KR101507744B1 - 항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제인 ml-7 균주 및 이의 용도 - Google Patents

항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제인 ml-7 균주 및 이의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제인 ML-7 균주 및 이의 용도에 관한 것으로, 본 발명의 신규 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7) 균주는 간세포독소 유발하는 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 및 아스퍼질러스 플라부스(A. flavus)와 대장균(Escherichia coli) 등에 항균 효과가 있으므로, 간세포독소를 유발하는 곰팡이를 방제하여 곰팡이 독소인 아플라톡신(aflatoxin)이 생성되지 않은 원료를 제공할 수 있고, 육계에 급여시 증체 효과를 가지므로 안전한 생균제, 사료첨가제 및 동물약품 생산에 사용할 수 있다. 또한 곡물을 주원료로 하는 식품 제조시 첨가물 또는 발효용 균주로도 유용하게 활용할 수 있다.

Description

항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제인 ML-7 균주 및 이의 용도{Lactobacillus paracasei ML-7 strain having antimicrobial activity and uses thereof}
본 발명은 항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제인 ML-7 균주 및 이의 용도에 관한 것으로, 더욱 구체적으로는 본 발명은 항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7) 균주; 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 유효성분으로 함유하는 항균성 생균제; 상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 항균성 생균제의 제조방법; 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 유효성분으로 함유하는 사료첨가제; 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 육계에 급여하여 육계의 사료 효율을 증가시키는 방법; 및 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액을 유해 미생물에 처리하여 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp.) 균주 또는 대장균(Escherichia coli)을 방제하는 방법에 관한 것이다.
최근 2003년 이후로 장내 미생물과 숙주의 건강에 유익한 생균제에 대한 관심이 증대되고 있으며, 프로바이오틱스 중 특히 락토바실러스와 비피도박테리움은 충분한 양을 섭취할 경우 인간과 동물의 건강에 유익하다고 알려져 있다. 동물의 경우 프로바이오틱스는 증체율을 향상시키거나 사료중의 영양소 이용률을 증대시키고 항생제 사용량을 줄이는 효과를 기대할 수 있으며 좋은 품질의 식육을 생산하는데 기여할 수 있다.
락토바실러스는 프로바이오틱스 중 주요 균종이며, 정상세균의 기능을 도와주거나 항생제 대체물질 역할을 할 수 있다. 프로바이오틱스로 활용되는 많은 락토바실러스는 실험실상에서 기능적인 특성을 확인하고 동물에서 효과를 검증하여 사용하고 있으며 항미생물 활성이나 영양소 이용률이 뛰어난 균주들을 혼합하여 사용함으로써 생균제로서 우수한 효과를 기대할 수 있다.
반면, 아스퍼질러스 속 곰팡이는 호기성 불완전균류에 속하며, 일반적으로 농산물의 저장 중에 번식하는 저장곰팡이로, 누룩곰팡이(A. oryzae)와 같이 발효음식을 제조하는데 쓰이는 유용곰팡이도 있으나, 약 60여 종의 아스퍼질러스 속 곰팡이는 사람과 동물에 심각한 병을 일으키기도 한다. 이 중 곡물에서 간세포독소(hepatoxin)로 알려진 간암을 유발하는 아플라톡신을 생산하는 종으로, 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus), 아스퍼질러스 플라부스(A. flavus) 및 아스퍼질러스 노미어스(A. nomius) 등이 알려져 있으며, 특히 아스퍼질러스 종에 의해 생산되는 아플라톡신은 물에 불용성이나 아세톤이나 클로로포름에 가용이며, 강산 또는 강알칼리에 의해 분해되고, 열에 안정적이어서 270~280℃이상 가열해야 분해되는 특성이 있다.
한편, 한국등록특허 제1201337호에는 '신규한 락토바실러스균 유산균 복합 균주를 포함하는 사료첨가제'가 개시되어 있고, 한국등록특허 제1201338호에는 '신규 락토바실러스 루테리 및 이를 포함하는 사료첨가제'가 개시되어 있으나, 본 발명에서와 같이 항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제인 ML-7 균주 및 이의 용도에 대해서는 밝혀진 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자들은 김치로부터 분리한 락토바실러스 파라카제이 LS-2 유산균을 UV 처리를 통하여 자발적 돌연변이를 유도한 후 본 발명의 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7)를 선발하였다. 상기 균주는 간세포 독소를 유발하는 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus), 아스퍼질러스 플라부스(A. flavus) 및 대장균(Escherichia coli)에 항균 효과가 있을 뿐만 아니라, 육계의 증체 효과를 가지므로 사료첨가제로의 활용가능성을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7) 균주를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 유효성분으로 함유하는 항균성 생균제를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 항균성 생균제의 제조방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 유효성분으로 함유하는 사료첨가제를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 육계에 급여하여 육계의 사료 효율을 증가시키는 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액을 유해 미생물에 처리하여 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp.) 균주 또는 대장균(Escherichia coli)을 방제하는 방법을 제공한다.
본 발명의 신규 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7) 균주는 간세포독소를 유발하는 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 및 아스퍼질러스 플라부스(A. flavus)와 대장균(Escherichia coli) 등에 항균 효과가 있으므로, 간세포독소를 유발하는 곰팡이를 방제하여 곰팡이 독소인 아플라톡신(aflatoxin)이 생성되지 않은 원료를 제공할 수 있고, 육계에 급여시 증체 효과를 가지므로 안전한 생균제, 사료첨가제 및 동물약품 생산에 사용할 수 있다. 또한 곡물을 주원료로 하는 식품 제조시 첨가물 또는 발효용 균주로도 유용하게 활용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 균주의 생장곡선을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 균주의 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus)에 대한 항곰팡이 오버레이 분석 결과를 나타낸 그림이다. a : 락토바실러스 파라카제이 LS-2, b : 락토바실러스 파라카제이 ML-7.
도 3는 본 발명의 균주의 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus)에 대한 항곰팡이 오버레이 분석 결과를 나타낸 그림이다. a : 락토바실러스 파라카제이 LS-2, b : 락토바실러스 파라카제이 ML-7.
도 4는 본 발명의 균주의 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 및 대장균(Escherichia coli)에 대한 배지내 글리세롤 첨가에 따른 항균성 오버레이 분석 결과를 나타낸 그림이다. a : 아스퍼질러스 푸미가투스에 대한 항균성 분석, b : 대장균에 대한 항균성 분석, 0mM : 글리세롤 0mM 첨가, 10mM : 글리세롤 10mM 첨가, 50mM : 글리세롤 50mM 첨가, 100mM : 글리세롤 100mM 첨가, 200mM : 글리세롤 200mM 첨가, 500mM : 글리세롤 500mM 첨가, NC : 음성대조구(글리세롤을 첨가하지 않고, 본 발명의 락토바실러스 파라카제이 ML-7을 접종하지 않은 처리구).
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7) 균주(KACC91832P)를 제공한다.
본 발명의 일 구현 예에 따른 균주에서, 상기 항균성은 바람직하게는 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp.) 균주 또는 대장균(Escherichia coli)에 대한 항균성일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus), 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus) 또는 대장균(Escherichia coli)에 대한 항균성일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 균주는 김치에서 분리한 유산균 락토바실러스 파라카제이 LS-2에 UV를 처리하여 자발적 돌연변이를 유도하고, 변이체 중 낮은 pH에도 생장이 가능한 균주를 선발하여 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7)라 명명하였다. 상기 락토바실러스 파라카제이 ML-7 균주는 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus), 아스퍼질러스 플라부스(A. flavus) 및 대장균(Escherichia coli)에 항균성을 가질 뿐만 아니라, 육계의 증체 효과를 가지는 것을 확인하였다.
본 발명의 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7) 균주를 농업생명공학연구원에 2013년 07월 2일자로 기탁하였다(기탁번호: KACC91832P).
또한, 본 발명은 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 유효성분으로 함유하는 항균성 생균제를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 항균성 생균제의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 균주를 배양하는 방법은 당업계에 통상적으로 이용되는 방법에 따라 배양할 수 있으며, 유산균의 생균을 배양하는데 사용될 수 있는 배지의 바람직한 예로는 소젖, 염소젖, 말젖 등의 유제 배지, 이의 탈지유 및 유산균용 배지, 예를들면, BL 배지, 브릭스(Briggs)간 브로쓰 배지, MRS(deMan, Rogosa and Sharpe) 배지, GAM 배지 또는 TTY 배지 등을 이용할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 MRS 배양 배지를 이용하는 것이나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 락토바실러스 파라카제이 ML-7는 25 내지 45℃, 보다 바람직하게는 30 내지 40℃에서 6 내지 30시간, 더욱 바람직하게는 35 내지 40℃에서 10 내지 24시간 동안, 가장 바람직하게는 37℃에서 18시간 동안 배양할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이로써 수득된 배양 브로쓰를 그 자체로서 사용할 때까지 약 5℃에서 저장함으로써 유산균의 생균제로서 직접적으로 사용할 수 있다. 또 다른 한편, 이러한 미생물을 원심분리시켜 회수하고, 보호제와 혼합한 다음 진공하에서 동결 건조시킬 수 있다. 이로써 생성된 세균 분말을 차고 어두운 방에서 저장하고, 사용시 상기 분말을 현탁, 혼합 또는 용해시킴으로써 유산균의 생균제로서 사용할 수 있다. 이러한 방식으로 제조된 무수 미생물 분말이 더욱 바람직한데, 이는 이러한 분말이 장기간의 저장에도 견딜 수 있기 때문이다.
유산균의 생균제는 담체 및 희석제를 함유할 수 있다. 이러한 담체 및 희석제는 특별히 제한되지 않으며, 약제학적으로 또는 영양학적으로 허용되는 담체 및 희석제 중에서 선택된다. 또한, 유산균의 생균제는 사료첨가제로 함유될 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 유효성분으로 함유하는 사료첨가제를 제공한다.
본 발명의 균주를 배양하는 단계에서 얻어지는 상기 균주 또는 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 첨가물로 사용할 경우, 상기 균주 또는 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 그대로 첨가하거나 다른 첨가제를 함께 사용할 수 있으며, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 사료 첨가제는 기초사료에 일정 비율로 첨가하는 것이다. 상기 기초사료는 주성분이 옥수수, 대두박, 유청, 어분, 당밀, 소금, 비타민 프리믹스 및 미네랄 프리믹스 등으로 이루어질 수 있다. 비타민 프리믹스는 비타민 A, 비타민 D, 비타민 E, 리보프라빈 및 나이아신으로 구성될 수 있으며, 미네랄 프리믹스는 망간, 철, 아연, 칼슘, 구리, 코발트 및 셀레늄 등으로 구성될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명은 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 육계에 급여하여 육계의 사료 효율을 증가시키는 방법을 제공한다.
상기 언급한 사료 효율을 증가시키는 방법은 육계 뿐만 아니라, 오리, 거위, 메추라기, 야생 오리, 타조 등의 기타 사육용 조류 및 애완용 조류 등에 급여될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명은 상기 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액을 유해 미생물에 처리하여 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp.) 균주 또는 대장균(Escherichia coli)을 방제하는 방법을 제공한다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 김치 유산균 변이체 선발 및 항균성 특징 분석
본 발명의 돌연변이에 사용한 균주는 미래자원 ML에서 김치로부터 분리한 유산균인 락토바실러스 파라카제이 LS-2로, 우량 변이주를 선별하기 위해 MRS(de Man, Rogosa and Sharpe) 한천 배지에서 18시간 동안 배양한 상기 균주를 도말한 후 치사율이 99.99%가 되는 시간인 30초간 10W UV 램프를 30cm 거리를 두어 조사하여 자발적 돌연변이를 유도한 후 배양하였다. 도말 농도는 균주 희석액을 O.D(optical density)를 0.1(10-1)로 맞추어 10-8까지 희석하였다. 락토바실러스 파라카제이 LS-2 그룹과 락토바실러스 파라카제이 LS-2에 자발적 돌연변이를 유발하도록 UV처리한 그룹의 두 그룹으로 나누었고, 각 희석단계의 튜브에서 배지에 세장씩 도말하여 18시간 배양한 후 콜로니를 선별하였다.
유산 생성 증강변이주를 선별하기 위하여, MRS 한천 배지에 메틸 레드 지시약을 10ppm 첨가하여 만든 배지에 콜로니들을 배양하였다. 멸균된 이쑤시개를 사용하여 배지에 가볍게 찍어 접종하였으며, 플레이트상의 콜로니 주위에 나타나는 기질 분해환(halo zone)의 크기를 측정하여 선별하였다. 투명환(clear halo zone)이 큰 변이주를 대상으로 항진균 및 항박테리아 기능 정도를 측정하여 확인하였다. 선별된 균주의 pH 저감에 의한 성장력을 확인하기 위해 MRS 배지에 pH를 젖산을 이용하여 pH3.5~5.0으로 조절하여 성장력을 확인하였다. pH 3.5에서도 자라는 한 종의 균주를 선별하여 추후 실험에 사용하였으며, 이렇게 선별된 돌연변이 균주를 락토바실러스 파라카제이 ML-7으로 명명하였다. 변이주의 일반 배지에서의 성장 정도를 락토바실러스 파라카제이 LS-2와 비교한 결과, 도 1과 같은 생장곡선을 나타냈다.
각각의 균주를 두 번의 활성화를 거친 후 실험에 사용하였고, 아스퍼질러스 속 곰팡이는 30℃에서 배양을, 락토바실러스 파라카제이 LS-2와 그 외 나머지 균주는 37℃, 호기적 조건에서 배양하였다. 락토바실러스 파라카제이 LS-2 균주를 활성화한 후 루프를 이용하여 배지의 삼등분이 되는 지점에 2cm 백금선을 이용하여 평판획선배양법으로 24~48시간 동안 배양하였다.
오버레이 분석(Overlay assay)에 이용할 병원성 미생물을 액체배지에 밤새 배양하였다. 0.7% 한천 배지를 멸균한 후에 45℃ 항온수조에 담구어 온도 균일화 후, 0.1㎖/4㎖의 농도로 희석하여 10㎖을 오버레이하였다. 오버레이 분석에 이용할 곰팡이 균주는 동일한 방법으로 실험을 하였으며, 균주 희석 농도는 혈구계수기(hemocytometer)를 이용하여 1×104 분생포자(conidias)/㎖로 희석된 균주를 10㎖을 오버레이하였다. 오버레이한 표적균주와 사용한 배지 및 배양조건은 표 1과 같다.
표적 균주에 따른 배지 및 배양조건
표적 균주 배지 배양조건
Lactobacillus paracasei LS-2 MRS 37℃(호기)
Echerichia coli(ATCC25922) LB 37℃(혐기)
Aspergillus flavus(ATCC22546) ME 30℃(호기)
Aspergillus fumigatus(ATCC9197) ME 30℃(호기)
먼저 아스퍼질러스 푸미가투스의 항곰팡이 효과를 확인한 결과, 락토바실러스 파라카제이 LS-2는 항곰팡이 효과가 미비한 반면, 본 발명의 락토바실러스 파라카제이 ML-7 균주에서는 성장 억제환이 생성되는 것을 확인할 수 있었다(도 2). 한 페트리디쉬에서 락토바실러스 파라카제이 LS-2 및 락토바실러스 파라카제이 ML-7 균주의 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus)에 대한 항곰팡이 효과를 비교한 결과, 락토바실러스 파라카제이 ML-7 균주에서 눈에 띄는 억제환을 관찰할 수 있었으며(도 3), 따라서 아스퍼질러스 속 곰팡이에서 변이주인 락토바실러스 파라카제이 ML-7 균주가 항곰팡이 효능이 월등한 것을 확인할 수 있었다.
이어서 변이주가 글리세롤을 첨가한 배지에서 그 항균, 항곰팡이 효과가 증대되는지 여부를 확인하기 위해 10~500mM의 글리세롤을 처리하여 아스파질러스 푸미가투스 및 대장균에 대한 오버레이 분석 결과, 아스파질러스 푸미가투스 및 대장균 모두에서 무첨가 배지에 비해 글리세롤 처리구에서 투명환이 커지고 뚜렷해 지는 것을 확인할 수 있었다(도 4a).
글리세롤을 3% 첨가한 MRS 배지에 각각의 균주를 접종한 후, 37℃에서 48시간 배양한 후에 배지 중에 축적된 유기산 3종을 분석한 결과는 표 2와 같다. 두 균주에서 숙신산은 동일한 양이 검출된 반면, 변이주에서 젖산 및 아세트산은 증가하는 것을 확인할 수 있었으며, 이는 변이주의 항진균 효과가 이러한 유기산 증가에 의한 것임을 확인할 수 있었다.
균주 배양에 의한 유기산 생성량
유기산 L. paracasei LS-2 L. paracasei ML-7
젖산(Lactic acid) 0.61 g/l 1.13 g/l
아세트산(Acetic acid) 0.02 g/l 0.05 g/l
숙신산(Succinic acid) 0.01 g/l 0.01 g/l
실시예 2. 김치 유산균 변이체를 첨가한 사료 조제 및 육계 사료 효율
1일령의 육계 수평아리(Ross 308)를 입수하여 1일간 적응기간을 거친 후 2일령 육계 100마리를 2그룹으로 나눈 후 각각 10마리씩 나누어 5반복으로 실험하였다. 이후 2일령의 각 그룹에게 일반 대조사료와 유산균 0.3% 처리 군 사료와 물을 3주간 자유 급식토록 하였다. 대조 사료는 육계전기 사료를 사용하였으며, 각 그룹의 사료 조성은 아래 표와 같다.
육계 사료 조성
Item Control Control +유산균제
Ingredient Contents(%)
Corn 52.40 52.10
Wheat Powder 5.00 5.00
Fish meal(55%) 2.00 2.00
Poultry by products 2.00 2.00
Soybean meal(46%) 23.60 23.60
Fullfat Soybean(Extruded) 5.00 5.00
Limestone 1.33 1.33
Salt 0.24 0.24
Glucose 1.00 1.00
Dicalcium phosphate 1.00 1.00
Tallow 4.90 4.90
Vitamin, Mineral Premix1 ) 0.15 0.15
Lysin-HCL(50%) 0.45 0.45
DL-Methionine(81%) 0.31 0.31
Threonine 0.07 0.07
Cholin-Hcl 0.05 0.05
Maduramycine 0.05 0.05
Yeast culture 0.20 0.20
etc 0.25 0.25
유산균제 0 0.30
Calculated Value
Protein 20.19 20.19
Crude Fat 8.59 8.59
Calcium 0.92 0.92
Phosporus 0.63 0.63
Retein-Phosporus 0.32 0.32
Lys 1.35 1.35
Met+Cys 0.91 0.91
AMEn 3,150 3,150
1)1kg 당 비타민 함량 :
비타민 A: 10,000,000IU, 비타민 D3: 5,000,000IU, 비타민 E: 20,000IU, 비타민 K3: 3,000mg, 비타민 B1: 2,000mg, 비타민 B2: 6,000mg, 비타민 B6: 3,000mg, 비타민 B12: 16mg, 나이아신: 50,000mg, Ca-pantothenate: 13,000mg, 엽산: 13,000mg, Cu: 5,000mg, I: 1,250mg, Mn: 110,000mg, Zn: 100,000mg, Se: 300mg, Fe: 40,000mg, Co: 5,000mg.
사료 섭취량은 3일 단위로 기록하였으며, 점등시간은 1일 23시간이 되도록 하였다. 조사항목 및 분석 방법은 처리구간의 사양 성적을 산출하기 위하여 각 처리구간의 체중 증체량(weight gain, G)과 사료 섭취량(feed intake, F)을 실험 개시일(2일령) 및 종료일(23일령)에 측정하여 기록하고, 이에 따라 사료 요구율(feed conversion rate, F/G)을 산술하여 평가하였다. 유산균제제 처리구가 시판 사료인 육계 전기 사료를 섭취한 대조구에 비해 전반적으로 좋은 경향을 보여주었으며, 본 발명의 L. paracasei ML-7 처리구가 증체 및 사료 요구효율이 증진되었으므로, L. paracasei ML-7를 유효성분으로 함유하는 사료를 육계에 급여시 사료 효율이 높은 것을 확인할 수 있었다(표 4).
육계 사료 섭취에 따른 사료 섭취량, 체중 증체량 및 사료 요구율
처리구 사료 섭취량(g/bird) 체중 증체량(g/bird) 사료 요구율(F/G)
대조구 940.2±35.9 660.2±25.5 1.42±0.07
대조구+유산균(LS-2) 제제 0.3% 955.0±34.5 672.1±37.6 1.41±0.10
대조구+유산균(ML-7) 제제 0.3% 964.0±78.8 701.0±38.6 1.37±0.06
농업생명공학연구원 KACC91832P 20130702

Claims (8)

  1. 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp.) 균주 및 대장균(Escherichia coli)에 대해 항균성을 갖는 락토바실러스 파라카제이 ML-7(Lactobacillus paracasei ML-7) 균주(KACC91832P).
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 상기 아스퍼질러스 속 균주는 아스퍼질러스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus) 또는 아스퍼질러스 플라부스(Aspergillus flavus)인 것을 특징으로 하는 균주.
  4. 제1항 또는 제3항의 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 유효성분으로 함유하는 항균성 생균제.
  5. 제1항 또는 제3항의 균주를 배양하는 단계를 포함하는 항균성 생균제의 제조방법.
  6. 제1항 또는 제3항의 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 유효성분으로 함유하는 사료첨가제.
  7. 제1항 또는 제3항의 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액의 농축액을 육계에 급여하여 육계의 사료 효율을 증가시키는 방법.
  8. 제1항 또는 제3항의 균주, 상기 균주의 배양물 또는 상기 균주의 배양액을 유해 미생물에 처리하여 아스퍼질러스 속(Aspergillus spp.) 균주 또는 대장균(Escherichia coli)을 방제하는 방법.
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CN114703107B (zh) * 2022-05-07 2024-04-05 青岛蔚蓝生物集团有限公司 一株副干酪乳酪杆菌及其在预防婴幼儿链球菌感染中的应用
CN116640700B (zh) * 2023-06-24 2024-05-14 西南大学 一株抑制黄曲霉生长和毒素产生的副干酪乳杆菌f50及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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