KR101392983B1

KR101392983B1 - 홍합 접착 단백질을 이용한 인공모발 접착제 및 이의 제조 방법

Info

Publication number: KR101392983B1
Application number: KR1020120130471A
Authority: KR
Inventors: 차형준; 송영훈; 최유성
Original assignee: 포항공과대학교 산학협력단
Priority date: 2012-11-16
Filing date: 2012-11-16
Publication date: 2014-05-08

Abstract

본 발명은 홍합 접착 단백질을 기반으로 한 인공모발 접착제 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

홍합 접착 단백질을 이용한 인공모발 접착제 및 이의 제조 방법 {Artificial hair-glue using mussel adhesive proteins and preparation method thereof}

최근 가속눈썹, 가발, 인조손톱 등과 같은 미용 재료들이 다양하게 발달하면서, 다양한 인공모발에 적용가능한 인체용 접착제가 사용되고 있다. 인간의 피부는 연령, 성, 계절, 피부의 온도 등에 따라 차이는 있지만 피부 자체의 지질, 땀 및 피지가 섞여서 피부의 수분함량을 20% 정도로 유지하면서 피지막을 형성하여 피부를 보호하고 있다. 따라서 인체에 무해하고 피부에 대한 접착성 및 내수성이 우수한 인체용 접착제 소재의 개발이 요구되고 있다.

하지만 기존에 사용되고 있는 접착 소재의 대부분은 시아노아크릴레이트를 주성분으로 하거나 합성수지, 고무 등에 유기 용매를 혼합하여 사용하는 방법이 주로 이용되었다. 이러한 화학접착제는 높은 기계적 강도와 가공성을 가지나 한편으론, BTX5종과 포름알데하이드 등과 같은 유해성 물질을 포함하여 이를 해결하기 위한 많은 노력에도 불구하고 화학 접착제라는 태생적인 측면에서 다소 한계를 지니고 있다. 이에 대한 대안으로 바이오 산업을 통해 자연에서 유래하는 생물 접착제의 개발이 제안되고 있으며 젤라틴, 콜라겐 등이 사용되는 지혈제, 피브린 계열의 단백질 접착제가 개발되었으나, 강도가 낮고 그 접착 능력이 낮아 제한적으로 사용되고 있다.

따라서, 이러한 문제점을 극복하기 위해서 피부 표면에서 강력한 접착 및 가교 능력을 가지고, 생체 내에서 최소한의 부작용을 보일 수 있는 이상적인 형태의 접착 소재의 개발이 필요하다.

한편, 해양 생명체인 홍합(mussel)은 접착 단백질(adhesive proteins)을 생산 및 분비함으로써 홍합 자신을 바다 속의 바위와 같은 젖은 고체표면에 단단히 부착할 수 있어, 파도의 충격이나 바닷물의 부력 효과에 영향을 받지 않는다. 홍합 접착 단백질은 강력한 자연 접착제로 알려져 있으며, 화학 합성 접착제와 비교하였을 때 대부분 에폭시 수지보다 약 두 배 정도의 높은 인장강도를 나타내면서도 휘어질 수 있는 유연성을 지니고 있다. 또한, 홍합 접착 단백질은 플라스틱, 유리, 금속, 테플론 및 생체물질 등의 다양한 표면에 접착할 수 있는 능력을 가지고 있으며, 아직까지 화학접착제 개발에서 미완의 과제로 남아 있는 젖은 표면에서의 접착도 몇 분 안에 가능하다.

특히, 홍합의 족사 (byssal thread)를 구성하고 있는 미틸러스 에둘리스 foot protein 1 (Mefp-1) 단백질의 경우, 단백질 내에 존재하는 dihydroxy-phenylalanine (DOPA) 잔기가 Fe³ ⁺ 이온과 결합하면서 표면에 큐티클 층을 구성하고, 이러한 결합에 의한 단단한 코팅층은 족사가 외부 충격에도 견딜 수 있도록 하는데 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 또한, DOPA 잔기가 DOPA-quinone 으로 산화되면서 주변 DOPA 잔기 및 아미노산과 결합하면서 가교작용을 일으키고 이것이 물 속에서도 강력한 결합을 유지할 수 있도록 도와주는 것으로 알려져 있다. 최근에는 이러한 DOPA와 metal의 결합 및 DOPA의 산화반응을 이용하여 젤을 만들거나 생체접착제로 응용하려는 시도 및 연구가 일어나고 있다. 하지만, 대부분 합성 고분자를 기반으로 한 방법이 주를 이루고, 실제 홍합 접착 단백질을 이용한 인공모발 접착제에 대한 시도는 없었다.

본 발명자들은 이전의 연구에서, Mefp-1에서 80번 정도 반복되는 데카펩타이드를 6번 반복하여 Mgfp-5의 양쪽 말단에 융합한 새로운 형태의 홍합 접착 단백질인 fp-151을 개발하였으며, 상기 재조합 홍합 접착 단백질이 대장균에서 대량생산이 가능하고, 정제과정 또한 매우 단순하여 산업적 이용 가능성이 매우 높음을 확인한 바 있다 (국제특허공개 WO2006/107183 또는 WO2005/092920).

이러한 대량생산 기술을 바탕으로, 본 발명자들은 홍합 접착 단백질을 산업용도로 사용하기 위하여 가교제의 조합만으로 화학접착제의 유해한 성분을 포함하지 않고, 우수한 내수성 및 접착력을 지니는 인공모발 접착제로 활용 될 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 홍합 접착 단백질을 포함하는 인공모발 접착제를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 인공모발 접착제의 제조방법을 제공하는 것이다.

하나의 양태로서, 본 발명은 홍합 접착 단백질을 포함하는 인공모발 접착제에 관한 것이다.

본 발명에서 "홍합 접착 단백질"은 홍합에서 유래한 접착 단백질로, 바람직하게는 미틸러스 에둘리스(Mytilus edulis), 미틸러스 갈로프로빈시얼리스(Mytilus galloprovincialis) 또는 미틸러스 코루스커스(Mytilus coruscus) 에서 유래한 홍합 접착 단백질 또는 이의 변이체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

예를 들어, 본 발명의 홍합 접착 단백질은 상기 홍합 종에서 각각 유래한 Mefp(Mytilus edulis foot protein)-1, Mgfp(Mytilus galloprovincialis foot protein)-1, Mcfp(Mytilus coruscus foot protein)-1, Mefp-2, Mefp-3, Mgfp-3 및 Mgfp-5 또는 이의 변이체를 포함할 수 있으며, 바람직하게는 fp(foot protein)-1 (서열번호 1), fp-2 (서열번호 4), fp-3 (서열번호 5), fp-4 (서열번호 6), fp-5 (서열번호 7), 및 fp-6 (서열번호 8)로 이루어진 군에서 선택된 단백질, 또는 2종 이상의 단백질이 연결되어 있는 융합 단백질, 또는 상기 단백질의 변이체를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명의 홍합 접착 단백질은 국제공개번호 제WO2006/107183호 또는 제WO2005/092920호에 기재된 모든 홍합 접착 단백질을 포함한다. 바람직하게, 상기 홍합 접착 단백질은 fp-151(서열번호 9), fp-131(서열번호 10), fp-353(서열번호 11), fp-153(서열번호 12), fp-351(서열번호 13) 등의 융합 단백질을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

또한, 본 발명의 홍합 접착 단백질은 fp-1 에서 80번 정도 반복되는 데카펩타이드(서열번호 2)가 1 내지 12회 또는 그 이상으로 연속하여 연결된 폴리펩타이드를 포함할 수 있다. 바람직하게, 상기 서열번호 2의 데카펩타이드가 12회 연속하여 연결된 fp-1 variant 폴리펩타이드(서열번호 3)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명은 홍합 접착 단백질 기반의 인공모발 접착제를 제공한다.

바람직한 양태로서, 본 발명의 홍합 접착 단백질 기반의 인공모발 접착제는 가교제를 포함한다.

상기 가교제는 홍합 접착 단백질 분자들 사이의 화학결합을 유도하여 내구성과 기계적 특성을 높이며, 물 속에서도 형태 안정성을 유지하여 흘러내리지 않도록 내수성을 높이는 역할을 한다. 상기 가교제는 당분야에서 사용하는 일반적인 가교제로 그 종류를 특별히 한정하지 않으나, 글루타알데하이드(glutaraldehyde), 제니핀(Genifin), 또는 EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide)를 바람직하게 사용할 수 있다.

글루타알데하이드 등은 가교액 내에서 0.01 내지 10 중량%, 바람직하게는 5 중량%의 함량으로 포함될 수 있다. 상기 범위 미만에서는 가교가 일어나지 않으며, 상기 범위를 초과할 경우 가교가 과다하게 일어나 접착력이 없어질 수 있다.

상기 접착제는 통상의 바이오 접착제에 함유되거나 또는 약리학적으로 허용가능한 부형제를 0.5 내지 90 중량％로 더욱 포함할 수 있다. 부형제의 예로는 계면활성제, 산화제 및 충진제(filler)가 있으나, 이에 한정되진 않는다(참조: 미국 공개특허공보 제 2003-65060호 및 미국 특허 제 5,015,677호). 상기 계면활성제는 양이온성, 음이온성, 비이온성, 양쪽성 계면 활성제일 수 있으며, 그 예로는 소듐 도데실설페이트(sodium dodecylsulfate) 및 소듐 도데실벤젠설포네이트(sodium dodecylbenzensulfonate)가 있다. 상기 산화제는 티로시나제, 카테콜 옥시데이즈(catechol oxidase), 비스(설포숙시니미딜) 수베레이트(bis(sulfosuccinimidyl) suberate), 3,3' -디티오비스(설포숙시니미딜프로피오네이트)(3,3'-Dithiobis(sulfosuccinimidyl propionate), O₂, Fe³ ⁺, H₂O₂ 및 IO₄ ^-로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으며(참조: Macromlecules 1998, 31, 4739-4745), 상기 충진제는 콜라겐, 히알루론 산, 콘드로이탄 설페이트(condroitan sulfate), 엘라스틴, 라미닌, 카세인, 하이드록시아페티트, 알부민, 피브로넥틴 및 하이브린으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

본 발명의 홍합 접착 단백질 기반의 인공모발 접착제는 인모, 실크, 모다크릴, 폴리염화비닐계, 폴리에스테르계, 폴리아미드계, 폴리페닐렌설파이드계, 폴리프로필렌 등 다양한 인공모발 소재에 신속하고 강하게 결합할 수 있고, 피부에 대한 접착성 및 내수성이 우수할 뿐 아니라, 인체에도 무해하다.

본 발명의 구체적인 실시예에서는, 본 발명의 인공모발 접착제가 우수한 결합 강도를 나타내고, 내수성 및 접착력이 우수하며, 유해성분이 전혀 검출되지 않아 인체에 무해하다는 것이 입증되었다(본원 실시예 2 참조). 따라서, 본 발명의 인공모발 접착제는 기존의 유해한 화학 접착제를 대체하여 사용할 수 있으며, 예를 들어 가속눈썹, 가발, 인조 손톱 등 인체에 적용가능한 제품 제조시 사용될 수 있다.

또 하나의 바람직한 양태로서, 본 발명은 상기 홍합 접착 단백질 기반의 인공모발 접착제의 제조방법에 관한 것이다.

바람직하게, 본 발명은 홍합 접착 단백질을 글루타알데하이드 등의 가교제 용액에 투입하여 가교 반응을 수행하는 단계를 포함하는, 인공모발 접착제의 제조방법을 제공한다.

일예로, 상기 홍합 접착 단백질은 형질전환체로부터 대량 생산된 후 동결건조된 형태로 제공될 수 있다. 인체용 접착제로 사용하기 위해서, 상기 동결건조된 홍합 접착 단백질 파우더를 물에 녹여 농축한 후 가교제를 포함하는 가교액에 침수시켜 반응시킴으로써 경화된 상태로 사용될 수 있다. 이 때, 홍합 접착 단백질이 증류수에 완전히 용해되는 것이 바람직하며, 이를 위하여 통상 100~300 mg/ml 정도의 농도로 상온(25±3℃)에서 12~48시간 교반할 수 있다.

예를 들어, 본 발명의 인공모발 접착제의 제조방법은

(a) 건조된 홍합 접착 단백질을 증류수에 첨가하여 교반하는 단계; 및

(b) 상기 홍합 접착 단백질 용액을 글루타알데하이드 용액에 침수시키는 단계를 포함할 수 있으며, 추가적으로 가교 후에 세척 단계를 통하여 가교제를 세척하거나, 글라이신 수용액에 침수시켜 미반응 글루타알데하이드 수용액을 제거하는 등의 추가적인 과정을 거칠 수 있다.

이와 같이 제조된 홍합 접착 단백질 기반의 인체용 접착제는 결합 강도가 우수하고, 물 속에서도 형태 안정성을 유지하여 흘러내리지 않으며, 다양한 인공모발 기질 및 피부에 대한 접착력이 우수할 뿐만 아니라, 인체에 무해하고 제조가 용이한 특징이 있어 산업에 널리 응용될 수 있다.

본 발명을 통하여 제공되는 홍합 접착 단백질 기반의 인공모발 접착제 인체에 무해하고 우수한 내수성 및 접착력을 지니므로 인공모발 접착제로 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 홍합 접착 단백질 고농축 용액을 나타낸 것이다.
도 2는 홍합 접착 단백질의 가죽적용 접착력과 측정 후 접착 면의 상태를 나타낸 것이다.
도 3은 홍합 접착 단백질과 5% 글루타알데하이드를 이용한 내수성 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 유해성 평가서 및 중금속 시험성적서를 나타낸 것이다.
도 5는 홍합 접착 단백질과 5% 글루타알데하이드를 이용한 가속눈썹 접착과 접착 형상을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 6은 본 발명에 따른 인공모발 접착제의 제품 구현예를 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 홍합 접착 단백질 생산

홍합 접착 단백질은 국제특허공개 WO2005/092920 에 개시된 fp-151 단백질을 사용하였다. 상기 홍합 접착 단백질의 발현 유전자를 포함하는 대장균 형질전환체를 10 L ~ 300 L의 발효조에서 37도로 배양하여 1 mM IPTG를 첨가하여 단백질 발현을 유도하였다가 이를 동일 온도에서 9~12시간 더 배양한 후 4℃, 9000 rpm에서 원심분리를 진행하여 발현된 형질전환체를 수확하였다.

수확된 홍합 접착 단백질 형질전환체를 lysis buffer와 혼합하여 초고압 파쇄기를 이용, 파쇄한 후 원심분리를 통하여 홍합 접착 단백질이 포함되어 있는 pellet부분(단백질 응집체)만 취하였다.

단백질 응집체 시료 1 g당 washing buffer 40ml을 더하여 homogenizer를 이용하여 잘 섞어준 후 세척을 위해 12~24시간 반응을 시켰다. 반응이 끝난 후 9000 rpm에서 15분 동안 원심 분리하여 pellet부분을 washing buffer로 12~24시간의 반응과정 없이 다시 세척을 한 후 원심분리, 끝으로 증류수를 이용하여 잘 섞어준 후 동일 조건으로 원심 분리하여 pellet만을 취하여 세척 과정을 종료 하였다. 이렇게 세척이 종료된 시료에 25% AcOH을 넣어 homogenizer를 이용하여 홍합 접착 단백질을 녹여낸 후 9000 rpm, 20분간 원심 분리하여 상등액 만을 취하였다.

25% AcOH에 녹아 나온 홍합 접착 단백질을 cutoff 12 kDa ~ 14 kDa membrane tube를 이용하여 4℃에서 증류수(5 L, 2회, ~10시간/회)로 투석을 진행하였다. 투석이 종료된 후 동결건조를 진행하여 형질전환체로부터 단백질 이외의 대부분의 불순물을 제거한 파우더 형태의 단백질을 회수하였다.

실시예 2. 홍합 접착 단백질을 이용한 인공모발 접착제로의 활용

2-1. 홍합 접착 단백질 용액 제조

생산된 고순도 파우더 형태의 홍합 접착 단백질 ~200 mg에 증류수 1 mL를 첨가한 후 교반기를 이용하여 잘 녹여준다. 농축용액의 형상을 도 1에 나타내었다.

2-2. 홍합 접착 단백질 용액을 이용한 기계적 물성 측정

현재 가속눈썹 등의 인공모발 접착에 대한 객관적인 기준이 제시된 것이 존재하지 않고 있고, 실제 인공모발을 접착시켰을 경우에 홍합 접착 단백질의 기계적 물성을 확인하는데 어려움이 있기 때문에, 천연 소가죽 시편을 이용한 접착력을 분석하여 이를 대체하였다. 천연소가죽 시편의 모(毛)가 있는 부분에 ~5 mg과 20 mL 증류수를 혼합한 홍합 접착 단백질 용액을 1 cm² 면적에 도포하여 37℃, 4시간의 반응시간을 가진 뒤 5 mm/min의 속도로 인장강도기(INSTRON, No3344)를 통하여 접착력을 측정하였다. 최대 인장강도는 2~3 Mpa 정도로 나타났으며, 떨어진 가죽 시편의 모(毛)부분이 훼손되었음을 확인하였다. 이를 도 2에 나타내었다.

2-3. 홍합 접착 단백질 용액과 가교제를 통한 내수성 확인

준비된 홍합 접착 단백질 농축 용액을 주사기에 넣어 유리판이나 1회용 무게접시에 소량(1~2 cc) 분주하여 가교제인 글루타알데하이드(Glutaraldehyde) 5% 용액에 담갔다(dipping) 뺀 후 경화가 이루어지도록 약 5분간 상온에 방치하였다. 경화가 완료되면 증류수에 경화된 홍합 접착 단백질이 잠기도록 한 채로 검지손가락을 이용하여 경화된 단백질을 누른 상태로 물속에서 비벼주었다. 약 20회 정도로 물속에서 마찰시킨 후 물에 용해되는지를 관찰하였고 이를 도 3에 나타내었다. 도 3에 나타난 바와 같이 물에 풀어지거나 녹아 나오지 않음을 확인 할 수 있었다.

2-4. 홍합 접착 단백질 용액의 유해성 평가

가속눈썹과 같은 인공모발용 접착제가 인체에 직/간접적으로 사용됨을 감안하여, 홍합 접착 단백질 fp-151 함유 용액에 대하여, 벤젠, 톨루엔, 에틸벤젠, 자일렌, 스타이렌, 포름알데하이드의 오염물질 방출량에 대한 유해성 평가(한국산업기술시험원, www.ktl.re.kr) 및 안전인증 항목에 해당하는 납, 비소의 검출여부를 공인기관(한국의류시험연구원, www.katri.re.kr)을 통하여 확인하였다. 오염물질 방출량 시험은 증류수로 세척 후 130℃로 가열 처리한 깨끗한 유리판 2개에 홍합 접착 단백질 시료를 63mm X 63mm의 크기로 각 1.2 g을 도포하여 3시간의 경화시간을 거친 후, 소형 챔버의 중앙부에 고정시켜 7일 후의 방출 강도를 측정하였다. 소형 챔버의 용적은 20 L이고 온도는 25?, 습도는 45~50% R.H, 0.5/h의 환기횟수의 조건으로 휘발성 유기화합물은 ATD기기(Markers,Unity) -GC/MS(Shimadzu, QP5050A), 포름알데하이드는 HPLC(HP, Series 1100)를 이용하였다. 분석방법으로 휘발성 유기화합물은 비극성 칼럼을 이용하여 분석크래마토그램에서 n-헥산부터 n-헥사데칸까지 범위에 검출되는 VOCs를 대상으로 각 화합물을 톨루엔으로 환산하여 측정하였고, 포름알데하이드는 DNPH카트리지내의 DNPH수용체를 아세토니트릴을 사용하여 용해 및 탈리시켜 탈리용액을 고속액체크래마토그래프(HPLC)를 이용하여 정량하였다. 실내공기질 공정시험법과 안전인증 항목의 검출 결과로 건축자재 인증기준(HB마크)의 최우수등급(0.1 mg/m²h)을 충족함을 확인하였고, 원자흡광분석장치를 통한 함유원소의 정량(안전기준부속서, ks k 0731으로 납과 비소의 중금속 불검출을 확인하였다. 이를 도 4에 나타내었다.

2-5. 홍합 접착 단백질 용액의 인공모발 (가속눈썹) 적용 접착력 확인

실시예 2-2, 2-3을 통해 접착력과 내수성에 대한 확인을 거쳐 실제 판매되는 실크 재질의 인공모발을 구입하여 적용해보았다. 시판용 가속눈썹 (실크재질, 8~13 mm 길이) 총 길이의 30% 정도를 홍합 접착 단백질 용액을 먼저 살짝 담갔다 빼고 나서 5% 글루타알데하이드용액에 차례로 다시 살짝 담그어 빼서 다른 가속눈썹 면에 접착을 한 후 실제 판매/유통하는 가속눈썹 접착제의 접착력 실험방법에 따라 약 24시간 동안 상온 방치 후 엄지와 검지를 이용, 비벼서(~5회) 건조마찰을 주어 떨어지는지를 확인하였다. 확인 후 10% 세제 용액을 이용하여 같은 방법으로 젖은 상태의 마찰에서의 접착력 유지 상태를 확인하였고, 접착력이 안정적으로 유지되는 상태와 이에 대한 형상을 현미경으로 관찰하였다. 이를 도 5에 나타내었다.

서열목록 전자파일 첨부

Claims

홍합 접착 단백질 및 가교제를 포함하는 인공모발 접착제로,
상기 홍합 접착 단백질은
서열번호 1 의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 서열번호 4 의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 서열번호 5 의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 서열번호 6 의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 및 서열번호 8의 아미노산 서열로 이루어진 단백질로 이루어진 군에서 선택되는 단백질;
상기에서 2종 이상의 단백질이 연결된 융합 단백질; 또는
서열번호 2의 아미노산 서열이 1회 내지 12회 연속하여 연결된 단백질인, 인공모발 접착제.
제1항에 있어서, 상기 가교제는 글루타알데하이드, 제니핀(Genifin), 또는 EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide)인 인공모발 접착제.
제1항에 있어서, 상기 인공모발은 가속눈썹 또는 가발인 인공모발 접착제.
삭제
제1항에 있어서, 상기 융합 단백질은 서열번호 9의 아미노산 서열로 이루어진 융합 단백질, 서열번호 10의 아미노산 서열로 이루어진 융합 단백질, 서열번호 11의 아미노산 서열로 이루어진 융합 단백질, 서열번호 12의 아미노산 서열로 이루어진 융합 단백질, 및 서열번호 13의 아미노산 서열로 이루어진 융합 단백질로 이루어진 군에서 선택되는 융합 단백질인, 인공모발 접착제.
삭제
제1항에 있어서, 상기 홍합 접착 단백질은 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 단백질인, 인공모발 접착제.
홍합 접착 단백질을 글루타알데하이드 용액에 투입하여 가교 반응을 수행하는 단계를 포함하며,
상기 홍합 접착 단백질은
서열번호 1 의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 서열번호 4 의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 서열번호 5 의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 서열번호 6 의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 서열번호 7의 아미노산 서열로 이루어진 단백질, 및 서열번호 8의 아미노산 서열로 이루어진 단백질로 이루어진 군에서 선택되는 단백질;
상기에서 2종 이상의 단백질이 연결된 융합 단백질; 또는
서열번호 2의 아미노산 서열이 1회 내지 12회 연속하여 연결된 단백질인,
제1항의 인공모발 접착제의 제조 방법.
제8항에 있어서, 상기 홍합 접착 단백질은 동결건조 및 농축된 것인 방법.