KR101323177B1 - 식물 병원균 방제 효과를 가지는 바실러스 속 cnu-ba-2 균주 및 이의 용도 - Google Patents

식물 병원균 방제 효과를 가지는 바실러스 속 cnu-ba-2 균주 및 이의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 잔디 병원균에 대해 항균 활성을 가지는 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주(KCTC 12330BP), 상기 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물, 상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물의 제조 방법 및 상기 균주의 유효량을 잔디 또는 토양에 살포함으로써 잔디 병원균을 방제하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 CNU-BA-2 균주는 농약의 부작용으로 발생하는 환경 오염 및 잔류 농약으로 인한 인체 독성의 위험성이 없는 자연 친화적인 생물 농약으로 사용될 수 있으며, 잔디 병원균에 대한 방제 효과 및 식물의 생육을 촉진시키는 효과가 있으므로, 산업적으로 매우 유용하게 이용될 수 있을 것으로 판단된다.

Description

식물 병원균 방제 효과를 가지는 바실러스 속 CNU-BA-2 균주 및 이의 용도{Bacillus sp. CNU-BA-2 strain for controlling plant pathogen and uses thereof}
본 발명은 식물 병원균 방제 효과를 가지는 바실러스 속 CNU-BA-2 균주 및 이의 용도에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 잔디 병원균에 대해 항균 활성을 가지는 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주(KCTC 12330BP), 상기 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물, 상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물의 제조 방법 및 상기 균주의 유효량을 잔디 또는 토양에 살포함으로써 잔디 병원균을 방제하는 방법에 관한 것이다.
잔디는 기계작업과 여러 가지 요인의 답압 등 매우 부적절한 환경 하에서 생육하고 있다. 따라서 골프장에 조성된 잔디는 야생잔디에 비하여 병 저항성이 극히 저하되어 있으며 이로 인해 여러 가지 병해가 발생한다. 우리나라 골프장에 식재되어 있는 한국잔디류에 발생하는 병은 약 7종으로 알려져 있으나, 잔디품종, 토양, 기후환경 등에 따라 발병 시기에 차이가 있다. 한국잔디류(Zoysiagrass)는 난지형 잔디로서 한지형 잔디류보다 내병성 및 내마모성이 강하고 질감이 균일하여 국내 골프장에서 많은 면적에 사용되고 있으나, 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ)에 의한 갈색퍼짐병(Large patch)에 대해서는 이병성이 높은 초종으로 알려져 있다. 갈색퍼짐병은 국내 골프장에서 발생하는 병해 중 가장 큰 피해를 초래하는 병이며, 전체 골프장 대비 약 45%의 발병율을 보이고 있다. 국내 골프장의 갈색퍼짐병에 대한 방제는 농약에 의한 약제처리가 광범위하기 때문에 이로 인한 경제적 부담 및 환경오염에 대한 우려가 높다.
갈색퍼짐병(Large patch)은 잔디가 휴면에 들어가는 늦은 가을과 휴면에서 깨어나는 이른 봄에 발생하는 것이 가장 일반적이다. 그러나 한여름에도 장마기, 습한 지역, 음지 등에서 가끔 발생되기도 한다. 병징의 크기는 직경 약 60cm에서 부터 6m에 이르기까지 매우 다양하게 나타나며 잔디밭에 발생되는 패취병 중에서 가장 크게 형성된다. 감염된 잔디의 줄기는 쉽게 뽑히고 엽신의 지제부가 하얗게 쭈그러져 고사하며 줄기의 표면에 갈색의 균사매트가 형성된다. 균사 생육 최적 온도는 25∼30℃, 발병온도는 15∼30℃, 발병 최적 온도는 23℃ 전후이다. 지온이 10∼15℃가 되면 급속히 균체 밀도가 높아지고 잔디를 침해하기 시작한다. 병원균은 병든 잔디의 잔사물, 대취, 살아있는 포복경 등에서 균사나 혹은 균핵으로 월동한다. 이 곰팡이는 포자를 형성하지 않으며 균사의 형태로 증식, 전염된다. 분포밀도는 대취층(thatch layer)에서 가장 높으며, 감염부위도 대취층에 묻혀있는 지제부 줄기이다. 5월 초부터 발병이 시작되어 강우의 빈도가 증가함에 따라 점차 증가하여 6월 말부터 7월 중순의 장마기에 대발생하고, 7월 하순에서 8월 중순의 30℃ 이상의 고온기에는 병원균의 활력이 떨어져서 발생이 일시적으로 정지되었다가 8월 중순 이후 강우와 함께 다시 대발생하게 된다.
현재 잔디 병원균의 방제는 품종의 선택과 경종적인 방법을 일부 사용하는 가운데 주로 농약사용에 의존하고 있는 실정이나, 생물학적 방제에 관한 연구에 관심이 높아지고 있으며, 최근에는 제형화된 미생물 제제가 골프장의 잔디에 사용되고, 미생물 제제의 사용이 점점 증가되는 경향을 보이고 있다. 또한 잔류 독성과 환경오염의 문제가 없는 생화학 농약과 미생물 농약을 포함한 생물 농약 개발에 관심이 집중되고 있다.
국내에서 잔디 병원균에 관한 연구는 1989년 잔디연구소가 설립된 이후 각종 병에 대한 피해조사, 병원균의 특성조사 및 방제에 관한 체계적인 연구가 수행되어 왔다. 그러나 대부분의 연구결과는 잔디의 각종 병을 생물학적으로 방제할 수 있는 방향과 가능성을 제시해 주고 있으나, 다른 식물 병원균의 생물학적 방제에 관한 연구 보고에 비하여 소수에 지나지 않으며, 실제 재배지에서 미생물 제제로서 사용 가능 여부의 연구가 미비한 실정이다. 앞으로 생활수준 향상과 더불어 골프장을 위시한 휴식 및 오락 공간과 그 이용의 증가에 따른 잔디의 식재면적과 이용성이 증대될 전망으로 농약의 사용을 줄일 수 있는 효과적인 병해충의 방제법 개발이 요구되고 있다. 길항미생물을 이용한 생물학적 방제는 이러한 요구에 부응할 수 있는 중요한 방법이다.
본 발명에서는 잔디의 뿌리병 병원 진균인 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ)의 성장을 저해하는 능력이 우수한 길항균의 선발과 항균성 검정을 통해 잔디에 발생하는 갈색퍼짐병(large patch)의 생물학적 방제를 위한 미생물 제제를 개발하였다.
한편, 한국등록특허 제1038034호에는 '길항 미생물 함유 잔디의 생육촉진 및 병해방제용 조성물 및 이를 이용한 잔디 관리 방법'이 개시되어 있고, 한국등록특허 제0478146호에는 '협죽도과 식물의 잎 추출물을 함유하는 고려잔디 갈색퍼짐병 방제용 조성물 및 이를 이용하여 갈색퍼짐병을 방제하는 방법'이 개시되어 있으나, 본 발명의 식물 병원균 방제 효과를 가지는 바실러스 속 CNU-BA-2 균주 및 이의 용도에 대해서는 기재된 바가 전혀 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명에서는 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ) 병원균에 감염되지 않은 토양으로부터 리족토니아 솔라니 AG2-2(Ⅳ)에 의해 유발되는 갈색퍼짐병(large patch) 억제 효과를 보이는 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주를 분리하였고, 상기 균주를 분류학적으로 동정하였다. 본 발명의 CNU-BA-2 균주 또는 이의 배양액을 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물의 접종에 의해 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ), 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(ⅢB), 커부라리아 루나타(Curvularia lunata), 콜레토트리컴 카우다툼(Colletotrichum caudatum) 또는 피티움 울티멈(Pythium ultimum)에 감염된 잔디에서 병증의 발생이 감소하고, 병원균의 성장이 억제되는 것을 확인하였는데, 이를 통해 CNU-BA-2 균주의 잔디 병원균에 대한 방제 효과를 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 잔디 병원균에 대해 항균 활성을 가지는 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주(KCTC 12330BP)를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주를 배양하는 단계를 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물의 제조 방법을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주의 유효량을 잔디 또는 토양에 살포함으로써 잔디 병원균을 방제하는 방법을 제공한다.
본 발명에서는 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주가 잔디 병원균에 대해 병증의 발생을 감소시키고, 병원균류의 성장을 억제시키는 것을 확인하였다. 본 발명의 CNU-BA-2 균주는 농약의 부작용으로 발생하는 환경 오염 및 잔류 농약으로 인한 인체 독성의 위험성이 없는 자연 친화적인 생물 농약으로 사용될 수 있으며, 잔디 병원균에 대한 방제 효과 및 식물의 생육을 촉진시키는 효과가 있으므로, 산업적으로 매우 유용하게 이용될 수 있을 것으로 판단된다.
도 1은 선발된 CNU-BA-2 균주의 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ) 병원균에 대한 항균 활성을 나타낸다.
도 2는 분리된 FRIN-001-1(CNU-BA-2) 균주의 계통분류도를 나타낸다. 계통도는 16s rDNA 유전자 서열의 계통 분석을 토대로 바실러스 속(Bacillus sp.) FRIN-001-01과 바실러스 과(family)의 연관된 다른 종들과의 관계를 나타낸다.
도 3은 LB 아가 플레이트 상에서 2중 배양을 통한 CNU-BA-2 균주의 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ)에 대한 균사 생육 억제 효과를 나타낸다.
도 4는 선발된 CNU-BA-2 균주의 5종류의 잔디 병원균에 대한 균사 생육 억제 효과를 나타낸다. a; 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ), b; 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(ⅢB), c; 피티움 울티멈(Pythium ultimum), d; 콜레토트리컴 카우다툼(Colletotrichum caudatum), e; 커부라리아 루나타(Curvularia lunata)
도 5는 생육상의 재배 실험에서 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ)에 의해 형성된 4주된 잔디의 줄기 사이 군체 형성에 대해 선발된 CNU-BA-2 균주의 억제 효과를 나타낸다. I; 대조구 잔디 화분, Ⅱ; 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ) 및 선발된 CNU-BA-2 균주를 함께 접종한 처리구, Ⅲ; 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ)만 접종한 처리구.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 잔디 병원균에 대해 항균 활성을 가지는 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주를 제공한다.
상기 잔디 병원균의 균사체 발달을 억제하는 항진균 박테리아인 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주는 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) 병해가 발생하지 않은 지역의 토양에서 분리하였으며, 잔디에 감염된 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani)의 성장을 현저히 억제시키는 균주를 선발하였다. 상기 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주를 한국생명공학연구원의 생명자원센터에 2012년 11월 30일자로 기탁하였다(기탁번호: KCTC 12330BP).
본 발명의 일 구현 예에 따른 균주는 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ), 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(ⅢB), 커부라리아 루나타(Curvularia lunata), 콜레토트리컴 카우다툼(Colletotrichum caudatum) 및 피티움 울티멈(Pythium ultimum)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 잔디 병원균에 대해 항균 활성을 가질 수 있으며, 바람직하게는 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ), 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(ⅢB), 커부라리아 루나타(Curvularia lunata), 콜레토트리컴 카우다툼(Colletotrichum caudatum) 및 피티움 울티멈(Pythium ultimum) 모두에 대해 항균 활성을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명은 또한, 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물을 제공한다.
상기 잔디 병원균 방제용 조성물은 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) 병해가 발생하지 않은 지역의 토양으로부터 분리된 항균 균주인 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2를 유효성분으로 포함할 수 있다. 본 발명의 잔디 병원균 방제용 조성물은 수화제(wettable powder) 또는 액상수화제(suspension concentrate) 형태의 제형일 수 있다. 본 발명에 의한 방제용 조성물은 액상 살균제 형태로 제조될 수 있으며, 이에 증량제를 첨가하여 가루분말의 형태로 이용하거나 이를 제형화하여 과립화시킬 수도 있다. 그러나 그 제형에 특별히 한정되지는 않는다. 즉 화학 살균제 공급이 제한된 친환경 유기농업에서 이를 극복하기 위한 생물 살균제로 제형화가 가능하다.
본 발명의 수화제는 유효성분(active ingredient)으로서 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주 또는 이의 배양액, 흡습제로서 화이트 카본(white carbon), 습윤제로서 소듐 비스[2-에틸헥실]설포숙시네이트, 분산제로서 소듐 리그노설포네이트 및 증량제로서 카올린으로 이루어질 수 있으며, 바람직하게는 10 중량% 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주 또는 이의 배양액, 1 중량% 화이트 카본(white carbon), 1 중량% 소듐 비스[2-에틸헥실]설포숙시네이트, 1 중량% 소듐 리그노설포네이트 및 87 중량% 카올린으로 이루어질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 액상수화제는 유효성분(active ingredient)으로서 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주 또는 이의 배양액, 습윤제 및 분산제로서 MBSC(Nonylphenol, ethoxylated, monoether with sulfuric acid, sodium salt, Sodium bis[20 ethylhexyl] sulfosuccinate Polyoxyethylene nonylphenol), 부형제로서 이소프로판올 및 증량제로서 물로 이루어질 수 있다. 상기 액상수화제는 바람직하게는 50 중량% 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주 또는 이의 배양액, 4 중량% MBSC, 30 중량% 이소프로판올 및 16 중량% 물로 이루어질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명은 또한, 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주를 배양하는 단계를 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물의 제조 방법을 제공한다. 상기 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주의 배양 방법 및 잔디 병원균 방제용 조성물의 제조 방법은 당업계에 공지된 임의의 방법을 이용할 수 있으며, 특정 방법에 특별히 제한되는 것은 아니다.
본 발명은 또한, 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주의 유효량을 잔디 또는 토양에 살포함으로써 잔디 병원균을 방제하는 방법을 제공한다. 상기 잔디 병원균을 방제하는 방법으로는 상기 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주를 배양한 배양액 및 상기 균주를 이용한 방제용 조성물을 잔디나 토양에 분무 또는 살포하여 수행할 수 있다. 상기 잔디는 바람직하게는 한국형 잔디(zoysiagrass)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 '유효량'은 유익한 또는 원하는 결과를 일으키기에 충분한 양으로, 잔디 병원균을 방제하기 위해 방제용 조성물을 물로 균일하게 희석한 후 동력살포기와 같은 적절한 살포장치를 이용하여 식물체 및 경작지에 살포할 수 있다. 본 발명의 수화제 또는 액상수화제를 물에 희석하는 경우 수화제 또는 액상수화제의 농도는 유효성분이 생물학적으로 유효한 범위가 될 수 있도록 105 내지 1010 cfu/㎖, 바람직하게는 108 cfu/㎖ 내외로 조절할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 길항미생물의 분리 및 선발
한국잔디에 주로 발생하는 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ) 병원균에 대하여 항균 활성을 나타내는 길항균을 선발하기 위해 수년간 리족토니아 솔라니 병해가 발생하지 않은 전남지역 12개소, 경남지역 1개소의 골프장, 일반 경작지 및 산림지역에서 토양을 수집하였다. 평판희석법(dillution plate)을 이용하여 수집된 토양으로부터 미생물을 분리하였고, 형성된 단일 콜로니를 취하여 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ) 병원균과 2중 배양(dual culture)을 하였다. 2중 배양을 통해 길항력을 갖는 총 61개의 길항 미생물을 1차로 분리하였고, 분리된 균주를 대상으로 색소의 형성 유무, 형태 및 그람 염색 등을 수행하였다. 상기 방법을 통하여 각기 다르다고 판단되는 균주를 선별하고, 리족토니아 솔라니 AG2-2(Ⅳ) 병원균과 1:1 대치 배양을 수행하여 2차로 균주를 선발하였다. 이중 가장 균사 생육 억제 거리가 큰 CNU-BA-2 균주를 최종 선발하였다(도 1).
실시예 2. CNU - BA -2 균주의 그람 염색 및 형태적 특성
최종 선발한 CNU-BA-2 균주에 대해 그람 염색을 수행하였고, 형태적 특성을 분석하였다.
CNU-BA-2 균주는 LB 아가 플레이트에 배양했을 때 우유빛의 불투명한 색이었으며, 그람 염색상 양성으로 판명되었다. 균의 형태는 비교적 부드러운 표면과 둘레를 확인할 수 있었으며, 전자현미경을 통한 형태는 간균으로 확인되었다.
실시예 3. CNU - BA -2 균주의 16s rDNA 염기서열 분석 및 계통도 작성
선발 길항미생물 CNU-BA-2 균주의 16s rDNA 염기서열 분석을 통해 분류학상 위치를 확인하였다. 길항미생물 CNU-BA-2 균주를 LB 아가 플레이트에 배양하여 염기서열을 분석하였으며, NCBI/GeneBank 데이터베이스의 Blast 프로그램을 이용하여 비교 분석한 후, ClustalW2 프로그램으로 계통분류도를 작성하였다(도 2).
CNU-BA-2 균주의 16s rDNA의 염기서열을 분석한 결과, 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 및 아밀로리쿼파시언스(amyloliquefaciens)와 100% 유사성을 보여 바실러스 속(Bacillus sp.) FRIN-001-1 균주로 분류한 후, 실험실 유전자원 ID 분류코드에 의해 CNU-BA-2로 명명하였다.
실시예 4. 길항미생물의 항균력 검정
최종 선발한 길항미생물인 CNU-BA-2 균주를 대상으로 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ)에 대한 대치 배양과 잔디에 주로 발생하는 병원균을 대상으로 CNU-BA-2 균주의 항진균 스펙트럼 및 CNU-BA-2 균주 배양 여액을 이용한 항진균 활성을 조사하였다.
같은 조건하에서 대치 배양을 실시하여 항균력을 확인한 결과 도 3에 나타낸 바와 같이, 해남의 골프장에서 분리한 CNU-BA-2 균주는 15mm의 높은 균사 생육 억제 거리를 나타내었다.
상기 CNU-BA-2 균주가 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ) KACC NO. 40132(갈색퍼짐병) 외의 다른 잔디 병원균에 대하여 항균 활성을 나타내는지 알아보기 위하여, 잔디에 주로 발생하는 병원균인 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(ⅢB) KACC NO. 40151(갈색마름병), 커부라리아 루나타(Curvularia lunata) KACC NO. 40392(엽고병), 콜레토트리컴 카우다툼(Colletotrichum caudatum) KACC NO. 41028(탄저병) 및 피티움 울티멈(Pythium ultimum) KACC NO. 41062(피시움블라이트병) 등 총 5종의 병원균에 대한 CNU-BA-2 균주의 대치 배양을 통해 병원균의 균사 생육 억제력을 조사하였다. 그 결과, 전체적으로 CNU-BA-2 균주의 길항 효과가 높게 나타난 것을 확인하였다. 피시움블라이트 병원균인 피티움 울티멈(Pythium ultimum)에 대해서는 균사 생육 억제력이 다소 낮게 나타났으나, 갈색퍼짐병, 갈색마름병, 엽고병 및 탄저병에 대해서는 높은 억제력을 나타내었다(도 4).
CNU-BA-2 균주가 골프장으로부터 분리한 길항미생물인 점으로 볼 때, 이미 골프장 토양 환경에 적응한 균주일 것으로 판단되므로 생물학적 방제에 이용하기가 용이할 것으로 사료된다.
실시예 5. CNU - BA -2 균주의 재배상 방제력 확인
리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ)에 대해 생육상(growth chamber)에서 선발 길항미생물 CNU-BA-2 균주의 효과를 검정하고자 실제 잔디에서의 방제력 시험을 실시하였다. 건전한 잔디에 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ) 병원균을 접종한 다음, CNU-BA-2 균주의 배양액을 희석 처리한 후 병 발생을 유도하고, 4주 후에 CNU-BA-2 균주에 의한 병 발생 억제율을 확인하였다.
그 결과 CNU-BA-2 균주를 접종하지 않은 대조구에서는 병이 진전되어 잎 집이 썩거나 뽑히는 전형적인 갈색퍼짐병(Large patch)의 병징을 보였다. CNU-BA-2 균주 처리구에서는 47%의 병 발생율을 나타내었고, 43% 병원균 억제율을 보여 높은 병 발생 억제율을 나타내었다(표 1).
실제 잔디를 활용한 갈색퍼짐병에 대한 CNU-BA-2 균주의 병 발생 억제율을 확인한 결과 시험관 내(in vitro)에서와 마찬가지로 생체 내(in vivo)에서 CNU-BA-2 균주가 갈색퍼짐병 병원균에 대한 억제력이 매우 우수한 것을 확인하였다. 또한, CNU-BA-2 균주를 접종한 처리구에서 갈색퍼짐병 병원균의 병 발생이 높게 억제되었을 뿐만 아니라, 외관상 생육을 촉진하는 경향을 나타내었다(도 5).
상기 결과를 통해 CNU-BA-2 균주가 잔디 병원균에 대하여 우수한 병 발생 억제율을 나타내는 것을 확인하였고, 실제 잔디 포장에서의 방제력 검정을 통해 CNU-BA-2 균주를 활용한 미생물 제제 개발이 가능할 것으로 판단된다.
Figure 112013004617107-pat00001
a리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ)의 접종 및 선발된 길항미생물의 적용.
a줄기 사이 군체 형성 크기, A(0); 건강한 줄기, B(2); 성장은 정상이나 약간 썩음, C(3); 썩음＜10%, D(5); 썩음=11~50%, E(8); 썩음=51~90%, F(10); 썩음=91~100%.
줄기 사이 군체 형성(%)=(0×A + 2×B + 3×C + 5×D + 8×E + 10×F) / (총 줄기 수)×100.
b병원균 억제(%)=(대조구 - 처리구) / 대조구 × 100.
c리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) 단독 처리구.
zDuncan's multiple range 시험에 의한 평균치 검정을 나타낸다. P=0.05
한국생명공학연구원 KCTC12330BP 20121130

Claims (6)

  1. 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ), 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(ⅢB), 커부라리아 루나타(Curvularia lunata), 콜레토트리컴 카우다툼(Colletotrichum caudatum) 및 피티움 울티멈(Pythium ultimum)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 잔디 병원균에 대해 항균 활성을 가지는 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주(KCTC 12330BP).
  2. 삭제
  3. 제1항에 있어서, 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(Ⅳ), 리족토니아 솔라니(Rhizoctonia solani) AG2-2(ⅢB), 커부라리아 루나타(Curvularia lunata), 콜레토트리컴 카우다툼(Colletotrichum caudatum) 및 피티움 울티멈(Pythium ultimum) 모두에 대해 항균 활성을 가지는 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주(KCTC 12330BP).
  4. 제1항 또는 제3항의 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물.
  5. 제1항 또는 제3항의 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주를 배양하는 단계를 포함하는 잔디 병원균 방제용 조성물의 제조 방법.
  6. 제1항 또는 제3항의 바실러스 속(Bacillus sp.) CNU-BA-2 균주의 유효량을 잔디 또는 토양에 살포함으로써 잔디 병원균을 방제하는 방법.
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