KR101273644B1 - 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents

마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 마제황(Spenceria ramalana) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는, 마제황 추출물 또는 이의 분획물은 당뇨합병증의 지표인 최종당화산물의 생성 및 알도즈 환원효소의 활성을 억제하고, 당뇨병성 망막증에 대한 유의적인 예방 및 치료효과를 나타내므로, 당뇨병성 망막증을 포함하는 다양한 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물의 유효성분으로서 유용하게 이용될 수 있다.

Description

마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물{Composition for the prevention and treatment of diabetic complications containing the extracts or fractions of Spenceria ramalana as active ingredient}
본 발명은 당뇨합병증의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로 마제황(Spenceria ramalana) 추출물을 이용한 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물, 노화방지 및 지연용 조성물, 암 예방 및 치료용 조성물 및 건강식품용 조성물에 관한 것이다.
당뇨병(diabetes mellitus)은 전 세계적으로 중요한 성인병 중의 하나로서, 최근 우리나라에서도 급속한 경제 성장과 더불어 당뇨병 유병률이 10%에 달하며, 현재 전 세계적으로도 당뇨환자는 2억4천만 명이 넘었으며, 2025년에는 전 세계적으로 3억8천만 명으로 증가할 것이며, 이중 60%가 아시아 지역에서 발병할 것이라고 2009년 미국의사협회(JAMA)에서 발표하였다. 특히 당뇨발병시기가 중장년으로 당겨졌으며, 수명이 연장됨으로 인해서 합병증으로 진행되는 것은 피할 수 없는 상황이 되었다. 즉, 일반적으로 당뇨병에 걸린 후 10 ~ 20년이 지나면 체내 거의 모든 기관이 손상을 받아 당뇨성 망막병증(diabetic retinopathy), 당뇨성 백내장(diabetic cataract), 당뇨성 신증(diabetic nephropathy), 당뇨성 신경병증(diabetic neuropathy), 심장병, 암 또는 골다공증 등이 나타난다. 만성 당뇨성 신증은 혈액 투석 치료 및 말기 신부전의 가장 중요한 원인이 되고 있으며, 당뇨성 백내장과 망막증은 실명을 초래하고 결국엔 죽음에 이르게 한다. 미국의 경우 25 ~ 74세 연령대의 실명의 원인이 당뇨병이며, 당뇨 발병 후 15 ~ 20년이 지나면 60%가 실명으로 이어진다. 그러므로 당뇨환자에게서 합병증이 발병하는 기간이 5 ~ 10년 정도 지연만 되더라도 환자와 그 가족의 삶의 질이 달라질 것이며, 국가재정에도 커다란 영향을 끼칠 것이다.
이러한 당뇨합병증을 유발하는 기전으로는 크게 단백질의 비효소적 당화반응(nonenzymatic glycation of protein), 폴리올 경로(polyol pathway) 및 산화적 스트레스(oxidative stress) 등으로 설명되고 있다. 단백질의 비효소적 당화반응(nonenzymatic glycation of protein)이란, 단백질의 리신 잔기 등의 아미노산 그룹과 환원당이 효소 작용 없는 축합반응, 즉 밀리아드 반응에 의한 것으로, 이 반응의 결과로 최종당화산물(advanced glycation endproducts, AGEs)이 생성된다. 단백질의 비효소적 당화반응은 (1) 단백질의 리신 잔기 등의 아미노산기와 환원당의 알데히드 또는 케톤이 효소 작용 없이 친핵성 첨가 반응을 하여 초기 단계 산물인 쉬프염기(schiff base)를 형성하고, 상기 쉬프염기와 인접한 케토아민 어닥트(ketoamine adduct)가 서로 축합하여 가역적인 아마도리(Amadori)형의 조기당화산물이 생성되는 단계 및 (2) 고혈당 상태가 지속되어 가역적인 아마도리형의 조기당화산물이 분해되지 않고 재배열(rearrangement)되어 비가역산물인 최종당화산물이 생성되고, 이렇게 생성된 최종당화산물들이 단백질 또는 지질 등과 결합 또는 교차결합(cross-linking)하여 비가역적인 당화단백질 또는 당화지질 등의 산물이 생성되는 단계로 나눌 수 있다. 가역적인 아마도리형의 조기당화산물과 달리 최종당화산물은 비가역적인 반응 산물이므로, 일단 생성되면 혈당이 정상으로 회복되어도 분해되지 않고, 최종당화산물이 결합한 단백질 또는 지질의 생존기간 동안 조직에 축적되어 조직의 구조와 기능을 비정상적으로 변화시켜 조직 곳곳에서 합병증을 유발시킨다(Vinson, J. A. et al., 1996, J. Nutritinal Biochemistry 7: 559-663; Smith, P. R. et al., 1992, Eur . J. Biochem., 210: 729-739). 예를 들면, 포도당과 여러 종류의 단백질이 반응하여 생성된 최종당화산물 중 하나인 당화 알부민은 만성 당뇨성 신증을 일으키는 중요한 요인으로 작용한다. 당화 알부민은 당화가 진행되지 않은 정상 알부민에 비해 더 용이하게 신사구체 세포 내로 유입되고, 고농도의 포도당은 메산지움 세포를 자극하여 세포외 기질(extracellular matrix)합성을 증가시킨다. 과도하게 유입된 당화 알부민과 증가된 세포외 기질로 인하여 신사구체의 섬유화가 야기된다. 이와 같은 기전으로 신사구체가 계속 손상 받게 되어 혈액투석 또는 장기이식 등의 극단적인 치료방법을 쓸 수밖에 없는 단계에 이르게 되는 것이다. 또한, 만성 당뇨로 인하여 동맥벽에서는 콜라겐이, 신사구체에서는 기저막성 단백질이 최종당화산물과 결합되어 조직에 축적됨이 보고된바 있다(Brownlee, M., et al ., 1986, Sciences, 232, 1629-1632). 이처럼 비효소적 단백질 당화반응에 의하여 기저막, 혈장 알부민, 수정체 단백질, 피브린, 콜라겐 등의 단백질에서 당화가 일어나며, 생성된 최종당화산물이 조직의 구조와 기능을 비정상적으로 변화시켜 당뇨성 망막병증(diabetic retinopathy), 당뇨성 백내장(diabetic cataract), 당뇨성 신증(diabetic nephropathy), 당뇨성 신경병증(diabetic neuropathy) 등의 만성 당뇨합병증을 유발시킨다. 또한, 고혈당 상태에서 최종당화산물이 생성되는 과정에서 지질대사 이상이 일어나고 동시에 생성되는 유해한 산소 자유라디칼에 대한 방어시스템 기능이 저하되어 산화적 스트레스가 유발된다고 보고된바 있다(Yokozawa, T., et al, 2001, J. of Trad . Med., 18: 107-112). 이처럼 비효소적 당화반응과 산화적 스트레스(oxidative stress) 작용 기전이 서로 연관되어 있다.
폴리올 경로란 (1) 알도스 또는 케토스로부터 알도스 환원효소(aldose reductase, AR)작용에 의해 환원되어 솔비톨을 형성하는 단계 및 (2) 솔비톨이 솔비톨 탈수소효소에 의해 산화되어 과당을 생성하는 단계로 이루어지는 과정이다. 정상상태에서는 알도스 환원효소가 포도당에 대하여 친화력이 매우 낮지만, 고혈당 상태에 의하여 폴리올 경로의 첫 번째 효소인 알도스 환원효소가 과도하게 활성화되어, 이로 인해 과도한 고혈당이 솔비톨과 과당으로 전환되어 조직에 축적되어 삼투압의 균형이 깨져 합병증이 유발된다. 즉, 증가한 삼투압으로 인하여 수분이 인입되어 당뇨성 망막병증(diabetic retinopathy), 당뇨성 백내장(diabetic cataract), 당뇨성 신경병증(diabetic neuropathy) 등으로 진행된다(김응진 외, 당뇨병학, 대한 당뇨병학회, 고려의학, 483쪽; Soulis-Liparota, T., et al ., 1995, Diabetologia, 38: 357-394). 최종당화산물이 사람의 미세혈관 내피세포에서 폴리올 경로의 주효소인 알도스 환원효소를 활성화시키는 것이 보고된바 있다(Nakamura, N., et al., 2000, Free Radic Biol . Med., 29: 17-25). 이때 과당은 포도당에 비하여 단백질의 비효소적 당화반응의 속도가 약 10배 정도 빠르다. 따라서 고농도의 과당이 단백질과 결합하여 결국은 최종당화산물의 형성을 가속화시킨다. 이와 같이, 비효소적 당화반응, 폴리올 경로 및 산화적 스트레스(oxidative stress) 작용 기전들이 서로 연관되어 당뇨합병증을 유발시킨다. 고혈당 상태에서 최종당화산물이 생성되는 과정에서 지질대사 이상이 일어나고 동시에 생성되는 유해한 산소 자유라디칼에 대한 방어시스템 기능이 저하되어 산화적 스트레스가 유발된다고 보고된바 있다(Yokozawa, T., et al, 2001, J. of Trad . Med., 18: 107-112). 따라서 비효소적 당화반응과 산화적 스트레스(oxidative stress) 작용 기전이 서로 연관되어 있다. 따라서 당뇨합병증의 발병을 지연하거나 예방 또는 치료하기 위해서는 최종당화산물 형성의 억제가 매우 중요한 것으로 밝혀졌다(Brownlee, M., et al., 1988, N. Engl . Med ., 318, 1315-1321).
현재, 단백질 당화 억제제로 합성제제인 아미노구아니딘(aminoguanidine)은 친핵성 히드라진(hydrazine)으로, 아마도리 산물과 결합하여 단백질과의 교차결합을 방지함으로써 최종당화산물의 생성을 억제하여 합병증으로 진전되는 것을 지연 또는 방지한다(Brownlee, M., et al ., 1986, Sciences, 232, 1629-1632; Edelstein, D. et al., 1992, Diabetes, 41, 26-29). 아미노구아니딘은 당뇨합병증의 예방 및 치료에 가장 유망한 합성 의약품으로 제 3상 임상실험까지 진행되었으나, 장기간 투여 시 독성이 유발되는 문제점이 나타나 중단되었다. 그러므로 안전하고 효능이 우수한 천연약제의 개발이 요망되고 있는 실정이다.
마제황(蜜桶花)(Spenceria ramalana)는 장미과 (Rosaceae)에 속하는 다년생 초본이다. 마제황(Spenceria ramalana)은 한의학적으로 맛은 약간 쓰(微苦: bitter taste)고 성질은 약간 온(溫: warm)하며, 해독소염(解毒소炎), 수렴지혈(收斂止血) 등의 효능이 있다고 전해지고 있고(중화본초, 상해과학기술출판사), 현대 의학적인 약물학적인 연구나 성분연구가 전혀 보고되지 않았다.
이에 본 발명자들은 당뇨합병증을 위한, 독성 및 부작용이 거의 없어 안전하고 효과적인 천연 약재를 개발하던 중, 마제황 추출물 또는 이의 분획물이 장기적인 당뇨상태에서 발생하는 당화생성물의 축적을 억제하고, 알도즈 환원효소의 활성을 억제효과를 나타내며, 고혈당에 의한 눈 혈관 확장의 유의적인 감소를 나타내므로, 당뇨합병증 예방 및 치료, 및 노화방지 효능 및 항암 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 마제황(Spenceria ramalana) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 목적은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 지연용 약학적 조성물 및, 암 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 마제황(Spenceria ramalana) 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 개선용 건강식품용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 개선용 건강식품용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 지연용 약학적 조성물을 제공한다.
아울러, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 지연용 건강식품용 조성물을 제공한다.
본 발명의 마제황(Spenceria ramalana) 추출물 또는 이의 분획물은 당뇨합병증의 지표인 최종당화산물의 생성 및 알도즈 환원효소의 활성을 억제하고, 당뇨병성 망막증에 대한 유의적인 예방 및 치료효과를 나타내므로, 다양한 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물의 유효성분으로서 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 마제황 추출물 및 이의 분획물 제조과정의 도식도를 나타낸 도이다.
도 2는 유리체혈관(hyaloid vasculature)의 변화를 나타낸 도이다:
a: 유리체혈관의 형광이미지; 및
b: 대조군, 고혈당군(HG),글루코스(Glucose) 및 마제황 추출물 1 ug/ml 처리군, 및 글루코스(Glucose) 및 마제황 추출물 5 ug/ml 처리군 각각의 유리체혈관 두께.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 마제황(Spenceria ramalana)추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 당뇨합병증은 당뇨성 망막병증, 당뇨성 백내장, 당뇨성 신증, 당뇨성 신경병증, 당뇨성 심장병, 암, 당뇨성 골다공증, 및 당뇨성 아테롬성 동맥경화로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 당뇨합병증은 당뇨병이 장기간 지속될 경우 유발되는 증상이지만, 당뇨병의 발병 기준 및 판단 기준과 상이하며, 당뇨합병증 치료제는 당뇨병 치료제와는 별개로서 사용될 수 있다.
상기 마제황 추출물은 하기의 단계들을 포함하는 제조방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다:
1) 마제황에 추출용매를 가하여 추출하는 단계;
2) 단계 1)의 추출물을 식힌 후 여과하는 단계; 및
3) 단계 2)의 여과한 추출물을 감압 농축한 후 건조하는 단계.
상기 방법에 있어서, 단계 1)의 마제황은 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한없이 사용할 수 있다. 상기 마제황은 마제황 전초를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 추출용매는 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 알코올로는 C1 내지 C2 저급 알코올을 이용하는 것이 바람직하고, 상기 저급 알코올로는 에탄올 또는 메탄올을 이용하는 것이 바람직하며, 80% 에탄올 수용액을 이용하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 추출 방법으로는 여과법, 열수추출, 침지추출, 환류냉각추출 및 초음파추출 등 당업계의 통상적인 방법을 이용할 수 있으며, 열수추출 방법으로 1회 내지 5회 추출하는 것이 바람직하며, 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 상기 추출용매는 건조된 마제황 전초에 0.1 내지 10배 첨가할 수 있으며, 0.3 내지 5배 첨가하는 것이 바람직하다. 추출온도는 20 내지 30℃인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 추출시간은 12 내지 48시간인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 방법에 있어서, 단계 3)의 감압농축은 진공감압농축기 또는 진공회전증발기를 이용하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 또한, 건조는 감압건조, 진공건조, 비등건조, 분무건조 또는 동결건조하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 구체적인 실시태양에 있어서, 마제황 전초를 물로 세척하고 그늘에서 건조시킨 다음, 건조된 마제황 전초를 분쇄하여 추출용기에 넣고, 추출용매로 상온에서 반복 추출하여, 마제황 추출물을 수득한 후, 거름종이 등을 이용하여 고형분을 제거하고 여과하였다. 그런 다음, 상기 추출액을 감압 농축하여 마제황 추출물을 제조하였다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물을 추가적으로 유기용매로 분획하여 제조한 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
상기 마제황 추출물의 분획물은 다음과 같이 제조되는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
1) 마제황 추출물을 물에 현탁한 후, n-헥산을 가하여 n-헥산층을 분리하는 단계;
2) 단계 1)의 남은 물층에 에틸아세테이트를 가하여 에틸아세테이트 층을 분리하는 단계;
3) 단계 2)의 남은 물층에 부탄올을 가하여 부탄올층을 분리하는 단계; 및
4) 단계 3)의 남은 물층에 물 분획물을 분리하는 단계.
상기 방법에 있어서, 상기 유기용매는 노르말-헥산, 에틸아세테이트 또는 노르말-부탄올인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 상기 분획물은 상기 마제황 추출물로부터 분획 과정을 1 내지 5회, 바람직하게는 3회 반복하여 수득할 수 있고, 분획 후 감압 농축하는 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
상기 유기용매는 에틸아세테이트 또는 부탄올인 것이 보다 바람직하다.
상기 당뇨합병증은 당뇨성 망막병증, 당뇨성 백내장, 당뇨성 신증, 당뇨성 신경병증, 당뇨성 심장병, 암, 당뇨성 골다공증, 및 당뇨성 아테롬성 동맥경화로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다. 당뇨합병증은 당뇨병이 장기간 지속될 경우 유발되는 증상이지만, 당뇨병의 발병 기준 및 판단 기준과 상이하며, 당뇨합병증 치료제는 당뇨병 치료제와는 별개로서 사용될 수 있다.
상기 분획물은 상기 마제황 추출물에서 용매를 증발시키고 수득한 잔사에 물과 노르말-헥산을 넣어 노르말-헥산층을 분리하여 노르말-헥산 분획물을 수득하였다. 헥산층을 제외한 물층에 에틸아세테이트를 혼합한 후 에틸아세테이트층을 분리하여 에틸아세테이트 분획물을 얻었다. 또한, 에틸아세테이트층을 제거한 후 노르말-부탄올을 혼합한 후 노르말-부탄올층을 분리하여 노르말-부탄올 분획물을 수득하였다. 마지막으로 노르말-부탄올층을 제거한 후 물층의 물 분획물을 수득하였다(도 1 참조).
본 발명의 구체적인 실시태양에 있어서, 본 발명자들은 당뇨합병증의 지표 및 치료 효능 평가의 지표가 되는 최종당화산물의 생성억제 효능을 분석하기 위하여, 단백질로 우혈청알부민(bovine serum albumin; BSA)을 이용하여 과당 및 글루코스와의 결합 정도를 지표로 이용하였다. 또한, 양성대조군으로는 최종당화산물에 대한 억제 효능이 매우 우수하다고 알려진 아미노구아니딘(aminoguanidine)을 이용하였다. 그 결과, 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 처리한 시험군이 양성 대조물질인 아미노구아니딘에 비해 약 3.6배 효과적으로 최종당화산물 억제 효능을 나타냄을 확인하였다(표 1 참조).
본 발명의 구체적인 실시태양에 있어서, 본 발명자들은 마제황 추출물 또는 이의 분획물의 당뇨합병증의 또 다른 지표가 되는 알도즈 환원효소의 활성 억제를 측정하였다. 비교 대조군으로는 3,3-테트라메칠렌글루타르산(Tetramethyleneglutaric acid)을 이용하여 측정하였다. 그 결과, 본 발명의 마제황 추출물 또는 이의 분획물은 기존에 알려진 알도즈 환원효소 억제제에 비하여 더 효과적으로 알도즈 환원효소 활성을 억제하는 것을 확인하였다(표 2 참조).
본 발명의 구체적인 실시태양에 있어서, 본 발명자들은 마제황 추출물의 당뇨병성 망막증에 대한 효과를 확인하기 위하여, 고혈당으로 유도된 제브라피쉬(zebrafish) 발생배에 마제황 추출물을 처리한 후, 유리체혈관의 변화를 확인하였다. 그 결과, 마제황 추출물 처리군은 고혈당으로 확장된 유리체혈관의 유의적인 확장 감소효과를 나타내는 것을 확인하였다(도 2 참조).
따라서, 본 발명의 마제황 추출물 또는 이의 분획물은 장기적은 당뇨상태에서 발생하는 당화생성물의 축적을 억제하고, 알도즈 환원효소의 활성을 억제효과를 나타내며, 고혈당에 의한 눈 혈관 확장의 유의적인 감소를 나타내므로, 당뇨병성 망막증을 포함하는 당뇨합병증 예방 및 치료용 조성물의 유효성분으로서 유용하게 사용될 수 있음을 확인하였다.
본 발명의 조성물 총 중량에 대하여 본 발명의 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 0.1 내지 99.9 중량%를 유효성분으로 함유하고, 약제학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제 및 현탁용제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구로 투여될 수 있으며, 비경구 투여시 피부외용 또는 복강내, 직장, 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사 방식을 선택하는 것이 바람직하며, 가장 바람직하게는 피부외용으로 사용한다.
본 발명의 조성물의 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하며, 일일 투여량은 마제황 추출물의 양을 기준으로 0.01 내지 1000 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 30 내지 500 ㎎/㎏이고, 더욱 바람직하게는 50 내지 300 ㎎/㎏이며, 하루 1 ~ 6 회 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 당뇨합병증 예방 및 개선용 건강식품용 조성물을 제공한다.
상기 당뇨합병증은 당뇨성 망막병증, 당뇨성 백내장, 당뇨성 신증, 당뇨성 신경병증, 당뇨성 심장병, 암, 당뇨성 골다공증, 및 당뇨성 아테롬성 동맥경화로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 마제황 추출물 또는 이의 분획물은 장기적은 당뇨상태에서 발생하는 당화생성물의 축적을 억제하고, 알도즈 환원효소의 활성을 억제효과를 나타내며, 고혈당에 의한 눈 혈관 확장의 유의적인 감소를 나타내므로, 당뇨병성 망막증을 포함하는 당뇨합병증 예방 및 개선용 건강기능식품에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 기능성 식품은 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강식품 100 중량부당 0.01~0.04 중량부, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 중량부 범위에서 선택하는 것이 바람직하다.
상기 외에 본 발명의 기능성 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 기능성 식품은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강식품 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 지연용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 노화방지 및 지연용 건강식품용 조성물을 제공한다.
최종당화산물이 생성되는 과정에서 지질대사 이상이 일어나고 동시에 생성되는 유해한 산소 자유라디칼에 대한 방어시스템 기능이 저하되어 산화적 스트레스가 유발된다고 보고된 바(Yokozawa, T., et al, 2001, J. of Trad . Med., 18: 107-112), 본 발명의 마제황 추출물 또는 이의 분획물은 최종당화산물의 생성을 효과적으로 억제하므로, 노화방지 및 지연용 약학적 조성물 또는 건강식품용 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 암 예방 및 개선용 건강식품용 조성물을 제공한다.
최종당화산물이 암을 유발한다는 것이 이미 보고되었는바(Tokuda H. et al., 2005, Book of Abstract of 53 rd GA Congress joint with SIF, P076), 본 발명의 마제황 추출물 또는 이의 분획물은 최종당화산물의 생성을 효과적으로 억제하므로, 암 치료 및 예방용 약학적 조성물 또는 암 치료 및 개선용 건강식품용 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예, 실험예 및 제조예에 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 마제황 ( Spenceria ramalana ) 에탄올 수용액 추출물의 제조
경동시장(대한민국)에서 구입하여 음건 및 세절한 마제황의 전초 4 kg을 분쇄한 후 1.0 L의 80% 에탄올수용액을 넣고, 추출용기에서 상온상태로 반복 추출하였다. 그런 다음, 상기 추출액을 여과한 후, 구성성분의 분해 및 가수분해를 방지할 수 있도록 농축 시 온도를 40 ~ 45℃ 이하로 유지하며 감압 농축시켜 에탄올 추출물을 350 g을 수득하였다. 또한, 증거표본(no. Diab-2008-63)은 한국한의학연구원 한의융합연구본부 당뇨합병증연구센터 표본실에 보관하였다.
< 실시예 2> 마제황 분획물의 제조
마제황 분획물을 제조하기 위하여 상기 <실시예 1>의 마제황 추출물에서 용매를 증발시키고 수득한 잔사에 물과 노르말-헥산을 넣어 노르말-헥산층을 분리하여 노르말-헥산 분획물을 수득하였고, 헥산층을 제외한 물층에 에틸아세테이트를 혼합한 후 에틸아세테이트층을 분리하여 에틸아세테이트 분획물을 얻었다. 또한, 에틸아세테이트층을 제거한 후 노르말-부탄올을 혼합한 후 노르말-부탄올층을 분리하여 노르말-부탄올 분획물을 수득하였다. 마지막으로 노르말-부탄올층을 제거한 후 물층의 물 분획물을 수득하였다.
<실험예 1> 최종당화산물 생성억제 효능 분석
상기 <실시예 1>에서 수득한 마제황 추출물과 상기 <실시예 2>에서 수득한 마제황 분획물의 시험관 내 최종당화산물 생성 억제 효능을 분석하였다.
구체적으로, 단백질원으로 소혈청알부민(bovine serum albumin; BSA, 미국 시그마)을 택한 후, BSA를 10 ㎎/㎖의 농도가 되도록 50 mM 인산완충용액(phosphate buffer; pH 7.4)에 첨가하여 제조하였다. 당원으로는 0.2 M 과당 및 0.2 M 글루코스가 혼합된 용액을 사용하였다. 상기의 제조된 BSA 용액에 과당 및 글루코스 혼합액을 첨가하였다. 마제황 에탄올 추출물은 5 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖, 25 ㎍/㎖ 또는 50 ㎍/㎖농도로 제조하였다. 상기 모든 화합물을 디메틸설폭사이드(Dimethylsulfoxide; DMSO)에 녹인 후 15% 트윈(tween) 80을 첨가하였고, 총 DMSO의 함량은 0.2%이었다. 상기 제조된 추출물을 상기 BSA 및 당의 혼합액에 첨가하여 37℃에서 14일간 배양하였다. 이때, 0.02% 소디움아자이드(sodium azide) 및 안티마이코틱스(antimycotics)를 항박테리아제 및 항진균제로서 첨가하였다. BSA 및 당 혼합액을 배양한 것을 대조군으로서 사용하였고, 추출물 또는 이의 분획물을 제조하여, 배양하지 않을 것을 시험군과 대조군의 공시험군(blank)으로서 사용하였다. 한편, 효능의 우수함을 비교할 수 있는 지표인 양성대조군으로서 아미노구아니딘을 사용하였다. 구체적으로는, 아미노구아니딘을 증류수에 용해하여 상기에 기재한 방법으로 37℃에서 55.5 ㎍/㎖, 74 ㎍/㎖ 또는 92.5 ㎍/㎖의 농도로 14일 동안 각각 배양하였다. 모든 배양액은 4개씩 준비하여 최대한 오차를 피하였다. 배양 14일 후 배양액에서 생성된 최종당화산물의 함량을 분석하여 그 결과를 나타내었다. 최종당화산물은 형광, 갈색을 띠고 있으며 교차결합을 할 수 있는 물리화학적인 특성을 지니고 있을 뿐 아니라 세포막 수용체가 인지할 수 있는 배위자를 지니고 있었다. 이러한 특성을 지닌 최종당화산물의 양을 마이크로플레이트 검출기(Microplate reader; Excitation: 350 ㎚, Emission: 450 ㎚)로 측정하여 최종당화산물의 생성 억제 정도를 분석하였다(Vinson, J.A. et al., J. Nutr . Biochem., 7: 659-663, 1996). 최종당화산물의 생성억제율은 하기의 [수학식 1]에 따라 계산하였다.
Figure 112011062575360-pat00001
그 결과, 하기 [표 1]에 나타낸 바와 같이, 마제황 에탄올 추출물의 최종당화산물 생성억제 효능의 IC50값은 17.42 ㎍/㎖으로 나타났다. 이는 양성대조군인 아미노구아니딘(IC50값: 63.40 ㎍/㎖)보다 3.6 배로 효능이 현저하게 우수한 것으로 증명되었다(표 1). 이에, 마제황 추출물 또는 이의 분획물은 단백질과 당의 결합을 억제하여 최종당화산물의 생성을 저해하는 것으로 확인되었다.
농도
(㎍/㎖)		 억제
(%)		 IC50
(%)
14일 14일 14일

마제황 추출물		 5
10
25		 17.86± 3.76
35.33± 2.67
67.32± 1.93
17.42± 0.23
마제황 추출물의
노르말-헥산
분획물		 10
25
50		 -2.90± 0.25
-4.28± 0.91
-2.18± 1.00
〉50
마제황 추출물의
에틸아세테이트
분획물		 5
10
25		 14.86± 0.93
25.34± 1.30
62.42± 0.42
19.92± 0.13
마제황 추출물의
노르말-부탄올
분획물		 2.5
5
10		 10.34± 1.96
35.11± 0.66
63.00± 0.25
7.87± 0.03

마제황 추출물의
물 분획물		 2.5
5
10		 4.59± 3.02
28.72± 0.59
59.66± 0.34
8.48± 0.05

아미노구아니딘		 55.5
74
92.5		 42.84± 2.16
60.82± 2.21
66.96± 1.34
63.40± 2.61
< 실험예 2> 알도즈 환원효소( aldose reductase , AR ) 활성 억제 효능 분석
마제황 추출물, 또는 이의 노르말-헥산, 에틸아세테이트, 노르말-부탄올 및 물 분획물의 시험관 내에서 알도즈 환원효소 활성 억제 효능을 분석하였다.
구체적으로 듀프란(Dufrane; 1984) 방법에 따라 SD 랫트(Sprague-Dawley rat, 250 ~ 280 g)의 안구로부터 천연상태의 알도즈 환원효소를 얻기 위하여, 135 mM Na, K-인산완충용액(K-phosphate buffer; pH 7.0) 및 10 mM 2-머캡토에탄올(2-mercaptoethanol)을, 적출한 렌즈와 함께 균질기(Homogenizer)와 초음파분쇄기(Sonicater)를 이용해 분쇄하였다. 14,000 rpm에서 30 분간 원심분리한 다음 상층액을 0.2 ㎛의 필터에 여과한 후 사용하였다. 상기 과정은 모두 4℃에서 수행하였다. 효소(Enzyme)의 단백질원으로 BSA을 이용하여 라우리(lowry) 방법으로 정량하였다. 135 mM Na, K-인산완충용액(pH 7.0), 100 mM 리튬 설페이트(Lithium sulfate), 0.03 mM NADPH, 0.04 mM DL-글리세알데하이드(DL-glycealdehyde) 및 100 ㎍/㎖의 효소 혼합물(mixture)을 0.1% DMSO에 녹인 후 각 농도로 희석한 시료 50 ㎕에 첨가하여 총 부피 1 ㎖가 되도록 한 뒤 37℃에서 10분간 반응시켰다. 이때, 공시험군은 0.04 mM DL-글리세알데하이드(DL-glycealdehyde)를 첨가하지 않은 혼합물을, STD는 135 mM Na, K-인산완충용액(pH 7.0), 100 mM 리튬 설페이트(Lithium sulfate)에 50 ㎕ NADP(0.2 ~ 5 μM)를 첨가한 시료를 사용하였다. 시료 0.3 ㎖의 0.5 N HCl을 첨가하여 반응을 종료시킨 뒤, 10 mM 이미다졸(imidazole)이 첨가된 6 M NaOH 1 ㎖을 가하여 60℃에서 10분간 반응시켜 NADP가 형광 산물(fluorescent product)로 전환되는 정도를 측정하였다. 시료는 3회(triplicate) 수행하였다. 효능 정도는 Spectrofluorophotometric detector(Bio-TEK, Synergy HT, 미국)를 이용하여 Ex. 360 ㎚, Em. 460 ㎚에서 측정하여, IC50값으로 나타내었다. 마제황 추출물은 1.0 ㎍/㎖ , 2.5 ㎍/㎖ 또는 5 ㎍/㎖ 농도로 제조하였고, 노르말-헥산 분획물은 2.5 ㎍/㎖, 5 ㎍/㎖ 또는 10 ㎍/㎖의 농도로, 에틸아세테이트 분획물은 2.5 ㎍/㎖, 5 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖의 농도로, 노르말-부탄올 분획물은 1 ㎍/㎖, 2.5 ㎍/㎖ 또는 5 ㎍/㎖의 농도로, 물 분획물은 2.5 ㎍/㎖, 5 ㎍/㎖ 또는 10 ㎍/㎖의 농도로 각각 제조하였다. 비교대조군으로는 우수한 알도즈 환원효소 활성억제제 중의 하나인 3,3-테트라메칠렌 글루타르산(3,3-tetramethyleneglutaric acid)을 3.72 ㎍/㎖, 4.66 ㎍/㎖ 또는 5.59 ㎍/㎖의 농도로 제조한 후 알도즈 환원효소 활성 억제효능을 측정하였다.
그 결과, 하기 [표 2]에서 나타낸 바와 같이, 마제황 추출물, 이의 노르말-헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 노르말-부탄올 분획물 또는 물 분획물의 알도즈 환원효소 활성억제 효능은 IC50값이 각각 3.49 ㎍/㎖, 8.95 ㎍/㎖ 이상, 6.51 ㎍/㎖, 4.07 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖ 이상이었다. 양성대조군인 3,3-테트라메칠렌글루타르산(IC50값: 5.41 ㎍/㎖)과 비교하여 활성억제 효능이 우수하였다(표 2). 이에 마제황 추출물 또는 이의 분획물은 알도즈 환원효소를 활성 억제하는 것으로 확인되었다.
농도
(㎍/㎖)		 억제
(%)		 IC50
(%)

마제황 추출물		 1
2.5
5		 28.25 ± 4.11
63.23 ± 9.45
92.38 ± 9.73
3.49 ± 0.73
마제황 추출물의
노르말-헥산
분획물		 2.5
5
10		 21.18 ± 2.70
35.88 ± 4.17
53.53 ± 1.02
8.95 ± 0.21
마제황 추출물의
에틸아세테이트
분획물		 2.5
5
10		 25.45 ± 5.06
46.97 ± 3.67
66.671 ± 1.39
6.51 ± 0.16
마제황 추출물의
노르말-부탄올
분획물		 1
2.5
5		 22.12 ± 6.94
30.00 ± 3.28
62.42 ± 8.59
4.07 ± 0.57
마제황 추출물의
물
분획물		 2.5
5
10		 22.94 ± 8.85
31.19 ± 5.50
34.86 ± 3.18
>10
3,3-테트라메칠렌글루타르산
(3.3-Tetramethyleneglutaric acid)
3.72
4.66
5.99
33.03± 4.36
40.27± 1.36
51.58± 0.78

5.41± 0.13
< 실시예 3> 당뇨병성 망막증에 대한 효능 분석
척추동물에 속하며, 생체내(in vivo) 스크리닝(screening) 검색 시스템 중 하나인 제브라 피쉬(zebrafish)를 이용하여 본 발명의 마제황 추출물의 당뇨병성 망막증에 대한 효능을 확인하였다.
구체적으로 혈관내피세포에 특이적으로 형광단백질(green fluorescence protein)이 발현하는 형질전환 제브라피쉬(Tg(kdr:EGPG)) 암수를 교배하여 발생배(embryo)를 수득하였다. 그런 다음, 수정 후 24 시간째 형광을 발현하는 발생배를 선별하여 24 웰 플레이트(well plate)에 5 개체씩 분주를 한 후, 30 mM 글루코스(glucose)를 이용하여 고혈당을 유도하였다. 본 발명의 마제황 추출물 1 ug/ml 및 5 ug/ml을 글루코스 용액에 같이 희석하여 고혈당 조건에서 5일 동안 처리 한후(마제황 추출물 처리 후 3일째 새로운 용액으로 교체) 4% 파라포름알데하이드(paraformaldehyde)를 이용하여 하루 동안 고정한 후, 고정된 개체에서 수정체를 분리하여 유리체혈관(hyaloid vasculature)의 변화를 분석하였다.
그 결과, 도 2에 나타낸 바와 같이 30 mM 글루코스 용액에서 5일간 배양한 고혈당군(HG)의 유리체혈관은 대조군(control)에 비해 유의적으로 확장되었고, 글루코스와 마제황 추출물 1 ug/ml 및 5 ug/ml 처리군은 고혈당에 의한 유리체혈관의 확장을 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다. 따라서, 본 발명의 마제황 추출물은 당뇨 눈합병증의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있음을 확인하였다(도 2).
< 제조예 1> 약학적 제제의 제조
<1-1> 산제의 제조
본 발명의 <실시예 1>의 에탄올 추출물 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<1-2> 정제의 제조
본 발명의 <실시예 1>의 에탄올 추출물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎ 유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<1-3> 캡슐제의 제조
본 발명의 <실시예 2>의 노르말-헥산 분획물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<1-4> 환의 제조
본 발명의 <실시예 2>의 노르말-헥산 분획물 1 g
유당 1.5 g
글리세린 1 g
자일리톨 0.5 g
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1 환 당 4 g이 되도록 제조하였다.
<1-5> 과립의 제조
본발명의 <실시예 2>의 노르말-헥산 분획물 150 ㎎
대두 추출물 50 ㎎
포도당 200 ㎎
전분 600 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 30% 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.
< 제조예 2> 식품의 제조
본 발명의 마제황 추출물을 포함하는 식품들을 다음과 같이 제조하였다.
<2-1> 밀가루 식품의 제조
본 발명의 <실시예 2>의 에탄올 추출물 0.5~5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.
<2-2> 스프 및 육즙( gravies )의 제조
본 발명의 <실시예 1>의 에탄올 추출물 0.1~5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
<2-3> 그라운드 비프(ground beef)의 제조
본 발명의 <실시예 1>의 에탄올 추출물 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
<2-4> 유제품( dairy products )의 제조
본 발명의 <실시예 1>의 에탄올 추출물 5~10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
<2-5> 선식의 제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
본 발명의 <실시예 1>의 에탄올 추출물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 <실시예 1>의 에탄올 추출물을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부),
종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),
본 발명의 <실시예 1>의 에탄올 추출물(3 중량부),
영지(0.5 중량부),
지황(0.5 중량부)
< 제조예 3> 음료의 제조
<3-1> 건강음료의 제조
액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 본 발명의 <실시예 2>의 에틸아세테이트 분획물 5 g을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 제조하였다.
<3-2> 야채 주스의 제조
본 발명의 <실시예 2>의 에틸아세테이트 분획물 5 g을 토마토 또는 당근 주스 1,000 ㎖에 가하여 야채 주스를 제조하였다.
<3-3> 과일 주스의 제조
본 발명의 <실시예 2>의 에틸아세테이트 분획물 1 g을 사과 또는 포도 주스 1,000 ㎖ 에 가하여 과일 주스를 제조하였다.

Claims (13)

  1. 마제황(Spenceria ramalana) 추출물을 유효성분으로 함유하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 마제황 추출물은 마제황의 전초를 이용하는 것을 특징으로 하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 마제황 추출물은 물, C1 ~ C2의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것을 특징으로 하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  4. 제 3항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  5. 마제황 추출물에 추가적으로 유기용매를 가하여 제조한 분획물을 유효성분으로 함유하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  6. 제 5항에 있어서, 상기 분획물은 마제황 추출물을 물에 현탁시킨 후 노르말-헥산, 에틸아세테이트, 노르말-부탄올 및 물로 순차적으로 계통 분획하여 수득한 노르말-헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 노르말-부탄올 분획물 또는 물 분획물 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  7. 제 1항 또는 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 당뇨합병증은 당뇨성 망막병증, 당뇨성 백내장, 당뇨성 신증, 당뇨성 신경병증, 당뇨성 심장병, 암, 당뇨성 골다공증, 및 당뇨성 아테롬성 동맥경화로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  8. 마제황 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 개선용 건강식품용 조성물.
  9. 제 8항에 있어서, 상기 당뇨합병증은 당뇨성 망막병증, 당뇨성 백내장, 당뇨성 신증, 당뇨성 신경병증, 당뇨성 심장병, 암, 당뇨성 골다공증, 및 당뇨성 아테롬성 동맥경화로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 단백질의 비효소적 당화 반응 및 알도즈 효소에 의해 유발되는 당뇨합병증 예방 및 개선용 건강식품용 조성물.
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Pharmazie, Vol.63, pp.693-696, 2008 *
Phytotherapy Research, Vol.13, pp.91-94, 1999 *
The journal of Japaneses Botany, Vol.81, pp.154-167, 2006 *

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