KR101146104B1 - The composition effective against wrinkles mainly comprised of ginsenoside rg3, rg6 and rg2, and the skin treatment composition - Google Patents

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김보현
장경희
신대현
차윤정
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Abstract

PURPOSE: An agent for improving anti-wrinkling and skin elasticity is provided to enable long-term application without side effect. CONSTITUTION: An agent for improving anti-wrinkling contains 20-40 wt% of Rg3, 50-70 wt% of Rg6, and 2-10 wt% of Rg2 as a main ingredient. The agent is manufactured in the form of a skin softener, nutrition lotion, massage cream, or pack. The composition contains ginsenoside Rg3, ginsenoside Rg6, and ginsenoside Rg2 in a ratio of 2:7:1-4:5:1.

Description

진세노사이드 알지3, 알지6 및 알지2를 주성분으로 하는 피부 주름 개선제 및 그를 함유하는 피부 주름 개선 화장제{The composition effective against wrinkles mainly comprised of ginsenoside Rg3, Rg6 and Rg2, and the skin treatment composition}[0001] The present invention relates to a skin wrinkle remedy comprising, as main components, ginsenoside algin 3, algin 6 and algin 2, and a skin wrinkle improving cosmetic comprising the same, wherein the ginsenosides Rg3, Rg6 and Rg2,

본 발명은 피부 주름 개선 및 피부 탄력 증진제 및 그를 함유한 화장제에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 진세노사이드 중 특정한 성분을 적절한 비율로 배합하여 그 성능을 극대화한 피부 주름 개선 및 피부 탄력 증진제 및 그를 함유하는 화장제에 관한 것이다.The present invention relates to a skin wrinkle improving and skin elasticity enhancing agent and a cosmetic preparation containing the same, and more particularly, to a skin wrinkle improving and skin elasticity enhancing agent maximizing the performance of blending certain components of ginsenosides in an appropriate ratio, And to cosmetics containing the same.

본 발명에 따른 조성물은 홍삼 및 인삼으로부터 분리된 진세노사이드 Rg3(구조식 1), Rg6(구조식 2) 및 Rg2(구조식 3)를 함유한다. 본 발명자들의 연구 결과, 이 세 가지 진세노사이드를 2:7:1 내지 4:5:1의 비율(Rg3 20~40중량%, Rg6 50~70중량%, Rg2 10중량%)로 배합할 경우 섬유아세포 증식 효과, 콜라겐 합성 효과, 엘라스틴 합성 효과, 피부 면역 증강 효과 등이 가장 탁월한 것으로 나타났다.The composition according to the present invention contains ginsenosides Rg 3 (structural formula 1), Rg 6 (structural formula 2) and Rg 2 (structural formula 3) separated from red ginseng and ginseng. The study, the three ginsenosides of the present inventors 2 in a ratio of 1 (Rg 3 20 ~ 40 wt%, Rg 6 50 ~ 70% by weight, Rg 2, 10% by weight): 7: 1 to 4: 5 The combination of fibroblast proliferation, collagen synthesis, elastin synthesis, and skin immunity enhancement were the most excellent.

위와 같은 피부 주름 개선 및 피부 탄력 증진용 화장료 및 이를 포함한 화장제는 피부 주름 개선 및 탄력 증진 효과가 매우 우수하며 피부에 대한 부작용도 없어 오랜 기간 동안 피부에 적용하는 화장품등으로 제조하여 피부에 적용할 수 있다.
The above-mentioned cosmetic compositions for improving skin wrinkles and skin elasticity and cosmetic compositions containing the same are excellent in improving the wrinkles of skin and improving elasticity, and there is no side effect to the skin. .

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피부 주름은 노화된 피부의 가장 중요하고 자연스러운 증상으로 노화의 정도를 가늠할 때 흔히 기준이 되는 양상이다. 피부 노화를 막는 것은 불가능한 일이지만 피부는 외관상 중요한 역할을 하는 부위이기 때문에 시대, 장소와 방법을 불문하고 피부의 노화 및 그 대표증상인 피부 주름을 억제하고 늦추기 위한 다양한 시도들이 이루어져왔다.Skin wrinkles are the most important and natural symptom of aging skin and are often the norm when measuring the degree of aging. It is impossible to prevent skin aging. However, since skin plays an important role in appearance, various attempts have been made to suppress and slow down skin wrinkling, which is a representative symptom of skin, regardless of age, place and method.

피부노화는 내인성 노화와 광노화로 나눌 수 있다. 내인성 노화는 비교적 경미한 잔주름, 피부 건조증, 피부탄력이 감소되는 특징을 가짐에 비하여, 광노화는 비교적 굵고 깊은 주름과 많은 잔주름, 그리고 조기에 발견되는 특징을 가지고 있다. 피부 주름의 시작은 진피의 노화에서부터 진행되는데, 표피와 진피의 경계부위인 유두층의 굴곡이 점점 펴지며 탄력섬유인 엘라스틱 섬유와의 부착력을 잃게 되고 엘라스틴의 구조가 변화하게 되어 피부는 탄력을 잃고 늘어지면서 주름이 접히게 된다.Skin aging can be divided into endogenous aging and photoaging. While intrinsic aging has the characteristics of relatively slight fine wrinkles, dryness of the skin, and skin elasticity, photoaging has comparatively coarse and deep wrinkles and many fine wrinkles, and early onset features. The beginning of skin wrinkling starts from the aging of the dermis, and the bending of the papillary layer, which is the boundary between the epidermis and the dermis, gradually expands and the elasticity of the elastic fiber is lost and the elasticity of the elastin is changed. The folds are folded.

현재까지 사용되고 있는 주름 예방 및 개선 방법으로는 피부 자체에 영양을 공급하거나 피부 재생을 돕거나 피부 노화를 발생시키는 환경들을 배제하는 방법들이 주로 사용되었다. 이를 위한 화장료로는 일종의 화학적 박피를 유도함으로써 진피층의 콜라겐 합성을 통해 피부 탄력을 유도하는 과일 산(alpha hydroxy acids), 또는 활성산소(free radical) 발생을 억제하여 세포의 노화를 예방하는 항산화제가 있으며, 항산화제로는 주로 Coenzyme Q, Polypodium Leucotomos, Pycnogenol, 비타민A(레티놀) 등이 사용되어왔다. 또한 Ferulic aicd, Grape seed extracts와 같은 식물성 추출물이나 히알루론산(Hyalurinic aicd)과 같은 수분 공급제(moisturizers)를 함유하는 제품이 대표적으로 사용되어 왔다.Methods of preventing and improving wrinkles that have been used so far include methods of supplying nutrients to the skin itself, helping skin regeneration, or eliminating environments that cause skin aging. As a cosmetic material for this purpose, alpha hydroxy acids which induce skin elasticity through induction of collagen synthesis of dermal layer by inducing a kind of chemical peeling, or antioxidant which inhibits cell aging by inhibiting free radical generation , Coenzyme Q, Polypodium Leucotomos, Pycnogenol, and Vitamin A (retinol) have been used as antioxidants. Also, products containing vegetable extracts such as Ferulic aicd and Grape seed extracts or moisturizers such as hyaluronic acid have been used representatively.

그러나 이들 원료를 함유한 제품은 경시변화에 민감할 뿐만 아니라 유효 농도 이상으로 피부에 침투되거나 분해될 경우 상당한 피부 자극을 수반한다. 따라서 피부 노화에 보다 근원적으로 도움을 줄 수 있으며 약물의 안정성과 피부 안전성까지 만족하는 새로운 원료의 개발이 필요하다.However, products containing these ingredients are not only sensitive to changes over time, but also involve significant skin irritation when they penetrate or decompose into the skin above effective concentrations. Therefore, it is necessary to develop new raw materials that can provide more fundamental help to skin aging and satisfy drug safety and skin safety.

이 때문에 식물 유래 추출물이나 성분이 한방화장품 시장에서 가장 큰 범주를 차지하며 각광받고 있다. 그중 인삼 추출물을 이용한 화장품도 개발돼 왔으나, 앞으로도 인삼에서 분리된 단일 성분 또는 복합 성분을 기능성 화장료로 개발할 수 있는 요소는 무궁무진한 상태이다. Because of this, plant-derived extracts and ingredients are in the spotlight as the largest category in the herbal cosmetics market. Among them, cosmetics using ginseng extract have been developed, but there are many factors that can develop single functional ingredients or complex ingredients separated from ginseng as functional cosmetics in the future.

인삼(Panax Ginseng C.A. Mayer)은 한의학뿐만 아니라 민간요법으로 널리 알려져 사용되어온 대표적인 약용식물로서 오가피(Araliaceae)과에 속하는 다년생 초본류이다. 인삼은 전분 등의 탄수화물이 60~70%로 높은 구성비를 나타내며 triterpenoid saponins을 비롯한 polyacetylenes, phenolic compounds, polysaccharides, peptidoglycans 등의 성분을 함유하고 있다. 또한 그 외에 단백질과 펩티드(Protein, Peptides), 알칼로이드 성분(Alkaloids), 정유성분과 식물스테롤(Essential oil, Phytosterol), 아미노산, 핵산, 비타민, 리그난 성분, 미네랄(Minerals) 등을 함유한다. Panax Ginseng CA Meyer is a perennial herbaceous plant belonging to the genus Araliaceae, which is a representative medicinal plant widely known and used not only in Oriental medicine but also as a folk remedy. Ginseng contains 60% ~ 70% carbohydrates such as starch, and contains components such as triterpenoid saponins, polyacetylenes, phenolic compounds, polysaccharides and peptidoglycans. It also contains proteins, peptides, alkaloids, essential oils and phytosterols, amino acids, nucleic acids, vitamins, lignans, and minerals.

대개 인삼의 생리활성은 사포닌, 다당체 및 펩타이드류에 의한 것으로 진세노사이드(Ginsenoside)를 중심으로 많은 연구가 이루어지기 시작하여 중추신경계 조절, 기억력, 학습효능개선 및 항스트레스 작용과 면역기능 조절작용, 암세포 증식 및 전이 억제 작용, 항산화 작용, 항당뇨 작용, 간기능 개선, 방사선 방어 작용, 혈전형성 억제 등의 다양한 약리작용이 과학적으로 입증됨에 따라 한방뿐 아니라 현대의학에서도 의약품 및 기능성 보조식품으로 그 수요가 증가하고 있다. In general, the physiological activity of ginseng is caused by saponin, polysaccharides and peptides, and many studies have been conducted centering on ginsenoside. Thus, central nervous system regulation, memory, improvement of learning efficacy and anti- Since various pharmacological actions such as cancer cell proliferation and transfer inhibition action, antioxidation action, antidiabetic action, liver function improvement, radiation defense action and inhibition of thrombogenesis have been scientifically proved, the demand for medicines and functional supplements Is increasing.

진세노사이드는 당의 결합 형태와 종류에 따라 그 약리작용이 다르며, 그 화학구조에 따라 개별 또는 복합적으로 작용하여 각각 다양한 생리에 영향을 주는 것으로 알려져 있다. It has been known that ginsenosides differ in their pharmacological action depending on the type and type of glycoside bond, and they act individually or in combination depending on their chemical structure, thus affecting various physiological functions.

진세노사이드가 피부에 갖는 효능으로서 자외선에 의한 피부세포 사멸 감소 및 자외선에 의한 각질 세포 보호(J. Invest. Dermatol. 121:607-613, 2003), 경구 투여를 통한 주름생성 예방(J. Ginseng Res. 31:86-92, 2007), 과각질화 방지(Korean J. Dermatol. 28(4):434-440, 1990), 여드름 예방 및 치료(Korean J. Dermatol. 14(4):335-339, 1976), 피부 탄력성 및 수화성 증가(Fitoterapia 57(1):15-28, 1986), Fitoterapia 57(4):217-222, 1986), 콜라겐 분해 억제(Mol. Cells. 9(5):476-483, 1999), 미백효과(Journal of the society of cosmetic of korea. 27(2)45-56, 2001) 등이 연구 발표되었다.The effects of ginsenoside on the skin include reduction of skin cell death by ultraviolet rays and protection of keratinocytes by ultraviolet rays ( J. Invest. Dermatol. 121: 607-613, 2003), prevention of wrinkle formation by oral administration ( J. Ginseng Res. 31: 86-92, 2007), prevention of keratinization ( Korean J. Dermatol . 28 (4): 434-440, 1990), acne prevention and treatment ( Korean J. Dermatol. 14 (4): 335-339 , 1976), increased skin elasticity and hydratability ( Fitoterapia 57 (1): 15-28, 1986), Fitoterapia 57 (4): 217-222, 1986), inhibition of collagen degradation ( Mol. 476-483, 1999), whitening effect ( Journal of the Society of Cosmetic of Korea, 27 (2) 45-56, 2001).

특히 진세노사이드 Rg3는 강력한 항암작용과 암 예방 효과, 면역기능항진, 항암 치료 및 수술 후 면역력을 빠른 시간 내에 회복시키는 것으로 보고되어 있으며, 이와 관련하여 혈소판응집억제 및 항혈전작용, 혈관이완작용, 항암제의 내성억제 작용 등 경구용 약리작용에 관한 특허가 있다. 피부에 관련된 효능으로는 피부섬유아세포(skin fibroblast)에서 콜라겐(collagen)과 피브로넥틱(fibronectin)과 같은 세포간질(Extracellular matrix)의 주요 성분의 합성을 증가시키고, 자연적 또는 광노화에 의한 피부의 간질 성분의 분해에 영향을 주는 AP-1과 TGF-β1의 발현을 조절(J. Soc. Cosmet. Scientists Korea. 30(2):2521-2525, 2004)하며, 또한 진세노사이드 Rg3를 다량 포함하는 흑삼 추출물을 함유한 화장제가 피부의 주름을 개선하는 효과가 있음(Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society, 11(9):3325-3329, 2010)이 발표되었다. 또한 진세노사이드 Rg3가 피부 개선 효과가 있음을 확인하여 단일 진세노사이드 Rg3를 함유하는 화장료 조성물이 특허 출원(제2003-65882호)되기도 하였다.In particular, ginsenoside Rg 3 has been reported to rapidly restore potent anti-cancer, anti-cancer, anti-immune, anti-cancer, and post-operative immunity. In addition, platelet aggregation inhibition and anti- , And anti-cancer drug resistance-inhibiting action. Skin-related efficacy increases the synthesis of the major components of the extracellular matrix, such as collagen and fibronectin, in skin fibroblasts, controlling the AP-1 and TGF-β1 expression of influencing the decomposition of the component (J. Soc Cosmet Scientists Korea 30 ( 2):... 2521-2525, 2004) , and also contains a large amount of ginsenoside Rg 3 (Korean Academy of Industrial Science, 11 (9): 3325-3329, 2010), which is effective for improving skin wrinkles. Also, it was confirmed that ginsenoside Rg 3 had a skin improving effect, and a cosmetic composition containing a single ginsenoside Rg 3 was patented (No. 2003-65882).

진세노사이드 Rg6는 (3β,2α,12β)-trihydroxydammar-20(21), 24-diene-6-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-β-D-glucopyranoside로서 항보체 활성화 및 혈소판 응집과 관련된 약리적 효능에 대해 연구되었으며 진세노사이드 Rg6와 관련된 주름개선용 화장료에 대한 특허는 출원된 바 없다.Ginsenoside Rg is 6 (3β, 2α, 12β) -trihydroxydammar -20 (21), 24-diene-6-O-α-L-rhamnopyranosyl (1 → 2) , wherein as -β-D-glucopyranoside and complement activation It was studying the pharmacological effects associated with platelet aggregation patent on a cosmetic for improving wrinkles associated with ginsenosides Rg 6 is not filed on the bar.

인삼의 진세노사이드 Rg2는 자외선 노출에 의해 손상된 피부세포를 DNA 회복과 관련하여 보호하는 효과(Naunyn-Schmied Arch pharmacol, 382:89-101, 2010)가 있음이 발표되었고, 진세노사이드 Rg2를 주성분으로 포함하는 피부보호용 화장료 조성물이 특허 출원(제10-2005-0088741호)된 바가 있다.Ginsenoside Rg 2 of ginseng has been reported to have the effect of protecting the damaged skin cells against DNA recovery ( Naunyn-Schmied Arch pharmacol , 382: 89-101, 2010), and that ginsenoside Rg2 A cosmetic composition for skin protection comprising as a main component has been patented (No. 10-2005-0088741).

위와 같이 진세노사이드 Rg3와 진세노사이드 Rg2는 피부 노화 및 개선과 관련하여 많은 연구와 개발이 이루어지고 있다. 하지만 홍삼으로부터 진세노사이드를 분리하였을 때 Rg2 및 Rg3 각각의 추출 수율이 매우 낮고 천연 소재로서 다른 화학 소재에 비해 고가이기 때문에 화장료 소재로서의 활용도가 낮았다. 또한 순수하게 분리된 진세노사이드 Rg2와 진세노사이드 Rg3가 화장료 조성물 또는 그를 포함한 화장제로서 사용할 때 각각 사용된 사례는 있지만 특정한 비율로 함유되었을 때 노화에 대한 주름 생성 및 탄력 감소 방지 효과에 대해 구체적으로 밝힌 사례는 없었다.
As described above, ginsenoside Rg 3 and ginsenoside Rg 2 have been studied and developed in relation to skin aging and improvement. However, when the ginsenosides were separated from red ginseng, the extraction yields of Rg 2 and Rg 3 were very low and their utilization as a cosmetic material was low because they were expensive compared with other chemical materials as natural materials. Also, when purely separated ginsenoside Rg 2 and ginsenoside Rg 3 are used as cosmetic compositions or cosmetics containing the same, there are cases in which they are respectively used. However, when they are contained in a specific ratio, There was no specific case for this.

요컨대 진세노사이드의 다양한 단일 성분에 대한 약리적 효과는 이미 과학적인 결과로 입증되어 왔으며, 이를 함유한 화장료 조성물 및 화장제에 대해서는 이미 많은 개발이 이루어졌다. 그럼에도 불구하고, 진세노사이드의 복합적인 작용에 대한 연구는 미미하며, 이를 활용한 제제에 대한 개발은 매우 적다. 기존의 진세노사이드를 포함한 화장료 및 화장제는 자외선 차단, 미백, 보습 또는 피부에 유용한 기능 등의 매우 넓은 범위의 기능을 내세운 포괄적인 목적을 가지고 개발된 화장료가 대부분이었기 때문에 소비자들은 기존의 화장료 및 화장제와 차별화된 이점을 감지할 수 없었다. 또한 이미 화장료 조성물로 많은 개발이 이루어진 진세노사이드 Rg2 및 진세노사이드 Rg3도, 이를 각기 개별적으로 함유한 화장료 및 기타 향장제품들만이 다수 개발되고 있는 실정이다.
In short, the pharmacological effects of various single components of ginsenoside have already been proven by scientific results, and many developments have already been made with regard to cosmetic compositions and cosmetics containing them. Nevertheless, the research on the complex action of ginsenosides is insignificant, and very little development has been done on them. Cosmetics and cosmetics including conventional ginosenoids have been developed with a comprehensive purpose for a wide range of functions such as ultraviolet ray blocking, whitening, moisturizing or skin-friendly functions. Therefore, I could not detect the advantage differentiated from the cosmetic. In addition, cosmetic compositions and other cosmetics containing Rg 2 and Ginsenoside Rg 3 , which have already been developed with cosmetic compositions, have been developed.

본 발명은 상기와 같은 배경에서 안출된 것으로, 본 발명은 기존의 한계를 극복하여 홍삼 및 인삼으로부터 유래된 진세노사이드 중 특정 성분을 효과적으로 배합함으로써 피부 주름 개선 및 피부 탄력 증진이라는 효과가 매우 우수한 조성물을 제공하는 데 그 목적이 있다.SUMMARY OF THE INVENTION The present invention has been made in view of the above circumstances, and it is an object of the present invention to overcome the limitations of the prior art and effectively formulate a specific component of ginsenoside derived from red ginseng and ginseng to improve skin wrinkles and skin elasticity And the like.

발명자들은 피부 주름 개선 및 탄력 증진에 효과적인 우수한 화장제를 개발함과 동시에 그 효과를 보다 더 극대화하기 위해 여러 가지 진세노사이드들을 배합해 보고 그 비율을 조절해본 결과, 섬유아세포 증식 효과, 콜라겐 합성 효과, 엘라스틴 합성 효과, 피부 면역 증강 효과 등에서 고루 우수한 진세노사이드의 조합 및 각 성분의 함량 비율을 확인하였다. The present inventors have developed an excellent cosmetic preparation effective for improving skin wrinkles and elasticity and at the same time, in order to further maximize the effect, various ginsenosides were blended and their proportions were adjusted. As a result, the effects of fibroblast proliferation effect, collagen synthesis effect , Elastin synthesis effect, skin immunity enhancement effect and the like, and the content ratio of each component was confirmed.

상기와 같은 목적을 갖는 본 발명은 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 주성분으로 하는 피부 주름 개선제인 것을 특징으로 한다.The present invention having the above object is characterized in that it is a skin wrinkle improving agent comprising, as a main component, ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 .

이때 각 진세노사이드의 함량은 Rg3 20~40중량%, Rg6 50~70중량%, Rg2 10중량%인 것을 특징으로 한다.Wherein the content of each ginsenoside is 20 to 40% by weight of Rg 3 , 50 to 70% by weight of Rg 6 , and 10% by weight of Rg 2 .

본 발명은 또한 상기 피부 주름 개선제를 함유하는 피부 주름 개선 화장제인 것을 특징으로 한다.The present invention is also characterized in that it is a skin wrinkle-improving cosmetic preparation containing the skin wrinkle-improving agent.

상기 피부 주름 개선 화장제는 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림 또는 팩의 제형 중 어느 하나이다.The skin wrinkle-improving cosmetic agent is any one of a softening agent, a nutritional lotion, a massage cream, or a pack.

또한 본 발명의 피부 주름 개선 화장제는 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2가 전체 화장료 중에 고형분으로서 0.0001 내지 20.0중량% 함유됨을 특징으로 한다.
In addition, the skin wrinkle-improving cosmetic of the present invention is characterized in that ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 are contained in the total cosmetics in an amount of 0.0001 to 20.0% by weight as solids.

본 발명에 따르는 활성성분인 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2로 함유된 조성물은 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 단독으로 적용하였을 경우보다 우수한 피부 주름 개선 및 탄력 증진 효과를 나타낸다. 또한 이들이 2:7:1 내지 4:5:1(Rg3 20~40중량%, Rg6 50~70중량%, Rg2 10중량%)로 배합될 때 더욱 우수한 효과를 보인다.A composition comprising the active ingredients ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 according to the present invention can be used alone, in combination with ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 The skin wrinkle improvement and the elasticity enhancement effect are superior. Further, when they are blended with 2: 7: 1 to 4: 5: 1 (20 to 40% by weight of Rg 3 , 50 to 70% by weight of Rg 6 and 10% by weight of Rg 2 )

또한 본 발명에 따르는 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2는 천연 추출물로서 다른 합성 단일 원료에 비해 부작용이 없으며, 실제로 상기 추출물에 대한 안전성 평가 결과, 생체에 아무런 영향이 없는 것으로 판명되어 오랜 기간 동안 피부에 적용하는 화장품 등으로 제조하여 피부에 적용할 수 있다. In addition, the ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 according to the present invention are natural extracts and have no adverse effects compared to other synthetic single raw materials. In fact, It can be applied to the skin by being manufactured with cosmetics which are proved to be absent and applied to the skin for a long period of time.

본 발명에 이어서 추후, 진세노사이드 Rg3, Rg6 및 Rg2의 조성비가 상기의 탁월한 효과를 나타내는 비율 범위를 충족하는 추출 공정 및 가공 공정 개발 시, 기존의 Rg3, Rg6 및 Rg2 각각의 분리 공정을 생략하고 산업소재로 사용 가능하게 되므로 경제적인 부담을 줄일 수 있을 것이다.
Rg 3, Rg 6, and Rg 2, respectively , at the time of development of an extraction process and a processing process in which the composition ratio of ginsenosides Rg 3, Rg 6, and Rg 2 satisfies the above-mentioned excellent range of effects, It is possible to reduce the economical burden because it is possible to use it as an industrial material.

이하 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명에 따르는 활성성분으로서 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 2:7:1 내지 4:5:1의 비율로 함유한 것을 특징으로 하는 화장제는 우수한 피부 주름 개선 및 탄력 증진 효과를 발휘하는 화장물 조성물로 사용될 수 있다. The cosmetic agent characterized by containing ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 as active ingredients according to the present invention in a ratio of 2: 7: 1 to 4: 5: 1, It can be used as a cosmetic composition that exhibits an effect of improving wrinkles and improving elasticity.

본 발명에 의한 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 함유하는 화장제의 인체 피부에 대한 적용량은 피부의 상태에 따라 적절히 선택될 수 있으며, 일반적으로는 전체 화장료 조성에 대하여 고형분으로써 0.0001% 내지 12.0%가 되게 하여 1일 1 내지 3회 적용하는 것이 바람직하다. 상기 조성이 0.0001% 미만일 경우 효과가 나타나기 어렵고, 12%를 초과한 경우에는 적용량 대비 효능 상승효과가 떨어지면 제품의 제형이 불안정해 진다.The amount of the cosmetic preparation containing the ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 according to the present invention applied to the human skin can be appropriately selected according to the condition of the skin, To be in the range of 0.0001% to 12.0% by mass as a solid content. If the above composition is less than 0.0001%, the effect is less likely to be exhibited, and if it exceeds 12%, if the effect of increasing the effect is less than the application amount, the formulation of the product becomes unstable.

본 발명의 조성물은 통상적인 방법으로 화장수(스킨), 영양화장수(로션), 영양크림, 맛사지크림, 에센스 또는 팩으로 제조하여 피부에 적용할 수 있다.The composition of the present invention can be applied to the skin by preparing it as a lotion (skin), a nutritional lotion (lotion), a nutritional cream, a massage cream, an essence or a pack in a conventional manner.

이러한 제형으로 화장품을 제조할 경우 다른 배합성분은 특별히 한정하지 않고 통상적인 방법으로 자유롭게 선택할 수 있다. When the cosmetic is manufactured by such a formulation, the other ingredients are not particularly limited and can be freely selected by a conventional method.

또한 피부의 자외선 차단 효과(광인성 노화 방지), 세포활성 유지(내인성 노화방지), 미백효과, 항산화, 보습, 피부의 거칠어짐 방지 등에 효과가 있는 각종 물질(또는 약제)과 병용할 수 있다. It can also be used in combination with various substances (or medicines) which are effective for the ultraviolet blocking effect (prevention of aging of the skin), maintenance of cell activity (anti-aging of the skin), whitening effect, antioxidation, moisturization and prevention of skin roughness.

본 발명에 따르는 조성물의 활성성분이 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 2:7:1 내지 4:5:1의 비율로 조제하여 피부에 적용할 경우 그 효과가 우수할 뿐 아니라, 후술하는 실험결과로부터 입증되는 바와 같이 부작용이 없어 안전하게 사용할 수 있다. When the active ingredient of the composition according to the present invention is formulated at a ratio of 2: 7: 1 to 4: 5: 1 of ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 , And it can be safely used because there is no side effect as evidenced by experimental results to be described later.

진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2의 배합비율 2:7:1(Rg3 20~40중량%, Rg6 50~70중량%, Rg2 10중량%)에 있어 진세노사이드 Rg6가 70중량% 이상에서는 피부 주름 개선 및 탄력 증진 효과가 충분하지 않았으며 50중량% 이하에서는 그 효과가 비교적 충분히 증가하지 않는 문제점이 있었다.The mixture ratio of ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 is 2: 7: 1 (20 to 40% by weight of Rg 3 , 50 to 70% by weight of Rg 6 and 10% by weight of Rg 2 ) When the concentration of ginsenoside Rg 6 is more than 70% by weight, the effect of improving skin wrinkles and elasticity is not sufficient, and when it is less than 50% by weight, the effect is not sufficiently increased.

본 발명은 이하의 실시예 및 실험예에 의하여 더욱 상세히 설명되나, 본 발명이 이들에 의해 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니다.
The present invention is explained in more detail by the following examples and experimental examples, but the present invention is not limited thereto in any way.

[진세노사이드 Rg[Ginsenoside Rg 33 , 진세노사이드 Rg, Ginsenoside Rg 6 6 및 진세노사이드 RgAnd ginsenoside Rg 22 의 제조]Gt;

(1) 진세노사이드 Rg3의 제조(1) Preparation of ginsenoside Rg 3

인삼 또는 홍삼을 정제수로 세척한 후 건조하고 작은 조각으로 파쇄한 후, 건조 중량 10배의 에탄올을 용매로 사용하여 추출한 후 수득한 추출물에서 통상적인 방법에 따라 인삼조사포닌 분리하였다. 조사포닌 10g을 50% 초산 35ml에 용해시키고 2시간 동안 70℃에서 교반하면서 가열한 후 반응 혼합물을 상온까지 식혔다. 반응액을 증류수로 300ml로 희석하고 n-부탄올 150ml로 3회 추출하였다. 추출액을 합하여 포화 소디움바이카보네이트 용액으로 2회 세척한 다음 n-부탄올층을 감압 농축시켰다. 반응 혼합물을 실리카겔 칼럼크로마토그라피(클로로포름:에탄올:물=100:30:10, 하층)으로 분리하여 진세노사이드 Rg3를 얻었다.
The ginseng or red ginseng was washed with purified water, dried and crushed into small pieces, and then extracted with 10 times the dry weight of ethanol as a solvent. Then, the ginseng crude saponin was separated from the obtained extract by a conventional method. 10 g of crude saponin was dissolved in 35 ml of 50% acetic acid and heated for 2 hours at 70 캜 with stirring, and then the reaction mixture was cooled to room temperature. The reaction solution was diluted to 300 ml with distilled water and extracted three times with 150 ml of n-butanol. The combined extracts were washed twice with saturated sodium bicarbonate solution and the n-butanol layer was concentrated under reduced pressure. The reaction mixture was separated by silica gel column chromatography (chloroform: ethanol: water = 100: 30: 10, lower layer) to obtain ginsenoside Rg 3 .

(2) 진세노사이드 Rg6의 제조(2) Preparation of ginsenoside Rg 6

인삼 또는 홍삼을 정제수로 세척한 후 건조하고 작은 조각으로 파쇄한 후, 건조 중량 10배의 에탄올을 용매로 사용하여 추출한 후 수득한 추출물에서 통상적인 방법에 따라 인삼조사포닌 분리하였다. 분리된 조사포닌으로부터 프랩 엘시(Waters Co., Ltd. 미국, Delta prep 4000)을 이용하여 진세노사이드 (ginsenoside) Rg6를 분리하였다. 분리된 진세노사이드 Rg6를 HPLC(Waters Co., Ltd. 미국, Waters 2690 Seperations Module, Waters 2487 Dual λ Absorbance deterctor)로 정성 분석하여 순도가 96% 이상임을 확인하였다.
The ginseng or red ginseng was washed with purified water, dried and crushed into small pieces, and then extracted with 10 times the dry weight of ethanol as a solvent. Then, the ginseng crude saponin was separated from the obtained extract by a conventional method. Ginsenoside Rg 6 was isolated from the separated crude saponin using a Purp Elsy (Waters Co., Ltd., Delta prep 4000, USA). The separated ginsenoside Rg 6 was qualitatively analyzed by HPLC (Waters 2690 Seperations Module, Waters 2487 Dual λ Absorbance Detector, USA) to confirm that the purity was 96% or more.

(3) 진세노사이드 Rg2의 제조(3) Production of ginsenoside Rg 2

인삼 또는 홍삼을 정제수로 세척한 후 건조하고 작은 조각으로 파쇄한 후, 건조 중량 10배의 에탄올을 용매로 사용하여 추출한 후 수득한 추출물에서 통상적인 방법에 따라 인삼조사포닌 분리하였다. 조사포닌 10g을 50% 초산 35ml에 용해시키고 3시간 동안 가열 환류처리 한 후, 감압농축하여 약 5g을 수득하였다. 반응물을 증류수로 용해시키고 알킬벤젠계 다공성 수지로 충진한 컬럼으로 분리하여 진세노사이드 Rg2를 얻었다.
The ginseng or red ginseng was washed with purified water, dried and crushed into small pieces, and then extracted with 10 times the dry weight of ethanol as a solvent. Then, the ginseng crude saponin was separated from the obtained extract by a conventional method. 10 g of crude saponin was dissolved in 35 ml of 50% acetic acid, and the mixture was heated under reflux for 3 hours and then concentrated under reduced pressure to obtain about 5 g. The reaction product was dissolved in distilled water and separated into a column packed with an alkylbenzene-based porous resin to obtain ginsenoside Rg 2 .

[실험예 1] 섬유아세포 증식 효과 측정 [Experimental Example 1] Measurement of fibroblast proliferation effect

인간의 피부 섬유아세포 (human skin fibroblast)인 CCD986sk를 96-웰 마이크로 플레이트(96-well microplate)의 각 well에 5X103 cell/well이 되도록 분주하고 우태아 혈청(Fetal bovine serum)이 함유된 DMEM(Dulveccos Modified Eagles Media) 배지에서 24시간 동안 37℃에서 배양하였다. 양성대조군으로 레티놀(Retinol)을 처리하였으며 준비된 진세노사이드 Rg3, Rg6, Rg2와 진세노사이드 Rg3/Rg6/Rg2 혼합물을 배양배지에 100 ㎕ 첨가하였다. 대조군은 진세노사이드 Rg3, Rg6, Rg2와 진세노사이드 Rg3/Rg6/Rg2 혼합물을 처리하지 않은 기본배지만을 넣었다. 그다음 CO2(5%) 배양기에서 37℃, 72시간 배양한 후, 0.2% MTT(3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드) 용액을 각 well에 50 μl씩 첨가하여 4시간 동안 정치하였다. 이후 상층액을 제거하고 150 μl의 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 첨가한 후 10분간 진탕하여 formazan을 녹였다. 이후 DMSO에서 녹은 formazan을 마이크로 플레이트 판독기(Microplate reader)를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다. 이를 대조군의 흡광도와 비교하여 섬유아세포 증식효과를 나타내었다.
The human skin fibroblast CCD986sk was dispensed into each well of a 96-well microplate at 5 × 10 3 cells / well and cultured in DMEM containing fetal bovine serum Dulveccos Modified Eagles Media) for 24 hours at 37 < 0 > C. Retinol was treated as a positive control and 100 μl of the mixture of prepared ginsenosides Rg 3 , Rg 6 , Rg 2 and ginsenoside Rg 3 / Rg 6 / Rg 2 was added to the culture medium. The control group was supplemented with a basal diet not treated with ginsenosides Rg 3 , Rg 6 , Rg 2 and a mixture of ginsenosides Rg 3 / Rg 6 / Rg 2 . Then, the cells were cultured in a CO 2 (5%) incubator at 37 ° C for 72 hours, and a solution of 0.2% MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) 50 μl was added to each well and allowed to stand for 4 hours. After removing the supernatant, 150 μl of DMSO (dimethyl sulfoxide) was added and formazan was dissolved by shaking for 10 minutes. The absorbance of formazan dissolved in DMSO was measured at 570 nm using a microplate reader. This was compared with the absorbance of the control group to show the fibroblast proliferation effect.

세포증식효과(%)=(실험군의 흡광도-대조군의 흡광도)/대조군의 흡광도*100
Cell proliferation effect (%) = (absorbance of experimental group-absorbance of control group) / absorbance of control group * 100

실험결과, fig. 1에 나타난 바와 같이 양성대조군인 레티놀은 세포활성능이 약 90%의 세포 증식을 나타내었고 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 단독으로 처리 시 약 96~101% 이내의 섬유아세포 증식효과를 나타내었다. 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 2:7:1 내지 4:5:1의 비율로 혼합하여 처리 시 약 152~165%의 섬유아세포 증식효과를 나타내어 특정 비율로 혼합하여 처리 시 그 효과가 특이적으로 증가하는 것을 확인할 수 있다.
As a result of the experiment, fig. 1, the positive control group, retinol, exhibited cell proliferation of about 90%, and about 96 to 101% of ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 alone, Of fibroblast proliferation. Ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 at a ratio of 2: 7: 1 to 4: 5: 1 to exhibit a fibroblast proliferation effect of about 152 to 165% It can be confirmed that the effect is specifically increased in the treatment.

Fig. 1. 본 발명에 따른 Rg3/Rg6/Rg2 혼합물의 섬유아세포 증식 효과를 나타낸 그래프Fig. 1. Graph showing the fibroblast proliferation effect of Rg 3 / Rg 6 / Rg 2 mixture according to the present invention

Figure 112011062619561-pat00004

Figure 112011062619561-pat00004

[실험예 2] MMPs (Matrix metalloproteinases)의 활성 저해능 [Experimental Example 2] Activity inhibition of MMPs (Matrix metalloproteinases)

준비된 진세노사이드 Rg3, Rg6, Rg2와 진세노사이드 Rg3/Rg6/Rg2 혼합물 및 양성대조군인 레티놀에 의한 Matrix metalloproteinases의 활성 저해 효과를 실험예 1에서 기술한 피부 섬유아세포 (human skin fibroblast)인 CCD986sk 배양액을 이용하여 측정하였다.Prepared ginsenoside Rg 3, Rg 6, Rg 2 and ginsenoside Rg 3 / Rg 6 / Rg 2 mixture and a skin fibroblast describing the inhibitory effect of Matrix metalloproteinases by the retinol positive control group in Experiment Example 1 (human skin fibroblast).

MMPs의 활성을 측정하기 위해 gelatin zymography를 실시하였는데 실험예 1에서 기술한 조건에서 배양된 CCD986sk 배양액을 채취하여 400xg로 원심분리하여 상층액을 취한 후 2X sample buffer (Invtrogen Co., 미국)를 넣어 전기영동 시료를 준비하였다. 10% 폴리아크릴아마이드에 0.1% 젤라틴을 첨가한 겔을 사용하여 시료를 전기영동 한 후, 겔을 2.5% Trino X-100 (Sigma Co., Ltd 미국)으로 30분간 renaturation하고 24시간 동안 developing 완충용액 (50mM Tris-HCl, 150mM NaCl, 50mM CaCl2, 1μM ZnCl2, 0.02% NaN3, pH7.5)에서 반응시켰다. Developing 완충용액을 제거한 다음, 겔을 0.5% (w/v) Coomassie brilliant blue G-250 (Bio-Rad Laboratories, 미국) 용액으로 1시간 동안 염색하고 탈색용액 (methanol:acetic acid:water (3:1:6))으로 세척하여 젤라틴 분해정도를 확인하였다.
In order to measure the activity of MMPs, gelatin zymography was performed. CCD986sk culture was cultured under the conditions described in Experimental Example 1, and centrifuged at 400 xg to obtain supernatant. Then, 2X sample buffer (Invitrogen Co., USA) Youngdong samples were prepared. The gel was electrophoresed using a gel containing 0.1% gelatin added to 10% polyacrylamide, and the gel was renaturated with 2.5% Trino X-100 (Sigma Co., Ltd USA) for 30 minutes, (50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 50 mM CaCl 2, 1 μM ZnCl 2, 0.02% NaN 3, pH 7.5). Developing buffer was removed and the gel was stained with 0.5% (w / v) Coomassie brilliant blue G-250 (Bio-Rad Laboratories, USA) for 1 hour and decolorized with methanol: acetic acid: water : 6)) to confirm the extent of gelatin degradation.

MMPs 저해율 (%)=(1-B/A)x100MMPs inhibition rate (%) = (1-B / A) x 100

(A: 대조군의 흡광도, B: 상기 시험 물질 처리 세포군의 흡광도)
(A: absorbance of the control group, B: absorbance of the test substance-treated cell group)

MMPs는 콜라겐합성을 억제하는 분해인자로 MMPs 활성의 억제는 곧 콜라겐 분해를 감소시켜 피부탄력의 유지 및 주름 형성을 지연한다. fig. 2와 같이 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2 각각 단독으로 처리했을 시에는 26% 내외의 MMPs 저해능을 보인 반면 특정 비율 내에서 혼합하여 처리 시 그 효과가 약 36% 이상으로 증가하는 것을 확인할 수 있었고, 특히 2:7:1 내지 4:5:1의 비율로 혼합하여 처리한 실험군은 레티놀보다 높은 MMPs 저해능을 나타내어 나타내었다.
MMPs are degrading factors that inhibit collagen synthesis. Inhibition of MMPs activity will soon reduce collagen degradation, delaying the maintenance of skin elasticity and wrinkling. fig. 2, ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 In the case of each treatment alone, the effect of MMPs was observed to be about 26%, while the effect was increased to about 36% or more when mixed in a specific ratio. Especially, 2: 7: 1 to 4: 5: 1 showed higher inhibition of MMPs than retinol.

[Fig. 2] MMPs의 활성 저해능 [Fig. 2] Activity inhibition of MMPs

Figure 112011062619561-pat00005

Figure 112011062619561-pat00005

[실험예 3] 콜라겐 합성량 측정 [Experimental Example 3] Measurement of collagen synthesis amount

진세노사이드 Rg3, Rg6, Rg2와 진세노사이드 Rg3/Rg6/Rg2 혼합물은 적당한 농도로 PBS 완충용액에 녹인 후 실험에 사용하였고 대조군은 기본배지만을 첨가, 양성대조군으로는 레티놀 사용하였다. 실험예 1에서 기술한 조건에서 배양된 CCD986sk 세포주의 배지를 혈청이 첨가되지 않은 DMEM(Dulveccos Modified Eagles Media) 배지로 교체한 다음 추출물을 일정 농도가 되도록 CCD986sk 세포배양 플레이트에 첨가하고 24시간, 48시간 동안 배양하였다. 주어진 시간동안 배양한 후 각각의 세포배양액을 채취하고 콜라겐 단백질 측정 키트 (Takara Shuzo Co., Ltd, 일본국)를 사용하여 채취한 배양액에 존재하는 프로콜라겐 타입 I C-펩타이드의 양을 측정함으로서 콜라겐 생성 증가효과를 조사하였다. 이를 위해 1차 콜라겐 항체를 96-웰 마이크로 플레이트에 도포시킨 후 각각의 채취된 CCD986sk 세포배양액을 넣고 37℃에서 3시간 동안 반응시키고, 세포배양액을 제거한 후 PBS 완충용액을 사용하여 3회 세척하였다. 각 웰에 발색시약을 첨가한 후 상온에서 15분간 반응시킨 후 1N 황산용액을 가해 반응을 중지시키고, ELISA reader를 이용하여 450nm 에서 흡광 값을 측정하였다. 표준용액으로부터 얻어진 표준곡선에 상기의 방법으로 얻어진 흡광 값을 대입하여 각 시료가 첨가된 CCD986sk 세포배양액에서의 콜라겐 생성량을 산출하였다. 콜라겐 생성 합성율은 아래의 계산식으로부터 얻어졌다.
The mixture of ginsenosides Rg 3 , Rg 6 , Rg 2 and ginsenoside Rg 3 / Rg 6 / Rg 2 was dissolved in PBS buffer at a proper concentration and used in the experiment. The control group was supplemented with the basic medium, and the positive control group was retinol Respectively. The culture medium of CCD986sk cell line cultured under the conditions described in Experimental Example 1 was replaced with DMEM (Dulveccos Modified Eagles Media) supplemented with no serum. Then, the extract was added to CCD986sk cell culture plate to a constant concentration and cultured for 24 hours, 48 hours Lt; / RTI > After culturing for a given period of time, each cell culture solution was collected and the amount of procollagen type I C-peptide present in the culture solution collected using a collagen protein measurement kit (Takara Shuzo Co., Ltd., Japan) Production increase effect was investigated. To this end, the primary collagen antibody was coated on a 96-well microplate, and each collected CCD986sk cell culture was added and reacted at 37 ° C for 3 hours. After removing the cell culture medium, the cells were washed three times with PBS buffer solution. The reaction was stopped by addition of 1 N sulfuric acid solution, and the absorbance at 450 nm was measured using an ELISA reader. The absorbance value obtained by the above method was substituted into the standard curve obtained from the standard solution, and the amount of collagen production in the CCD986sk cell culture fluid to which each sample was added was calculated. Collagen production synthesis rate was obtained from the following equation.

콜라겐 생성 합성율 (%)=[(Ax100)/B]-100Collagen production synthesis rate (%) = [(Ax100) / B] -100

(A:시료를 첨가한 배양액의 콜라겐 생성량, B:시료가 첨가되지 않은 배양액의 콜라겐 생성량)
(A: collagen production amount of the culture solution to which the sample is added, and B: collagen production amount of the culture solution to which no sample is added)

피부를 구성하는 주성분인 Collagen은 피부, 골, 인대, 연골 및 치아 등에 높은 농도로 존재하고 있으며, 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포 접착의 지탱, 세포분할과 분화의 유도 등 다양한 기능을 한다. 또한 연령 및 자외선 조사에 의한 광노화에 의해 감소하며, 이는 피부의 주름 형성과 밀접한 연관이 있다. 그러므로 collagen 합성을 촉진하는 소재의 발견은 화장품 원료로서 이용이 매우 크다. Collagen, which is the main constituent of the skin, is present at high concentrations in skin, bone, ligament, cartilage and tooth, and it has mechanical strength of skin, resistance of connective tissue and binding force of tissue, support of cell adhesion, induction of cell division and differentiation And so on. It is also reduced by aging and photoaging by ultraviolet irradiation, which is closely related to the wrinkling of the skin. Therefore, the discovery of a material that promotes collagen synthesis is very useful as a raw material for cosmetics.

fig. 3과 같이 진세노사이드 Rg6를 단독으로 처리 시 약 37%의 콜라겐 합성 촉진 효과를 보였으나 진세노사이드 Rg6를 50%(w/w) 이하 처리하면 그 효과가 서서히 감소하는 것을 확인하였다. 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 혼합처리하면 2:7:1 내지 4:5:1의 조성비일 때 최대 약 70% 내외로 양성대조군인 레티놀에 비해 콜라겐 합성 효과가 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 따라서 콜라겐 합성 촉진 효과에 있어 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 2:7:1 내지 4:5:1의 비율로 혼합하여 처리 시 효과 대비 최적의 효율을 나타낸 것으로 볼 수 있다.
fig. 3, the effect of ginsenoside Rg 6 alone was promoted by about 37%, whereas the effect of ginsenoside Rg 6 was decreased by 50% (w / w) or less. The mixed treatment of ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 resulted in a maximum of about 70% at a composition ratio of 2: 7: 1 to 4: 5: 1, compared to the positive control retinol It was confirmed that the effect was increased. Therefore, in the effect of promoting collagen synthesis, mixing of ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6, and ginsenoside Rg 2 at a ratio of 2: 7: 1 to 4: 5: 1, .

[Fig. 3] 콜라겐 합성량 측정 결과 [Fig. 3] Results of measurement of collagen synthesis amount

Figure 112011062619561-pat00006

Figure 112011062619561-pat00006

[실험예 4] 엘라스타아제 활성 저해능 [Experimental Example 4] Elastase activity inhibition

준비된 진세노사이드 Rg3, Rg6, Rg2와 진세노사이드 Rg3/Rg6/Rg2 혼합물에 의한 엘라스타아제 활성 저해 효과를 porcine pancreas elastase (돼지췌장 엘라스타아제, Sigma Co., Ltd 미국)와 기질인 N-succinyl-(L-Ala)3-ρ-nitroanilide (Sigma Co., Ltd 미국)를 사용한 효소반응에 의해 조사하였다. 적당량 농도로 준비된 진세노사이드 Rg3, Rg6, Rg2 및 진세노사이드 Rg3/Rg6/Rg2 혼합물 용액을 0.5 ml 씩 시험관에 넣고 100mM Tris-HCl 완충용액 (pH 8.0)에 녹인 porcine pancreas elastase (1U/ml) 용액 0.5 ml을 가한 후 DMSO에 녹여 준비된 3.2μM N-succinyl-(L-Ala)3-ρ-nitroanilide를 0.1 ml 씩 첨가하여 잘 섞은 후 실온에서 20분간 반응시켰다. 엘라스티아제 활성은 기질로부터 생성되는 ρ-nitroanilide의 생성량을 분광광도계를 이용하여 410nm에서 측정함으로서 조사하였다.
The prepared ginsenosides Rg 3 , Rg 6 , Rg 2 and ginsenoside Rg 3 / Rg 6 / Rg 2 The inhibitory effect of the mixture on the elastase activity was examined using porcine pancreas elastase (Sigma Co., Ltd., USA) and N-succinyl- (L-Ala) 3-p-nitroanilide USA). ≪ / RTI > Rinsing ginsenosides Rg 3 , Rg 6 , Rg 2 And ginsenoside Rg 3/6 Rg / Rg 2 0.5 ml of the mixture solution was added to the test tube and 0.5 ml of porcine pancreas elastase (1 U / ml) solution dissolved in 100 mM Tris-HCl buffer solution (pH 8.0) was added thereto and dissolved in DMSO to prepare 3.2 μM N-succinyl- 3-p-nitroanilide (0.1 ml) was added thereto, followed by reaction at room temperature for 20 minutes. Elastase activity was determined by measuring the amount of ρ-nitroanilide produced from the substrate using a spectrophotometer at 410 nm.

엘라스타아제 저해율 (%)=(1-B/A)x100Elastase inhibition rate (%) = (1-B / A) x 100

(A: 대조군의 흡광도, B: 상기 시험 물질 처리 세포군의 흡광도)
(A: absorbance of the control group, B: absorbance of the test substance-treated cell group)

피부의 진피조직 내 콜라겐과 엘라스틴이 그물망 구조를 형성하며 피부의 탄력성을 유지시켜 준다. 하지만 나이, 자외선과 같은 내외적 스트레스로 인하여 탄력성 및 윤택성이 감소하고 과다 발현된 elastase에 의해 엘라스틴의 그물망 구조가 깨지게 되면 피부가 처지고 주름이 생기므로 피부 노화가 발생하게 된다. Collagen and elastin in the dermal tissue of the skin form a network structure and maintain the elasticity of the skin. However, due to the internal and external stresses such as age and ultraviolet rays, the elasticity and the elasticity decrease, and when the elastin network structure is broken by the overexpressed elastase, the skin becomes wrinkled and wrinkles occur.

fig. 4에 나타난 바와 같이 진세노사이드 Rg6를 단독으로 처리 시 약 51%의 비교적 높은 elastase 저해 효과를 보였다. 또한 진세노사이드 Rg3/Rg6/Rg2를 혼합처리하면 2:7:1 내지 4:5:1의 조성비에서 약 82% 내외로 그 효과가 매우 증가하는 것을 확인할 수 있다. 하지만 5:4:1의 조성비 이상, 즉 진세노사이드 Rg6를 약 50%(w/w) 이하 처리하면 그 효과가 서서히 감소하는 것을 볼 수 있다.fig. As shown in Fig. 4, treatment with ginsenoside Rg 6 alone showed a relatively high elastase inhibitory effect of about 51%. Also, when the ginsenosides Rg 3 / Rg 6 / Rg 2 were mixed, it was confirmed that the effect was greatly increased to about 82% at a composition ratio of 2: 7: 1 to 4: 5: 1. However, 5: 4: If the composition ratio of more than 1, that ginsenoside Rg 6 to about 50% (w / w) following process can be seen that the effect is gradually decreased.

주름 생성과 관련된 elastase 저해 활성을 측정한 결과 진세노사이드 Rg3, Rg6 및 Rg2를 단독 처리했을 시에 비교하여 Rg3, Rg6 및 Rg2의 혼합물을 처리함으로써 elastase 저해 활성이 증가하였고, 특히 2:7:1 내지 4:5:1의 비율로 혼합하여 처리 시 가장 효과적인 elastase 저해 활성을 나타낸다고 볼 수 있다.
As a result of measuring the elastase inhibitory activity associated with wrinkle formation , the elastase inhibitory activity was increased by treating a mixture of Rg 3, Rg 6 and Rg 2 when the ginsenosides Rg 3, Rg 6 and Rg 2 were treated alone, Especially in the ratio of 2: 7: 1 to 4: 5: 1, exhibiting the most effective elastase inhibitory activity.

Figure 112011062619561-pat00007
Figure 112011062619561-pat00007

[Fig. 4] 본 발명에 따른 Rg3/Rg6/Rg2 혼합물의 엘라스타아제 활성 저해능 비교 결과
[Fig. 4] Comparison of inhibitory activity of elastase activity of Rg 3 / Rg 6 / Rg 2 mixture according to the present invention

[제조예 1 및 2] 유연화장수(skin) [Preparation Examples 1 and 2] Softening time (skin)

본 발명의 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 함유한 유연화장수(skin)를 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
The softening skin containing the ginsenosides Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 of the present invention was prepared in a conventional manner at the following proportions:

[Fig. 5] 유연화장수의 성분비(단위:중량%) [Fig. 5] Ingredient ratio of softened longevity (unit:% by weight)

Figure 112011062619561-pat00008

Figure 112011062619561-pat00008

[제조예 3 및 4] 영양화장수(lotion) [Production Examples 3 and 4] Nutritional lotion (lotion)

본 발명의 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 함유한 영양화장수(lotion)를 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
Nutritional lotions containing the ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 of the present invention were prepared in a conventional manner at the following proportions.

[Fig. 6] 영양화장수의 성분비(단위:중량%) [Fig. 6] Composition ratio of nutrition lotion (unit:% by weight)

Figure 112011062619561-pat00009

Figure 112011062619561-pat00009

[제조예 5 및 6] 영양크림 [Production Examples 5 and 6] Nourishing cream

본 발명의 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 함유한 영양크림을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
Nutrition creams containing the ginsenosides Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 of the present invention were prepared in a conventional manner at the following proportions:

[Fig. 7] 영양크림의 성분비(단위:중량%) [Fig. 7] Composition ratio of nutritional cream (Unit:% by weight)

Figure 112011062619561-pat00010

Figure 112011062619561-pat00010

[제조예 7 및 8] [Production Examples 7 and 8]

본 발명의 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 함유한 팩을 아래의 성분비로 통상적인 방법으로 제조하였다.
A pack containing the ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 of the present invention was prepared in a conventional manner at the following proportions.

[Fig. 8] 팩의 성분비(단위:중량%) [Fig. 8] Component ratio of pack (unit:% by weight)

Figure 112011062619561-pat00011

Figure 112011062619561-pat00011

[실험예 5] 제형의 안정성 시험 [Experimental Example 5] Stability test of formulation

본 발명의 화장료 조성물의 제형 안정성 시험을 위해 상기 제조예 1~8에서 제형한 화장료 조성물을 불투명 초자 용기에 담아 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 12주 동안 보관하고, 또한 불투명 초자 용기에 담아 4℃로 일정하게 유지하고 완전히 차광된 냉장고 내에서 12주 동안 보관한 후 변색 정도를 측정하였다. 제품의 변색 정도는 다음 6등급으로 분류하여 평가하였다.
For the formulation stability test of the cosmetic composition of the present invention, the cosmetic composition prepared in Preparation Examples 1 to 8 was placed in an opaque glazed container and kept in a constant temperature bath maintained at 45 캜 for 12 weeks. ≪ / RTI > and stored for 12 weeks in a fully shaded refrigerator and the degree of discoloration was measured. The degree of discoloration of the product was classified into the following six grades and evaluated.

0 : 변화 없음, 1: 극히 조금 분리(변색), 2: 조금 분리(변색), 0: No change, 1: Very little separation (discoloration), 2: Little separation (discoloration)

3: 조금 심하게 분리(변색), 4: 심하게 분리(변색), 5: 극히 심하게 분리(변색)
3: Severely separated (discolored), 4: Severely separated (discolored), 5: Severely separated (discolored)

[Fig. 9] 각 제형의 변색 정도 [Fig. 9] Degree of discoloration of each formulation

Figure 112011062619561-pat00012

Figure 112011062619561-pat00012

제조예의 화장료 조성물은 변색 및 분리현상이 일어나지 않아 본 발명에 의한 진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2를 함유하는 화장제의 인체 피부에 대한 적용량인 0.0001% 내지 12.0%의 범위에서 제형의 안정성에는 이상이 없음을 알 수 있다.
The cosmetic composition of the present invention does not cause discoloration and separation phenomenon, and the amount of the cosmetic preparation containing the ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 according to the present invention is 0.0001% to 12.0% Lt; RTI ID = 0.0 > of < / RTI > the stability of the formulation.

[실험예 6] 피부 안정성 시험 [Experimental Example 6] Skin stability test

본 발명의 조성물에 대한 피부 안전성을 실험하기 위하여 상기 제조예 1~8에서 제형한 화장료 조성물을 대상으로 아래와 같은 안전성 시험을 수행하였다.
In order to test skin safety of the compositions of the present invention, the following safety tests were conducted on the cosmetic compositions formulated in Preparation Examples 1 to 8.

1) 피부 일차 자극성 시험1) Primary skin irritation test

등 쪽 피부의 털을 제거한 수컷 백색종 토끼의 피부에 상기 화장료 제조물을 1일 1회, 주 5회, 두께 2㎎/㎠ 이상이 되도록 도포했다. 도포는 2주간 수행하였으며, 털의 제거는 매주 최종 도포일에 수행하였다. 판정은 적용 후 24, 48, 72 시간에 일차 자극성 평정법으로 홍반 및 부종을 지표로 하여 수행하였다. The cosmetic preparation was applied to the skin of male white rabbits with hair on the dorsal skin removed once a day, five times a week to a thickness of 2 mg / cm 2 or more. The application was carried out for 2 weeks, and hair removal was carried out every week at the final application day. The test was performed at 24, 48, and 72 hours after application with the primary irritation test using erythema and edema as an index.

시험 결과, 모든 실험 군에서 홍반 및 부종이 나타나지 않아 음성으로 판정되었다.
As a result of the test, it was judged to be negative because no erythema and edema were observed in all experimental groups.

2) 피부 누적 자극성 시험2) Skin Cumulative Irritation Test

등 쪽 피부의 털을 제거한 수컷 백색종 토끼의 피부에 상기 화장료 제조물을 1일 1회, 주 5회, 두께 2㎎/㎠ 이상이 되도록 도포했다. 도포는 2주간 수행하였으며, 털의 제거는 매주 최종 도포일에 수행하였다. 판정은, 각 도포일 및 최종 도포일의 다음날에 일차 자극성 평정법으로 홍반 및 부종을 지표로 해서 수행하였다. The cosmetic preparation was applied to the skin of male white rabbits with hair on the dorsal skin removed once a day, five times a week to a thickness of 2 mg / cm 2 or more. The application was carried out for 2 weeks, and hair removal was carried out every week at the final application day. The determination was carried out using the erythema and edema as the indicators by the primary irritation method on the day of each application and the day after the last application.

시험 결과, 모든 시험 군에서 제조물의 반복 도포에 의한 피부 자극성 반응은 관찰되지 않아 음성으로 판정되었다.
As a result of the test, skin irritation caused by repeated application of the preparation was not observed in all the test groups and it was judged as negative.

이상, 위에서 살펴본 결과로부터 본 발명에 따라 진세노사이드 Rg3, Rg6 및 Rg2를 배합할 경우 피부 탄력 및 주름 개선에서 우수한 효과를 거둘 수 있으며, 특히 이들의 배합비를 2:7:1 내지 4:5:1의 비율(Rg3 20~40중량%, Rg6 50~70중량%, Rg2 10중량%)로 할 때 더 우수한 효능을 가진다는 점을 확인할 수 있다.From the above results, it can be seen that when the ginsenosides Rg 3 , Rg 6 and Rg 2 are blended according to the present invention, the skin elasticity and wrinkle can be improved, : 5: 1 ratio (Rg 3 20-40 wt%, Rg 6 50 to 70% by weight, and Rg 2 10% by weight).

Claims (5)

삭제delete 진세노사이드 Rg3 20~40중량%, Rg6 50~70중량% 및 Rg2 10중량%을 주성분으로 하는 피부 주름 개선제.A skin wrinkle improving agent comprising 20 to 40% by weight of ginsenoside Rg 3 , 50 to 70% by weight of Rg 6 , and 10% by weight of Rg 2 as main components. 제2항의 피부 주름 개선제를 함유하는 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선 화장제.A skin wrinkle-improving cosmetic preparation containing the skin wrinkle-improving agent according to claim 2. 제3항에 있어서,
피부 주름 개선 화장제는 유연화장수, 영양화장수, 마사지크림 또는 팩의 제형 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선 화장제.
The method of claim 3,
Wherein the skin wrinkle improving agent is any one of a softening agent, a nutritional lotion, a massage cream or a pack.
제3항에 있어서,
진세노사이드 Rg3, 진세노사이드 Rg6 및 진세노사이드 Rg2가 전체 화장료 중에 고형분으로서 0.0001 내지 20.0중량% 함유됨을 특징으로 하는 피부 주름 개선 화장제.
The method of claim 3,
Wherein ginsenoside Rg 3 , ginsenoside Rg 6 and ginsenoside Rg 2 are contained in the total cosmetics in a solid content of 0.0001 to 20.0% by weight.
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