KR101135052B1 - A bioreactor easy to sterilize and liquid cultivation methods using the same - Google Patents
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Abstract
본 발명은 멸균이 간편한 생물배양기(Bioreactor) 및 이를 이용한 액상배양방법에 관한 것으로, 배양액을 살균하기 위해 생물배양기를 가압증기멸균기에 넣어 효과적으로 멸균할 수 있고, 살균 후에는 액상배양이 용이하며, 배양 후 식균 공정에서 액체 배양물을 오염없이 균질하고 일정하게 전달하는 것이 용이한 장점을 가지고 있다. 또한, 본 발명에 따른 생물배양기 및 이를 이용한 액상배양방법은 가열살균 공정에서 탱크본체 내부의 고온의 공기 및/또는 수증기가 공기필터를 경유하여 외부로 배출되도록 함으로써 공기필터를 살균할 수 있고, 냉각공정에서 배기관을 통하여 외부공기가 유입되는 것을 방지하여 배양액의 오염을 방지할 수 있으며, 가열살균공정과 냉각공정에서 탱크본체 내부의 배양액이 송기관으로 역류하는 것을 방지하여 공기필터가 오염되는 것을 방지할 수 있기 때문에 배양액이 채워진 상태에서 확실하게 가열살균이 이루어질 수 있고, 탱크본체가 별도의 가열수단을 구비하지 않고 가압증기멸균기(Autoclave)의 내부에서 가열살균이 이루어지기 때문에 장치의 구성이 단순하고 제조비용이 작게 소요되어 버섯종균 배양 등 발효 생산비용을 크게 낮출 수 있다는 특징을 가진다. The present invention relates to a bioreactor (stereo) easy to sterilize and a liquid culture method using the same, which can be sterilized effectively by putting the biocultivator in a autoclave to sterilize the culture medium, and after sterilization, can be easily cultured and cultured. It is easy to homogeneously and consistently deliver the liquid culture without contamination in the post-pasteurization process. In addition, the biological incubator and the liquid culture method using the same according to the present invention can sterilize the air filter by heating the hot air and / or water vapor in the tank body to the outside via the air filter in the heat sterilization process, and cooling Prevents contamination of culture liquid by preventing external air from flowing through the exhaust pipe in the process, and prevents contamination of the air filter by preventing the culture medium inside the tank body from flowing back to the feed pipe during the heat sterilization process and the cooling process. Since it is possible to reliably heat sterilization while the culture medium is filled, since the tank body does not have a separate heating means and the heat sterilization is performed inside the autoclave, the configuration of the device is simple. The manufacturing cost is small, which can greatly lower the cost of fermentation such as mushroom spawn culture. It has a characteristic.
Description
본 발명은 멸균이 간편한 생물배양기 및 이를 이용한 액상배양방법에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 가압증기멸균기를 이용한 가열살균 공정에서 탱크본체 내부의 고온의 공기 및/또는 수증기가 공기필터를 경유하여 외부로 배출되도록 함으로써 공기필터를 살균할 수 있고, 냉각공정에서 배기관을 통하여 외부공기가 유입되는 것을 방지하여 배양액이 오염되는 것을 방지할 수 있으며, 가열살균공정과 냉각공정에서 탱크본체 내부의 배양액이 송기관으로 역류하는 것을 방지하여 공기필터가 오염되는 것을 방지할 수 있기 때문에 배양액이 채워진 상태에서 가열살균이 이루어질 수 있고, 탱크본체가 별도의 가열수단을 구비하지 않고 가압증기멸균기(Autoclave)의 내부에서 가열살균이 이루어지기 때문에 장치의 구성이 단순하고 제조비용이 작게 소요되어 버섯종균배양 등 발효 생산비용을 크게 낮출 수 있는, 멸균이 간편한 생물배양기 및 이를 이용한 배양방법에 관한 것이다.The present invention relates to a biological incubator easy to sterilize and a liquid culture method using the same, and more particularly, in the heat sterilization process using a pressurized steam sterilizer, hot air and / or water vapor inside the tank body is transferred to the outside via an air filter. By discharging, the air filter can be sterilized, and external air can be prevented from entering through the exhaust pipe in the cooling process to prevent contamination of the culture solution. Since it is possible to prevent the air filter from being contaminated to prevent backflow, heat sterilization may be performed while the culture medium is filled, and the tank body may be heated in an autoclave without a separate heating means. Because of sterilization, the configuration of the device is simple and the manufacturing cost is small. John mushroom spawn is related to significantly lower the cost of production fermentation, sterile culture method using a simple biological incubator and cultured them with such.
일반적으로, 팽이버섯, 만가닥버섯, 능이버섯, 나도팽나무버섯, 새송이버섯 등과 같은 버섯의 인공 재배에서는 버섯자실체를 재배하기 위하여 버섯균사체 종균이 사용된다. 종균은 식물의 씨앗과 같은 것으로서, 버섯의 2차 균계를 톱밥이나 목재칩을 기재로 한 고체배지 또는 대두박찌꺼기 등을 원료로 한 액체배지로 배양하여 취급을 손쉽게 한 것이다. 이러한 종균을 버섯자실체 재배용 배지에 접종하고 배양공정, 발생공정, 육성공정을 거친 후 버섯을 수확한다. In general, in the artificial cultivation of mushrooms, such as the enoki mushroom, mandala mushroom, mt. Mushrooms, mushrooms, mushrooms, etc. mushroom mycelium spawn is used to cultivate the mushroom fruit body. The spawn is the same as the seed of a plant, and is easily handled by cultivating the mushroom's secondary fungus into a liquid medium based on sawdust or wood chips, or a solid medium based on soybean meal. These spawns are inoculated in the medium for cultivating the mushroom fruit body, and the mushrooms are harvested after the cultivation process, the development process, and the growth process.
상기 종균을 제조하기 위해서는 고체배양과 액체배양의 두 방법이 있는데, 지금까지 고체배양법이 일반적으로 사용되어 왔다. To prepare the seed, there are two methods, a solid culture and a liquid culture. Until now, a solid culture method has been generally used.
그러나, 고체배양법은 다수 개의 배양병을 사용하기 때문에 공간을 많이 차지할 뿐만 아니라 배양시 오염 가능성이 높으며, 실제로 종균을 액체배양기에 접종하여 확인해 보지 않고서는 종균의 오염 여부를 신속히 확인할 수 없다는 문제점이 있다. 또한, 고체배양은 버섯자실체 재배를 위해 접종 작업 시 일정량을 투여하기가 어려울 뿐만 아니라 투여 환경을 통제하기가 어려워 오염가능성이 매우 높다. 종균이 오염된 경우에는 자실체 재배시 그 만큼 손실이 발생하게 된다. However, the solid culture method does not only take up a lot of space because of the use of a plurality of culture bottles, and there is a high possibility of contamination during cultivation. . In addition, the solid culture is not only difficult to administer a certain amount during the inoculation work for mushroom fruit cultivation but also difficult to control the dosing environment is very high contamination. If the spawn is contaminated, the loss of fruiting will occur.
한편, 액체배양은 보존 균주로부터 액체종균을 제조하고 상기 액체종균을 전배양 및 본배양시켜서 액체종균을 대량으로 생산한다. 상기 본배양은 소정의 용기 내에서 이루어진다. On the other hand, the liquid culture is produced in large quantities by producing a liquid seed from the preservation strain and pre-culture and the main culture of the liquid seed. The main culture is carried out in a predetermined container.
상기 용기는, 도 1에 나타난 바와 같이, 용기본체(11)와, 용기본체(11)에 공기를 공급하는 송기관(12)과, 용기본체(11) 내부의 공기 및/또는 수증기를 외부로 배출하는 배기관(13) 및, 송기관(12)에 설치된 필터(14)를 구비한다. 용기본체(11)는 대략 1 내지 50리터 정도의 내부용량을 가진다. 필터(14)는 송기관(12)을 통해서 용기본체(11)에 공급되는 공기를 정화한다. As shown in FIG. 1, the container includes a container
용기(10)는 내부에 수용된 배양액을 살균하기 위해서 가열살균된다. 용기본체(11)의 내부용량이 50리터 미만인 경우에는 상기 가열살균 공정이 통상적으로 100 내지 200리터 정도 크기의 소형 가압증기멸균기 (autoclave)(미도시) 내에서 이루어지는데, 용기(10)를 이러한 소형 가압증기멸균기 내에서 121도, 1.5기압에서 20분 내지 30분간 둠으로써 이루어진다. 상기 소형 가압증기멸균기의 내부에서 용기(10)가 가열되면 용기본체(11) 내부는 수증기로 인해서 고온 고압 상태가 되고, 용기본체(11) 내부의 공기 및/또는 수증기는 배기관(13)을 통해서 외부로 배출된다. 이 때, 배양액이 송기관(12)을 통해서 외부로 배출(역류)되면 필터(14)가 오염되기 때문에 이를 방지하기 위해서 클램프(15) 등을 이용하여 송기관(12)을 밀폐시킨다. 이와 같이 송기관(12)이 밀폐되면 배양액이 송기관(12)으로 역류하는 것을 방지할 수는 있지만 수증기가 송기관(12)을 통과하지 못하기 때문에 필터(14)가 살균되지 못한다는 문제점이 있다. The vessel 10 is heat sterilized to sterilize the culture solution contained therein. When the internal volume of the
필터(14)를 살균하기 위해서 배양액이 수용되지 않은 상태에서 가열살균을 한 후, 배양액을 수용한 상태에서 가열살균을 하는 방법이 있지만, 이 방법은 두 번의 가열살균을 해야 하기 때문에 불편하다.In order to sterilize the filter 14, there is a method of heat sterilization after the culture medium is not accommodated and then heat sterilization while the culture medium is accommodated. However, this method is inconvenient because two heat sterilizations are required.
한편, 이와 같은 가열살균공정에서 배기관(13)이 개방되어 있기 때문에 가열살균공정 이후에 용기(10)를 냉각하는 과정에서 배기관(13)을 통해서 외부의 공기가 용기본체(11)의 내부로 유입될 수 있다. 용기본체(11)의 내부로 외부공기가 유입되면 배양액이 오염되는 문제점이 발생된다. On the other hand, since the
또한, 상기 용기본체(11)의 내부용량이 대략 1 내지 50리터 정도이기 때문에 많은 양의 액체종균을 배양하기 위해서는 많은 개수의 용기(10)가 필요하다는 문제점도 있다. 상기 문제점을 해결하기 위해서 용기(10)를 크게 제작하는 경우에는 용기(10)가 100 내지 200리터 크기의 일반 소형 가압증기멸균기에 수납되지 못하기 때문에 별도의 가열수단이 용기(10)에 부착 구비되어야 하고, 이 경우에는 용기(10)의 제조비용이 크게 증가한다는 문제점이 생긴다. 많은 양의 액체종균을 가열살균 하기 위해서는 가압증기멸균기의 크기를 크게 하고 용기를 크게 제작하면 되겠으나, 큰 용기를 이러한 방식으로 완벽하게 멸균되게 하면서 저렴하게 제작하기 위해서는 특별한 장치가 필요하다.In addition, since the internal capacity of the
본 발명은 가압증기멸균기를 이용한 가열살균 공정에서 탱크본체 내부의 고온의 공기 및/또는 수증기가 공기필터를 경유하여 외부로 배출되도록 함으로써 공기필터를 살균할 수 있되, 한 번의 가열살균으로 배양액 및 공기필터를 모두 살균할 수 있는, 멸균이 간편한 생물배양기 및 이를 이용한 액상배양방법을 제공하는데 그 목적이 있다. The present invention can sterilize the air filter by allowing the hot air and / or steam in the tank body to be discharged to the outside through the air filter in the heat sterilization process using a pressure steam sterilizer, the culture solution and air in one heat sterilization It is an object of the present invention to provide a bio-cultivator and a liquid culture method using the same, which can sterilize all filters.
본 발명의 또 다른 목적은 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정 후의 냉각공정에서 배기관을 통하여 외부공기가 유입되는 것을 방지할 수 있는, 생물배양기 및 이를 이용한 액상배양방법을 제공하는데 있다. Still another object of the present invention is to provide a biological incubator and a liquid culture method using the same, which can prevent external air from flowing through an exhaust pipe in a cooling process after a heat sterilization process using a pressurized steam sterilizer.
본 발명의 또 다른 목적은 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정과 가열살균공정 후의 냉각공정에서 탱크본체 내부의 배양액이 송기관으로 역류하는 것을 방지함으로써 공기필터가 오염되는 것을 방지할 수 있는, 생물배양기 및 이를 이용한 액상배양방법을 제공하는데 있다. Another object of the present invention is to prevent the contamination of the air filter by preventing the culture medium inside the tank body to flow back to the feed pipe in the heat sterilization process using a pressurized steam sterilizer and the cooling process after the heat sterilization process, bio-incubator And to provide a liquid culture method using the same.
본 발명의 또 다른 목적은 탱크본체가 자체에 장착된 별도의 가열수단을 구비하지 않고 가압증기멸균기 내에 넣어져서 가열살균이 이루어지기 때문에 장치의 구성이 단순하고 제조비용이 작게 소요되며 종균의 생산비용을 낮출 수 있는, 멸균이 간편한 생물배양기 및 이를 이용한 액상배양방법을 제공하는데 있다. Still another object of the present invention is that the tank body is not provided with a separate heating means mounted on its own, but is put into a pressure steam sterilizer to be heat sterilized, so that the configuration of the device is simple and the manufacturing cost is small, and the production cost of the seed is To lower the, to provide a simple sterilized bioculture and liquid culture method using the same.
상기 문제점들을 해결하기 위해서 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 생물배양기는, 탱크본체; 탱크본체의 내부에 외부 공기를 공급하는 송기관; 탱크본체 내부에 유입된 공기를 배기구를 통해서 외부로 배출하기 위한 배기관; 및 우회관용 밸브를 이용하여 송기관과 배기관을 선택적으로 연통시키는 우회관;을 구비한다. 탱크본체에 수용된 배양액을 가압증기멸균기를 이용하여 가열살균하기 위한 공정에서는 탱크본체 내부의 공기 또는 수증기가 탱크본체부터 우회관까지의 배기관 부분과, 우회관 및, 송기관을 통하여 외부로 배출된다. In order to solve the above problems, a biological incubator according to a preferred embodiment of the present invention, the tank body; An air supply pipe for supplying external air to the inside of the tank body; An exhaust pipe for discharging air introduced into the tank body to the outside through an exhaust port; And a bypass pipe for selectively communicating with the exhaust pipe and the exhaust pipe by using the valve for the bypass pipe. In the process for heat sterilization of the culture solution contained in the tank body using a pressure steam sterilizer, air or steam inside the tank body is discharged to the outside through the exhaust pipe part from the tank body to the bypass pipe, the bypass pipe, and the exhaust pipe.
바람직하게, 송기관은 공기 공급원과 연결되고, 송기관에는 우회관과 연결된 부분과 상기 공기 공급원 사이에 공기 공급원으로부터 공급된 공기를 정화하기 위하여 고압증기 멸균이 가능한 공기필터가 설치된다.Preferably, the air supply pipe is connected to an air source, and the air supply pipe is provided with an air filter capable of autoclaving in order to purify the air supplied from the air source between the portion connected to the bypass pipe and the air supply.
상기 탱크본체의 내부 용량은 50리터 내지 1000리터인 것이 바람직하다. It is preferable that the internal capacity of the tank body is 50 liters to 1000 liters.
본 발명의 바람직한 실시예에 따른 생물배양기의 송기관은, 공기 공급원과 연결되고 공기필터가 설치된 상류측 송기관; 및 상류측 송기관의 끝단과 연통되어 공기필터를 경유한 공기를 탱크본체의 내부에 공급하는 하류측 송기관;을 포함한다. 또한, 배기관은 탱크본체의 내부와 연통되는 상류측 배기관; 및 상류측 배기관의 끝단과 연통되어 탱크본체 내부의 공기 또는 수증기를 외부로 배출하는 하류측 배기관;을 포함한다. 아울러, 우회관은 상류측 송기관의 끝단과 상류측 배기관의 끝단을 서로 연통시키도록 설치된다. 이 때, 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정에서 탱크본체 내부의 가열된 공기 또는 수증기는 상류측 배기관과, 우회관과, 상류측 송기관을 순차적으로 경유하여 외부로 배출되고, 상기 가열살균공정에서 하류측 배기관은 밀폐된다.According to a preferred embodiment of the present invention, an inlet pipe of a biological incubator includes an upstream side air pipe connected to an air source and provided with an air filter; And a downstream air supply pipe communicating with an end of the upstream air supply pipe for supplying air through the air filter to the inside of the tank body. In addition, the exhaust pipe is an upstream exhaust pipe communicating with the inside of the tank body; And a downstream exhaust pipe communicating with an end of the upstream exhaust pipe for discharging air or steam inside the tank body to the outside. In addition, the bypass pipe is provided to communicate the end of the upstream side exhaust pipe and the end of the upstream side exhaust pipe. At this time, in the heat sterilization process using a pressurized steam sterilizer, heated air or steam inside the tank body is discharged to the outside via the upstream exhaust pipe, the bypass pipe, and the upstream air supply pipe in sequence, and in the heat sterilization process, The downstream exhaust pipe is closed.
여기에서, 하류측 송기관에는 탱크본체 내부에 수용된 배양액이 상류측 송기관 쪽으로 이동하는 것을 방지하는 역류방지밸브가 설치된다. Here, the downstream side supply pipe is provided with a non-return valve for preventing the culture solution contained in the tank body from moving toward the upstream side air pipe.
또한, 상기 가열살균공정 이후에 탱크본체를 냉각하는 동안에 배기관이 밀폐되어 공기필터를 경유한 공기만이 탱크본체로 공급되는 것이 바람직하다. In addition, it is preferable that the exhaust pipe is closed while the tank body is cooled after the heat sterilization process so that only air passing through the air filter is supplied to the tank body.
아울러, 탱크본체의 내부 압력을 측정하기 위해서 배기관 또는 탱크본체에 압력계가 설치되고, 상기 압력계는 배기관 또는 탱크본체에 착탈 가능하게 설치될 수 있다. 그러나, 압력계가 고온, 고압의 환경하에 견딜 수 있는 것이라면, 굳이 착탈식으로 설치할 필요는 없으며, 이 경우 가열살균 공정에서 배기구로부터의 공기유입을 막기 위한 밸브를 하나만 설치하여도 된다.In addition, a pressure gauge is installed on the exhaust pipe or the tank body in order to measure the internal pressure of the tank body, the pressure gauge may be detachably installed on the exhaust pipe or the tank body. However, if the pressure gauge can withstand a high temperature and high pressure environment, it does not need to be detachably installed, and in this case, only one valve may be provided to prevent the inflow of air from the exhaust port in the heat sterilization process.
한편, 본 발명에 따른 생물배양기는 탱크본체의 내부에 수용된 배양액을 냉각시키기 위해서 탱크본체를 둘러싸도록 설치되고 그 내부에는 냉수가 수용된 냉각용 자켓을 포함할 수 있다. On the other hand, the biological incubator according to the present invention may be installed to surround the tank body in order to cool the culture solution contained in the tank body, the inside may include a cooling jacket containing the cold water.
상기 생물배양기는 탱크본체를 경사지게 할 수 있도록 지지유니트를 포함할 수 있는데, 상기 지지유니트는 하부프레임; 탱크본체가 내부에 수납될 수 있고, 하부프레임에 회동 가능하게 설치된 상부프레임; 및, 상부프레임을 경사지도록 회동시킬 수 있는 회동수단;을 구비한다. The biocultivator may include a support unit to incline the tank body, wherein the support unit includes a lower frame; An upper frame can be accommodated inside the tank body, rotatably installed on the lower frame; And rotating means capable of rotating the upper frame to be inclined.
바람직하게, 상기 탱크본체의 하부에는 배양 완료된 액체 종균을 외부로 배출하기 위한 배출수단이 구비된다. Preferably, the lower portion of the tank body is provided with a discharge means for discharging the complete liquid spawn to the outside.
더욱 바람직하게, 배출수단은 탱크본체의 하단과 연통된 배출관; 배출관에 설치되어 배출관을 통한 액체종균의 배출을 조절하는 배출용 밸브; 및 배출관의 끝단을 밀폐하여 배출관의 오염을 방지하는 캡부재;를 구비한다.More preferably, the discharge means is a discharge pipe in communication with the bottom of the tank body; A discharge valve installed in the discharge pipe to control discharge of the liquid spawn through the discharge pipe; And a cap member sealing the end of the discharge pipe to prevent contamination of the discharge pipe.
상기 하류측 송기관의 하부에는 다수의 공기배출공이 형성된다. 상기 공기배출공으로부터 배출된 공기는 탱크본체의 내부에서 배양액을 순환시킨다.A plurality of air discharge holes are formed in the lower portion of the downstream side exhaust pipe. The air discharged from the air discharge hole circulates the culture solution in the tank body.
상기 배양액 중의 고체성분이 탱크본체의 아랫면에 퇴적되는 것을 방지하기 위해서 상기 아랫면의 중앙부가 위로 돌출되어 돌출부를 형성한다.In order to prevent the solid component in the culture solution from being deposited on the lower surface of the tank body, the central portion of the lower surface protrudes upward to form a protrusion.
본 발명에 따른 생물배양기는 탱크본체 아랫면의 상기 돌출부와 공기배출공으로부터 배출된 공기에 의해서 배양액이 순환되어 별도의 교반장치를 필요로 하지 않지만, 탱크본체의 내부에 수용된 배양액을 더욱더 잘 교반하기 위한 교반유니트를 더 구비할 수 있다. 상기 교반유니트는 상기 배양액을 교반하는 교반날개; 및 교반용 모터의 회전력을 교반날개에 전달하는 교반축;을 구비하고, 교반축은 탱크본체의 외부에서 교반용 모터와 연결되기 때문에 교반용 모터는 교반축에 착탈가능할 수 있다.Bio-cultivator according to the present invention is a culture medium is circulated by the air discharged from the protruding portion and the air discharge hole of the lower surface of the tank body, but does not require a separate stirring device, but for agitating the culture medium contained in the tank body even better A stirring unit may be further provided. The stirring unit is a stirring blade for stirring the culture solution; And a stirring shaft for transmitting the rotational force of the stirring motor to the stirring blade, and since the stirring shaft is connected to the stirring motor from the outside of the tank body, the stirring motor may be detachable from the stirring shaft.
또한, 본 발명에 따른 생물배양기는 다수 개의 탱크본체를 가압증기멸균기 내부에 수납한 상태에서 탱크본체를 고온 고압 상태에서 가열살균할 수 있다. 따라서, 탱크본체는 별도의 가열수단을 구비할 필요가 없다.In addition, the biological incubator according to the present invention can heat sterilize the tank body at a high temperature and high pressure in a state in which a plurality of tank bodies are accommodated in the autoclave. Therefore, the tank body does not need to be provided with a separate heating means.
한편, 본 발명의 다른 일 측면인 액체종균의 배양방법은, 탱크본체의 내부에 수용된 배양액을 가압증기멸균기를 이용하여 가열살균하는 동안에 가열된 상기 내부의 공기 또는 수증기를 배기관의 입구와, 배기관의 소정 부분과 송기관의 소정 부분을 연결하는 우회관 및, 상기 송기관을 순차적으로 경유하도록 하여 외부로 배출한다. On the other hand, the liquid spawn culture method according to another aspect of the present invention, during the heat sterilization of the culture solution contained in the tank body using a pressurized steam sterilizer, the inlet of the exhaust pipe and the inside of the exhaust pipe and the exhaust pipe, The bypass pipe connects a predetermined portion with a predetermined portion of the air pipe, and is discharged to the outside by sequentially passing through the air pipe.
바람직하게, 상기 가열살균은 다수 개의 탱크본체가 수납될 수 있고 상기 배양액을 가열살균할 수 있는 가압증기멸균기 내부에서 이루어진다. Preferably, the heat sterilization is made in a pressurized steam sterilizer capable of accommodating a plurality of tank bodies and heat sterilizing the culture solution.
상기 가열살균공정 이후에 배양액을 냉각하는 과정에서 공기 공급원으로부터 공급되는 공기를 송기관의 상기 소정 부분보다 공기 공급원에 가까운 송기관의 상류측 송기관과, 우회관을 순차적으로 경유하도록 하여 탱크본체의 내부에 공급하고, 상기 상류측 송기관에 공기필터를 설치하여 탱크본체의 내부로 공급되는 공기를 정화시키는 것이 바람직하다. In the process of cooling the culture medium after the heat sterilization process, the air supplied from the air source is sequentially passed through the upstream side of the air line closer to the air source than the predetermined portion of the air line and the bypass pipe. It is preferable to supply the inside, and to install the air filter in the said upstream side exhaust pipe to purify the air supplied to the inside of the tank main body.
여기에서, 상기 가열살균하는 동안 또는 상기 가열살균 이후에 냉각하는 동안에 상기 배양액이 외부로 배출되지 않도록 송기관의 상기 소정 부분보다 탱크본체에 가까운 하류측 송기관에는 역류방지밸브가 설치된다. 상기 배양액이 역류하여 상류측 송기관으로 유입되면 공기필터가 오염되는 문제가 발생될 수 있다. Here, a non-return valve is installed in the downstream side air pipe closer to the tank body than the predetermined portion of the air pipe so that the culture solution is not discharged to the outside during the heat sterilization or during the cooling after the heat sterilization. When the culture fluid flows backward and flows into the upstream side pipe, the air filter may be contaminated.
바람직하게, 상기 가열살균 공정 이후에 배양액을 신속히 냉각하기 위해서 탱크본체를 둘러싸도록 냉각용 자켓을 설치할 수 있으며 냉각용 자켓에 냉수가 순환되도록 하여 배양액의 냉각을 진행할 수 있다.Preferably, in order to quickly cool the culture after the heat sterilization process, a cooling jacket may be installed to surround the tank body, and the cooling water may be circulated to allow the cooling medium to circulate.
본 발명에 따른 액상배양방법은 배양 완료된 액체종균을 탱크본체로부터 배출하는 방법을 포함하는데, 송기관으로부터 공기가 공급되게 하고 배기관의 밸브를 조절함으로써 탱크본체 내부의 압력을 높여 배양 완료된 액체종균이 균질하고 일정하게 배출되도록 할 수 있다. The liquid culture method according to the present invention includes a method for discharging the cultured liquid spawn from the tank body. The liquid spawn is homogenized by increasing the pressure inside the tank body by supplying air from the exhaust pipe and adjusting the valve of the exhaust pipe. Can be discharged regularly.
한편, 탱크본체의 내부용량은 50리터 내지 1000리터인 것이 바람직하다. On the other hand, the internal capacity of the tank body is preferably 50 liters to 1000 liters.
본 발명에 따른 멸균이 간편한 생물배양기 및 이를 이용한 액상배양방법은 다음과 같은 효과를 가진다. Easy sterilization incubator according to the present invention and a liquid culture method using the same has the following effects.
첫째, 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정에서 탱크본체 내부의 고온의 공기 및/또는 수증기가 공기필터를 경유하여 외부로 배출되도록 함으로써 공기필터를 살균할 수 있되, 한 번의 가열살균으로 배양액 및 필터를 모두 살균할 수 있다. First, in a heat sterilization process using a pressurized steam sterilizer, the air filter can be sterilized by allowing the hot air and / or water vapor to be discharged to the outside through the air filter. All can be sterilized.
둘째, 가열살균공정 후의 냉각공정에서 배기관을 통하여 외부공기가 유입되는 것을 방지할 수 있기 때문에 배양액의 오염을 방지할 수 있다. Second, in the cooling process after the heat sterilization process, it is possible to prevent the inflow of external air through the exhaust pipe to prevent contamination of the culture solution.
셋째, 가열살균공정과 냉각공정에서 탱크본체 내부의 배양액이 송기관으로 역류하는 것을 방지하여 공기필터가 오염되는 것을 방지할 수 있을 뿐만 아니라, 배양액이 외부로 상당량 배출되어 탱크본체 내부의 배양액이 현저히 감소되는 것을 막을 수 있다. Third, in the heat sterilization process and the cooling process, the culture medium inside the tank body can be prevented from flowing back to the feed pipe to prevent the air filter from being contaminated. Can be prevented from being reduced.
넷째, 탱크본체가 별도의 가열수단을 구비하지 않고 가열살균이 가압증기멸균기 내부에서 이루어지기 때문에 탱크본체의 구성이 단순하고 제작비용이 작게 소요되어 종균의 생산비용을 크게 낮출 수 있다. Fourth, since the tank body is not provided with a separate heating means and the heat sterilization is made in the autoclave, the structure of the tank body is simple and the manufacturing cost is small, so that the production cost of the seed can be greatly reduced.
다섯째, 생물배양기 구조가 단순함에도 불구하고 배양공정에서 액상배양이 균질하고 효과적으로 이루어질 뿐만 아니라, 액상종균 배양이 종료된 후 자실체 재배를 위해 배양물을 일정량으로 균질하게 오염없이 접종할 수 있다.Fifth, despite the simplicity of the incubator structure, not only the liquid culture is homogeneous and effective in the culture process, but also after the completion of the liquid seed spawn, the culture can be inoculated to a certain amount without contaminating the culture homogeneously without contamination.
도 1은 종래기술에 따른 액체종균 배양 공정을 보여주는 도면.
도 2는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 생물배양기를 보여주는 정면도.
도 3은 도 2의 생물배양기를 보여주는 평면도.
도 4(a)는 도 2의 생물배양기에 구비된 압력계를 보여주는 사시도.
도 4(b)는 도 4(a)의 압력계가 설치된 것을 보여주는 단면도.
도 5(a)는 도 4(a)의 압력계가 제거되고 마개가 설치된 것을 보여주는 사시도.
도 5(b)는 도 5(a)의 마개가 설치된 것을 보여주는 단면도.
도 6은 본 발명의 바람직한 다른 실시예에 따른 생물배양기를 보여주는 정면도.
도 7은 도 2의 생물배양기에 구비된 교반 유니트를 보여주는 분해 사시도.
도 8은 도 2의 생물배양기에 구비된 지지 유니트를 보여주는 정면도.
도 9는 전배양에 사용하는 종균을 제작하는 공정을 보여주는 도면.
도 10은 도 9의 공정으로 만들어진 종균을 이용하여 액체종균을 전배양하는 것을 보여주는 도면.
도 11a 내지 도 11e는 본 발명의 바람직한 실시예에 따라 버섯균사체 액체종균을 배양하는 공정을 보여주는 도면. 1 is a view showing a liquid seed culture process according to the prior art.
Figure 2 is a front view showing a bioculture in accordance with a preferred embodiment of the present invention.
3 is a plan view showing the bioculture device of FIG.
Figure 4 (a) is a perspective view showing a pressure gauge provided in the bioincubator of FIG.
Figure 4 (b) is a cross-sectional view showing that the pressure gauge of Figure 4 (a) is installed.
Figure 5 (a) is a perspective view showing that the pressure gauge of Figure 4 (a) is removed and the stopper is installed.
Figure 5 (b) is a cross-sectional view showing that the plug of Figure 5 (a) is installed.
Figure 6 is a front view showing a bioculturer according to another preferred embodiment of the present invention.
7 is an exploded perspective view showing a stirring unit provided in the bioincubator of FIG.
8 is a front view showing a support unit provided in the biocultivator of FIG.
9 is a view showing a process for producing a spawn for use in preculture.
10 is a view showing the pre-culture of liquid spawn using spawn made in the process of FIG.
11a to 11e is a view showing a process for culturing mushroom mycelium liquid spawn according to a preferred embodiment of the present invention.
이하, 첨부된 도면들을 참조로 본 발명의 바람직한 실시예에 대해서 상세히 설명하기로 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다. 따라서, 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다. Hereinafter, exemplary embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings. Prior to this, terms or words used in the specification and claims should not be construed as having a conventional or dictionary meaning, and the inventors should properly explain the concept of terms in order to best explain their own invention. Based on the principle that can be defined, it should be interpreted as meaning and concept corresponding to the technical idea of the present invention. Therefore, the embodiments described in the specification and the drawings shown in the drawings are only the most preferred embodiment of the present invention and do not represent all of the technical idea of the present invention, various modifications that can be replaced at the time of the present application It should be understood that there may be equivalents and variations.
본 발명에 따른 생물배양기와 액상배양방법은 버섯종균을 비롯한 여러 미생물의 배양에 사용될 수 있지만, 아래에서는 설명의 편의를 위해서 버섯종균의 배양만을 예로 들어서 설명하기로 한다.The bioculture and liquid culture method according to the present invention can be used for the cultivation of several microorganisms, including mushroom spawn, but for the convenience of description, the following description will be given by culturing only mushroom spawn.
본 발명에 따른 생물배양기를 이용하여 배양할 수 있는 생물로는 특별히 한정되지는 않지만 미생물일 수 있으며, 미생물에는 특별히 한정되지는 않지만 세균, 방선균, 효모, 곰팡이, 버섯균사체, 단세포 조류, 원생동물, 동식물의 분화되지 않은 세포 및 조직 배양물 등 당업계에서 인정되는 모든 미생물 생물체를 포함한다.The organisms that can be cultured using the bioculture device according to the present invention are not particularly limited, but may be microorganisms, but are not particularly limited to microorganisms, bacteria, actinomycetes, yeast, fungi, mushroom mycelium, single cell algae, protozoa, All microbial organisms recognized in the art, including undifferentiated cell and tissue cultures of animals and plants.
도 2는 본 발명의 바람직한 실시예에 따른 생물배양기를 보여주는 정면도이고, 도 3은 상기 생물배양기를 보여주는 평면도이다. Figure 2 is a front view showing a bioculturer according to a preferred embodiment of the present invention, Figure 3 is a plan view showing the bioculturer.
도면을 참조하면, 생물배양기(100)는 탱크본체(20)와, 탱크본체(20)의 내부에 공기를 공급하는 송기관(30)과, 탱크본체(20) 내부에 유입된 공기를 외부로 배출하는 배기관(40)과, 송기관(30)과 배기관(40)을 선택적으로 연통시키는 우회관(50)을 구비한다. Referring to the drawings, the bio-incubator 100, the
탱크본체(20)는 그 내부에 배양액 및/또는 액체종균이 수용된다. 탱크본체(20)는 가압증기멸균기(도면에 미도시) 내부에 수납될 수 있는 크기를 가진다. 이를 위해서 탱크본체(20)는 내부용량이 50리터 내지 1000리터인 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 100리터 내지 400리터의 내부용량을 가진다. 한편, 상기 가압증기멸균기는 버섯공장에서 자실체 고체배양배지 및 통을 대량 멸균하기 위해서 통상적으로 사용되고 있는 장치로서, 작업자가 내부에서 걸어서 이동할 수 있는 정도의 크기를 가진다.
상기 탱크본체의 내부용량이 매우 큰 경우, 예를 들어 상기 내부용량이 1000리터를 초과하는 경우에는 통상적인 가압증기멸균기를 사용하여 멸균하기가 어려워지고 탱크본체의 이동에도 문제가 생기기 때문에 탱크본체의 내부용량을 1000리터 이하로 제작하는 것이 바람직하다. 또한, 내부용량이 큰 경우, 예를 들어 상기 내부용량이 1000리터를 초과하는 경우에는 한번에 자실체 접종을 하고 남는 배양물이 발생할 수 있다. 상기 탱크본체의 내부용량이 1000 리터를 초과하는 경우에는 자실체 한 뱃치 (batch) 배양을 위해 접종완료 후에 남는 많은 액체종균을 장기간 보존해야 하는 문제점이 있다. 즉, 자실체 한 뱃치 배양을 위해 필요한 접종 양만큼만 액체종균을 배양하고 이를 모두 사용하는 것이 가장 바람직한데, 상기 내부용량이 1000 리터를 초과하면 접종에 필요한 액체종균보다 많을 경우 남는 액체종균을 다음 번 접종 때까지 장기간 보관해야 하는 문제점이 있다. 이에 비하여, 본 발명에 따른 생물배양기(100)와 액상배양방법은 필요 배양량에 따라 탱크본체의 크기를 늘리지 않고 탱크본체의 댓수를 늘리면 되기 때문에 배양이 완료된 액체종균을 다음 번 자실체 배양 뱃치까지 보관할 필요도 없고 필요 배양량에 따라 작업량을 효율적으로 조절할 수 있다. 이와 같은 본 발명에 따른 생물배양기(100)의 장점은 배양에 5일 이상의 장기간이 소요되는 경우에 있어서 특히 유리하다.When the internal volume of the tank body is very large, for example, when the internal capacity exceeds 1000 liters, since it is difficult to sterilize using a conventional autoclave sterilizer and problems occur in the movement of the tank body, It is preferable to produce an internal capacity of 1000 liters or less. In addition, when the internal dose is large, for example, when the internal dose exceeds 1000 liters, a culture remaining after inoculating fruiting bodies at once may occur. When the internal volume of the tank body exceeds 1000 liters, there is a problem in that a long term preservation of many liquid spawns left after completion of inoculation is required for batch culture of one fruiting body. In other words, it is most preferable to incubate the liquid spawn as much as the inoculation amount necessary for the batch culture of the fruiting body, and to use all of them. There is a problem that must be stored for a long time until. On the other hand, the
또한, 상기 탱크본체의 내부용량이 매우 큰 경우에는 오염 발생시 손실이 크다. 즉, 본 발명에 따른 생물배양기(100)는 여러 개의 탱크본체(20)가 배양액을 순차적으로 시간간격을 두고 생산할 수 있기 때문에 어느 한 탱크본체(20)의 배양액 또는 액체종균이 오염된 경우에 오염된 탱크본체(20)의 배양액 또는 액체종균만을 폐기하고 다른 탱크본체(20)의 배양액을 이용하면 된다는 장점이 있다. 그런데, 상기 내부용량이 1000리터를 초과할 정도로 매우 큰 경우에는 오염이 발생된 경우에 폐기해야 하는 배양액 또는 액체종균이 그 만큼 많아질 뿐만 아니라, 적은 개수의 탱크본체가 사용되기 때문에 다음 뱃치를 준비하여 들어가기 위해서는 시간이 더 소요된다는 문제점이 있다.In addition, when the internal capacity of the tank body is very large, the loss is large when contamination occurs. That is, the
아울러, 상기 탱크본체의 내부용량이 1000리터를 초과할 정도로 크게 되면 탱크본체를 멸균하기 위해 통상의 가압증기멸균기를 사용하기가 용이하지 못해 별도의 가열수단을 구비해야 하기 때문에 생물배양기의 제조비용이 크게 올라간다는 문제점이 있다. In addition, when the internal capacity of the tank body is large enough to exceed 1000 liters, it is not easy to use a conventional autoclave sterilizer to sterilize the tank body, so that a separate heating means must be provided so that the production cost of the bioculture device is increased. There is a problem that goes up significantly.
한편, 탱크본체(20)의 내부용량이 50리터보다 작으면 적정규모의 자실체를 생산하기 위한 종균배양을 위해 너무 많은 개수의 탱크본체(20)가 구비되어야 하기 때문에 경제적이지 못하다. On the other hand, if the internal capacity of the
탱크본체(20)는 그 상단에 설치된 덮개(21)와, 그 내부를 들여다 보기 위한 점검용 창(23)과, 하단에 설치된 바퀴(25) 및, 배양 완료된 액체종균을 배출하기 위한 배출수단을 구비한다. The
상기 덮개(21)는 탱크본체(20)의 상단에 형성된 개구부를 밀폐하도록 설치된다. 상기 배양액은 개구부를 통해서 탱크본체(20)의 내부에 주입된다. 또한, 탱크본체(20)의 내부를 세정하기 위한 세정수도 개구부를 통해서 주입된다. 덮개(21)는 고정부재(21a)에 의해서 개구부에 착탈가능하게 고정된다. 이러한 고정부재(21a)는 통상적인 것이므로 여기서는 설명을 생략하기로 한다.The
덮개(21)에는 삼각 플라스크에서 전배양된 액체종균(Seed Culture)을 탱크본체(20)의 내부에 주입하기 위한 주입부(21b)와, 점검용 창(23)이 설치된다. 주입부(21b)에는 종균접종공정에서 전배양된 액체종균을 주입하기 위한 주입관이 연결된다. 주입관에 대해서는 아래에서 설명된다. The
상기 바퀴(25)는 탱크본체(20)의 이동을 위해서 구비된 것이고 가압증기멸균기를 이용한 고온살균공정에 견딜 수 있는 재질로 구성되며, 점검용 창(23)은 유리와 같이 투명한 소재로 이루어지는데 탱크본체(20)의 내부에서 이루어지는 배양을 관찰하기 위한 것이다. 점검용 창(23)은 탱크본체(20)의 측면과 하단 등 여러 곳에 형성될 수 있고, 덮개(21)에도 형성될 수 있다.The
상기 배출수단은 탱크본체(20)의 하단에 설치된 배출관(27a)과, 배출관(27a)을 선택적으로 개폐하기 위한 배출용 밸브(27b)와, 배출관(27a)의 끝단을 덮는 캡부재(27c)를 구비한다. The discharge means is a discharge pipe (27a) installed on the lower end of the
배출용 밸브(27b)는 배출되는 액체종균 양을 조절하는데, 소정 시간마다 개폐할 수 있는 밸브가 사용될 수 있다. The
캡부재(27c)는 배출관(27a)의 끝단을 밀폐하도록 설치되는데, 배출관(27a)을 통해서 액체종균이 배출되는 경우에는 제거되고 배출관(27a)을 통해서 액체종균이 배출되지 않는 경우에는 배출관(27a)의 끝단을 밀폐함으로써 배출관(27a)이 오염되는 것을 방지한다. The
한편, 탱크본체(20)의 아랫면은 그 중앙부가 위로 돌출되어 돌출부(22)를 형성하는 것이 바람직한데, 이것은 하류측 송기관(35)의 공기 배출공(36)으로부터 배출된 공기에 의해서 배양액이 순환되는 동안에 배양액 중의 고체성분이 상기 아랫면에 퇴적되는 것을 방지하기 위해서이다. 공기 배출공(36)에 대해서는 아래에서 설명된다.On the other hand, the lower surface of the
본 발명에 따른 생물배양기(100)는 냉각공정을 위한 냉각용 자켓(28)을 포함할 수 있다. 냉각공정은 가열살균공정 이후에 탱크본체(20)를 냉각시키기 위한 공정이다. Bio-cultivator 100 according to the present invention may include a cooling
냉각용 자켓(28)은, 탱크본체(20)의 외부면과 접촉하도록 설치되고 그 내부에는 냉수를 수용할 수 있는 자켓몸체(28a)와, 자켓몸체(28a)의 내부에 상기 냉수를 주입하기 위한 냉수 주입구(28b)와, 자켓몸체(28a)로부터 냉수를 배출하기 위한 냉수 배출구(28c)를 구비한다. 한편, 냉각용 자켓(28)은 필요한 경우에 상기 냉수를 순환시키기 위한 순환용 펌프(미도시)를 더 구비할 수도 있다. 상기 냉수는 일반 수도관을 연결하여 공급할 수 있으며, 순환용 펌프에 의해서 냉수탱크(미도시)로부터도 공급될 수 있다. 순환용 펌프에 의해서 공급시 상기 냉수는 냉수탱크와, 냉수 주입구(28b)와, 자켓몸체(28a)와, 냉수 배출구(28c)를 순차적으로 순환하면서 탱크본체(20)를 냉각시킨다. 한편, 도 2에서 냉수탱크와 냉수 주입구(28b)를 연결하는 관과 냉수탱크와 냉수 배출구(28c)를 연결하는 관은 그 도시가 생략되었다. The cooling
아울러, 상기 탱크본체(20)는 그 내부의 온도를 측정하기 위한 온도계(온도센서)(미도시)를 구비할 수도 있다. In addition, the
송기관(30)은 상류측 송기관(31)과 하류측 송기관(35)을 구비한다. The
상류측 송기관(31)의 한쪽 끝단은 공기 공급원(미도시)과 연통되고 상류측 송기관(31)의 다른쪽 끝단(32)은 하류측 송기관(35) 및 우회관(50)과 연통된다. One end of the upstream
상류측 송기관(31)에는 공기필터(33)가 설치되는데, 공기필터(33)는 공기공급원으로부터 공급된 공기를 정화한다. 그리고, 공기필터(33)의 상류측에는 공기의 유입을 조절하기 위한 송기용 밸브(34)가 설치된다. 송기용 밸브(34)는 가열살균공정과 냉각공정 및 종균배양공정에서 개방된다. An
한편, 본 발명에 따른 생물배양기(100)에 구비되는 밸브(34)(46a)(46b)(37)(27b)는 열에 강하고 다이아프람(diaphragm) 형태의 밸브인 것이 바람직하지만, 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.On the other hand, the
하류측 송기관(35)은 상류측 송기관(31)과 연통되어 공기를 탱크본체(20)의 내부로 공급한다. 바람직하게, 하류측 송기관(35)의 하부는 탱크본체(20)의 아랫면에 평행하게 형성되고, 상기 평행한 부분에는 다수의 공기 배출공(36)이 형성된다. 즉, 상류측 송기관(31)과 하류측 송기관(35)을 통해서 공급된 공기가 공기 배출공(36)을 통해서 탱크본체(20)의 내부로 배출된다. 상기 공기배출공(36)을 통해서 배출된 공기흐름은 탱크본체(20)의 내부에서 배양액을 순환시키는데, 이 때 돌출부(22)는 배양액 중의 고체성분이 아랫면에 가라앉지 않도록 한다.The downstream
하류측 송기관(35)에는 역류방지밸브(37)가 설치된다. 역류방지밸브(37)는 배양액이 상류측 송기관(31)으로 이동(역류)하는 것을 방지한다. 즉, 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정 시 가열살균종료시점에서 가압증기멸균기의 압력을 낮출 때 탱크본체(20) 내부가 수증기로 인해서 고온, 고압 상태이기 때문에 배양액이 송기관(30)을 통해서 외부로 배출될 수 있다. 만약, 배양액이 송기관(30)을 통해서 외부로 배출되면 공기필터(33)가 배양액에 의해서 젖게 되어 향후 오염된다. 마찬가지로, 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정을 끝내고 탱크본체(20)가 가압증기멸균기 밖으로 이동되더라도 탱크본체(20)의 내부는 여전히 외부보다 고온, 고압이기 때문에 배양액이 송기관(30)을 통해서 외부로 배출될 수 있다. 역류방지밸브(37)는 가열살균공정과 냉각공정에서 하류측 송기관(35)을 밀폐함으로써 배양액이 역류하는 것을 방지하는 매우 중요한 역할을 한다. 역류방지밸브(37)로는 열에 강하고 다이아프람(Diaphragm) 형태의 통상적인 밸브가 이용될 수 있다. The downstream
배기관(40)은 탱크본체(20) 내부의 공기 및/또는 수증기를 외부로 배출한다. The
배기관(40)은 탱크본체(20)의 내부와 연통되는 상류측 배기관(41)과, 상류측 배기관(41)의 끝단(42)과 연통되어 탱크본체(20) 내부의 공기 및/또는 수증기를 외부로 배출하는 하류측 배기관(45)을 구비한다.The
상류측 배기관(41)은 한쪽 끝단(42)이 하류측 배기관(45) 및 우회관(50)과 연통되고, 다른쪽 끝단이 탱크본체(20)의 내부와 연통된다. 즉, 상기 한쪽 끝단(42)은 하류측 배기관(45) 및 우회관(50)과 연결되고, 상기 다른쪽 끝단은 배기관 입구(43)가 된다. One
하류측 배기관(45)은 상류측 배기관(41)을 통해서 이동된 공기 및/또는 수증기를 배기구(49)를 통해서 외부로 배출한다. 하류측 배기관(45)에는 압력계(60)가 설치될 수 있는 부착부(48)가 형성된다. 또한, 부착부(48)의 상류측과 하류측에는 각각 제1,2 배기용 밸브(46a)(46b)가 설치되는데, 제1,2 배기용 밸브(46a)(46b)는 압력계(60)를 착탈하는 동안에 외부 공기가 하류측 배기관(45)에 유입되는 것을 차단한다. The
도 4(a)와 도 4(b)는 압력계(60)가 부착부(48)에 설치된 것을 보여주고, 도 5(a)와 도 5(b)는 압력계(60)가 부착부(48)에서 제거되고 마개(67)가 부착부(48)에 설치된 것을 보여준다. 4 (a) and 4 (b) show that the
압력계(60)는 그 하단이 플랜지(61)로 형성되는데, 이것은 부착부(48) 상단의 플랜지(48a)와 접촉되는 면적을 넓힘으로써 하류측 배기관(45) 내부의 공기 및/또는 수증기가 유출되는 것을 방지하기 위해서이다. The
압력계(60)는 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정에서의 고온 고압에서 손상되지 않는 재질의 압력계를 사용하거나, 착탈가능하게 설치되는 것이 바람직하다. 바람직하게, 압력계(60)는 클램프에 의해서 부착부(48)에 설치된다. 클램프는 회동축(63a)을 중심으로 회동가능하게 설치된 한 쌍의 밀폐부재(63b) 및, 한 쌍의 밀폐부재(63b)가 플랜지(61)(48a)에 밀착되도록 조여주는 조임부재(63c)를 구비한다.The
밀폐부재(63b)는 그 단면이 'ㄷ' 형상으로 형성되는데, 밀폐부재(63b)가 회동축(63a)을 중심으로 회동하면 플랜지(61)(48a)가 상기 'ㄷ' 형상의 내부에 수용된다. 이 상태에서 조임부재(63c)를 회전시키면 한 쌍의 밀폐부재(63b)가 플랜지(61)(48a)에 완전히 밀착된다. The sealing
압력계(60)는 탱크본체(20) 내부의 압력을 측정하기 위한 것으로서, 하류측 배기관(45)에 설치될 수도 있지만 탱크본체(20)에도 설치될 수 있다. 즉, 탱크본체(20) 내부의 압력을 측정할 수 있다면 압력계(60)는 어디든지 설치될 수 있다. The
마개(67)는 압력계(60)가 제거된 경우에 부착부(48)를 밀폐한다. 즉, 마개(67)는 가열살균공정에서 압력계(60)가 제거된 경우에 부착부(48)에 설치된다. 마개(67)도, 압력계(60)와 마찬가지로, 클램프에 의해서 부착부(48)에 착탈가능하게 설치된다. 마개(67)의 하단은 플랜지(68)로 형성되는데, 이것은 부착부(48) 상단의 플랜지(48a)와 접촉되는 면적을 넓힘으로써 배기관(40) 내부의 공기 및/또는 수증기가 유출되는 것을 방지하기 위해서이다. The
한편, 압력계가 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정에서의 고온 고압에서 손상되지 않는 재질로 이루어진 경우에는 부착부(48)에 착탈가능하게 설치될 필요가 없다. 도 6에 도시된 생물배양기(100a)와 같이 압력계(60a)는 하류측 배기관(45)에 고정되도록 설치될 수 있고, 이 경우에는 제2 배기용 밸브(46b)만 구비되면 되고 제1 배기용 밸브(46a)는 필요하지 않다. 압력계(60a)는 하류측 배기관(45) 뿐만 아니라 탱크본체(20)의 내부압력을 측정할 수 있다면 그 설치위치는 다양할 수 있다. 도 6에서 도 2의 도면부호와 동일한 것은 동일한 역할을 하는 동일한 구성요소를 나타낸다. 한편, 아래에서는 설명의 편의를 위해서 도 2의 생물배양기(100)만을 설명하기로 한다. On the other hand, when the pressure gauge is made of a material that is not damaged at high temperature and high pressure in the heat sterilization process using a pressure steam sterilizer, it does not need to be detachably installed on the
상기 우회관(50)은 송기관(30)의 소정부분과 배기관(40)의 소정부분을 서로 연결하여 연통시킨다. 예를 들어, 상기 소정부분은 상류측 송기관(31)의 끝단(32)과 상류측 배기관(41)의 끝단(42)이고, 우회관(50)은 상류측 송기관(31)의 끝단(32)과 상류측 배기관(41)의 끝단(42)을 서로 연통시킨다. The
우회관(50)에는 우회관용 밸브(52)가 설치된다. 우회관(50)은 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정에서 탱크본체(20) 내부의 고온, 고압의 공기 및/또는 수증기가 공기필터(33)를 경유하여 배출되도록 함으로써 공기필터(33)가 멸균 소독되도록 하고, 가열살균공정 후의 냉각공정에서는 멸균된 공기필터(33)를 통과하여 균이 제거된 공기가 탱크본체(20)의 내부로 공급되도록 한다. 이 점에 대해서는 아래에서 자세히 설명될 것이다.The
전술한 바와 같이, 우회관(50)은 상류측 송기관(31)의 끝단(32)과 상류측 배기관(41)의 끝단(42)을 서로 연통시키도록 설치된다. 따라서, 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정에서 탱크본체(20) 내부의 공기 및/또는 수증기는 상류측 배기관(41)과, 우회관(50)과, 상류측 송기관(31)을 순차적으로 경유하여 외부로 배출되기 때문에 공기필터(33)가 멸균 소독될 수 있다. 또한, 가열살균공정 후의 냉각공정에서는 공기공급원(미도시)으로부터 공급된 공기가 상류측 송기관(31)과, 우회관(50) 및, 상류측 배기관(41)을 순차적으로 경유하여 탱크본체(20)의 내부로 공급되기 때문에 탱크본체(20)의 내부에는 공기필터(33)에 의해서 균이 제거된 공기만이 공급된다. As described above, the
한편, 종균배양공정에서 탱크본체(20)에 수용된 배양액 및 액체종균은 공기배출공(36)으로부터 배출된 공기에 의해서 교반되지만, 별도의 교반유니트(70)를 구비할 수도 있다. On the other hand, the culture medium and the liquid spawn in the
도 7에 나타난 바와 같이, 교반유니트(70)는 교반용 모터(71)와, 교반용 모터(71)에 의해서 회전되는 교반축(73)과, 교반축(73)의 하단에 형성된 교반날개(75)를 구비한다. 교반축(73)의 상단은 탱크본체(20)의 외부에서 교반용 모터(71)의 구동축(72)과 결합된다. 교반축(73)의 상단은 베어링(미도시)에 의해서 탱크본체(20)에 회전가능하게 지지되는데, 이러한 회전 가능한 지지는 당업자가 용이하게 알 수 있는 것이므로 여기서는 설명을 생략하기로 한다. As shown in FIG. 7, the stirring
상기 구동축(72)과 교반축(73)에는 각각 관통공(72a)(73a)이 형성되어 있는데, 상기 관통공(72a)(73a)을 관통하여 체결부재(74a)(74b)가 설치됨으로써 교반축(73)과 구동축(72)은 착탈 가능하게 결합된다. 따라서, 가압증기멸균기를 이용한 가열살균시의 고온, 고압에 의해서 교반용 모터(71)가 손상되는 것을 방지하기 위해서 가열살균시에는 교반용 모터(71)가 탱크본체(20)로부터 분리될 수 있다. Through
한편, 본 발명에 따른 생물배양기(100)는 탱크본체(20)를 지지하기 위한 지지유니트(도 8의 80)를 더 구비할 수 있다. 탱크본체(20) 내부의 세정작업은 덮개(21)를 열고 물을 주입하여 이루어지는데, 지지유니트(80)는 세정 후 탱크본체(20)의 내부에 남아있는 물을 배출관(27a)을 통해서 외부로 배출하기 위해서 탱크본체(20)를 경사지도록 한다.On the other hand, the
지지유니트(80)는 하부 프레임(81)과, 하부프레임(81)에 회동가능하게 설치된 상부프레임(83)과, 하부프레임(81)을 상부프레임(83)에 대해 선택적으로 회동시키는 회동수단(85)을 구비한다. The
상부 프레임(83)의 내부에는 탱크본체(20)가 수납된다. 상부 프레임(83)은 회동수단(85)에 의해서 회동축(82)을 중심으로 회동 가능하도록 하부 프레임(81)에 설치된다. The
회동수단(85)으로서 실린더(85)가 사용될 수 있는데, 상기 실린더(85)의 한쪽 끝단(85a)은 하부프레임(81)에 회동가능하게 설치되고 다른쪽 끝단(85b)은 상부프레임(83)에 회동가능하게 설치된다. 실린더(85)가 신장되면 상부프레임(83)은 회동축(82)을 중심으로 회동하여 탱크본체(20)가 기울어지게 된다. 탱크본체(20)가 한쪽으로 기울어지면 탱크본체(20)의 내부에 수용된 세정수 등이 배출관(27a)을 통하여 외부로 원활하게 배출될 수 있다.
A
그러면, 도 9 내지 도 11e를 참조하여 본 발명에 따른 종균의 액상배양방법을 설명하기로 한다. 버섯균사체 액체종균의 배양은 전배양과 본배양으로 이루어진다. 도 11a 내지 도 11e에서 점선으로 된 화살표는 관(30)(40)(50)을 통한 공기의 흐름을 나타낸다.
Then, the liquid culture method of the seed according to the present invention with reference to Figures 9 to 11e. Cultivation of liquid mycelia of mushroom mycelium consists of preculture and main culture. The dashed arrows in FIGS. 11A-11E indicate the flow of air through the
1. 전배양단계1. Pre-cultivation stage
먼저, 시험관(1)에 수납된 보존 버섯균주를 평판 배양기(2)의 고체배지에 접종한 후, 인큐베이터(미도시)에서 약 20도로 배양한다. 한편, 배양액이 수용된 삼각 플라스크(5)를 소형 가압증기멸균기(미도시)에 넣어서 약 121도에서 15분 내지 20분간 고온, 고압 살균하여 준비해둔다. 평판 배양기(2)의 균사가 많아지면 평판배양기(2)에서 5mm 정도의 블록(3)을 2-10개 정도 덜어낸 후, 상기 블록(3)을 살균이 완료된 삼각플라스크(5)에 접종한다. First, the preserved mushroom strain stored in the test tube 1 is inoculated into a solid medium of the
이어서, 상기 접종이 완료되면 삼각플라스크(5)를 20도 내지 25도 정도의 실내에서 1일 동안 방치하여 배양한다(정치배양). 상기 정치배양 후에는 20도 내지 25도의 환경에서 6일 내지 11일 동안 진동(회전) 배양한다. 진동(회전) 배양에서는 진동 배양기(7)를 사용하는데, 회전수는 50 R.P.M. 내지 150 R.P.M. 사이에서 적절하게 조절한다. Subsequently, when the inoculation is completed, the
상기 진동배양이 완료되어 가면 배양액 안에서 균사가 성장해 가는데, 이 배양액을 본 배양에 사용하는 경우에는 호모게나이저 또는 마그네틱 교반기(magnetic stirrer) 등으로 균사체를 가늘게 하여 사용하는 것이 바람직하다. 균사가 가늘어지면 본배양시 버섯균주의 성장이 빨라진다. 이와 같은 전배양 단계는 7일 내지 14일 정도가 걸린다.
When the vibration culture is completed, the mycelium grows in the culture medium. When the culture medium is used for the present culture, it is preferable to thin the mycelium with a homogenizer or a magnetic stirrer. The thinner the mycelia, the faster the growth of mushroom strains in the main culture. This preculture step takes about 7 to 14 days.
2. 본배양 단계2. Main culture stage
본배양에서는 약 360리터의 내부용량을 가진 탱크본체(20)를 사용한다. 그러나, 상기 내부용량은 예시적인 것으로서 본 발명에서 탱크본체(20)의 내부용량은 생산이 요구되는 액체종균의 양에 따라 50리터 내지 1000리터 사이에서 가변될 수 있다.In this culture, the
(A) 준비공정(A) Preparation process
준비공정은 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정 전에 이루어진다. 먼저, 청소된 탱크본체(20) 내부에 배양액을 채워 가열살균공정 준비를 한다. 압력계가 탈부착 식인 경우 조임부재(63c)를 풀고 밀폐부재(63b)를 회동시켜서 압력계(60)를 떼어낸 후, 마개(67)를 부착부(48)에 설치한다. 또한, 교반용 모터(71)를 사용하는 경우 교반축(73)으로부터 교반용 모터(71)를 떼어내 교반용 모터(71)를 탱크본체(20)로부터 분리한다. The preparation process is performed before the heat sterilization process using a pressurized steam sterilizer. First, the culture medium is filled into the cleaned
(B) 가열살균공정(B) heat sterilization process
가열살균공정은 탱크본체(20)를 가압증기멸균기에 넣어 배양액과 함께 전체를 살균하는 공정인데, 탱크본체(20)의 내부에 배양액이 수용된 상태에서 가열 살균이 이루어진다. 가열살균공정은 소정의 가압증기멸균기(미도시) 내부에서 이루어지는데, 상기 가압증기멸균기는 탱크본체(20)와 배양액을 살균할 수 있는 고온, 고압을 유지할 수 있는 장치로서, 기존에 이미 공지된 것이다. 배양액을 내부에 수용한 본 발명의 탱크본체(20)는 상기 가압증기멸균기의 내부에서 121도, 1.4 기압 내지 1.5 기압에서 15분 이상의 조건으로 가열 살균된다. The heat sterilization process is a process of sterilizing the whole together with the culture solution by putting the
가열살균공정에서 제1,2 배기용 밸브(46a)(46b)와 역류방지밸브(37)는 닫히고, 송기용밸브(34)와 우회관용 밸브(52)는 개방된다. 한편, 121도, 1.4 기압 내지 1.5 기압에서는 배양액이 증발하여 만들어진 수증기(스팀)가 탱크본체(20)의 내부를 채우게 되는데, 상기 수증기와 탱크본체(20)에 남아있던 고온의 공기는 상류측 배기관(41)과 우회관(50) 및 상류측 송기관(31)을 통해서 외부로 배출된다. 이 과정에서 수증기와 공기는 공기필터(33)를 소독하게 된다. 또한, 역류방지밸브(37)가 하류측 송기관(35)을 밀폐하기 때문에 배양액이 상류측 송기관(31)으로 유입되지 않고, 이에 따라 배양액으로 인해서 공기필터(33)와 상류측 송기관(31)이 오염되는 것을 방지할 수 있다. In the heat sterilization process, the first and
기존에는 용기(도 1의 10)를 소형 가압증기멸균기에 수납한 상태에서 가열살균을 하였다. 기존에는 가열살균공정에서 수증기와 공기가 배기관(13)을 통해서 외부로 배출되었기 때문에 공기필터(14)가 효과적으로 살균될 수 없었다. 또한, 가열살균공정 후 필터를 거치지 않은 외부 공기가 유입되어 오염이 되는 문제가 있었다(공기필터를 배기관에 부착하는 경우에는 배양 시 압력이 발생하는 문제점이 있음). 그렇다고 해서 공기필터(14)를 소독하기 위해서 클램프(15)를 제거하여 송기관(12)을 개방하면 배양액이 송기관(12)으로 역류하여 공기필터(14)가 오염되는 문제점이 있었다. 이러한 상기 문제점들을 해결하기 위해서 배양액이 수용되지 않은 상태에서 가열살균을 하여 공기필터(14)를 소독하고 이어서 별도로 멸균된 배양액을 수용하여 사용하거나, 배양액이 수용되지 않은 상태로 1 차 가열살균 후 배양액을 넣고 클램프(15)로 송기관(12)을 밀폐한 상태에서 2차로 가열살균을 하는 방법을 사용할 수 있다. 그러나, 완벽한 살균을 위해 두 번의 가열살균공정을 거치는 문제점이 있다. 본 발명에서는 상기 문제점들이 모두 해결되었다.Conventionally, heat sterilization was carried out in a container (10 in FIG. 1) housed in a small autoclave. In the past, the air filter 14 could not be effectively sterilized because steam and air were discharged to the outside through the
(C) 냉각공정(C) cooling process
상기 가압증기멸균기를 이용한 가열살균공정 이후에는 냉각공정이 이루어진다. 냉각공정이 이루어지기 전에 가압증기멸균기에서 탱크본체(20)를 꺼낼 때 송기용 밸브(34)를 일시적으로 닫아서 송기관(30)을 통하여 탱크본체(20) 내부의 스팀이 밖으로 나오는 것을 차단한다. 즉, 모든 밸브가 차단되어 외부공기의 유입을 차단한 상태에서 탱크본체(20)를 가압증기멸균기부터 꺼내어 냉각실로 이동시킨다. After the heat sterilization process using the pressurized steam sterilizer is a cooling process. When the tank
압력계(60)를 부착하는 경우에는 마개(67)를 부착부(48)로부터 떼어낸 후 압력계(60)를 부착부(48)에 설치하는데, 이 때 제1,2 배기용 밸브(46a)(46b)를 닫은 상태로 유지함으로써 외부공기가 배기관(40)으로 유입되는 것을 최소화시킨다. 또한, 교반 유니트(70)를 이용하는 경우에는 교반용 모터(71)를 교반축(73)에 연결한다. When attaching the
이어서, 배기용 밸브(46a)(46b)를 열어 탱크본체(20)의 내부에 남아있는 잔여 스팀으로 배기관(40)을 일시적으로 추가 살균하고 배기용 밸브(46a)(46b)를 닫는다. 다음, 송기용 밸브(30)를 열어 탱크본체(20) 내부의 잔여 스팀을 제거하면서 탱크본체(20)의 냉각을 진행시킨다. 냉각이 진행되면서 탱크본체(20)의 내부는 음압이 걸리게 되는데, 이 경우 공기 필터(33)에 의해 외부 공기가 균이 제거된 상태로 유입되기 때문에 오염문제가 발생하지 않는다.Then, the
냉각용 자켓(28)을 사용하는 생물배양기(100)의 경우에는 냉수가 공급되어 탱크본체(20) 및 배양액을 냉각시키고, 냉각용 자켓(28)이 없는 경우에는 자연 냉각시킨다. 상기 냉각용 자켓(28)을 이용함으로써 냉각공정에 소요되는 시간을 줄일 수 있다. 종균의 접종이 가능한 20도까지 온도를 낮추기 위해서 냉각용 자켓이 없는 용기(10)는 거의 40시간이 소요되었지만 냉각용 자켓(28)을 적용하게 되면 냉각 시간을 크게 줄일 수 있다. In the case of the bio-incubator 100 using the cooling
냉각이 완료되면 다음으로, 탱크본체(20)를 배양실로 옮겨 공기공급원(미도시)을 상류측 송기관(31)에 연결하고, 배기라인(미도시)을 하류측 배기관(45)에 연결한다. 공기공급원은 공기를 송기관(30)에 공급하기 전에 일차적으로 프리필터를 통해 정화하는 수단과 송풍수단(예를 들어, 송풍용 펌프 등)을 갖고 있다. After the cooling is completed, the
냉각공정 후반부에서는 제1,2 배기용 밸브(46a)(46b)와 역류방지밸브(37)가 닫히고 송기용 밸브(34)와 우회관용 밸브(52)는 개방된다. 냉각공정 후반부에서 탱크본체(20)의 내부가 냉각되면 탱크본체(20)의 내부 압력이 낮아지기 때문에 공기공급원으로부터 공급된 공기가 상류측 송기관(31)과, 공기필터(33)와, 우회관(50) 및, 상류측 배기관(41)을 통해서 탱크본체(20)의 내부로 공급된다. 한편, 냉각이 시작되는 냉각공정 전반부 때에는 탱크본체(20)의 내부는 여전히 고온 고압 상태이고 외부는 상온 상압 상태이기 때문에 배양액이 상류측 송기관(31)으로 역류하여 공기필터(33)를 오염시킬 수 있는데, 이를 방지하기 위해서 역류방지밸브(37)를 닫아 놓아야 한다. In the second half of the cooling process, the first and
(D) 종균접종공정(D) spawn inoculation process
종균접종공정은 전배양된 액체종균을 탱크본체(20)의 내부에 주입하는 공정이다. 송기용밸브(34)와 역류방지밸브(37) 및, 제1,2 배기용 밸브(46a)(46b)를 닫고 주입관(8)을 주입부(21b)에 연결한다. Seeding inoculation process is a step of injecting the pre-cultured liquid spawn inside the tank body (20). The
청정공기 공급수단(미도시)을 이용하여 삼각플라스크(5)의 내부에 청정공기를 공급함으로서 삼각플라스크(5) 내부의 압력이 탱크본체(20)의 내부 압력보다 높게 하여 삼각플라스크(5)에 수용된 액체종균이 탱크본체(20)로 이동하도록 한다. 이 때, 상기 액체종균 및 배양액은 외부 공기와 완전히 차단되기 때문에 오염이 방지될 수 있다. 한편 주입부(21b)가 탱크본체(20)에 설치되지 않은 경우에는 클린부스(미도시) 내에 탱크본체(20)를 가지고 들어가 삼각 플라스크에 전배양된 액체종균을 탱크본체(20)에 접종하는 작업을 행할 수 있다. 본 발명에 따른 생물배양기(100)와 액상배양방법은 외부공기를 완전히 차단한 상태에서 종균접종이 이루어지기 때문에 잡균이 섞이는 것을 완전히 방지할 수 있다. By supplying clean air to the inside of the
(E) 종균배양공정(E) spawn culture process
종균배양공정은 배양액에 접종된 액체종균을 배양하는 공정이다. 배양실의 적정한 온도는 대략 22도 내지 23도이다. 송기용밸브(34), 제1,2 배기용 밸브(46a)(46b), 역류방지밸브(36)를 열고 우회관용 밸브(52)를 닫는다. 공기공급원으로부터 공급된 공기는 상류측 송기관(31)과, 공기필터(33)와, 하류측 송기관(35) 및, 공기배출공(36)을 통하여 배양액으로 배출된 후, 상류측 배기관(41)과 하류측 배기관(45)을 통해서 외부(배기라인)로 배출된다. 공기공급원으로부터 공급된 공기는 가압증기멸균기에서 가열살균된 공기필터(33)를 통과하기 때문에 정화된 공기만이 탱크본체(20) 내부로 공급된다. 송기관(30)을 통하여 공급되는 공기량과 배기관(40)을 통해서 배기되는 공기량을 조절함으로써 탱크본체(20)의 내부압력이 0.02MPa 내지 0.04MPa이 되도록 한다. The spawn culture step is a process of culturing the liquid spawn inoculated into the culture solution. Suitable temperature of the culture chamber is about 22 to 23 degrees. The
공기 배출공(36)으로부터 배출된 공기는 위로 이동하면서 배양액을 교반한다. 상기 공기의 흐름에 의해서 배양액을 교반할 수도 있지만, 교반날개(75)를 이용하여 배양액을 교반할 수도 있다. 교반날개(75)가 배양액을 교반하면 버섯종균의 균사를 가늘게 절단할 수 있어 5~8일 정도 소요되는 공기교반 방식에 비해 1~2일정도의 배양기간 단축에 도움이 되며. 배양공정 후 자실체 배양통에 접종시 접종용 노즐(미도시)이 막히는 것을 방지하는 데도 도움이 된다.The air discharged from the
탱크본체(20)의 내부에서 이루어지는 상기 배양은 점검용 창(23)을 이용하여 관찰할 수 있다. 또한, 종균이 불량한 것은 배양 시 하류측 배기관(45)을 통해 나오는 공기의 냄새로도 알아낼 수 있다. 이와 같이, 본 발명에 따른 생물배양기(100)와 그 배양방법은 불량 종균이 실제의 버섯 자실체 재배에 사용되는 것을 방지할 수 있고, 종균이 불량한 것을 발견한 경우에 단시간에 배양액을 가열살균 및 냉각하고 액체종균을 다시 제조할 수 있기 때문에 버섯 자실체 재배손실을 최소화할 수 있다. The culture made in the
탱크본체(20)의 내부에서 이루어지는 상기 배양에 걸리는 기간은 표고버섯 등의 경우에는 대략 3일 내지 6일, 만가닥 버섯, 나도 팽나무 버섯 등의 경우에는 대략 4일 내지 8일이다. The culturing period of the inside of the
한편, 본배양을 거쳐서 만들어진 액체종균은 자실체 재배용 고체배지에 접종되는데, 이 접종은 밸브(34)(46a)(46b)를 조절하여 탱크본체(20)의 내부압력을 높임으로서 배출관(27a)을 통해서 액체종균이 배출되도록 하여 이루어진다. On the other hand, the liquid spawn produced through the main culture is inoculated into a solid medium for fruiting body cultivation, which inoculates the
구체적으로 송기용 밸브(34)를 개방하고, 송기관(30)을 통해 외부 공기를 공급하되, 제1,2 배기용 밸브(46a)(46b)의 개방 정도를 조절하여 내부압력을 높일 수 있다.Specifically, the
<도면의 주요 참조부호에 대한 설명>
20 : 탱크본체 30 : 송기관
40 : 배기관 50: 우회관
60 : 압력계 70 : 교반유니트
100 : 생물배양기
<Description of main reference numerals in the drawings>
20 tank body 30: pipe
40: exhaust pipe 50: bypass
60: pressure gauge 70: stirring unit
100: biological incubator
Claims (22)
탱크본체의 내부에 외부 공기를 공급하는 송기관;
탱크본체 내부로 유입된 공기를 배기구를 통해서 외부로 배출하기 위한 배기관; 및
우회관용 밸브를 이용하여 송기관과 배기관을 선택적으로 연통시키는 우회관;을 구비하고,
탱크본체에 수용된 배양액을 가열살균하기 위한 공정에서는 탱크본체 내부의 공기 또는 수증기가 탱크본체의 내부에서부터 배기관이 우회관과 연결된 부분까지의 배기관, 우회관 및, 송기관을 순차적으로 경유하여 외부로 배출되고,
송기관은 공기 공급원과 연결되고,
송기관에는 우회관과 연결된 부분과 상기 공기 공급원 사이에 공기 공급원으로부터 공급된 공기를 정화하기 위한 공기필터가 설치된 것을 특징으로 하는 생물배양기.Tank body;
An air supply pipe for supplying external air to the inside of the tank body;
An exhaust pipe for discharging air introduced into the tank body to the outside through an exhaust port; And
And a bypass pipe for selectively communicating with the exhaust pipe and the exhaust pipe using the bypass pipe valve.
In the process for heat sterilization of the culture solution contained in the tank body, the air or steam inside the tank body is discharged to the outside via the exhaust pipe, the bypass pipe, and the exhaust pipe sequentially from the inside of the tank body to the portion where the exhaust pipe is connected to the bypass pipe. Become,
The exhaust pipe is connected to an air source,
And an air filter is installed between the portion connected to the bypass pipe and the air supply to purify the air supplied from the air supply.
상기 가열살균은 적어도 하나 이상의 탱크본체를 내부에 수납하고 탱크본체를 고온 고압 상태에서 가열살균하는 가압증기멸균기의 내부에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 1,
The heat sterilization is a bio-cultivator, characterized in that the interior of the at least one tank body and the inside of the autoclave steam sterilizing the tank body in a high temperature and high pressure state.
탱크본체의 내부 용량이 50리터 내지 1000리터인 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 1,
Bio-cultivator, characterized in that the internal capacity of the tank body is 50L to 1000L.
송기관은,
공기 공급원과 연결되고, 공기필터가 설치된 상류측 송기관; 및
상류측 송기관의 끝단과 연통되어 공기필터를 경유한 공기를 탱크본체의 내부에 공급하는 하류측 송기관;을 포함하고,
배기관은,
탱크본체의 내부와 연통되는 상류측 배기관;
상류측 배기관의 끝단과 연통되어 탱크본체 내부의 공기 또는 수증기를 외부로 배출하는 하류측 배기관;을 포함하며,
우회관은 상류측 송기관의 끝단과 상류측 배기관의 끝단을 서로 연통시키도록 설치되고,
가열살균공정에서 탱크본체 내부의 가열된 공기 또는 수증기는 상류측 배기관과, 우회관과, 상류측 송기관을 순차적으로 경유하여 외부로 배출되고, 상기 가열살균공정에서 하류측 배기관은 밀폐되는 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method according to claim 1 or 2,
The air line,
An upstream exhaust pipe connected to an air source and provided with an air filter; And
And a downstream air pipe communicating with an end of the upstream air pipe to supply air through the air filter to the inside of the tank body.
The exhaust pipe is
An upstream exhaust pipe communicating with the inside of the tank body;
And a downstream exhaust pipe communicating with an end of the upstream exhaust pipe for discharging air or water vapor from the inside of the tank body to the outside.
Bypass pipe is installed so as to communicate the end of the upstream exhaust pipe and the end of the upstream exhaust pipe,
In the heat sterilization process, heated air or steam inside the tank body is discharged to the outside through the upstream exhaust pipe, the bypass pipe, and the upstream air supply pipe in sequence, and the downstream exhaust pipe is sealed in the heat sterilization process. Biocultivator.
하류측 송기관에는 탱크본체 내부에 수용된 배양액이 상류측 송기관 쪽으로 이동하는 것을 방지하는 역류방지밸브가 설치된 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 5,
The downstream inlet pipe is a biocultivator, characterized in that the non-return valve is installed to prevent the culture fluid contained in the tank body to move toward the upstream side pipe.
상기 가열살균공정 이후에 탱크본체를 냉각하는 동안에 배기관이 밀폐되어 공기필터를 경유한 공기만이 탱크본체로 공급되는 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 5,
Bio-cultivator, characterized in that the exhaust pipe is sealed during the tank body cooling after the heat sterilization process so that only air passing through the air filter is supplied to the tank body.
탱크본체의 내부 압력을 측정하기 위해서 배기관 또는 탱크본체에 압력계가 설치되고, 상기 압력계는 배기관 또는 탱크본체에 착탈 가능하게 설치되는 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 5,
A pressure gauge is installed on the exhaust pipe or the tank body to measure the internal pressure of the tank body, and the pressure gauge is detachably installed on the exhaust pipe or the tank body.
탱크본체의 내부에 수용된 배양액을 냉각시키기 위해서 탱크본체를 둘러싸도록 설치된 냉각용 자켓을 포함하는 것을 특징으로 하는 생물배양기. The method of claim 5,
And a cooling jacket installed to surround the tank body in order to cool the culture solution contained in the tank body.
하부프레임;
탱크본체가 내부에 수납될 수 있고, 하부프레임에 회동 가능하게 설치된 상부프레임; 및
상부프레임을 경사지도록 회동시킬 수 있는 회동수단;을 구비하는 것을 특징으로 하는 생물배양기. The method of claim 5,
Lower frame;
An upper frame can be accommodated inside the tank body, rotatably installed on the lower frame; And
And a rotating means capable of rotating the upper frame to be inclined.
탱크본체의 하부에는 배양 완료된 액체 종균을 외부로 배출하기 위한 배출수단이 구비된 것을 특징으로 하는 생물배양기. The method of claim 5,
The lower part of the tank body is a biological incubator, characterized in that the discharge means for discharging the cultured liquid spawn to the outside.
배출수단은,
탱크본체의 하단과 연통된 배출관;
배출관에 설치되어 배출관을 통한 액체종균의 배출을 조절하는 배출용 밸브; 및
배출관의 끝단을 밀폐하여 배출관의 오염을 방지하는 캡부재;를 구비하는 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 11,
The discharge means,
A discharge pipe communicating with a lower end of the tank body;
A discharge valve installed in the discharge pipe to control discharge of the liquid spawn through the discharge pipe; And
And a cap member sealing the end of the discharge pipe to prevent contamination of the discharge pipe.
하류측 송기관의 하부에는 다수의 공기배출공이 형성된 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 5,
Bio-cultivator, characterized in that a plurality of air discharge holes formed in the lower portion of the downstream side exhaust pipe.
탱크본체의 아랫면은 그 중앙부가 위로 돌출되어 돌출부를 형성하는 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 5,
The lower surface of the tank body is a biocultivator, characterized in that the central portion protrudes upward to form a protrusion.
탱크본체의 내부에 수용된 배양액을 교반하기 위한 교반유니트를 더 구비하고,
상기 교반유니트는,
상기 배양액을 교반하는 교반날개; 및
교반용 모터의 회전력을 교반날개에 전달하는 교반축;을 구비하고, 교반축은 탱크본체의 외부에서 교반용 모터와 연결되어 교반용 모터가 교반축에 착탈가능한 것을 특징으로 하는 생물배양기.The method of claim 5,
Further provided with a stirring unit for stirring the culture solution contained in the tank body,
The stirring unit,
Stirring blade for stirring the culture solution; And
And a stirring shaft for transmitting the rotational force of the stirring motor to the stirring blade, wherein the stirring shaft is connected to the stirring motor from the outside of the tank body, and the stirring motor is detachable from the stirring shaft.
배기관은 탱크본체의 내부와 연통된 상류측 배기관(41) 및, 상류측 배기관(41)의 끝단(42)과 연통된 하류측 배기관(45)을 구비하고,
송기관은 상류측 송기관(31) 및, 상류측 송기관(31)의 끝단(32)과 연통된 하류측 송기관(35)을 구비하고,
우회관은 상류측 송기관(31)의 끝단(32)과 상류측 배기관(41)의 끝단(42)을 서로 연통시키도록 설치되며, 우회관에는 우회관용 밸브가 설치되어 우회관을 선택적으로 개폐시키고,
상류측 송기관(31)에는 공기 공급원으로부터 공급된 공기를 정화하기 위한 공기필터가 설치된 것을 특징으로 하는 액상배양방법. During the heat sterilization of the culture solution contained in the tank body, the heated air or water vapor is discharged to the outside by passing through the inlet of the exhaust pipe, a bypass pipe connecting the exhaust pipe and the exhaust pipe, and sequentially through the exhaust pipe. ,
The exhaust pipe has an upstream exhaust pipe 41 in communication with the interior of the tank body, and a downstream exhaust pipe 45 in communication with an end 42 of the upstream exhaust pipe 41.
The air supply pipe includes an upstream air supply pipe 31 and a downstream air supply pipe 35 in communication with the end 32 of the upstream air supply pipe 31,
The bypass pipe is installed to communicate the end 32 of the upstream side exhaust pipe 31 and the end 42 of the upstream side exhaust pipe 41 with each other. A bypass tube is installed in the bypass pipe to selectively open and close the bypass pipe. Let's
The upstream side exhaust pipe (31) is a liquid phase culture method characterized in that the air filter for purifying the air supplied from the air source.
상기 가열살균은 다수 개의 탱크본체가 수납될 수 있고 상기 배양액을 가열살균할 수 있는 고온이 유지될 수 있는 가압증기멸균기 내부에서 이루어지는 것을 특징으로 하는 액상배양방법.The method of claim 16,
The heat sterilization is a liquid culture method characterized in that the inside of the autoclave can be accommodated a plurality of tank body can be maintained at a high temperature to heat sterilize the culture solution.
상기 가열살균 이후에 배양액을 냉각하는 과정에서 공기 공급원으로부터 공급되는 공기를 상류측 송기관과, 우회관을 순차적으로 경유하도록 하여 탱크본체의 내부에 공급하고, 고압증기멸균이 가능한 상기 공기필터를 이용하여 탱크본체의 내부로 공급되는 공기를 제균하는 것을 특징으로 하는 액상배양방법.The method according to claim 16 or 17,
In the process of cooling the culture medium after the heat sterilization, the air supplied from the air source is supplied to the inside of the tank body through the upstream side pipe and the bypass pipe sequentially, and the air filter capable of autoclaving is used. Liquid culture method characterized in that the air supplied to the inside of the tank body to sterilize.
상기 가압증기멸균기를 이용하여 탱크를 가열살균하는 동안 또는 상기 가열살균 이후에 냉각하는 동안에 상기 배양액이 외부로 배출되지 않도록 하류측 송기관에는 역류방지밸브가 설치된 것을 특징으로 하는 액상배양방법.The method of claim 17,
And a backflow check valve is installed on the downstream side of the pipe so that the culture liquid is not discharged to the outside during the heat sterilization of the tank or the cooling after the heat sterilization using the autoclave.
배양 완료된 액체종균을 탱크본체로부터 배출하기 위해서, 송기관으로부터 공급되는 공기의 양을 배기관을 통해서 배출되는 공기의 양보다 많게 하여 탱크본체 내부의 압력을 높이는 것을 특징으로 하는 액상배양방법.The method according to claim 16 or 17,
In order to discharge the cultured liquid spawn from the tank body, the liquid culture method characterized in that the pressure of the tank body is increased by increasing the amount of air supplied from the exhaust pipe than the amount of air discharged through the exhaust pipe.
상기 가열살균 이후에 배양액을 냉각하기 위해서 탱크본체를 둘러싸도록 설치된 냉각용 자켓에 냉수가 순환되도록 하는 것을 특징으로 하는 액상배양방법.The method according to claim 16 or 17,
Liquid culture method characterized in that the cold water is circulated in the cooling jacket installed to surround the tank body to cool the culture after the heat sterilization.
탱크본체의 내부용량은 50리터 내지 1000리터인 것을 특징으로 하는 액상배양방법.The method according to claim 16 or 17,
Liquid tank culture method characterized in that the internal capacity of the tank body is 50L to 1000L.
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