KR101060514B1 - Functional natural fermented seasonings and kelp fermented powder from kelp fermentation products by yeast and preparation method thereof - Google Patents

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Abstract

본 발명은 (1) 다시마를 고온가압멸균하여 다시마로부터 기능성 다당류(fucoidan 등)와 해조류 유래의 생리활성물질을 비롯한 글루탐산을 추출해서 배지를 준비하는 단계; (2) 상기 배지에 효모를 접종하여 발효시켜 다시마의 이취와 이미를 제거하고, 후코이단 등의 해조 다당류를 저분자화함으로써 후코즈(fucose)와 같은 단당류와 올리고당을 생성하는 단계; (3) 발효산물을 고온가압멸균하여 효모에 함유된 정미성분인 핵산을 추출하는 단계를 포함하는 다시마 발효산물의 제조방법, 그 제조방법에 의해 수득한 다시마 발효산물, 상기 다시마 발효산물의 발효액을 조미료로 제조하는 방법과 그 제조방법에 의해 수득한 다시마 발효 조미료, 상기 다시마 발효산물의 발효잔사를 다시마 발효 분말로 제조하는 방법과 그 제조방법에 의해 수득한 다시마 발효분말에 관한 것이다.The present invention comprises the steps of preparing a medium by extracting glutamic acid including bioactive substances derived from functional polysaccharides (fucoidan) and seaweed from kelp by autoclaving the kelp at high temperature; (2) inoculating the medium with yeast to ferment to remove off-flavor and seaweed of kelp, and to produce monosaccharides and oligosaccharides such as fucose by lowering the molecular weight of seaweed polysaccharides such as fucoidan; (3) a method for preparing kelp fermentation product, the kelp fermentation product obtained by the method, and the fermentation broth of the kelp fermentation product, comprising the step of autoclaving the fermentation product under high temperature The present invention relates to a method for preparing seasonings, a method for preparing kelp fermented seasonings obtained by the method, a method for preparing a fermentation residue of the kelp fermentation product into kelp fermentation powder, and a method for preparing kelp fermentation powder obtained by the method.

다시마, 효모, 글루탐산, 조미료, 발효 분말 Kelp, yeast, glutamic acid, seasoning, fermented powder

Description

효모에 의한 다시마 발효산물로부터 기능성 천연 발효조미료와 다시마 발효분말 및 그의 제조방법{Method for Preparing Functional Natural Fermentation Condiment and Sea-Tangle Fermentation Powder Using Fermentation of Sea-Tangle by Yeast}Method for Preparing Functional Natural Fermentation Condiment and Sea-Tangle Fermentation Powder Using Fermentation of Sea-Tangle by Yeast}

본 발명은 효모에 의한 다시마 발효산물로부터 기능성 천연 발효조미료와 다시마 발효분말 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 보다 자세하게는 (1) 다시마를 고온가압멸균하여 다시마로부터 기능성 다당류(fucoidan 등)와 해조류 유래의 생리활성 물질을 비롯한 글루탐산의 추출과 배지의 준비를 동시에 수행하는 단계; (2) 상기 배지에 효모를 접종하여 발효시켜 다시마의 이취와 이미를 제거하고, 다시마로부터 글루탐산의 추출과 후코이단 등의 해조 다당류를 저분자화함으로써 후코즈(fucose)와 같은 단당류와 올리고당을 생성하는 단계; (3) 발효산물을 고온가압멸균하여 효모에 함유된 핵산을 추출하는 단계를 포함하는 다시마 발효산물의 제조방법, 그 제조방법에 의해 수득한 다시마 발효산물, 상기 다시마 발효산물의 발효액을 조미료로 제조하는 방법과 그 제조방법에 의해 수득한 다시마 발효 조미료, 상기 다시마 발효산물의 발효잔사를 다시마 발효 분말로 제조하는 방법과 그 제조 방법에 의해 수득한 다시마 발효분말에 관한 것이다.The present invention relates to a functional natural fermented seasoning and kelp fermented powder from yeast fermented product by yeast and a method for preparing the same, and more specifically, (1) high-temperature autoclave sterilization of kelp and from functional polysaccharides (fucoidan, etc.) and seaweed derived from kelp. Simultaneously performing extraction of glutamic acid and preparation of a medium including a bioactive substance; (2) inoculating the medium with yeast to ferment to remove off-flavor and seaweed of kelp, and to produce monosaccharides and oligosaccharides such as fucose by lowering the molecular weight of seaweed polysaccharides such as glutamic acid and fucoidan from kelp. ; (3) a method of preparing kelp fermentation products, the kelp fermentation product obtained by the production method, and the fermentation broth of the kelp fermentation product prepared by seasoning the fermentation product by autoclaving at high temperature The present invention relates to a method for preparing kelp fermented seasonings obtained by the method, and a method for preparing kelp fermentation residue of the kelp fermentation product as kelp fermentation powder and a kelp fermentation powder obtained by the method.

우리나라 국민의 연령별 주 사망원인을 보면, 20~30대는 교통사고, 40대는 간질환, 50대 이후에는 혈관질환, 즉 고혈압과 중풍 등으로 조사, 보고되고 있다. 특히 평균수명이 길어지면서 고혈압과 당뇨, 중풍 등의 성인병으로 고생하는 사람의 수가 증가하고 있으며 발생연령도 점차 낮아져 30대, 40대부터 성인병으로 고생하는 사람이 증가하고 있다.The main causes of death by age of Koreans are the traffic accidents in their 20s and 30s, liver disease in their 40s, and vascular diseases in their 50s, such as hypertension and stroke. In particular, as life expectancy increases, the number of people suffering from adult diseases such as hypertension, diabetes, and stroke is increasing, and the age of occurrence gradually decreases, and the number of people suffering from adult diseases is increasing.

때문에 이러한 현상과 관련하여, 최근 현대인들의 건강에 대한 관심과 함께 생활수준의 향상됨에 따른 웰빙(well-being)에 대한 관심이 상호적으로 급속히 높아지면서 음식문화 또한 크게 변화되고 있다. 이에 따라, 자연식품이나, 건강식품, 기능성 식품 등 보다 건강지향적인 식품을 찾고자 하는 노력이 크게 증가하였고, 다수의 사람들이 이와 같은 식습관으로 변화하게 되었다. 이러한 점에서 다시마는 식품의 3차적 기능인 영양적 특성, 기호적 특성 및 생체조절 특성을 모두 갖춘 식품 재료로 나날이 기호도와 소비량이 증가하고 있으며, 생산량 또한 증가하고 있는 추세이다.Therefore, in relation to this phenomenon, the interest in well-being due to the improvement of living standards along with the health of the modern people has been rapidly increasing mutually, and the food culture has also changed greatly. Accordingly, efforts to find more health-oriented foods such as natural foods, health foods, and functional foods have greatly increased, and many people have changed to such eating habits. In this regard, kelp is a food ingredient with all three of the food's nutritional, palatial, and bioregulatory properties, and its taste and consumption are increasing day by day.

이러한 추세에 따라, 최근에는 가공식품의 안전성 및 영양학적 측면의 충족뿐만 아니라 특히 위해성 여부에 대한 소비자들의 인식이 높아져 자연의 맛을 살린 천연조미료 및 기능성 천연식품소재에 대한 관심이 집중되고 있다.In accordance with this trend, in recent years, as well as meeting the safety and nutritional aspects of processed foods, in particular, consumers' awareness of risks has increased, and attention has been focused on natural seasonings and functional natural food materials that utilize the natural taste.

일반적으로 조미료는 식품이 갖고 있는 짠맛, 신맛, 쓴맛을 완화시켜 복잡한 깊고 진한 여운이 남는 감칠맛을 식품에 부여함으로서 맛을 서로 조화시켜 맛있는 맛을 이끌어 내는 기능을 한다. 이러한 조미료는 지금까지 많이 사용되는 것으로 화학적 방법 또는 발효공학적 방법에 의하여 얻는 인공 조미료와 자연 식품으로부터 화학적 및 생물학적 가공 없이 얻는 천연 조미료로 대별된다. 대표적인 인공 조미료에는 조미기능을 발휘하는 것으로 알려진 MSG(Mono Sodium Glutamate) 및 핵산 조미료로서 잘 알려져 있는 이노신산나트륨(Inosine-5'-monophosphate)과 구아닐산나트륨(Guanosine-5'-monophosphate)이 현재 사용되고 있으며, 이러한 인공 조미료는 조미성능을 발휘하는 물질만으로 구성되어 있어 단위 무게당 조미 특성이 우수하여 많이 사용되고 있다. 그러나 인공 조미료는 짠맛, 신맛, 쓴맛을 완화시켜 맛을 조화롭게는 하지만 자체로 자극적인 맛 또는 강한 자극을 혀에 전달한다. 이러한 인공 조미료의 자극에 길들여지면, 인공 조미료의 첨가 없이는 음식의 맛을 느끼기 어렵게 되고 천연의 은근하고 보다 복합화 된 맛을 느끼지 못하는 상태에 이르게 된다. 이러한 이유로 미식가들은 인공 조미료를 사용하지 않거나 사용하더라도 극도로 제한한다. 뿐만 아니라 인공 조미료는 천연의 재료에 비하여 인체에 대한 독성이 높은 것으로 인식되고 있으며 과도한 사용은 실제로 인체에 문제를 발생하기도 한다. 특히 위나 장이 약한 사람에게는 적은 량을 사용하더라도 문제를 일으킨다. 이에 반하여 천연 조미료는 조미 특성을 가지는 성분을 포함하는 천연 재료로 구성된 것이다. 이러한 천연 조미료는 인공 조미료와 같은 인공적인 맛이 아닌 자연스러운 깊은 감칠맛을 제공하지만 인공 조미료에 비하여 단위 무게당 조미 특성이 떨어지기 때문에 보다 효과적인 조미 특성을 발휘하기 위해서는 조미력 이 보다 강하도록 농축시키거나 조미력의 상승효과를 발휘하도록 적절하게 복합화시킬 필요가 있다. 그러나 현재까지는 일반적으로 조미특성이 있는 것으로 알려진 천연재료를 단독으로 또는 단순히 혼합하여 사용하는 것이 보통이었다.In general, seasonings relieve the salty, sour, and bitter taste of the food to give the food a rich flavor that leaves a deep deep dark complex to function to harmonize the taste to bring out the delicious taste. Such seasonings are widely used so far and are classified into artificial seasonings obtained by chemical methods or fermentation engineering methods and natural seasonings obtained from natural foods without chemical and biological processing. Representative artificial seasonings include Monosodium Glutamate (MSG) and Inosine-5'-monophosphate and Guanosine-5'-monophosphate, both of which are well known as seasoning agents. These artificial seasonings are composed of only the material exhibiting the seasoning performance, so the seasoning properties per unit weight is excellent and are used a lot. However, artificial seasonings relieve salty, sour, and bitter tastes, but in harmony with the taste, but by itself delivers a pungent taste or a strong stimulus to the tongue. When tamed by the stimulation of such artificial seasonings, it becomes difficult to feel the taste of food without the addition of artificial seasonings and leads to a state in which the natural coarse and more complex tastes are not felt. For this reason, gourmets are extremely limited, even if they do not use artificial seasonings. In addition, artificial seasonings are considered to be more toxic to humans than natural ingredients, and excessive use may actually cause problems for the human body. Especially for those with weak stomach or bowel, even small amounts cause problems. On the contrary, natural seasonings are composed of natural materials containing ingredients having seasoning properties. These natural seasonings provide a natural deep umami rather than an artificial flavor like artificial seasonings, but the seasoning properties per unit weight are inferior to artificial seasonings. It needs to be properly compounded to exhibit synergistic effects. Until now, however, it has been common to use natural materials, which are generally known to have seasoning properties, alone or simply in combination.

천연 조미료에 대한 종례의 기술을 살펴보면, 옥의 미세분말을 이용한 기능성 조미료(출원번호:10-2002-0036152)를 비롯하여 매실을 이용한 천연조미료 (등록번호:10-0749143), 표고버섯과 다시마를 이용한 천연 조미료 (등록번호;10-0839609), 금강송을 이용한 천연 조미료 (출원번호:10-2006-0071259), 조개, 양파 등을 혼합하여 제조되는 천연 조미료 (출원번호:10-2003-0003439)등 그 종류가 다양해지고 있는 경향을 띄고 있다. 그러나 대부분의 기능성 및 천연 조미료의 경우 대부분이 1차 가공 제품의 채소나, 수산물 (주로 연체동물이나 갑각류)을 함께 혼합하여 제조되는 단순한 천연의 재료를 이용한 조미료에 그치고 있는 실정이며, 현재 일본에서 시판 되고 있는 대부분의 제품들은 원료를 자숙, 건조 후의 분말형태나 열수추출물에 증량제를 가하여 제품화시키고 있다. 또한 종래의 기술 중, 효모엑스의 제조방법(등록번호 : 10-0522945)의 경우 효모를 이용한 핵산 성분의 조미료는 본 발명에 의해 제시된 조미료에서 다시마의 정미성분 이외에 발효 부산물인 효모 균체내의 핵산성분을 추출하는 것과는 그 차이가 확연하다고 할 수 있다. The conventional techniques for natural seasonings include functional seasonings using jade micropowders (Application No.:10-2002-0036152), natural seasonings using plum (Registration No.:10-0749143), natural using shiitake mushrooms and kelp. Seasonings (Registration No .: 10-0839609), Natural seasonings using the Geumgangsong (Application No.:10-2006-0071259), Natural seasonings prepared by mixing shellfish, onions, etc. (Application No.:10-2003-0003439) Tends to diversify. However, most of the functional and natural seasonings are only seasonings made from simple natural ingredients, which are made by mixing together vegetables from primary processing products or aquatic products (mainly mollusks or crustaceans). Most of the products that are being used are commercialized by adding the extender to the raw powder, dried powder form or hot water extract. In addition, in the prior art, in the production method of yeast extract (registration number: 10-0522945), the seasoning of the nucleic acid component using the yeast is a nucleic acid component in the yeast cell that is a by-product of the fermentation in addition to the seasoning component of kelp in the seasoning according to the present invention. The difference with extraction is obvious.

한편, 우리나라는 삼면이 바다로 둘러싸여 있고 한, 난류가 교류하고 있어 비교적 해양생물 자원이 풍부한 입지조건을 가지고 있을 뿐만 아니라 양식 기술의 발달로 미역 다시마 등이 대량 생산되고 있어, 국내 연안에서 생산되는 해조류의 총 생산량은 777천톤에 달하고 있다. 이러한 해양 생물은 높은 염의 농도, 수압 그리고 체표면이 해수에 노출되어 있어 병원 미생물의 침입을 받기 쉽고, 육상생물과는 매우 다른 환경에 서식하고 있으므로 그 진화과정이 육상 생물계와는 전혀 다른 대사계나 생체 방어계를 발전시켜 왔음을 추측할 수 있다. 따라서 해양 천연물의 대사산물들은 새로운 형태의 화학구조와 다양한 생리 활성을 보여주고 있다.On the other hand, Korea is surrounded by the sea on three sides, and there are turbulent exchanges with each other, which not only has abundant marine biological resources, but also produces seaweed kelp, etc., due to the development of aquaculture technology. The total production of 777 thousand tons. Since marine organisms are exposed to seawater because of high salt concentration, water pressure and body surface, they are easily invaded by pathogenic microorganisms, and their evolution is very different from that of terrestrial organisms. It can be assumed that the defense system has been developed. Therefore, the metabolites of marine natural products show new forms of chemical structure and various biological activities.

그러나 해조류의 이용은 단순하여 전체 생산량의 16% 정도만이 가공되고 있으며 그 대부분이 1차 가공품이나 사료로 사용되는 것에 그치고 있다. 따라서 이를 이용한 고차 가공품의 개발이 필요하며, 특히 다시마를 비롯한 해조류의 각종 생리활성물질을 최대한 이용하고 풍부한 비타민이나 무기질 등의 천연성분을 그대로 유지할 수 있는 가공 방법의 개발이 시급한 실정이다.However, the use of seaweed is simple and only 16% of the total production is processed, the majority of which is used only as primary processed products or feed. Therefore, it is necessary to develop a higher order processed product using the same, and in particular, it is urgent to develop a processing method that can make full use of various bioactive substances of seaweeds including kelp and maintain natural ingredients such as rich vitamins and minerals.

해조류 중에서 다시마는 학명이 라미나리아 론기시마(Laminaria longissima)인 갈조류에 속하는 다시마과의 한 속으로서 2~3년생인 해조류이다. 다시마는 육상식물에 비해 비타민 및 미네랄, 특히 마그네슘, 칼슘, 요오드(4000 ppm 이상) 및 철 등의 함량이 높고, 대표적인 정미성분인 천연의 아미노산(Glutamic Acid 및 Aspartic Acid 등)을 다량으로 함유하고 있으며, 고기능성 천연소재로 각광을 받고 있는 수용성 식이섬유인 후코이단(fucoidan) 등과 같은 생리활성이 강한 다당류를 풍부하게 포함하고 있어 이상적인 천연식품으로써 인식되고 있으며 최근에는 기능성 소재나 건강식품으로 많이 이용되고 있다. 최근 다시마의 생리효용성에 관한 국내외 전문가들의 활발한 연구 수행 결과, 다시마가 다이어트 작용, 정장 작용에 의한 변비 치료, 중금속 및 방사능 물질의 체외 배출 작용 등에 깊이 관여하는 것으로 밝혀지고 있다. 그리고 후코이단(fucoidan)으로 통칭되는 함황다당류의 경우 는 항균, 항산화, 항바이러스, 항암활성을 비롯하여 동맥경화, 심근경색, 고혈압, 협심증, 뇌졸중 등의 성인병 예방에 효과적이라고 보고된바 있다.Among seaweeds, kelp is a genus of seaweed, which belongs to the brown seaweed, whose scientific name is Laminaria longissima . Kelp is higher in vitamins and minerals, especially magnesium, calcium, iodine (more than 4000 ppm) and iron, compared to terrestrial plants, and contains a large amount of natural amino acids (such as glutamic acid and aspartic acid), which are representative taste elements. It is recognized as an ideal natural food because it contains abundant physiologically active polysaccharides such as fucoidan, a water-soluble dietary fiber that is spotlighted as a high-functional natural material, and is recently used as a functional material or a health food. . As a result of active research by domestic and foreign experts on the physiological efficacy of kelp, it has been found that kelp is deeply involved in dietary action, treatment of constipation by intestinal action, extracorporeal discharge of heavy metals and radioactive substances. In addition, the sulfur-containing polysaccharide, commonly referred to as fucoidan, has been reported to be effective in preventing adult diseases such as atherosclerosis, myocardial infarction, hypertension, angina pectoris, and stroke, including antibacterial, antioxidant, antiviral, and anticancer activities.

더욱이 생활수준이 급속하게 향상됨에 따라 평균수명이 증가되어 노인인구가 급증하고 개인 건강에 대한 관심이 고조됨에 따라 식품의 3차 기능인 생리활성 조절기능에 대한 관심이 극대화되고 있다. 우리나라는 전통적으로 일상 섭취하는 식품을 통하여 건강을 유지할 수 있다는 생각이 보편화되어 있고 전통의약품도 식품의 형태를 가진 것이 많아 기능성 식품은 오래전부터 우리생활에 깊은 관련성을 가지고 있다. 도시화, 산업화, 핵가족화 됨에 따라 가공식품의 섭취가 증대되고 고혈압, 당뇨, 암 등 성인병의 발병율이 증가되어 국민의 의료 진료비가 지속적으로 증가하고 있어 식품의 기능성 및 유효성이 소비자들의 가장 중요한 관심사항의 하나가 되고 있다. 특히 고혈압은 대표적인 성인병의 하나로 우리나라 뿐 아니라 세계적으로 그 관리 방안이 필요시 되고 있으며 식이요법이 중요한 관리방안의 하나로 활용될 수 있어 혈압강하 기능성식품 소재의 개발을 통한 경증환자의 치료 또는 발병가능성이 있는 사람의 예방을 미리 유도할 필요가 있다.Moreover, with the rapid increase in living standards, the average life expectancy has increased, so the elderly population is rapidly increasing and interest in personal health is increasing. In Korea, the idea of maintaining health through traditionally ingested food is common. Many traditional medicines have a form of food, and functional food has long been deeply related to our lives. With urbanization, industrialization, and nuclear family, the consumption of processed foods increases, and the incidence of adult diseases such as hypertension, diabetes, and cancer increases, and medical expenses for the public are continuously increasing. It is becoming one. In particular, hypertension is one of the representative adult diseases, and its management plan is needed not only in Korea but also globally. As dietary therapy can be used as an important management plan, it is possible to treat or develop mildly ill patients by developing functional food materials for reducing blood pressure. It is necessary to induce human prevention in advance.

다시마는 천연 웰빙식품 소재로서 최근 조미료를 비롯한 해조면류, 해조스낵, 영양 강화식품 등 그 적용성이 점차 확대되어 추출액, 분말, 그리고 분말환의 형태로 널리 이용되고 있으나, 유용물질의 추출 또는 가공하는 과정에서 다시마 특유의 해조 취(갯비린내, 잔내 등)와 쓴맛의 이행 등에 의한 이미, 이취와 관련된 문제로 말미암아 현대인이 요구하는 안전성과 기능성을 보유함에도 불구하고 소비자의 웰빙 수요를 충족시키는 데 있어서 그 한계점을 노출하여 왔다. 또한 다시마 를 비롯한 해조류는 단순히 열수 추출, 단순 페이스트화 및 분쇄한 분말 등을 사용한 단순 가공기술에 지나지 않아 다시마의 조체를 이용할 수 있는 수율이 낮은 치명적인 문제점을 안고 있다.Kelp is a natural well-being food material, and its applicability such as seasoning, seaweed noodles, seaweed snacks, and nutrition-enhanced foods has been gradually expanded and widely used in the form of extracts, powders, and powder rings. Limitations in meeting the consumer's well-being demands despite having the safety and functionality required by modern people already due to problems related to off-flavor, due to the implementation of seaweed odors unique to kelp (such as smelt and glass) and bitter taste Has been exposed. In addition, seaweeds, including kelp, are merely a simple processing technology using hot water extraction, simple pasting and pulverized powder, etc., and have a fatal problem of low yield of using kelp.

특히, 다시마의 경우 추출 및 가공 과정에서 고점도 물질인 알긴산(Algin acid) 등이 용출되어 분리 정제와 같은 현장 가공적성이 매우 불량하여 원가상승의 요인이 되어왔다. 특히 해조류 중 다시마, 미역 등 갈조류에 다량 존재한다고 알려진 후코이단은 함황 다당류로써 이를 추출 분리 정제하기 위하여는 알긴산과 같은 고점도 물질과의 효과적인 분리정제기술이 필연적으로 요구된다. 이러한 후코이단과 같은 기능성 물질의 고순도 분리 정제를 위하여 도입된 정밀여과방식으로는 중공사막, 한외여과방식(ULTRAFILTRATION)이 있으며 이는 평막 또는 할로우파이버(Hollow Fiber)모듈 방식의 멤브레인 필터와 이의 미세공극(Pore Size)을 이용한 가압형 분리정제방식으로 정밀여과공정에 널리 소개되고 있다. 그러나 원활한 한외여과공정의 적용을 위해서는 정밀여과전 예비 필터링(Pre-Filtering)이 선행되어야 할 뿐 아니라, 여과공정 중 멤브레인 필터의 막힘현상(Fouling Phenomena)에 의하여 분리효율이 급격히 감소하는데 특히 해조류 추출액 등 고점도 물질의 경우 분리적성과 운용 경비의 과다 발생 등 대량생산 공정에서의 도입이 불가능하였다. 따라서 다시마를 이용한 기능성물질의 개발 및 이의 상용화를 위하여 이러한 고점도 물질의 정밀 여과할 수 있는 효율적인 고점도물질의 정밀 여과공정의 개발이 필요하며 본 발명에서 이를 해결하고자 한다.In particular, in the case of kelp, alginic acid (Algin acid), which is a highly viscous substance, is eluted during extraction and processing, and it has been a factor of cost increase due to very poor field processing ability such as separation and purification. In particular, fucoidan, which is known to be present in large amounts of seaweed, kelp and brown seaweed in brown algae, is a sulfur-containing polysaccharide and an effective separation and purification technology with high viscosity materials such as alginic acid is inevitably required to extract and purify it. The microfiltration method introduced for high-purity separation and purification of functional materials such as fucoidan includes hollow fiber membrane and ultrafiltration (ULTRAFILTRATION), which is a membrane filter of a flat membrane or hollow fiber module type and its micropores. It is widely used in precision filtration process by pressure type separation purification method using size). However, in order to apply the ultrafiltration process smoothly, pre-filtering should be preceded before microfiltration, and the separation efficiency is rapidly reduced due to the fouling phenomena of the membrane filter during the filtration process. In the case of high viscosity materials, it was impossible to introduce them in the mass production process due to excessive adequacy and excessive operation costs. Therefore, in order to develop a functional material using kelp and commercialization thereof, it is necessary to develop an efficient high-viscosity microfiltration process capable of precisely filtering such high-viscosity material and to solve it in the present invention.

한편 천연 웰빙 식품으로서 다시마는 다이어트식품으로서의 효용성과 후코이 단 등의 고기능성 생리활성 물질을 보유하고 있을 뿐만 아니라, 조미료의 대명사로 널리 알려진 글루탐산을 다량 함유한 전통 천연조미료 소재로써 널리 상용되어왔다. 뿐만 아니라, 다시마에 함유되어 있는 섬유소가 가지는 뛰어난 다이어트효과와 정장기능 등의 건강 효용성을 응용하기 위해서 다시마의 단순가공 형태인 분말 또는 환의 형태로 다시마를 가공하여 섭취하고 있으나 맛과 기호성의 불량으로 인한 대량소비의 한계점을 노출시키고 있으며, 이를 개선시키기 위한 수단으로 해조면류(다시마국수, 톳 국수 등)등의 제조 시 첨가하여 섭취하고 있으나, 그마저도 상기에서 언급한 식감과 향미, 그리고 가공적성 불량 등의 제약으로 인하여 다시마가 가지는 실질적인 효능을 발현하기에는 역부족인 실정이다. 뿐만 아니라 다시마를 추출하고 남은 잔사의 경우, 대부분이 산업폐기물로 분류되어 버려지거나 이를 산업적으로 응용하는데 있어서 단순히 식물 비료나 동물의 사료로 사용되는 수준에 그치고 있으나 본 발명에서는 다시마의 추출과 발효공정이 동시에 수행함으로서 상기의 문제점을 충족시키고자 한다.On the other hand, as a natural well-being food, kelp not only possesses the utility as a diet food and high functional physiologically active substances such as fucoidan, but has been widely used as a traditional natural seasoning material containing a large amount of glutamic acid, which is widely known as a pronoun. In addition, in order to apply the excellent dietary effect of fiber contained in kelp and health benefits such as formal function, kelp is processed in the form of powder or pill, which is a simple processing form of kelp, but due to poor taste and palatability It exposes the limitations of mass consumption, and is used as a means to improve seaweed noodles (Tashima noodles, 톳 noodles, etc.) in addition to the consumption, but even the above-mentioned texture, flavor and poor processability Due to the constraints of kelp, the situation is insufficient to express the substantial efficacy. In addition, most of the residues left after extracting kelp are classified as industrial wastes or merely used as plant fertilizer or animal feed in industrial application. However, in the present invention, the extraction and fermentation process of kelp At the same time, the above problems are solved.

따라서 본 발명자는 본 발명으로 인하여 자연에서 얻을 수 있고 검증된 식재료로서 다시마를 이용한 식품 및 식품소재로서 응용할 경우에 발생하였던 상기의 문제점들을 해결할 수 있는 획기적인 기능성 천연 발효조미료와 다시마 발효분말 및 그의 제조방법을 통하여, 해조취 등의 이미, 이취를 제거함과 더불어 향미증진, 식감개선, 가공적성의 개량, 정미성 보강, 기능성의 강화 등을 가능하게 할 뿐만 아니라 제조공정의 단순화로 인한 경제성과 하나의 제조과정에 의한 두 가지의 제품을 제조함으로서 생산성을 높이고자 한다.Therefore, the present inventors have obtained a functional and natural fermented seasoning and kelp fermentation powder and a method for preparing the same, which can solve the problems caused when applied as a food and food material using kelp as a certified food material obtained from nature and verified by the present invention. By eliminating odor, such as seaweed odor, it is possible not only to improve flavor, to improve texture, to improve processing aptitude, to reinforce taste, to enhance functionality, and to improve economic efficiency due to simplification of manufacturing process. We want to increase productivity by manufacturing two products by process.

이에, 본 발명자는 다시마와 물을 혼합하여, 전체를 고온가압멸균하여 배지를 준비함으로써 다시마를 비롯한 원료로부터의 잡균을 멸균함과 동시에 다시마로부터 정미성분인 글루탐산과 해조 다당류(fucoidan 등)를 추출하고, 이렇게 고온가압멸균된 다시마에 효모를 접종하여 발효시켜 다시마의 해조취 등 이미, 이취를 완전히 제거하고, 글루탐산의 지속적인 추출과 해조 다당류의 단당류(Fucose 등)와 해조류 유래의 올리고당으로의 분해를 유도하며, 발효 종류후에는 다시마 발효산물을 고온가압멸균하여 효모내에 존재하는 정미성분인 핵산을 추출하는 공정을 통해 수득한 다시마 발효 산물에 고함량의 정미성분인 글루탐산과 효모 유래 핵산 그리고 해조 다당류 유래의 단당류와 올리고당이 함유되어 있으면서 다시마의 이미, 이취가 제거됨을 확인하고 본 발명을 완성하기에 이르렀다.Thus, the present inventors mix the kelp and water, and autoclave the whole at high temperature to sterilize various germs from raw materials including kelp, while extracting glutamic acid and seaweed polysaccharides (fucoidan, etc.) from kelp. By inoculating and fermenting yeast to the high-temperature autoclaved kelp, the odor is removed completely, such as seaweed odor of kelp, inducing continuous extraction of glutamic acid and decomposition of seaweed polysaccharides into monosaccharides (Fucose, etc.) and oligosaccharides derived from seaweed. After fermentation, the kelp fermentation product is autoclaved at high temperature to extract the nucleic acid, which is a taste ingredient in yeast, and the glutamic acid, yeast-derived nucleic acid, and algae polysaccharide derived from seaweed polysaccharides. Confirmed that odors of kelp are already removed while containing monosaccharides and oligosaccharides And it completed the present invention.

따라서, (1) 다시마를 120~125℃에서 15~30분간 고온가압멸균하여 다시마를 멸균함과 동시에 다시마로부터 글루탐산과 해조 다당류를 추출함으로써 배지를 준비하는 단계; (2) 상기 배지에 효모를 접종하여 발효시켜 다시마의 이취와 이미를 제거하고, 다시마로부터 글루탐산을 지속적으로 추출하며, 해조 다당류의 단당류와 올리고당으로의 저분자화를 유도하는 단계; (3) 발효산물을 120~125℃에서 15~30분간 고온가압멸균하여 효모에 함유된 핵산을 추출하는 단계를 포함하는 다시마 발효산물의 제조방법을 제공하고자 한다.Accordingly, (1) preparing a medium by sterilizing kelp by hot autoclaving at 120-125 ° C. for 15 to 30 minutes and simultaneously extracting glutamic acid and seaweed polysaccharides from kelp; (2) inoculating the medium with yeast to ferment to remove off-flavor and seaweed of kelp, continuously extracting glutamic acid from kelp, and inducing low molecular weight of seaweed polysaccharides into monosaccharides and oligosaccharides; (3) To provide a method for preparing kelp fermentation products comprising the step of extracting the nucleic acid contained in the yeast by autoclaving the fermentation products at 120-125 ℃ for 15-30 minutes.

또한, 상기 제조방법에 의해 수득한 다시마 발효산물을 제공하고자 한다.In addition, to provide a kelp fermentation product obtained by the above production method.

또한, 상기 다시마 발효산물의 발효산물을 여과하여 발효액과 발효잔사로 분리해서 발효액을 수득하는 단계; (2) 상기 발효액을 정밀여과하는 단계; (3) 정밀여과된 발효액에 식품 보조 첨가제를 첨가하고 분말화하는 단계를 포함한 다시마 발효 조미료의 제조방법을 제공하고자 한다.In addition, filtering the fermentation product of the kelp fermentation product to separate the fermentation broth and the fermentation residue to obtain a fermentation broth; (2) microfiltration of the fermentation broth; (3) To provide a method for preparing kelp fermentation seasoning, including adding and supplementing a food supplement additive to the microfiltered fermentation broth.

또한, 상기 제조방법에 의해 수득한 다시마 발효 조미료를 제공하고자 한다.In addition, to provide a seaweed fermented seasoning obtained by the above method.

또한, 상기 다시마 발효산물을 여과하여 발효액과 발효잔사를 분리해서 발효잔사를 수득하는 단계; (2) 상기 발효액을 정밀여과하여 발효잔사를 수득하는 단계; (3) 상기 단계 (1)과 (2)의 발효잔사를 건조하고 분말화하는 단계를 포함한 다시마 발효 분말의 제조방법을 제공하고자 한다.In addition, filtering the kelp fermentation product to separate the fermentation broth and the fermentation residue to obtain a fermentation residue; (2) microfiltration of the fermentation broth to obtain a fermentation residue; (3) To provide a method for producing kelp fermentation powder comprising the step of drying and powdering the fermentation residues of steps (1) and (2).

또한, 상기 제조방법에 의해 수득한 다시마 발효분말을 제공하고자 한다.In addition, to provide a kelp fermentation powder obtained by the above production method.

본 발명은 (1) 다시마를 120~125℃에서 15~30분간 고온가압멸균하여 다시마를 멸균함과 동시에 다시마로부터 글루탐산과 해조 다당류를 추출함으로써 배지를 준비하는 단계;The present invention comprises the steps of: (1) preparing a medium by sterilizing kelp by hot autoclaving at 120-125 ° C. for 15 to 30 minutes and simultaneously extracting glutamic acid and seaweed polysaccharides from kelp;

(2) 상기 배지에 효모를 접종하여 발효시켜 다시마의 이취와 이미를 제거하고, 다시마로부터 글루탐산을 지속적으로 추출하며, 해조 다당류의 단당류와 올리고당으로의 저분자화를 유도하는 단계; 및(2) inoculating the medium with yeast to ferment to remove off-flavor and seaweed of kelp, continuously extracting glutamic acid from kelp, and inducing low molecular weight of seaweed polysaccharides into monosaccharides and oligosaccharides; And

(3) 발효산물을 120~125℃에서 15~30분간 고온가압멸균하여 효모에 함유된 핵산을 추출하는 단계를 포함하는 다시마 발효산물의 제조방법에 관한 것이다. 이하, 구체적으로 각 단계별로 설명한다.(3) It relates to a method for producing kelp fermentation products comprising the step of extracting the nucleic acid contained in the yeast by autoclaving the fermentation products at 120-125 ℃ for 15-30 minutes. Hereinafter, each step will be described in detail.

1. 다시마의 1. Kelp 고온가압멸균에High temperature autoclave 의한 배지 준비 단계 Medium Preparation Step

다시마를 수차례 물로 수세하여 탈염하고, 다시마로부터 글루탐산과 해조 다당류의 효율적인 추출을 위하여 습식 또는 건식 분쇄한다. 적당한 크기로 분쇄된 다시마를 원료의 상태에 따라 물과 1:2~1:15로 혼합한 후 120~125℃에서 15~30분간 고온가압멸균을 실시한다.The kelp is washed several times with water to demineralize and wet or dry pulverize for efficient extraction of glutamic acid and seaweed polysaccharides from the kelp. The kelp crushed to a suitable size is mixed with water 1: 2 ~ 1: 15 depending on the state of the raw material, and then subjected to autoclaving at 120 ~ 125 ℃ for 15 ~ 30 minutes.

단계 (1)의 고온가압멸균에 의하여 다시마에 함유된 정미성분인 글루탐산과 해조 다당류[예, 후코이단(fucoidan)]를 비롯한 각종 영양 성분이 추출되고, 동시에 미생물(원료내의 잡균)을 멸균할 수 있다는 이점이 있다. 종래에는 다시마를 추출한 후 이 추출물을 고온가압멸균하고 배양하는 방식을 채택하였으나, 본 발명에서는 다시마를 추출하지 않고 다시마를 비롯한 원료를 전체적으로 고온가압멸균하여, 이를 그대로 배지로 사용하여 배양하는 것을 특징으로 하며, 이 고온가압멸균만으로도 각종 미생물(잡균)의 멸균뿐만 아니라 글루탐산과 해조 다당류를 비롯한 각종 영양 성분이 추출될 수 있다.By the autoclaving of step (1), various nutrients, including glutamic acid and seaweed polysaccharides (eg, fucoidan), which are contained in kelp, can be extracted and sterilize microorganisms (hybrid in raw materials) at the same time. There is an advantage. Conventionally, after extracting kelp, the extract was subjected to autoclaving and culturing, but the present invention is characterized by culturing the raw material including kelp as a whole without autoclaving and cultivating it as a medium. In addition, the high temperature autoclaving alone can extract various nutrients including glutamic acid and seaweed polysaccharides as well as sterilization of various microorganisms (microorganisms).

2. 효모의 접종 및 배양2. Inoculation and Cultivation of Yeast

본 발명에서는 발효 미생물로서 효모를 이용한다.In the present invention, yeast is used as the fermentation microorganism.

본 발명에서 효모로는 사카로마이세스 속, 칸디다 속,스키조사카로마이세스 속, 클루베로마이세스 속, 한세눌라 속, 피키아 속에 속하는 효모가 이용될 수 있다. 바람직하게는 효모로 사카로마이세스 세레비시애 또는 칸디다 유틸리스를 이용한다.In the present invention, yeast belonging to the genus Saccharomyces, Candida genus, Schizocarcinaceae genus, Kluberomyces genus, Hanshenula genus, Pichia genus can be used. Preferably Saccharomyces cerevisiae or Candida utility is used as yeast.

전 단계에서 준비된 배지에 효모 중 적어도 하나의 미생물을 접종하여 배양한다. 접종시에는 무균적인 환경을 유지하여 공중낙하균과 같은 잡균에 의한 오염을 방지하며 실시한다. 미생물은 전체 배지 대비 1~5%(v/v)의 양으로 접종하는 것이 적합하다. 발효는 35~40℃에서 2~3일간 진행한다. 효모의 원활한 증식을 위하여 교반과 더불어 멸균 필터로 제균된 공기를 발효조에 지속적으로 공급하여 줌으로써 효모에 의한 최적의 발효조건을 충족시켜 주는 것이 바람직할 것이다.The medium prepared in the previous step is inoculated with at least one microorganism of yeast and cultured. At the time of inoculation, maintain aseptic environment to prevent contamination by various germs such as airborne bacteria. Microorganisms are suitably inoculated in an amount of 1-5% (v / v) relative to the total medium. Fermentation is carried out for 2 to 3 days at 35 to 40 ℃. For smooth growth of the yeast, it would be desirable to satisfy the optimum fermentation conditions by the yeast by continuously supplying the air sterilized with a sterile filter to the fermenter.

발효 과정에서 효모의 증식에 의해 추출공정 이후에도 다시마로부터 글루탐산이 지속적으로 추출되며, 또한 다시마로부터 유래된 해조 다당류 후코이단이 단당류 [예, 후코즈 (fucose)] 및 올리고당으로 저분자화 (즉, 분해)된다. 또한, 효모에 의하여 다시마의 해조취 등 이취, 이미가 제거된다. 따라서, 다시마 발효산물은 다시마의 이취와 이미는 제거되면서 고함량의 글루탐산과, 해조 다당류 유래의 단당류와 올리고당을 함유하게 될 것이다.Glutamic acid is continuously extracted from kelp after the extraction process by the growth of yeast in the fermentation process, and seaweed polysaccharide fucoidan derived from kelp is low-molecularized (ie, decomposed) into monosaccharides (e.g., fucose) and oligosaccharides. . In addition, the yeast odor, such as seaweed odor and seaweed are removed by yeast. Thus, the kelp fermentation product will contain high content of glutamic acid, monosaccharides and oligosaccharides derived from seaweed polysaccharides, while the odor and already removed of the kelp.

3. 3. 발효산물의Fermented products 고온가압멸균Autoclave Sterilization

발효 후에 발효산물을 추가로 고온가압멸균(autoclaving)한다. 고온가압멸균은 120~125℃에서 15~30분간 실시할 수 있다. 단계 (3)의 고온가압멸균에 의하여 발효과정에서 대수적으로 증식한 효모를 멸균할 수 있을 뿐만 아니라 효모에 함유 되어 있는 다량의 핵산을 추출할 수 있다. 핵산은 정미성분으로, 효모로부터 추출된 핵산으로 인하여 본 발명의 발효 산물은 정미성이 강화될 수 있다.After fermentation, the fermentation product is further autoclaving. High temperature autoclaving can be performed at 120 to 125 ° C. for 15 to 30 minutes. By autoclaving in step (3), not only can the sterilization of yeast grown algebraically during fermentation but also extract a large amount of nucleic acid contained in yeast. The nucleic acid is a taste component, the fermentation product of the present invention can be enhanced by the nucleic acid extracted from the yeast.

본 발명은 이상과 같은 제조방법을 통하여 수득한, 다시마 발효산물에 관한 것이다. 상기 다시마 발효산물은 다시마의 해조취 등 이미, 이취가 제거되고, 정미성분인 글루탐산과 효모 유래 핵산 그리고 해조 다당류 유래 단당류(후코즈 등) 및 올리고당을 고함량으로 함유할 것이다. 한편, 본 발명에서는 다시마를 통째로 발효시키는 것을 특징으로 하므로 본 발명의 발효산물은 발효액 (발효산물 중 액상 부분)과 발효잔사 (발효산물 중 고상 부분)이루어져 있다. 본 발명에 따른 발효산물 중 발효액은 조미료로, 발효잔사는 분말로 각각 제조하는 것이 바람직하다.The present invention relates to a kelp fermentation product obtained through the above production method. The kelp fermentation product is already removed, such as seaweed odor of kelp, and will contain high content of glutamic acid, yeast-derived nucleic acid, seaweed polysaccharide-derived monosaccharides (such as fucose) and oligosaccharides. On the other hand, the present invention is characterized by fermenting the kelp as a whole, the fermentation product of the present invention consists of a fermentation broth (liquid portion of the fermentation product) and a fermentation residue (solid portion of the fermentation product). Fermentation broth in the fermentation product according to the invention is preferably prepared as a seasoning, fermentation residues in powder.

또한, 본 발명은 (1) 상기 다시마 발효산물을 여과하여 발효액과 발효잔사로 분리해서 발효액을 수득하는 단계; (2) 상기 발효액을 정밀여과하는 단계; (3) 정밀여과된 발효액에 식품 보조 첨가제를 첨가하고 분말화하는 단계를 포함한 다시마 발효 조미료의 제조방법에 관한 것이다. 이 제조방법에 의해 수득한, 다시마 발효 조미료가 또한 본 발명의 한 측면을 이룬다.In addition, the present invention (1) filtering the kelp fermentation product to separate the fermentation broth and the fermentation residue to obtain a fermentation broth; (2) microfiltration of the fermentation broth; (3) relates to a method for preparing kelp fermented seasonings comprising adding and supplementing food supplement additives to the microfiltered fermentation broth. Kelp fermented seasonings, obtained by this process, also form an aspect of the present invention.

발효액과 발효잔사를 분리하여 발효액만을 수득하는 과정은 이에 제한되는 것은 아니지만, 원심분리 또는 여과에 의해 달성될 수 있다. 여과 시에는 20~200 메쉬(mesh)의 망을 이용하는 것이 바람직하다.The process of separating the fermentation broth from the fermentation broth and obtaining only the fermentation broth is not limited thereto, but may be accomplished by centrifugation or filtration. When filtering, it is preferable to use a 20 ~ 200 mesh (mesh).

이어서, 전 단계에서 얻은 발효액을 정밀여과한다. 정밀여과 시에는 분자량 이 60kDa 이하의 물질만을 통과시키는 '외부 순환식 감압형 분리막'을 이용하는 것이 바람직하다. '외부 순환식 감압형 분리막'을 이용한 정밀여과는 외부로의 노출을 완전히 차단함으로써 발효액의 외부로부터의 오염을 사전에 방지하는 등 발효 후 형성된 발효액의 맛과 향을 손실 없이 그대로 유지시킬 수 있다. 단계 (3)의 고온가압멸균에 의해 사멸된 효모의 사체 등을 완전히 제거하여 정제된 순수한 발효액만을 얻을 수 있다.Subsequently, the fermentation broth obtained in the previous step is microfiltered. In the case of microfiltration, it is preferable to use an 'external circulation pressure reducing membrane' which passes only a substance having a molecular weight of 60 kDa or less. Precision filtration using the 'external circulation pressure-sensitive separator' can completely prevent exposure to the outside, thereby preventing contamination from the outside of the fermentation broth in advance, thereby maintaining the taste and aroma of the fermentation broth formed after fermentation without loss. Only purified pure fermentation broth can be obtained by completely removing dead bodies of yeast and the like which are killed by autoclaving in step (3).

본 발명에서 이용된 '외부 순환식 감압형 분리막' 시스템은 외부의 환경과 격리된 막분리공정으로서 기존의 가압식 공정과는 달리 여과액이 나오는 부분에 자흡식 펌프를 부착하여 감압식으로 70mmHg~400mmHg 사이의 마일드한 조건에서 운전함으로써, 압력에 따른 막의 부담을 감소시킬 뿐만 아니라 여과액 방출부로부터 자흡식 펌프로 액을 흡입하여 여과하기 때문에 펌프와 여과액이 직접적으로 접촉하는 일이 없으며, 저압에서 운전하고 별도의 농축 탱크가 필요 없고, 배관, 밸브 및 시스템의 비용이 최소화되어 경제적이다. 또한, 각각의 멤브레인(모듈)의 하단으로부터 지속적으로 공기를 방출하여 막의 외부 표면에 흡착(fouling 현상)될 수 있는 오염물질을 지속적으로 떨어낼 수 있도록 설계됨에 따라 여과공정이 진행되면서 막의 오염이 가속화되지 않고 지속적으로 안정한 투과성을 가지는 장점을 갖는다(도 2 및 3 참조).The external circulation pressure reducing membrane system used in the present invention is a membrane separation process that is isolated from the external environment, unlike a conventional pressurized process, by attaching a self-suction pump to a portion where the filtrate comes out, between 70mmHg and 400mmHg. By operating under mild conditions, the pressure on the membrane is not only reduced, but the liquid is sucked and filtered by the self-suction pump from the filtrate discharge, so that the pump and the filtrate do not come in direct contact. It is economical because there is no need for a separate concentration tank and the cost of piping, valves and systems is minimized. In addition, it is designed to continuously release the air from the bottom of each membrane (module) to continuously drop contaminants that can be adsorbed (fouling phenomenon) on the outer surface of the membrane as the filtration process proceeds to accelerate the fouling of the membrane It has the advantage of having a continuously stable permeability (see Figs. 2 and 3).

그 다음, 상기 정밀여과된 다시마 발효액에 식품 보조 첨가제(예, 정제염, 덱스트린, 정백당 등)를 혼합하여 동결건조 또는 분무건조함으로써 다시마 발효액을 분말화하여 다시마 발효 조미료를 제조한다.Next, the kelp fermentation broth is prepared by powdering the kelp fermentation broth by lyophilization or spray drying by mixing food auxiliary additives (eg, refined salt, dextrin, white sugar, etc.) with the microfiltered kelp fermentation broth.

또한, 본 발명은 (1) 상기 다시마 발효산물을 여과하여 발효액과 발효잔사를 분리해서 발효잔사를 수득하는 단계; (2) 상기 발효액을 정밀여과하여 남은 발효잔사를 수득하는 단계; (3) 상기 단계 (1)과 (2)의 발효잔사를 건조하고 분말화하는 단계를 포함한 다시마 발효 분말의 제조방법에 관한 것이다. 이 제조방법에 의해 수득한, 다시마 발효 분말이 또한 본 발명의 한 측면을 이룬다.In addition, the present invention (1) filtering the kelp fermentation product to separate the fermentation broth and the fermentation residue to obtain a fermentation residue; (2) microfiltration of the fermentation broth to obtain the remaining fermentation residue; (3) relates to a method for preparing kelp fermentation powder, comprising the step of drying and powdering the fermentation residues of steps (1) and (2). Kelp fermented powder, obtained by this preparation method, also forms an aspect of the present invention.

상기 단계 (1)과 (2)는 전술된 다시마 발효 조미료의 제조방법의 단계(1) 및 (2)와 동일하되, 단계 (1)에서는 발효잔사를 수득하고, 단계 (2)에서는 정밀여과되지 못한, 남은 발효잔사를 수득한다. 정밀여과시에 분자량이 60kDa 이하의 물질만을 통과시키는 '외부 순환식 감압형 분리막'을 이용한 경우에는 발효잔사는 막을 통과하지 못한 60kDa 이상의 물질일 것이다.Steps (1) and (2) are the same as steps (1) and (2) of the above-described method for preparing kelp fermented seasonings, in step (1) to obtain a fermentation residue, and in step (2) it is not microfiltered. The remaining fermentation residue is obtained. In the case of using the 'external circulation pressure reducing membrane' which passes only a substance having a molecular weight of 60 kDa or less during microfiltration, the fermentation residue will be a substance of 60 kDa or more that did not pass through the membrane.

단계 (3)에서는 단계 (1)과 단계 (2)의 발효잔사를 혼합하여 열풍건조기 또는 진공건조기 등을 이용하여 50~70℃에서 6~12시간 동안 건조시킨다. 건조 완료 후 건식 분쇄기 등으로 분말화하여 다시마 발효 분말을 제조한다.In step (3), the fermentation residues of step (1) and step (2) are mixed and dried for 6-12 hours at 50-70 ° C. using a hot air dryer or a vacuum dryer. After the drying is completed, powdered by dry mill or the like to prepare kelp fermentation powder.

종래에 다시마 발효분말은 다시마 추출 후 다시마 잔사를 따로 분리하여 탈수한 후에 적정 습도와 온도를 유지하면서 고상 발효하는 과정을 통하여 제조하였는데, 본 발명에서는 전술된 바와 같이 다시마 전체를 발효시키기 때문에 다시마 발효 분말을 얻기 위하여 별도로 발효시키는 공정이 필요하지 않다. Conventionally, the kelp fermentation powder is prepared through the process of solid phase fermentation while maintaining the appropriate humidity and temperature after separating and dehydrating the kelp residue separately after kelp extraction, in order to ferment the whole kelp as described above, the kelp fermentation powder No separate fermentation process is necessary to obtain.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시예를 보다 상세히 설 명하기로 한다.Hereinafter, with reference to the accompanying drawings will be described in detail a preferred embodiment of the present invention.

도 1은 본 발명에 따른 다시마 발효산물, 다시마 발효 조미료, 다시마 발효 분말의 제조방법의 전반적인 공정의 흐름도를 나타낸 것이다.Figure 1 shows a flowchart of the overall process of the production method of kelp fermentation product, kelp fermentation seasoning, kelp fermentation powder according to the present invention.

다시마의 준비 단계(a)에서는 다시마를 충분한 물을 취하여 수세 및 탈염한 후, 후술되는 고온가압멸균 단계에서 글루탐산, 해조 다당류와 같은 인체에 유용한 성분의 효율적인 추출을 위하여 습식 또는 건식 분쇄한다. In the preparation step (a) of kelp, the water is washed and desalted with sufficient water, and then wet or dry pulverized for efficient extraction of useful components such as glutamic acid and seaweed polysaccharides in the autoclaving step described below.

다시마의 고온가압멸균 단계(b)에서는 적당한 크기로 분쇄된 다시마를 원료의 상태에 따라 다시마와 물을 1:2~1:15의 비율로 혼합한 다음, 글루탐산, 해조 다당류와 같은 인체에 유용한 성분들의 효율적인 추출을 도모하고 효모의 발효를 위하여 상기 혼합물을 121℃에서 15~20분간 고온가압멸균함으로써 인체에 유용한 성분들의 추출과 다시마에 존재하는 잡균의 멸균을 하나의 공정으로 단순화하여 동시에 수행한다. 고온가압멸균 후에 효모의 최적 생육 온도인 37℃까지 냉각한다. In the high temperature autoclaving step (b) , kelp pulverized to a suitable size is mixed with kelp and water in a ratio of 1: 2 to 1:15 depending on the state of the raw material, and then useful components such as glutamic acid and seaweed polysaccharides. In order to promote efficient extraction of these and fermentation of yeast, the mixture is autoclaved at 121 ° C. for 15 to 20 minutes to simultaneously extract the useful components of the human body and sterilization of various germs present in kelp in one process. After autoclaving, it is cooled to 37 ° C., which is the optimum growth temperature of yeast.

효모의 접종 단계(c)에서는 앞서 제조한 고온가압멸균된 배지에 효모를 접종하는 단계로 무균적인 환경을 유지하여 공중낙하균과 같은 잡균에 의한 오염을 방지하면서 실시한다. 여기서, 효모는 배지를 기준으로 하여 1~5%(v/v)가 되도록 접종한다. In the inoculation step (c) of the yeast is inoculated with yeast in the hot autoclaved medium prepared in advance to maintain the aseptic environment to be carried out while preventing contamination by various bacteria such as airborne bacteria. Here, yeast is inoculated to 1 to 5% (v / v) based on the medium.

효모에 의한 다시마의 발효 단계(d)에서는 효모가 배지를 이용하여 대수적으로 생육하면서 생리활성 물질의 생성 및 고분자 다당류 (예: 후코이단) 등의 저분 자화를 유도한다. 특히, 효모가 대수적으로 증식하면서 다시마 옆체를 먹이원으로 이용하기 때문에 다시마로부터 글루탐산이 지속적으로 추출되고, 해조 다당류(후코이단 등)가 단당류(후코즈 등)와 올리고당으로 저분자화된다. 또한, 효모에 의한 발효를 통해 다시마에 존재하는 해조취 등의 이미, 이취를 완전히 제거할 수 있다. 발효는 효모의 충분한 생육을 위하여 37℃에서 2~3일간 실시하며, 원활한 증식을 위하여 교반과 더불어 멸균필터로 제균된 공기를 발효조에 지속적으로 넣어줌으로써 효모에 의한 최적의 발효조건을 충족시켜 준다. In the fermentation step (d) of kelp by yeast , yeast grows algebraically using a medium to induce the production of physiologically active substances and low molecular weight of polymer polysaccharides (eg, fucoidan). In particular, since yeast grows logarithmically, glutamic acid is continuously extracted from kelp as a food source, and seaweed polysaccharides (fucoidan, etc.) are low molecular weight into monosaccharides (fucose, etc.) and oligosaccharides. In addition, it is possible to completely remove off-flavor such as seaweed odor present in kelp through fermentation by yeast. Fermentation is carried out for 2 ~ 3 days at 37 ° C for sufficient growth of yeast, and it satisfies the optimum fermentation conditions by yeast by continuously putting air sterilized with a sterile filter with agitation for smooth growth.

발효산물의 고온가압멸균 단계(e)에서는 효모에 의해 발효가 완료된 발효산물을 121℃에서 15~20분간 고온가압멸균한다. 이로써, 발효기간 중에 대수적으로 증식한 효모를 멸균함과 동시에 전 단계 (d)에서 대수적으로 증가된 효모 내에 함유된 정미 성분인 핵산을 다량으로 추출함으로써 발효산물의 정미성을 보강할 수 있다. Fermented products In the autoclave sterilization step (e) , the fermentation product, which has been fermented by the yeast, is autoclaved at 121 ° C. for 15 to 20 minutes. As a result, the sterility of the fermentation product can be enhanced by sterilizing the yeast grown logarithmically during the fermentation period and extracting a large amount of the nucleic acid, which is a net ingredient contained in the logarithmically increased yeast in the previous step (d).

이어서, 다시마 발효액과 발효잔사의 분리 단계(f)에서는 다시마 발효산물을 메쉬(20~200 메쉬)망을 이용하여 다시마 발효액과 발효잔사로 분리한다.Then, in the separation step (f) of kelp fermentation broth and fermentation residue , the kelp fermentation product is separated into kelp fermentation broth and fermentation residue using a mesh (20 to 200 mesh) network.

다시마 발효액의 정밀여과 단계(g)에서는 앞서 분리한 다시마 발효액을 이용하여 조미료를 제조하는 첫 단계로, 분자량이 60kDa 이하의 물질만을 통과시키는 외부 순환식 감압형 분리막을 이용하여 다시마 발효액을 여과함으로써 상기 단계 (e)의 고온가압멸균 후에 존재하는 효모의 사체와 다시마의 미세한 찌꺼기 등을 완전히 제거함으로써 정제된 다시마 발효액을 생산할 수 있다. In the microfiltration step (g) of kelp fermentation broth, the first step is to prepare a seasoning using the kelp fermentation broth, which has been separated previously, by filtering the kelp fermentation broth using an external circulation pressure-sensitive separator that passes only substances having a molecular weight of 60 kDa or less. Purified kelp fermentation broth can be produced by completely removing dead bodies of yeast and fine debris of kelp existing after autoclaving in step (e).

다시마 발효액의 건조 단계(h)에서는 이렇게 수득한 정제된 다시마 발효액에 식품 보조 첨가제(예, 정제염, 덱스트린, 정백당 등)을 혼합하여 동결건조 또는 분무건조함으로써 다시마 발효액을 분말화하여 다량의 정미성분 및 생리활성물질을 함유하는 다시마 발효 조미료를 완성한다. In the drying step (h) of the kelp fermentation broth, food supplementary additives (e.g., refined salt, dextrin, white sugar, etc.) are mixed with the purified kelp fermentation broth to freeze-dried or spray-dried to powder the kelp fermentation broth to obtain a large amount of The kelp fermented seasoning containing the bioactive substance is completed.

이렇게 제조된 다시마 발효 조미료는 필요에 따라 용량별로 포장하는 단계(i)를 거친다.The kelp fermented seasoning prepared in this way is subjected to step (i) of packaging according to the capacity as necessary.

다시마 발효잔사의 건조 단계(j)에서는 다시마 발효 분말을 제조하는 첫 단계로, 단계(f)에서 메쉬망을 통과하지 못한 발효잔사와 단계(g)에서 정밀여과되지 못한 발효잔사 (즉, 60kDa 이상의 발효잔사)를 혼합한 후 이를 열풍건조기 또는 진공건조기 등을 이용하여 50~70℃에서 6~12시간 건조한다. The drying step (j) of kelp fermentation residue is the first step to prepare the kelp fermentation powder, the fermentation residue that does not pass through the mesh network in step (f) and the fermentation residue that is not microfiltered in step (g) (ie, 60 kDa or more) Fermentation residue) is mixed and dried for 6 to 12 hours at 50 ~ 70 ℃ using a hot air dryer or vacuum dryer.

다시마 발효잔사의 분쇄 단계(k)에서는 다시마 발효잔사를 분말화하는 단계로, 건식 분쇄기 등으로 분말화하여 다시마 발효 분말을 완성한다. In the grinding step (k) of kelp fermentation residue, the kelp fermentation residue is powdered, and the kelp fermentation powder is completed by powdering with a dry mill.

이렇게 제조된 다시마 발효 분말은 전술된 다시마 발효 조미료와 마찬가지로 필요에 따라 용량별로 포장하는 단계(l)를 거친다.The kelp fermentation powder thus prepared is subjected to the step (l) of packaging according to the capacity as needed, as in the kelp fermentation seasoning described above.

본 발명의 제조방법을 통하여 다시마의 해조취 등 이미, 이취가 제거되고, 정미성분인 다시마 유래 글루탐산과 효모 유래 핵산, 그리고 해조 다당류 유래 단당류(후코즈 등)와 올리고당과 같은 생리활성물질을 풍부하게 함유한 천연 조미료를 수득할 수 있다.Algae, such as seaweed odor of kelp, are already removed through the preparation method of the present invention, and abundant bioactive substances such as glutamic acid derived from kelp, yeast-derived nucleic acid, and seaweed polysaccharide-derived monosaccharides (such as fucose) and oligosaccharides Natural seasonings can be obtained.

본 발명의 다시마 발효 조미료는 천연 조미료로서, 각종 화학 조미료의 폐단 을 방지하고, 방부제나 인공 색소가 포함되지 않아 인체에 무해하며 천연 재료만으로 제조함으로써 맛이 개운하면서도 시원한 맛을 지니고, 또한 화학 조미료의 남용과 편식으로 부족해질 수 있는 영양소를 보충해 주는 것과 더 나아가 각종 생리활성물질은 동맥경화, 심근경색, 고혈압, 협심증과 같은 성인병을 예방하는데 기여할 것이다.The kelp fermented seasoning of the present invention is a natural seasoning, which prevents the end of various chemical seasonings, does not contain preservatives or artificial pigments and is harmless to the human body. In addition to supplementing nutrients that can be lacking due to abuse and unbalanced diet, bioactives will contribute to the prevention of adult diseases such as atherosclerosis, myocardial infarction, hypertension and angina pectoris.

이하, 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the examples are only for illustrating the present invention in more detail, and the scope of the present invention is not limited by these examples in accordance with the gist of the present invention, those skilled in the art. Will be self-evident.

<< 실시예Example 1: 효모에 의한 다시마  1: kelp by yeast 발효산물의Fermented products 제조> Manufacturing>

다시마를 여러 차례 수세하여 탈염하고 분쇄한 후 분쇄된 다시마와 물을 1:2~1:15의 비율로 혼합한 후 121℃에서 15~20분간 고온가압멸균하였다. 그 다음 효모(사카로마이세스 세레비시애)를 접종하여 37℃에서 2~3일간 배양하였다. 배양 후 121℃에서 15~20분간 고온가압멸균함으로써, 다시마 발효산물을 수득하였다.The kelp was washed several times, desalted and pulverized, and the crushed kelp and water were mixed at a ratio of 1: 2 to 1:15, and then autoclaved at 121 ° C. for 15 to 20 minutes. Then, inoculated with yeast (Saccharomyces cerevisiae) and incubated for 2 to 3 days at 37 ℃. After incubation at 121 ° C. for 15 to 20 minutes under high temperature autoclave, kelp fermentation products were obtained.

<< 실시예Example 2: 효모에 의한 다시마  2: kelp by yeast 발효산물Fermentation product 중 유리 아미노산 분석> Free Amino Acid Analysis

다시마와 물을 혼합한 후 이를 121℃에서 15~20분간 고온가압멸균하여 배지 를 제조한 다음 이 배지에 본 발명에서 이용된 효모를 비롯한 칸디다 DU-1, 칸디다 DU-2, 칸디다 DU-3의 3종을 각각 무균적으로 접종하고 37℃에서 2일간 발효한 후, 각 배양물로부터 시료를 채취하여 유리 아미노산을 측정하였고, 그 결과를 표 1에 나타내었다.After mixing the kelp and water, the medium was prepared by autoclaving at 121 ° C. for 15 to 20 minutes, and then the candida DU-1, candida DU-2, and candida DU-3, including the yeast used in the present invention. After inoculating each of the three species aseptically and fermented for 2 days at 37 ℃, samples were taken from each culture to measure the free amino acids, the results are shown in Table 1.

효모 발효전과 발효후의 유리 아미노산 조성의 변화Changes in Free Amino Acid Composition Before and After Yeast Fermentation 유리 아미노산Free amino acids 발효전
함량
(㎍/ml)
Before fermentation
content
(占 퐂 / ml)
발효후 함량 (㎍/ml)Content after fermentation (㎍ / ml)
사카로마이세스Saccharomyces DU-1DU-1 DU-2DU-2 DU-3DU-3 o-Phosphoserineo-Phosphoserine 15.54715.547 24.48324.483 24.83924.839 24.80824.808 24.50424.504 TaurineTaurine 25.07125.071 9.8839.883 12.32112.321 12.24412.244 9.8919.891 o-Phophoethanolamineo-Phophoethanolamine 5.2515.251 3.3213.321 6.4276.427 6.2486.248 3.4063.406 UreaUrea -- -- 15.32915.329 -- -- L-Aspartic acidL-Aspartic acid 1490.5621490.562 2142.3962142.396 2193.1862193.186 2205.0262205.026 2157.4482157.448 L-ThreonineL-Threonine 15.52915.529 2.9492.949 2.8172.817 3.2273.227 3.2033.203 L-SerineL-Serine 30.59130.591 1.6591.659 1.2241.224 1.5361.536 1.9411.941 L-Glutamic acidL-Glutamic acid 2875.9922875.992 4214.2404214.240 4106.2144106.214 4125.1154125.115 4062.3964062.396 SarcosineSarcosine -- -- -- -- -- L-2-Aminoadipic acidL-2-Aminoadipic acid -- -- -- -- -- GlycineGlycine 10.43510.435 21.47221.472 21.55621.556 21.64721.647 21.30821.308 L-AlanineL-Alanine 195.872195.872 204.805204.805 234.116234.116 237.561237.561 222.121222.121 L-CitrullineL-Citrulline -- -- -- -- -- DL-2-Aminobutyric acidDL-2-Aminobutyric acid 5.81105.8110 6.3926.392 6.5836.583 6.5406.540 6.3626.362 L-ValineL-Valine 14.11014.110 6.3556.355 6.1366.136 6.5876.587 6.4676.467 L-(-)-CystineL-(-)-Cystine -- -- -- -- 0.7410.741 L-MethionineL-Methionine 1.0501.050 3.1073.107 -3.868-3.868 3.6803.680 3.3293.329 L-CystathionineL-Cystathionine 5.9395.939 3.4823.482 3.4463.446 3.4753.475 3.4323.432 L-IsoleucineL-Isoleucine 5.0215.021 2.7692.769 2.6672.667 3.1653.165 3.1133.113 L-LeucineL-Leucine 5.4365.436 2.6882.688 2.8172.817 3.2123.212 3.1203.120 L-TyrosineL-Tyrosine 5.0785.078 3.0823.082 3.7203.720 3.6433.643 3.0423.042 L-PhenylalanineL-Phenylalanine 4.4254.425 -- -- 0.9210.921 1.0021.002 β-Alanineβ-Alanine 1.8851.885 2.5382.538 2.6672.667 2.6042.604 2.3342.334 DL-3-Aminoisobutyric acidDL-3-Aminoisobutyric acid 1.8451.845 1.0801.080 1.0231.023 1.2541.254 1.3171.317 4-4- AminobutyricAminobutyric acidacid 1.6851.685 2.4902.490 2.4032.403 2.4632.463 2.3402.340 2-Aminoethanol2-Aminoethanol 10.07510.075 15.76415.764 15.82315.823 18.00818.008 15.71715.717 DL-plus allo-δ-HydroxylysineDL-plus allo-δ-Hydroxylysine 5.5775.577 3.3813.381 3.45553.4555 3.4873.487 6.5096.509 L-OrnithineL-Ornithine 4.5854.585 2.8052.805 0.1710.171 2.8532.853 3.0453.045 L-LysineL-Lysine 5.2175.217 2.1392.139 1.8211.821 3.9073.907 2.7602.760 L-1-MethylhistidineL-1-Methylhistidine -- -- -- -- -- L-HistidineL-Histidine -- -- -- -- -- L-3-MethylhistidineL-3-Methylhistidine -- -- -- -- -- L-AnserineL-Anserine -- -- -- -- -- L-CarnosineL-Carnosine -- -- -- -- -- L-ArginineL-Arginine 4.8104.810 0.6420.642 0.5670.567 -- --

표 1을 살펴보면, 다시마 추출액에 비하여 다시마 전체를 발효시킴으로써 다시마의 정미성분인 글루탐산 등의 함량이 약 1000ppm 정도 증대되는 것을 확연하게 알 수 있었다. 이는 다시마 전체를 발효시킴으로써 효모가 다시마로부터 글루탐산을 지속적으로 용출해내기 때문인 것으로 판단된다.Looking at Table 1, it can be clearly seen that fermentation of the whole kelp compared to the kelp extract increases the content of glutamic acid, such as glutamic acid, which is a net taste of kelp. This is because yeast continuously eluts glutamic acid from kelp by fermenting whole kelp.

<< 실시예Example 3: 효모 발효에 의한 다시마의  3: of kelp by yeast fermentation 해조취Algae smell 제거 효과> Removal effect>

다시마 전체를 효모로 발효함으로써 해조취 등의 이미, 이취가 어느 정도 제거되는지 확인하기 위하여 배양일별로 시료를 채취하여 향기 성분을 GC/MS를 이용하여 분석하였다. 분석 결과를 바탕으로 냄새의 강도에 대한 변화를 도 4에 나타내었다.In order to confirm the elimination of algae odors, such as seaweed odors by fermenting the whole kelp with yeast, samples were collected by cultivation days and the fragrance components were analyzed using GC / MS. Based on the analysis results, the change in the intensity of the smell is shown in FIG. 4.

다시마 전체를 효모로 발효하였을 경우, 시간이 경과함에 따라 냄새의 강도가 감소하는 것을 확인하였으며, 발효 2일째에 총 냄새 강도의 절반 이상이 감소되는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 효모의 발효를 통하여 해조취 등의 이미, 이취가 제거되고 자극적이고, 불쾌함을 나타내는 향기성분 등이 줄어드는 것을 간접적으로 나타내어 주는 것으로 판단된다.When the whole kelp fermented with yeast, it was confirmed that the odor intensity decreases with time, and more than half of the total odor intensity was reduced on the second day of fermentation. These results indirectly indicate that the algae odor, such as seaweed odor, is removed through the fermentation of yeast, and the fragrance component, which is irritating and unpleasant, is reduced.

<< 실시예Example 4: 관능검사> 4: Sensory test>

다시마 추출액(A), 다시마 추출액의 발효액(B), 다시마 전체의 발효액(C)에 대하여 관능검사를 실시하였다. 관능시험은 피대상자 50명을 대상으로 하고, 복용시 느껴지는 맛과 향을 1~10점으로 세분화하여 상대적으로 평가된 점수의 평균을 분석하였다. 본 실시예에서 이용된 다시마 추출액(A)는 다시마 추출 후 별도의 여과공정을 거치지 않고 다시마 잔사를 제거한 것을 말하며, 다시마 추출액의 발효액(B)는 다시마 추출 후 공극 크기가 0.1㎛인 외부 순환식 감압형 분리막을 이용하여 여과한 다시마 추출액을 효모를 이용하여 발효한 후 분자량이 60kDa 이하의 물질만을 여과한 발효액을 말하고, 다시마 전체의 발효액(C)는 다시마 전체를 고온가압멸균한 후 효모를 이용하여 발효시킨 다음 이를 분자량이 60kDa 이하의 물질만을 여과한 발효액을 일컫는다.A sensory test was carried out on the kelp extract (A), the fermentation broth (B) of the kelp extract, and the fermentation broth (C) of the whole kelp. In the sensory test, 50 subjects were analyzed, and the taste and aroma of the dose were subdivided into 1 to 10 points. Kelp extract (A) used in this embodiment refers to removing the kelp residue without going through a separate filtration process after kelp extraction, the fermentation broth (B) of kelp extract is an external circulation pressure reduction of 0.1㎛ pore size The kelp extract filtered using a type separation membrane is fermented using yeast, and refers to a fermentation broth in which only a substance having a molecular weight of 60 kDa or less is filtered. The fermentation broth (C) of the whole kelp is subjected to high-temperature autoclave after sterilization. After fermentation, it refers to a fermentation broth in which only a substance having a molecular weight of 60 kDa or less is filtered.

관능검사 결과Sensory test result 항목Item 평균점수Average score 최고점수High score 최하점수Lowest score flavor incense flavor incense flavor incense (A)(A) 2.22.2 1.31.3 44 44 1One 00 (B)(B) 9.59.5 9.19.1 99 88 77 66 (C)(C) 9.89.8 9.49.4 1010 1010 88 88

상기의 결과를 보면, 다시마 추출액(A)의 경우 다시마의 해조취 등의 이미, 이취가 복용시 작용하여 복용하기에 거부감을 일으켰으며, 식품으로서는 부족한 점이 많다는 의견이 대부분을 차지하였다. 효모를 이용하여 발효한 (B) 다시마 추출액의 발효액과 (C) 다시마 전체의 발효액은 대부분의 피대상자들에 의해 시원하면서도 정미성이 좋다는 평가를 받았다. (B)와 (C)의 두 시료를 대상으로 피대상자들의 의견을 수렴한 결과, 다시마 전체를 발효한 (C)가 (B)에 비해 상대적으로 다시마의 시원하고 담백한 맛에서 호감을 더 갖는 것으로 평가되었다. 이러한 평가로 미루어 보아 효모에 의한 발효를 통하여 다시마의 비릿한 해조취 등의 이미, 이취가 제거됨으로써 맛과 향이 향상되고, 다시마 전체를 발효함으로써 영양성의 강화를 비롯한 정미성분이 증가됨으로 인해 맛과 향이 다시마 추출액을 발효하는 것 보다 개선되어지는 것을 알 수 있었다.In view of the above results, in the case of kelp extract (A), such as seaweed odor of kelp, the off-flavor has already caused a sense of rejection to take action by taking, and most of the opinions that food is insufficient. The fermentation broth of (B) kelp extract fermented with yeast and the fermentation broth of (C) kelp were evaluated by most subjects as being cool and tasteful. As a result of collecting the opinions of two subjects (B) and (C), it was found that (C) which fermented whole kelp has more favorable taste in the cool and light taste of kelp than (B). Was evaluated. In view of this evaluation, the taste and aroma are improved by eliminating the off-flavor of seaweed, such as the seaweed odor of kelp through fermentation by yeast, and the taste and aroma are increased by increasing the taste and flavor of the kelp by fermenting the whole kelp. It can be seen that the fermentation extract is improved rather than fermented.

<< 실시예Example 5: 항산화 활성 및 안전성 분석> 5: Antioxidant Activity and Safety Analysis>

본 발명의 다시마 발효액을 항산화 활성에 대하여 알아본 것으로, HTS-DPPH 라디칼 제거 에세이, HTS-과산화물 라디칼 제거 에세이, HTS-크산틴 옥시다제 억제 에세이, HTS-질산 제거 에세이를 3회에 걸쳐 실험한 결과의 평균치를 양성 대조군인 BHA와 비교함으로써 본 발명에 따른 다시마 발효액의 항산화 활성을 판단하였다.The kelp fermentation broth of the present invention was examined for antioxidant activity, and the results of three experiments of the HTS-DPPH radical elimination assay, the HTS-peroxide radical elimination assay, the HTS-xanthine oxidase inhibition assay, and the HTS-nitric acid elimination assay The antioxidant activity of the kelp fermentation broth according to the present invention was determined by comparing the mean value of BHA with the positive control.

5-1: 다시마 발효액에 대한 HTS-DPPH 라디칼 제거 에세이5-1: HTS-DPPH radical elimination assay for kelp fermentation broth

시료를 96 구판에 0.1 ml씩 분주하고 0.4 mM DPPH(α,α'-diphenyl-β-picrylhydrazyl) 용액을 동량 첨가하여 실온에서 30분간 방치한 후 540 nm에서 흡광도를(Wallac 1420, USA) 측정하였다. 이때 대조구인 BHA는 시료와 같은 농도로 첨가하여 위에서와 동일한 방법으로 흡광도를(Wallac 1420, USA)측정하였으며, 3반복을 원칙으로 하여 평균값을 구하였다. 측정 결과는 표 3에 나타내었다.0.1 ml of the sample was dispensed into 96 spheres, and 0.4 mM DPPH (α, α'-diphenyl-β-picrylhydrazyl) solution was added in the same amount and left at room temperature for 30 minutes, and then absorbance was measured at 540 nm (Wallac 1420, USA). . At this time, the control group BHA was added at the same concentration as the sample and the absorbance was measured in the same manner as above (Wallac 1420, USA), and the average value was calculated based on three repetitions. The measurement results are shown in Table 3.

다시마 발효액의 HTS-DPPH 라디칼 제거 에세이 결과HTS-DPPH Radical Removal Essay Results from Kelp Fermentation Broth 시료명Sample Name 농도density 평균Average STDEVSTDEV BHA
(대조군)
BHA
(Control group)
50㎍/ml50 µg / ml 48.748.7 0.70.7
100㎍/ml100 µg / ml 83.883.8 0.50.5 다시마 발효액Kelp fermentation broth 50㎍/ml50 µg / ml 42.542.5 0.60.6 100㎍/ml100 µg / ml 76.976.9 0.90.9

Electronic donating ability (%) = [(공시료군- 반응군)/공시료군]×100Electronic donating ability (%) = [(Gong sample group-reaction group) / Gong sample group] × 100

5-2: 다시마 발효액에 대한 HTS-과산화물 라디칼 제거 에세이5-2: HTS-Peroxide Radical Removal Assay for Kelp Fermentation Broth

시료에 0.5 mM 크산틴과 1 mM EDTA를 200 mM 인산완충용액(pH 7.5) 100㎕에서 준비하였고 50 mU/mL 크산틴 옥시다제를 첨가하여 1시간동안 반응을 유도하였다. 그 후 0.5mM NBT를 첨가한 후 37℃에서 20분 동안 반응 시켰다. 다음 여기에 2.0 N HCl를 첨가하여 반응을 중지시키고 560 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 대조구인 BHA는 시료와 같은 농도로 첨가하여 위에서와 동일한 방법으로 흡광도를(Wallac 1420, USA)측정하였으며, 3반복을 원칙으로 하여 평균값을 구하였다. 측정 결과는 표 4에 나타내었다.0.5 mM xanthine and 1 mM EDTA were prepared in 100 µl of 200 mM phosphate buffer (pH 7.5), and 50 mU / mL xanthine oxidase was added to induce a reaction for 1 hour. After the addition of 0.5mM NBT it was reacted for 20 minutes at 37 ℃. Next, 2.0 N HCl was added to stop the reaction, and the absorbance was measured at 560 nm. At this time, the control group BHA was added to the same concentration as the sample and the absorbance was measured in the same manner as above (Wallac 1420, USA), and the average value was determined based on three repetitions. The measurement results are shown in Table 4.

다시마 발효액의 HTS-과산화물 라디칼 제거 에세이 결과HTS-Peroxide Radical Removal Essay Results from Kelp Fermentation Broth 시료명Sample Name 농도density 평균Average STDEVSTDEV BHA
(대조군)
BHA
(Control group)
50㎍/ml50 µg / ml 56.456.4 0.80.8
100㎍/ml100 µg / ml 93.893.8 0.10.1 다시마 발효액Kelp fermentation broth 50㎍/ml50 µg / ml 49.249.2 1.21.2 100㎍/ml100 µg / ml 83.383.3 0.40.4

과산화물 제거 활성 (%)=(공시료군-반응군)/(공시료군-색보정군)×100Peroxide removal activity (%) = (Glue group-reaction group) / (Glue group-color correction group) x 100

5-3: 다시마 발효액에 대한 HTS-크산틴 옥시다제 억제 에세이5-3: HTS-Xanthine Oxidase Inhibition Assay for Kelp Fermentation Broth

시료와 0.5 mM 크산틴과 1 mM EDTA를 200 mM 인산완충용액(pH 7.5) 100㎕에서 준비하였고 50 mU/mL 크산틴 옥시다제를 첨가하여 1시간동안 요산의 생성을 유도하였다. 크산틴/크산틴 옥시다제에 의한 요산의 생성은 290 nm에서 증가된 흡광도(Wallac 1420, USA)에 의해 측정하였고, 이 때 대조구인 BHA는 시료와 같은 농도로 첨가하여 위에서와 동일한 방법으로 흡광도를(Wallac 1420, USA)측정하였으며, 3반복을 원칙으로 하여 평균값을 구하였다. 측정 결과는 표 5에 나타내었다.Samples, 0.5 mM xanthine and 1 mM EDTA were prepared in 100 μl of 200 mM phosphate buffer (pH 7.5), and the production of uric acid was induced for 1 hour by adding 50 mU / mL xanthine oxidase. The production of uric acid by xanthine / xanthine oxidase was measured by increased absorbance at 290 nm (Wallac 1420, USA), in which the control group BHA was added at the same concentration as the sample to measure the absorbance in the same manner as above. (Wallac 1420, USA) was measured, and the average value was calculated based on three iterations. The measurement results are shown in Table 5.

다시마 발효액의 HTS-크산틴 옥시다제 억제 에세이 결과HTS-Xanthine Oxidase Inhibition Essay Results of Kelp Fermentation Broth 시료명Sample Name 농도density 평균Average STDEVSTDEV BHA
(대조군)
BHA
(Control group)
50㎍/ml50 µg / ml 71.371.3 0.30.3
100㎍/ml100 µg / ml 99.499.4 0.20.2 다시마 발효액Kelp fermentation broth 50㎍/ml50 µg / ml 63.963.9 0.60.6 100㎍/ml100 µg / ml 82.782.7 1.01.0

크산틴 옥시다제 제거 활성(%) =(공시료군-반응군)/(공시료군-색보정군)×100Xanthine oxidase removal activity (%) = (public sample group-reaction group) / (public sample group-color correction group) x 100

5-4: 다시마 발효액에 대한 HTS-질산 제거 에세이 결과5-4: HTS-Nitrate Removal Essay Results for Kelp Fermentation Broth

10 mM SNP 용액 200㎕에 시료를 첨가하고 25℃에서 4시간 동안 반응시켰다. 반응이 끝난 후 반응액과 동일한 양의 Griess시약 [2.5%(v/v) phosphoric acid에서 1%(w/v) sulfanilamide와 0.1%(w/v) naphylethylenediamine]을 첨가하였다. 실온에서 10분 동안 반응시킨 후 540 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 3반복을 원칙으로 하여 평균값을 구하였다. 측정 결과는 표 6에 나타내었다.Samples were added to 200 μl of 10 mM SNP solution and reacted at 25 ° C. for 4 hours. After the reaction, the same amount of Griess reagent [1% (w / v) sulfanilamide and 0.1% (w / v) naphylethylenediamine] in 2.5% (v / v) phosphoric acid was added. After reacting at room temperature for 10 minutes, absorbance was measured at 540 nm, and the average value was determined based on three repetitions. The measurement results are shown in Table 6.

다시마 발효액의 HTS-질산 제거 에세이 결과HTS-Nitrate Removal Essay Results from Kelp Fermentation Broth 시료명Sample Name 농도density 평균Average STDEVSTDEV BHA
(대조군)
BHA
(Control group)
50㎍/ml50 µg / ml 35.335.3 0.60.6
100㎍/ml100 µg / ml 63.963.9 0.70.7 다시마 발효액Kelp fermentation broth 50㎍/ml50 µg / ml 32.532.5 0.50.5 100㎍/ml100 µg / ml 58.158.1 0.70.7

% 억제 = (반응군/대조군)*100% Suppression = (Responder / Control) * 100

도 1은 본 발명에 따른 다시마 발효 산물, 다시마 발효 조미료 및 다시마 발효 분말의 제조방법을 전체적인 공정의 흐름도로 나타낸 것이다.1 is a flow chart illustrating a method of preparing a kelp fermentation product, kelp fermentation seasoning and kelp fermentation powder according to the present invention.

도 2는 외부 순환식 감압형 분리막의 작동 원리를 나타내는 흐름도이다.2 is a flow chart showing the operating principle of the external circulation pressure-sensitive separator.

도 3은 외부 순환식 감압형 분리막의 사진과 공극 크기별로 분획물을 받아내는 과정을 나타내는 흐름도이다.Figure 3 is a flow chart showing a process of receiving the fraction by the pore size and the photograph of the external circulation pressure-sensitive separator.

도 4는 본 발명에 따라 효모로 다시마를 발효시킴으로써 다시마의 이취가 제거됨을 나타내는 그래프이다.Figure 4 is a graph showing that the odor of kelp is removed by fermenting kelp with yeast according to the present invention.

Claims (12)

(1) 다시마를 120~125℃에서 15~30분간 고온가압멸균하여 다시마를 멸균함과 동시에 다시마로부터 글루탐산과 해조 다당류를 추출함으로써 다시마 추출액과 추출잔사로 이루어진 배지를 준비하는 단계;(1) preparing a medium consisting of kelp extract and extract residue by sterilizing kelp by hot autoclaving at 120-125 ° C. for 15-30 minutes and simultaneously extracting glutamic acid and seaweed polysaccharides from the kelp; (2) 상기 배지에 효모를 접종하여 발효시켜 다시마의 이취와 이미를 제거하고, 다시마로부터 글루탐산을 지속적으로 추출하며, 해조 다당류의 단당류와 올리고당으로의 저분자화를 유도하는 단계; 및(2) inoculating the medium with yeast to ferment to remove off-flavor and seaweed of kelp, continuously extracting glutamic acid from kelp, and inducing low molecular weight of seaweed polysaccharides into monosaccharides and oligosaccharides; And (3) 발효산물을 120~125℃에서 15~30분간 고온가압멸균하여 효모에 함유된 핵산을 추출하는 단계를 포함하는 다시마 발효산물의 제조방법.(3) A method for producing kelp fermentation products comprising the step of extracting the nucleic acid contained in the yeast by autoclaving the fermentation product at 120 to 125 ℃ for 15 to 30 minutes. 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 단계 (2)에서 효모는 사카로마이세스 세르비지에 또는 칸디다 유틸리스인 것을 특징으로 하는 제조방법.Yeast in the step (2) is characterized in that Saccharomyces cerbizier or Candida utility. 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 단계 (2)에서 효모는 배지 대비 1~5%(v/v)의 양으로 접종하는 것을 특징으로 하는 제조방법.Yeast in the step (2) is characterized in that inoculated in an amount of 1 ~ 5% (v / v) relative to the medium. 제 1항에 있어서,The method of claim 1, 상기 단계 (2)에서 발효는 35~40℃에서 2~3일간 발효시킴을 특징으로 하는 제조방법.Fermentation in the step (2) is characterized in that the fermentation for 2 to 3 days at 35 ~ 40 ℃. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 따른 제조방법을 통해 수득한 다시마 발효산물.A kelp fermentation product obtained through the production method according to any one of claims 1 to 4. (1) 제 5항에 따른 다시마 발효산물을 여과하여 발효액과 발효잔사로 분리해서 발효액을 수득하는 단계; (2) 상기 발효액을 정밀여과하는 단계; (3) 정밀여과된 발효액에 식품 보조 첨가제를 첨가하고 분말화하는 단계를 포함한 다시마 발효 조미료의 제조방법.(1) filtering the kelp fermentation product according to paragraph 5 into a fermentation broth and a fermentation residue to obtain a fermentation broth; (2) microfiltration of the fermentation broth; (3) A method for preparing kelp fermentation seasoning, comprising the step of adding a food supplement additive to the microfiltered fermentation broth and powdering. 제 6항에 있어서,The method of claim 6, 단계 (2)에서 정밀여과는 60kDa 이하의 물질을 여과하는 외부 순환식 감압형 분리막을 이용하여 실시하는 것을 특징으로 하는 제조방법.In step (2), the microfiltration is carried out using an external circulation pressure-sensitive separator that filters the material of 60 kDa or less. 삭제delete (1) 제 5항에 따른 다시마 발효산물을 여과하여 발효액과 발효잔사를 분리해서 발효잔사를 수득하는 단계; (2) 상기 발효액을 정밀여과하여 발효잔사를 수득하는 단계; (3) 상기 단계 (1)과 (2)의 발효잔사를 건조하고 분말화하는 단계를 포함 한 다시마 발효 분말의 제조방법.(1) filtering the kelp fermentation product according to paragraph 5 to separate the fermentation broth and the fermentation residue to obtain a fermentation residue; (2) microfiltration of the fermentation broth to obtain a fermentation residue; (3) A method for producing kelp fermentation powder comprising the step of drying and powdering the fermentation residues of steps (1) and (2). 제 9항에 있어서,The method of claim 9, 단계 (2)에서 정밀여과는 60kDa 이하의 물질을 여과하는 외부 순환식 감압형 분리막을 이용하여 실시하는 것을 특징으로 하는 제조방법.In step (2), the microfiltration is carried out using an external circulation pressure-sensitive separator that filters the material of 60 kDa or less. 제 9항에 따른 제조방법을 통해 수득한 다시마 발효 분말.Kelp fermented powder obtained through the manufacturing method according to claim 9. 제 10항에 따른 제조방법을 통해 수득한 다시마 발효 분말.Kelp fermented powder obtained through the production method according to claim 10.
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