KR101054913B1 - 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증,동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents

식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증,동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101054913B1
KR101054913B1 KR1020030101482A KR20030101482A KR101054913B1 KR 101054913 B1 KR101054913 B1 KR 101054913B1 KR 1020030101482 A KR1020030101482 A KR 1020030101482A KR 20030101482 A KR20030101482 A KR 20030101482A KR 101054913 B1 KR101054913 B1 KR 101054913B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
hcd
cholesterol
diet
hesperidin
phytosterol
Prior art date
Application number
KR1020030101482A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20050069410A (ko
Inventor
우동호
유은정
이혜영
김종희
우종림
박연성
박태선
Original Assignee
주식회사 삼양제넥스
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 삼양제넥스 filed Critical 주식회사 삼양제넥스
Priority to KR1020030101482A priority Critical patent/KR101054913B1/ko
Publication of KR20050069410A publication Critical patent/KR20050069410A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101054913B1 publication Critical patent/KR101054913B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A23L33/11—Plant sterols or derivatives thereof, e.g. phytosterols
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/3262—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on blood cholesterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/328—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having effect on glycaemic control and diabetes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/20—Natural extracts
    • A23V2250/21—Plant extracts
    • A23V2250/2116—Flavonoids, isoflavones
    • A23V2250/21164—Hesperidin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/20—Natural extracts
    • A23V2250/21—Plant extracts
    • A23V2250/2116—Flavonoids, isoflavones
    • A23V2250/2117—Rutin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/20—Natural extracts
    • A23V2250/21—Plant extracts
    • A23V2250/2136—Phytosterols, phytostanols

Abstract

본 발명은 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물은 체내에서 총콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 및 중성지방 저하뿐만 아니라 체내에 콜레스테롤 축적을 매개하는 효소 활성을 저해하여 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
식물스테롤, 헤스페리딘, 루틴, 콜레스테롤, 중성지방, 동맥경화, 고지혈증

Description

식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물 {Composition comprising phytosterol, hesperidin and rutin for preventing and treating arteriosclerosis, hyperlipidemia and liver disease}
본 발명은 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 식물스테롤 및 플라보노이드 성분인 헤스페리딘, 루틴을 포함하여 혈중 중성지방 농도 저하, HDL-콜레스테롤 농도 증가 효과를 통해 동맥경화 지표 개선 기능을 갖는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
최근 급격한 증가 추세인 고지혈증이란 혈액중에 콜레스테롤 또는 중성지방의 농도가 증가한 상태를 의미하며, 그 자체로서 임상적 소견을 나타내는 질병상태는 아니나 죽상동맥경화증 (atherosclerosis), 더 나아가 심근경색 및 뇌경색을 유발하는 제 1의 위험요인이 되고 있다. 대규모의 역학연구조사 결과 (미국의 Framingham Study)에 의하면 고지혈증 중에서도 특히 고콜레스테롤혈증은 허혈성 심질환 발생률과 매우 밀접한 양의 상관관계를 나타내는 것으로 알려져 있다. 이러 한 상관성은 나이에 따라 달라지는데, 40세 이전에 혈청 콜레스테롤 농도가 증가하는 경우 40세 이후에서 보다 허혈성 심질환 발생율과 더욱 밀접한 관련성을 보이고 있다.? 총 40,000여명을 대상으로 4년 동안 추적 조사한 연구결과를 종합하면, 혈중 콜레스테롤 농도를 10% 감소시키는 경우 첫째로 심장질환에 의한 사망률이 20% 저하되고, 둘째로 심근경색 발생률을 17% 저하시키는 효과가 있음이 보고되었다. 결과적으로 고콜레스테롤혈증의 치료는 관상동맥 심질환을 예방 및 치료하는 가장 효율적인 방법이라고 할 수 있다.
현재 고지혈증 치료제로서 담즙산과 결합하는 레진(resin)들 (예, cholestyramine, colesripol 등), 콜레스테롤 생합성 과정의 주요 효소인 HMG-CoA 환원효소 저해제 [예, 로바스타틴(lovastatin), 플루바스타틴(fluvastatin), 심바스타틴(simvastatin), 프라바스타틴(pravastatin)] 등이 임상에서 사용되고 있으나, 장기복용시 부작용 발생의 우려가 있다. 특히 HMG-CoA 환원효소 저해제인 스타틴계열 약물은 간손상 및 근육병(myopathy)등을 초래할 수 있는 것으로 알려져 있다.
따라서, 고콜레스테롤혈증의 치료는 장기간에 걸친 관리가 필요함을 고려할 때 부작용이 있는 약물보다는 건강기능식품에 의한 관리가 더욱 효과적일 수 있으며, 특히 약물치료가 권장되지 않는 혈중 콜레스테롤 농도 220mg/dl 미만의 준고지혈증 환자의 경우 건강기능식품을 이용한 예방 차원에서의 관리가 절대적으로 필요하다고 할 수 있다.
현재, 각국에서는 상기에서 언급한 각종 성인병 문제를 해결하기 위해 식이 요법과 함께 사용될 각종 건강기능식품 및 고지혈증 치료제의 합성에 주력하고 있는 상황이며, 그중 식물스테롤은 여러 건강기능식품에 응용되고 있다. 식물스테롤은 일반적으로 과일, 채소, 견과류, 곡류, 옥수수, 콩과류 동식물계에 널리 존재하며, 그 효능에 대해서는 1950년대 연구가 시작되었다. 식물스테롤의 구조는 콜레스테롤과 매우 유사하다고 보고되었으며, 현재 식물스테롤이 장내의 콜레스테롤 흡수를 저해하는 사실에 주목하여 연구가 진행되고 있다. 식물스테롤은 인체에 대해서 매우 안전한 물질로 미국 GRAS (Generally Recognized As Safe)로 인정받았으며, 유럽에서도 그 안정성을 인정하였다. 또한 FDA의 과학적 연구 결과에 따르면 식물스테롤 에스터는 1일 13g 섭취시 콜레스테롤 저하 효과가 있는 것으로 FDA가 인정하고 미국국립보건원(NIH)에서 권장하고 있다. 따라서 미국, 유럽 및 일본 등에서는 식물스테롤이 강화된 제품들이 많이 개발 시판되어 콜레스테롤이 높은 환자뿐만 아니라 건강을 염려하는 사람들의 많은 관심을 얻어 의사, 약사, 영양사 등의 의료 식품 전문가들이 식물스테롤이 강화된 식품 선택을 우선적으로 추천하고 있다.
한편, 플라보노이드는 식물의 담황색 또는 노란색 색소화합물로서 수용성이며, 식물의 모든 기관에 널리 분포하는데 천연물로서 자연계에 약 4,000여종이 존재하며, 광범위한 생리학적 및 약리학적 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. 그 중 녹차 폴리페놀은 혈중 LDL-콜레스테롤(low density lipoprotein-cholesterol)을 낮추는 반면 HDL-콜레스테롤(high density lipoprotein-cholesterol)은 유의적으로 증가시키며, 실험동물에서 콜레스테롤 저하 효과를 나타내는 것으로 보고되었다.
감귤류 과피 추출물 또는 이로부터 분리 정제된 헤스페리딘 또는 나린진은 3- Hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A (HMG-CoA) 환원효소의 활성을 저해하여 혈중 콜레스테롤 농도를 낮추는 것으로 알려져 있다 (대한민국특허 출원번호 1996-0045735, 1997-0059427 및 1999-0051434). 또한, 식물스테롤의 구성성분중 하나인 베타-시토스테롤과 다당류인 펙틴을 산성조건하에서 합성시킨 소재를 콜레스테롤 저하 목적으로 사용하였다. (WO 95/00158 및 대한민국특허 출원번호2000-0067634) 그리고 식물스테롤의 흡수를 증가시킬 목적으로 레시친, 단백질 및 오일 등을 사용한 조성물을 개발하였다. (미국특허공보 6,063,776, 6,113,972 및 6,267,963) 그러나 상기한 선행 기술들은 바이오플라보노이드, 다당류 및 식물스테롤의 종래에 알려진 효과, 즉 콜레스테롤 저하 단독 효과만을 나타내 그 적용범위를 크게 벗어나지 못하고 있다.
상기 종래기술의 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 본 발명은 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.?
본 발명은 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것을 또 다른 목적으로 한다.?
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 식물스테롤, 헤스페리딘 또는 헤스페리딘 유도체, 루틴 또는 루틴 유도체를 포함하는 고지혈증, 동맥경화증 간질환 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.
"식물스테롤(phytosterol)"은 통상의 모든 종류의 식물에서 유래되는 스테롤 물질에 대한 통징으로서, 주로 대두유, 옥배유 및 채종유 등 식물성 기름을 고온 진공하에서 최종 탈취하는 과정에서 발생하는 증류성분으로부터 분리, 정제하여 만드는데 이때 유기용매를 단독으로 이용하거나 유기용매와 함께 초임계장치를 이용하게 된다. 이들 식물스테롤은 주로 베타-시토스테롤, 스티그마스테롤, 켐페스테롤 및 브라시카스테롤 등으로 구성된다. 식물스테롤은 구조적으로 콜레스테롤과 유사한데 내부의 이중결합이 수소로 치환되어 환원된 형태를 식물스타놀이라 명명한다. 이 식물스타놀은 제지공장에서 사용되는 펄프를 생산하는 과정에서 부산물로부터 주로 얻어지는데 생체내에서의 기능성은 식물스테롤과 거의 동일한 것으로 보고되고 있다. 따라서 본 발명에 식물스테롤 대신에 식물스타놀을 사용할 수 있고 각각의 단일 스테롤 물질을 이용할 수 있다.
플라보노이드 성분인 헤스페리딘은 감귤류의 과피성분으로부터 주로 얻어지며, 국내에서는 용성 비타민 P로 허가되어 있고, 일반적으로 모세혈관 강화, 혈압 상승억제 작용 및 천연색소의 자외선에 의한 퇴색방지 효과 등이 알려져 있다. 메틸-헤스페리딘(Methyl Hesperidin)은 상기 헤스페리딘을 구성하는 두번째 벤젠고리의 세번째 탄소의 수산기가 메틸기로 치환시킨 형태로써 그 기능성 면에서는 헤스페리딘과 동일한 것으로 알려져 있다.
본원 명세서에서 사용된 용어 "헤스페리딘 유도체" 란 메틸-헤스페리딘, 헤스페리틴, 네오헤스페리딘을 포함하며, 체내에서 상기 화합물의 용해도(Solubility)를 고려할 때 메틸-헤스페리딘을 사용하는 것이 가장 바람직하다.
"루틴(quercetin-3beta-d-rutinoside)" 또한 플라보노이드 성분으로, 메밀, 회화나무, 아스파라거스, 토마토, 감귤류 등 우리가 일상적으로 섭취하는 식물에 폭넓게 존재하며, 주로 메밀이나 회화나무의 꽃봉오리으로부터 추출되는 색소 성분이다. 루틴의 수용성을 증가시키기 위해 포도당 전이효소를 이용하여 루티노사이드 (포도당과 람노스가 결합된 이당류) 측쇄에 당을 결합시킨 형태가 알파-G-루틴인데 항산화성이 우수한 소재로서 기능성면에서 원래의 루틴과 거의 동일한 것으로 알려져 있다.
본원 명세서에서 사용된 용어 "루틴 유도체"는 루틴을 효소전환시켜 측쇄를 변환시킨 것을 의미하며, 상기 유도체에는 알파-G-루틴을 포함된다. 본 발명의 조성물에 있어서 루틴과 루틴 유도체는 상호교환적으로 선택하여 사용할 수 있으며, 체내에서의 용해도를 고려할 때 알파-G-루틴을 사용하는 것이 가장 바람직하다.
본 발명의 조성물은 메틸-헤스페리딘과 알파-G-루틴 외에도 플라보노이드 계통인 나린진, 나린제닌, 네오헤스페리딘, 퀘르세틴, 카테킨 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물에 있어서, 식물스테롤, 헤스페리딘 또는 헤스페리딘 유도체, 루틴 또는 루틴 유도체 알파-G-루틴의 배합비율은 1 : 0.4~1 : 0.4~1 중량비가 바람직하며, 더욱 바람직하기로는 1: 0.4 : 0.4의 중량비로 혼합하는 것이다.
본 발명의 조성물은 각각의 단일 성분을 단독으로 사용하였을 때 보다 식물 스테롤, 헤스페리딘, 루틴을 함께 사용함으로써 혈중 중성지방, 총콜레스테롤 및 LDL(low-density lipoprotein)-콜레스테롤 농도, 간조직의 중성지방 농도를 동시에 효과적으로 감소시킬 수 있으며, 동맥경화 지표 개선에 있어서 상승효과를 나타내고, 간조직의 ACAT (acyl-CoA: cholesterol acyltransferase) 활성을 저해하므로 조직내 콜레스테롤 축적을 감소시킨다.
본 발명에 따른 조성물은 약학 조성물 또는 식품 조성물일 수 있으며, 본 발명에서 식품 조성물이라 함은 식품, 식품 첨가제, 음료 및 음료첨가제 등을 포함하는 의도이다. ?
또한 상기의 성분 외에 조성물에는 총 중량부에 대하여 1 내지 99.9 중량부로 약제학적으로 허용되는 1종 이상의 부형제를 첨가하여 약제로 제조할 수 있다. 부형제로는 마그네슘 스테아레이트, 셀룰로오스, 일반전분, 아미노산 등이 있으나 이에 한정되지 않으며, 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제는 모두 사용 가능하다. ?
상기 조성물은 통상적인 일반 조제법에 따라 경고제, 과립제, 산제, 시럽제, 액제, 유동엑스제, 유제, 현탁제, 침제, 정제, 주사제, 캅셀제, 크림제, 트로키제, 파스타제 등의 제형으로 제조할 수 있으며, 경구로 사용될 수 있다. 상기 조성물의 투여량은 특별히 제한을 받지는 않으나 일예로 1일 2 내지 3그람을 사용할 수 있다. 상기 투여량은 이에 한정되진 않으며, 환자의 연령, 성별, 상태, 체내에서 활성 성분의 흡수도, 불활성율 및 배설속도, 질병 종류, 병용되는 약물에 따라 달리 적용되는 것이 바람직하다.
본 발명에서 특별한 언급이 없는 한 %는 중량%를 의미한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐 이들 실시예에 의하여 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 본 발명 조성물의 혈당, 혈중 지질농도, 동맥경화지표, 간기능 지표 효소의 활성도, 간조직내 콜레스테롤 대사 효소의 활성, 혈장 및 간 조직내 지질 과산화물 농도에 대한 영향 조사
실험예 1-1 : 동물투여 실험
식물스테롤, 메틸-헤스페리딘 및 알파-G-루틴을 포함하는 본 발명 조성물의 기능성을 평가하기 위하여 실험식이를 실시하였다.
실험에 사용된 동물은 스프라그-돌리(Sprague-Dawley)계 수컷 흰쥐 (4주령, 100±10그람)로 고형사료로 5일간 실험실 환경에 적응시킨 후 난괴법 (Randomized complete block design)에 의해 8군으로 분류하여 각 실험식이로 5주간 사육하였다. 사육실의 사육환경은 온도 24℃, 습도 55±5%, 그리고 광주기는 매일 12시간이 되도록 유지하였다. 식이 섭취량은 매일 오전 11시에서 오후 12시 사이에 그리고 체중은 1주일에 한번씩 측정하였다.
식물스테롤은 시판되는 제품 (Generol 122N, Cognis, 독일)을 구입하여 사용하였고 플라보노이드의 일종인 메틸-헤스페리딘 (Hesperidin Methyl Chalcone, Chong Qing Economic & Technological Development, 중국)과 알파-G-루틴 (알파-G-루틴 PS, 동양정당, 일본)을 함께 사용하였다.
본 실험에 사용된 8가지 실험식이의 자세한 조성은 표 1에 기재한 바와 같다. 정상 대조식이 (ND)는 AIN-93 (Philip et al., J Nutr 123(11): 1939-1951, 1993) 실험식이 조성에 따라 제조하였으며, 고콜레스테롤 대조식이 (HCD)의 경우 정상식이(ND)와 동일하되 1% (wt/wt) 콜레스테롤을 혼합하였고, 고콜레스테롤/메틸-헤스페리딘 첨가 식이 (HCD+H) 또는 고콜레스테롤/식물스테롤 첨가 식이 (HCD+P)는 각각 0.1% 메틸-헤스페리딘 또는 0.25% 식물스테롤을 첨가하였다. 고콜레스테롤/식물스테롤+레시친 첨가 식이 (HCD+PL)는 HCD+P와 동일하되 0.15% 레시친을 첨가하였다. 고콜레스테롤 식이에 0.25% 식물스테롤, 0.1% 메틸-헤스페리딘 및 0.1% 알파-G-루틴을 복합 처방한 식이군을 HCD+FA라 명명하였으며, 상기 HCD+FA 식이군에 0.15% 레시친을 추가하여 처방한 식이군을 HCD+FB라 명명하였다. 실험식이군에 있어서는 상기 첨가된 물질들의 양만큼 옥수수전분에서 제외하여 식이의 총량을 조절하였으며, 정상식이군의 경우 수돗물을, 그리고 고콜레스테롤 식이군 (나머지 6군)의 경우 0.5% 에탄올이 첨가된 수돗물을 식이와 함께 자유급식시켰다.
조성물과 단일성분과의 기능성 비교를 위한 식이조성 (단위 : % diet)
성분 식이그룹 ND 1) HCD? HCD+H? HCD+P? HCD+PL? HCD+FA? HCD+FB?
옥수수전분 (삼양제넥스) 39.749? 38.749? 38.649? 38.499? 38.349? 38.299? 38.149?
알파-전분 (삼양제넥스) 13.2? 13.2? 13.2? 13.2? 13.2? 13.2? 13.2?
설탕 (삼양사) 10.0? 10.0? 10.0? 10.0? 10.0? 10.0? 10.0?
카제인 (Scerma, 59290, 프랑스) 20.0? 20.0? 20.0? 20.0? 20.0? 20.0? 20.0?
L-시스틴 (시그마, 미국) 0.3? 0.3? 0.3? 0.3? 0.3? 0.3? 0.3?
대두 오일 (CJ, 한국) 7.0? 7.0? 7.0? 7.0? 7.0? 7.0? 7.0?
미네랄 혼합물 2) 3.5? 3.5? 3.5? 3.5? 3.5? 3.5? 3.5?
비타민 혼합물 3)? 1.0? 1.0? 1.0? 1.0? 1.0? 1.0? 1.0?
셀룰로오스 분말 (보락, 한국) 5.0? 5.0? 5.0? 5.0? 5.0? 5.0? 5.0?
Choline bitartrate (시그마, 미국) 0.25? 0.25? 0.25? 0.25? 0.25? 0.25? 0.25?
Tert-butylhydroquinone (시그마) 0.001? 0.001? 0.001? 0.001? 0.001? 0.001? 0.001?
콜레스테롤 (니폰사, 일본) -? 1.0? 1.0? 1.0? 1.0? 1.0? 1.0?
식이별 첨가 소재 ? ? ? ? ? ? ?
메틸-헤스페리딘 -? -? 0.1? -? -? 0.1? 0.1?
식물스테롤 -? -? -? 0.25? 0.25? 0.25? 0.25?
레시친 -? -? -? -? 0.15? -? 0.15?
알파-G-루틴 -? -? -? -? -? 0.1? 0.1?
Total (%)? 100 ? 100 ? 100 ? 100 ? 100 ? 100 ? 100 ?
1) AIN-93 식이에 준함
2) AIN-93 미네랄 혼합물 (AIN-93G-MX; ICN Biomedical사, 미국)
3) AIN-93 비타민 혼합물 (AIN-93-VX; ICN Biomedical사, 미국)
ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet), HCD+H (고콜레스테롤 식이+메틸-헤스페리딘), HCD+P (고콜레스테롤 식이+ 식물스테롤), HCD+PL (고콜레스테롤+식물스테롤+레시친), HCD+FA (고콜레스테롤+식물스테롤+메틸헤스페리딘+루틴), HCD+FB (고콜레스테롤식이+ 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+ 루틴+레시친)
5주 동안 사육한 실험동물을 16시간 절식시킨 후 에틸 에테르로 마취시킨 상태에서 개복하고 복부 대동맥으로부터 혈액을 채취하였다. 헤파린으로 처리된 튜브를 사용하여 채혈하였으며, 채취된 혈액은 1000×g, 4℃에서 15분간 원심분리하여 혈장을 분리시키고 생화학분석시까지 -80℃에서 냉동보관하였다. 혈액 채취가 끝난 즉시 간을 적출하여 0.9% 염화나트륨용액으로 세척 후 무게를 측정하였고, 액체질소에서 snap-freeze시킨 후 지질과 효소활성분석시까지 -80℃에 보관하였다. ?
모든 자료의 통계분석은 Statistical Analysis System (SAS version 8.01, SAS Institute Inc, Cary, NC) PC 패키지를 사용하여 실시하였고, 분석 수치는 평균±편차로 나타냈다. 실험식이에 따른 유의적인 차이는 ANOVA (one way analysis of variance)를 실시하여 검증하였고, p<0.05 수준에서 유의성이 관찰된 경우 각 실험군간의 평균값의 차이에 대한 유의성은 던컨 다중검정법(Duncan's multiple range test)을 이용하여 평가하였다
실험예 1-2 : 식이에 따른 공복시 혈당 농도 측정
상기 실험예 1-1에서 식이시킨 쥐의 공복시 혈당을 효소법에 이용한 상업용 키트 (Glucose-E kit, 영동제약)를 이용하여 505 nm에서 측정하였다. 고콜레스테롤 식이에 알코올 섭취를 병행시킨 고콜레스테롤 식이 대조군 (HCD)의 공복시 혈당 농도는 141±8.2mg/ml으로 나타나 정상식이군(ND)의 159±4.49mg/ml과 유의적인 차이가 없었다. HCD에 메틸-헤스페리딘을 단독으로 첨가한 실험군(HCD+H) 또는 HCD에 식물스테롤을 단독으로 첨가시킨 실험군(HCD+P)에서 혈당 농도에 유의적인 변화가 없었으나, 고콜레스테롤 식이 대조군에 식물스테롤+레시친(HCD+PL), 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴(HCD+FA) 또는 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴+레시친(HCD+FB)을 첨가시켜 사육한 군의 혈당 농도는 각각 119±6.68mg/dl, 112±2.48mg/dl 또는 116±5.36mg/dl으로 나타 나 HCD군에 비해 유의적으로 더 낮았다 (p<0.05). 이중 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘 및 알파-G-루틴을 첨가한 실험군(HCD+FA)에서 가장 높은 혈당조절효과를 나타냄을 알 수 있었다(표 2).?
상기 결과는 고콜레스테롤 식이에 첨가된 단일성분들은 그 자체로는 혈당 조절효과가 없었으나, 조성물을 섭취한 경우 혈당 저하효과가 있음을 나타낸 것이다.알 수 있었으며, 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘 및 알파-G-루틴을 첨가한 실험군(HCD+FA)에서 가장 높은 혈당조절효과를 나타냄을 알 수 있었다(표 2).?
식이에 따른 혈당 농도
식이그룹 ND HCD HCD+H HCD+P HCD+PL HCD+FA HCD+FB
혈당(mg/dl) 159±4.5a 141±8.2a 141±5.7a 148±7.2a 119±6.7b 112±2.5b 116±5.4b
수치는 평균±표준편차 (n = 8)
수치옆의 다른 영문 알파벳은 유의적으로 차이있음을 의미 (p<0.05)
ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet), HCD+H (고콜레스테롤 식이+메틸-헤스페리딘), HCD+P (고콜레스테롤 식이+식물스테롤), HCD+PL (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+레시친), HCD+FA (고콜레스테롤+ 식물스테롤+ 메틸헤스페리딘 +루틴), HCD+FB (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+
메틸헤스페리딘+루틴+레시친)?
실험예 1-3: 식이에 따른 혈중 지질농도 변화 조사
혈장 중성지방 (Triglycerides kit, 영동제약) 및 총콜레스테롤 농도 (Cholesterol E kit, 영동제약)는 상업용 키트를 이용하여 각각 측정하였다. HDL-콜레스테롤 농도는 상업용 (HDL-cholesterol kit, 영동제약)을 이용하였는데, 덱스트란 설페이트와 마그네슘 설페이트에 의해 LDL-콜레스테롤 및 VLDL-콜레스테롤을 침전시킨 후 남아 있는 상층액의 HDL-콜레스테롤 함량을 비색 정량하였다. 혈장의 VLDL+LDL-콜레스테롤 농도는 혈장 총콜레스테롤 농도에서 HDL-콜레스테롤 농도를 뺀 값으로 하였다.
실험식이로 5주간 사육한 동물의 혈장 지질농도는 표 3에 나타내었다. 고콜레스테롤 대조군 (HCD)과 정상식이군간에 혈장 중성지방 농도에 유의적인 차이가 관찰되지 않았다. 고콜레스테롤 대조군에 메틸-헤스페리딘(HCD+H), 식물스테롤(HCD+P), 식물스테롤+레시친(HCD+PL) 또는 메틸-헤스페리딘+ 식물스테롤+알파-G-루틴+레시친(HCD+FB)를 첨가시킨 군의 혈장 중성지방 농도를 고콜레스테롤 대조군에 비에 낮은 경향을 보였으나, 유의적인 차이는 아니었다. 그러나 고콜레스테롤 대조군에 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴(HCD+FA)를 첨가한 군 (14.4±0.78 mg/dl)의 혈장 중성지방 농도는 고콜레스테롤 대조군 (20.4±1.29 mg/dl)에 비해 29% 유의적으로 더 낮았다 (p<0.05). 즉, 식물스테롤 단일성분에 비해 식물스테롤에 메틸-헤스페리딘과 알파-G-루틴을 함께 첨가한 경우 혈장 중성지방 농도가 감소하는 경향을 보인 반면, 식물스테롤에 레시친을 함께 첨가한 경우에는 식물스테롤만 섭취시킨 군에 비해 혈장 중성지방 농도가 오히려 증가하는 경향을 보였다 (P<0.05).
고콜레스테롤 대조군 (125.8±8.99mg/dl)의 혈장 총콜레스테롤 농도는 정상 식이군 (85.8±4.98mg/dl)에 비하여 47% 정도 높게 나타났다 (p<0.05). 고콜레스테롤 대조군에 메틸-헤스페리딘을 단독으로 첨가시킨 결과, 혈장 총콜레스테롤 농도에 유의적인 변화가 없었고 고콜레스테롤 대조군에 식물스테롤(HCD+P), 식물스테롤+레시친(HCD+PL), 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴(HCD+FA) 또는 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴+레시친(HCD+FB)를 첨가시킨 결과 혈장 총콜레스테롤 농도가 각각 82.4±6.73mg/dl, 103.4±13.85mg/dl, 81.5±5.73mg/dl 또는 92.7±5.49 mg/dl으로 나타나 고콜레스테롤 대조군에 비해 유의하게 더 낮았다 (p<0.05). 특히, 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘, 알파-G-루틴을 첨가한 식이군(HCD+FA)은 혈장 총콜레스테롤 농도가 35% 감소된 것으로 나타나 가장 효과적이었다.
콜레스테롤과 알코올 섭취를 병행한 고콜레스테롤 대조군(HCD)의 혈장 HDL-콜레스테롤(high density lipoprotein-cholesterol) 농도는 24.8±2.51mg/dl으로 나타나 정상식이군 (53.1±3.03 mg/dl)에 비해 53% 더 낮았다 (p<0.05). 고콜레스테롤 대조군에 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘, 알파-G-루틴을 첨가한 군(HCD+FA)의 HDL-콜레스테롤 농도가 가장 높은 수치를 나타냈다. 이는 식물스테롤만 첨가한 군(HCD+P)에 비해 37% 유의하게 증가한 수준이다 (p<0.05).
고콜레스테롤 대조군(HCD)의 혈장 VLDL+LDL-콜레스테롤 농도는 101.1±3.81mg/dl로 나타나 정상식이군 (32.7±2.53mg/dl)에 비해 209% 더 높았다 (p<0.05). 그러나 고콜레스테롤 대조군에 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘, 알파-G-루틴(HCD+FA)을 첨가시킨 결과 50.7±7.06mg/dl을 나타내 혈장 VLDL+LDL-콜레스테롤 농도가 50% 수준으로 가장 낮게 유의적으로 감소함을 알 수 있었다 (p<0.05). 따라서, 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘, 알파-G-루틴은 고콜레스테롤 식이를 섭취한 흰쥐의 혈장 VLDL+LDL- 콜레스테롤 농도 강하 효과가 가장 우수하였으며, 이는 총콜레스테롤 농도에서 관찰된 결과와 유사하였다.
식이에 따른 혈중 지질 농도의 변화 (단위 : mg/dl)
항목 식이그룹 ND? HCD? HCD+H? HCD+P? HCD+PL? HCD+FA? HCD+FB?
중성지방? 19.5 ab?
± 1.24?		 20.4 ab?
± 1.29?		 18.4 abc?
± 1.51?		 16.0 bc?
± 1.34?		 19.3 ab?
± 1.83?		 14.4 c?
± 0.78?		 16.5 bc?
± 0.86?
총콜레스테롤 85.8 c?
± 4.98?		 125.8 ab?
± 8.99?		 133.9 a?
± 11.07?		 82.4 c?
± 6.73?		 103.4 bc?
± 13.85?		 81.5 c?
± 5.73?		 92.7 c?
± 5.49?
HDL-콜레스테롤? 53.1 a?
± 3.03?		 24.8 bc?
± 2.51?		 27.9 bc?
± 2.31?		 22.5 c?
± 2.86?		 27.8 bc?
± 2.07?		 30.9 b?
± 2.84?		 27.4 bc?
± 1.90?
VLDL+LDL-콜레스테롤 1)? 32.7 cd?
± 2.53?		 101.1 a?
± 3.81?		 106.0 a?
± 12.12?		 60.0 bc?
± 7.87?		 75.6 b?
± 13.91?		 50.7 bcd?
± 7.06?		 65.4 b?
± 4.02?
수치는 평균±표준편차 (n = 8)
수치옆의 다른 영문 알파벳은 유의적으로 차이있음을 의미 (p<0.05)
ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet), HCD+H (고콜레스테롤 식이+메틸-헤스페리딘), HCD+P (고콜레스테롤 식이+식물스테롤), HCD+PL (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+레시친), HCD+FA (고콜레스테롤+ 식물스테롤+ 메틸헤스페리딘 +루틴), HCD+FB (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+
메틸헤스페리딘+루틴+레시친)?
1) VLDL+LDL-콜레스테롤 = 총콜레스테롤-HDL-콜레스테롤
실험예 1-4: 식이에 따른 동맥경화지표의 변화 조사
실험동물의 동맥경화지표 (atherogenic indices)를 평가한 결과를 표 4에 나 타내었다. 콜레스테롤과 알코올 섭취를 병행한 고콜레스테롤 대조군 (HCD, 0.80±0.09)의 경우 정상식이군 (ND, 0.37±0.03)에 비해 HDL-콜레스테롤 농도에 대한 혈장 중성지방 농도의 비율이 116% 더 높았다(p<0.05). 고콜레스테롤 대조군에 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴(HCD+FA)을 식이시킨 결과 위의 비율 (0.50±0.06)이 가장 낮게 38% 정도 유의하게 감소하였다 (p<0.05).
HDL-콜레스테롤 농도에 대한 악성인 VLDL 및 LDL-콜레스테롤 농도 (혈장 총콜레스테롤 농도에서 HDL-콜레스테롤 농도를 뺀 값)의 비율을 계산한 결과 고콜레스테롤 대조군의 경우 HDL-콜레스테롤 농도에 대한 악성인 VLDL 및 LDL-콜레스테롤 농도비가 4.28±0.51로 나타나 정상식이군(ND, 0.62±0.04)에 비해 590% 더 높아 고콜레스테롤 식이 및 알코올 섭취에 의해 동맥경화 위험성이 현저하게 증가하였음을 알 수 있었다 (p<0.05). 고콜레스테롤 대조군에 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴(HCD+FA, 1.52±0.26)를 첨가하여 섭취시킨 결과 고콜레스테롤 대조군(HCD)에 비해 HDL-콜레스테롤 농도에 대한 악성인 VLDL 및 LDL-콜레스테롤 농도비가 64% 유의적으로 감소하였다 (p<0.05). 이는 고콜레스테롤 대조군에 메틸-헤스페리딘, 식물스테롤을 단독으로 첨가한 경우와 비교하여 본 발명의 조성물은 매우 우수한 항동맥경화작용이 있음을 알 수 있었다.?
식이에 따른 동맥경화 지표의 변화
식이그룹 항목 중성지방/HDL-콜레스테롤 1)? (총콜레스테롤-HDL-콜레스테롤)/HDL-콜레스테롤 2)?
ND? 0.37 ±0.03?d 0.62 ±0.04 d
HCD? 0.80 ±0.09? a 4.28 ±0.51? a
HCD+H? 0.70 ±0.08? ab 4.08 ±0.62? a
HCD+P? 0.77 ±0.08? a 3.17 ±0.75? ab
HCD+PL? 0.63 ±0.08? abc 2.89 ±0.64? ab
HCD+FA? 0.50 ±0.06? bcd 1.52 ±0.26? cd
HCD+FB? 0.63 ±0.06? abc 2.42 ±0.13? bc
수치는 평균±표준편차 (n = 8)
수치옆의 다른 영문 알파벳은 유의적으로 차이있음을 의미 (p<0.05)
ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet), HCD+H (고콜레스테롤 식이+메틸-헤스페리딘), HCD+P (고콜레스테롤 식이+식물스테롤), HCD+PL (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+레시친), HCD+FA (고콜레스테롤+ 식물스테롤+ 메틸헤스페리딘 +루틴), HCD+FB (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+
메틸헤스페리딘+루틴+레시친)?
1) 중성지방 (mg/dl) / HDL-콜레스테롤 (mg/dl)
2) [총콜레스테롤 (mg/dl) -HDL-총콜레스테롤 (mg/dl)]/HDL-콜레스테롤
실험예 1-5: 식이에 따른 간기능 지표 효소의 활성도 변화 조사
간세포가 파괴되면 세포내에 고농도로 함유되어 있던 GOT(glutamate oxaloacetate transeferase) 및 GPT(glutamate pyruvate transferase) 등의 효소가 혈액으로 유출되므로 혈장에서 이들 효소의 활성이 증가하게 되고, 따라서 혈장 GOT 및 GPT 활성은 간염, 간경변 및 괴사 등과 같은 질병시 간 손상 정도를 반영하는 지표로 활용된다. 5주간 실험식이를 섭취한 흰쥐의 혈장 GOT 및 GPT 활성을 분석하여 표 7에 나타내었다. 고콜레스테롤 대조군 (HCD)의 혈장 GOT 활성은 90.6±2.49U/L로 나타나 정상식이군 (ND, 72.4±5.07U/L)에 비해 25% 더 높았고 (p<0.05) 고콜레스테롤 식이에 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘, 알파-G-루틴(HCD+FA)를 첨가하여 섭취시킨 쥐의 혈장 GOT 활성은 HCD군에 비해 감소하는 경향을 보였다.
식이에 따른 간기능 지표 효소의 활성도 변화
식이그룹 ND HCD HCD+H HCD+P HCD+PL HCD+FA HCD+FB
GOT 1) 72.4±5.1d 90.6±2.5bc 101.9±7.6ab 86.1±2.0bcd 107.2±6.0a 79.8±2.2cd 101.1±8.9ab
GPT 2) 21.8±0.9c 26.8±1.3abc 27.8±1.9abc 27.3±1.5abc 30.8±2.3ab 26.5±1.3abc 33.3±5.0a
수치는 평균±표준편차 (n = 8)
수치옆의 다른 영문 알파벳은 유의적으로 차이있음을 의미 (p<0.05)
ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet), HCD+H (고콜레스테롤 식이+메틸-헤스페리딘), HCD+P (고콜레스테롤 식이+식물스테롤), HCD+PL (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+레시친), HCD+FA (고콜레스테롤+ 식물스테롤+ 메틸헤스페리딘 +루틴), HCD+FB (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+
메틸헤스페리딘+루틴+레시친)?
1) Glutamate oxaloacetate transferase, 2) Glutamate pyruvate transferase
실험예 1-6: 식이에 따른 간조직내 콜레스테롤 대사 효소의 활성 변화?
HMG-CoA 환원효소(3-Hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A 환원효소)는 간 조직에서 HMG-CoA로부터 콜레스테롤을 합성하는 과정에서 중요한 속도 결정 효소이 며, ACAT(acyl coenzyme A : cholesterol acyltransferase)는 조직에 유리 콜레스테롤 농도가 증가한 상황에서 유리 콜레스테롤을 콜레스테롤 에스테르로 전환하여 간조직에 저장시키는 과정을 촉매하는 효소이다. 5주간 실험식이로 사육한 후 간조직에서 콜레스테롤 대사효소의 활성을 분석하여 표 6에 나타내었다. 고콜레스테롤 대조군 (HCD)의 간조직 ACAT 활성은 154±5.53pmole · min-1 ·mg protein-1로 정상식이군(ND)과 유의한 차이가 없었으나, 고콜레스테롤 대조군에 메틸-헤스페리딘을 단독으로 첨가시킨 결과 간조직의 ACAT 활성에 유의적인 변화가 나타나지 않은 반면, 식물스테롤(HCD+P), 식물스테롤+레시친(HCD+PL), 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴(HCD+FA) 또는 식물스테롤+메틸-헤스페리딘+알파-G-루틴+레시친 (HCD+FB)를 첨가시킨 군의 간조직 ACAT 활성은 HCD군에 비해 최대 18%까지 유의하게 더 낮았다 (p<0.05). 따라서, 고콜레스테롤 식이와 알코올 섭취를 병행하는 흰쥐를 대상으로 한 본 발명의 조성물의 섭취는 콜레스테롤 생합성에 유의적인 영향을 미치지 않았으나 간조직의 ACAT 활성을 저해하므로써 조직내 콜레스테롤 축적을 유의적으로 감소시켰음을 알 수 있다.
식이에 따른 간조직내 콜레스테롤 대사 효소의 활성 변화?
식이그룹 HMG-CoA reductase? ACAT 1)
(pmole ·min-1 ·mg protein-1)
ND? 117 ±9.91? NS 157 ±4.76? a
HCD? 116 ±4.51 154 ±5.53? ab
HCD+H? 119 ±6.10 143 ±3.90? bc
HCD+P? 113 ±3.00 135 ±3.38? cd
HCD+PL? 113 ±5.53 136 ±3.90? cd
HCD+FA? 109 ±2.70 133 ±3.43? cd
HCD+FB? 109 ±6.39 126 ±3.97? d
수치는 평균±표준편차 (n = 8)
수치옆의 다른 영문 알파벳은 유의적으로 차이있음을 의미 (p<0.05) , NS 유의차 없음.ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet), HCD+H (고콜레스테롤 식이+메틸-헤스페리딘), HCD+P (고콜레스테롤 식이+식물스테롤), HCD+PL (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+레시친), HCD+FA (고콜레스테롤+ 식물스테롤+ 메틸헤스페리딘 +루틴), HCD+FB (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+ 메틸헤스페리딘+루틴+레시친)?
1) acyl coenzyme A : cholesterol acyltransferase
실험예 1-7: 식이에 따른 혈장 및 간조직내 지질과산화물 농도 변화?
혈장의 지질과산화물 농도를 평가하기 위하여 형성된 TBARS(thiobarbituric acid reactive substances) 농도를 분석하였다. 15% TCA(trichloroacetic acid)(w/v), 0.375% TBA(thiobarbituric acid)(w/v)와 0.25 N 염산 용액 (TCA-TBA-HCl reagent) 0.8 ml에 혈장 0.4 ml을 가하여 잘 섞은 후, 95℃에서 15분간 가열한 다음 얼음 위에서 3분 동안 식혔다. 2000×g에서 10분간 원심분리한 후 상층액을
취하여 535nm(DU530 Life Science UV/Vis Spectrophotometer, USA)에서 말론다이알데하이드(malondialdehyde)표준용애고가 비교하여 비색 정량하였다.
간조직의 지질과산화물농도를 측정하기 위해 간균질액 0.2ml에 8.1% SDS(sodium dodecyl sulfate) 0.2ml과 증류수 0.6ml을 가하여 혼합한 후, 실온에서 5분 동안 반응시켰다. 20% 초산 (pH 3.5) 1.5 ml과 0.8% TBA(thiobarbituric acid) 용액 1.5ml을 넣고 95℃ 진탕수조에서 60분간 가열하였다. 혼합액을 얼음 위에서 5 분 동안 식히고 반응을 종결시킨 후 증류수 1ml과 n-부탄올:피리딘 (15:1, v/v) 혼합액 5 ml을 가하여 잘 섞었다. 원심분리 (1000×g, 20℃, 15분)하여 얻은 상층액의 흡광도를 532nm에서 말론다이알데하이드(malondialdehyde) 표준용액과 비교하여 비색 정량하였다.
5주간의 실험식이로 사육한 흰쥐의 혈장 및 간조직에서 지질과산화물 농도를 측정하여 표 7에 나타내었다. 고콜레스테롤 대조군 (HCD, 1.32±0.05umol/L)의 혈장 지질과산화물 농도는 정상식이군 (ND)과 차이가 없었으나 고콜레스테롤식이(HCD)에 메틸-헤스페리딘(HCD+H) 또는 식물스테롤(HCD+P)을 단독으로 첨가시킨 결과 지질과산화물 농도가 38% 또는 36% 유의하게 증가하였다 (p<0.05). 따라서, 메틸-헤스페리딘 또는 식물스테롤을 단독으로 고콜레스테롤 식이에 첨가하는 경우 혈장의 지질과산화를 촉진하나 본 발명의 조성물은 단일 성분에 의해 증가된 지질과산화를 오히려 감소시키는 효과가 있었다.?
고콜레스테롤식이군(HCD)의 간조직 지질과산화물 농도는 정상식이군과 유의한 변화가 나타나지 않았다. 혈장에서 관찰된 결과와 유사하게 메틸-헤스페리딘 또는 식물스테롤 단독 섭취에 의해 증가한 간조직의 지질과산화물 농도는 이들 성분을 복합적으로 보충하므로서 오히려 감소하는 경향을 보였다 (p<0.05).
식이에 따른 혈장 및 간조직내 지질과산화물 농도 변화?
식이그룹 항목 혈장? 간?
(㎛ol MDA 1) /L)? (nmol MDA /g liver)?
ND? 1.42 ±0.06? bc 36.6 ±0.61? d
HCD? 1.32 ±0.05? cd 35.4 ±1.69? d
HCD+H? 1.82 ±0.13? a 41.5 ±1.56? cd
HCD+P? 1.80 ±0.12? a 51.1 ±3.41? a
HCD+PL? 1.27 ±0.10? cd 46.4 ±2.72? abc
HCD+FA? 1.35 ±0.09? bcd 34.0 ±1.69? bc
HCD+FB? 1.61 ±0.11? ab 48.7 ±2.37? ab
수치는 평균±표준편차 (n = 8)
수치옆의 다른 영문 알파벳은 유의적으로 차이있음을 의미 (p<0.05)
ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet), HCD+H (고콜레스테롤 식이+메틸-헤스페리딘), HCD+P (고콜레스테롤 식이+식물스테롤), HCD+PL (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+레시친), HCD+FA (고콜레스테롤+ 식물스테롤+ 메틸헤스페리딘 +루틴), HCD+FB (고콜레스테롤 식이+식물스테롤+메틸헤스페리딘+루틴+레시친)?
1) MDA : malondialdehyde
실시예 2 : 혈중 지질대사 개선에 있어서 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘 및 알파-G-루틴의 최적 배합비 도출
식물스테롤, 메틸-헤스페리딘, 알파-G-루틴을 포함하는 조성물에 있어서, 상기 성분의 최적 배합비를 결정하기 위하여 각각의 첨가비율을 달리하여 스프라그-돌리(Sprague-Dawley)계 수컷 흰쥐 (4주령, 100±10그람)에 5주간 투여하였다. 주요 성분의 배합비는 하기 표 8과 같으며, 실험조건은 상기 실시예 1의 방법과 동일하게 실시하였다.
주요 성분의 배합비를 달리한 식이조성 (단위 : % diet)
성분 식이그룹 ND 1) HCD? HCD+FA1 HCD+FA2 HCD+FA3 HCD+FA4 HCD+FA5
옥수수전분 (삼양제넥스) 39.749 38.749 38.449 38.149 38.249 38.299 37.749
알파-전분 (삼양제넥스) 13.2 13.2 13.2 13.2 13.2 13.2 13.2
설탕 (삼양사) 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0
카제인 (Scerma, 59290, 프랑스) 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0 20.0
L-시스틴 (시그마, 미국) 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
대두 오일 (CJ, 한국) 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0
미네랄 혼합물 2) 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5 3.5
비타민 혼합물 3)? 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
셀룰로오스 분말 (보락, 한국) 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
Choline bitartrate (시그마, 미국) 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25
Tert-butylhydroquinone (시그마) 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001 0.001
콜레스테롤 (니폰사, 일본) - 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
식이별 첨가 소재
메틸-헤스페리딘 - - 0.1 0.1 0.2 0.1 0.3
알파-G-루틴 - - 0.1 0.2 0.1 0.1 0.3
식물스테롤 - - 0.1 0.3 0.2 0.25 0.4
Total (%)? 100 100 100 100 100 100 100
1) AIN-93 식이에 준함, 2) AIN-93 미네랄 혼합물 (AIN-93G-MX; ICN Biomedical사, 미국), 3) AIN-93 비타민 혼합물 (AIN-93-VX; ICN Biomedical사, 미국)
ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet)
HCD+FA1 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=1:1:1)
HCD+FA2 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=1:2:3)
HCD+FA3 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=2:1:2)
HCD+FA4 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=1:1:2.5)
HCD+FA5 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=3:3:4)
배합비에 따른 혈장 지질농도는 표 9에 나타내었는데 메틸-헤스페리딘, 알파-G-루틴 및 식물스테롤의 배합비를 1 대 1대 2.5로 한 경우 (FA4)가 고콜레스테롤 대조식이에서 다른 배합비에 비해 혈중 중성지방, 총콜레스테롤 및 악성 콜레스테롤의 감소 효과가 보다 우수하였으며, 체내에서 지질대사에 좋은 영향을 미치는 HDL-콜레스테롤의 경우도 다른 배합비보다 높게 나타남으로써 유리하였다.1111
조성물의 배합비에 따른 지질대사 개선 효과 비교 (단위 : mg/dl)
항목 식이그룹 ND? HCD? HCD+FA1 HCD+FA2 HCD+FA3 HCD+FA4 HCD+FA5
중성지방? 19.5 ab?
± 1.24?		 20.4 ab?
± 1.29?		 18.7 abc?
± 1.28?		 16.5 bc?
± 1.14?		 17.3 bc?
± 1.63?		 14.4 c?
± 0.78?		 16.9 bc?
± 0.76?
총콜레스테롤 85.8 c?
± 4.98?		 125.8 ab?
± 8.99?		 110.9 a?
± 10.07?		 82.9 c?
± 6.93?		 89.4 bc?
± 12.65?		 81.5 c?
± 5.73?		 88.7 c?
± 5.25?
HDL-콜레스테롤? 53.1 a?
± 3.03?		 24.8 bc?
± 2.51?		 27.1 bc?
± 2.38?		 21.5 c?
± 2.84?		 27.7 bc?
± 2.04?		 30.9 b?
± 2.84?		 27.1 bc?
± 1.80?
VLDL+LDL-콜레스테롤 1)? 32.7 cd?
± 2.53?		 101.1 a?
± 3.81?		 96.0 a?
± 11.17?		 60.3 bc?
± 6.42?		 65.6 b?
± 8.90?		 50.7 bcd?
± 7.06?		 63.2 b?
± 3.92?
수치는 평균±표준편차 (n = 8)
수치옆의 다른 영문 알파벳은 유의적으로 차이있음을 의미 (p<0.05)
ND 정상식이 (normal diet), HCD 고콜레스테롤 식이 (high cholesterol diet)
HCD+FA1 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=1:1:1)
HCD+FA2 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=1:2:3)
HCD+FA3 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=2:1:2)
HCD+FA4 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=1:1:2.5)
HCD+FA5 (고콜레스테롤 식이, 메틸-헤스페리딘:루틴:식물스테롤=3:3:4)
1) VLDL+LDL-콜레스테롤 = 총콜레스테롤-HDL-콜레스테롤
실시예 3 : 메틸-헤스페리딘, 알파-G-루틴 및 식물스테롤을 주요 성분으로 하는 건 강식품용 조성물 제조
상기의 실험결과를 바탕으로 하여 아래의 성분들을 포함하는 건강식품용 조성물을 제조하였다.
식물스테롤 224 mg
메틸-헤스페리딘 88 mg
알파-G-루틴 88 mg
셀룰로오스 56 mg
L-발린 20 mg
스테아린산 마그네슘 4 mg
총 480 mg
상기 성분들을 잘 혼합하여 캅셀당 총 480 mg이 되도록 경질 젤라틴 또는 셀룰로오스 캅셀에 충전하였다. 제조된 캅셀을 하루에 5개씩 섭취함으로써 체내 콜레스테롤, 중성지방을 부작용없이 효율적으로 낮춤으로써 동맥경화의 위험성을 경감시킬 수 있었다.
상기에 언급한 바와 같이, 본 발명의 식물스테롤, 메틸-헤스페리딘 및 알파-G-루틴을 포함하는 조성물은 고콜레스테롤 식이에서 단일 성분의 첨가에 비해 혈중 콜레스테롤 및 중성지방을 동시에 현저하게 저하시킬 수 있었다. 특히 본 발명은 단일 성분에 비해 고콜레스테롤 식이에서 체내에 콜레스테롤 축적을 매개하는 효소 활성을 저해하며, 또한 동맥경화지표를 뚜렷하게 개선하는 효과가 있어 건강 기능 식품 소재 및 약학적 용도로 폭넓게 사용할 수 있다. ??

Claims (6)

  1. 식물스테롤, 헤스페리딘 또는 헤스페리딘 유도체, 및 루틴 또는 루틴 유도체를 포함하며,
    상기 식물스테롤, 헤스페리딘 또는 헤스페리딘 유도체, 및 루틴 또는 루틴 유도체의 배합비율이 1:0.4:0.4 중량비인 것을 특징으로 하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 헤스페리딘 유도체는 메틸-헤스페리딘임을 특징으로 하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 루틴 유도체는 알파-G-루틴임을 특징으로 하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물.
  4. 삭제
  5. 제 1항에 있어서, 네오헤스페리딘, 나린진, 퀘르세틴, 카테킨 군으로부터 선택된 어느 하나 이상을 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물.
  6. 제 1항에 있어서, 상기 식물스테롤은 베타-시토스테롤, 스티그마스테롤, 캄페스테롤, 브라시카스테롤 및 이들의 스타놀 형태가 혼합되어 있는 액상유지의 탈취증류분이나 펄프 가공시 부산물로부터 추출된 식물스테롤임을 특징으로 하는 고지혈증, 동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물.
KR1020030101482A 2003-12-31 2003-12-31 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증,동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물 KR101054913B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020030101482A KR101054913B1 (ko) 2003-12-31 2003-12-31 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증,동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020030101482A KR101054913B1 (ko) 2003-12-31 2003-12-31 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증,동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20050069410A KR20050069410A (ko) 2005-07-05
KR101054913B1 true KR101054913B1 (ko) 2011-08-05

Family

ID=37259824

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020030101482A KR101054913B1 (ko) 2003-12-31 2003-12-31 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증,동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101054913B1 (ko)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990062596A (ko) * 1997-12-09 1999-07-26 도시오 미야께 혈액순환 개선제
KR20000035619A (ko) * 1998-11-26 2000-06-26 프리돌린 클라우스너, 롤란드 비. 보레르 피토스테롤 및/또는 피토스타놀 유도체

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990062596A (ko) * 1997-12-09 1999-07-26 도시오 미야께 혈액순환 개선제
KR20000035619A (ko) * 1998-11-26 2000-06-26 프리돌린 클라우스너, 롤란드 비. 보레르 피토스테롤 및/또는 피토스타놀 유도체

Also Published As

Publication number Publication date
KR20050069410A (ko) 2005-07-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Kreft Buckwheat phenolic metabolites in health and disease
Mäkynen et al. Cultivar variations in antioxidant and antihyperlipidemic properties of pomelo pulp (Citrus grandis [L.] Osbeck) in Thailand
Espín et al. Nutraceuticals: facts and fiction
EP0930889B1 (en) CITRUS PEEL EXTRACT AS 3-HYDROXY-3-METHYLGLUTARYL CoA(HMG-CoA) REDUCTASE INHIBITOR
Luo et al. Evaluation of antioxidative and hypolipidemic properties of a novel functional diet formulation of Auricularia auricula and Hawthorn
Ojo et al. Inhibition of paracetamol-induced oxidative stress in rats by extracts of lemongrass (Cymbropogon citratus) and green tea (Camellia sinensis) in rats
CA2640414C (en) Combinations of botanical extracts for promoting cardiovascular health
WO2002056899A1 (en) Compositions and methods for reducing oxysterols in blood
RU2327463C2 (ru) Лекарственный препарат и пищевой продукт или напиток для улучшения гипергликемического состояния
JP2014511171A (ja) 機能性食品製剤及びその使用
US7989006B2 (en) Annatto extract compositions, including geranyl geraniols and methods of use
Tanaka et al. Safety evaluation of supercritical carbon dioxide extract of Aloe vera gel
CA2847543C (en) Annatto extract compositions, including geranyl geraniols and methods of use
Yousefi et al. Insights to potential antihypertensive activity of berry fruits
EP2752195A1 (en) Grape extract, nutritional supplement comprising grape extract, and the use thereof as a functional ingredient
WO2018163095A1 (en) Compositions for the treatment of cardiovascular disease
WO2008018142A1 (fr) Composition antioxydante contenant un composant issu de l&#39;écorce d&#39;un arbre appartenant au genre acacia
EP3169322B1 (en) Dietetic composition with antidyslipidemic activity
KR101054913B1 (ko) 식물스테롤, 헤스페리딘 및 루틴을 포함하는 고지혈증,동맥경화증 및 간질환 예방 및 치료용 조성물
Hassan et al. Irvingia gabonensis baill.(African Mango): A comprehensive review of its ethnopharmacological significance, unveiling its long-standing history and therapeutic potential
JP2010077065A (ja) サラシア属植物を含有する経口用組成物
Pranita et al. Anti-Diabetic Effect of Singi Fruit (Dillenia serrata) in Male Rats (Rattus novergicus) Induced with a High-Fat Diet
TW200401645A (en) Enteric fat absorption inhibitors containing plant extract and foods containing the same
Zubaidah et al. Physicochemical characteristics of kombucha based on various concentration of white turmeric (Curcuma zedoaria (Berg.) Roscoe)
Molz et al. Antioxidant and lipid lowering activity of Persea major extract on triton WR 1339 induced hyperlipidemia in mice.

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20140618

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20150603

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160601

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170605

Year of fee payment: 7

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180605

Year of fee payment: 8