KR100996239B1 - 접합된 항-정신병 약물 및 그의 용도 - Google Patents

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Abstract

신규한 항-정신병 약물과 유기산의 화학적 접합체, 정신병 및/또는 증식성 장애 및 질환의 치료 및 약물 감작 약물로서의 상기 접합체의 용도, 및 상기 접합체의 합성 방법이 개시된다. 상기 유기산은 항-정신병 약물에 의해 유도된 부작용을 감소시키고/또는 항-증식 활성을 나타내도록 선택된다.
화학적 접합체, 항-정신병 약물, 유기산, 신경이완, GABA 작동제, 페노티아진

Description

접합된 항-정신병 약물 및 그의 용도 {CONJUGATED ANTI-PSYCHOTIC DRUGS AND USES THEREOF}
본 발명은 신규한 항-정신병 약물(antipsychotic drug)과 유기산의 화학적 접합체(chemical conjugate) 및 그의 용도에 관한 것이다. 보다 구체적으로는, 본 발명은 항-정신병 약물(항-증식 (anti-proliferative) 활성 및/또는 약물 감작(chemosensitization) 활성을 가질 수 있는) 및 항-정신병 약물에 의해 유도된 부작용을 감소시키고/또는 항-증식 활성을 나타내도록 선택된 유기산의 접합체, 및 정신병 및/또는 증식성 장애 및 질환의 치료 및 약물 감작화를 위한 상기 접합체의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 신규한 화학적 접합체는 종래 기술의 항-정신병 약물에 비해 부작용을 최소화하는 것을 특징으로 한다.
신경이완(neuroleptic agent) 약제 또는 신경이완제로도 알려져 있는 신경이완 약물(neuroleptic drug)은 정신분열증(schizophrenia)과 같은 중추신경계 정신 질환 및 장애의 치료에 광범위하게 사용되는 전형적인 항-정신병 약물이다. 신경이완제의 항-정신병 효능은 중추신경계의 도파민 수용체를 길항(antagonize)/차단하는 능력에 따라 다르다. 신경이완 약물은 전형적인 항-정신병 약물로 알려져있고, 예를 들면 페노티아진 그 중에서도 지방족(예를 들면 클로르프로마진), 피페리 딘(예를 들면 티오리다진) 및 피페라진(예를 들면 플루페나진); 부티로페논(예를 들면 할로페리돌); 티옥산텐(예를 들면 플로펜틱솔); 옥소인돌(예를 들면 몰린돈); 디벤족사제핀(예를 들면 록사핀) 및 디페닐피페리딘(예를 들면 피모지드)을 포함한다.
그러나, 현재 시판되고 있는 신경이완 약물의 투여는 종종 부작용을 수반한다. 신경이완 약제가 경직, 떨림(tremor), 서동(느린 운동, bradykinesia) 및 반응 지연(느린 생각, bradyphrenia) 현상 뿐 아니라 지연성 운동 장애(tardive dyskinesia), 급성 실조(dystonic) 반응 및 아카타시아(akathasia)를 포함하는 추체외로(extrapyramidal) 증상을 유도하는 것으로 본 기술 분야에 잘 알려져 있다. 실제로, 1년에 걸쳐 신경이완 약물을 만성 치료받은 환자의 약 5%가 지연성 운동장애 병변이 진전되었다.
항-정신병 약물의 상이한 분류는 비전형적인(atypical) 항-정신병제를 포함한다. 비전형적인 항-정신병 약물은 도파민 D2 수용체 외에도 중추 세로토닌(serotonin) 2 수용체(5-HT2)에 대한 결합을 포함하는 수용체 결합 형태를 갖는다. 비전형적인 항-정신병 약물은 예를 들면 클로자핀(clozapine), 올란자핀(olanzapine) 및 리스페리돈(risperidone)을 포함하고, 일반적으로 높은 항-세로토닌 활성 및 상대적으로 낮은 도파민 D2 수용체에 대한 친화력을 특징으로 한다. 클로자핀과 같은 몇몇 비전형적인 항-정신병 약물은 아드레날린성, 콜린성(cholinergic) 및 히스타민성(histaminergic) 수용체를 더 길항하는 것으로 알려져 있다.
신경이완제와 달리, 비전형적인 항-정신병제는 추체외로 증상을 최소한으로 유발하므로 지연성 운동 장애, 아카타시아 또는 급성 실조 반응을 거의 유발하지 않는다. 그러나, 이들의 투여는 체중 감소, 기분 장애, 성기능 장애, 진정, 기립성(orthostatic) 저혈압(hypotension), 다유연(hypersalivation), 저하된 발작 역치(seizure threshold) 및 특히 무과립구증(agranulocytosis)과 같은 다른 부작용을 수반한다.
본 명세서에서 항-정신병제로서 언급되기도 하는 전형적 및 비전형적 항-정신병 약물과 관련된 심각한 부작용은 상기 부작용이 없는 항-정신병 약물의 용도 및 이들을 개발하기 위한 광범위한 노력에 대한 주요 한계로 작용한다.
미국 특허 제 6,197,764호는 클로자핀(비전형적 항-정신병 약물) 및 12-26개의 탄소원자, 바람직하게는 16-22개의 탄소원자를 갖는 지방산의 화학적 접합체를 개시하고 있다. 이들 접합체는 항-정신병 치료 효과를 얻기 위해 저투여량 투여에 의한 확대된 치료 효능이 있어 심각한 부작용이 진전되지 못하도록 하는 것을 특징으로 한다. 따라서, 이들 접합체는 비-접합된 비전형적 항-정신병 약물에 비해 유익 및 유리하다. 그러나, 미국 특허 제 6,197,764호는 다른 항-정신병제를 포함하는 유리한 접합체를 개시하고 있지 않으며, 이들 접합체는 장쇄(long-chain) 지방산을 포함하는 것으로 한정되어 있다. 주로 신경이완제인 다른 항-정신병제 및 장쇄 지방산의 에스테르 접합체가 본 기술 분야에 잘 알려져 있음은 물론이다. 그러나, 이러한 접합체는 주로 약물의 뇌 침투를 용이하게 하는데 목적이 있으며, 부작용을 적극적으로 감소 또는 예방하는 것을 목적으로 하지 않는다.
미국 특허 제 3,966,930호는 상당한 신경이완성 및 상대적으로 낮은 정도의 바람직하지 않은 부작용을 갖는 불소-치환된 페노티아진 유도체를 개시하고 있다. 그러나, 미국 특허 제 3,966,930호에 기재된 일부 상기 불소-치환된 페노티아진 유도체는 그 사슬 내에 1-17개의 탄소원자를 갖는 아실 라디칼을 포함하고 있는 반면, 그 실험적 데이터에는 옥살산 또는 말레산(예를 들면 각각 2 및 4개의 탄소원자를 포함하는 유기산)으로부터 유도된 아실 라디칼만을 포함하는 페노티아진 유도체만 한정되어 기재되어 있다. 개시되어 있는 상기 페노티아진 유도체는 다른 공지되어 있는 신경이완제와 비교하여 보다 장시간의 치료효과를 가지며, 따라서 유도된 부작용 정도가 상대적으로 낮은 것을 특징으로 한다. 이들 화합물의 치료 연장 효과는 주로 페노티아진 치환기(예를 들면 플루오로 및 트리플루오로메틸) 때문인 반면, 유기산과의 접합은 주로 용이한 약제학적 제형화를 목적으로 하는 것이다.
항-정신병 약물, 주로 신경이완제에 의한 치료 결과로서 추체외로 증상의 진전에 대한 최근의 연구는 도파민성 수용체 D1 및 D2의 부조화를 수반하는 기작을 제시하고 있는 바, 이는 뇌에서의 γ-아미노부티르산(GABA)계의 활성 감소를 수반한다.
GABA는 기분 안정 활성, 불안 활성 및 근육 이완 활성에 영향을 주는 것으로 알려져 있는 뇌내 중요한 억제성 신경 전달 물질(neurotransmitter)이며, 또한 몇몇 중추 신경계 장애 및 질환과 관련이 있는 것으로 알려져 있기도 하다. 추체외로 증상에 대한 최근의 연구는 GABA 작동제(agonist)는 신경이완-유도 부작용을 감 소시켜 치료 능력을 추가적으로 갖게 하는데 사용될 수 있음을 제시하고 있다.
이전의 연구를 통해 이미 GABA 작동제가 뇌 신경 전달 물질, 특히 도파계전달 물질을 방해할 수 있음을 제시한 바 있다. 따라서, GABA 작동제가 도파민 수용체 감작성의 신경이완-유도 증가를 길항할 수 있고, 따라서 신경이완-유도된 운동 장애를 개선할 수 있음이 밝혀졌다[1]. 나아가, 몇몇 공지되어 있는 직접적인 GABA 작동제(예를 들면 무스시몰(muscimol) 및 SL 76002)는 할로페리돌(haloperidol)-유도 강경증(catalepsy)에 대한 이상성(biphasic) 효과를 유발하여, 저투여량의 작동제가 전형적인 강경증 거동을 억제하는 반면, 고투여량의 작동제는 할로페리돌-유도 강경증을 강화한다는 것이 밝혀져 있다. 기타 다른 연구들은 GABA 작동제가 항-경련(convulsive) 활성을 유도할 수 있다고 보고하고 있다[2].
GABA 작동제가 친수성 작용기(예를 들면 유리 카르복실산 및 유리 아미노기)를 포함하고 있기 때문에, GABA 작동제를 사용하면 혈뇌 장벽(blood brain barrier, BBB)을 쉽게 관통하지 못한다. 그러나, 이들 화합물과 지방 아미노산 또는 펩티드를 화학적으로 접합시키면, 혈뇌 장벽(BBB) 통과가 실질적으로 용이하다는 것이 밝혀졌다[3].
실제로, 미국 특허 제 3,947,579호; 3,978,216호; 4,084,000호; 4,129,652호 및 4,138,484호는 γ-히드록시부티로락톤, γ-히드록시부티레이트, 아미노옥시아세트산, 5-에틸-5-페닐-2-피롤리돈, 1-히드록시-3-아미노-2-피롤리돈 및 β-(4-클로로페닐)-γ-아미노부티르산과 같은 혈뇌 장벽을 관통하는 것으로 알려져 있는 GABA-유사 화합물(GABA와 약리학적 관련성이 있는 화합물)을 신경이완 약물과 동시-투여는 신경이완 약물의 약간 낮은 투여량으로도 이들 GABA-유사 화합물을 투여하는 것 없이 고투여량의 신경이완 약물로 얻어지는 바와 같은 항-정신병 효과를 얻을 수 있으며, 동시에, 추체외로 부작용을 다소 감소시킨다. 비록 저투여량의 신경이완 약물을 사용하더라도 GABA-유사 화합물이 동시-투여된 항-정신병 약물의 항-정신병 활성을 강화시키는 것으로 알려져 있기 때문에 동일한 항-정신병 효과를 얻을 수 있는 것으로 알려져 있다.
최근의 연구를 통해, 몇몇 신경이완제 및 특히 페노티아진은 신경 세포, 신경교세포, 흑색종(melanoma) 세포, 유방세포, 결장 세포, 전립선 세포, 림프종 및 백혈병, 뿐 아니라 원시 인간 케라토사이트와 같은 상이한 세포주에서 강력한 항-증식 활성을 나타내는 것으로 밝혀졌다[4]. 칼모둘린(calmodulin)에 대해 특이적 억제 효과를 나타내는 것으로 알려진 "신규한 반 겨자 유형의 페노티아진(new half mustard type phenothiazines)"은 국립 암 협회(NCI)에 의해 시험되었다. 페노티아진의 항-증식 활성은 60개의 서로 다른 인간 암 세포주의 시험관 내 스크리닝을 통해 관찰되었다. 몇몇 페노티아진은 또한 동물 모델에서 종양 성장을 유의적으로 억제하는 것으로 밝혀졌다. 이러한 발견은 일반적인 집단(population)과 비교하여 신경이완 약제에 대한 정신분열증 환자에게서 암 발병의 빈도가 낮다는 사실과 부합한다.
전체적으로 본 명세서의 참고 문헌으로 포함되는 WO 02/43652호는 증식성 질환의 치료에 있어 다양한 전형적 및 비전형적 정신병 약제의 용도를 개시하고 있다. 특히, WO 02/43652호는 신경교종, 흑색종, 신경모세포종(neuroblastoma), 결장, 폐 및 전립선 암을 포함하는 각종 종양의 치료, 뿐 아니라 B16 흑색종 세포(독소루비신(todoxorubicin) 및 콜키신(colchicine)에 대해 저항성이 있는 것으로 알려짐) 및 신경모세포종(SH-SY5T, 5-FU 및 독소루비신에 저항성이 있음)과 같은 다약물내성(MDR, multidrug resistant) 암세포의 치료에 효과적인 약제로 작용할 수 있음을 개시하고 있다. 게다가, MDR 암 치료에 있어 정신병 약제의 활성에 대한 개시내용 이외에도, WO 02/43652호는 세포 독성 약물에 대한 약물 감작제로서, 즉 암세포 특히 MDR 암세포를 효과적으로 감작하는 화합물로서 정신병 약물의 용도를 또한 개시하고 있다.
그러나, 비록 WO 02/43652호가 개시하는 바가 특히 MDR 암의 치료시 정신병 약제의 항-증식 활성 및 약물 감작 활성에 대해 매우 유리하지만, 이들 정신병 약제에 의해 유도되는 부작용 때문에 매우 제한적으로 사용된다.
부티르산(BA) 및 그의 유도체가 GABA인 4-페닐부티르산(PBA)은 시험관내 광범위한 신생물 세포(neoplastic cell)에서 분화 및 항-증식성 약제로서 작용하는 것으로 알려져 있다[5]. 부티르산 및 4-페닐부티르산은 또한 플레오프토픽(pleotropic) 약제로서 알려져 있고, 가장 주목할 만한 활성 중 하나는 염색질(chromatin) 이완을 유도하고 전사 활성을 변화시키는 핵 히스톤(histone)내 아세틸화 반응 수준을 가역적으로 증가시킨다는 점이다[6]. 이러한 작용 기작은 또한 부티르산 및 4-페닐부티르산의 항암 활성과 관련이 있는 것으로 추측된다.
따라서, 상기 종래 기술은 정신분열증 및 관련 중추 신경계 정신병적 장애 및 질환, 뿐 아니라 악성 및 양성 종양 및 MDR 암과 같은 증식성 장애 및 질환을 치료하는데 있어 전형적 및 비전형적 항-정신병 약물의 항-증식성 약제 및 약물 감작제로서의 용도를 개시하고 있다. 상기 종래 기술은 또한 신경이완-유도 부작용을 감소시키기 위한 강력한 약제로서 GABA 작동제(GABA 자신을 포함하여)의 용도 뿐 아니라 항-증식성 약제로서 부티르산 및 그의 유도체의 용도를 개시하고 있다.
그러나, 항-증식성 약물 및 약물 감작제로서 작용할 수 있고, 치료 활성의 개선 및 부작용의 감소를 특징으로 하는 항-정신병 약물에 대한 광범위하게 인식되는 필요성이 여전히 요구되고 있다.
본 발명에 따르면, (i) 항-정신병 약물과, 상기 항-정신병 약물에 의해 유도되는 부작용을 감소시키고/또는 항-증식 활성을 나타내도록 선택되는 유기산의 화학적 접합체; (ii) 항-정신병 약물과 GABA 작동제(GABA 자신을 포함하여)의 화학적 접합체; (iii) 항-정신병 약물 및 항-증식성 약제의 화학적 접합체; (vi) 이들의 합성 방법; (v) 종래의 항-정신병 약물의 특징인 부작용을 감소시키면서 정신병적 장애 및 질환을 치료 및/또는 예방하는 이들의 용도; (vi) 증식성 장애 및 질환을 치료 및/또는 예방하는 이들의 용도; 및 (vii) 약물 감작성 약제로서의 이들의 용도가 제공된다.
본 명세서에 기재되어 있는 이러한 항-정신병 약물의 화학적 접합체들은 부작용(예를 들면 추체외로 증상)의 최소화, 항-정신병 치료 활성의 강화 및 항-증식 활성 및 약물 감작 활성 갖는 것을 특징으로 한다. 또한 본 명세서에 기재되어 있는 이들 화학적 접합체가 뜻밖에도 치료 효과의 강화 및 부작용의 최소화와 관련하여 모(parent) 화합물에 비해 상승 효과가 있는 것으로 밝혀져 있다.
따라서, 본 발명의 일요지에 따르면, 제 1 화학적 잔기, 및 제 1 화학적 잔기에 공유 결합된 제 2 화학적 잔기를 포함하는 화학적 접합체가 제공되는 바, 상기 제 1 화학적 잔기는 항-정신병 약물기이고, 제 2 화학적 잔기는 상기 항-정신병 약물 자신의 투여시 항-정신병 약물에 의해 유도되는 부작용을 감소시키고/또는 항-증식 활성을 나타내도록 선택되는 유기산기이다.
본 발명의 또 다른 요지에 따르면, 활성 성분으로서 본 발명의 화학적 접합체 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
본 발명의 약제학적 조성물은 정신병적 장애 또는 질환의 치료, 증식성 장애 또는 질환의 치료 및/또는 화학 치료제와 조합하여 사용되고/또는 약물 감작화가 유리한 의학적 상태에서 약물 감작화를 위해 사용하기 위해 바람직하게는 포장 재료로 포장되고, 상기 포장 재료 상에 또는 그 안의 인쇄물에 의해 식별된다.
본 발명의 또 다른 요지에 따르면, 본 발명의 화학적 접합체의 치료 유효량을 대상체에 투여하는 것을 포함하는 상기 대상체의 정신병적 장애 또는 질환을 치료 또는 예방하기 위한 방법이 제공된다.
후술하는 본 발명의 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 정신병적 장애 또는 질환은 정신 분열, 편집증(paranoia), 유아 정신병(childhood psychoses), 헌팅턴 병(Huntington's disease) 및 질 드 라 투렛 증후군(Gilles de la Tourette's syndrome)으로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 또 다른 요지에 따르면, 본 발명의 화학적 접합체의 치료 유효량을 대상체에 투여하는 것을 포함하는 증식성 장애 또는 질환을 치료 또는 예방하기 위한 방법이 제공된다.
후술하는 본 발명의 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 증식성 장애 또는 질환은 뇌 종양, 유방 전이 및 말초 종양으로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
후술하는 본 발명의 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 장애는 다약물내성 암과 같은 암이다.
본 발명의 또 다른 요지에 따르면, 약물 감작화 방법이 제공된다. 상기 방법은 필요로 하는 대상체에 하나 이상의 화학 치료제(들)의 화학 치료 유효량 및 본 발명의 화학적 접합체의 약물 감작 유효량을 투여하는 것을 포함한다.
후술하는 바람직하는 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 대상체는 다약물내성 암과 같은 암을 갖는다.
본 발명의 후술하는 바람직하는 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 제 2 화학적 잔기는 카르복실산 결합, 아미드 결합 및 티오에스테르 결합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 에스테르 결합을 통해 제 1 화학적 잔기에 공유 결합된다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 제 2 화학적 잔기는 항-증식성 약제기 및 GABA 작동제 기로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 항-정신병 약물기는 항-증식 활성을 갖는다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 항-정신병 약물기는 약물 감작 활성을 갖는다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 항-정신병 약물기는 페노티아진기 및 페노티아진 유도체기로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 항-정신병 약물기는 전형적인 항-정신병 약물기 및 비전형적인 항-정신병 약물기로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 항-정신병 약물기는 클로르프로마진기, 페르페나진기, 플루페나진기, 주클로펜틱솔기, 티오프로파제이트기, 할로페리돌기, 벤페리돌기, 브롬페리돌기, 드로페리돌기, 스피페론기, 피모지드기, 피페르아세타진기, 아밀술프리드기, 술피리드기, 클로티아핀기, 지프라시돈기, 레목시프리드기, 술토프리드기, 알리자프리드기, 네모나프리드기, 클로자핀기, 올란자핀기, 지프라시돈기, 세르틴돌기, 쿠에티아핀기, 플루옥세틴기, 플루복사민기, 데시프라민기, 파록세틴기, 세르트랄린기, 발프로산기 및 페닐토인기로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 GABA 작동제 기는 (±) 바클로펜기, γ-아미노부티르산(GABA)기, γ-히드록시부티르산기, 아미노옥시아세트산기, β-(4-클로로페닐)-γ-아미노부티르산기, 이소니페코트산기, 피페리딘-4-술폰산기, 3-아미노프로필포스폰산기, 3-아미노프로필포스핀산기, 3-(아미노프로필)메틸포스핀산기 및 3-(2-이미다졸릴)-4-아미노부탄산기로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 항-증식성 약제 기는 부티르산기 및 4-페닐부티르산기로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 유기산기는 화학식 -R-C(=O)-를 갖는 바, 상기 식에서 R은 치환되거나 비치환된 1-20개 탄소원자를 갖는 탄화수소기, 및 1-20개 탄소원자를 갖고 산소, 질소, 황 원자로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로 원자를 갖는 탄화수소기, 및 화학식 R1: -Z-C(=O)O-CHR2-R3로 이루어지는 군으로부터 선택되며, 이때 Z는 단일 결합, 1-20개의 탄소원자를 갖는 치환되거나 비치환된 탄화수소기 및 1-20개의 탄소원자 및 산소, 질소 및 황으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 헤테로원자를 갖는 치환되거나 비치환된 탄화수소기로 이루어지는 군으로부터 선택되며; R2는 수소 및 1-10개의 탄소원자를 갖는 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되며; R3은 수소, 및 1-20개의 탄소원자를 갖는 치환되거나 비-치환된 탄화수소기, 1-20개의 탄소원자 및 산소, 질소 및 황으로 이루어지는 군으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 갖는 치환되거나 또는 비치환된 알킬기로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, R은 3-5개의 탄 소원자를 갖는 치환 또는 비-치환된 알킬이다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 유기산기는 부티르산기, 발레르산기, 4-페닐부티르산기, 4-아미노부티르산기, 레티노인산기, 술린닥산기, 아세틸 살리실산기, 이부프로펜기, 말론산기, 숙신산기, 글루타르산기, 푸마르산기 및 프탈산기로 이루어지는 군으로부터 선택된다.
본 발명의 또 다른 요지에 따르면, 본 발명의 화학적 접합체를 합성하는 방법이 제공된다. 상기 방법은 유기산 및 항-정신병 약물을 반응시켜 항-정신병 약물기에 유기산기를 공유 결합시키는 것을 포함한다.
본 발명의 바람직한 실시형태의 또 다른 실시형태에 따르면, 상기 유기산기는 카르복실산 에스테르 결합을 통해 상기 항-정신병 약물기에 공유 결합되며, 상기 방법은 반응 전에, 유기산을 그의 아실 클로라이드 유도체로 전환시키는 것을 더 포함한다.
기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 유기산은 티오에스테르 결합을 통해 항-정신병 약제기에 공유결합되고, 상기 방법은 반응 전에 유기산을 그의 아실 클로라이드 유도체로 전환하고, 항-정신병 약물을 그의 티올 유도체로 전환하는 것을 더 포함한다. 기재되어 있는 바람직한 실시형태의 또 다른 특징에 따르면, 상기 유기산기는 아미드 결합을 통해 항-정신병 약물기에 공유 결합되며, 상기 방법은 반응 전에 상기 유기산을 그의 아실 클로라이드 유도체로 전환하고, 항-정신병 약물을 그의 아민 유도체로 전환하는 것을 더 포함한다. 상술한 방법에서 사용되는 상기 유기산 및 항-정신병 약물은 바람직하게는 상술한 본 발명의 유기산기 및 항-정신병 약물기로부터 유도된다.
상기 유기산이 유리 아미노기를 포함하는 GABA 작동제인 경우, 상기 방법은 반응 전에 보호기로 상기 유리 아미노기를 보호하여 항-정신병 약물기에 공유 결합되는 유기산의 아미노-보호된 기를 반응시킴으로써 얻도록 하고, 항-정신병 약물기에 공유 결합되는 유기산의 아미노-보호된 기를 얻은 후 상기 보호기를 제거하는 것을 더 포함한다. 바람직하게는, 상기 방법은 보호 후 및 반응 전에 유기산을 그의 아실 이미다졸 유도체로 전환하는 것을 더 포함한다.
본 발명은 정신병 및/또는 증식성 장애 및 질환을 치료 및 예방하고, 약물 감작제로서 사용하기 위해 최소한의 부작용을 유도하는 항-정신병 약물의 신규하고 강력한 화학적 접합체를 제공함으로써 현재 알려진 접합체들의 단점을 성공적으로 해결한다.
이하, 단지 예시적인 첨부 도면을 참조로 하여 본 발명을 설명한다. 도면을 참조로 하는 세부 사항들은 단지 예시에 불과하며 본 발명의 바람직한 실시형태를 예시적으로 논의할 목적으로 제공되고, 본 발명의 원리 및 개념적인 요지들을 가장 유용하고 쉽게 이해되는 기재 내용으로 믿어지는 것들을 제공하는 것이다. 이와 관련하여, 본 발명의 기본적인 이해를 위해 필요한 것 이상으로 상세하게 본 발명의 구조적인 세부 사항들을 나타내고자 어떠한 시도도 하지 않았으며, 본 발명의 몇몇 형태가 어떻게 구체적으로 실시되는지 본 기술 분야의 당업자에게 명백하도록 도면과 함께 상세한 설명이 제공된다.
도면에서:
도 1a 및 도 lb는 5mg/체중kg의 페르페나진 및 그와 동일 몰량의 화학적 접합체를 복강내 주사한 래트에서의 총 강경증(total catalepsy) (도 1a) 및 혈중 프롤락틴 수준(도 1b)에 대한 페르페나진 및 본 발명에 따른 그의 화학적 접합체(AN 167, AN168 및 AN 130)의 효과를 증명하는 구조 활성 상관관계(Structure Activity Relationship (SAR)) 연구에 의해 얻어진 막대 그래프 및 곡선을 나타낸다;
도 2는 5mg/kg의 페르페나진으로 처리한 후, 본 발명에 따른 그의 화학적 접합체의 동일 몰량을 투여한 래트에서 총 강경증을 나타내는 막대 그래프이다;
도 3a 및 도 3b는 래트에서 총 강경증에 대한 페르페나진(5mg/kg), 플루페나진(7.5mg/kg) 및 본 발명에 따른 이들의 화학적 접합체(AN 167, AN 168, AN 180 및 AN 187)의 효과를 나타내는 막대 그래프 및 그래프(도 3a), 및 래트에서 혈중 프롤락틴 수준에 대한 이들의 페르페나진, 플루페나진 및 GABA 화학적 접합체 AN 168 및 AN 187의 효과를 나타내는 도면(도 3b)이다;
도 4a 및 도 4b는 페르페나진 및 그의 화학적 접합체(도 4a) 및 플루페나진 및 본 발명에 따른 그의 화학적 접합체(도 4b)에 의해 유도된 래트에서의 강경증의 시간 경과를 나타내는 비교 그래프이다;
도 5a 및 도 5b는 래트에서 강경증에 대한 본 발명의 페르페나진과 GABA(화합물 AN168)의 화학적 접합체, 및 페르페나진과 GABA의 혼합물의 동일 투여량 효과를 나타내는 막대 그래프 및 비교 그래프이다;
도 6은 래트에서 총 강경증에 대한 본 발명의 AN167 및 AN 168의 화학적 접 합체의 효과를 나타내는 막대 그래프이다(4번의 별도 실험의 평균);
도 7a 및 도 7b는 생쥐에서 강경증에 대한 화학적 접합체 AN 168, 동일 투여량의 페르페나진 및 동일 투여량의 페르파나진과 GABA의 혼합물의 효과를 나타내는 막대 그래프로서, 2분 내 타겟에 도달하는 동물의 분율(도 7a) 및 동물이 타겟에 도달하는 걸린 시간(도 7b)을 나타낸다;
도 8a 및 도 8b는 래트에서 강경증에 대한 경구 투여된 페르페나진 및 그의 화학적 접합체 AN168의 효과를 나타내는 비교 그래프로, "피아노(piano)" 시험법에 의해 측정하였다(도 8b는 도 8a의 실험 3개월 후에 실시된 실험에서 얻어진 데이터를 나타낸다);
도 9a 및 도 9b는 페르페나진 및 그의 화학적 접합체 AN168를 다양한 농도로 래트에 경구 투여함으로써 유도된 총 강경증을 나타내는 막대 그래프로서, "피아노(piano)" 시험법에 의해 측정하였다(도 9b는 도 9a의 실험 3개월 후에 실시된 실험에서 얻어진 데이터를 나타낸다);
도 10a 및 도 10b는 강경증의 시간 경과(도 10a) 및 래트에서 총 강경증(도 10b)에 대해 경구 투여된 페르페나진 및 그의 화학적 접합체 AN168의 다양한 농도 효과를 나타내는 비교 그래프 및 막대 그래프로서, 24시간 동안 "피아노(piano)" 시험법에 의해 측정하였다;
도 11은 래트에서 총 강경증에 대한 다양한 농도로 경구 투여된 페르페나진 및 AN 168의 효과를 나타내는 막대 그래프로서, "월(wall)" 시험법에 의해 측정하였다;
도 12는 래트에서 혈중 프롤락틴 수준에 대한 경구 투여된 페르페나진 및 AN 168의 효과를 나타내는 비교 그래프이다;
도 13은 B16 쥐과 흑색종 세포의 증식에 대한 페르페나진 및 본 발명에 따른 그의 화학적 접합체, AN 130, AN 167 및 AN 168의 효과를 나타내는 비교 그래프이다;
도 14는 C6 래트 신경교종 세포의 생존력에 대한 페르페나진, AN 168, GABA, 빈시스틴(Vincistine) 및 시스플라틴(Cisplatin)의 증가 농도 효과를 나타내는 비교 그래프이다;
도 15는 Jurkat T 림프종 세포의 생존력에 대한 페르페나진, AN 168 및 덱사메타손(Dexamethasone)의 증가 농도 효과를 나타내는 비교 그래프이다;
도 16은 30μM 빈시스틴으로 처리한 C6 래트 신경교종 세포의 생존력에 대한 페르페나진 및 AN 168의 다양한 농도 효과를 나타내는 막대 그래프이다;
도 17은 C6 래트 신경교종 세포의 생존력에 대한 시스플라틴(5-50μM) 및 시스플라틴(5-50μM) 및 AN 168(10 및 15μM)의 조합물의 효과를 나타내는 막대 그래프이다;
도 18은 C6 래트 신경교종 세포의 DNA 단편화(DNA fragmentation)에 대한 페르페나진, AN 168 및 시스플라틴의 효과를 나타내는 막대 그래프이다;
도 19는 정상 뇌세포(IC50 값)에 대한 페르페나진 및 그의 화학적 접합체 AN 130, AN 167 및 AN 168의 효과를 나타내는 막대 그래프이다;
도 20은 래트 근세포(myocytic)의 생존력에 대한 페르페나진 및 AN 168의 동일 몰량의 투여 효과를 나타내는 막대 그래프이다;
도 21은 페르페나진 (per) 및 본 발명의 화합물 AN 167로 복강내 투여된 래트에서 사멸율(mortality)의 시간 경과를 나타내는 비교 그래프이다.
본 발명은 유기산에 공유 결합된 항-정신병 약물의 화학적 접합체, 그의 제조 방법 및 이들에 한정되지는 않지만 정신 분열증과 같은 정신병적 장애 또는 질환 뿐 아니라 이들에 한정되지는 않지만 뇌 종양, 뇌 전이, 말초 종양, MDR 암 및 기타 증식성 장애와 같은 증식성 장애 또는 질환의 치료를 위한 약물 감작제로서 이들의 용도에 관한 것이다.
본 발명에 따른 화학적 접합체의 원리 및 작동은 첨부 도면 및 후술하는 기재 내용을 참고로 하여 보다 잘 이해될 것이다.
본 발명의 하나 이상의 실시형태를 상세히 설명하기 전에, 본 발명이 후술하는 실시예에서 기재 예시된 내용들로 한정되는 것이 아님을 분명히 하고자 한다. 본 발명은 다양한 방법으로 구체화되거나 실시 또는 수행될 수 있다. 또한, 본 명세서에 사용하고 있는 용어들은 기재를 목적으로 할 뿐 본 발명을 한정하는 것으로 간주되어서는 안됨은 명백하다.
본 발명을 서술하는 중에, 항-정신병 약물(또한 항-증식 활성 및/또는 약물 감작 활성을 가질수도 있음) 및 GABA 작동제 또는 항-증식성 약제를 공유 결합시키는 화학적 접합체가 높은 항-정신병 및/또는 항-증식성 치료 활성, 뿐 아니라 부작 용의 최소화와 관련된 약물 감작 활성을 나타낼 수 있다고 가정하였다.
이러한 가정에 대한 바탕은 다음과 같다: 정신분열증과 같은 정신병적 장애 또는 질환은 신경이완제와 같은 전형적인 항-정신병제, 및 비전형적인 항-정신병제로 분류될 수 있는 다양한 유형의 항-정신병 약물에 의해 치료가능하다. 그러나, 항-정신병 약물의 투여는 전형적으로 추체외로 증상(주로 전형적인 항-정신병제에 의해 유도됨) 및 무과립구증(주로 비전형적인 항-정신병제에 의해 유도됨)과 같은 단기 및 장기 부작용을 수반한다. 이들 부작용, 특히 추체외로 증상의 진전은 도파민성 D1 및 D2 수용체에서 유도된 불균형 및 뇌에서의 GABA계 화합물의 감소된 활성 때문이다.
따라서, GABA 작동제와 항-정신병 약물의 공유 결합은 부작용이 최소화된 항-정신병 활성을 나타내는 화학적 접합체를 형성할 수 있다고 가정하였다.
특히, 이와 관련하여 항-정신병 활성 및 GABA-증가된 활성을 동시에 나타내는 화합물을 얻을 수 있기 때문에, 항-정신병 약물과 GABA 작동제의 결합은 매우 유익할 것이라고 가정하였다.
GABA 작동제 또는 GABA-유사 화합물의 투여에 의해 현재 달성되는 GABA계 활성의 증가는 항-정신병제에 의해 유도되는 부작용을 감소시키고, GABA계와 관련된 치료 유익성(예를 들면 기분 안정 및 이완)을 제공하는 것으로 알려져 있다. 또한 GABA 작동제는 항-정신병 약물에 의해 유도되는 도파민성 수용체의 증가된 감작성을 길항하는 것으로 알려져 있다. 그러나, 일부 GABA 작동제는 이들의 친수성에 의해 그 투여가 제한된다.
따라서, 항-정신병 약물 및 GABA 작동제의 공유 결합에 의해 얻어지는 화학적 접합체는 (i) 항-정신병 약물 잔기 및 GABA 작동제 잔기에 의해 유도되는 항-정신병 및 GABA-증가 활성의 상승효과; (ii) 항-정신병제-유도된 부작용의 감소; (iii) 모 화합물에 비해 결합된 항-정신병 약물 및 GABA 작동제의 혈뇌 장벽 관통에 약물동력학적 개선; 및 (iv) 개선된 항-정신병 활성을 나타내는 뇌에서의 도파민성 수용체에 대한 친화도 상승을 특징으로 하는 것이라고 가정하였다.
더욱이, 몇몇 항-정신병 약물, 특히 페노티아진과 같은 신경이완 약물은 강력한 항-증식성 약제이고, 화학 치료 약물과 조합하여 사용시 약물 감작제로서 작용할 수 있다는 것이 본 기술 분야에 알려져 있다. 따라서, 항-정신병 약물과 항-증식 활성을 갖는 화학적 잔기를 공유 결합시키는 화학적 접합체가 항-증식 활성 및/또는 약물 감작 활성을 나타낼 것이라고 가정하였다. 이러한 화학적 접합체는 뇌 수용체에 대한 항-정신병 유도체의 친화도 및 개선된 뇌 약물동력학에 의해, 특히 뇌에서의 증식성 장애 또는 질환의 치료에 있어 매우 유익할 것이다.
후술하는 실시예 부분에 더욱 예시된 바와 같이 본 발명을 실시하는 동안, 항-정신병 약물 및 GABA 작동제와 같이 항-정신병 약물에 의해 유도되는 부작용을 감소시키거나 또는 항-증식 활성을 나타내도록 선택되는 화학적 잔기를 공유 결합하면, 공지되어 있는 모든 항-정신병제와 비교하여 상승적으로 (i) 부작용의 최소화; (ii) 항-정신병 활성의 상승; (iii) 항-증식 활성의 상승; (iv) 약물 감작 활성의 상승; 및 (v) 독성의 감소를 특징으로 하는 화학적 접합체를 제조할 수 있음을 발견하였다.
따라서, 상기 화학적 접합체는 본 발명에 따라 정신병적 장애 또는 질환 뿐 아니라 증식성 장애 또는 질환를 치료하기 위해 항-증식성 약제 및/또는 약물 감작제로서 사용된다. 본 발명에 따른 정신병 및/또는 증식성 장애 또는 질환을 치료하기 위해 사용되는 상기 화학적 접합체의 각각은 제 2 화학적 잔기에 공유 결합되는 제 1 화학적 잔기를 포함한다. 상기 제 1 화학적 잔기는 항-정신병 약물기인 반면, 상기 제 2 화학적 잔기는 투여시 항-정신병 약물에 의해 유도되는 부작용을 감소시키거나 또는 항-증식 활성을 나타내도록 선택되는 는 유기산이다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "화학적 잔기"는 화학적 화합물의 기능성을 그대로 유지하면서 유도되는 기를 의미한다.
상기 용어 "기"는 본 기술 분야에서 잘 이해되는 것으로, 하나의 분자와 공유 결합되는 또 다른 분자의 주요 부분을 의미한다.
따라서, 상기 용어 "항-정신병 약물기"는 위에서 정의한 바와 같이 또 다른 화학적 잔기에 공유 결합되는 항-정신병 약물의 주요 부분을 의미한다.
본 발명에 따른 항-정신병 약물기는 전형적인 항-정신병 약물 및 비전형적 항-정신병 약물로부터 유도되고, 예를 들면 클로르프로마진기, 페르페나진기, 플루페나진기, 주클로펜틱솔기, 티오프로파제이트기, 할로페리돌기, 벤페리돌기, 브롬페리돌기, 드로페리돌기, 스피페론기, 피모지드기, 피페르아세타진기, 아밀술프리드기, 술피리드기, 클로티아핀기, 지프라시돈기, 레목시프리드기, 술토프리드기, 알리자프리드기, 네모나프리드기, 클로자핀기, 올란자핀기, 지프라시돈기, 세르틴돌기, 쿠에티아핀기, 플루옥세틴기, 플루복사민기, 데시프라민기, 파록세틴기, 세 르트랄린기, 발프로산기 및 페닐토인기를 포함한다.
본 발명의 바람직한 일실시형태에 따르면, 상기 항-정신병 약물은 또한 항-증식 활성을 나타낸다. 이러한 2중 활성 항-정신병제는 예를 들면 페노티아진 및 그의 유도체를 포함한다.
본 발명의 또 다른 바람직한 일실시형태에 따르면, 상기 항-정신병 약물은 또한 약물 감작 활성을 나타낸다. 이러한 이중 활성 항-정신병제는 예를 들면 페노티아진 및 그의 유도체, 티옥산텐 및 그의 유도체, 클로자핀, 클로미프라민 및 파록세틴을 포함한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "약물 감작화"는 약물 감작제의 부재하에서 화학치료제가 나타내는 세포 독성 수준에 비해 약물 감작제의 존재하에서 암세포, 특히 다약물내성 암세포에 대한 화학 치료제의 측정된 세포 독성의 증가 또는 감소를 의미한다.
본 명세서세서 호환적으로 사용하고 있는 상기 용어 "약물 감작 약제" 및 "약물 감작제"는 암세포로 하여금 화학 치료에 대해 보다 감작하게 하는 화합물을 의미한다.
상술한 바와 같이, 본 발명에 따른 항-정신병 약물기는 유기산기인 제 2 화학적 잔기에 공유 결합된다.
상기 용어 "유기산기"는 본 명세서에서 정의된 바와 같이 유리 카르복실산을 포함하는 유기산으로부터 유도되는 잔기를 의미한다.
상기 용어 "유리 카르복실산"은 수소화 또는 이온화 또는 염 형태의 "- C(=O)OH"기를 포함한다.
본 발명에 따른 유기산기는 상기 항-정신병 약물의 단독 투여시 유도될 수 있는 부작용을 감소시키거나 또는 항-증식 활성을 나타내도록 선택된다. 본 발명에 따른 상기 유기산은 예를 들면 화학식 -R-C(=O)-기(상기 식에서, R은 예를 들면 1-20개의 탄소원자를 갖는 탄화수소기일 수 있다)일 수 있다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "탄화수소"는 기본 골격으로서 공유결합되어 있는 탄소원자 및 수소원자를 포함하는 유기 화합물을 의미한다.
따라서, 본 발명에 따른 탄화수소 잔기는 알킬 또는 시클로알킬일 수 있다.
본 명세서에서 사용하고 있는 상기 용어 "알킬"은 직쇄 및 분지쇄기를 포함하는 포화 지방족 탄화수소를 의미한다. 바람직하게는, 상기 알킬기는 1 내지 20개의 탄소원자를 갖는다.
본 명세서에 언급되어 있는 수치 범위, 예를 들면 "1-20"은 알킬기의 경우 1개의 탄소원자, 2개의 탄소원자, 3개의 탄소원자 등, 20개 이하의 탄소원자를 함유할 수 있음을 의미한다. 보다 바람직하게는, 상기 알킬은 1 내지 10개의 탄소원자를 갖는 중간 크기의 알킬이다. 가장 바람직하게는, 상기 알킬은 3 내지 5개의 탄소원자를 갖는다.
본 명세서에서 사용하고 있는 상기 용어 "시클로알킬"은 모든-탄소 단일 고리형 또는 축합 고리(즉, 탄소원자의 이웃한 쌍을 공유하는 고리)기를 포함하는 것으로, 하나 이상의 고리가 완전히 공액된(conjugated) 파이-전자계를 갖지 않는다. 시킬로알킬기의 예는 특별히 한정되지는 않지만 시클로프로판, 시클로부탄, 시클로 펜탄, 시클로펜텐, 시클로헥산, 시클로헥사디엔, 시클로헵탄, 시클로헵타트리엔 및 아다만탄을 포함한다.
본 발명에 따른 탄화수소 잔기는 선형 또는 분지형일 수 있다. 상기 탄화수소 잔기는 또한 포화 또는 불포화될 수 있다. 불포화 탄화수소의 경우, 탄화수소 잔기는 탄소쇄에 2중 결합 또는 3중 결합을 포함할 수 있다. 불포화 탄화수소 잔기는 또한 아릴기를 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용하고 있는 "아릴기"는 완전히 공액된 파이-전자계를 갖는 모든 탄소 단일 고리형이거나 또는 축합-고리 다중 고리형(즉, 탄소원자의 이웃한 쌍을 공유하는 고리)기를 의미한다. 아릴기의 예는 특별히 한정되지는 않지만 페닐, 나프탈레닐 및 안트라세닐을 포함한다.
탄화수소 잔기는 또한 치환 또는 비-치환될 수 있다. 치환된 탄화수소인 경우, 치환기는 예를 들면 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로지환족, 히드록시, 알콕시, 아릴옥시, 시아노, 할로, 옥소, 아미도 및 아미노일 수 있다.
"헤테로아릴"기는 고리(들)내 하나 이상의 원자 예를 들면 질소, 산소 및 황을 갖고, 또한 완전히 공액된 파이-전자계를 갖는 탄소 단일 고리형이거나 또는 축합-고리형(즉, 탄소원자의 이웃한 쌍을 공유하는 고리)기를 의미한다. 헤테로아릴기의 예는 특별히 한정되지는 않지만 피롤, 푸란, 티오펜, 이미다졸, 옥사졸, 티아졸, 피라졸, 피리딘, 피리미딘, 퀴놀린, 이소퀴놀린 및 푸린을 포함한다. 상기 헤테로아릴기는 치환 또는 비-치환될 수 있다. 치환된 경우, 치환기는 예를 들면 알킬, 시클로알킬, 히드록시, 알콕시, 아릴옥시, 시아노, 할로, 옥사, 아미도 및 아 미노기일 수 있다.
"헤테로지환족"기는 고리(들)내 하나 이상의 원자 예를 들면 질소, 산소 및 황을 갖는 단일 고리형이거나 또는 축합-고리기를 의미한다. 상기 고리는 하나 이상의 이중 결합을 가질수도 있다. 그러나, 상기 고리는 완전히 공액된 파이-전자계를 갖지 않는다. 상기 헤테로 지환족은 치환 또는 비-치환될 수 있다. 치환되는 경우, 상기 치환된 기는 예를 들면 알킬, 시클로알킬, 아릴, 헤테로아릴, 할로, 트리할로메닐, 히드록시, 알콕시, 아릴옥시, 시아노, 옥소, 아미도 및 아미노일 수 있다.
"히드록시"기는 -OH기를 의미한다.
"알콕시"기는 위에서 정의한 바와 같이 -O-알킬 및 -O-시클로알킬기를 의미한다.
"아릴옥시"기는 위에서 정의한 바와 같이 -O-아릴 및 -O-헤테로아릴기를 의미한다.
"옥소"기는 예를 들면 R'가 알킬, 시클로알킬 또는 아릴일 수 있는 -C(=O)-R'기를 의미한다.
"할로"기는 불소, 염소, 브롬 또는 요오드를 의미한다.
"트리할로메틸"기는 위에서 정의한 바와 같이 X가 할로기인 -CX3-기를 의미한다.
"아미노"기는 -NH2기를 의미한다.
"아미도"기는 Ra 및 Rb가 예를 들면 수소, 알킬, 시클로알킬 및 아릴일 수 있는 -C(=O)-NRaRb기를 의미한다.
본 발명에 따르면 탄화수소기는 그 사슬내에 분산된 하나 이상의 헤테로원자를 포함할 수도 있다. 상기 헤테로원자는 예를 들면 산소, 질소 및/또는 황일 수 있다.
상기 탄화수소기는 화학식인 -Z-C(=O)O-CHR2-R3(상기 식에서 Z는 위에서 정의한 바와 같이 예를 들면 단일 결합 또는 치환 또는 비치환 탄화수소 잔기이고; R2는 예를 들면 수소 또는 1-10개의 탄소원자를 갖는 알킬기일 수 있고; R3은 위에서 정의한 바와 같이 예를 들면 수소 또는 탄화수소 잔기일 수 있다)인 기일 수 있다.
따라서, 본 발명에 따른 유기산기가 유도될 수 있는 유기산의 대표적인 예로는, 옥살산, 말론산, 숙신산, 글루타르산, 말레산, 푸마르산, 프탈산, 이소프탈산, 테레프탈산, 부티르산, 4-페닐부티르산, 4-아미노부티르산(GABA), 발레르산, 프로피온산, 레티논산, 아세틸 살리실산 및 이부프로펜을 포함한다.
본 발명의 가장 바람직한 일실시형태에 따르면, 화학적 접합체의 제 2 화학적 접합체는 GABA 작동제 기이다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "GABA 작동제 기"는 위에서 정의한 바와 같이 GABA 작동제 기를 의미하고, 상기 용어 "GABA 작동제"는 뇌에서 GABA계를 활성화할 수 있고 따라서 GABA와 약리학적으로 관련된 화합물을 의미한다. 따라서, 상기 용어 "GABA 작동제"는 GABA 자신을 포함하는 것으로 이해되며, 따라서 상기 용어 "GABA 작동제 기"는 GABA 자신의 기도 포함하는 것으로 이해된다.
따라서, 본 발명에 따른 GABA 작동제 기는 GABA(γ-아미노부티르산) 기 자신 이외에 항-정신병 약물에 공유 결합될 수 있는 다른 GABA 작동제 기도 포함한다.
이러한 GABA 작동제 기의 예는 (±) 바클로펜기, 이소니페코트산기, γ-히드록시부티르산기, 아미노옥시아세트산기, β-(4-클로로페닐)-γ-아미노부티르산기, 피페리딘-4-술폰산기, 3-아미노프로필포스폰산기, 3-(아미노프로필)메틸프로핀산기 및 3-(2-이미다졸릴)-4-아미노부탄산기를 포함한다.
본 발명의 또 다른 바람직한 실시형태에 따르면, 본 발명의 화학적 접합체에서 제 2 화학적 잔기는 항-증식성 약제 기이다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "항-증식성 약제 기"는 위에서 정의한 바와 같이 항-증식 활성을 특징으로 하는 화합물의 기를 의미한다.
본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 항-증식성 약제는 부티르산 또는 4-페닐부티르산이다. 이들 화합물은 항암 활성을 나타내는 것으로 알려져 있고, GABA가 유도체이며 따라서 GABA 유사 약제로서 작용할 수 있는 화합물인 것을 특징으로 한다.
따라서, 본 발명의 화학적 접합체의 제 2 화학적 잔기는 위에서 그 용어가 정의되고 예시되어 있는 바와 같이 바람직하게는 GABA 작동제 기 또는 항-증식성 약제 기인 유기산기를 포함한다.
본 발명의 화학적 접합체에서 제 2 화학적 잔기는 바람직하게는 에스테르 결 합을 통해 제 1 화학적 잔기와 공유 결합된다. 상기 에스테르 결합은 카르복실산 에스테르 결합, 아미드 결합 또는 티오에스테르 결합일 수 있다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "카르복실산 에스테르 결합"은 -O-(C=O)-" 결합을 포함한다.
상기 용어 "아미드 결합"은 -NH-C(=O)-" 결합을 포함한다.
상기 용어 "티오에스테르 결합"은 -SH-C(=O)-" 결합을 포함한다.
이러한 에스테르 결합은 에스테라아제 및 아미다아제와 같은 뇌 유도 효소에 의해 가수분해될 수 있는 것으로 알려져 있으며, 따라서 본 발명의 화학적 접합체가 뇌에서 대사 작용되는 프로드러그(prodrug)로서 작용하여 항-정신병 약물과 유기산을 동시에 방출하여 상기 항-정신병 약물과 유기산에 대한 유리한 공-약물동력학을 제공하는 것으로 본 명세서에 기재되어 있는 실험 결과에 의해 예상될 뿐 아니라 증명된다(예를 들면 도 5a 및 5b).
이러한 방법은 (i) 항-정신병 약물에 의해 유도되는 부작용의 감소 및 2개의 잔기의 2중 활성을 상승적으로 초래하는 항-정신병 약물 및 유기산의 동시 작용; (ii) 뇌 증식성 장애에 대해 상승적으로 높은 항-정신병 활성 및 상승적으로 높은 항 증식 활성을 가져오는 도파민성 수용체에 대한 프로드러그의 친화도 상승; 및 (iii) 2개의 화학적 잔기의 뇌 투과성의 개선을 제공하기 때문에 매우 유리하다.
본 발명의 또 다른 요지에 따르면, 상술한 화학적 접합체를 합성하는 방법이 제공된다. 상기 방법은 통상적으로 항-정신병 약물의 기에 공유 결합되는 유기산의 기를 얻도록 항-정신병 약물과 유기산을 반응시키는 것을 포함한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "유기산의 기" 및 "항-정신병 약물의 기"는 각각 위에서 정의된 바와 같이 "유기산기"와 "항-정신병 약물 기"와 동일한 의미를 갖는다. 유기산과 항-정신병 약물을 반응시키면, 유기산과 항-정신병 약물의 기를 포함하고 그들 사이에 공유결합이 형성되는 최종 생성물을 얻을 수 있다는 것은 당업자에게 명백하다.
따라서, 본 발명의 요지에 따른 방법에서 반응하는 유기산은 상술한 유기산기에 상응하는 임의의 화합물을 포함하고, 따라서 상술한 유기산기가 유도되는 모든 유기산을 포함한다.
예를 들면, 본 발명의 요지 내용에서 사용할 수 있는 유기산은 상술한 바람직한 GABA 작동제 기에 상응하는 GABA 작동제들을 포함한다. 유사하게, 상기 유기산은 상술한 항-증식 약제 기에 상응하는 부티르산 및 4-페닐부티르산과 같은 항-증식 약제를 포함할 수 있다.
동일한 방식으로, 본 발명의 요지에 따른 방법에서 반응되는 항-정신병 약물은 상술한 모든 항-정신병 약물기에 상응한다.
상술한 본 발명의 화학적 접합체를 합성하는 방법은 사용된 유기산의 유형 및/또는 유기산기와 항-정신병 약물기 사이의 공유 결합 유형에 따라 조절될 수 있다.
위에서 상세하게 논의한 바와 같이, 본 발명에 따른 바람직한 유기산은 예를 들면 부티르산 및 그의 유도체와 같은 항-증식성 약제, 화학식 R-C(=O)-OH(유기산기 R-(C=O)-O에 상응하는)를 갖는 유기산 등을 포함한다. 대부분의 이들 바람직한 유기산은 유리 아미노기를 포함하지 않으며, 따라서 추가적인 처리없이 본 발명의 합성 방법에 사용될 수 있다.
위에서 상세하게 논의한 바와 같이, 본 발명의 화학적 접합체에서, 유기산기 및 항-정신병 약물기는 에스테르 결합에 의해 공유 결합되고, 카르복실산 에스테르 결합, 티오에스테르 결합 또는 아미드 결합일 수 있는 에스테르 결합에 의해 공유 결합되며, 이들 용어들은 위에서 정의한 바와 같다.
카르복실산 에스테르 결합을 통해 공유 결합되는 경우, 본 발명의 화학적 접합체를 합성하는 방법은 먼저 유기산을 활성화하도록 유기산을 상응하는 아실 클로라이드 유도체로 전환하는 것을 포함한다. 이후, 상기 아실 클로라이드 유도체는 잘 알려진 친핵성 첨가 반응에 따라 전형적으로 유리 히드록실기를 포함하는 항-정신병 약물과 반응하여 카르복실산 에스테르 결합을 통해 항-정신병 약물기에 공유 결합되는 유기산기를 갖는 원하는 화학적 접합체를 얻는다. 이러한 반응은 바람직하게는 염기성 조건하에서 수행되어 항-정신병 약물을 활성화하고/또는 염산염으로 존재하는 화합물을 중화시킨다. 그러나, 유기산 및/또는 항-정신병 약물은 다른 공지된 방법에 의해 활성화될 수도 있다.
티오에스테르 결합을 통해 공유 결합되는 경우, 본 발명의 화학적 접합체를 합성하는 방법은 항-정신병 약물을 상응하는 티올 유도체로 전환시키고, 유기산을 상응하는 아실 유도체 또는 그의 활성화된 다른 유도체로 전환시키는 것을 포함한다. 이후, 상기 티올 유도체를 잘 알려진 절차에 의해 활성화된 유기산과 반응시켜 티오에스테르 결합을 통해 항-정신병 약물기에 공유 결합되는 유기산기를 갖는 원하는 화학적 접합체를 얻는다. 몇몇 현재 알려진 항-정신병 약물은 유리 티올기를 포함하고, 따라서 이러한 약물은 유기산의 아실 클로라이드 유도체와 직접 반응될 수 있음을 알 수 있다. 유리 티올기를 포함하지 않는 항-정신병 약물은 본 기술분야에 잘 알려져 있는 방법에 의해 그의 티올 유도체를 얻도록 쉽게 반응될 수 있다.
잔기가 아미드 결합을 통해 공유 결합되는 경우, 본 발명의 화학적 접합체를 합성하는 방법은 먼저 유기산을 활성화하도록 유기산을 상응하는 아실 클로라이드 유도체로 전환하고, 상기 항-정신병 약물을 그의 아민 유도체로 전환하는 것을 포함한다. 이후, 상기 아실 클로라이드 유도체는 잘 알려진 친핵성 첨가 반응 또는 아미드 결합을 형성하기 위한 다른 임의의 공지된 절차에 따라 항-정신병 약물의 아미노기와 반응하여 아미드 결합을 통해 항-정신병 약물기에 공유 결합되는 유기산기를 갖는 원하는 화학적 접합체를 얻는다. 몇몇 현재 알려진 항-정신병 약물은 유리 아민기를 포함하고, 따라서 이러한 약물은 유기산의 아실 클로라이드 유도체와 직접 반응될 수 있음을 알 수 있다. 유리 아민기를 포함하지 않는 항-정신병 약물은 본 기술 분야에 잘 알려져 있는 방법에 의해 그의 아민 유도체를 얻을 수 있도록 쉽게 반응할 수 있다.
상술한 방법은 전형적으로 유기산이 유리 아미노기를 갖지 않을 때 유효하다. 그러나, 유기산이 유리 아미노기를 포함하는 경우, GABA 작동제의 경우와 같이 예를 들면 아미노기는 항-정신병 약물과 상기 기재된 반응 중에 보호되어야 한다. 유리 아미노기는 바람직하지 않게 반응에 참여할 수 있는 상대적인 화학적 활 성기이기 때문에 보호할 필요가 있다.
따라서, 유리 아미노기를 갖는 GABA 작동제 기를 포함하는 화학적 접합체를 합성하는 바람직한 방법은 유리 아미노기를 먼저 보호하는 것을 포함한다. 특별히 한정되지는 않지만 삼차-부톡시카르보닐(Boc) 및 벤질옥시카르보닐(Cbz)과 같은 공지된 보호기와 유기산을 반응시킴으로써 아미노기를 보호할 수 있다. 이후, 아미노기-보호된 유기산을 항-정신병 약물기에 공유 결합된 아미노-보호 유기산을 얻도록 항-정신병 약물과 반응시킨다. 이후, 상기 보호기를 제거한다. 보다 바람직하게는, 상기 아미노-보호된 유기산은 항-정신병 약물과 반응시키기 전에 유기산을 활성화시키도록 그의 아실 이미다졸 유도체로 전환된다.
또한 본 발명에 따르면, 본 발명의 화학적 접합체를 활성 성분으로서 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
본 명세서에서 사용하고 있는 "약제학적 조성물"은 본 명세서에 기재되어 있는 화학적 접합체의 하나 이상과 약제학적으로 적합한 담체 및 부형제와 같은 화학 성분의 제제를 의미한다. 약제학적 조성물의 목적은 대상체에 화합물을 보다 용이하게 투여하기 위함이다.
후술하는 용어 "약제학적으로 허용되는 담체"는 대상체에 심각한 염증을 유발하지 않고 투여된 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 의미한다. 담체의 예로는 특별히 한정되지는 않지만 프로필렌 글리콜, 식염수, 유제 및 유기 용매와 물의 혼합물이 있다.
본 명세서에서 사용하고 있는 "부형제"는 화합물의 투여를 보다 용이하게 하 기 위해 약제학적 조성물에 첨가되는 비활성 물질을 의미한다. 부형제의 예는 특별히 한정되지는 않지만 탄산칼슘, 인산칼슘, 각종 슈가 및 전분, 셀룰로오스 유도체, 젤라틴, 식물성 오일 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 약제학적 담체는 락트산의 수용액이다.
이와 관련하여, 바람직한 실시형태에 따른 본 발명의 화학적 접합체의 일부는 수성 매질에 쉽게 용해되어 용이하게 제형화됨을 명심해야 한다. 이러한 편리한 제형화는 전형적으로 장쇄 지방산을 포함함으로써 수성 매질에 불용성이고 유성 제형으로서 투여되는 종래 항-정신병 약물의 에스테르 접합체에 비해 본 발명의 화학적 접합체의 추가적인 이점을 제공한다.
약물의 제형화 및 투여 기술은 본 명세서의 참고문헌으로 포함되어 있는 "Remingtons's Pharmaceutical Sciences, "Mack Publishing Co., Easton, PA, latest edition"에 기재되어 있다.
적합한 투여 경로는 예를 들면, 경구, 직장, 경점막(transmucosal), 경피, 장내 또는 근육내, 피하 및 수막내(intramedullary) 주사를 포함하는 비경구 전달, 뿐 아니라 지주막하(intrathecal), 직접 뇌실내(direct intraventricular), 정맥내, 복강내, 비강내(intranasal) 또는 안내(intraocular) 주사를 포함한다. 본 발명의 약제학적 조성물은 본 기술 분야에 공지된 공정, 예를 들면 종래의 혼합, 용해, 과립화, 당의정화(dragee-making), 균질화(levigating), 유제화, 캡슐화, 인트래핑(entrapping) 또는 동결 건조 공정에 의해 제조될 수 있다.
따라서 본 발명에 따라 사용하기 위한 약제학적 조성물은 활성 성분을 약제학적으로 사용될 수 있는 제제로 가공하는 것을 용이하게 하는 부형제 및 보조제를 포함하는 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 종래의 방식으로 제형화될 수 있다. 적합한 제형은 선택된 투여 경로에 따라 다르다.
주사하는 경우, 본 발명의 화학적 접합체는 수용액, 바람직하게는 행크스(Hank's) 용액, 링거액, 또는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜과 같은 유기 용매의 존재 또는 부재의 생리 식염수 완충액과 같은 생리학적으로 사용가능한 완충액으로 제형화될 수 있다. 경점막 투여의 경우, 투과제(penetrant)가 제형화를 위해 사용된다.
경구 투여의 경우, 상기 화학적 접합체는 활성 성분과 본 기술분야에 잘 알려진 약제학적으로 허용되는 담체를 조합함으로써 용이하게 제형화될 수 있다. 이러한 담체는 본 발명의 접합체를 환자가 경구 섭취하기 위한 정제, 알약, 당의정, 캡슐, 액체, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁액 등과 같은 제형으로 제조할 수 있게 한다. 경구용 약리학적 제제는 고체 부형제를 사용하여 얻어지는 혼합물을 경우에 따라 분쇄하고, 필요한 경우 적합한 보조제를 투여한 후, 과립 혼합물을 가공 처리하여 정제 또는 당의정 핵을 얻을 수 있다. 특히 적합한 부형제는 락토오스, 수크로오스, 만니톨 또는 소르비톨과 같은 충전제; 예를 들면 옥수수(maize) 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분, 젤라틴, 트라가칸트검(tragacanth gum), 메틸 셀룰로오스, 히드록시프로필메틸-셀룰로오스, 소듐 카르보메틸셀룰로오스와 같은 셀룰로오스 및/또는 폴리비닐피롤리돈(PVP)과 같은 생리학적으로 허용되는 폴리머가 있다. 필요한 경우, 가교된 폴리비닐 피롤리돈, 한천 또는 알긴산 또는 알긴산 나트륨과 같은 그의 염과 같은 붕해제가 첨가될 수 있다.
당의정 핵은 적합한 코팅으로 제공된다. 이를 위해, 선택적으로 아라비아 검, 활석, 폴리비닐 피롤리돈, 카르보폴 겔, 폴리에틸렌 글리콜, 티타늄 디옥사이드, 래커 용액 및 적합한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 함유할 수 있는 진한 슈가액이 사용될 수 있다. 염료 또는 안료가 활성 화합물 투여량의 상이한 조합을 확인 또는 특성화하기 위해 정제 또는 당의정 코팅에 첨가될 수 있다.
경구적으로 사용될 수 있는 약제학적 조성물은 젤라틴으로 제조된 푸쉬-핏(push-fit) 캡슐 뿐 아니라, 젤라틴 및 글리세롤 또는 소르비톨과 같은 가소제로 제조된 연질, 밀봉된 캡슐을 포함한다. 상기 푸쉬-핏 캡슐은 활성 성분과 함께 락토오스와 같은 충전제, 전분과 같은 결합제, 활석 또는 스테아르산 마그네슘과 같은 윤활제, 및 선택적으로 안정화제를 혼합하여 함유할 수 있다. 연질 캡슐에서, 상기 활성 성분은 지방 오일, 액상 파라핀, 또는 액상 폴리에틸렌 글리콜과 같은 적절한 액체에 용해 또는 현탁될 수 있다. 또한, 안정화제가 첨가될 수 있다. 경구 투여를 위한 모든 제형은 선택된 투여 경로에 대해 적합한 투여이어야 한다.
구강(buccal) 투여를 위해, 상기 조성물은 종래의 방식으로 제형된 정제 또는 마름모꼴 정제(lozenge) 형태를 가질 수 있다.
비강 흡입에 의한 투여를 위해, 본 발명에 따라 사용하기 위한 활성 성분은 적합한 추진제(propellant) 예를 들면 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로디플루 오로메탄, 디클로로-테트라플루오로에탄 또는 이산화탄소의 사용과 함께 가압 팩(pack) 또는 분무기로부터의 에어로졸 분무 형태로 편리하게 전달된다. 가압 에어로졸의 경우, 투여 단위는 계량된 양을 전달하기 위한 밸브를 제공함으로서 결정될 수 있다. 캡슐 및 예를 들면 흡입기 또는 가스 흡입기(insufflator)에서 사용하기 위한 젤라틴의 카트리지는 상기 화합물 및 락토오스 또는 전분과 같은 적절한 분말 기재의 분말 혼합물을 함유하여 제형될 수 있다.
본 명세서에 기재되어 있는 약제학적 조성물은 예를 들면 순간(bolus) 주사 또는 연속 주입에 의해 비경구 투여를 위해 제형화될 수 있다. 주사를 위한 제형은 단위 투여 형태, 예를 들면 경우에 따라 보존제가 첨가된 앰플 또는 다중 투여 용기로 제공될 수 있다. 상기 조성물은 유성 또는 수성 매질 중의 현탁액, 용액 또는 유제일 수 있고, 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형 제제를 함유할 수 있다.
비경구 투여를 위한 약제학적 조성물은 수용성 형태로 활성 제제의 수용액을 포함한다. 또한, 활성 성분의 현탁액은 적절한 유성 또는 수성 기재 주사 현탁액으로서 제조될 수 있다. 적합한 친유성 용매 또는 부형제는 참기름 또는 에틸 올레에이트, 트리글리세라이드 또는 리포솜과 같은 합성 지방산 에스테르와 같은 지방성 오일을 포함한다. 수성 주사 현탁액은 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스, 소르비톨 또는 덱스트란과 같이 현탁액의 점도를 증가시키는 물질을 함유할 수 있다. 경우에 따라, 상기 현탁액은 또한 고농도 용액을 제조하기 위해 활성 성분의 용해도를 증가시키는 적합한 안정화제 또는 제제를 함유할 수 있다.
이와 다르게, 상기 활성 성분은 사용하기 전에 예를 들면 무-피로겐(pyrogen) 수성 기재 용액과 같은 적합한 부형제으로 구성화하기 위한 분말 형태일 수 있다.
본 발명의 화학적 접합체는 또한 예를 들면 코코아 버터 또는 다른 글리세라이드와 같은 종래의 좌약 기재를 사용하여 좌약 또는 배변 관장제(retension enema)와 같은 직장용 조성물로 제형화될 수 있다.
본 명세서에 기재되어 있는 약제학적 조성물은 겔상의 담체 또는 부형제의 적절한 고체를 포함할 수도 있다. 이러한 담체 또는 부형제의 예로서는 특별히 한정되지는 않지만, 탄산칼슘, 인산칼슘, 각종 슈가, 전분, 셀룰로오스 유도체, 젤라틴 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리머를 포함한다.
본 발명의 내용에 비추어 사용하기 적합한 약제학적 조성물은 활성 성분이 의도된 목적을 달성하기에 유효한 양으로 함유되어 있는 조성물을 포함한다. 보다 구체적으로, 치료학적 유효량은 질환의 증상을 예방, 경감 또는 완화하거나 처리할 대상체의 생존을 연장하기에 화학적 접합체의 양을 의미한다.
치료적 유효량의 결정은 특히 본 명세서에 기재되어 있는 상세한 설명에 비추어 본 기술 분야의 당업자의 능력 안에 있다.
본 발명의 방법에서 사용되는 모든 화학적 접합체에 대해, 상기 치료 유효량 또는 투여량은 세포 배양물 및/또는 동물에서 활성 분석 초기에 평가될 수 있다. 예를 들면, 투여량은 활성 분석에 의해 결정되는 IC50(예를 들면, 증식 활성을 최대 억제의 50%를 달성하는 시험 화합물의 농도)을 포함하는 순환 농도 범위를 달성하기 위해 수치화될 수 있다. 이러한 정보는 인간에서 유용한 투여량을 보다 정확하게 결정하기 위해 사용될 수 있다.
본 명세서에 기재되어 있는 화학적 접합체의 독성 및 치료적 효능은 실험 동물에서 표준 약제학적 절차에 의해 결정될 수 있는데, 예들 들면 대상 화합물에 대한 IC50 및 LD50(시험 동물의 50%를 사멸시키는 치사 투여량)을 측정함으로써 결정될 수 있다. 이러한 활성 분석 및 동물 연구로부터 얻어진 데이터는 인간에서 사용하기 위한 투여량 범위를 수치화하는데 사용될 수 있다.
채용된 투여 형태 및 사용된 투여 경로에 따라 다양하게 투여될 수 있다. 정확한 제형, 투여 경로 및 투여량은 의사가 환자의 상태를 감안하여 선택할 수 있다(예를 들면 Fingl, et al., 1975, in "The Pharmacological Basis of Therapeutics", Ch. 1 p.1 참조).
투여량 및 투여 간격을 개별적으로 조절하여 항-정신병 및/또는 항-증식 효과를 유지하기에 충분한 활성 잔기의 혈장내 수준, 즉 최소 유효 농도(MEC)를 제공할 수 있다. MEC는 각 제제에 따라 다양하지만, 시험관내 및/또는 생체내 데이터로부터 평가될 수 있는 바, 예를 들면 임의의 세포의 증식을 50-90% 억제하기에 필요한 농도는 본 명세서에 기재된 분석법을 사용하여 확인할 수 있다. MEC를 달성하기에 필요한 투여량은 개인별 특성 및 투여 경로에 따라 다양할 것이다. HPLC 분석법 또는 생체 분석법이 혈청 농도를 결정하기 위해 사용될 수 있다.
투여 간격은 MEC 수치를 사용하여 결정될 수도 있다. 제제는 시간의 10-90%, 바람직하게는 30-90%, 가장 바람직하게는 50-90%에 대해서는 MEC 이상의 혈장 수준을 유지하는 투여 방법을 사용하여 투여되어야 한다.
치료할 상태의 중증도 및 반응도에 따라, 수일 내지 수주 또는 치료가 수행될 때까지 또는 질환 상태가 경감될 때까지 치료 지속 기간을 갖는 서방성 조성물의 단일 투여에 의해 투여될 수 있다.
조성물의 투여량은 물론 처리할 대상체, 질병의 경중, 투여 양식, 처방 의사의 판단 등에 따라 다를 것이다.
본 발명의 조성물은 필요한 경우 활성 성분을 함유하는 하나 이상의 단위 투여 형태를 함유할 수 있는 FDA에 의해 승인된 키트와 같은 팩(pack) 또는 분배기(dispenser) 장치 형태로 제공될 수 있다. 상기 팩은 예를 들면 블리스터(blister) 팩과 같은 금속 또는 플라스틱 호일을 포함할 수 있다. 상기 팩 또는 분배기 장치는 투여 및 처방과 관련한 지시문을 포함할 수 있다. 상기 팩 또는 분배기는 또한 약품의 제조, 사용 또는 판매를 규제하는 관리 부서에 의해 처방된 형태로 용기와 관련된 지시문이 포함될 수 있다. 이러한 지시문은 조성물의 형태 또는 인간 또는 동물 투여에 대한 관리 부서의 승인 내용을 반영한다. 이러한 지시문은 예를 들면 처방 약물에 대한 미국 식품 의약품국에 의해 승인된 표지문 또는 승인된 제품 함유물의 표지문일 수 있다. 상용성이 있는 약제학적 담체에서 제형화된 본 발명의 화학적 접합체를 포함하는 조성물은 제조되고, 적절한 용기에 담겨지고, 지시된 상태의 치료를 위해 표지될 수 있다. 표지에 대해 지시 된 적합한 상태는 예를 들면 상술한 바 있는 정신분열증, 유아 정신병, 헌팅턴 병, 질 드 라 투렛 증후군, 뇌 증식성 장애 및 MDR 암, 및 위에서 정의된 약물 감작화를 포함할 수 있다.
따라서, 본 발명의 바람직한 실시형태에 따르면, 상기 약제학적 조성물은 다음과 같은 하나 이상의 용도를 위해 포장 재료로 포장되고, 상기 포장 재료 상에 또는 그 안의 인쇄물에 의해 식별된다: 정신병적 장애 또는 질환의 치료용, 뇌 또는 말초 증식성 장애 또는 질환의 치료용, 화학 치료제와 조합하여 사용되고/또는 약물 감작화가 유리한 의학적 상태에서 MDR 암과 같은 암의 치료용 및 약물 감작화용.
또한 본 발명에 따르면, 대상체(예를 들면 인간)에서 정신병적 장애 또는 질환을 치료 또는 예방하기 위한 방법이 제공된다. 이 방법은 처리 대상체에 본 발명의 하나 이상의 화학적 접합체의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "방법"은 특별히 한정되는 것은 아니지만 화학, 약리학, 생물학, 생화학 및 의학 분야의 당업자에게 공지되어 있거나 또는 방식, 수단, 기술 및 절차로부터 쉽게 개발할 수 있는 방식, 수단, 기술 및 절차를 포함하는 소정의 과제를 달성하기 위한 방식, 수단, 기술 및 절차를 의미한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "치료"는 질환의 진전을 저해하거나, 실질적으로 억제하거나 완만하게 하거나 진행시키거나 후퇴시키거나, 또는 질환의 임상적 증상을 실질적으로 경감하거나 질환의 임상적 증상의 출현을 실질적으로 예방하는 것을 포함한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "정신병적 장애 또는 질환"은 중추 신경계 손상 결과로 나타나는 정신 상태를 특징으로 하는 장애 또는 질환을 의미한다. 본 발명의 화학적 접합체를 이용하여 치료 가능한 정신병적 장애 또는 질환의 예는 특별히 한정되지는 않지만, 정신분열증, 유아 정신병, 헌팅턴 병 및 질 드 라 투렛 증후군을 포함한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "투여"는 본 발명의 화학적 접합체를 정신병적 장애 또는 질환에 의해 영향을 받는 뇌의 영역 또는 부위에 전달하는 것을 의미한다.
본 발명의 화학적 접합체는 복강내 투여될 수 있다. 보다 바람직하게는, 경구 투여된다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "대상체"는 동물, 전형적으로는 인간을 포함하는 혈뇌 장벽(blood brain barrier)를 갖는 포유류를 의미한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "치료 유효량"은 치료할 정신병적 장애 또는 질환의 하나 이상의 증상을 일정 정도 경감시킬 수 있는 화학적 접합체의 투여량을 의미한다.
본 발명에 따른 치료 유효량은 바람직하게는 1mg/체중kg 내지 50mg/체중kg, 보다 바람직하게는 2mg/체중kg 내지 30mg/체중kg, 보다 바람직하게는 2mg/체중kg 내지 20mg/체중kg 및 가장 바람직하게는 2mg/체중kg 내지 10mg/체중kg의 범위내이다.
따라서, 본 발명은 항-정신병 활성을 나타내는 화학적 접합체에 관한 것이다. 본 발명의 화학적 접합체는 강화된 항-정신병 활성을 나타내고, 그로 인해 유 도되는 부작용이 최소화되는 것을 특징으로 하기 때문에 매우 유리하다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "부작용"은 대상체에 임의의 약물을 투여한 결과 진행될 수 있는 유해한 증상을 의미한다. 이러한 증상으로는 예를 들면 상술한 바 있는 추체외로 증상을 포함할 수 있으며, 전형적으로는 항-정신병 약물의 투여와 관련이 있다.
또한 본 발명에 따르면, 대상체(예를 들면 인간)에서 증식성 장애 또는 질환을 치료 또는 예방하기 위한 방법이 제공된다. 상기 방법은 치료 대상체에 본 발명의 화학적 접합체의 하나 이상의 치료 유효량을 투여하는 것을 포함한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "증식성 장애 또는 질환"은 세포 증식을 특징으로 하는 장애 또는 질환을 의미한다. 본 발명에 의해 예방 또는 치료될 수 있는 세포 증식 상태는 예를 들면 암과 같은 악성 종양 및 양성 종양을 포함한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "암"은 Stedman's medical Dictionary 25th edition (Hensyl ed., 1990)에서 정의한 바와 같이 주위를 둘러싸고 있는 조직으로 침투할 수 있고, 다른 부위로 전이될 수 있는 다양한 유형의 악성 신생물(neoplasma)을 의미한다. 본 발명의 화학적 접합체에 의해 치료될 수 있는 암의 예는 특별히 한정되지는 않지만 뇌 및 피부암을 포함한다. 이러한 암들은 또한 분화될 수 있다. 예를 들면, 뇌암은 다형성 아교모세포종(glioblastoma multiforme), 역행성 별세포종(anaplastic astrocytoma), 별세포종(astrocytoma), 상의세포종(ependyoma), 희소돌기아교세포종(oligodendroglioma), 수모세포종(medulloblastoma), 수막종(meningioma), 육종(sacroma), 혈관모세포종(hemangioblastoma) 및 송과체 실질(peneal parenchymal)을 포함한다. 피부암은 흑색종 및 카포시 육종을 포함한다. 본 발명의 화학적 접합체를 사용하여 치료할 수 있는 다른 암 질환으로는 유두종(papilloma), 모세포종, 난소암, 전립선암, 편평세포(squamous cell) 암종, 별아교모세포종(astrocytoma), 두부(head)암, 목부(neck)암, 방광암, 유방암, 폐암, 대장암(colorectal), 갑상선암, 췌장암, 위암, 간세포(hepatocellular) 암종, 백혈병, 림프종, 호지킨 림프종 및 부르킷(Burkitt's) 림프종을 포함한다. 기타 비암성 증식성 장애들이 본 발명의 화학적 접합체를 사용하면 치료 가능하다. 이러한 비암성 증식성 장애는 예를 들면 협착증(stenosis), 재협착증(restenosis), 스텐트내(in-stent) stenosis, 혈관 이식 재협착층, 관절염, 류마티스 관절염, 당뇨병 망막증(retinopathy), 혈관신생(angiogenesis), 폐섬유증(pulmonary fibrosis), 간경화증(hepatic cirrhosis), 죽상동맥경화증(atherosclerosis), 사구체신염(glomerulonephritis), 당뇨병 신증(nephropathy), 혈소판 미세혈관병증(microangiopathy) 증후군 및 이식 거부반응을 포함한다.
후술하는 실시예 부분에 설명되는 바와 같이, 본 발명의 화학적 접합체는 MDR 암 세포를 포함하는 광범위한 암 세포에 대한 높고 강력한 항-증식 활성을 나타낸다.
후술하는 실시예 부분에 설명되는 바와 같이, 본 발명의 화학적 접합체는 또한 각종 화학 치료 약물과 조합하여 사용할 때 약물 감작 활성을 나타낸다.
따라서, 본 발명에 따르면, 위에서 정의한 바와 같은 약물 감작화 방법이 제 공된다. 상기 방법은 화학 치료 약물(들)의 하나 이상의 치료 유효량과 본 발명의 화학적 접합체의 약물 감작 유효량을 대상체에 투여하는 것을 포함한다.
본 명세서에서 사용하고 있는 용어 "약물 감작 유효량"은 화학 치료제의 치료 유효량 존재하에서 측정 가능한 약물 감작을 위한 충분한 양을 의미한다.
상기 방법은 특별히 한정되지는 않지만 백혈병, 림프종, 암종 또는 육종(sacroma)와 같은 MDR 암을 가진 대상체의 경우에 특히 유용하다. 본 발명에 따르면, 화학 치료제는 예를 들면 다음 중 하나일 수 있다: 질소 겨자(mustard), 에틸렌이민 및 메틸멜라민, 알킬 술포네이트, 니트로소우레아 및 트라아젠과 같은 알킬화제; 엽산(folic acid) 유사체, 피리미딘 유사체 및 푸린 유사체와 같은 대사길항물질(antimetabolite); 빈카(vinca) 알칼로이드, 에피포도필로톡신(epipodophyllotoxin), 항생제, 효소, 탁산(taxane) 및 생물학적 반응 개질제와 같은 천연물; 백금 배위 착물, 안트라센디온, 안트라사이클린, 치환된 요소, 메틸 히드라진 유도체 또는 아드레노코르티칼 억제제(adrenocortical suppressant)와 같은 혼합 시약(miscellaneous agent); 또는 아드레노코르티코스테로이드(adrenocorticosteroid), 프로게스틴(progestin), 에스트로겐, 항에스트로겐, 안드로겐, 항안드로겐, 또는 고나도트로핀(gonadotropin)-방출 호르몬 유사체와 같은 호르몬 또는 길항제. 바람직하게는, 상기 화학 치료제는 질소 겨자, 에피포도필로톡신, 항생제 또는 백금 배위 착물이다. 보다 바람직한 화학 치료제는 시스플라틴 또는 빈시스틴이다.
따라서, 본 발명은 높은 항-정신병 활성을 나타내고, 부작용을 실질적으로 감소시키며, 상응하는 비-조합된 항-정신병제보다 낮은 독성을 나타내는 항-정신병 약물의 신규한 화학적 접합체를 개시하고 있다. 이들 신규한 접합체들은 항-증식 활성 및 약물 감작 활성을 나타내며, 따라서 감소된 부작용, 낮은 독성 및 뇌세포에 대한 높은 친화성을 특징으로 하는 프로드러그 또는 화학 치료 약물과 조합 사용되는 약물 감작제로서 증식성 장애를 치료하는데 유익하게 사용될 수 있다.
따라서, 본 발명을 한정하고자 하는 것이 아닌 후술하는 실시예를 실시할 때 본 발명의 추가적인 목적, 이점 및 신규한 특징은 본 기술 분야의 당업자에게는 명백한 것이다. 추가적으로, 상술하고 또한 후술하는 청구범위에서 청구되고 있는 본 발명의 다양한 실시형태 및 요지들은 하기 실시예에서 실험적으로 뒷받침된다.
실시예
상술한 기재 내용과 함께 하기 실시예를 참조로 하여 비제한적인 방식으로 본 발명을 설명한다.
화학적 합성 및 분석
본 발명의 예시적인 화학적 접합체를 신경이완제인 페르페나진 및 플루페나진과 단쇄(short-chain) 지방산인 프로피온산, 부티르산 및 발레르산 및 4-페닐부티르산 및 γ-아미노부티르산(GABA)을 반응시켜 합성하였다. 상기 화합물들은 고수율로 제조되었고, 1% 락트산 수용액에 가용성인 결정성 고체로 분리되었다.
페르페나진 또는 플루페나진 및 유기산으로부터 제조되는 화학적 접합체의 합성 - 일반적 절차: 5-10ml 디메틸포름아미드(DMF) 중 신경이완제인 페르페나진 또는 플루페나진(1 당량)의 혼합물, 단쇄 지방산의 아실 클로라이드 유도체(1.1당량) 및 경우에 따라 Et3N(2당량)(HCl 염으로서 발견되는 출발 물질을 유리시키기 위해 사용됨)의 혼합물을 상온, 질소 분위기하에서 24시간 동안 교반하였다. 이후, 상기 혼합물을 에틸아세테이트 및 물 사이에서 분배(partition)하였다. 다음, 유기층을 5% NaHCO3 및 염수로 세척하고, MgSO4로 건조하고, 여과하고 증발시켜 원하는 생성물을 얻었다.
페르페나진 4-페닐부티레이트(AN 130)의 합성: 페르페나진 및 4-페닐부티릴 클로라이드(4-페닐부티르산의 아실 클로라이드)를 상술한 바와 같이 반응시켰다. 이렇게 얻어진 조(crude) 잔류물을 용출제로서 1:10 메탄올: 에틸아세테이트 혼합물을 사용하여 실리카겔 크로마토그래피법으로 정제하였다. 황색 오일로서 생성물을 얻었다(수율 78%).
1H-NMR(CDCl3): δ= 1.94(quint, J=6Hz, 4H, CO2CH2 CH2, ArNCH2CH2), 2.32(t, J=6Hz, 2H, CO2CH2), 2.64(m, 12H, six NCH2), 3.93(t, J=5.6Hz, 2H, ArNCH 2), 4.17(t, J=5.3Hz, 2H, NCH2CH2O), 6.82-7.30(m, 12H, Ar, Ph)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 23.25(CH2CH2CO2), 26.46(ArNCH 2CH2), 33.56(CH2Ph), 35.06(CH2CO2), 45.10(ArNCH2), 52.23(two NCH2), 52.72(two NCH2), 55.25(ArNCH2CH2CH2), 57.04(NCH2CH2O), 61.32(NCH 2CH2O), 116.00(C1,C10), 122.51(C3), 123.15(C8), 123.86(CH2C(CH)2), 125.13(C 2), 126.02(p-Ph), 127.56(C9), 127.63(C7), 128.01(o-Ph), 128.41(m-Ph), 128.49(C4), 173.33(CO 2)ppm.
MS(CI, i-Bu) : m/z(%)= 550(MH+, 1.7).
페르페나진 부티레이트(AN 167)의 합성: 페르페나진 및 부티릴 클로라이드(부티르산의 아실 클로라이드)를 상술한 바와 같이 반응시켰다. 황색 오일로서 생성물을 얻었고(수율 74%), 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H-NMR(CDCl3): δ= 0.93(t, J=7.36Hz, 3H, Me), 1.63(sext, J=7.44Hz, 2H, CH2Me), 1.95(quint, J=6.7Hz, 2H, ArNCH2CH2), 2.27(t, J=7.46Hz, 2H, CO2CH2), 2.43(m, 10H, five NCH2), 2.57(t, J=5.96Hz, 2H,NCH2CH2O), 3.66(t, J=5.96Hz, 2H, ArNCH2), 4.18(t, J=5.9Hz, 2H, NCH2CH2O), 6.66(m, 7H, Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 13.54(CH2CH2), 18.29(MeCH2 ), 24.06(ArNCH2CH2), 36.03(CH2CO2), 45.15(ArNCH2), 53.09(two NCH2), 53.23(two NCH2), 55.30(ArNCH2CH2CH2), 56.51(NCH2CH2O), 61.48(NCH 2CH2O), 115.64(C1,C10), 122.02(C3), 122.69(C8), 123.27(C5), 124.52(C6), 127.23(C 7), 127.29(C9), 127.68(C4), 133.00(C2), 144.32(C12), 146.29(C11), 173.37(CO 2)ppm.
MS(CI, NH3) : m/z(%)= 473(M+, 100), 474(MH+, 82.64).
페르페나진 프로피오네이트(AN 177)의 합성: 페르페나진 및 프로피오닐 클로라이드(프로피온산의 아실 클로라이드)를 상술한 바와 같이 반응시켰다. 황색 오일로서 생성물을 얻었고(수율 85%), 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H-NMR(CDCl3): δ= 1.12(t, J=7.53Hz, 3H, Me), 1.95(quint, J=6.8Hz, 2H, ArNCH2CH2), 2.32(q, J=7.57Hz, 2H, CO2CH2), 2.51(m, 10H, five NCH2), 2.61(t, J=5.95Hz, 2H, NCH2CH2O), 3.89(t, J=6.8Hz, 2H, ArNCH2), 4.16(t, J=9.92Hz, 2H, NCH2CH2O), 6.98(m, 7H, Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 9.01(CH3), 24.08(ArNCH2CH2 ), 27.44(CH2CO2), 45.18(ArNCH2), 53.09(two NCH2), 53.26(two NCH2), 55.32(ArNCH 2CH2CH2), 56.50(NCH2CH2O), 61.63(NCH2CH2O), 115.67(C1,C 10), 122.05(C3), 122.72(C8), 123.30(C5), 124.56(C6), 127.26(C7), 127.33(C9), 127.71(C 4), 133.03(C2), 144.35(C12), 146.32(C11), 174.24(CO2)ppm.
MS(CI, NH3) : m/z(%)= 459(MH+, 100), 458(M, 47.63).
페르페나진 발레레이트(AN 178)의 합성: 페르페나진 및 발레릴 클로라이드(발레르산의 아실 클로라이드)를 상술한 바와 같이 반응시켰다. 얻어진 조 잔류물을 용출제로서 7:4 에틸아세테이트: 헥산 혼합물을 사용하여 실리카겔 크로마토그래피법에 의해 정제하였다. 황색 오일로서 생성물을 얻었다(수율 75%).
1H-NMR(CDCl3): δ= 0.86(t, J=7.23Hz, 3H, Me), 1.29(sext, J=6.97Hz, 2H, CH2Me), 1.56(quint, J=7.09Hz, 2H, CH2CH2CO2), 1.87(quint, J=6.79Ha, 2H, ArNCH2CH2), 2.26(t, J=7.64Hz, 2H, CH2CO2), 2.37(m, 10H, five NCH2), 2.54(t, J=5.93Hz, 2H, ArNCH2), 4.14(t, J=5.95Hz, 2H, NCH2CH2O), 6.53-7.14(m, 7H, Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 13.51(CH3CH2), 22.02(CH2 Me), 23.89(CH2CH2Me), 26.82(ArNCH2CH2), 33.80(CH2CO2), 45.07(ArNCH2 ), 53.00(two NCH2), 53.16(two NCH2), 55.09(ArNCH2CH2CH2), 56.46(NCH2CH 2O), 61.42(NCH2CH2O), 111.68(q, J=3.77Hz, C1), 115.73(C10), 118.74(q, J=3.77Hz, C3), 122.85(C8), 123.77(C5), 124.02(q, J=272Hz, CF3), 127.20(C7), 127.29(C9), 127.42(C 4), 129.34(q, J=32Hz, C2), 129.69(C5), 144.08(C11), 145.51(C12), 173.45(CO 2)ppm.
MS(CI/NH3) : m/z(%)= 522(MH+, 100).
플루페나진 프로피오네이트(AN 179)의 합성: 플루페나진 및 프로피오닐 클로라이드(프로피오산의 아실 클로라이드)를 상술한 바와 같이 반응시켰다. 황색 오일로서 생성물을 얻었고(수율 95%), 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H-NMR(CDCl3): δ= 1.12(t, J=7.55Hz, 3H, Me), 1.91(quint, J=7.18Hz, 2H, ArNCH2CH2), 2.32(q, J=7.56Hz, 2H, CO2CH2), 2.45(m, 10H, five NCH2), 2.59(t, J=5.92Hz, 2H, NCH2CH2O), 3.93(t, J=7.12Hz, 2H, ArNCH2 ), 4.17(t, J=5.95Hz, 2H, NCH2CH2O), 6.67-7.14(m, 7H, Ar).
13C-NMR(CDCl3): δ= 8.91(Me), 23.87(ArNCH2CH2), 27.33(CH 3CO2), 45.05(ArNCH2), 52.98(two NCH2), 53.17(two NCH2), 55.07(ArNCH 2CH2CH2), 56.42(NCH2CH2O), 61.54(NCH2CH2O), 111.65(q, J=3Hz, C1), 115.71(C10), 118.73(q, J=3.77Hz, C3), 122.84(C8), 123.73(C5), 123.99(q, J =272Hz, CF3), 127.18(C7), 127.27(C9), 127.41(C4), 129.30(q, J=32Hz, C2), 129.65(C 5), 144.05(C11), 145.48(C12), 174.10(CO2).
MS(CI/NH3) : m/z(%)= 494(MH+, 100).
플루페나진 부티레이트(AN 180)의 합성: 플루페나진 및 부티릴 클로라이드를 상술한 바와 같이 반응시켰다. 황색 오일로서 생성물을 얻었고(수율 97%), 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H-NMR(CDCl3): δ= 0.93(t, J=7.4Hz, 3H, Me), 1.32(sext, J=7.4Hz, 2H, CH2ME), 1.92(quint, J=7.18Hz, 2H, ArNCH2CH2), 2.27(t, J=7.4Hz, 2H, CO2CH2), 2.45(m, 10H, five NCH2), 2.58(t, J=5.9Hz, 2H, NCH2CH2O), 3.93(t, J=7.2Hz, 2H, ArNCH2), 4.17(t, J=5.98Hz, 2H, NCH2CH2O), 6.67-7.13(m, 7H, Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 13.42(CH3CH2), 18.20(MeCH2 ), 23.85(ArNCH2CH2), 35.92(CH3CO2), 45.02(ArNCH2), 52.97(two NCH2), 53.14(two NCH2), 55.04(ArNCH2CH2CH2), 56.43(NCH2CH2O), 61.39(NCH 2CH2O), 111.62(q, J=3Hz, C1), 115.68(C10), 118.68(q, J=3.77Hz, C3), 122.80(C8), 123.70(C 5), 123.98(q, J=272Hz, CF3), 127.15(C7), 127.24(C9), 127.38(C4 ), 129.27(q, J=32Hz, C2), 129.62(C5), 144.03(C11), 145.46(C12), 174.23(CO2)ppm.
MS(CI/CH3) : m/z(%)= 507.18(M+, 75.3), 508.18(MH+, 57.57), 419.13(M-C4H8O2, 82).
플루페나진 발레레이트(AN 181)의 합성: 플루페나진 및 발레릴 클로라이드(발레르산의 아실 클로라이드)를 상술한 바와 같이 반응시켰다. 얻어진 조 잔류물을 용출제로서 7:4 에틸아세테이트: 헥산 혼합물을 사용하여 실리카겔 크로마토그래피법에 의해 정제하였다. 황색 오일로서 생성물을 얻었다(수율 75%).
1H-NMR(CDCl3): δ= 0.86(t, J=7.23Hz, 3H, Me), 1.29(sext, J=6.97Hz, 2H, CH2ME), 1.56(quint, J=7.09Hz, 2H, CH2CH2CO2), 1.87(quint, J=6.79Hz, 2H, ArNCH2CH2), 2.26(t, J=7.64Hz, 2H, CH2CO2), 2.37(m, 10H, five NCH2), 2.54(t, J=5.93Hz, 2H, ArNCH2), 4.14(t, J=5.95Hz, 2H, NCH2CH2 O), 6.53-7.14(m, 7H, Ar).
13C-NMR(CDCl3): δ= 13.51(Me), 22.02(CH2Me), 23.89(CH2 CH2Me), 26.82(ArNCH2CH2), 33.80(CH3CO2), 45.07(ArNCH2 ), 53.00(two NCH2), 53.16(two NCH2), 55.09(ArNCH2CH2CH2), 56.46(NCH2CH 2O), 61.42(NCH2CH2O), 111.68(q, J=3.77Hz, C1), 115.73(C10), 118.74(q, J=3.77Hz, C3), 122.85(C8), 123.77(C5), 124.02(q, J=272Hz, CF3), 127.20(C7), 127.29(C9), 127.42(C 4), 129.34(q, J=32Hz, C2), 129.69(C5), 144.08(C11), 145.51(C12), 173.45(CO 2).
MS(CI/NH3) : m/z(%)= 522(MH+, 100)
페르페나진 또는 플루페나진 및 아미노 유기산으로부터 제조되는 화학적 접합체의 합성 - 일반적 절차 : 5-10ml DMF 중의 N-보호된 아미노산(1당량) 및 카르보닐 디이미다졸(CDI)(1.1당량)의 혼합물을 질소 분위기하에서 1시간 동안 교반하였다. 이후, 페르페나진 또는 플루페나진(1당량)을 첨가하고, 혼합물을 질소 분위기하 90℃에서 24시간 동안 교반하였다. 이렇게 얻어진 슬러리를 증발시키고 에틸 아세테이트와 물로 분배하였다. 얻어진 물층을 2번 에틸 아세테이트로 추출하고, 조합된 유기층을 NaHCO3로 2번, 염수로 2번 세척하고, MgSO4로 건조하고, 여과하고 증발시켰다. N-보호된 생성물을 황색 오일로서 얻었다.
상기 N-보호기를 다음과 같이 생성물로부터 제거하였다: 에틸아세테이트 중 N-보호된 생성물 용액에, 에틸아세테이트 중 4N HCl 용액을 적가하였다. 이 혼합물을 상온에서 2시간 동안 교반하였다. 이후, 용매를 증발시키고, 잔류물을 고진공하에서 더 건조시켰다. 트리히드로클로라이드염으로서 얻어진 생성물을 메탄올/에테르 혼합물로 재결정하고, 여과 및 건조하였다.
페르페나진 N-boc-4-아미노부티레이트의 합성: 페르페나진 및 N-t-boc-GABA(N-t-boc-보호된 4-아미노부티르산)을 상술한 바와 같이 반응시켰다. 이렇게 얻어진 조 생성물을 20:1 에틸아세테이트: 에탄올의 혼합물을 용출제로 사용하여 실리카겔 크로마토그래피법으로 정제하였다. 황색 오일로서 생성물을 얻었다(수율 63%).
1H-NMR(CDCl3): δ= 1.43(s, 9H, t-Bu), 1.82(quint, J=7.18Hz, 2H, CH2CH2NHBoc), 1.90(quint, J=7.18Hz, 2H, ArNCH2CH2 ), 2.35(t, J=8.97Hz, 2H, CO2CH2), 2.42(m, 10H, five NCH2), 2.60(t, J=5.98Hz, 2H, NCH 2CH2O), 3.16(q, J=6.85Hz, 2H, CH2NHBoc), 3.84(t, J=7.2Hz, 2H, ArNCH2), 4.18(t, J=5.98Hz, 2H, NCH2CH2O), 5.10(bs, 1H, NH), 6.83(m, 7H, Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 23.92(CH2CH2NHBoc), 24.98(ArNCH 2CH2), 28.21(t-Bu), 39.50(CH3CO2), 45.05(ArNCH2), 52.89(two NCH2), 53.03(two NCH2), 55.15(ArNCH2CH2CH2), 56.34(NCH2CH2O), 60.13(CH 2NHBoc), 61.29(NCH2CH2O), 78.80(CMe3), 115.60(C1,C10), 121.96(C3), 122.65(C 8), 123.22(C5), 124.45(q,C6), 127.21(C7,C4), 127.62(C9), 132.93(C2), 144.23(C12 ), 146.23(C11), 155.79(NCO2), 172.92(CO2)ppm.
플루페나진 N-boc-4-아미노부티레이트의 합성: 플루페나진 및 N-t-boc-GABA(N-t-boc-보호된 4-아미노부티르산)을 상술한 바와 같이 반응시켰다. 이렇게 얻어진 조 생성물을 20:1 에틸아세테이트: 에탄올의 혼합물을 용출제로 사용하여 실리카겔 크로마토그래피법으로 정제하였다. 황색 오일로서 생성물을 얻었다(수율 75%).
1H-NMR(CDCl3): δ= 1.49(s, 9H, t-Bu), 1.77(quint, J=6.38Hz, 2H, CH2CH2NHBoc), 1.90(quint, J=6.96Hz, 2H, ArNCH2CH2 ), 2.35(t, J=6.38Hz, 2H, CO2CH2), 2.45(m, 10H, five NCH2), 2.58(t, J=5.8Hz, 2H, NCH 2CH2O), 3.14(q, J=5.8Hz, 2H, CH2NHBoc), 3.94(t, J=6.38Hz, 2H, ArNCH2), 4.2(t, J=5.8Hz, 2H, NCH2CH2O), 4.92(bs, 1H, NH), 6.8-7.2(m, 7H, Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 23.88(CH2CH2NHBoc), 25.07(ArNCH 2CH2), 28.28(t-Bu), 39.60(CH3CO2), 45.13(ArNCH2), 52.94(two NCH2), 53.04(two NCH2), 55.13(ArNCH2CH2CH2), 56.43(NCH2CH2O), 60.22(CH 2NHBoc), 61.36(NCH2CH2O), 78.92(CMe3), 111.77(q, J=3.77Hz, C1), 115.82(C10), 118.85(q, J=3.77Hz, C3), 122.97(C8), 123.91(C5), 124.05(q, J=272Hz, CF3), 127.30(C 7), 127.39(C9), 127.52(C4), 129.42(q, J=32Hz, C2), 129.82(C5), 144.12(C 11), 145.58(C12), 155.82(NCO2), 173.01(CO2)ppm.
페르페나진 4-아미노부티레이트 트리하이드로클로라이드(AN 168)의 합성: 상술한 바와 같이 얻어진 페르페나진 N-boc-4-아미노부티레이트를 상술한 바와 같이 HCl과 반응시켰다. 트리하이드로클로라이드 생성물을 점성이 있는 반-고형 오일로 서 얻었다(정량적 수율).
1H-NMR(CDCl3): δ= 1.93(quint, J=7.14Hz, 2H, CH2CH2 NH2), 2.23(quint, m, 2H, ArNCH2CH2), 2.61(t, J=7.14Hz, 2H, CO2CH2), 3.01(m, 2H, CH2CH2), 3.33(m, 2H, ArNCH2CH2), 3.48-3.87(m, 10H, five NCH2), 4.10(t, J=6.4Hz, 2H, NCH2CH2O), 4.48(m, 2H, ArNCH2), 7-7.31(m, 7H, Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 22.34(CH2CH2NH2), 22.93(ArNCH 2CH2), 31.11(CH3CO2), 39.56(CH2NH2), 44.76(ArNCH2), 49.42(two NCH2), 49.61(two NCH2), 55.29(ArNCH2CH2CH2), 56.08(NCH2CH2O), 58.64(NCH 2CH2O), 116.69(C10), 117.20(C1), 123.49(C3), 124.19(C8), 125.44(C5), 126.42(C6), 128.20(C 7), 128.56(C9), 128.80(C4), 134.23(C2), 144.97(C12), 147.37(C11), 173.04(CO 2)ppm.
MS(CI/CH4) : m/z(%)= 403.09(MH+ - C4H7NO, 100), 489.18(MH +, 1.7)
플루페나진 4-아미노부티레이트 트리하이드로클로라이드(AN 187)의 합성: 플루페나진 N-boc-4-아미노부티레이트를 상술한 바와 같이 HCl과 반응시켰다. 백색 고체로서 생성물을 얻었다(수율 75%).
1H-NMR(CDCl3): δ= 1.93(quint, J=7.25Hz, 2H, CH2CH2 NH2), 2.29(quint, J=5.42Hz, 2H, ArNCH2CH2), 2.49(t, J=7.14Hz, 2H, CO2CH 2), 2.99(t, J=7.54Hz, 2H, CH2NH2), 3.39(t, J=4.87Hz, 2H, ArNCH2CH2CH 2), 3.40(t, J=5.42Hz, 2H, NCH2CH2N), 3.4-4.0(m, 8H, four NCH2), 3.91(m, 2H, NCH2CH2O), 4.18(t, J =6.12Hz, 2H, ArNCH2), 7.02-7.33(m, 7H, Ar)ppm.
13C-NMR(CDCl3): δ= 22.76(ArNCH2CH2), 23.36(CH2 CH2NH2), 31.49(CH3CO2), 39.96(CH2NH2), 45.21(ArNCH2), 49.57(two NCH2), 50.02(two NCH2), 55.72(ArNCH2CH2CH2), 56.48(NCH2CH2O), 58.99(NCH 2CH2O), 113.41(q, J=3.77Hz, C1), 117.80(C10), 120.70(q, J=3.77Hz, C3), 124.89(C8), 126.24(C 5), 125.59(q, J=272Hz, CF3), 128.75(C7), 128.97(C9), 129.25(C4 ), 130.96(q, J=32Hz, C2), 132.51(C5), 145.12(C11), 147.25(C12), 173.48(CO2)ppm.
MS(CI/CH4) : m/z(%)= 523(MH+ 0.5), 280(M-C14H9NF3 S, 100).
하기 표 1은 상술한 방법에 의해 합성된 화학적 접합체를 나타낸다.

AN-130
페르페나진 4-페닐부티레이트
C31H36CIN3O2S
550.16
Figure 112004012702752-pct00001

AN-167
페르페나진 부티레이트
C25H32CIN3O2S
474.06
Figure 112004012702752-pct00002

AN-168
페르페나진 4-아미노부티레이트
트리하이드로클로라이드
C25H33CIN4O2S.3HCI
598.46
Figure 112004012702752-pct00003

AN-177
페르페나진 프로피오네이트
C24H30CIN3O2S
460.03
Figure 112004012702752-pct00004

AN-178
페르페나진 발레레이트
C26H34CIN3O2S
488.09
Figure 112004012702752-pct00005

AN-180
플루페나진 부티레이트
C26H32F3N3O2S
507.61
Figure 112004012702752-pct00006

AN-179
(NSK-I-52)
플루페나진 프로피오네이트
C25H30F3N3O2S
493.59
Figure 112004012702752-pct00007

AN-181
(NSK-I-42)
플루페나진 발레레이트
C27H34F3N3O2S
521.64
Figure 112004012702752-pct00008

AN-187		 플루페나진 4-아미노부티레이트
트리하이드로클로라이드
C26H33F3N4O2S.3HCI
632.01
Figure 112004012702752-pct00009
재료 및 실험 방법
세포주 : 본 연구에서 인간 전립선 암종(PC-3), 인간 결장 암종(HT-29), 쥐과 흑색종(B-16) 및 그의 약물 저항성 서브클론(B-16 MDR), 생쥐 섬유모세포(fibroblast, 3T3), 골수성(myeloid) 백혈병(HL 60) 및 그 약물 저항성 서브클론(HL 60 MX2), 자궁내막(endometrium) 세포주(MES SA) 및 그 약물 저항성 서브클론(MES DX5), jurkat T 림프종 및 단핵구 백혈병(U-937)을 사용하였다.
래트 섬유모세포의 1차 배양물을 공지된 절차에 따라 신생(neonatal) 래트로부터 얻었다[7].
신경 세포 및 신경교세포를 임신한(14-15일) ICR 생쥐의 배아 뇌로부터 얻었다. 상기 뇌를 절개하고 Leibowitch L-15 배지 (Beth Aemek),75㎍/ml 겐타마이신 및 0.2mM 글루타민의 혼합물에서 균질화시켰다. 세포수 300-500K/웰을 폴리-D-라이신 처리한 96 웰 마이크로플레이트에 접종하였다. 48시간 후, 선택된 신생 배양물을 5-플루오로데옥시우리딘(FUDR) 및 우리딘을 플레이트의 반까지 첨가하여 얻었다. 미처리 배양물은 신생 및 신경교세포 상에 혼합물을 포함하였다. 세포를 10% FCS(우태아 혈청)와 2mM 글루타민을 함유한 RPMI 또는 DMEM 배지에서 성장시키고 37℃의 습윤 5% CO2 배양기에서 배양하였다.
래트 근세포 배양물을 생후 1-2일 Wistar 신생 래트(Harlan)로부터 얻었다. 생후 30일 래트를 사용하여 25-30x106개의 세포를 얻었다. 이를 위해, 심장을 절개하고, RDBTM(무화과 나무 추출물로부터 분리한 프로테아제)를 사용하여 상온에서 효 소적으로 조직-분리하였다. 이러한 과정을 세포가 완전히 분산될 때까지 5번 반복하였다. DMEM 배지 내에서 3x106/몰로 분산된 세포를 조직 배양 플라스크에서 45분 동안 프리-플레이팅(pre-plating)하고, 이후 24시간 동안 젤라틴 코팅된 마이크로티터(microtiter_ 플레이트로 이송하여 비-근세포를 감소시켰다. 이후, 세포독성 약제 ARO-C를 상기 배양물에 첨가하여, 분할 중의 세포를 제거하고 미분할 근세포를 배양물에 잔류시켰다. 세포를 4일 동안 배양한 다음, 현미경 검사를 실시하였다.
암 및 정상 세포의 증식 : DNA 함량을 정량화하는 중성 레드 분석법(neutral red assay)[8]에 의해 또는 형광 광도(fluorometric) 분석법[9]에 의해 증식을 측정한다. 중성 레드 분석법에서, 중성 레드는 리소좀(lysosome)에 의해 흡수되어 살아있는 세포의 착색을 유발한다. 비색(colorimetric) 분석법(ELISA 리더, 550nm에서)에 의해 정량 분석을 실시한다. 형광 광도 분석법에서, 알라마(alamar) 블루가 산화환원 반응 지시약으로서 사용된다. 알라마 블루 형광을 544nm의 여기 파장(excitation wavelength) 및 590nm의 방출 파장에서 측정하였다(FLUOstar BMG Lab Technologies, 오펜부르크, 독일).
아폽토시스(Apoptosis) 및 DNA 단편화 : 세포 핵의 단편화를 프로피디움 요오다화물-염색된 세포의 유동 세포 분석법에 의해 조사하였다. 이러한 분석은 여기 파장 480nm로 조정된 아르곤 이온 레이저와 데이터 수집을 위한 Doublet Discrimination Module (DDM). Lysis II (Becton Dickinson) 소프트웨어를 구비한 FACScan (BectonDickinson, Mountain View, 캐나다)을 사용하여 수행하였다. 아폽토시스성 핵 변화는 Nicolletti 등의 기준에 따라 평가하였다[13].
약물 감작화 : 페르페나진과 그의 화학적 접합체 AN168의 약물 감작 효과를 시험관내 측정하였다. 페르페나진 또는 AN 168의 다양한 농도를 화학 치료 약물과 동시에 C6 래트 신경교종 세포 또는 Jurkat T 림프종 세포에 동시 투여하였다. 화학 치료 약물, 페르페나진, AN 168, 화학 치료 약물과 페르페나진의 조합물 또는 화학 치료 약물과 AN 168의 조합물로 처리한 후 세포 생존력 및/또는 DNA 단편화를 상술한 바와 같이 측정하였다.
동물 : 젊은 성인 웅성 래트(150-230그램)를 Harlan(이스라엘)로부터 구입하였다. 동물을 2-5/케이지로 분리하고 실험 1주 전 동안 동물 사육실의 제어 조건하에서 사육하였다. 실험 동물을 사용하여 이중 맹검법(double blind) 절차에 따라 실험을 수행하였다. 각 실험에서, 다양한 처리군(각 약 5-10마리의 동물)을 시험하였다.
젊은 성인 웅성 및 자성 생쥐를 Harlan(이스라엘)로부터 구입하였다. 동물들을 실험 전 제어된 조건하에서 4-7일 동안 사육하였다. 이중 맹검법 절차에 따라 실험을 진행하였다. 각 실험에서, 다양한 처리군(각 약 10마리)을 시험하였다.
래트에서 강경증 : 전형적인 신경이완제에 의해 유도되는 추체외로 부작용의 출현을 신경이완제 처리 후 래트에서 전형적인 강경증 거동의 출현을 통해 평가하였다. 강경증은 다음 2가지 방법으로 결정하였다: (i) 케이지 벽에 매달려 있는 동물이 뒷다리를 움직여서 바닥면에 도달하는데 걸리는 시간의 측정("월"시험법); 및 (ii) 래트가 피아노 연주 위치와 유사한 편평 바(높이 5.5cm) 위에 걸치고 있는 앞다리로 바닥면상에 위치하였다. 동물이 내려와서 바닥면에 도달하는 시간을 측정하여 강경증을 결정하였다("피아노" 시험법). 팔로우 업(follow up) 최대 시간은 2분이었고, 이러한 측정을 각 동물에 대해 별도로 매시간 마다 수행하였다. 상기 시험은 중추신경계의 도파민(DA) 차단 활성에 대한 평가를 제공하며, 항-정신병 약물에 의해 유도되는 추체외로 증상에 대한 허용 기준이 된다[10]. 서로 다른 화합물과 조건을 비교하면서, 페르페나진, 플루페나진 및 AN 167, AN 168, AN 177, AN 178, AN 180 및 AN 187(상기 표 1 참조)에 대해 총 유도 강경증 및 시간 경과를 측정하였다. 일반적으로, 1% 락트산에 용해한 모 약물인 페르페나진 5mg/kg과 플루페나진 7.5mg/Kg과 이들과 관련된 본 발명의 화학적 접합체의 동일 몰량을 동물들에게 복강내 주사하였다. 또 다른 측정 세트에서, 1% 락트산에 용해한 AN 168 및 페르페나진을 동물들에게 경구 투여하였다.
생쥐에서의 강경증: 2개의 서로 다른 실험 세트에서 신경이완제 처리 후 생쥐에서의 전형적인 강경증 거동의 출현을 측정하였다.
첫 번째 세트에서는, 성인 웅성 생쥐를 몇 개의 군으로 분리하고, 각 군을 페르페나진(1.5mg/kg, 9마리 생쥐), 페르페나진 및 동일 몰량의 GABA의 혼합물 (7마리의 생쥐), 동일 몰량의 AN-168(8마리의 생쥐)으로 처리하거나 어떠한 처리도 하지 않았다(대조군, 6마리의 생쥐). 생쥐가 바아의 중간에 매달려 있고, 처리 후 2분내 타겟에 도달하는 동물의 분율을 1시간, 2시간 및 3시간에 기록하였다.
두 번째 세트에서는, 젊은 자성 생쥐들을 몇 개의 군으로 분류하고, 각 군을 페르페나진 2.5mg/kg(6마리 생쥐), 페르페나진 및 동일 몰량의 GABA의 혼합물(6마리의 생쥐), 동일 몰량의 AN-168(7마리의 생쥐)으로 처리하거나 어떠한 처리도 하지 않았다(대조군, 7마리의 생쥐). 상술한 시스템을 사용하여 강경증을 결정하였다. 생쥐가 바아의 중간에 매달려 있고, 그 생쥐가 2분내 타겟에 도달하는데 걸리는 시간을 측정하였다.
프롤락틴 분비: 전형적인 신경이완제는 갈락토레헤아(gallactorehea), 손상 생식선(impaired gonadal) 및 성기능과 종종 관련된 과다 프롤락틴증(hyperprolactinemia)을 유도한다[11]. 따라서, 혈장내 순환 프롤락틴 수준의 측정은 공지된 신경이완제 및 본 발명의 화학적 접합체를 복강내 또는 경구 투여한 후 항-정신병 활성에 대한 감작성 생화학 표지자로서 사용하였다. 따라서, 에테르 마취하에서 래트의 천공된 눈의 오비탈(orbital)로부터 채혈하고, Millennia 생쥐 프롤락틴 효소 면역 분석-키트(DPC, 미국)를 사용하여 분석하였다.
거동 기준 : 본 발명의 화학적 접합체에 의해 처리된 동물의 진정 작용(sedation)을 관찰하고, 하기 기준에 따라 등급화하였다(표 2). 다양한 처리군에서의 동물 진정도 및 이동도를 0 내지 3의 등급으로 평가하였다: 0은 활발한 이동성이 있는 동물을 나타내고, 1은 조용하게 이동성이 있는 동물을 나타내며, 2는 조용하고 이동성이 없는 동물을 나타내고, 3은 완전히 운동실조(ataxic)되고 경계심이 없는(non-alert) 동물을 나타낸다. 처리 동물의 거동은 시험된 공지의 신경이완제 및 화학적 접합체의 신경이완 효능에 대한 평가를 제공할 뿐 아니라, 이들에 의해 유도된 추체외로 증상의 중증도를 제공하였다.
독성: 신생 생쥐의 뇌로부터 얻은 신경 및 전뇌 신경 및 신경교세포에 대한 시험 화합물(신경이완제 또는 본 발명의 화학적 접합체)의 효과를 측정함으로써 시험관 내 독성을 측정하였다. 또한, 래트 근세포를 이용하여 페르페나진 및 화학적 접합체 AN 168의 시험관내 독성을 측정하였다. LD50으로 측정되는 생체내 급성 독성을 약물의 단일 순간-투여량으로 생후 2개월의 ICR 래트 복강내 투여한 후 평가하였다.
실험 결과:
페르페나진 및 이를 함유하는 화학적 접합체의 유도-강경증 및 항-정신병 활성: 페르페나진 5mg/kg 및 그의 동일 몰량 농도의 화학적 접합체 AN 130의 유도된 강경증 및 항-정신병 활성을 1% 락트산에 용해시킨 이들 화합물을 케이지 당 5마리씩 분리시킨 젊은 성인 Wistar 웅성 래트(150-200그램 중량)의 복강내 주사하고 상술한 "월" 시험법에 의해 결정하였다. 대조 동물군은 단지 매질(락트산)로만 처리하였다. 강경증 및 프롤락틴 분비에 대한 처리 효과는 2시간 동안 수행하였고, 그 결과를 도 1a 및 도 1b에 나타내었다.
도 1a는 처리 0, 60 및 120분 후에 2번씩 실시한 3번의 측정 합계로서 유도된 강경증에 대해 얻어진 데이터를 보여주고 있다. 각 막대는 평균 5마리를 나타낸다. 총 시간을 페르페나진(예를 들면 100%)으로 표준화하였다. 얻어진 데이터를 통해, AN 167 및 AN 168이 강경증을 전혀 유도하지 않은 반면에, 페르페나진 및 AN 130의 처리에 의해 강경증이 유도되었음을 알 수 있다.
도 1b는 처리 0, 60 및 120분 후에 측정한 혈중 프롤락틴 수준을 나타내며, 각 시간에서 3번의 측정 합계를 나타낸다. 혈중 프롤락틴 수준은 화합물의 항-정신병 활성에 대한 생화학적 표지자로서 기능한다. 얻어진 데이터를 통해, 페르페나진, AN 130, AN 167 또는 AN 168로 처리했을 때 60분에 최대치를 나타낸 다음 이후 감소하는 동물에서의 혈중 프롤락틴 수준의 유사한 형태를 나타냄을 알 수 있다. 화학적 접합체 AN 130, AN 167 및 AN 168로 처리한 동물에서 각 시점의 혈중 프롤락틴 수준은 페르페나진에서 측정된 바와 유사한 바, 이는 상기 화학적 접합체의 항-정신병 활성이 모 약물의 항-정신병 활성과 유사함을 나타낸다. 매질(1% 락트)로만 처리한 대조군 동물에서, 프롤락틴의 수준은 변하지 않았다.
SAR(구조 활성 상관관계) 연구: 페르페나진 및 이를 포함하는 화학적 접합체에 대한 SAR 연구를 수행하였다. 유도된 강경증은 상술한 바와 같이 측정하고, "월" 시험법에 따라 측정하였다. 얻어진 결과를 도 2에 나타낸다. 페르페나진 및 GABA, AN 168의 접합체가 유도 강경증을 거의 최대로 감소시킬 수 있는 가장 효과적이며, 다음으로 접합체 AN 178을 함유하는 발레레이트, AN 177을 함유하는 프로피오네이트 및 AN 167을 함유하는 부티레이트 순인 것으로 밝혀졌다. 이러한 실험을 통해, 페르페나진만으로 처리하여 유도된 강경증과 비교하여 화학적 접합체를 처리한 후 유도된 강경증이 유의적으로 감소했음을 알 수 있다.
페르페나진, 플루페나진 및 이들 함유하는 화학적 접합체에 의해 유도되는 강경증 및 동물 거동: 페르페나진, 플루페나진 및 이들의 부티르산- 및 GABA-함유 화학적 접합체(AN 167, AN 168, AN 180 및 AN 187, 표 1 참조)를 대상으로 이들에 의해 유도되는 총 강경증, 유도된 강경증의 시간 경과 및 투여한 후 동물 거동에 대해 시험하였다. 5mg/kg의 페르페나진, 동일 몰량 농도의 AN 167 및 AN 168, 5mg/kg의 플루페나진 및 동일 몰량 농도의 AN 180 및 AN 187을 복강내 주사한 후 측정하였다. 강경증을 "월" 시험법에 의해 측정하였다.
도 3a는 시험 화합물에 의해 유도되는 총 강경증을 보여주고 있다. 얻어진 데이터는 투여한 지 0, 30, 60, 90, 120, 180, 240 및 420분 후에 수행된 측정값의 합계로서, 페르페나진 및 플루페나진(=100%)에 대해 총 시간을 표준화하였다. 부티르산 함유 화학적 접합체, AN 167 및 AN 180은 강경증을 유의적으로 감소시켰다. GABA 함유 페르페나진의 접합체, AN 168은 강경증을 완전히 제거한 반면, 플루페나진의 GABA 접합체 AN 187은 강경증을 상당히 감소시켰다.
도 3b는 페르페나진, 그의 GABA 접합체 AN 168, 플루페나진 및 그의 GABA AN 187로 처리한지 0, 60 및 120분 후에 측정한 혈중 프롤락틴 수준을 나타낸다. 얻어진 결과는 페르페나진, 플루페나진 또는 이들의 GABA 화학적 접합체로 처리했을 때 60분에서 최대가 된 후 감소하는 동물에서의 혈중 프롤락틴 수준의 유사한 형태를 나타냄을 보여주고 있다. 화학적 접합체 AN 168 및 AN 187로 처리한 동물에서 각 시점의 혈중 프롤락틴 수준은 각각 페르페나진과 플루페나진에서 측정된 바와 유사하였다.
도 4a는 7시간에 걸쳐 페르페나진 및 이를 함유하는 화학적 접합체에 의해 유도되는 강경증의 시간 경과를 나타낸다. 페르페나진에 의해 유도되는 강경증은 2시간 후에 최대가 된 후 감소한다. 부티르산-함유 접합체 AN 167은 페르페나진에 비해 강경증 감소를 유도한 반면, GABA-함유 접합체 AN 168은 본 연구의 총 7시간 동안 어떠한 강경증도 갖지 않았다.
도 4b는 7시간에 걸쳐 플루페나진 및 이를 함유하는 화학적 접합체에 의해 유도되는 강경증의 시간 경과를 나타낸다. 플루페나진으로 처리한 동물들은 측정 7시간 동안 강경증을 나타내었으나, AN 180 및 AN 187로 처리한 동물들은 보다 낮은 강경증을 나타내었다. AN 180에 의해 유도된 강경증은 측정 시간 동안 변동한 반면, AN 187에 의해 유도되는 강경증은 7-시간 기간의 종료시 없어졌다. 본 연구에서는 어떠한 동물도 24시간 후에 강경증을 갖지 않았다.
동물 거동에 대한 시험 화합물의 투여 효과를 상술한 바와 같이 처리한 후 동물 진정도 및 이동도를 평가하고 0 내지 3으로 등급화함으로써 측정하였다. 0은 활발한 이동성이 있는 동물을 나타내고, 1은 조용하게 이동성이 있는 동물을 나타내며, 2는 조용하고 이동성이 없는 동물을 나타내고, 3은 완전히 운동실조(ataxic)되고 경계심이 없는(non-alert) 동물을 나타낸다. 이렇게 얻어진 등급을 하기 표 2에 요약한 바, 이를 통해 공지의 약물 효과에 비해 동물 거동에 대한 화학적 접합체의 효과가 감소되었음을 알 수 있다.
30분 60분 90분 120분 180분 240분
페르페나진 1 2 2 3 2 2
AN-167 0 1 1 2 2 2
AN-168 0 0 1 1 1 1
플루페나진 1 2 3 3 2 2
AN-180 1 2 3 2 1 1
AN-187 1 2 2 2 1 1
래트에서 AN 168 및 페르페나진과 GABA의 혼합물에 의한 유도-강경증: 래트 에서 유도된 강경증에 대한 AN 168, 페르페나진의 GABA 접합체의 효과를 모 약물-비-조합된 페르페나진 및 GABA의 혼합물에 의해 유도된 강경증과 비교하였다. 상기 접합체 또는 상기 혼합물을 복강내 주사한 지 60, 90 및 120분 후에 강경증을 측정하고, "월" 시험법에 의해 결정하였다.
도 5a는 다양한 처리법에 의해 유도되는 총 강경증에 대해 얻어진 데이터를 나타낸다. AN 168 처리군의 동물들은 매우 낮은 강경증을 나타낸 반면에, 페르페나진 및 GABA의 혼합물로 처리한 군에서의 강경증은 높았다.
도 5b는 2개의 처리 후 강경증의 시간 경과를 나타내며, AN 168로 처리한 동물에서 강경증이 감소하여 120분 후에는 완전히 사라짐을 보여주고 있다.
래트에서의 AN 167 및 AN 168에 의한 강경증 : 4개의 별도 실험에서 AN 167 및 AN 168에 의해 유도되는 총 강경증을 시험하고, 동일 실험 조건에서 페르페나진-유도된 강경증과 비교하였다.
페르페나진-유도된 강경증의 분율로서 나타낸 AN 167 및 AN 168의 동일 몰량 투여 후 총 강경증의 평균값을 도 6에 나타내었다. 비록 AN 167이 페르페나진에 비해 낮은 강경증을 유도하였지만, AN 168은 유도된 강경증을 거의 영(0)으로 감소시켰다.
생쥐에서 페르페나진, 페르페나진 및 GABA의 혼합물, AN 168에 의한 유도된 강경증 : 생쥐에서 유도된 강경증에 대한 AN 168, 페르페나진의 GABA 접합체의 효과를 페르페나진 단독 및 모 약물 비-조합된 페르페나진 및 GABA의 혼합물에 의해 유도된 강경증과 비교하였다. 처리군에 복강내 주사한지 60, 90 및 120분 후에 강경 증을 측정하고, 상술한 바와 같이 결정하였다.
도 7a는 2분내 타겟에 도달하는 동물의 분율로서 다양한 처리에 의해 유도된 강경증에 대해 얻은 데이터를 보여주고 있다. AN 168로 처리한 군의 동물들은 실질적으로 낮은 무능력(disability)을 나타낸 반면, 페르페나진 단독 및 페르페나진과 GABA의 혼합물로 처리한 군의 동물들은 높은 강경증을 나타내었다.
도 7b는 동물들이 타겟에 도달하는데 걸린 시간으로서 상기 처리 2 및 3시간 후에 다양한 처리에 의해 유도된 강경증에 대해 얻어진 데이터를 보여주고 있다. AN 168로 처리한 군의 동물들은 페르페나진 단독 및 페르페나진과 GABA의 혼합물로 처리한 동물들보다 훨씬 빨랐다.
경구 투여된 페르페나진 및 그의 GABA 접합체 AN 168의 유도된-강경증, 유도된 동물 거동 및 항-정신병 활성: AN 168, 페르페나진 및 GABA의 화학적 접합체는 복강내 투여시 가장 효과적인 화학적 접합체라는 것이 밝혀짐에 따라, 페르페나진에 비해 상기 화학적 접합체의 경구 효능을 결정하기 위해 추가적인 비교 실험을 수행하였다. 이를 위해, AN 168 또는 페르페나진만을 래트에 경구 투여한 후, 유도된 강경증, 혈중 플루페나진 수준 및 동물 거동을 상술한 바와 같이 측정하였다. 케이지 당 5마리씩 분리한 동물들을 1% 락트산에 용해시킨 페르페나진 또는 AN 168을 경구 투여하여 처리하였다. 대조군 동물들은 매질(락트산)만 투여하였다.
AN 168 및 페르페나진의 다양한 농도를 경구 투여하여 유도된 강경증을 상술한 "월" 시험법 및 "피아노" 시험법에 따라 측정하였다. 2.5, 5, 10 및 20mg/kg의 페르페나진 및 AN 168의 각 동일 몰량 투여량 3.5, 7, 14 및 28mg/kg을 경구 투여 한지 4-24시간 후에 강경증의 시간 경과를 측정하였다. 총 강경증은 4-24시간 중에 처리군 당 평균 강경증의 합계를 나타낸다.
도 8a는 4-6 시간 동안 "피아노" 시험법에 의해 측정되는 다양한 처리 후 강경증의 시간 경과를 나타내며, AN 168의 모든 농도에서 강경증 거동의 일관된 감소를 나타낸다. 통계 분석법을 통해, 이러한 감소는 페르페나진의 각 동일 몰량 투여량에 비해 AN 168의 저투여량 및 중간 투여량(7, 14mg/kg)에서 보다 유의적이었음을 알 수 있었다(p < 0.05). 화학적 접합체의 고투여량에서(14 및 28mg/kg), 비록 그 차이가 그다지 크지는 않지만, 검출된 강경증 증상은 페르페나진의 증상보다 일관적으로 낮았다. 고투여량의 약물 및 화학적 접합체에 의해 유도되는 강경증 사이의 작은 차이는 평가 과정에 기인한 것으로 생각된다. 측정된 최대 강경증 신호는 120초로 한정되었다. 그러나, 실제로는 페르페나진에 의해 유도되는 최대 강경증 신호는 화학적 접합체에 의해 유도된 것에 비해 높을 것이라고 예상된다. 이러한 예상은 "월" 시험법과 후술하는 진정작용의 등급에 의해 측정되는 강경증에 대해 관찰된 고투여량에서의 AN-168과 페르페나진 사이의 보다 크고 실질적인 차이에 의해 뒷받침된다. 게다가, 실시된 실험을 통해, 근육 경직 및 빈호흡(tachypnea)은 중간 및 고투여량의 페르페나진(10 및 20mg/kg)으로 처리한 동물들에서만 관찰되었고, 각 동일 몰량 투여량의 화학적 접합체를 처리한 동물들에게서는 관찰되지 않았음을 알 수 있다.
도 8b는 도 8a에 제공된 실험 3개월 후 실시된 별도의 실험에서 4-6시간 동안 "피아노" 시험법에 의해 측정한 것으로, 다양한 처리 후 강경증의 시간 경과를 나타내고 있다. 얻어진 데이터를 통해, AN 168의 고투여량(14 및 28mg/kg)에서 이전 실험에 비해 높은 강경증이 유도되었음을 알 수 있다. NMR 분광법을 통해, 아마도 가수분해에 의한 느린 분해가 발생하였고, 이에 따라 화학적 접합체 고유의 특성이 영향을 받았음을 알 수 있다. 이러한 발견은 상기 화합물이 밀봉된 바이알에 보관되어야 하며 사용하기 직전에만 노출되어야 함을 암시한다. 이와 관련하여, 플루페나진, AN 187의 유사 화학적 접합체는 흡습성이지 않기 때문에 저장 기간이 연장되더라도 쉽게 분해되지 않는다.
도 9a 및 도 9b는 4-6 시간 동안 페르페나진 5, 10 및 20mg/kg, 및 AN-168의 각 동일 몰량 투여량 7, 14 및 28mg/kg을 경구 투여하여 유도된 총 강경증을 보여주고 있다. 도 9b는 도 9a에서 실시된 실험 3개월 후 실시된 실험에서 얻어진 데이터를 나타낸다. 비록 페르페나진에 비해 AN 168에 의해 유도된 강경증 거동의 감소가 도 9b에 제시된 데이터에서 덜 유의적이지만, AN 168에 의해 유도된 강경증이 페르페나진에 의해 유도된 강경증에 비해 일관적으로 낮음을 명백히 나타내고 있다.
도 10a 및 도 10b는 다양한 처리 이후 24시간 동안 "피아노" 시험법에 의해 측정한 것으로서, 강경증(도 10a) 및 총 강경증(도 10b)의 시간 경과를 보여주는 도면이다. 이렇게 얻은 데이터를 통해, 처리한지 5-6시간 후에 페르페나진 및 AN-168의 최대 강경증 효과가 달성되고, 처리한 지 24시간 후에는 모든 처리군에서 강경증이 감소되었음을 알 수 있다. 이들 데이터는 환자에 투여(1일 1회)된 페르페나진에 대해 관찰된 임상 시간 경과와 일치한다.
도 11은 "월" 시험법에 의해 측정한 것으로서, 다양한 처리 이후의 총 강경증을 나타내는 도면이며, 이를 통해 강경증 증상이 AN 168의 모든 시험된 투여량으로 처리한 후 거의 사라졌음을 명백히 알 수 있다.
AN 168 및 페르페나진의 다양한 농도로 경구 처리한지 4-6시간 후에 동물 진정도 및 이동도를 평가함으로써 동물 거동에 대한 화학적 접합체 AN 168의 경구 투여 효과를 상술한 바와 같이 0 내지 3의 등급을 사용하여 측정하였다. 이렇게 얻어진 등급을 하기 표 3에 요약하고, 이를 통해 페르페나진에 비하여 동물 거동에 대한 화학적 접합체의 효과가 감소함을 알 수 있다.
처리 투여량 (㎎/㎏) 진정 등급
페르페나진
페르페나진
페르페나진
페르페나진
AN 168
AN 168
AN 168
AN 168
대조군		 20
10
5
2.5
28
14
7
3.5		 3
2
1
0
2
1
0
0
0
경구 투여된 도파민성 활성에 대한 표지자로서, 상술한 바와 같이 다양한 처리 0, 90 및 180분 후에 혈중 프롤락틴 수준을 측정하였다. 이렇게 얻어진 데이터를 도 12에 요약하고, 이를 통해 페르페나진 및 AN 168로 처리한 동물들에서의 혈중 프롤락틴 수준이 유사한 형태임을 알 수 있다. AN 168로 처리한 동물들에서 각 시점의 혈중 프롤락틴 수준은 저투여량 및 중간 투여량의 페르페나진의 프롤락틴 수준과 유사한 반면, 고투여량의 AN 168로 처리한 동물의 혈중 프롤락틴 수준은 페르페나진으로 처리한 동물에 비해 훨씬 높았다.
이러한 결과를 통해, AN 168이 매우 유효하며, 따라서 경구 투여시 저투여량(예를 들면 3.5 및 7mg/kg)으로 임상 시험에 적합함을 알 수 있다. 또한, 저투여량의 AN 168은 추체외로 증상을 최소로 유발한다는 것이 밝혀졌고, 따라서 흑질 건조체(nigro-striatal) 경로에서 길항 활성이 거의 없음을 알 수 있다.
항-증식 활성: 페르페나진, 그의 화학적 접합체 AN 167, AN 168 및 AN 177, 플루페나진, 그의 화학적 접합체 AN 179, AN 180, AN 181 및 AN 187, 및 부티르산(BA), 4-페닐부티르산(PBA) 및 GABA의 항-증식 활성을 정상 및 형질전환 세포로 수행된 증식 시험에 의해 측정하였다(통상 1개 이상의 별도 실험으로). 상기 세포를 계대 배양(sub-culture)하고, 여기에 시험 화합물을 증가 농도로 첨가하였다. IC50 값을 세포의 생존력의 선형 회귀법(linear regression)에 의해 결정하였다. 다양한 시험 세포주로 시험 화합물에 대해 얻어진 IC50 값을 하기 표 4 및 표 5에 요약하였다
세포
약물		 B16MDR B16 HT-29 PC-3 3T3 정상 래트 섬유아세포
페르페나진 18.45 ±5.4
n=3* 		12.5 ±1.29
n=4		 8.85 ±2.7
n=2		 23.1 ±2.3
n=2		 26.6
BA 8000 ±546
n=3		 1300 ±113
n=3		 7170 ±2034
n=4		 5540
GABA >20000
n=3		 >20000
n=3		 >20000
n=3		 >20000
AN-167 41.5 ±1.8
n=3		 17.3 ±4.5
n=5		 13.3 ±2.4
n=4		 49.1 21.7 31.64
AN-168 23 ±16
n=3		 26.8 ±1.8
n=3		 23.1 ±9
n=3		 45.5 25 45.8
AN-130 58 36.5 ±8.1
n=5		 17.27 ±3.07
n=5		 52.9 ±28.7
n=3		 41.9 ±16.8
n=2
AN-177 25.8
 24.6
AN-178 11.5
 18.6
* 별도 실험의 횟수
세포
약물		 HL 60 HL 60MX2
(MDR)		 MES SA MES SA
DX5 (MDR)		 JURKAT U-937

페르페나진
19.76
22.55
15.31
16.24
11.34
21.30

AN 167
17.29
19.86
17.23
20.90
11.40
23.28

AN 168
15.14
18.36
18.20
17.16
11.35
14.23

AN 177
15.13
17.59

플루페나진
20.94
21.77
14.79
13.74
14.30
21.51

AN 179
18.25
21.42

AN 180
19.00
18.76
11.96
12.74
10.43
12.25

AN 181
14.79
16.69

AN 187
18.57
17.10
14.37
9.47
10.31
18.86
이러한 결과를 통해, GABA 자체는 유의적인 항-증식 활성을 전혀 나타내지 못하고((IC50 > 20mM), BA(IC50 범위: 1-8 mM) 및 PBA(IC50 범위 2-12mM, 도시하지 않음)는 상대적으로 상당히 낮은 항-증식 활성을 나타내고 있지만, 이들의 각 페르페나진 및 플루페나진 접합체는 유의적으로 높은 활성(IC50 범위 8-60MM)을 가졌다.
또한 이러한 결과는 HL 60 MX2, B16 MDR 서브클론 및 MES SA DX5와 같은 다약물내성(MDR) 세포를 포함하는 광범위한 세포주에서 본 발명의 화학적 접합체의 다양한 항-증식 활성을 보여주고 있다.
도 13은 B16 쥐과 흑색종의 증식에 대한 페르페나진과 그의 화학적 접합체의 효과를 측정하는 대표적인 실험에서 얻어진 결과를 보여 주고 있다. AN 167 및 AN 168은 항-증식제로서 상대적으로 활성이 있는 것으로 밝혀졌다.
페르페나진, GABA 및 그의 화학적 접합체 AN 168의 세포 독성 효과를 측정한 다음, C6 래트 신경교종 세포에 대한 공지의 화학 치료 약물인 시스플라틴 및 빈시스틴의 세포 독성 효과와 비교하였다. 상기 세포를 계대 배양하고, 여기에 시험 화합물을 증가 농도로서 100μM까지 첨가하였다. 이렇게 처리한 후 세포 생존력(24시간)을 상술한 중성 레드법에 의해 측정하고, 그 결과를 도 14에 나타낸다. 페르페나진과 AN 168의 IC50 값을 상술한 바와 같이 측정한 바, 각각 19.2μM 및 24.2μM으로 나타났다.
도 14에 나타낸 바와 같이, 대표적인 공지의 화학치료 약물에 비해 본 발명의 화학적 접합체의 항-증식 활성이 우수하였다. C6 신경교종 세포는 MDR 세포로 알려져 있으며, 실제로 공지의 화학 치료 약물의 항-증식 활성이 실질적으로 낮은 것으로 밝혀졌다. 이에 비해, AN 168은 높은 항-증식 활성을 나타내어 상대적으로 낮은 농도에서(약 20μM) 실질적인 세포 사멸을 유발하는 것으로 밝혀졌다.
도 15는 페르페나진, AN 168 및 덱사메타손(Dexamethasone)의 증가 농도로 Jurkat T 림프종 세포를 처리한 후 얻어진 데이터를 보여주고 있다. 알라마 블루법에 의해 측정한 바, 세포 생존력을 토대로 제시된 결과는 덱사메타손과 비교하여 AN 168 및 페르페나진의 세포 독성 효과가 우수함을 보여주고 있다. 페르페나진과 AN 168의 IC50 수치는 각각 16μM 및 19μM이었다.
비록 페르페나진, 플루페나진 및 이들의 화학적 접합체가 거의 동일한 정도로 항-증식 활성을 나타내고 있지만, 상기 화학적 접합체의 투여는 부작용이 거의 유발하지 않기 때문에 본 발명의 화학적 접합체를 임상적으로 적용하면 신경이완 약물의 임상 적용에 비해 매우 우수함을 알 수 있다.
페르페나진 또는 AN 168 및 화학 치료 약물의 동시 투여에 의한 약물 감작 효과 : 5, 10 및 15μM의 페르페나진 및 그의 화학적 접합체인 AN 168의 동일 몰량 투여량의 약물 감작 효과를 다양한 농도의 빈시스틴, 시스플라틴 및 덱사메타손과 같은 공지의 화학 치료 약물과 공지의 화학 치료 약물을 동시 투여함으로써 측정하였다. 이러한 조합 처리 후, 상기 방법란에 기재한 바와 같이 측정한 세포 생존력 및/또는 DNA 단편화를 화학 치료 약물 단독으로 처리한 후 얻어진 결과와 비교하였다.
도 16은 래트 C6 신경교종 세포주(MDR 세포)를 빈시스틴(30μM), 페르페나진 및 이들의 접합체로 24시간 처리한 후 얻은 데이터를 나타내고 있다. 이렇게 얻어진 결과는 화학 치료 약물과 동시 투여시 단독 투여시 약물의 세포 독성 활성에 비해 화학적 접합체의 저농도에서도(예를 들면 5μM) 세포 독성 효과가 실질적으로 증가하는 AN 168의 약물 감작 효과를 보여주고 있다.
도 17은 5μM 내지 50μM 범위의 다양한 농도의 시스플라틴, 및 시스플라틴과 10 및 15μM의 AN 168의 조합물로 래트 C6 신경교종 세포주(MDR 세포)를 처리한 후 얻은 데이터를 보여주고 있다. 이렇게 얻어진 결과는 중성 레드법에 의해 측정된 세포 생존력을 토대로 제시된 것이며, 이를 통해 세포가 모든 시험 농도에서 시스플라틴에 완전히 저항적인 반면, 시스플라틴 및 AN 168의 조합 처리는 세포로 하여금 화학 치료 약물에 민감하게 반응하도록 함을 명백히 알 수 있다.
도 18은 미처리 세포에 비해 시스플라틴(30μM), 페르페나진(25 및 50μM), AN 168(25, 50μM), 시스플라틴(30μM)과 AN 168(50μM)의 조합물로 래트 C6 신경교종 세포를 처리한 후 얻어진 DNA 단편화 데이터를 보여주고 있다. 이러한 DNA 단편화는 상술한 프로피디움 요오드화물 유동 세포 분석법(flow cytometric method)에 의해 측정하였다. 얻어진 결과를 통해, 시스플라틴 단독은 DNA 단편화의 어떠한 효과도 갖지 않는 반면, 페르페나진 및 AN 168은 DNA 단편화에 있어 급격한 증가를 유도함을 알 수 있다. 이러한 결과는 본 발명의 화학적 접합체의 약물 감작 효과가 이들의 활성에 기인하는 것임을 암시한다.
독성: 페르페나진, AN 167 및 AN 168의 시험관내 독성을 신생 생쥐 뇌로부터 얻은 신경 세포 및 신경세포와 신경교세포의 혼합물의 1차 배양물에 대해 측정하였다. 상기 세포 배양물을 시험 화합물로 24시간 동안 처리한 후, 이들의 생존력을 중성 레드 비색 시험법으로 측정하였다. 상기 시험에서 얻은 IC50 값을 통해, 도 19에 도시한 바와 같이 페르페나진 및 AN 167이 유사한 독성을 가진 반면에 AN 168은 정상 뇌세포에 비해 유의적으로 낮은 독성을 나타냄을 알 수 있다. 페르페나진 및 AN 168의 시험관내 독성을 배양된 래트의 근세포에 대해 측정하였다. 도 20은 페르페나진 또는 AN 168의 다양한 농도로 처리한 후 상술한 바와 같이 측정한 세포 생존력을 나타내고 있다. 이렇게 얻어진 데이터에 의해 AN 168은 모든 농도에서 세포 생존력을 전혀 감소시키지 않는 반면에 페르페나진은 높은 농도에서 세포 생존력을 20% 감소시켰음을 알 수 있다.
페르페나진 및 AN 167의 생체내 독성은 생쥐에 단일 투여량을 복강내 투여한 후 평가하였다. 처리 2주 후 측정한 LD50 값은 페르페나진에 대해서는 109mg/kg이었고, AN 167에 대해서는 120mg/kg이었다. 페르페나진(per)에 비해 AN 167의 낮은 독성 이외에도, 도 21에 도시한 바와 같이 조합된 화합물에 의해 유발된 사멸율(mortality)이 지연되었다.
상술한 실험 결과를 통해, 정상 세포에 대한 독성 감소 및 부작용 감소와 함께 항-정신병 활성, 항-증식 활성 및 약물 감작 활성을 나타내는데 있어 본 발명의 신규한 화학적 접합체가 상당히 유리한 효능을 가지고 있음을 알 수 있다.
명확성을 위해 별도의 실시형태로 기재된 본 발명의 일부 특징들은 하나의 실시형태로 조합하여 제공될 수도 있음은 물론이다. 반대로, 간결성을 위해 단일 실시형태로 기재된 본 발명의 다양한 특징들은 별도로 또는 적절히 조합하여 제공될 수도 있다.
본 발명은 본 발명의 특정 실시형태와 함께 기재되었지만, 다양한 선택, 변경 및 변화가 가능함은 본 기술 분야의 당업자에게 있어 명백하다. 따라서, 후술하는 청구범위의 사상 및 범위가 이러한 선택, 변경 및 변화를 포함한다. 본 명세서에서 언급하고 있는 모든 문헌, 특허 및 특허 출원은 마치 개개의 문헌, 특허 또는 특허 출원이 구체적으로 또한 개별적으로 본 명세서에 포함되어 있는 것처럼 본 발명의 명세서에 참고문헌으로 그 전체로서 포함된다. 또한, 본 출원에서 참고 문헌으로 언급되거나 확인된 문헌들은 본 발명의 선행 문헌으로서 이용 가능하다는 뜻으로 해석해서는 안 된다.
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  43. γ-아미노부티르산 (GABA)에 공유결합된 페르페나진을 포함하는 화학적 접합체.
  44. 활성 성분으로서 제 43 항에 따른 화학적 접합체, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
  45. 제 44 항에 있어서, 정신병적 장애 또는 질환의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에 있어서, 정신병적 장애 또는 질환을 치료 또는 예방하기 위한 약제학적 조성물.
  46. 제 44 항에 있어서, 정신 분열을 치료하기 위한 약제학적 조성물.
  47. 제 44 항에 있어서, 증식 장애 또는 질환의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에 있어서, 증식성 장애 또는 질환을 치료 또는 예방하기 위한 약제학적 조성물.
  48. 제 44 항에 있어서, 약물 감작화를 필요로 하는 대상체에 있어서 약물 감작화를 위한 것이며, 화학요법 약물과 조합되는 약제학적 조성물.
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