KR100837785B1 - 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 포함하는염증관련 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물 - Google Patents

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김익연
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강남숙
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Abstract

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온(1,2,4-thiadiazolidine-3,5-dione) 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 염증관련 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물에 관한 것이다.
[화학식 1]
Figure 112007004804074-pat00001
1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온, Lck SH2, 류마티스성 관절염, 염증관련 질환

Description

1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 포함하는 염증관련 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물{Pharmaceutical Composition For Treating Or Preventing Arthritis Comprising the 1,2,4-thiadiazolidine-3,5-dione compounds}
도 1 - 실시예 1에서 화합물 화합물 100의 Lck SH2에 대한 결합 억제 시험 결과 그래프
도 2 - 실시예 2에서 화합물 화합물 100의 T cell activation 억제 시험 결과 그래프
도 3 - 실시예 3에서 화합물 화합물 100의 복강 투여시 in vivo IL-2 production 억제 시험 결과 그래프
도 4 - 실시예 3에서 화합물 화합물 100의 구강 투여시 in vivo IL-2 production 억제 시험 결과 그래프
도 5 - 실시예 4에서 화합물 화합물 100을 이용한 동물모델에서의 면역반응 억제 시험 결과 그래프
도 6 - 실시예 5에서 화합물 화합물 100을 이용한 류마티스성 관절염 동물모델에서의 면역반응 억제 시험 결과 그래프
본 발명은 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온(1,2,4-thiadiazolidine-3,5-dione) 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 류마티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)을 포함한 염증관련 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명이 근거하고 있는 Lck SH2 (lymphocyte-specific protein tyrosine kinase Src homology 2) 저해에 근거한 류마티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)을 포함한 염증관련 질환 치료제 개발을 위해 다양한 화합물들이 연구되고 있으며[Bioorg. Med. Chem. Lett. 2002, 12, 1365-1369. PNAS 2000, 97, 9373-9378.], 그 중 가장 대표적인 화합물로서 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd.에서 개발 중인 nonpeptidic, monocharged 화합물(Kd = 1 uM)이 대표적이다 [J. Med. Chem. 2001, 44, 2421-2431.].
앞서 언급한 바와 같이 SH2 domain 저해에 근거한 류마티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)을 포함한 염증관련 질환 치료제 개발을 위해서는 임상에서의 낮은 효과와 부작용으로 인해 그 개발이 중단되는 경우가 많으므로 새로운 구조의 화합물로서 임상 치료효과 및 안전성이 우수한 치료제 개발이 요구되고 있다. 즉, 극복을 위해 다양한 SH2 domain들 간의 높은 선택성이 요구되고 있으며, 임상에서 우수한 치료효과가 유지되어야 하는 문제점들이 극복되어야 한다.
본 발명의 목적은 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 염증관련 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온(1,2,4-thiadiazolidine-3,5-dione) 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 염증관련 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물에 관한 것이다.
[화학식 1]
Figure 112007004804074-pat00002
[상기 화학식 1에서,
A는 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, 인덴일, (C1 - C7)알콕시카보닐(C1 - C7)알킬, 아릴 또는 헤테로아릴, 아르(C1 - C5)알킬, 아르(C1 - C5) 알콕시 또는
Figure 112007004804074-pat00003
이며;
R1은 수소, 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, (C3 - C7)시클로알킬, (C3 - C7)시클로알킬(C1 - C7)알킬, (C1 - C7)알콕시, (C1 - C7)알콕시카보닐(C1 - C7)알킬, 산소, 질소 또는 황을 헤테로고리안에 포함하는 3원 내지 7원의 포화 또는 불포화 헤테로시클로알킬, 산소, 질소 또는 황을 헤테로고리안에 포함하는 3원 내지 7원의 포화 또는 불포화 헤테로시클로알킬(C1 - C7)알킬, 아릴 또는 헤테로아릴, 아르(C1 - C5)알킬, 아르(C1 - C5)알콕시이며;
R2 및 R3는 서로 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, 플루오르와 같은 할로겐족을 포함하는 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, 페닐이거나 또는 R2와 R3는 (C1 - C5)알킬렌으로 연결되어 고리를 형성할 수 있으며, 또한 알킬렌으로 연결되어 형성된 고리에는 1~2개의 이종원자를 더 포함할 수 있으며, 할로겐, (C1 - C7)알킬, 히드록시 또는 (C1 - C7)알콕시카보닐이 더 치환될 수 있으며;
단 R1, R2 및 R3에서 알킬, 알콕시, 아릴, 아르알킬, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬 또는 헤테로시클로알콕시는 (C1 - C7)알킬, (C1 - C7)알콕시, (C1 - C7)알콕시 카보닐, (C1 - C7)알콕시카보닐(C1 - C7)알킬, 할로겐, 페닐술포닐, 니트로, 시아노, 히드록시, 카복실산, 피리딜로 더 치환될 수 있다.]
본 발명에 따른 화합물들은 Lck SH2 (lymphocyte-specific protein tyrosine kinase Src homology 2)에 대하여 우수한 활성과 효소선택성을 가지고 있으며, 동물실험에서 우수한 생체 내 효과를 갖고 있어 염증관련 질환, 특히 류마티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)의 치료제 및 예방제로 유용하다.
본 발명에 따른 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물은 하기 화학식 2로 표시되는 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 포함한다.
[화학식 2]
Figure 112007004804074-pat00004
[상기 화학식 2에서,
R1은 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, 할로겐원자를 포함하는 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, (C3 - C7)시클로알킬, (C3 - C7)시클로알킬(C1 - C7)알킬, (C1 - C7)알콕시, (C1 - C7)알콕시카보닐(C1 - C7)알킬, 산소, 질소 또는 황을 헤테로고리안에 포함하는 3원 내지 7원의 포화 또는 불포화 헤테로시클로알킬, 산소, 질소 또는 황을 헤테로고리안에 포함하는 3원 내지 7원의 포화 또는 불포화 헤테로시클로알킬(C1 - C7)알킬, 아릴 또는 헤테로아릴, 아르(C1 - C5)알킬, 아르(C1 - C5)알콕시이며;
R2 및 R3는 서로 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, 플루오르와 같은 할로겐족을 포함하는 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, 페닐이거나 또는 R2와 R3는 (C1 - C5)알킬렌으로 연결되어 고리를 형성할 수 있으며, 또한 알킬렌으로 연결되어 형성된 고리에는 1~2개의 이종원자를 더 포함할 수 있으며, 할로겐, (C1 - C7)알킬, 히드록시 또는 (C1 - C7)알콕시카보닐이 더 치환될 수 있으며;
단 R1, R2 및 R3에서 알킬, 알콕시, 아릴, 시클로알킬, 헤테로시클로알킬 또는 헤테로시클로알콕시는 (C1-C7)알킬, (C1-C7)알콕시, 할로겐, 니트로, 시아노, 히드록시로 치환될 수 있다.]
본 발명에 따른 화학식 1의 화합물은 하기 화합물로부터 선택될 수 있다.
Figure 112007004804074-pat00005
Figure 112007004804074-pat00006
Figure 112007004804074-pat00007
Figure 112007004804074-pat00008
본 발명에 따른 상기 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물의 제조방법으로 반응식 1 및 반응식 2를 예시하였으며, 하기의 제조방법이 본 발명에 따른 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 제조하는 방법을 한정하는 것은 아니며, 하기의 제조방법의 변형은 당업자에게 자명할 것이다.
본 발명에 따른 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물의 제조방법은 하기 반응식 1에 도시한 바와 같이, 이소티오시아네이토 화합물의 염소첨가 반응에 의해 얻어진 디클로로 화합물을 이소시아네이토 화합물과 고리화 반응을 통해 목적하는 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 합성할 수 있다. 상기 염소화 반응시 사용할 수 있는 용매로는 유기용매이면 가능하나, 핵산, 클로로포름과 메틸렌클로라이드 등이 바람직하며, 테트라하이드로퓨란(THF)을 적당량 혼합하여 티오시아네이토 화합물을 용해시킨 후 충분한 양의 염소를 첨가하여 반응을 진행하고, 이때 반응 혼합액에 생성된 중간체인 디클로로 화합물은 분리하지 않고 이소시아네이토 화합물과 반응시켜 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 얻는 것이 수율을 위해 보다 바람직하다.
[반응식 1]
Figure 112007004804074-pat00009
[상기 반응식 1에서, A는 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, 인덴일, (C1 - C7)알콕시카보닐(C1 - C7)알킬, 아릴 또는 헤테로아릴, 아르(C1 - C5)알킬, 아르(C1 - C5)알콕시이고; R1은 화학식 1에서 정의한 바와 동일하다.]
본 발명에 따른 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물의 제조방법은 하기 반응식 2에 도시한 바와 같이, 에스터 화합물을 가수분해하여 아세트산 화합물을 제조한 후 아민 화합물과의 반응으로서 목적하는 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 합성할 수 있다.
[반응식 2]
Figure 112007004804074-pat00010
[상기 반응식에서, R1, R2 및 R3는 화학식 1에서 정의한 바와 동일하다.]
상기 반응식 2에 따른 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 제조하기 위해 먼저 티부틸 이소티오시아네이토아세테이트 화합물의 염소첨가 반응에 의해 얻어진 디클로로 화합물을 이소시아네이토 화합물과 고리화 반응을 통해 에스터 화합물을 합성한다. 상기 염소화 반응시 사용할 수 있는 용매로는 유기용매이면 가능하나, 핵산, 클로로포름과 메틸렌클로라이드 등이 바람직하며, 테트라하이드로퓨란(THF)을 적당량 혼합하여 티부틸 이소티오시아네이토아세테이트 화합물을 용해시킨 후 충분한 양의 염소를 첨가하여 반응을 진행하고, 이때 반응 혼합액에 생성된 중간체인 디클로로 화합물은 분리하지 않고 이소시아네이토 화합물과 반응시켜 에스터 화합물을 얻는 것이 수율을 위해 보다 바람직하다. 상기 에스터 화합물을 포름산과 같은 산 촉매 존재 하에서 선택적으로 티부틸 에스터만을 가수분해하여 아세트산 화합물을 제조한 후 옥살릴 클로라이드(oxalic chloride)로 산염화물(acid chloride)을 형성하고 다양한 유기 아민과 반응시켜 본 발명에서 명시하는 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물을 합성할 수 있다. 이때 사용할 수 있는 용매로서는 모든 유기용매가 가능하나 디클로로메탄, 테트라하이드로퓨란(THF) 등이 수율측면에서 보다 바람직하다.
상기 에스터 화합물은 이미 알려진 [Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 1966, 5, 672-673.] 합성법으로서 가능하며, 그 외의 방법으로도 합성할 수 있다.
본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물은 생화학적, 약리학적 시험 결과 Lck SH2 (lymphocyte-specific protein tyrosine kinase Src homology 2)에 대한 우수한 저해활성과 높은 효소선택성을 가지며, 질환모델 동물실험에서의 우수한 류마티스 관절염 치료효과를 나타냄을 확인하였다.
본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합물은 류마티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)을 포함한 염증관련 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물로서의 용도로서 적합하며, 상기 화학식 1 화합물의 약제학적으로 사용 가능한 염으로 유기 및 무기 산 또는 염기로 형성된 모든 염을 포함한다. 약제학적으로 허용되는 산 부가염은 염산, 브롬산, 황산, 시트르산, 타르타르산, 인산, 락트산, 피루브산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 트리페닐아세트산, 페닐아세트산, 치환된 페닐아세트산, 예를 들어 메톡시페닐아세트산, 설팜산, 설파닐산, 숙신산, 옥살산, 푸마르산, 말레산, 말산, 글루탐산, 아스파르트산, 옥살로아세트산, 메탄설폰산, 에탄설폰산, 아릴설폰산(예를 들면, p-톨 루엔설폰산, 벤젠설폰산, 나프탈렌설폰산 또는 나프탈렌디설폰산), 살리실산, 글루타르산, 글루콘산, 트리카발릴산, 만델산, 시남산, 치환된 신남산(예를 들면, 4-메틸 및 4-메톡시신남산 및 α-페닐 신남산을 포함하는, 메틸, 메톡시, 할로 또는 페닐 치환된 신남산), 아스코르브산, 올레산, 나프토산, 하이드록시나프토산(예를 들면, 1- 또는 3-하이드록시-2-나프토산), 나프탈렌아크릴산(예를 들면, 나프탈렌-2-아크릴산), 벤조산, 4-메톡시벤조산, 2 또는 4-하이드록시벤조산, 4-클로로벤조산, 4-페닐벤조산, 벤젠아크릴산(예를 들면, 1,4-벤젠디아크릴산) 및 이세티온산 으로부터 형성된 것을 포함한다. 약제학적으로 허용되는 염기 염은 암모늄염, 알칼리 금속 염, 예를 들어 나트 륨 및 칼륨염, 알칼리 토금속 염, 예를 들어 칼슘 및 마그네슘 염 및 유기 염기, 예를 들어 디사이클로헥실아민 및 N-메틸-D-글루카민과의 염을 포함한다.
치료학적 효과를 달성하는데 사용되는 화학식 1 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 양은 물론 특정 화합물, 투여 방법, 치료 대상 및 질환의 중증, 또는 질환에 따라 달라진다.
본 발명에 따른 화학식 1 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 단독으로 투여하는 것이 가능하지만, 바람직하게는 약제학적 제형으로 투여한다. 따라서, 본 발명은 또한 화학식 1 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 및 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제, 및 임의의 하나 이상의 치료학적 성분을 포함하는 약제학적 제형으로서 제공되는 것이 바람직하다.
이상에서 설명한 바와 같은 본 발명은 다음의 실시예에 의거하여 더욱 상세히 설명하겠는 바, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
[제조예 1] N,N- diethyl -2-(2-( ethoxycarbonylmethyl )-3,5- dioxo -1,2,4-thiadiazolidin-4-yl)acetamide(화합물 172)
Isothiocyanatoacetic acid tert-butyl ester(2) 200 mg(1.15 mmol)을 건조된 둥근바닥플라스크에 넣고 무수 hexane 10 ㎖를 가한다. -15 ℃를 유지하면서 염소가스를 주입시킨다. (1초당 2방울 정도로 주입시켜야하고 대략 1.5-2시간 정도 주입함) 서서히 실온으로 방치하면서 질소풍선으로 플라스크안의 남아있는 Cl2를 제거한 다음, ethyl isocyanatoacetate 149 mg(1.15 mmol)을 가한다. 실온에서 시간 교반한 후에 흰색 고체가 생김을 확인하고 여과하여 ethyl 2-(4-(tert-butoxycarbonylmethyl)-3,5-dioxo-1,2,4-thiadiazolidin-2-yl)acetate (2)을 얻었다(수득율 = 68 %).
상기 얻어진 ethyl 2-(4-(tert-butoxycarbonylmethyl)-3,5-dioxo-1,2,4-thiadiazolidin-2-yl)acetate (2) (1당량)을 formic acid로 가수분해하여 2-(2-methyl-3,5-dioxo-1,2,4-thiadiazolidin-4-yl)acetic acid (3)를 얻었다(수득율 = 98 %).
상기 얻어진 2-(2-methyl-3,5-dioxo-1,2,4-thiadiazolidin-4-yl)acetic acid (3) (1당량)를 CH2Cl2에 녹인 후 oxalic chloride(2 당량)와 촉매제로 DMF 한 방울을 첨가하여 2시간 가량 교반 후 용매를 모두 날린 후 0 ℃에서 천천히 diethylamine을 넣어준다. 반응 종결 후 물과 CH2Cl2을 사용하여 분별 시킨 후 여분의 수분을 MgSO4로 없애고 컬럼크로마토그라피를 하여 표제화합물인 N,N-diethyl-2-(2-(ethoxycarbonylmethyl)-3,5-dioxo-1,2,4-thiadiazolidin-4-yl)acetamide(화합물 172)를 흰색 고체로 얻었다(수득율 = 90 %).
1H NMR (200 MHz, CDCl3) δ 4.48(s, 2H), 4.36(s, 2H), 4.25(q, J = 7.2 Hz, J = 7.2 Hz, 2H), 3.46-3.29(m, 4H), 1.34-1.67(m, 6H), 1.13(t, J = 7.2 Hz, 3H).
상기와 같은 방법으로 제조한 화합물들의 구조 및 1H NMR을 하기 표 1에 표시하였다.
[표 1]
Figure 112007004804074-pat00011
Figure 112007004804074-pat00012
Figure 112007004804074-pat00013
Figure 112007004804074-pat00014
Figure 112007004804074-pat00015
Figure 112007004804074-pat00016
Figure 112007004804074-pat00017
Figure 112007004804074-pat00018
Figure 112007004804074-pat00019
Figure 112007004804074-pat00020
[실시예 1] Lck SH2 (lymphocyte-specific protein tyrosine kinase Src homology 2)에 대한 결합 억제 효과 분석
Lck SH2 도메인과 그것의 리간드 (pYEEIE) 사이의 결합을 억제하는 물질을 찾기 위하여 ELISA를 이용하였다. 우선 streptavidin (5ug/ml)이 코팅되어 있는 96-well plate 에 biotinylated pYEEIE (20ng/ml)를 결합시킨 후 GST-Lck SH2가 있는 용액을 첨가하였다. Biotinylated pYEEIE에 결합한 Lck SH2의 양은 anti-GST antibody (santa-cruz, 200ng/ml) 및 연이은 peroxidase-conjugated anti-rabbit antibody(KPL)과의 반응, TMB 용액(KPL)을 사용한 발색반응을 통하여 측정되었다. 발색 반응은 1M H2SO4를 첨가함으로써 적절한 시점에 중단하였고 450nM 파장에서 microplate reader를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 한편 후보물질(화합물 100)의 Lck SH2 도메인에 대한 결합력은 고정된 biotinylated pYEEI에 결합하는 Lck SH2의 양을 줄이는 정도에 의하여 비교되었으며 이를 수행하기 위하여 미리 테스트 화합물과 GST-Lck SH2 (50ng/ml)를 pre-incubation한 후 biotinylated pYEEIE가 결합된 96 well plate로 옮겨 나머지 실험을 진행하였다.
그 결과는 도 1에 나타난 것과 같이 화합물 100의 경우 IC50값이 50nM을 보임으로써 Lck SH2의 cognate peptide 인 pYEEIE 보다 더 강력하게 효과적으로 Lck SH2와 pYEEIE간의 결합을 억제하는 것으로 나타났다.
[표 2]
Figure 112007004804074-pat00021
[실시예 2] 화합물 100의 T임파구 수용체를 통한 T cell activation 억제 효과
화합물 100이 ELISA system 에서 효과적으로 Lck 활성을 억제하는 것으로 나타났기 때문에 화합물 100이 세포 내에서 T-cell antigen receptor (TCR) 자극으로 유도되는 NFAT promoter의 활성을 억제하는지 알아보았다. 이의 측정을 위해 NFAT promoter 뒤에 luciferase gene을 사용하였으며 원활한 활성 측정을 위하여 이러한 유전자가 안정적으로 발현되는 stable Jurkat T cell을 제작하여 사용하였다. Jurkat T cell을 화합물 100과 다양한 농도(0.5~50UM)에서 3시간 동안 전처리한 후, T cell activation을 위해 anti-CD3 antibody (1~5ug/ml, pharmingen)가 coating된 24well plate로 옮겼고, 24시간 뒤 세포를 모아 luciferase activity를 luminometer를 이용하여 측정하였다.
화합물 100은 T임파구 수용체를 통한 NFAT promoter의 활성을 효과적으로 농도에 비례하여 억제하였다. 이때의 IC50값은 10~50uM이었으며, 화합물 100의 유도체 중 화합물 100보다 더 효과적으로억제하는 물질도 관찰되었다. 따라서 화합물 100과 그것의 유도체들이 효과적으로 T cell activation을 억제함을 알 수 있었다.
[실시예 3] Anti-CD3 antibody에 의해 유도된 in vivo IL-2 production의 억제 효과
In vivo에서도 화합물 100이 anti-CD3 antibody에 의해 유도된 IL-2의 발현을 억제하는지 보기 위하여 다음과 같은 실험을 수행하였다. 0.2% CMC(Carboxy Methyl Cellulose) 에 녹인 다양한 농도의 화합물 100의 BALB/C mouse에 구강 또는 복강에 주입하였다. T cell activation을 위하여 3시간(실험조건에 따라 1,2시간)뒤에anti-CD3 antibody (125ng/100ul)를 복강에 투여하였고 2시간 후 mouse 심장에서 혈액을 채취하였다. 이후 실온에서 30분이 지난 뒤 분리된 serum에서 IL-2 level 을 ELISA를 통해 측정하였다.
그 결과, 도 3 및 도 4에 나타낸 바와 같이, 시간별로 화합물 100(10mg/kg)을 복강에 주입하였을 때, anti-CD3 antibody로 T cell을 자극하기 1시간 전에 투여되었을 때 IL-2 level이 가장 많이 억제(66%)되는 것을 관찰하였다. T임파구를 활성화시킨 후 2시간 후에 채혈을 했으므로 이는 화합물 100의 효과가 투여 후 3시간되었을 때 가장 높음을 알 수 있다 (도 3). 반면 구강으로 주입(200mg/kg)하였을 때에는(도 4) 3시간째에 가장 많이 억제(62%)되는 효과를 보였다. 따라서 투여 후 5시간 되었을 때 그 효과가 가장 높음을 의미한다. 한편 화합물 100 유도체의 경우 화합물 100보다 더 많이 억제하는 효과를 보였고 이를 통해 in vivo에서도 화합물 100과 그것의 유도체들이 anti-CD3 antibody에 의해 유도된 IL-2 level 을 효과적으로 억제함을 알 수 있었다.
[실시예 4] 화합물 100의 동물모델에서의 면역반응 억제효과
화합물 100이 동물모델에서 면역반응을 억제하는지 보기 위하여 delayed type-hypersensitivity(DTH) model을 사용하였다. 이것은 항원 특이적으로 T임파구에 의해 매개되는 면역반응으로써 자가면역질환 치료제 선별을 위해 널리 사용되는 방법이다. 우선 C57BL/6 female mouse는 7주령이 사용되었고 그룹당 5마리로 구성되었다. 화합물 100은 0.2% CMC에 녹여졌고 이는 0일째부터 8일째까지 하루에 두 번 복강에 투여되었으며 vehicle로는 0.2% CMC만이 투여되었다. 0일째에, methylated bovine serum albumin (mBSA) 400ug을 complete Freund’s adjuvant (CFA) 와 1:1로 섞은 후 털이 면도된 mouse의 옆구리에 면역하였다. 다음으로 7일 뒤에 mouse의 한쪽 뒷발에는 mBSA(5mg/ml) 20ul를 injection 하고 다른 한쪽에는 PBS 20ul만을 injection하였다. 이로부터 24시간 뒤 부은 발의 두께를 vernier caliper를 이용하여 측정하였다.
그 결과, 도 5에 나타난 바와 같이, 화합물 100이 10mg/kg/day로 복강에 injection 되었을 때 부은 발의 두께가 대조군(vehicle) 보다 40% 억제되었다. 또한 화합물 100의 유도체들도 화합물 100과 비슷하거나 더 높은 정도로 억제하는 효과를 나타내었다. 이로써 화합물 100과 유도체들이 동물모델에서도 T임파구에 의하여 매개되는 면역반응을 효과적으로 억제함을 알 수 있다.
[실시예 5] 화합물 100의 류마티스성 관절염 동물모델에서의 억제효과
화합물 100이 류마티스성 관절염의 발병 및 진행을 억제하는 효과가 있는지 알아보기 위하여 mouse rheumatoid arthritis model을 사용하였다. 실험에는 7주령의 DBA 1/J male mouse가 사용되었고 그룹당 7마리로 구성되었다. 0일째에 4mg/ml의 제2형 콜라겐에 동량의 CFA를 섞어 emulsion 시킨 후 DBA 1/J mouse 의 꼬리의 피하에 100ug/100ul씩 투여하였다 (1차 면역). 3주 후 4mg/ml의 제2형 콜라겐에 동량의 1X PBS를 섞어 복강에 200ug/100ul씩 추가 투여를 하였다 (2차 면역). 테스트 화합물은 1차 면역 이후 14일째부터 10mg/kg/day으로 매일 복강에 투여하였고 발의 부종 정도에 따라 점수를 매김으로써 그 효과를 측정하였다.
그 결과, 도 6에 나타낸 바와 같이, 대조군(control)에 비해 화합물 100이 주입된 경우 류마티스 관절염의 발달이 현격히 억제됨을 확인할 수 있었다.
본 발명에 따른 화학식 1의 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온(1,2,4- thiadiazolidine-3,5-dione) 화합물들은 Lck SH2에 대하여 우수한 활성과 효소선택성을 가지고 있다. 또한 상기 화합물들을 사용한 동물실험에서 염증관련 질환, 특히 류마티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)의 치료 및 예방에 탁월한 효과를 나타낼 것으로 예상되며 높은 선택성으로 인하여 부작용이 없이 사용가능하다.

Claims (7)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온(1,2,4-thiadiazolidine-3,5-dione) 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 염증에 의해 유발되는 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물.
    [화학식 1]
    Figure 112008022910679-pat00022
    [상기 화학식 1에서,
    A는 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, 인덴일, (C1 - C7)알콕시카보닐(C1 - C7)알킬, 페닐, 벤질 또는
    Figure 112008022910679-pat00023
    이며, 상기 A의 알킬, 페닐 또는 벤질은 할로겐, 카복실산, (C1 - C7)알콕시카보닐, (C1 - C7)알콕시, 니트로 또는 히드록시로 더 치환될 수 있고;
    R1은 수소, 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, (C1 - C7)알콕시카보닐(C1 - C7)알킬, 페닐, 페닐(C1 - C5)알킬 또는 페닐카보닐메틸이며;
    R2 및 R3는 서로 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬 또는 페닐이거나, 상기 R2와 R3는 (C1 - C5)알킬렌으로 연결되어 고리를 형성할 수 있으며, 또한 알킬렌으로 연결되어 형성된 고리에는 질소원자 또는 산소원자를 더 포함할 수 있으며, 상기 알킬렌으로 연결되어 형성된 고리는 할로겐, (C1 - C7)알킬, 히드록시 또는 (C1 - C7)알콕시카보닐이 더 치환될 수 있으며;
    단 R1, R2 및 R3에서 알킬, 페닐 또는 페닐알킬은 (C1 - C7)알킬, (C1 - C7)알콕시, (C1 - C7)알콕시카보닐, 할로겐, 니트로, 히드록시, 카복실산, 피리딜로 더 치환될 수 있다.]
  2. 제 1항에 있어서,
    하기 화학식 2로 표시되는 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온(1,2,4-thiadiazolidine-3,5-dione) 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 염증에 의해 유발되는 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물.
    [화학식 2]
    Figure 112008022910679-pat00024
    [상기 화학식 2에서,
    R1은 수소, 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬, (C1 - C7)알콕시카보닐(C1 - C7)알킬, 페닐, 페닐(C1 - C5)알킬 또는 페닐카보닐메틸이며;
    R2 및 R3는 서로 독립적으로 수소, 직쇄 또는 분쇄의 포화 또는 불포화 (C1 - C7)알킬 또는 페닐이거나, 상기 R2와 R3는 (C1 - C5)알킬렌으로 연결되어 고리를 형성할 수 있으며, 또한 알킬렌으로 연결되어 형성된 고리에는 질소원자 또는 산소원자를 더 포함할 수 있으며, 상기 알킬렌으로 연결되어 형성된 고리는 할로겐, (C1 - C7)알킬, 히드록시 또는 (C1 - C7)알콕시카보닐이 더 치환될 수 있으며;
    단 R1, R2 및 R3에서 알킬, 페닐 또는 페닐알킬은 (C1 - C7)알킬, (C1 - C7)알콕시, (C1 - C7)알콕시카보닐, 할로겐, 니트로, 히드록시, 카복실산, 피리딜로 더 치환될 수 있다.]
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물 유도체는 하기 화합물로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 염증에 의해 유발되는 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물.
    Figure 112008022910679-pat00025
    Figure 112008022910679-pat00026
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물 유도체는 하기 화합물로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 염증에 의해 유발되는 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물.
    Figure 112008022910679-pat00027
    Figure 112008022910679-pat00028
    Figure 112008022910679-pat00029
  5. 제 3항에 있어서,
    상기 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물 유도체는 하기 화합물로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 염증에 의해 유발되는 질환의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물.
    Figure 112008022910679-pat00030
  6. 하기 화학식 1로 표시되는 1,2,4-티아다이아졸리딘-3,5-다이온 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 류마티스성 관절염(Rheumatoid arthritis)의 치료 및 예방을 위한 약제학적 조성물.
    [화학식 1]
    Figure 112007004804074-pat00031
    [상기 화학식 1의 치환체 정의는 상기 청구항 제1항과 동일하다.]
  7. 삭제
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101399484B1 (ko) 2011-07-14 2014-05-29 한국화학연구원 허피스바이러스 엑소뉴클리에이즈 활성 억제 물질을 유효성분으로 함유하는 항허피스바이러스용 약학적 조성물
US20150038538A1 (en) * 2012-02-24 2015-02-05 Asd Therapeutics Partners Llc Thiadiazolidinediones as gsk-3 inhibitors
CN115197167A (zh) * 2022-07-22 2022-10-18 中国药科大学 1,2,4-噻二唑烷-3,5-二酮化合物及其制备方法和应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5532256A (en) * 1994-05-18 1996-07-02 American Home Products Corporation New azolidinediones and thiadiazolidinediones as antihyperglycemic agents
KR20060052790A (ko) * 2003-07-07 2006-05-19 뉴로크린 바이오사이언시즈 인코퍼레이티드 고나도트로핀-방출 호르몬 수용체 길항제로서의피리미딘-2,4-디온 유도체
KR20060131976A (ko) * 2004-04-05 2006-12-20 뉴로파마 에스.에이. Ｇｓｋ-3 저해제로서의 티아디아졸리디논

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5532256A (en) * 1994-05-18 1996-07-02 American Home Products Corporation New azolidinediones and thiadiazolidinediones as antihyperglycemic agents
KR20060052790A (ko) * 2003-07-07 2006-05-19 뉴로크린 바이오사이언시즈 인코퍼레이티드 고나도트로핀-방출 호르몬 수용체 길항제로서의피리미딘-2,4-디온 유도체
KR20060131976A (ko) * 2004-04-05 2006-12-20 뉴로파마 에스.에이. Ｇｓｋ-3 저해제로서의 티아디아졸리디논

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101399484B1 (ko) 2011-07-14 2014-05-29 한국화학연구원 허피스바이러스 엑소뉴클리에이즈 활성 억제 물질을 유효성분으로 함유하는 항허피스바이러스용 약학적 조성물
US20150038538A1 (en) * 2012-02-24 2015-02-05 Asd Therapeutics Partners Llc Thiadiazolidinediones as gsk-3 inhibitors
US9371299B2 (en) * 2012-02-24 2016-06-21 Asd Therapeutics Partners, Llc Thiadiazolidinediones as GSK-3 inhibitors
US9469618B2 (en) 2012-02-24 2016-10-18 Asd Therapeutics Partners, Llc Thiadiazolidinediones as GSK-3 inhibitors
AU2013224041B2 (en) * 2012-02-24 2017-08-24 Asd Therapeutics Partners Llc Thiadiazolidinediones as GSK-3 inhibitors
CN115197167A (zh) * 2022-07-22 2022-10-18 中国药科大学 1,2,4-噻二唑烷-3,5-二酮化合物及其制备方法和应用

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