KR100827513B1 - 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법및 그 조성물 - Google Patents

지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법및 그 조성물 Download PDF

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Abstract

유해 미생물의 생육이 억제되는 조성물 및 그 제조방법이 게시된다. 본 제조방법은 a) 건조된 지초를 유기용매에 침지하여 지초에 함유된 시코닌 유도체를 유기용매로 추출하는 단계; b) 시코닌 유도체가 추출된 유기용매에 실리카겔을 혼합하여 시코닌 유도체를 실리카겔에 흡착시키는 단계; c) 시코닌 유도체가 흡착된 실리카겔을 건조하여 유기용매를 제거하는 단계; d) 유기용매가 제거된 실리카겔에 석유에테르를 가하여 진탕하고 여과하여 불순물을 제거하는 단계; e) 불순물이 제거되고 남은 실리카겔에 에테르를 첨가한 후 진탕하고 여과하여 유해 미생물 생육억제 조성물을 얻는 단계;를 포함한다. 이에 따르면, 기존의 다른 제조방법에 비하여 현저하게 향상된 함량의 조성물을 얻을 수 있고, 이러한 조성물에 의하면, 식품에 첨가할 경우 유해 미생물의 생육을 효과적으로 억제하여 식품의 신선도를 유지할 수 있고, 저장기간과 유통기간을 효과적으로 연장시킬 수 있으며, 여드름 원인균의 생육을 억제시킬 수 있는 효과가 제공되며, 국내에서 생산되는 지초로부터 제조되므로 화학적 합성물에 비하여 안전하기 때문에 체내에 잔류/축적되어 해를 입는 현상이 방지될 수 있는 효과가 제공되는 것이다.
지초, 유해미생물, 생육억제, 조성물, 제조방법

Description

지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법 및 그 조성물{a method for composition manufacturing having multiplication suppression capability of harmful microbe from Lithospermum erythrohizon and the composition }
도 1은 본 발명의 바람직한 실시 예에 따른 제조방법을 설명하기 위한 순서도.
도 2는 본 발명의 바람직한 실시 예에 따라 제조된 물질을 분석결과를 도시한 크로마토그램.
도 3은 바람직한 실험 예에 따라 유해 미생물 생육억제 물질을 함유한 소시지의 사진.
도 4는 도 3에 도시된 소시지의 저장기간 중 총 균 수의 변화를 도시한 그래프.
본 발명은 지초로부터 유해 미생물 생육억제 물질을 제조하는 방법에 관한 것으로, 특히 지초 뿌리에 함유된 시코닌 성분을 유기용매로 추출하고, 이에 실리 카겔을 가하여 실리카겔에 지초의 시코닌 성분을 흡착시킨 후 실리카겔을 석유에테르로 세척하고, 남은 잔사에 에테르를 첨가하여 유해 미생물 생육억제 물질을 얻을 수 있는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 물질을 제조하는 방법에 관한 것이다.
일반적으로 유해 미생물은 식품들을 부패시키거나 인체, 특히 여드름 등을 증식시키는 원인으로 작용한다.
예를 들면, 소고기, 돼지고기, 닭고기 등의 식육이나 육류제품은 도살 이후부터 소비자들의 식탁에 오르기까지 상당한 기간의 저장 유통과정이 필요하다. 이들 다양한 육류는 보통 가공 후 단계부터 소비자 구매 시까지 제한된 기간 동안 냉동보관한다고 하나 가공 시에 도입된 유해 미생물 포자나 잔류 미생물 등에 의해 오염되어 식품의 부패가 일어나거나 향미를 변질시킬 수가 있다. 특히, 식육의 냉장 중 부패현상으로는 미생물에 의한 곰팡이 발생이나 고기표면에 끈적끈적한 점성 및 불쾌한 냄새, 관절부위와 같은 골 주위 도체의 깊은 부분에서의 혐기성균 증식으로 인한 불쾌한 산패취(souring)나 부패취 뿐만 아니라, 건조에 의한 고기표면의 혼탁 등이 나타나는데, 이러한 현상을 방지하기 유해서는 적정 온/습도를 유지하고 도살 후 신속한 냉각이 요구될 뿐만 아니라 미생물 생육 또한 억제하는 방법이 요구되고 있다.
이를 유해서 육류를 포함한 식품의 보존에 살균제, 방부제나 식품보존제들이 사용되고 있는데 이들 물질들은 체내에 축적되고 해를 입히는 잔류성 문제로 인해 갈수록 인류의 보건에 치명적이며 생명을 위협하고 있다. 특히 식품의 국제화시대 에 있어서 살균제, 소독제 및 식품보존제의 과량 사용은 수출과 수입시 가장 큰 문제로 대두 되고 있는 것이다.
따라서, 식품의 보존을 유해 살균제와 소독제, 식품보존제를 남용함으로써 인해 발생할 수 있는 부작용 및 잔류성 문제를 해결하고, 이와 동시에 유해 미생물의 증식으로 인해 발생할 수 있는 식중독의 발병을 감소시킬 수 있는 천연 유해 미생물 생육억제제가 절실히 요구되고 있다.
본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해소하기 위하여 안출한 것으로 본 발명의 기술적 과제는 국내에서 생산되는 지초를 이용하여 유해 미생물의 생육을 효과적으로 억제하여 식품의 신선도를 유지함으로써 저장기간과 유통기간을 효과적으로 연장시킬 수 있는 새로운 기능을 지닌 유해 미생물의 생육 억제물질을 제조하는 방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 기술적 과제는 국내에서 생산되는 지초를 이용하여 여드름 원인균의 생육억제 물질을 제조하는 방법을 제공하는 데 있다.
상기와 같은 기술적 과제를 해소하기 유해, 본 발명은,
a) 건조된 지초를 유기용매에 침지하여 지초에 함유된 시코닌 유도체를 유기용매로 추출하는 단계;
b) 시코닌 유도체가 추출된 유기용매에 실리카겔을 혼합하여 지초 농축물에 함유된 시코닌 유도체를 실리카겔에 흡착시키는 단계;
c) 시코닌 유도체가 흡착된 실리카겔을 건조하여 유기용매를 제거하는 단계;
d) 유기용매가 제거된 실리카겔에 석유에테르를 가하여 진탕하고 여과하여 불순물을 제거하는 단계;
e) 불순물이 제거되고 남은 실리카겔에 에테르를 첨가한 후 진탕하고 여과하여 유해 미생물 생육억제 조성물을 얻는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법을 제공한다.
상기 a) 단계는 시코닌 유도체가 추출되어 함유된 유기용매를 농축하여 지초 농축물을 제조하는 단계를 더 포함하고,
상기 b) 단계는 상기 지초 농축물에 유기용매를 혼합하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 유기용매는 에틸아세테이트 또는 주정으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 어느 하나 이상의 성분으로 이루어지는 것을 특징으로 한다.
상기 c) 단계는 실리카겔을 35℃ - 45℃에서 5 - 15분간 감압농축시키는 것을 특징으로 한다.
상기 c) 단계는 실리카겔을 35℃ - 45℃에서 30분 - 90분간 건조하는 것을 특징으로 한다.
상기 e) 단계는 유해 미생물 생육억제 조성물을 감압 농축하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 한다.
한편, 본 발명은 상기한 제조 방법에 의해 제조되고, 시코닌, 하이드록시이 소바레릴시코닌, 아세틸시코닌, 이소부틸시코닌, 디메틸아크릴시코닌 및 이소바레릴시코닌으로 이루어진 그룹에서 선택된 어느 하나 이상의 시코닌 유도체를 포함하는 것을 특징으로 하는 유해 미생물 생육억제 조성물을 제공한다.
또한, 시코닌 0.786중량부;
하이드록시이소바레릴시코닌 18.297 중량부;
아세틸시코닌 27.037 중량부;
이소부틸시코닌 5.037 중량부;
디메틸아크릴시코닌 1.514 중량부; 및
이소바레릴시코닌 16.033 중량부;를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 유해 미생물 생육억제 조성물을 제공한다.
이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 유해서 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서, 본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일 실시 예에 불과할 뿐이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시 예에 따른 유해미생 물 생육억제 조성물의 제조방법에 대하여 보다 상세히 설명하면 다음과 같다.
첨부된 도면 중에서 도 1은 본 발명의 바람직한 실시 예에 따른 제조방법을 설명하기 위한 순서도이다.
도 1에 나타난 바와 같이 먼저, a) 단계는 용매를 이용하여 지초에서 시코닌 유도체를 추출하기 위한 단계로, 건조된 지초뿌리를 지초뿌리 중량의 5 - 15배 바람직하기로는 10배 이상의 에틸아세테이트 또는 주정과 같은 용매에 침지한 뒤 대략 24시간 방치시킨다. 이어서 분쇄장치를 통해 용매와 함께 지초뿌리를 분쇄하여 지초뿌리에 함유되어 있는 붉은 색 색소인 시코닌 유도체를 추출한다. 즉, 용매와 함께 지초뿌리를 분쇄하여 시코닌 유도체가 용매에 더욱 용이하게 추출되도록 하고, 여과 과정을 거쳐 순수한 용매만 얻는다.
b) 단계는 시코닌 유도체를 실리카겔에 흡착시키는 단계로, a) 단계에서 제조된 지초 추출물을 완전히 농축시키지 않은, 즉 용매가 미량 남아있는 상태의 지초 추출물에 실리카겔을 넣어서 시코닌 유도체를 실리카겔에 흡착시킨다. 상기 실리카겔 표면의 수산기, 즉 -OH기가 시코닌 유도체를 흡착하게 된다.
이때, 용매가 너무 많이 남아 있으면 지초 농축물(추출물)의 성분이 실리카겔에 모두 흡착되지 않는다. 즉, 용매가 많으면 용매에 지초 성분이 남아 있게 되기 때문이다. 따라서, 흡착률을 높이기 위해서는 추출물에 용매가 미량 남아있는 상태에서만 실리카겔로 흡착한다.
한편, b) 단계는 도면에 도시된 바와 같이 지초의 시코닌 성분이 녹은 용매를 대략 40℃에서 감압 농축하여 지초 농축물을 얻은 후, 이 지초 농축물을 소량의 유기용매로 용해시키는 단계를 더 포함할 수 있다. 여기서 소량의 유기용매는 에틸아세테이트 또는 주정으로 이루어지고, 그 혼합양은 대략 지초 농축물 중량의 15-25, 바람직하게는 20배이다. 이는 농축물을 전부 또는 최대로 실리카겔에 흡착하기 위해서 필요한 충분한 양이다. 즉, 추출물 중량의 20배 정도의 실리카겔을 혼합함으로써 지초 농축물을 최대로 흡착할 수 있는 것이다. 따라서, 15배 이하일 경우에는 지초 농축물을 충분히 흡착할 수 없고, 25배 이상이면 실리카겔이 불필요하게 다량 사용되는 문제점이 있다.
그리고, 지초 추출물 농축시 40℃ 이상이면 물질의 변화위험이 있고, 너무 낮으면 농축이 잘 되지 않는 문제점이 있다.
이와 같이 유기용매에 의해 용해된 지초 농축물에 농축물 중량의 대략 20배의 실리카겔을 혼합하여 실리카겔에 시코닌 유도체가 흡착되도록 할 수 있다.
이때, 농축과정은 일반적으로 알려진 감압 농축기를 이용하는 것이므로 그에 대한 상세한 설명은 생략한다.
c) 단계는 시코닌 유도체가 흡착된 실리카겔을 건조하여 유기용매를 제거하는 단계이다. 즉, c) 단계에서는 지초의 유효성분이 흡착된 실리카겔을 40℃에서 10분간 감압농축 하여 유기용매를 제거하거나 40℃ 에서 1시간동안 건조하여 용기용매를 제거한다. 따라서, 실리카겔이 건조되면 실리카겔에는 순수한 지초의 유효성분인 시코닌 유도체만 남게 된다.
d) 단계는 실리카겔을 여과하여 불순물을 제거하는 단계로, c) 단계를 거치면서 유기용매가 제거된 실리카겔에 실리카겔 중량의 대략 20배의 석유에테르를 가 한 후 진탕하고 부크너 깔때기에 여과지를 깔고 감압 여과한다. 이 단계를 통하여 활성물질 이외의 비극성 불순물이 제거된다. 즉, 시코닌 유도체가 아닌 시코닌 보다 더 극성이 낮은 지방산 계통 또는 정유성분과 같은 물질들이 여과과정을 통해서 제거되는 것이다.
e) 단계는 불순물이 제거되고 남은 실리카겔에 에테르를 혼합하여 최종 조성물을 얻는 단계로, d) 단계에서 석유에테르로 세척한 후 남은 잔사에 실리카겔 중량의 20-50배, 바람직하게는 40배의 에테르를 첨가하고 10분동안 진탕한 후 여과하여 실리카겔로부터 활성물질을 추출한다. 이어서, 얻어진 활성물질 즉, 에테르를 감압 농축하여 최종적으로 유해 미생물 생육억제 조성물을 얻는다.
이상에서와 같은 공정에 의하면 시코닌, 하이드록시이소바레릴시코닌, 아세틸시코닌, 이소부틸시코닌, 디메틸아크릴시코닌 및 이소바레릴시코닌으로 이루어진 그룹에서 선택된 어느 하나 이상의 시코닌 유도체를 포함하는 조성물을 얻을 수 있다. 즉, 많은 양의 시코닌 유도체가 함유된 조성물을 얻을 수 있게 되는 것이다.
또한, 보다 구체적으로는 대략 시코닌 0.750-0.790 중량부, 바람직하게는 0.786중량부와, 하이드록시이소바레릴시코닌 17.00-19.00 중량부, 바람직하게는 18.297 중량부와, 아세틸시코닌 26.00-28.00 중량부, 바람직하게는 27.037 중량부와, 이소부틸시코닌 4.00-6.00 중량부, 바람직하게는 5.037 중량부와, 디메틸아크릴시코닌 1.4-1.6 중량부 바람직하게는 1.514 중량부와, 이소바레릴시코닌 15.00-17.00 중량부, 바람직하게는 16.033 중량부를 포함하여 이루어지는 유해 미생물 생육억제 조성물을 얻을 수 있는 것이다.
예를 들면, 지초를 주정에 침지하여 그 유효성분을 추출할 때 지초 100g당 7g, 에틸아세테이트로 추출할 때에는 지초 100g당 8g의 추출물을 얻을 수 있고, 이와 같은 방법에 의해 얻어진 추출물의 시코닌 유도체의 함량은 각각 16%, 14%에 불과하다. 그러나 전술한 본 발명의 바람직한 실시 예에 따른 방법에 의하면, 전조지초(건조된 지초-수분함량이 적은 상태에서 추출하여 추출 수율을 높이기 위한 것임.) 100g당 66%의 시코닌 유도체가 함유된 추출물 약 2.5 g을 얻을 수 있는 것이다.
또한, 이렇게 제조된 추출물은 기존의 단순 용매추출로 얻어진 추출물에 비하여 월등히 강력한 식품 유해 미생물 및 여드름 원인균의 생육억제 효과를 보이는 것이다.
이하, 본 발명을 아래의 실험 예를 통하여 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.
실험 예 1: 지초의 유효 성분을 용매로 추출한 추출물의 시코닌 유도체 함량 측정
본 발명의 바람직한 실시 예에 따른 추출방법에 의하여 제조된 추출물 및 기존에 사용되어 왔던 주정 및 에틸아세테이트로 추출하여 제조한 추출물의 시코닌 유도체의 함량을 MeCN:0.1% TFA=75:25의 용매조건으로 1ml/min로 용출하면서 420 nm에서 검출하는 조건의 reverse phase HPLC(High Pressure Liquid Chromatography)통하여 측정하였다. 이 조건의 경우, 시코닌 5.5 min, 하이드록시 이소바레릴시코닌 6.9 min, 아세틸시코닌 8.3 min, 이소부틸시코닌 14.4 min, 디메틸아크릴시코닌 16.8 min, 이소바레릴시코닌 18.7 min에 baseline separation되어 총 6종의 시코닌 유도체의 함량을 효과적으로 측정할 수 있다 (도2).
이 방법을 통하여 분석한 각 추출물의 시코닌 함량은 다음과 같다.
시코닌 유도체 100 mg 당 함량 (mg)
주정추출물 에틸아세테이트 추출물 본 발명에 의해 제조된 추출물
시코닌 0.375 0.707 0.786
하이드록시이소바레릴시코닌 2.044 1.800 18.297
아세틸시코닌 7.518 6.147 27.037
이소부틸시코닌 0.533 0.767 5.037
디메틸아크릴시코닌 0.518 0.167 1.514
이소바레릴시코닌 4.402 4.471 16.033
총 시코닌 유도체 함량 15.390 14.058 69.230
실험 예 2: 지초의 유효 성분을 용매로 추출한 추출물의 유해 미생물생육억제 효과 측정
본 발명의 상기에 제시한 추출방법에 의하여 제조된 추출물 및 기존에 사용되어 왔던 주정 및 에틸아세테이트로 추출하여 제조한 추출물의 유해미생물 생육 억제 효과를 측정하였다. 사용균주는 식품유해미생물 4종 (표1, 그람양성세균 2종: Staphylococcus aureus , Bacillus cereus , 그람음성세균 2종: Listeria monocytogenes , E. coli)과 여드름 원인균인 P. acnes를 대상으로 항균활성을 검정하였다.
식품유해 미생물 4종의 배양에 사용된 배지는 공통적으로 Tryptic Soy Broth (TSB)배지를 사용하였고, Escherichia coli , Staphylococcus aureus는 35에서 24시간, Listeria monocytogenes, Bacillus cereus는 30에서 24시간 동안 3회 반복하여 전배양을 행한 후 접종균주로 사용하였다.
여드름 원인균인 P. acnes는 KCCM에서 구매하여 사용하였으며, 사용배지는 P. acnes의 선택배지인 RCM배지를 사용하여 37에서 혐기성 JAR를 이용한 혐기적 조건하에서 배양을 실시하였다.
표1. 대표적 식품유해 미생물의 종류와 특징
사용균주 특징
그람 염색 주요특성
Escherichia coli - 포자를 만들지 않으며, 간균으로 편모를 가지고 있어 운동성이 있음, 식중독의 원인균
Listeria monocytogenes + 통성혐기성의 간균, 사람(식중독)과 동물에 다같이 질병을 일으킬 수 있는 균종
Bacillus cereus + 간균, 토양에 많이 존재, 단백질, 지방의 분해 활성이 높으며 식중독 원인균
Staphylococcus aureus + 구균, 통성혐기성, 대표적인 화농균, enterotoxin을 생성하는 식중독(독소형)의 원인균
미생물생육억제 효과는 paper disc(6mm 혹은 8 mm, Whatman)방법으로 측정하였다. Tryptic Soy Agar(TSA)배지 또는 RCM배지를 이용하여 pour-plate method에 의해 45로 조절된 멸균 배지 20mL에 전 배양액 0.5mL를 무균적으로 옮겨 잘 혼합한 후, 지초 추출물이 각 농도별로 함유된 지름 8.0 mm의 paper disc를 배지위에 올린 후 멸균 증류수 50 μL로 확산시킨 뒤, Escherichia coli , Staphylococcus aureus는 37에서 16시간, Listeria monocytogenes, Bacillus cereus는 30에서 16시간, P. acnes 는 37에서 24시간 배양하여 paper disc 주위에 clear zone의 크기(mm)로 활성의 정도를 측정하였다. 대조구로는 식품보존제로 이용되고 있는 benzoic acid를 사용 항균활성을 비교하였다.
지초로부터 유효성분을 추출한 추출물의 항균 활성 결과, 모든 추출물에서 그람양성세균과 음성세균 모두에 항균활성을 보였으나, 본 발명의 바람직한 실시 예에 의해 제조된 추출물은 기존의 단순 용매추출로 얻어진 주정 및 에틸아세테이트 추출물에 비해 월등히 강력한 식품유해미생물 및 여드름 원인균의 생육억제 효과를 보여 식품의 안전성 확보와 유통기한의 연장 등의 효과를 기대할 수 있을 것으로 판단되었다.
또한 여드름 원인균에 효과가 있음을 보여 향후 이를 이용한 의약 및 화장품의 이용가능성도 상당히 높은 것으로 생각된다.
추출물 농도 (mg/disc) 미생물 생육 저해환(mm)
Staphylococcus aureus * Bacillus cereus * Listeria monocytogenes * E. coli * P. acnes **
Benzoic acid 2 12 12 10 11 9
주정추출물 4 9 10 10 9 -
에틸아세테이트 추출물 4 9 11 10 9 10
본 발명에 의해 제조된 추출물 4 13 14 12 11 12
* 대표적인 식품유해 미생물, ** 여드름원인균
실험 예 3: 지초 추출물이 함유된 소시지의 저장기간 연장 실험
현재 햄이나 소시지 등에는 붉은 색을 내기위하여 합성 착색료를 사용하고 있으며, 보존성을 높이기 위하여 합성 보존료가 사용되고 있다. 본 연구에서 증명된 shikonin의 강한 항균활성을 이용하여 지초 추출물을 이들 합성 착색료 및 보존제의 대체 첨가물로 사용하기 위하여 햄과 소시지 등의 육가공식품에의 이용을 검토하였다.
지초 추출물의 육가공식품의 첨가물로 이용을 검토하기 위하여, 지초추출물을 첨가한 소시지를 제조하였다. 진도산 지초의 에탄올 추출물을 올리브유(청정원)와 혼합한 후 돼지고기 무게의 0.05%에 해당되는 양을 최하여, 잘 분쇄된 돼지고기의 목살에 첨가한 후 케이싱(가용성필름)한 뒤, 멸균하여 도 3에 도시된 바와 같이 소시지를 제조하였다.
대조구는 돼지고기와 소르빈산 칼륨을 0.05% 첨가한 돼지고기를 사용하였다. 이렇게 제조된 시료를 상온에 저장하면서 저장기간에 따른 총균수를 측정하였다. 총균수의 측정은 시료를 10g씩 bag에 넣은 후 멸균수 90 ml과 섞어 Bag mixer로 균질화시킨 후 멸균수로 단계 희석하여 trypic soy agar (TSA)에 0.1 ml씩 분주한 뒤 spreader로 도말하고 Incubator로 35에서 48시간 배양한 후 집락의 수를 시료 g당 세균수로 표시하였다.
그 결과 도 4에 나타난 바와 같이 지초 추출물을 첨가한 소시지의 경우, 합성보존제인 소르빈산칼륨을 첨가한 소시지보다는 보존성이 낮았으나, 아무것도 첨가하지 않은 무첨가 소시지에 비하여 보존성이 향상되는 결과를 얻어, 지초 추출물이 소시지의 보존기간을 연장시킴을 알 수 있었다.
본 발명에 의한 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법 및 그 조성물은 지초로부터 실리카겔을 통하여 시코닌 유도체를 얻는 것으로, 본 발명에 따르면, 기존의 다른 제조방법에 비하여 현저하게 향상된 함량의 조성물을 얻을 수 있고, 이러한 조성물에 의하면, 식품에 첨가할 경우 유해 미생물의 생육을 효과적으로 억제하여 식품의 신선도를 유지할 수 있고, 저장기간과 유통기간을 효과적으로 연장시킬 수 있으며, 여드름 원인균의 생육을 억제시킬 수 있는 효과가 제공되는 것이다.
또한, 본 발명에 따른 조성물은 국내에서 생산되는 지초로부터 제조되므로 화학적 합성물에 비하여 안전하기 때문에 체내에 잔류/축적되어 해를 입는 현상이 방지될 수 있는 효과가 제공되는 것이다.
이상과 같이 본 발명은 비록 한정된 실시 예와 도면에 의해 설명되었으나, 본 발명은 이것에 의해 한정되지 않으며, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 본 발명의 기술 사상과 아래에 기재될 청구범위의 균등 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능함은 물론이다.

Claims (11)

  1. a) 건조된 지초를 유기용매에 침지하여 지초에 함유된 시코닌 유도체를 유기용매로 추출하는 단계;
    b) 시코닌 유도체가 추출된 유기용매에 실리카겔을 혼합하여 시코닌 유도체를 실리카겔에 흡착시키는 단계;
    c) 시코닌 유도체가 흡착된 실리카겔을 건조하여 유기용매를 제거하는 단계;
    d) 유기용매가 제거된 실리카겔에 석유에테르를 가하여 진탕하고 여과하여 불순물을 제거하는 단계;
    e) 불순물이 제거되고 남은 실리카겔에 에테르를 첨가한 후 진탕하고 여과하여 유해 미생물 생육억제 조성물을 얻는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  2. 청구항 1에 있어서, 상기 a) 단계는 시코닌 유도체가 추출되어 함유된 유기용매를 농축하여 지초 농축물을 제조하는 단계를 더 포함하고,
    상기 b) 단계는 상기 지초 농축물에 유기용매를 혼합하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 유기용매는 에틸아세테이트 또는 주정으로 이루어 진 그룹으로부터 선택된 어느 하나 이상의 성분으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  4. 청구항 2에 있어서, 상기 유기용매는 에틸아세테이트 또는 주정으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 어느 하나 이상의 성분으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  5. 청구항 3에 있어서, 상기 지초 농축물에 혼합되는 유기용매는 에틸아세테이트 또는 주정으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 어느 하나 이상의 성분으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  6. 청구항 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 상기 c) 단계는 실리카겔을 35℃ - 45℃에서 5 - 15분간 감압농축시키는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  7. 청구항 1 내지 5 중 어느 한 항에 있어서, 상기 c) 단계는 실리카겔을 35℃ - 45℃에서 30분 - 90분간 건조하는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  8. 청구항 6에 있어서, 상기 e) 단계는 유해 미생물 생육억제 조성물을 감압 농축하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  9. 청구항 7에 있어서, 상기 e) 단계는 유해 미생물 생육억제 조성물을 감압 농축하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 지초로부터 유해 미생물 생육억제 조성물을 제조하는 방법.
  10. 청구항 1 내지 청구항 5 중 어느 한 항에 따른 제조 방법에 의해 제조되고, 시코닌, 하이드록시이소바레릴시코닌, 아세틸시코닌, 이소부틸시코닌, 디메틸아크릴시코닌 및 이소바레릴시코닌으로 이루어진 그룹에서 선택된 어느 하나 이상의 시코닌 유도체를 포함하는 것을 특징으로 하는 유해 미생물 생육억제 조성물.
  11. 삭제
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