상기한 바와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 살균 조성물은, 5 내지 12 중량비의 무수구연산과, 35 내지 55 중량비의 산화제와, 2.0 내지 2.9 중량비의 설파민산과, 5 내지 15 중량비의 비환원성 유기산과, 15 내지 25 중량비의 무수 알칼리 금속 인산염으로 구성되는 것을 특징으로 한다.
상기 무수 구연산은 레몬 등에서 추출한 과일산으로서 염소 성분을 포함하지 않아서 제조 및 사용시에 유독성 염소가스의 배출을 방지할 수 있고 강한 살균력을 제공할 수 있는 데, 5 내지 12 중량비로 구성되는 경우 종래의 살균 조성제보다 1.5 배 이상 향상된 살균력이 발생되고, 살균력과 재료 비용의 관점에서 특히 8 중량비로 구성되는 것이 바람직하다.
산화제는 세균에 반응하여 세균의 단백질을 산화시켜 세균의 기능을 정지시키는 작용을 하므로 살균 및 표백에 쓰이는 데, 이러한 산화제로는 과황산염, 과산화 이황산 암모늄염, 과망간산염, 크롬산염, 페르옥시프탈산염 등이 있는데, 가장 바람직한 산화제는 2KHSO5-KHSO4-K2SO4의 화학식을 가지는 과황산 트리플 칼륨염으로서 현재 미국 듀폰사에서 시판되고 있고 옥손이라는 제품명을 가지고 있다.
설파민산의 중량비는 특허발명 제 1992-00863호의 경우 3 내지 8 중량비일 것을 요구하고 있으나, 본 발명에서는 2.0 내지 2.9 의 중량비일 것을 요구하며 특히, 2.5 중량비일 경우 하기 구체적인 실시예에서 보는 바와 같이 산의 세기가 더 세지면서 살균의 효과가 상기 특허발명 제 1992-00863호 보다 월등히 개선되는 점을 확인할 수 있다.
비환원성 유기산은 50 중량비의 과황산 트리플 칼륨염, 1.5 중량비의 염화나트륨, 5 중량비의 설파민산, 20 중량비의 시험용산을 첨가하고 30분간 방치한 시험혼합물의 1% 수용액의 산화분말을 환원시키지 않는 유기산을 말한다. 본 발명에서는 사과산이 상기 비환원성 유기산으로 가장 바람직하다.
알칼리금속 인산염은 폴리인산 나트륨으로서 알려진 헥사메타인산 나트륨이 가장 적당하며, 피로인산 4나트륨, 인산 1, 2 또는 3나트륨과 이에 상응하는 칼륨화합물로도 가능하다.
인산염은 설파민산과 함께 완충제 및 킬레이트로서 작용하여 본 발명의 조성물이 경수에서도 살균성질을 역효과를 미치지 않고 용해시킬 수 있는 것 같이 다양한 사용조건에서도 효과를 낼 수 있도록 한다.
산화제에는 여러 종류의 계면활성제를 사용할 수 있는데, 특히 도데실벤젠 설폰산나트륨이 효과적이다. 그 밖에도 라우릴 에테르설페이트, 지방알콜의 폴리클리콜에테르, 알킬페놀의 폴리글리콜에테르 및 지방알콜 에톡실레이트 등이 계면활성제로서 가능하다.
본 발명에 따른 살균 조성물은 분말 형태로 제조 판매하는 것이 바람직하며, 사용시에 필요한 농도로 물에 타서 사용하며 수용액 상태로 만든 경우에는 그 즉시 사용하는 것이 효과적이다.
본 발명의 구체적인 실시예는 무수구연산 8.1 중량비, 과황산 트리플 칼륨염 50.0 중량비, 설파민산 2.5 중량비, 헥사메타인산나트륨 18.0 중량비, 도데실벤젠나트륨 11.0 중량비, 사과산 10.0 중량비와 나머지 중량비는 향로와 착색제로 구성된다.
상기와 같이 구성되는 살균 조성물의 효능을 시험하기 위한 공시세균 및 바 이러스는 소독체 시험에 적합한 국립수의과학검역원 분양 균독주로 하였으며 세균으로는 Salmonella cheleraesuis, Brucella ovis와 바이러스로는 Hog cholera virus, Aujeszky's virus, Newcastle disease virus, Avian influenza virus H9N2(MS96 strain)으로 하였다.
공시용액으로는 증류수 1L에 CaCl2 0.305g과 MgCl2.6H2O 0.139g(W/V)을 함유한 경수와 소독제의 희석을 위해 사용되는 유기물을 함유한 경수로서 유기물희석액을 조성하였다. 세균용 유기물 희석액은 5%(W/X) 효모추출물을, 바이러스용 유기물 희석액은 5% 소태아혈청을 조성하였다. 세균 등의 소독제 효력시험을 위해서 "소독제효력시험지침"의 별표 1의 규정을 따랐으며, 바이러스의 소독제 효력시험을 위해서 "소독제효력시험지침"의 별표 2의 규정을 따랐다.
하기 6가지 효력시험 결과표에서 가로줄은 본 발명의 살균 조성물의 희석배수를 나타내고, 세로줄의 저유기물은 축사공간 및 축사기구, 일반차량 및 운전석 내부나 도로 등의 유기물 조건을 뜻하며, 고유기물은 소독조, 축사바닥, 운반기구(농장용, 동물운송, 분뇨, 사료, 건초 등)와 바이러스 등의 발생지 주변 및 발생지 농장 출입차량 내외부를 뜻한다. 그리고, 각 표에서 셀 안의 숫자는 배양액 접종수에 대한 세균 또는 바이러스의 양성수를 뜻한다.
1.일반세균(Salmonella cheleraesuis)에 대한 효력시험 결과
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1:100 |
1:200 |
1:300 |
1:500 |
1:800 |
1:1000 |
1:1200 |
1:1600 |
저유기물 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
고유기물 |
0/5 |
4/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
세균의 증식여부 판정은 5개의 동일 소독제 희석배수의 영양배지에서 2개 이상 증식이 인정되지 않은 최종소독제 단계를 희석배수로 하였고, 3회 반복시험하여 20%의 오차범위 내의 결과의 중위수(median)를 본 발명의 살균 조성물에 대한 최종 희석배수로 하였다. 따라서, 일반세균에 대한 최종유효 희석배수는 저유기물인 경우 1600, 고유기물인 경우 100임을 알 수 있다.
2.부르세라(Brucella ovis)에 대한 효력시험 결과
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1:100 |
1:200 |
1:300 |
1:500 |
1:800 |
1:1000 |
1:1200 |
1:1600 |
저유기물 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
고유기물 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
1/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
세균의 증식여부 판정은 5개의 동일 소독제 희석배수의 영양배지에서 2개 이상 증식이 인정되지 않은 최종소독제 단계를 희석배수로 하였고, 3회 반복시험하여 20%의 오차범위 내의 결과의 중위수(median)를 본 발명의 살균 조성물에 대한 최종 희석배수로 하였다. 따라서, 부르세라에 대한 최종유효 희석배수는 저유기물인 경우 1600, 고유기물인 경우 500임을 알 수 있다.
3.돼지콜레라(Hog cholera virus)에 대한 효력시험 결과
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1:100 |
1:200 |
1:300 |
1:500 |
1:800 |
1:1000 |
1:1200 |
1:1600 |
저유기물 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
고유기물 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
2/8 |
8/8 |
바이러스의 증식여부 판정은 중화액을 PK-15 세포 배양용 배지를 사용하여 원액, 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000, 1/100000로 희석하고(표에서는 편의상 원액에 대한 결과만 표시함) PK-15 단층세포가 형성된 멀티 조직 배양판(96 well tissue culture plate)에 중화된 반응액 50㎕를 접종하고, 접종 후 30분간의 흡착과정을 거친 후 배지를 갈아 주고, 37℃에서 5일동안 배양하며, 매일 현미경으로 CPE 형성 여부를 관찰하여 바이러스의 존재 유무를 최종 판정한다. 또한, 3회 반복시험하여 20%의 오차범위 내의 결과의 중위수(median)를 본 발명의 살균 조성물에 대한 최종 희석배수로 하였다. 따라서, 돼지콜레라에 대한 최종유효 희석배수는 저유기물인 경우 1600, 고유기물인 경우 1200임을 알 수 있다.
4.오제스키(Aujeszky's virus)에 대한 효력시험 결과
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1:100 |
1:200 |
1:300 |
1:500 |
1:800 |
1:1000 |
1:1200 |
1:1600 |
저유기물 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
고유기물 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
0/8 |
바이러스의 증식여부 판정은 중화액을 PK-15 세포 배양용 배지를 사용하여 원액, 1/10, 1/10, 1/1000, 1/10000, 1/100000로 희석하고(표에서는 편의상 원액에 대한 결과만 표시함) PK-15 단층세포가 형성된 멀티 조직 배양판(96 well tissue culture plate)에 중화된 반응액 50㎕를 접종하고, 접종 후 30분간의 흡착과정을 거친 후 배지를 갈아 주고, 37℃에서 5일동안 배양하며, 매일 현미경으로 CPE 형성 여부를 관찰하여 바이러스의 존재 유무를 최종 판정한다. 또한, 3회 반복시험하여 20%의 오차범위 내의 결과의 중위수(median)를 본 발명의 살균 조성물에 대한 최종 희석배수로 하였다. 따라서, 오제스키에 대한 최종유효 희석배수는 저유기물인 경우 1600, 고유기물인 경우 1600임을 알 수 있다.
5.뉴캣슬(Newcastle disease virus)에 대한 효력시험 결과
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1:100 |
1:200 |
1:300 |
1:500 |
1:800 |
1:1000 |
1:1200 |
1:1600 |
저유기물 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
1/5 |
4/5 |
5/5 |
고유기물 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
2/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
바이러스의 증식여부 판정은 PBS를 사용하여 원액, 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000, 1/100000로 희석하고(표에서는 편의상 원액에 대한 결과만 표시함) 희석배수당 5개의 10일란 발육란에 중화된 반응액 0.2㎖를 요막강내로 접종하고, 접종후 37℃에서 5일동안 배양하여 매일 검란을 실시하고, 접종 24시간 이내에 죽은 발육란은 사고사로 간주하고 시험성적에서 제외하였으며 접종후 24시간 후부터 5일 이내에 죽은 접종란은 모두 4℃에서 보관하며, 접종 5일 후까지 살아남은 모든 발육란과 4℃에 보관된 죽은 접종란으로부터 요막강액을 각각 채취하고, 10% 닭적혈구를 사용한 혈구응집반응을 실시하여 바이러스의 존재 유무 및 바이러스 역가를 최종 판정하였다.
또한, 3회 반복시험하여 20%의 오차범위 내의 결과의 중위수(median)를 본 발명의 살균 조성물에 대한 최종 희석배수로 하였다. 따라서, 뉴캣슬에 대한 최종유효 희석배수는 저유기물인 경우 1000, 고유기물인 경우 800임을 알 수 있다.
6.조류독감(Avian influenza virus H9N2)에 대한 효력시험 결과
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1:100 |
1:200 |
1:300 |
1:500 |
1:800 |
1:1000 |
1:1200 |
1:1600 |
저유기물 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
1/5 |
5/5 |
5/5 |
고유기물 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
0/5 |
1/5 |
5/5 |
5/5 |
5/5 |
바이러스의 증식여부 판정은 PBS를 사용하여 원액, 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000, 1/100000로 희석하고(표에서는 편의상 원액에 대한 결과만 표시함) 희석배수당 5개의 10일란 발육란에 중화된 반응액 0.2㎖를 요막강내로 접종하고, 접종후 37℃에서 5일동안 배양하여 매일 검란을 실시하고, 접종 24시간 이내에 죽은 발육란은 사고사로 간주하고 시험성적에서 제외하였으며 접종후 24시간 후부터 5일 이내에 죽은 접종란은 모두 4℃에서 보관하며, 접종 5일 후까지 살아남은 모든 발육란과 4℃에 보관된 죽은 접종란으로부터 요막강액을 각각 채취하고, 10% 닭적혈구를 사용한 혈구응집반응을 실시하여 바이러스의 존재 유무 및 바이러스 역가를 최종 판정하였다.
또한, 3회 반복시험하여 20%의 오차범위 내의 결과의 중위수(median)를 본 발명의 살균 조성물에 대한 최종 희석배수로 하였다. 따라서, 조류독감에 대한 최종유효 희석배수는 저유기물인 경우 1000, 고유기물인 경우 800임을 알 수 있다.
7. 결과요약
본 발명에 따른 살균 조성물의 일 실시예의 세균 및 바이러스에 대한 효력시 험을 실시한 결과를 동일 조건하에 시험실시한 특허발명 제 1992-00863호의 결과와 비교하면 다음과 같다. 하기 표에서는 실제 사용 빈도수가 높은 고유기물 조건에서만 비교한다.
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일반세균 |
부루세라 |
돼지콜레라 |
오제스키 |
뉴캣슬 |
조류독감 |
본 발명 |
100 |
500 |
1200 |
1600 |
800 |
800 |
특허발명 |
100 |
120 |
800 |
300 |
280 |
300 |
표에서 셀 안의 수는 대상 질병별 권장희석배수를 뜻한다.
상기 실험결과의 표에서 나타나듯이 본 발명의 살균 조성물은 특허발명 제 1992-00863호의 살균 조성물에 비해 일반세균을 제외하고는 대상 질병에 따라 그 효과가 1.5배 내지 5배나 차이가 남을 확인할 수 있다.
본 발명에 의해 무기할로겐 화합물 대신 무수구연산을 사용함으로서 유독가스인 염소 가스의 배출을 방지할 수 있고, 월등히 뛰어난 살균력으로 인해 권장희석배수를 크게 향상시킬 수 있는 살균 조성물을 제공할 수 있다.
이상과 같이 본 발명에 따른 살균조성물의 일 실시예를 설명하였으나, 본 명세서에 개시된 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술사상 범위내에서 당업자에 의해 다양한 변형이 이루어질 수 있음은 물론이다.