KR100688137B1 - 안구 신경퇴행성 질환의 치료를 위한 신경성 인자 자극제 - Google Patents

Abstract

망막 및 시신경두 신경병증 치료용 조성물 및 방법이 개시되었다. 그 조성물 및 방법은 특히 녹내장성 신경병증 치료에 있어, AIT-082(네오트로핀)등 과 같은 신경성 인자 자극제의 사용과 관련된다.

신경성 인자 자극제, 뉴트로핀, 망막, 시신경두, 신경병증, 녹내장

Description

안구 신경퇴행성 질환의 치료를 위한 신경성 인자 자극제 {USE OF NEUROTROPHIC FACTOR STIMULATORS FOR THE TREATMENT OF OPHTHALMIC NEURODEGENERATIVE DISEASES}

본 발명은 안구 신경퇴행성 질환의 치료를 위한 신경성 인자(neurotrophic factor) 자극제에 관한 것이다.

원발(原發) 개방각 녹내장(primary open-angle glaucoma: POAG)은 시신경 손상을 유발시키고 최종적으로는 시력을 잃게 하는 진행형 질환이다. 이 질병의 원인은 오랜 세월동안 연구의 주제였음에도 불구하고 아직도 완벽하게 이해되지 못하고 있다. 녹내장은 망막 및 시신경두(optic nerve head)에 신경성 퇴행을 일으키는데, 적극적인 의학적 진료나 외과 치료로도 일반적으로 이 질병으로 인한 망막 뉴론(망막 신경절 세포 (retinal ganglion cells("RGCs"))의 점차적인 감소를 저지시키지 못한다(Van Buskirk et al ., Predicted outcome from hypotensive therapy for glaucomatous optic neuropathy, Am. J. Ophthalmol ., volume 25, pages 636-640 (1993); Schumer et al ., The nerve of glaucoma!, Arch. Ophthalmol., volume 112, pages 37-44 (1994)).

녹내장의 병인을 설명하기 위해 수많은 이론이 제안된 바 있었다. 그 중 한 이론은 과도한 안구 내압(몇몇의 경우에서는 시신경두, RGC 또는 시신경상의 유전적 결함과 관계된)에 의해, 시신경을 따라 이루어지는 정상적인 축삭 돌기 수송(axonal transport) 기능이 파괴되기 때문이라고 제안하고 있다.

시신경의 축삭 돌기 수송상의 혼선은 RGC 세포체와 그 말단간의 세포내 분자의 이동을 방해한다. 중요한 세포내 분자로는 신경성 인자들을 들 수 있다. 신경성 인자는 신경 조직의 성장을 자극, 또는 유지하는 펩타이드 분자로써, 뇌로부터 RGC 세포 체로의 이러한 신경성 인자의 수송은 RGC의 생존에 있어 필수이므로 향정신성 인자의 상실은 뉴론의 사멸(apoptosis)을 유도할 수 있다(Raff et al ., Programmed cell death and the control of cell survival: lessons from the nervous system, Science, volume 262, pages 695-700(1993)).

신경성 인자의 상실은 녹내장 유도성의 RGC 사멸 원인으로 볼 수 있는데, 그러한 관계는 많은 실험적 증거로 뒷받침될 수 있다(Anderson et al ., Effect of intraocular pressure on rapid axoplasmic transport in monkey optic nerve, Invest. Ophthalmol ., volume 13, pages 771-783 (1974); Quigley et al ., The dynamics and location of axonal transport blockade by acute intraocular pressure elevation in primate optic nerve, Invest. Ophthalmol ., volume 15, pages 606-616 (1976); Mansour-Robaey et al ., Effects of ocular injury and administration of brain-derived neurotrophic factor on survival and regrowth of axotomized retinal ganglion cells, Proc. Natl . Acad . Sci . USA, volume 91, pages 1632-1636 (1994); Meyer-Franke et al ., Characterization of the signaling interactions that promote the survival and growth of developing retinal ganglion cells in culture, Neuron, volume 15, pages 805-819 (1995); 및 Cui et al ., NT -4/5 reduces naturally occurring retinal ganglion cell death in neonatal rats, Neuroreport, volume 5, pages 1882-1884 (1994)). 이러한 신경성 인자에는 뉴로트로핀(neurotrophin) 및 그 밖의 몇몇 사이토카인(cytokine)등이 포함된다.

뉴로트로핀("NT")족 펩타이드에는 신경 성장 인자(NGF), 뇌-유래 신경성 인자(BDNF), NT-3, NT-4/5 및 NT-6등이 포함되며, TrkA, TrkB, TrkC 및 p75NTR과 같은 뉴론 표면 수용체와 결합하여 작용한다. Trk 수용체는 타이로신 카이네이즈 이다. TrkA는 NGF에, TrkB는 BDNF 및 NT-4/5에 선택적인데 반해 TrkC는NT-3에 선택적이다. 결합 후 NT-수용체 복합체는 내재화되고 축삭 돌기를 통해 몸체로 수송된다. 이러한 수용체는 리간드-유발 인산화 및 이합체화(dimerization)되어, 일련의 라스(Ras) 단백질-중재된 시그널 변환 과정을 활성화시키고 뉴론의 다양하고 중요한 기능에 영향을 미친다(Lewin et al ., Physiology of the neurotrophins, Ann. Rev. Neurosci ., volume 19, pages 289-317 (1997); Segal et al ., Intracellular signaling pathways activated by neurotrophic factors, Ann. Rev. Neurosci ., volume 19, pages 463-489 (1996); Ebadi et al ., Neurotrophins and their receptors in nerve injury and repair, Neurochem . Int., volume 30, pages 347-374 (1997); Kaplan et al ., Signal transduction by the neurotrophin receptors, Curr. Opin. Cell Biol., volume 9, pages 213-221 (1997)). 따라서, 이 수용체들은 뉴론의 발육에 있어 그 생존 및 분화의 조절에 기본적인 역할을 담당하며 성인기 신경 기관의 유지에 기여한다.

망막에서는, TrkA와 TrkB의 mRNA가 RGC, 도파민성 무축삭 세포 (dopaminergic amacrine cell) 및 시신경("ON")등에서 발견된 바 있다. 그들의 발현은 신경 발달시 엄격히 조절되는 것으로 알려져 있다(Jelsma et al ., Different forms of the neurotrophin receptor trkB mRNA predominate in rat retina and optic nerve, J. Neurobiol ., volume 24, pages 1207-1214 (1993); Rickman et al., Expression of the protooncogene , trk , receptors in the developing rat retina, Vis. Neurosci ., volume 12, pages 215-222 (1995); Ugolini et al ., TrkA, TrkB and p75 mRNAexpression is developmentally regulated in the rat retina, Brain Res., volume 704, pages121-124 (1995); Cellerino et al ., Brain-derived neurotrophic factor/ neurotrophin -4 receptor TrkB is localized on ganglion cells and dopaminergic amacrine cells in the vertebrate retina, J. Comp. Neurol., volume 386, pages 149-160 (1997)). TrkB 수용체- 선택적 리간드인 BDNF 및 NT-4/5는 RGC의 감지에 효율적임이 밝혀져 있다. 수많은 연구에서, 이러한 NT들이 RGC 배양시 축삭 돌기의 생장과 세포의 생존을 개선할 뿐 아니라, ON 및 RGC에 있어 축삭 절단-유발된 생체내 손상을 크게 감소시키고, 또한 RGC를 재생함으로써 축삭 분지의 성장을 자극한다고 밝혀 왔다(상기에 인용된, Anderson et al.; Quigley et al .; Mansour-Robaey et al .; Meyer-Franke et al .; 및 Cui et al). 그 한 예로, 상해 후 5일 이내에, 5㎍의 BDNF를 유리체내에 단 한번 주사함으로써 축삭 절단된 RGC의 사멸을 방지할 수 있었다(상기의 Mansour-Robaey et al.). 비처리된 망막의 경우 축삭 절단된 RGC의 절반 가량이 손실된 데 반해, BDNF 1회 주사된 망막의 경우 실질적으로 0일째에 존재했던 모든 RGC가 1주일후에도 존재하였다. ON 상해후, 래트의 RGC 층에 있어 BDNF의 mRNA 발현은 실질적으로 증가하였고(Gao et al ., Elevated mRNA expression of brain-derived neurotrophic factor in retinal ganglion cell layer after optic nerve injury, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci ., volume 38, pages 1840-1847 (1997)), 이는 망막 회복에 있어 이 NT의 잠재적 중요성을 더욱 보여주는 것이다.

망막 및/또는 ON 상의 기계적 손상에 대한 방어 효과에 더하여, 뉴로트로핀은 다른 형태의 뉴론 손상에 대해서도 방어적일 수 있다. 아직은 확실치 않은 기작에 의해 (하지만 아마도 세포 사멸 과정의 억제에 의해서), BDNF는 CNS 뉴론을 글루타메이트 신경 독성으로부터 보호하며(Lindholm et al ., Brain-derived neurotrophic factor is a survival factor for cultured rat cerebellar granule neurons and protects them against glutamate-induced neurotoxicity, Eur . J. Neurosci., volume 5, pages 1455-1464 (1993)); 래트 망막(Unoki et al ., Protection of the rat retina from ischemic injury by brain-derived neurotrophic factor, ciliary neurotrophic factor, and basic fibroblast growth factor, Invest. Ophthalmol . Vis. Sci ., volume 35, pages 907-915 (1994)), 및 해마상 융기(Beck et al ., Brain-derived neurotrophic factor protects against ischemic cell damage in the rat hippocampus, J. cereb . Blood Flow Metab ., volume 14,pages 689-692 (1994))상의 국소-빈혈성 세포 사멸 예방에 있어 생체내에서 효과적이었다.

섬모체 신경성 인자(ciliary neurotrophic factor:CNTF)는 뉴론의 생존을 뒷받침하는 또 다른 신경성 인자이다. 그것은 뉴트로핀과 구조적으로 관련이 없는 사이토카인 군의 일원이다. CNTF 및 그 수용체는 망막 신경 생성및 분화시에 뮐러 글리아(Muller glia)에 의해 발현된다(Kirsch et al ., Evidence for multiple, local functions of ciliary neurotrophic factor( CNTF ) in retinal development: expression of CNTF and its receptors and in vitro effects on target cells, J. Neurochem ., volume 68, pages 979-990 (1997)). 또한, 이 인자는 RGC의 상해-유발형 사멸을 예방하기 때문에, 녹내장성 신경병증 예방에도 유용할 수 있으며 (Mey et al ., Intravitreal injections of neurotrophic factors support the survival of axotomized retinal ganglion cells in adult rats in vivo, Brain Res., volume 602, pages 304-317 (1993)), BDNF에 비해 덜 효과적이긴 해도 ON 축삭 돌기 퇴화를 예방한다 (Weibel et al ., Brain-derived neurotrophic factor( BDNF ) prevents lesion-induced axonal die-back in young rat optic nerve, Brain Res., volume 679, pages 249-254 (1995)).

따라서, 신경성 인자는 녹내장성 망막병증의 증상 및 일반적인 망막 퇴화에 치료 역할을 한다. 그러나 이러한 인자들은 펩타이드 분자로, 일반적으로 투여시의 생체 이용성에 문제가 존재하므로 약학적 개발에 어려움이 있다. 따라서 천연 펩타이드에 갖는 생체 이용성 문제를 피해갈 수 있도록, 비-펩타이드 분자로 기능 저하된 망막 조직내의 향정신성 활성을 자극하여야 할 필요가 있다.

많은 향정신성 인자 자극제가 과학 문헌에 보고된 바 있는데 그 예로, AIT-082 (Graul & Castaner, AIT -082, Drugs of the Future, volume 22, pages 945-947 (1997)), 이데베논 (Nabeshima et al ., Oral administration of NGF synthesis stimulators recovers reduced brain NGF content in aged rats and cognitive dysfunction in basal- forebrain - lesioned rats, Gerontology, volume 40, supplement 2, pages 46-56 (1994)), ONO-2506 (Matsui et al ., Protective effects of ONO -2506 on neurological deficits and brain infarct volume following 1 week of permanent occlusion of middle cerebral artery in rats, Society for Neurosci . Abstracts, volume 24, pages 254 (1998)), NS521 (Gronborg et al ., Neuroprotection by a novel compound, NS 521, Society for Neurosci. Abstracts, volume 24, page 1551 (1998)), CB-1093 (Aimone et al ., The 1α,25(OH) ₂ D ₃ analog CB -1093 induces nerve growth factor in non-human primate brain, Society for Neurosci . Abstracts, volume 24, page 292, (1998)) 및 클렌부테롤 (Culmsee et al ., NGF antisense oligonucleotide blocks protective effects of clenbuterol against glutamate -induced excitotoxicity in vitro and focal cerebral ischemia in vivo, Society for Neurosci . Abstracts, volume 24, page 295 (1998))등이 있다. 그러나 본 명세서에서는, 녹내장 또는 그밖의 안구 신경병증의 치료에 신경성 인자 자극제를 사용함을 개시 또는 제시한다

발명의 개요
본 발명은 녹내장성 신경증 및 망막 퇴행성 질병 치료용 조성물 및 방법에 관한 것이다. 상기의 조성물과 방법은, 기능 저하 또는 위험한 상태의 망막 또는 시신경두 조직 치료용으로 신경성 인자 자극제를 포함한다.

향 신경성 인자 자극제는 망막의 신경성 인자의 활성 및 생산을 자극하는 물질이며 이러한 향정신성 인자의 안구내 자극은 녹내장성 신경병증 그리고 그 밖의 망막 및 시신경두 퇴행성 질병의 상태를 호전시킨다.

선호되는 조성물 및 방법은 신경성 인자 자극제, AIT-082(네오트로핀) 및 이데베논과 관련된다.
발명의 상세한 설명

본 발명은 녹내장성 신경병증 및 그 밖의 망막 또는 시신경두 퇴행성 질환의 치료용 조성물 및 방법에 관한 것이다. 상기 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체내에 존재하는 하나 이상의 신경성 자극제를 포함한다.

본 명세서에서 사용된 "신경성 인자 자극제"는 망막에서 신경성 인자의 계 내(in situ) 생산 또는 활성을 증가시키는 화합물을 나타낸다. 여기에서 사용된 "신경성 인자"는 NGF, BDNF, NT-3, NT-4/5, NT-6, CNTF 또는 그 밖의 망막 신경병증을 치료 또는 호전시키는 인자를 나타낸다. 신경성 인자 자극제의 예로는 AIT-082 (네오트로핀), 이데베논, ONO-2506, CB-1093, NS521 ((1-(1-부틸)-4-(2-옥쏘-1-벤지미다졸론)피페리딘) SS-701, KT-711 및 클렌부테롤 등을 포함한다. 본 발명의 가장 선호되는 신경성 인자 자극제는 AIT-082 (네오트로핀)이다. 상기의 분자들은 상업적으로 구득 가능한 것들이거나, 당업자에게 공지된 방법에 의해 합성될 수 있는 것들이다.

(실시예 1)

하기의 실시예에는 망막 세포 상해에 대한 신경성 인자 자극제(프로펜토필린: propentofylline)의 방어 효율을 예시한다.

망막 신경절 세포 생존 분석(Retinal Ganglion Cell Survival Assay)

RGC의 분리 및 배양에 관한 기술은 Takahashi 등에 의해 보고된 바를 따랐다(Takahashi N. et al ., Rat retinal ganglion cells in culture, Exp . Eye Res. volume 53, pages 565-572 (1991)). 이 방법은 형광성 염료, Di-I를 상부 소구(superior colliculi)에 주입하여 신경절 세포를 퇴행성 라벨링하는 것을 포함한다. 2 내지 4일 후 망막 세포는 분리되었고, 배양된 RGC 는 형광 현미경을 사용하여 Di-I 형광성을 시각적으로 관찰함으로써 동정되었다.

2 내지 5일령의 신생아인 Sprague-Dawley 랫트를 체온 저하법으로 마취시킨 후, 두피내에 횡단 만곡부(the traverse sinus)까지에 2mm의 중선 개구부를 만들었다. 주사 바늘(30 게이지)의 끝을 두개골 최상부로부터 6mm 아래에 삽입하였고, 3mg/ml Di-I (1,1'-디옥타데실-3,3,3',3'-테트라메틸인도-카르보시아닌 퍼클로레이트) (Molecular Probes 사, 유진, 오레곤주)를 90% 에탄올 및 10% 디메틸설폭사이드에 녹인 Di-I 용액 5㎕를 주사하였다. 그런 다음 상처에 Flexible Collodion (Amend Drug & Chemical 사, 어빙톤, 뉴저지주) 한방울을 도포한 뒤, 마취가 풀리고 몸이 덥혀진 랫트는 그 어미에게로 돌려보냈다.

삭제

Di-I 주사 2 내지 4일 후 랫트는 체온 저하법으로 마취시켜 단두술로 희생시킨 후, 그 안구를 적출하여 Dulbecco's Modified Eagle's 배지: 영양분 혼합물F12(1:1; DMEM/F12, Gibco 사, 그랜드 아일랜드, 뉴욕주) 용액 내에 보관하였다. 각 안구로부터의 망막은 떼어서 분리되었고, 12개의 망막을 5ml의 DMEM/F12 용액내에 10 mg 파파인(34units/ml; 시그마 케미칼 사, 세인트 루이스, 미주리주), 2 mg DL-시스테인(3.3mM; 시그마 케미칼 사, 세인트 루이스, 미주리주) 및 2mg의 소 혈청 알부민 (0.4mg/ml; 시그마 케미칼 사, 세인트 루이스, 미주리주)을 포함한 5ml의 파파인 용액 내에서 37℃에서 25분간 반응시킴으로써 망막 세포를 분리하였다. 그 후 세포는 DMEM 배지(Gibco 사, 그랜드 아일랜드, 뉴욕주)에 10% 소 태아 혈청(Hyclone 사, 로간, 유타주), 4 mM 글루타민(Gibco 사, 그랜드 아일랜드, 뉴욕주), 100 units/ml 페니실린 및 100㎍/ml 스트렙토마이신(시그마 케미칼 사, 세인트 루이스, 미주리주)이 첨가된, 5ml의 RGC 배지로 3회 세척하였다. 망막 조각에 부가의 RGC 배지를 첨가하여 최종 총 분량을 40ml로 맞춘 뒤, 상기 용액을 1회용 피펫으로 여러 번 통과시킴으로써 분쇄시켜 분산된 세포를 얻었다. 세포 현탁액(1.5ml; 약 4.5×10⁶ 개의 세포가 포함된)은 폴리-D-라이신이 코팅된 유리 바닥의 배양 디쉬에 담아 37℃, 95% 공기/ 5% CO₂의 상태에서 세포를 배양하였다.

여러 치료제로 처리 또는 비처리된 세포를 분리하고 3일 후 배양액으로부터 소태아 혈청을 제거하였다. 3일 후, 세포는 형광 현미경으로 200배 확대하여 관찰되었으며, 20개의 현미경 장(microscopic field)에서 Di-I 라벨된 형광 세포를 개수하고 그 평균값을 계산하였다. 그 결과는 아래의 표1에 나타낸다.:

표1: RGC 생존에 대한 신경성 인자 자극제의 영향

혈청 함유 배양	약 제	RGC 생존율(%)
예	없음	100.0 ±4.9*
아니오	없음	46.4 ±5.6
아니오	BDNF (5μM) + 폴스콜린(10ng/ml)	79.9 ±5.4*
아니오	프로펜토필린(100μM)	96.9 ±4.8*

노트: 혈청 존재하의 RGC 생존율을 100%로 정의한다. 모든 값은 평균 및 SEM (n=6)으로 표현되었다. *는 일방 ANOVA 및 Dunnett's test에 의해 결정된, 무-혈청, 무 약품 처리 그룹 대비 p<0.05를 나타낸다.

표1 은 소 태아 혈청 존재시(그리고 내재적인 신경성 인자들이 혈청 내에 포함되어 있을때)에 RGC의 생존율이 더 높음을 보여준다. 폴스콜린 존재시에 신경성 인자 BDNF는 그러한 상해에 대하여 저항적이었다(즉, 소 태아 혈청의 제거). 유사하게, 배양된 성상세포(astrocyte)내에서(Shinoda et al ., Stimulation of nerve growth factor synthesis/secretion by propentofylline in cultured mouse astroglial cells, Biochem . Pharmacol ., volume 39, pages 1813-1816 (1990)), 및 고령의 랫트 뇌의 생체내에서(Nabeshima et al ., Impairment of learning and memory and the accessory symptom in aged rat as senile dementia model: oral administration of propentofylline produces recovery of reduced NGF content in the brain of aged rats, Jpn . J. Psychol. Pharmacol ., volume 13, pages 89-95 (1993)), 신경 성장 인자의 생산을 자극하는 것으로 알려져 있는 프로펜토필린도 혈청 고갈로 인한 세포 사멸로부터 세포를 보호하였다. 이러한 데이터로부터 신경성 인자 생산 및 그 활성 증진을 자극하는 화합물이, 신경성 인자의 고갈로 인한 상해로부터 망막 세포, 특히 RGC를 보호할 수 있음을 알 수 있다.

본 발명의 방법은 망막 또는 시신경두 신경병증의 치료를 위하여, 환자에게 하나 이상의 신경성 인자를 투여함을 포함한다.

본 발명의 방법은 녹내장 및 그 밖의 질병 및 외부 망막의 이상, 특히 연령 관련 황반 변성, 망막 국소 빈혈, 외상 관련 급성 망막 병증, 외과 수술후 합병증, 광선 역학 요법을 포함한 레이저 요법관련 손상(PDT), 및 수술 광선 유발 의인성 신경병증등의 치료에 신경성 인자 자극제의 사용과 특히 관련된다. 여기에 사용된 "망막 또는 시신경두 신경병증"은 전술한 질병, 또는 그 밖의 망막 또는 시신경두 신경 퇴행성 질병중 어느 하나를 의미한다.

본 발명의 신경성 인자 자극제는 당업자에게 알려져 있는 제형 기술에 의거한 다양한 형태의 약학적 조성물에 담겨질 수 있다. 일반적으로, 신경성 인자 자극제는 국소 안과 투여 또는 안구내 투여를 위한 용액 또는 현탁액으로 제형되거나, 전신성 투여(예, 경구 또는 정맥내 투여)를 위한 정제, 캡슐 또는 용액으로 제제화 수 있다.

뉴로트로핀 자극제의 경구형 제형은 그 투여의 용이성 때문에 선호되는데, 경구형 제형은 액상 또는 고체상 형태일 수 있다. 일반적으로, 경구형 제형은 활성을 지닌 신경성 인자 자극제 및 불활성 부형제를 포함할 것이다. 일반적으로, 고형 정제 또는 캡슐 제형은 충전제(bulking agents), 결합제, 시간차 방출 코팅, 또는 당업자에게 알려진 그 밖의 다른 제제와 같은 다양한 부형제를 함유할 것이다. 액상 제형은 담체, 완충제, 삼투조절 제제(tonicity agents), 용해제, 또는 당업자에게 알려진 그 밖의 제제를 함유할 것이다.

본 발명의 조성물은 망막 및 시신경두 조직 또는 외과수술의 이전 또는 당시에 국소 빈혈성 손상 또는 상해를 예방하기 위하여, 외상치료의 및/또는 다른 급성 국소 빈혈성 의 경우에 이어 안구 내로 투여될 수 있다. 안구내 투여에 유용한 조성물은 일반적으로 안구내 주사용 조성물 또는 외과 세정용 용액일 것이다. 안구내 주사용 조성물은 일반적으로 아래에 기술된 밸런스된 염 세정 용액 등의 액상 용액으로 구성된다.

신경성 인자 자극제를 안구 후방 도는 주변부 주사 및 안구내 살포 또는 주사 등의 방법으로 안구내 수술 과정중 투여하였을 경우, 담체로 밸런스된 염 세정 용액을 사용하는 것이 가장 선호된다. BSS^? 멸균 세정 용액 및 BSS plus^? 멸균 세정 용액 (AlconLaboratories 사, 포트워쓰, 텍사스주)는 생리적으로 밸런스된 안구내 세정 용액의 예이다. 후자의 용액은 미국 특허 제 4,550,022호(Garabedian et al.)에 기술되어 있고, 그 전체 내용은 본 발명에 참고로 인용된다. 안구 후방부 및 안구 주변부 주사는 당업자에게 알려져 있으며 많은 간행물에 개시되어 있다(그 한 예로, Ophthalmic Surgery: Principles of Practice, Ed., G.L. Spaeth, W.B.Sanders Co., Philadelphia, PA, U.S.A., pages 85-87 (1990)).

일반적으로, 상기의 목적에 사용되는 투약 량은 다양할 수 있으나, 망막 또는 시신경두 신경병증을 예방, 감소 또는 개선하기에 효과적인 양의 범주에 있다. 여기에서 사용된, "약학적으로 효과적인 양"이란 망막 또는 시신경두 신경병증의 예방, 감소 또는 개선을 하는 신경성 인자 자극제의 양을 말한다. 신경성 인자 자극제는 일반적으로 본 발명에서 약 0.001 내지 약 10.0 중량/부피%("%W/V")로 예기된 양의 범위에서 국소형 또는 안구 내부형 제형 내에 함유된다. 선호되는 농도는 약 0.1 내지 약 5.0% (W/V)의 범위 안에 있다. 국소형 제형은 일반적으로 숙련된 임상 의사의 재량에 따라 1일 1회 내지 6회 눈에 투여된다. 전신성 투여용 조성물은 일반적으로 10 내지 1000mg의 신경성 인자 자극제를 포함하며 숙련된 임상 의사의 재량에 따라 1일 1회 내지 4회 투여될 수 있다.

본 발명에 사용된 용어 "약학적으로 허용 가능한 담체"는 원하는 투여 경로를 통해 적어도 하나의 신경성 인자 자극제 유효량을 적절히 전달할 수 있고, 안전한 모든 제형을 말한다.

본 발명의 조성물은 부가의 약학적 활성 제제를 포함할 수 있으며, 그 밖의 다른 약학적 조성물과 함께 투약될 수 있다. 특히, 녹내장성 망막 병증의 예방, 치료 또는 개선용으로 포유 동물의 치료시, 본 발명의 조성물은 부가의 " 항-녹내장" 제제를 포함 할 수 있으며, 또는 항-녹내장 제제 조성물과 동시 또는 순차적으로 투약될 수 있다. 항-녹내장 제제의 예로는 다음과 같은 것들을 포함한다: 프로스타글란딘(prostaglandins) 또는 프로스타노이드(prostanoids), 탄산탈수효소저해물질(carbonic anhydrase inhibitors), 베타 아드레날린성 작용제(adrenergic agonist) 및 베타 아드레날린성 길항제(adrenergic antagonist), 알파-아드레날린성 작용제, 또는 그 밖의 당 업자에게 알려진 항-녹내장 제제.

(실시예 2)

녹내장성 신경병증의 치료에 유용한 국소형 조성물:

성 분	% (W/V)
AIT-082(네오트로핀)	0.1-2.0
타이록싸폴(Tyloxapol)	0.01-0.05
HPMC	0.5
염화 벤잘코늄 (Benzalkonium Chloride)	0.01
염화나트륨	0.8
에데테이트 다이소듐 (Edetate Disodium)	0.01
NaOH/HCl	pH 7.4로 적정
정제수	적 량

(실시예 3)

녹내장성 신경병증의 치료에 유용한 선호되는 국소형 조성물

성 분	% (W/V)
AIT-082(네오트로핀)	0.5-1.0
타이록싸폴(Tyloxapol)	0.01-0.05
HPMC	0.5
염화 벤잘코늄 (Benzalkonium Chloride)	0.01
염화나트륨	0.8
에데테이트 다이소듐 (Edetate Disodium)	0.01
NaOH/HCl	pH 7.4로 적정
정제수	적 량

상기의 제형을 조성하기 위하여 우선 일정량의 정제수를 비이커에 넣고 90℃로 가열하였다. 그런 다음 가열된 물에 하이드록시프로필메틸셀룰로스(HPMC)를 가하고 모든 HPMC가 분산될 때까지 강력하게 볼텍스 혼합법으로 섞어 주었다. 얻어진 혼합물은 HPMC를 수화시키기 위하여 혼합 진행 중에서 냉각시켜 주었다. 얻어진 용액은 액체 삽입구와 소수성의, 멸균된 공기구 필터가 장착된 용기내에서 압열 멸균함으로써 살균하였다.

그 후, 염화 나트륨과 에데테이트 다이소듐을 또 다른 일정량의 정제수에 첨가하여 녹였다. 그런 다음, 염화 벤잘코늄을 용액에 첨가하고, 0.1M NaOH/HCl을 사용하여 그 용액의 pH를 7.4로 적정하였다. 상기 용액은 필터를 통과시킴으로써 멸균하였다.

AIT-082는 건조열 또는 산화 에틸렌(ethylene oxide)으로 멸균하였다. 산화 에틸렌 사용시에는 50℃에서 적어도 72시간 동안의 공기 주입이 필요하다. 멸균된 화합물은 무균적으로 무게를 측정하고 압력이 가해진 볼밀(ballmill) 용기에 정치하고, 여기에 멸균된 액상 용액 형태의 타이록싸폴을 첨가하였다. 멸균된 유리 볼(ball)을 용기에 넣고 225rpm에서 16시간동안 용기내 내용물을 무균적으로 갈아 모든 입자의 크기가 약 5 마이크론의 범위에 있도록 하였다.

무균 상태 하에서, 상기의 단계에서 형성된 마이크론 크기의 제약품 현탁액은 HPMC 용액에 부어주면서 혼합하였다. 여기에서 볼밀 용기와 볼을 염화나트륨, 에데테이트 다이소듐 및 염화 벤잘코늄이 함유된 일정량의 용액으로 세척하고, 세척액은 HPMC 용액에 무균적으로 첨가하였다. 용액의 최종 부피는 정제수로 조절하였고, 용액내 pH는 NaOH/HCl을 사용하여 7.4로 조절하였다.

(실시예 4)

경구형 투여를 위한 제형:

정제:

정제 제형 분야의 당업자에게 알려진 방법에 따라, 스타치, 락토오스 및 마그네슘 스테아레이트와 같은 비활성 성분과 함께 1 내지 1000mg의 신경성 인자 자극제를 첨가하여 제형될 수 있다.

(실시예 5)

국소형 안약 용액을 위해 선호되는 제형:

성 분	% (W/V)
AIT-082(네오트로핀)	0.5-1.0
염화 벤잘코늄 (Benzalkonium Chloride)	0.01
HPMC	0.5
염화나트륨	0.8
인산나트륨	0.28
에데테이트 다이소듐 (Edetate Disodium)	0.01
NaOH/HCl	pH 7.2로 적정
정제수	적 량

(실시예 6)

경구형 투여를 위한 선호되는 제형:

정제:

정제 제형 분야의 당업자에게 알려진 방법에 따라, 스타치, 락토오스 및 마그네슘 스테아레이트와 같은 비활성 성분과 함께 50 내지 500 mg의 AIT-082(네오트로핀)를 첨가하여 제형될 수 있다.

보다 넓은 양태에서의 본 발명은 상기에 명시된 특정 분야에 제한되지 않는다. 본 발명의 원리로부터 분리되거나 그 장점을 훼손시키지 않는 범위에서 하기 청구항의 범위 내에서 변형이 가능하다.

본 발명은 망막 또는 시신경두 신경병증을 포함하는 안구 신경퇴행성 질환의 치료제로써 신경성 인자 자극제의 이용 가능성을 제시하고 있다. 본 발명에서 제시된, 하나 이상의 신경성 인자 자극제 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 조성물로 구성되는 경구용, 국소 안구용, 또는 안내(intraocular)용 제형은 그 의학적 이용 가능성이 매우 크다.

Claims (14)

1. 프로펜토필린의 유효량 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는,

   망막 또는 시신경두 신경병증(optic nerve head neuropathy) 치료용 조성물.
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4. 제1항에 있어서, 그 조성물이 경구용 제제인,

   망막 또는 시신경두 신경병증 치료용 조성물.
5. 제1항에 있어서, 그 조성물이 국소 안구용, 또는 안내(intraocular)용 제제인,

   망막 또는 시신경두 신경병증 치료용 조성물.
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