KR100676010B1 - 간경변 모델동물 및 그 제작방법 - Google Patents
간경변 모델동물 및 그 제작방법 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 간경변을 발증(發症)한 인간의 간장조직을 가지는 간경변모델동물을 제공한다. 면역결손동물인 스키드 마우스에 항아시아로GM1항체를 투여하여, 내츄럴 킬러세포에 의존하는 면역응답능을 결손시킨 후, 간경변환자유래의 간장조직을 스키드 마우스의 신장피하에 이식함으로써 간경변모델동물을 제작한다. 이 간경변모델동물은 간경변을 발증한 인간의 간장조직을 가지므로, 간경변 치료방법 및 치료약제의 개발에 유효하게 이용할 수 있다.
Description
본 발명은 간경변용의 모델동물 및 그 제작방법에 관한 것으로서, 특히 간경변의 증세를 나타내는 인간간장조직을 보유하는 간경변모델동물 및 그 제작방법에 관한 것이다.
간경변은 지속되는 간세포의 괴사에 의해, 간장에 섬유의 증생과 잔존간세포의 결절상재생을 초래하는 간장에 만연하는 미만성질환이다. 그 원인으로는 감염(간염바이러스, 기생충), 알코올, 담즙울대, 간울혈, 영양장애, 중독, 대사이상, 자기면역 등이 있으며, 이것들을 기인으로 하여 만성간염에서 간경변에 이르는 예가 많다.
간경변은 불가역한 간변성질환으로 각종 간기능장애를 일으킨다. 그리고 간경변은 간장암으로 발전하는 예도 많으며, 사망에 이를 가능성도 있으므로 효과적인 치료방법이 기대되고 있다. 그러나 현 시점에서는 국민병으로도 불릴 정도로 환자수가 많음에도 불구하고, 간재생인자HGF(‘간세포성장인자’라고도 한다)를 유전자치료로 투여하면 개선되는 경우가 실험적으로 제시되어 있을 뿐으로, 확실한 치료법은 존재하지 않는다.
한편, 인간질환의 발증(發症)기구를 해명하고, 그 치료방법 및 치료약제를 개발하는 데 있어서, 그 인간질환과 유사한 병태를 나타내는 모델동물을 이용한 동물실험이 중요한 역할을 한다. 간경변에 대해서도 상기 모델 동물을 사용한 간경변의 발증기구 해명, 나아가 그 치료방법 및 치료약제의 개발이 진행되고 있다.
현재 사용되고 있는 간경변용 모델동물은, 마우스, 랫 등에 4염화탄소를 경구투여하여 간조직을 파괴한 것이다. 이 모델동물은 간재생의 경과관찰에는 적당하나, 실제의 간경변조직을 가지는 것은 아니므로, 치료방법 및 치료약제의 개발을 행하는 데 있어 하나의 장애가 되고 있다.
본 발명은 상기의 과제에 착안하여 이루어진 것으로서, 그 목적은 실제의 간경변을 발증한 간장조직을 가지는 간경변모델동물 및 그 제작방법을 제공하는 데 있다.
본 발명자 등은 상기의 과제에 착안하여, 간경변조직을 가지는 모델동물 및 그 제작방법에 대해 검토를 거듭하였다. 그 결과 면역결손 마우스(스키드 마우스:scid mouse)를 미리 항아시아로GM1항체 투여처리함으로써, 내츄럴 킬러세포 의존성 거절반응을 효율적으로 억제하는데 성공했다. 그리고 간경변환자유래의 인간간장조직을 상기 면역결손 마우스의 신장피막하에 이식하여 장기간 유지가능한 사실을 발견, 본 발명을 완성시키는데 이르렀다.
본 발명의 간경변모델동물은 간경변을 발증한 인간의 간장조직이 동물의 조직에 이식되어 있는 것을 특징으로 하고 있다.
이에 의해 동물에 간경변을 발증한 간장조직이 생착된다. 여기에서 ‘간장조직이 생착한다’는 것은, 이식된 간장조직이 괴사하지 않고, 체내에서 기능하며 또한 간장조직이 이식된 간경변모델동물이 생존하는 것을 의미한다.
이리 하여 얻어지는 간경변모델동물은, 지금까지 제작된 적이 없는 신규모델동물이다. 따라서 본 발명에 관련된 간경변모델동물은, 종래의 간장조직이 파괴되는 것과는 달리 실제로 간경변을 발증한 인간의 간장조직을 가지는 것이므로, 간경변의 병태해석과 그 치료약의 개발 및 치료법 개선에 바람직하게 이용될 수 있다. 그리고 간경변에서 간장암으로의 진전을 막을 수 있으며, 이들 질환의 예방을 위해 중요한 역할을 할 것이다.
상기 간장조직이 이식되는 동물조직은 특별히 한정되는 것은 아니나, 허혈에 의해 간장조직이 괴사하지 않도록 혈류가 많은 조직인 것이 바람직하다. 이와 같은 조직으로서는, 예컨대, 신장, 간장, 비장, 근육 등을 들 수 있다. 이 중 상기 간장조직은 상기 동물의 신장, 보다 상세하게는 신장피막하에 이식하는 것이 특히 바람직하다. 이와 같이 신장에 이식하면 비교적 단기간(1주일 정도)에 생착을 얻을 수 있다. 또한, 이식원인 신장과 이식되는 조직과의 식별이 용이하다. 게다가 동일개체의 신장의 좌우 또는 상부, 중부, 하부 등에 나누어 이식하는 것이 가능하다. 따라서 동일 조건에서의 약제 효과가 비교 가능한 등의 이점이 있다.
본 발명에 있어서, 상기 동물은 면역결손동물인 것이 바람직하다.
여기에서 ‘면역결손’이란, 면역계를 구성하는 세포요소의 일부 혹은 몇 개의 결손 또는 기능부전에 의해 정상면역기구에 장애를 일으킨 면역부전 상태에 있 음을 의미한다. 바꾸어 말하면, 이식되는 간장조직이 동물에 생착하도록 선천성면역 및/또는 후천성면역이 억제되고 있음을 의미한다. 또한 상기 면역결손동물은 면역부전동물로 바꾸어 말할 수도 있다.
즉, 상기 면역결손동물은 면역담당세포나 면역응답에 관여하는 인자의 일부 또는 전부를 결손하고 있는 것이 바람직하다.
구체적으로 상기면역결손동물은 T세포 및/또는 B세포에 의존하는 면역응답능을 결손하고 있는 것이 바람직하며, 나아가 내츄럴 킬러세포(NK세포)에 의존하는 면역응답능을 결손하고 있는 (혹은, 면역응답능이 억제되고 있는)것이 보다 바람직하다. 면역담당세포나 면역응답에 관여하는 인자의 많은 수를 결손하고 있으면, 당해세포나 인자에 의존하는 면역응답을 억제하여 간장조직 이식 시의 거절반응을 줄일 수 있을 것으로 생각된다.
따라서 상기면역결손동물로는 예컨대 흉선을 가지지 않아 T세포에 의존하는 면역응답능을 결손하고 있는 누드동물, 누드동물에 있어서의 면역응답능의 결손에 더해 B세포에 의존하는 면역응답능을 결손하고 있는 스키드동물, 스키드 동물에 있어서의 면역응답능의 결손에 더해 NK세포에 의존하는 면역응답능을 결손하고 있는 동물을 들 수 있다.
상기 면역결손동물의 하나인 T세포, B세포 및 NK세포에 의존하는 면역응답능을 결손한 마우스는, 일반적으로 사용되는 스키드마우스에 항아시아로GM1항체를 투여하여 제작이 가능하다. 아시아로GM1은 마우스의 NK세포에 특이적으로 표현되는 단백질이다. 따라서 아시아로GM1항체를 스키드마우스에 투여하면, T세포 및 B세포 에 의존하는 면역응답능의 결손에 더해 NK세포에 의존하는 면역응답능을 결손시킬 수 있다.
본 발명에 있어서 상기 동물은 특별히 한정되는 것은 아니나, 마우스, 랫, 모르모트, 햄스터, 토끼, 개 등을 들 수 있다. 이것들 중 실험동물로 이용하기에는 마우스, 랫, 토끼가 보다 바람직하며, 비교적 단기간(1주일 정도)에 생착이 얻어지고 저가에 입수 가능한 점에서 마우스가 특히 바람직하다.
또한 본 발명의 간경변모델동물에 있어서 상기 간경변을 발증한 인간의 간장조직은, 간경변의 중증도분류인 차일드 분류에서 차일드A로 분류되는 것이 바람직하다.
즉 상기 간경변모델동물을 얻기 위해서 이식되는 인간의 간장조직은, 간경변의 발증정도가 경도인 것이 바람직하며, 차일드C로 분류되는 중도의 간경변조직은 이식이 곤란하다. 상기 차일드분류에 있어서, 차일드A로 분류될 정도의 경도의 간경변조직이라면, 간경변모델동물에 있어서의 간장조직의 생착률을 높일 수 있다.
이상과 같은 본 발명에 관한 간경변모델동물은, 동물의 면역응답능을 결손시킨 면역결손동물의 조직, 바람직하게는 신피막하에, 간경변을 발증한 간장조직을 이식하여 상기 간장조직을 생착시키는 것에 의해 제작할 수 있다.
이에 의해 상기 모델동물의 체내에 간경변조직을 고확률로 생착시켜, 장기간에 걸쳐 유지할 수가 있다. 따라서 간경변의 치료법 및 치료약의 개발에 유용한 간경변모델동물을 용이하게 제작할 수 있다.
이하, 본 발명의 실시의 일 형태에 대해 설명한다.
(1) 본 발명의 간경변모델동물 및 그 제작방법
본 발명에 관련된 간경변모델동물은 간경변을 일으킨 인간의 간장조직이 동물의 체내에 이식되어 상기 간장조직을 체내에 생착시킨 것이다. 즉, 상기 간경변모델동물이란, 간경변을 발증한 환자로부터 적출한 인간간장조직을, 타동물에 이식하여 동물의 체내에서 상기 인간간장조직을 생착시켜서 만들어지는 것이다.
시료가 되는 상기 ‘인간의 간장조직’은, 일반적인 병원에서도 간세포암에 대한 치료로서 간절제수술을 행하고 있으며 환자수도 많아 쉽게 얻을 수 있다. 상기 ‘인간의 간장조직’으로는 간경변의 발증 정도가 경도인 것이 바람직하다. 간경변의 중증도분류인 차일드분류에 의거하면, 상기 ‘인간의 간장조직’은 차일드A의 간경변조직인 것이 바람직하다. 또한, 차일드C로 분류되는 중도의 간경변조직에 대해서는, 이식하는 것은 곤란하다고 생각된다. 또한, 이식되는 간장조직은 간경변미발증자유래의 정상적인 간장조직이어도 되며, 이 경우 후술하는 동물조직에 정상인 간장조직을 이식하여 모델동물로 만든 후, 당해모델동물에 이식된 정상인 간장조직에 간경변을 발증시키면 된다.
또한, 상기 ‘인간의 간장조직’은 간경변을 발증하고 있는 간장조직을 적출한 조직편을 이식해도 되며, 당해조직편의 동일개체 또는 타 생물에서 생체내 배양(culture in vivo)하여 계대한 것이라도 되고, 시험관내 배양(culture in vitro)한 것이라도 된다.
또한, 상기 ‘인간의 간장조직’은 간경변환자로부터 적출된 후, 냉각된 배양액(예를 들어 세포배양액, 생리식염수 등)안에 보존되는 것이 바람직하다. 또한, 이식되는 간조직은 이식처인 개체의 크기에 따라 다르나, 예컨대 마우스 및 랫에 이식을 행하는 경우는, 2mm정도의 적당한 크기로 절제하는 것이 바람직하다.
시료가 이식되는 상기 동물의 조직은 상기 시료가 생착 가능하면, 특별히 한정되는 것은 아니나, 이식한 간장조직이 허혈에 의해 괴사하지 않도록 혈류가 많은 조직인 것이 바람직하다. 이와 같은 조직으로는 예컨대 신장, 간장, 비장, 근육 등을 들 수 있다. 이것들 중 상기 간장조직은 상기 동물의 신장, 보다 상세하게는 신장피막하에 이식하는 것이 특히 바람직하다. 이‘신장피막하에 이식한다’는 것은 이식처의 신장의 피막이 절개되고, 그 절개부에 간장조직이 삽입되는 것을 의미한다.
또한, 상기 동물의 조직은 예컨대 안구결막과 같이 상기 시료와 거절반응이 일어나기 어려운 조직이라도 된다.
이와 같이 시료를 거절반응이 일어나기 어려운 동물조직에 이식하는 기법 외에도, 상기 동물의 면역응답기능을 결손시킨 면역결손동물을 이용하는 기법에 의해서도 시료와 동물조직과의 거절반응을 억제할 수 있다.
상기 면역결손동물은 예컨대, 면역담당세포의 이상, 면역응답유전자 등의 유전자이상, 면역억제제 등의 약제투여 또는 X선 조사 등의 물리화학적 인자 등에 의해 면역부전상태에 있는 동물을 의미한다. 이와 같은 면역결손동물은 돌연변이 또는 인위적인 제작에 의해 얻을 수 있다.
인위적으로 면역억제동물을 제작하는 방법으로는, 특별히 한정되는 것은 아니나 유전자공학적 기법 또는 약제의 투여 등에 의해 면역담당세포나 면역응답에 관여하는 인자(구체적으로는, B세포, T세포, NK세포, 마크로파지 등의 대식세포, 보체 등)중, 하나 이상의 세포 혹은 인자의 일부 또는 전부에 이상을 발생시킴으로써 제작 가능하다. 이상을 발생시킨 면역담당세포 또는 면역응답인자가 많으면, 그것들에 의존하는 면역응답능을 결손시킬 수 있어 간장조직을 동물에 이식할 때의 거절반응을 한층 줄일 수 있다. 따라서, 인간유래의 간장조직이라도 상기 면역결손동물에 고효율로 생착시킬 수 있다.
상기 면역결손동물로는 예컨대 T세포에 의존하는 면역응답능을 결손한 누드동물, T세포 및 B세포에 의존하는 면역응답능을 결손한 스키드 동물, 후술하는 실시예와 같이 스키드 동물에 항아시아로GM1항체를 투여함으로써 더욱 NK세포에 의존하는 면역응답능을 결손한 동물 등을 들 수 있다.
또한, 상기 항아시아로GM1항체는 마우스의 NK세포에 특이적으로 표현되는 아시아로 GM1단백질을 항원으로 하는 항체로, 당해단백질과 특이적으로 결합함으로써 NK세포에 의존하는 면역응답기능을 결손시키고 있다.
또한, 마우스 이외의 동물에 있어서 NK세포가 관여하는 면역응답능을 결손시키기 위해서는 방사선조사 혹은 면역억제제를 대량으로 투여하면 된다.
또한, 시료의 이식은 이식하는 동물 및 그 조직에 따라 다르나, 종래 공지의 일반적인 방법으로 이식할 수 있다. 예컨대 후술하는 실시예와 같이 마우스의 신장피막하에 이식할 경우, 마우스를 마취하여 개복한 후 신장을 노출시켜서, 신장피막 하에 시료인 간장조직을 삽입하고, 근층 및 피부를 한층으로 봉합하여 이식을 행하면 된다.
또한, 상기 간경변모델동물에 있어서 이식된 인간간조직이 생착되었는지 여부의 판정을 이식된 간조직을 HE염색함으로써 실시할 수 있다. HE염색에 의해 살아있는 것이 확인되면 이식된 인간간조직은 생착되어 있는 것으로 판단할 수 있다. 한편, 생착이 얻어지지 않은 조직에 대해서는 세포구조가 완전히 파괴되어 버리는 점에서 쉽게 판정할 수 있다. 또한, 상기 이외의 판정방법으로 인간간세포에서 합성되는 인간알부민, 인간프리알부민, Protein C등의 단백질을 ELISA법이나 웨스턴블롯법 등으로 측정하는 방법 등이 있다.
이상과 같이 하여, 인간유래의 간경변조직을 이식하여, 간경변의 병태를 나타낸 간경변모델동물을 제작할 수 있다. 이 간경변모델동물은 종래의 간조직을 파괴한 모델동물과 비교하여, 보다 간경병환자에 가까운 병태를 가지는 모델동물이므로 간경변의 치료방법 및 치료약제의 개발에 크게 공헌할 가능성이 높다.
각종 물질의 약리작용, 특히 의약품개발을 목적으로 하는 약효스크리닝시험 등에 있어서는 건강하고 정상인 동물 보다도 일정한 병태상태에 있는 질환모델동물 쪽이 보다 실제의 임상증상에 가깝다. 따라서, 건강하고 정상인 동물이 아닌 일정의 병태상태에 있는 질환모델동물을 사용한 시험을 행하는 것이 약효평가 상에서도 바람직하다. 그러므로 이와 같은 간경변모델동물은 인간질환의 원인해명, 진단, 예방, 치료기술의 개발을 하는 데 있어 실험용 동물로서 중요한 역할을 한다.
(2) 본 발명의 간경변모델동물의 유용성
상기(1)에서 설명한 제작방법에 의해 얻을 수 있는 간경변모델동물은 이하와 같은 유용성이 있다.
① : 스탠포드대학 의학부 등의 간세포를 마우스의 꼬리에서 주사하는 종래의 방법(K, Marion PL, Nakai H, Meuse L, Cullen JM, Bordier BB, Schwall R, Greenberg HB, Glenn JS, Kay MA. Sustained survival of humanhepatocytes in mice:A model for in vivo infection with human hepatitis B and hepatitis delta viruses. Nat. Med. 2000 Mar;6(3):327-331 참조)에서는, 마우스간장 내에 모자이크 상으로 인간간장세포가 삽입되어 있으므로, 조직으로서 인간간장조직을 유지하는 것은 불가능하다. 또한, 간경변을 발증한 간조직을 분산시켜 간세포로써 주입하는 것은, 세포가 원래 데미지를 입고 있는 데 다시 데미지를 입는 셈이 되어 생착률은 극히 낮다고 생각된다. 한편, 본 발명은 상기의 종래법과는 달리 인간간장조직을 이식하고 있어 약물이나 각종 물질을 간세포에서 검토하는 것에서도 생체에 보다 가까워 임상적으로 보아도 의의가 있는 모델동물을 제공할 수 있다.
② : 간경변을 발증한 인간유래의 간장조직을 동물(특히 실험동물로 사용하기 쉬운 마우스)로 계대가능하며, 인간간경변의 병태를 나타낸 모델동물을 얻을 수 있다.
③ : 비교적 단기간(1주일 정도)에 간경변조직이 생착한 간경변모델동물을 제작할 수 있다.
④ : 간경변모델동물의 신장에, 환자유래의 간장조직을 이식하면,
a) 간경변모델동물의 신장과 이식된 조직과의 식별이 쉽게 행해진다.
b) 동일 개체의 신장의 좌우 또는 상부, 중부, 하부 등에 나누어 이식할 수 있다. 따라서, 동일 조건에서의 약제의 효과 등이 비교 가능하다.
⑤ : 간경변의 진단을 위한 의약품, 간경변의 예방 및/또는 치료를 위한 의약품의 스크리닝시험 등에 바람직하게 이용될 수 있다. 그 결과 간경변치료약의 개발이 현저히 용이해 진다.
⑥ : 간경변의 치료법이 발견되면, 간경변에서 간장암으로의 진행을 막을 수 있으며 간장암 예방에 공헌할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 따라 상세하게 설명한다. 또한, 본 발명은 이하의 실시예의 기재에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 범위 내에서 다양한 변경이 가능하다.
[실시예 1] (간경변모델동물의 제작)
본 실시예에 있어서는 T세포, B세포부전의 스키드 마우스(scid mouse)를 이용하여 간경변 모델동물의 제작을 행했다. 이하에 그 순서를 나타낸다.
상기 스키드 마우스로서, 본 실시예에서는 BALB종의 마우스를 사용했다. 상기 스키드 마우스에는 전처리로서 항아시아로GM1항체(Cedarlane제, 모델번호:CL8955, 명칭:Ranbbit Anti-Mouse/Rat AsialoGM1 Polyclonal Antibody)가 이식 3일 전에 20㎍, 그리고 이식일의 개복 전에 20㎍이 복강 내에 투여되었다. 또한, 비교를 위해 일부의 스키드마우스에는 항아시아로GM1항체 투여를 행하지 않았다.
간경변을 일으킨 인간의 간장조직으로서, 간경변환자로부터 적출된 간장조직을 사용했다. 상기 간장조직은 적출된 후 수센티미터로 절제되어 냉각된 배양액 안 에 보존되었다.
상기 스키드 마우스에는 넴뷰탈(만유제약제)을 포함하는 마취약(생리식염수100㏄에 넴뷰탈 4㏄를 가한 것)이 주사기(2.5㏄, 바늘 27G)를 사용하여 복강 내에 1㏄투여되어 마취가 가해졌다. 27G주사바늘을 이용하면 마우스의 복벽에 수직으로 찔러도 장관이 도망가므로, 장관을 손상시키지 않고 주사를 행할 수 있다. 마취가 가해진 스키드 마우스는 수족이 비닐테이프로 고정되고, 가위로 복부가 정중절개되었다. 이 때 장관 등을 손상하지 않도록, 피부와 근막(fascia)을 각각 별도로 절개했다.
이어서 스키드 마우스에 마우스용의 개창기를 걸고, 면봉 또는 핀셋을 사용하여 장관을 나누어 가며 신장을 노출시켰다. 이 때 출혈에 대해서는 면봉으로 압박하는 것으로 대응한다. 그 후 신장의 뒤쪽에 면봉을 삽입하여 신장을 탈전시켰다. 그리고 실체현미경으로 신장을 관찰하면서, 신피막을 마이크로핀셋으로 파지하고 소절개를 하였다. 배양액 안에 보존되어 있던 간장조직은 약 2㎜크기의 소편으로 절제되고, 핀셋으로 스키드 마우스의 신피막을 파지하면서, 간장조직의 소편을 절개한 신피막하에 삽입했다.
이리 하여, 간장조직의 삽입이 행해진 후, 장관을 복강 내로 되돌리고 복부의 절개부분은 봉합사(3-0silk)를 이용해서 봉합되었다. 이 봉합은 피부·근막의 2층에서 각각 행해졌다. 그 후 상기 스키드 마우스는, 별도의 케이지로 옮겨져 약2시간 정도 지나 마취에서 깨어났다.
[실시예 2] (이식된 간장조직의 생착 유무 판정)
실시예 1에서 제작된 간경변모델동물의 생존율은 100%였다. 즉, 마취에서 깨어난 모든 마우스가 생존했다. 이식 전에 항아시아로GM1항체가 투여된 마우스에 대해서는 이식 후 5일째와 10일째에 상기 항아시아로GM1항체가 다시 투여되었다.
또한, 이식 후 2주간 경과 후에, 상기 마우스의 신피막에서 인간간조직의 생착유무가 확인되었다. 이 확인실험은 실시형태에서 설명하는 HE염색법에 의거하여 행해졌다. 그 결과 항아시아로GM1항체를 투여하지 않은 경우는 인간간장조직의 생착률은 15%이며, 항아시아로GM1항체를 투여한 경우는 인간간장조직의 생착률은 35%였다.
[실시예 3] (항아시아로GM1항체 투여 유무에 따른 생착률 비교)
이어서, 실시예 1과 같은 방법에 의해 인간의 정상적인 간장조직을 스키드 마우스에 이식한 모델동물에 있어서의 항아시아로GM1항체 투여의 유무에 따른 생착률의 차에 대해 조사한 결과를 이하에 나타낸다.
항아시아로GM1항체를 투여하지 않은 경우는, 상기 모델동물 19마리 중 5마리에서 인간간조직의 생착이 확인되었다. 항아시아로GM1항체를 투여한 경우는, 상기 모델동물 12마리 중 7마리에서 인간간조직의 생착이 확인되었다. 이 결과로부터 항아시아로GM1항체를 투여하는 것에 의해서, 인간간조직의 생착률을 높일 수 있음이 확인되었다. 이것은 항아시아로GM1항체의 투여에 의해, 모델동물 내의 내츄럴 킬러세포가 관여하는 면역응답능을 결손시켜, 상기 내츄럴 킬러세포에 의존하는 거절반응을 억제하는 것이 가능하였기 때문으로 생각된다.
상기의 결과에 의해 간경변을 발증한 인간간조직의 이식의 경우에도, 항아시 아로GM1항체의 투여에 의해 생착률을 높일 수 있다고 추측된다.
한편, 발명의 상세한 설명 항에서 이루어진 구체적인 실시형태 또는 실시예는 어디까지나 본 발명의 기술내용을 명확히 하는 것으로, 이와 같은 구체예로만 한정하여 협의로 해석되어서는 아니 되며, 본 발명의 정신과 다음에 기재하는 특허청구의 범위 내에서 여러 가지로 변경하여 실시가 가능한 것이다.
이상과 같이 본 발명에 따르면 간경변을 발증한 인간의 간장조직을 가지는 간경변모델동물을 높은 확률로 얻을 수 있다. 이 간경변모델동물은 종래의 간경변용 실험동물과는 다르며, 실제로 인간의 간경변조직이 이식된 것이다. 따라서, 간경변의 진단을 위한 의약품, 간경변 예방 및/또는 치료를 위한 의약품의 스크리닝시험 등에 바람직하게 이용될 수 있어 간경변치료약의 개발이 현저히 용이해질 것으로 기대된다.
Claims (10)
- 내츄럴 킬러세포에 의존하는 면역응답능을 결손하고 있으며, 인간 간경변 조직이 신장에 생착하고 있는 것을 특징으로 하는 스키드 마우스의 간경변모델동물.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제 1항에 있어서,상기 모델동물은 항아시아로GM1항체를 투여함으로써 내츄럴 킬러세포에 의존하는 면역응답능을 결손시킨 것을 특징으로 하는 간경변모델동물.
- 삭제
- 제 1항에 있어서,상기 인간 간경변 조직은, 간경변의 중증도 분류인 차일드 분류에 있어서, 차일드A로 분류되는 것을 특징으로 하는 간경변모델동물.
- 항아시아로GM1항체를 투여함으로써 내추럴 킬러세포에 의존하는 면역응답능을 결손시킨 스키드 마우스의 신장에 인간 간경변 조직을 이식하여 생착시키는 공정을 포함하는 것을 특징으로 하는 간경변모델동물의 제작방법.
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