KR100664724B1

KR100664724B1 - 망태버섯 추출물을 포함하는 천연 항균제의 제조방법 및그로부터 수득되는 천연 항균제

Info

Publication number: KR100664724B1
Application number: KR1020040052412A
Authority: KR
Inventors: 이지은; 김철진
Original assignee: 이지은
Priority date: 2004-07-06
Filing date: 2004-07-06
Publication date: 2007-01-03
Also published as: KR20060003508A

Abstract

본 발명은 버섯 추출물을 포함하는 천연 항균제의 제조방법 및 그로부터 수득되는 천연 항균제에 관한 것으로, 좀더 상세하게는 바이오 신소재로서 식품, 의약품, 화장품, 섬유, 생활용품 등에서 방부 및 저독성의 성질을 가짐으로서 품질의 안전성과 안정성을 높이고 사람을 포함한 포유류에서 안전하고 내성이 유발되지 않으면서 적절한 항균성을 가짐으로서 감염성 질병을 치료하고 예방하는 효과를 갖는 천연 항균제에 관한 것이다. 특히 본 발명은 다양한 균주에 대하여 생육을 저해하는 저독성 천연 항균 버섯 추출물에서 유래한 화합물의 제조방법 및 그로부터 수득되는 천연 항균제에 관한 것이다.

망태버섯, 추출물, 천연 항균제, 저독성, 안정성, 감염성 질병 예방 및 치료

Description

망태버섯 추출물을 포함하는 천연 항균제의 제조방법 및 그로부터 수득되는 천연 항균제 {Manufacturing method of natural bactericide comprising extracts of Dictyophora indusiata and natural bactericide obtained therefrom}

본 발명은 천연 방부제 제조방법 및 이를 이용한 제품에 관한 것으로, 좀더 상세하게는 부패 및 화학적 변화가 우려되는 화장품 및 식품 등의 제품의 보존 및 이의 사용으로 야기될 수 있는 부작용을 최소화할 수 있는 독성이 적고, 피부에 자극이 적으며, 항균스펙트럼이 광범위한 다기능성 천연 항균제에 관한 것이다.

식품 및 화장품 등에는 각종 영양분으로서 유기물질이 다량 함유되어 있으므로 공기에 노출되거나 불순물이 침투하게 되면 미생물 등의 작용으로 부패하게 되는데, 방부제는 이러한 부패를 억제하는 기능을 한다. 즉, 방부제는 미생물의 증가를 억제하는 물질로 배합량이 많으면 피부 트러블을 유발시킨다. 따라서 피부에 대한 테스트를 거쳐 안전성이 확인된 것을 화장품에 사용하고 있다.

현재 세계의 식품 및 화장품 업계의 최대 관심사는 제품의 보존 및 보존기간의 연장에 있다. 또한, 이러한 보존의 문제와 더불어 중요한 것이 인체에 무해하며, 피부에 저자극성을 갖는 방부제를 개발하는 것이다. 시장이 소비자의 기호와 관심을 반영하고, 그에 따라 변화됨에 따라 업계에서의 무독/무자극성의 천연 방부제의 의미에 대한 이해는 수익 실현에 불가결한 것이 되고 있다.

화장품은 기름이나 물을 주성분으로 하고, 여기에 미생물의 탄소원이 되는 글리세린이나 솔비톨, 질소원으로는 아미노산 유도체, 단백질 등이 배합된 것이 많으므로, 성분이 유사한 식품과 같이 곰팡이나 세균 등의 미생물이 침투하여 번식하기 쉽다. 그러나 식품과 비교하면, 그 사용기간은 극히 길고, 보통 2년 정도의 다년간 사용되는 것도 있어 미생물에 의한 변질의 위험은 식품에 비할 바가 아니다.

따라서 사용 중에 사용자의 손가락 등을 통해 오염되어 미생물이 일으키는 변패, 변취 등으로부터 장기간 보호하기 위해 화장품에는 무독, 무자극 또는 저자극의 천연 방부제를 사용할 것이 요구된다.

현재 화장품에 배합되어 외부로부터 유입되어 화장품을 오염시키는 미생물의 증식을 억제하며, 시간경과와 함께 사멸시켜 제품의 변화를 방지하는 목적으로 방부제가 사용된다. 이와 같이 미생물의 증식을 억제하는 작용을 정균작용(Microbiostasis)이라 하며, 방부제는 화장품 중에서 정균작용에 의해 변화가 방지되도록 구성되어 있다.

단독의 방부효과는 그리 강하지 않지만, 화장품의 성분과 융합되기 쉬워서 각종의 미생물을 시간을 두고 사멸시켜 가는 것이 일반적이다. 이에 반해, 화장품에 배합되는 살균제는 피부에 도포되는 것에 의해 피부면을 소독하여 청결하게 유지되도록 하는 목적으로 사용된다. 살균제에는 단기간에 균을 사멸 또는 감소시키는 효과가 요구된다.

실제로 사용되고 있는 살균제는 여드름의 원인으로 생각되는 피부상재균인 아크네균의 증식을 억제하여 여드름 발생이나 증상의 악화를 완화시키고, 액취의 원인으로 생각되는 피부상재균을 사멸 또는 감소시키는 효과가 있고, 항아크네 제품과 냄세제거 제품 등에 배합되어 있다. 또한, 비듬발생의 원인으로 생각되는 효모 억제에도 효과를 보이는 살균제는 비듬억제 제품에 응용되고 있다.

그러나 이와 같은 살균제를 실제 배합하는 경우, 화장품의 성분과 반응하거나, 화장품 중에 용해시키기 어렵거나, 피부상의 단백질 등과 반응하여 효과가 극단적으로 저하되는 등 실용상의 문제가 많았다. 대표적인 것으로, 염화벤잘코늄(Benzalkonium chloride), 글루콘산 클로로 헥시딘(Chlorohexidine gluconate), 트리클로로카르바닐드(TCC ; Trichlorocarb-anilide) 등이 있다.

최근, 화장품 및 식품관련 산업에서는 자연계에 존재하는 다양한 동, 식물 유래의 각종 유용성분을 이용하여 식품소재로 활용하려는 연구가 활발히 진행되고 있으며, 식품산업의 새로운 연구목표가 되고 있다. 따라서, 국내의 천연자원 및 부산물로부터 기능성을 갖는 물질을 탐색하여 식품 및 화장품에 응용가능한 원료로 개발하는 것은 효율적인 자원이용의 측면이나 국가적인 측면에서도 의미있는 일이라 할 수 있다.

일반적으로 우리 생활주변에서 널리 이용되는 식품 및 화장품 등에는 미생물에 의한 부패 및 화학적 변화를 방지하여 일정한 기간 동안 보존하기 위해 방부제를 첨가하게 된다.

방부제는 세균 및 곰팡이 등의 이물질들의 작용을 효과적으로 저해하여 식품 및 화장품 등이 변성되는 것을 막아주게 된다. 이러한 방부효과를 갖는 방부제로는 천연에서 추출되는 물질도 있으나, 대부분은 제조가 쉽고, 원가가 저렴하며, 대량생산이 용이한 인공적으로 화학합성된 물질이 주로 이용되고 있다. 예를 들어, 비교적 부패가 잘 되고, 유통기한이 긴 햄, 소시지 등의 저장식품에서 주로 사용되는 방부제인 부틸화 히드록시아니솔(BHA ; butylated hydroxyanisole)과 부틸화 히드록시톨루엔(butylated hydroxytoluene)은 페놀 유도체이다. 이들 방부제는 항균효과 뿐만 아니라 불포화지방이 들어 있는 음식물의 산화를 방지하는 부수적인 효과도 있다. 즉, 이들은 금속을 붙잡는 능력을 갖고 있어 효율적으로 산화방지제 역할을 한다.

다른 종류의 화학방부제는 세균과 곰팡이 등의 미생물이 번식해 식품이 부패하는 것을 막는 프로피온산, 벤조산 나트륨, 아질산 나트륨과 소르브산 등이 있다. 마가린, 잼, 과일통조림 등에도 이 첨가제가 사용된다. 아질산 나트륨은 육류에서 미생물이 번식하는 것을 억제한다.

이와 같은 합성 방부제는 지질친화성이 높으므로 식품으로 섭취하였을 경우, 체내 지방조직에 축적되어 장기적으로 독성을 유발할 가능성이 크다. 또한, 일부는 발암성물질의 형성에 참여하기도 하며, 세포벽 파괴, 원형질과의 반응, 효소의 파괴, 단백질의 변성 등 세포기능을 저하 또는 파괴하여 면역기능을 약화시킬 수 있는 등 다양한 문제점을 갖고 있다.

그러나 기존의 방부제로서 가장 안전하며, 화장품, 의약품 등에 범용적으로 사용되는 파라벤류의 방부제들조차 피부알러지(Andrea Counti 등, Contact Dermatitis, 1997, 37 ; 35-36)와 환경호르몬으로서의 가능성(Edwin 등, Toxicology and Applied Pharmacology, 1998, 153 ; 12-19) 및 내성균 유발이라는 문제점을 가지고 있다. 뿐만 아니라, 식품용 방부제들도 허용된 기준 내의 사용조차 불신되고 있고, 지속적인 체내 축적으로 인한 급,만성 독성, 돌연변이 유발 등의 새로운 문제 가능성이 대두되고 있는 실정이다.

이러한 문제점들로 인하여 제품의 안전성과 경제성이 우수한 천연 방부제에 대한 연구가 지속되고 있으며, 그 결과, 향신료, 우유 및 어류 등의 식품류, 정유, 한약재 등으로부터 많은 천연 항균성 물질들이 보고되고 있다.

천연의 항균성 물질로 알칼로이드, 후라보노이드, 피토알렉신, 항균 펩타이드 등이 알려져 있으며, 유기산과 지방산 등의 항균성에 대한 것도 알려져 있다. 이들 대부분은 산의 pH에 의한 효과와 킬레이트에 의한 효과가 주 메커니즘일 것으로 추정된다.

그러나 보고된 천연 항균성 물질의 대부분은 색취, 안전성 저하, 좁은 항균 스펙트럼, 제형상의 문제점 등으로 인하여 상용화되지 못하고 있으며, 편백추출물인 히노키티올(Hinokitiol), 목련추출물인 메그노놀(Megnonol), 자몽 추출물 DF-100 등 극히 일부분만이 상용화되고 있다.

이 중에서 가장 제품개발이 앞선 DF-100의 경우에, 항균력은 DF-100에 포함된 유기산 및 합성보존료인 염화벤조토늄(Benzotonium chloride) 때문인 것으로 알려져 있으며, 그 외 다른 천연 항균제 등은 경제성이 낮거나 좁은 항균 스펙트럼 또는 물성에 따른 사용범위의 제한성 등의 문제를 가지고 있어 보다 진보되고, 제 품화가 가능한 천연 항균제가 절실하게 요구되고 있는 실정이다.

한편, 현재 일반제품에 사용되고 있는 항균제는 제품의 품질을 유지하는 차원이 아니라, 미생물에 의한 사람 및 가축에서의 질병발생을 예방하고, 치료하기 위하여 합성항생제가 널리 사용되고 있으나, 오용 및 남용으로 인해 다양한 내성균주가 나타나 병원에서는 감염증을 치료하기 위해 고단위의 항생제를 사용하여야 하는 악순환의 고리를 형성하고 있고, 가축에게도 원인균의 감수성이 떨어지고, 항생제 잔류라는 공중 보건상 중요한 문제가 되고 있다.

특히, 메티실린 저항성 포도상구균(MRSA ; Methicillin Resistant Staphylococcus Aureus ; Voss, A 등, Int. J. Antimicrob Agents, 1995, 5 ; 101-106)에 대처하기 위해 2가지 이상의 항생제를 복합적으로 사용하거나, 반코마이신(Vancomycin)을 사용하고 있으나, 반코마이신에 대하여 저항성을 갖는 장내세균(Vancomycin-resistant enterococci ; Billot-Klein D. Antimicrob. Agents, Chemother, 1992, 36 ; 1487-1490)과 같은 내성균주가 출현하고 있다.

이에 따라 근래에는 항생제의 감수성을 높이기 위해 천연물에서 후라보노이드와 같이 사용하여 감수성을 높였다는 보고가 있으며(Ianix, Liu 등, J. Pharm. Pharmacol, 2000, 52 ; 361-366), 항균 펩타이드도 병용효과를 위한 대안으로서 많은 연구가 진행되었지만(Gaicometti A 등, J. Antimicrob. Chemother, 2000, Nov. ; 46(5), 807-811), 항균 펩타이드는 항균성만 나타내는 제한성이 있었으며, 경제적 대량 생산방법에 문제가 있었다(Lee JH 등, Protein, Expr. Purif., 1998, Feb. ; 12(1), 53-60).

현재 이러한 망태버섯을 이용한 항균제의 개발은 아직 이루어지지 않고 있다.

망태버섯의 항균력은 망태버섯에 함유된 퀴나졸린 계열의 물질에 의한 것으로, 이러한 계통의 물질들은 이미 여러 연구자들에 의해서 그 항균활성이 밝혀지고 있으며, 아직도 이러한 물질들에 대한 연구가 한창 진행중이다(미합중국 특허 제US006156758A, Kung et al.).

최근 생합성 및 화학적 항생제의 사용으로 내성을 갖는 병원성균이 증가함에 따라 천연 항생제를 이용하여 내성을 방지하고, 기존 항생제에 내성을 갖는 병원균에 대한 대체 항생제로서의 천연 항생제의 개발이 다각도로 검토되고 있으며, 화장품 및 식품의 보존성을 연장하기 위한 수단으로서 화학합성 첨가제를 사용하고 있으나, 이러한 방법은 상품의 질을 저하시키는 원인으로 작용하므로 미생물의 증식을 억제하면서도 무독 및 무자극성과 상품의 보존기간을 연장시킬 수 있는 방법의 개발이 절실한 실정이다.

또한, 현재까지 상업적으로 이 분야에 응용되고 있는 천연 항균물질은 거의 없으므로, 본 발명이 산업화에 성공할 경우, 기능성 화장품 및 식품시대에 미치는 경제 및 기술적인 파급효과는 막대할 것으로 기대된다.

본 발명의 목적은 부패 및 화학적 변화가 우려되는 화장품 및 식품 등의 제품의 보존 및 이의 사용으로 야기될 수 있는 부작용을 최소화할 수 있는 독성이 적고, 피부에 자극이 적으며, 항균스펙트럼이 광범위한 다기능성 천연 항균제의 제조 방법을 제공하는 데 있다.

본 발명에 따른 망태버섯 추출물을 포함하는 천연 항균제의 제조에 있어서, (1) 개열한 망태버섯 생체 1㎏을 분쇄 후, 90% 이상의 농도의 메탄올 또는 에탄올과 같은 저급알코올 4 내지 7ℓ에 25 내지 30시간 침지시키는 침지단계; (2) 상기 침지액을 여과하여 고형분을 제거하고, 여액을 감압 농축시키는 농축단계; 및 (3) 상기 농축단계에서 수득되는 농축물을 n-부탄올 1ℓ와 증류수 1ℓ를 사용하여 분획하여 알코올층을 수확하는 분획단계;들을 포함하여 이루어진다.

이하, 본 발명을 구체적인 실시예를 참조하여 상세히 설명한다.

본 발명에 따른 망태버섯 추출물을 포함하는 천연 항균제의 제조방법은, 천연 항균제의 제조에 있어서, (1) 개열한 망태버섯 생체 1㎏을 분쇄 후, 90% 이상의 농도의 메탄올 또는 에탄올과 같은 저급알코올 4 내지 7ℓ에 25 내지 30시간 침지시키는 침지단계; (2) 상기 침지액을 여과하여 고형분을 제거하고, 여액을 감압 농축시키는 농축단계; 및 (3) 상기 농축단계에서 수득되는 농축물을 n-부탄올 1ℓ와 증류수 1ℓ를 사용하여 분획하여 알코올층을 수확하는 분획단계;들을 포함하여 이루어짐을 특징으로 한다. 본 발명에 따른 망태버섯 유래의 천연 항균제는 상기한 분획단계에서 수득되는 분획물로 이루어진다.

상기 (1)의 침지단계는 실질적으로 망태버섯으로부터 유효성분들을 추출해내는 단계로서 개열한 망태버섯 생체 1㎏을 분쇄 후, 90% 이상의 농도의 메탄올 또는 에탄올과 같은 저급알코올 4 내지 7ℓ에 25 내지 30시간 침지시키는 것으로 이루어진다. 이 단계에서 수분함량이 높은 망태버섯 생체를 메탄올에 침지시켜 유효성분이 생체로부터 메탄올로 침출, 전이된다. 상기에서 메탄올의 사용량이 4ℓ 미만으로 사용되는 경우, 망태버섯으로부터 유효성분이 충분히 추출되지 못하는 문제가 있을 수 있으며, 반대로 7ℓ를 초과하는 경우 후속의 농축 및 분획에서 여액의 처리에 많은 시간과 노력이 소요되어 생산성을 저하시키는 문제점이 있을 수 있다. 상기 (2)의 농축단계는 상기 침지액을 여과하여 고형분을 제거하고, 여액을 감압 농축시키는 것으로 이루어지며, 이후의 분획단계에서 분획처리를 용이하게 하며, 또한 분획물 중의 망태버섯의 유효성분의 함량으로 높이는 기능을 한다. 상기 (3)의 분획단계는 메탄올 중에 포함된 망태버섯 유래의 유효성분을 n-부탄올로 전이시키면서 동시에 수용성의 불순물들을 제거하기 위한 것으로서 상기 농축단계에서 수득되는 농축물을 n-부탄올 1ℓ와 증류수 1ℓ를 사용하여 분획하여 알코올층을 수확하는 것으로 이루어진다.

이하에서 본 발명의 바람직한 실시예 및 비교예들이 기술되어질 것이다.

이하의 실시예들은 본 발명을 예증하기 위한 것으로서 본 발명의 범위를 국한시키는 것으로 이해되어져서는 안될 것이다.

실시예 1

망태버섯 추출물의 제조

본 발명에서 이용된 망태버섯은 개열한 것을 2003년 2월 망태버섯 원산지인 중국 현지에서 직접 채취하여 분쇄기로 분쇄한 후, 분쇄물 1㎏을 90% 이상의 농도의 메탄올 5ℓ에 28시간 침지시킨 후, 상기 침지액을 여과하여 고형분을 제거하고, 여액을 감압 농축시켰다. 수득되는 농축물을 n-부탄올 1ℓ와 증류수 1ℓ를 사용하여 분획하여 알코올층을 수확하였다.

상기 수확된 알코올층을 시료로 사용하여 항균력과 최소억제농도 및 열안정성에 대하여 실험하였다.

실험예

사용균주 및 배지

본 발명 망태버섯 추출물의 항균활성 등을 검정하기 위하여 병원성 세균을 배양하고 상기 세균을 멸균 생리식염수로 현탁하여 세균현탁액을 제조하여 사용하였으며, 이를 사용하여 페이퍼 디스크법을 이용하여 검정하였다. 항균활성의 검정에는 그람음성 및 양성 균주와 병원성 곰팡이균을 지시균주(indicator strain)로 사용하였다.

사용균주 및 배지

본 발명에 따른 망태버섯 추출물의 항균활성을 검정하기 위하여 사용한 균주는 항미생물 측정에 이용되는 균주들 중 대표적인 균주들로서 항생제에 대한 내성측정에 이용할 수 있도록 변이된 균주들 만을 선별하여 시험하였다. 이들 균주들은 Citrobater freundii(KCTC 2209), Bacillus cereus(ATCC 9634), Staphyloccus epidermis(ATCC 12228), Salmonella typhimurium(KCTC 1926), Escherichia coli(KCTC 1923), Klebsiella pneumoniae(ATCC 4352), Pseudomonas aeruginosa(ATCC 25619), Listeria monocytogenes(ATCC 19111), Penicillium rubrum(ATCC 10520) 등이다. 각 균주들은 최적배지에서 2회 이상 계대배양하여 활 성화시킨 후 사용하였다. 사용한 균주 및 배양온도를 표 1에 나타내었다.

균 주	배지명	pH	온도(℃)
Staphyloccus epidermis	Nutrient agar	6.8	37
Salmonella typhimurium	Nutrient agar	6.8	37
Escherichia coli	Nutrient agar	6.8	37
Klebsiella pneumoniae	Nutrient agar	6.8	37
Pseudomonas aeruginosa	Nutrient agar	6.8	37
Citrobacter freundii	Nutrient agar	6.8	37
Bacillus cereus	Nutrient agar	6.8	37
Listeria monocytogenes	Brain Heart Infusion agar	6.8	37
Aspergillus niger	Potato Dextrose agar	*	24
Bacillus subtilis	Nutrient agar	6.8	30
Penicillium rubrum	Micrococcus medium	7.4	37
* ; 5.4 내지 6.0

상기 표 1에서 배지명 'Nutrient agar'의 조성은 소고기 육즙(beef extract) 3.0g, 펩톤 5.0g, 아가(agar) 15.0g 및 증류수 1.0ℓ로 이루어지고, 'Brain Heart Infusion agar'의 조성은 Brain Heart infusion broth(Difco 사 0037) 37.0g, 아가 15.0g 및 증류수 1.0ℓ로 이루어지고, 'Potato Dextrose agar'의 조성은 감자절편 300.0g, 글루코스 20.0g, 아가 15.0g 및 증류수 1.0ℓ로 이루어지며, 'Micrococcus medium'의 조성은 펩톤 5.0g, 효모 추출물 3.0g, 소고기 추출물 1.5g, 글루코스 1.5g, 아가 15.0g 및 증류수 1.0ℓ로 이루어진다.

세균현탁액의 조제

각 공시균의 최적배지에서 자란 집락 1백금이를 10㎖의 뮤엘러 힌톤 브로스(Mueller Hinton broth, Difco Co. Ltd.)에 접종하고, 최적온도에서 24시간 동안 배양하여 활성화시킨 후, 멸균된 생리식염수로 2.5*10⁵CFU/㎖의 농도가 되도록 균수를 조절하여 항균효과 검정에 이용할 세균현탁액으로 사용하였다.

항균력의 측정

본 발명 망태버섯 추출물의 항균력은 자이카(Zaika)의 방법에 따라 페이퍼 디스크(paper disk)법으로 측정하였다. 상기에서 준비된 세균현탁액 100㎕를 각 배지에 분주하여 유리봉으로 골고루 도말한 다음, 세균현탁액이 배지에 스며들도록 실온에 잠시 보관하였다. 상기 실시예 1의 망태버섯 추출물 50㎕를 포함한 페이퍼 디스크를 도말된 배지의 표면에 부착시키고, 각 공시균의 최적온도에서 24시간 배양한 다음, 형성된 억제환의 크기로 항균력 정도를 확인하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.

구분	추출물	50% 메탄올	60% 메탄올	70% 메탄올	80% 메탄올	90% 메탄올	100% 메탄올	100% 에탄올
Citrobacter freundii	16	32	9	7			8
Bacillus cereus	16	13		13		8	7	12
Staphyloccus epidermis	25	24	7	8	7	7	8
Escherichia coli	17	18	7
Klebsiella pneumoniae				7	8		10	9
Pseudomonas aeruginosa	8	10	9	7
Listeria monocytogenes	22	30
Salmonella typhimurium	16	14	11	7
Aspergillus niger	24
Bacillus subtilis	20	18			15	10
Candida lypolytica	15	18		12			6
Saccharomyces cerevisiae	12	9		6		7
Staphyloccus aureus	7	9

병원성 세균에 대한 본 발명 망태버섯 추출물의 최소억제 농도의 결정

공시균에 대한 본 발명 망태버섯 추출물의 최소억제농도(MIC ; Minimum Inhibitory Concentration)를 확인하기 위하여 10%, 5%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05%, 0.01%가 되도록 활성분획을 첨가한 뮤엘러 힌톤 아가에 조제된 세균현탁액을 스티 어스 등의 방법(Steers, W., E. L. Flotz and B. S. Grabes, 1969, An inocula replicating apparatus for routine testing of bacterial susceptibility to antibiotics, Antibiot. Chemother., 2 ; 307-311)에 따라 접종한 다음, 37℃에서 하룻밤 동안 배양하였다. 망태버섯 추출물의 최소억제농도는 추출물을 포함한 평판배지에서 균이 성장하지 않는 최소농도로 결정하였으며, 그 결과를 표 3에 나타내었다.

구분	10%	5%	1%	0.5%	0.1%	0.05%	0.01%
Citrobacter freundii	＋	＋	＋	＋	＋	－	－
Saccharomyces cerevisiae	＋	＋	－	＋	－	－	－
Bacillus cereus	＋	＋	＋	－	－	－	－
Staphyloccus epidermis	＋	＋	＋	＋	＋	－	－
Escherichia coli	＋	＋	＋	＋	－	－	－
Klebsiella pneumoniae	＋	＋	－	－	－	－	－
Pseudomonas aeruginosa	＋	＋	＋	－	－	－	－
Listeria monocytogenes	＋	＋	＋	＋	－	－	－
Salmonella typhimurium	＋	＋	＋	＋	－	－	－
Aspergillus niger	＋	＋	＋	＋	＋	－	－
Bacillus subtilis	＋	＋	＋	＋	－	－	－
Candida lypolytica	＋	＋	－	－	－	－	－

망태버섯 추출물의 열안정성

본 발명 망태버섯 추출물의 항균성이 열처리에 의해 어떠한 영향을 받는지 알아보기 위해 상기 균주들을 지시균주로 사용하여 실시하였다. 상기 실시예 1의 망태버섯 추출물을 30℃, 50℃, 100℃ 및 121℃에서 각각 15분간 열처리하여 페이퍼 디스크 법으로 항균활성을 측정한 다음, 열처리하지 않은 망태버섯 추출물의 항균활성과 비교하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다.

구분	대조	30℃	50℃	100℃	121℃
Citrobacter freundii	15	16	14	＋	－
Saccharomyces cerevisiae	10	9	＋	－	－
Bacillus cereus	13	14	10	＋	－
Staphyloccus epidermis	22	23	19	13	－
Escherichia coli	18	15	14	10	－
Klebsiella pneumoniae	7	6	－	－	－
Pseudomonas aeruginosa	9	8	＋	－	－
Listeria monocytogenes	23	24	18	＋	－
Salmonella typhimurium	13	11	9	＋	－
Aspergillus niger	20	18	16	14	－
Bacillus subtilis	15	16	14	－	－
Candida lypolytica	16	17	15	＋	－

따라서, 본 발명에 의하면 병원성의 그람음성 세균과 그람양성 세균 그리고 병원성 곰팡이에 대해 비교적 높은 항균활성을 나타내는 천연 항균제로서의 망태버섯 추출물을 포함하는 천연 항균제를 제공하는 효과가 있으며, 이는 천연 방부제 화장품의 개발에 사용될 수 있으며, 이러한 천연 방부제 화장품은 종래의 화장품에서 방부제로 주로 사용된 파라벤류 등이 유발할 수 있는 체내축적과 이로 인한 피부알러지, 유방암 등 각종 암의 발생가능성을 크게 감소시키고, 인체 친화적인 그리고 자연 친화적인 화장품 등의 생산에 이용될 수 있다는 장점을 가지고 있다.

이상에서 본 발명은 기재된 구체예에 대해서만 상세히 설명되었지만 본 발명의 기술사상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함은 당연한 것이다.

Claims

천연 항균제의 제조에 있어서,

(1) 개열한 망태버섯 생체 1㎏을 분쇄 후, 90% 이상의 농도의 메탄올 또는 에탄올과 같은 저급알코올 4 내지 7ℓ에 25 내지 30시간 침지시키는 침지단계;

(2) 상기 침지액을 여과하여 고형분을 제거하고, 여액을 감압 농축시키는 농축단계; 및

(3) 상기 농축단계에서 수득되는 농축물을 n-부탄올 1ℓ와 증류수 1ℓ를 사용하여 분획하여 알코올층을 수확하는 분획단계;

들을 포함하여 이루어지며, 최소억제농도 0.5중량% 이상의 망태버섯 추출물을 포함하여 이루어짐을 특징으로 하는 망태버섯 추출물을 포함하는 천연 항균제의 제조방법.
상기 청구항 제1항의 제조방법에 따라 수득되는, 최소억제농도 0.5중량% 이상의 망태버섯 추출물을 포함하여 이루어짐을 특징으로 하는 망태버섯 추출물을 포함하는 천연 항균제.