KR100657380B1

KR100657380B1 - 한방추출물을 함유하는 탈모방지 및 발모개선을 위한 샴푸조성물 및 그 제조방법

Info

Publication number: KR100657380B1
Application number: KR1020050111946A
Authority: KR
Inventors: 이훈구; 서동수; 석창현
Original assignee: 주식회사 세화 피앤씨
Priority date: 2005-11-22
Filing date: 2005-11-22
Publication date: 2006-12-14

Abstract

본 발명은 대황 추출물 0.1-30중량%, 백지 추출물 0.1-30중량%, 당귀 추출물 0.1-30중량%, 한련초 추출물 0.1-30중량% 및 만형자 추출물 0.1-30중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모 방지와 발모 개선을 위한 조성물을 제공한다.

본 발명에 의하는 경우, 탈모의 지표가 되는 자유라디칼의 소거 효과(Free radical scavenging effect)와 리폭시게나아제(Lipoxygenase) 활성 억제 효과가 우수하므로, 상기 추출물에 의하는 경우, 탈모방지 효과를 얻을 수 있게 된다.

또한, 본 발명에 의한 혼합추출물의 경우, 세포 독성이 없고, 세포증식에 있어서 우수한 효과를 나타내므로, 발모 효과가 뛰어날 뿐만 아니라, 여러 가지 제형으로 제조시 안정성 또한 뛰어나다.

자유 라디칼 소거효과, 탈모방지, 발모개선, 샴푸 조성물, 세포증식

Description

한방추출물을 함유하는 탈모방지 및 발모개선을 위한 샴푸 조성물 및 그 제조방법{SHAMPOO COMPOSITION FOR PREVENTING DEPILATION AND IMPROVEMENT OF HAIR GROWTH COMPRISING HANBANG EXTRACTION, AND MANUFACTURING METHOD THEREOF}

도 1a 내지 도 1b는 각각 본 발명에 의하여 제조된 샴푸를 처리하기 전과 3회 처리한 후의 모발을 보여주는 전자현미경 사진이다.

도 2a 내지 도 2b는 각각 일반 샴푸와 본 발명에 의하여 제조된 샴푸로 2회 세척한 후의 두피를 보여주는 전자현미경사진이다.

본 발명은 탈모방지와 발모개선을 위한 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 한방 추출물을 함유하는 탈모방지와 발모개선을 위한 조성물에 관한 것이다.

모발은 모낭의 성장과정에 따라 여러 성장 인자들에 의해 복잡하게 조절되는 소기관이다. 모낭의 분화과정 및 이와 관계된 모주기는 모발이 성장하는 단계인 성 장기, 모발의 소멸이 연결되는 퇴화기, 성장 정지기인 휴지기 및 신규 모발이 발생하여 성장하는 발생기로 나눌 수 있다.

생장기/성장기는 모발이 성장하는 단계로 이는 다시 2단계로 나누어진다. 즉, 모발이 모구로부터 모낭으로 나가려고 모발을 생성하는 단계와 딱딱한 케라틴이 모낭 안에서 만들어지는 단계이며, 퇴화기까지 자가성장을 계속한다. 성장기의 모발의 수명은 3∼6년이며 전체 모발(10∼15만개)의 80∼90%를 차지하고 성장단계에서 두발은 한 달에 1∼1.5cm 정도 자란다.

퇴화기는 성장기가 끝나고, 모발의 형태를 유지하면서 대사과정이 느려지는 시기로서 이때 모발은 천천히 성장한다. 또한, 이 단계에서는 케라틴을 만들어 내지는 않는다. 퇴화기의 수명은 1∼1.5개월이며 전체 모발의 1%를 차지한다. 모구부가 수축하여 모유두로 나눠지며 모낭에 둘러싸여 위쪽으로 올라간다. 이때 세포분열은 정지하고 있다.

휴지기는 　모유두가 위축되고 모낭은 차츰 수축되며 모근은 위쪽으로 밀려 올라가 빠진다(모근부는 위쪽에 올라와 있고, 모낭의 깊이는 1/3로 되어 있다). 모발이 없어지는 시기로 다음 성장기 단계가 시작될 때까지의 수명은 3∼4개월, 전체 모발의 4∼14%에 해당(분만 후 30∼40%)되며 이 시기의 모발은 강한 빗질이나 자극만으로도 쉽게　빠진다.

마지막으로 발생기는 성장기 초에는 모낭에 둘러싸여 있던 모구부가 모유두와 결합하여 새로운 모발을 성장시킨다. 다음으로 새로운 모발은 휴지기에 들어간 오래된 모발을 위로 밀어 올려서 자연 탈모시킨다.

하지만, 이와 같은 모주기는 매번 동일하게 반복되고 있는 것은 아니다. 병, 유전, 체질, 연령 등 모든 상황에 따라 달라질 수 있다. 예를 들면 휴지기에 들어간 채로 발생기를 맞이한다든가, 성장기를 맞았지만 경모까지는 이르지 못한다든가, 유연한 경모인 상태로 퇴화기가 되는 등의 여러 가지 상황이 있을 수 있다.

또한, 사회가 복잡 다양화되어 감에 따라 환경오염, 스트레스, 각종 화학물질 등과 같이, 탈모나 모발을 손상시킬 수 있는 요인도 점차 증가해 가고 있는 추세이다. 탈모나 모발에 손상을 주는 요인을 구체적으로 살펴보면, 환경에 의한 손상; 강한 햇빛, 열, 산성비, 각종 오염물질들에 의한 손상; 기계적인 손상, 즉, 드라이기, 고대(Curling irons), 롤기(Hot rollers) 등에 의한 손상; 화학적 손상, 즉, 퍼머(Permanent), 염색(Coloring), 탈색(Bleach) 등에 의한 손상을 들 수 있다.

위와 같은 여러 가지 요인들 중 화학적 요인에 의한 손상도 갈수록 늘어가고 있다. 즉, 개인의 개성이 중시되는 요즈음에는 자기 자신만의 독특한 스타일이나 색을 가지기 원하는 사람들이 많아지고 있기 때문이다. 이러한 욕구를 충족시키고자 남녀노소를 불문하고 퍼머나 염색을 하는 사람들이 늘고 있다. 덕분에 자신만의 개성이 표현되기는 하지만 잦은 퍼머나 염색으로 인하여 머리카락이 윤기를 잃고 푸석푸석해지고, 갈라지고 끊어지는 등 많은 문제점이 야기되고 있다. 또, 머리카락이 가늘어지고 약해지며, 더욱더 심각한 경우에는 탈모가 생길 수도 있다.

또한 유전학적인 요인과 각종 스트레스, 오염원 등에 의해서 다양한 탈모형 태가 나타나고 점차적으로 머리카락이 없어지는 계층이 늘어나고 있으며, 그 연령대도 낮아지는 현상이 현대화와 더불어 만연되고 있는 실정이다.

하지만, 현재까지 뚜렷하게 탈모를 방지할 수 있다거나, 혹은 탈모된 모발의 성장을 촉진시킬 수 있는 물질들의 개발이 미진한 상황이다. 따라서, 생체에 안전하고 사용이 간편할 뿐만 아니라, 제형 상으로도 안정성이 높은 우수한 탈모방지 및 발모 효과가 있는 제품의 개발이 절실히 요구되고 있는 실정이다.

이에 본 발명자들은 생체에 안전하고 제형 상 안정성이 높으며 또한 우수한 탈모방지 및 발모 개선 효과를 갖는 새로운 물질을 개발하기 위하여 예의 연구를 거듭한 결과, 기존의 항암, 항염, 항균효과가 있는 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출물이 자유 라디칼 소거 효과(Free radical scavenging effect), 리폭시게나아제(Lipoxygenase)활성 억제 효과 및 우수한 세포증식 효과 등을 나타내며 배합시 안정성 또한 뛰어나다는 것을 발견하고, 본 발명을 완성하게 되었다.

그리하여, 본 발명은 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출물을 함유하는 탈모방지와 발모 개선을 위한 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 또한 상기 조성물을 함유하는 샴푸조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 대황 추출물 0.1-30중량%, 백지 추출물 0.1-30중량%, 당귀 추출물 0.1-30중량%, 한련초 추출물 0.1-30중량% 및 만형자 추출물 0.1-30중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모 방지와 발모 개선을 위한 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한, 상기 조성물을 0.01~20중량% 함유하는 것을 특징으로 하는 샴푸 조성물을 제공한다.

이에 더하여, 본 발명은 건조된 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자를 세절하여 추출용 시료를 제조하는 단계; 물, 탄소수 1~3의 무수 또는 함수 알코올 및 에틸아세테이트로 이루어진 군에서 선택되는 추출용매를 상기 추출용 시료의 총 중량 대비 1~15배 첨가하는 단계;및 상기 추출용매가 첨가된 추출 시료에 대하여 냉각 콘덴서가 장착된 추출기를 이용하여 50~100℃, 3~24시간 동안 추출물을 추출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합추출물의 제조방법을 제공한다.

이하에서, 본 발명의 구성을 더욱 상세하게 설명한다.

우선, 본 발명은 대황 추출물 0.1-30중량%, 백지 추출물 0.1-30중량%, 당귀 추출물 0.1-30중량%, 한련초 추출물 0.1-30중량% 및 만형자 추출물 0.1-30중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모 방지와 발모 개선을 위한 조성물을 제공한다.

대황은 마디풀과(Polygonaceae) 식물로 장군풀이라고도 불리며 중국 서장, 청해지역이 원산지로 우리나라에서도 해발 1,000m이상의 고산지대에서 자생하며, 최근에는 전라북도지역에서 종자번식 및 근경 번식의 방법으로 재배가 이루어지고 있다. 대황의 뿌리와 뿌리줄기(근경)에는 안트라키논(Anthraquinone) 유도체인 크리소패닉 산(Chrysophanic acid), 크리소파놀(Chrysophanol), 알로에에모딘(Aloeemodin)과 그밖에 탄닌(Tannin), 프로시아니딘(Procyanidin) 등이 있으며, 한방에서는 장의 연동운동을 도와 변비치료를 목적으로 사용되는 한약재이고, 뿌리 추출물은 이질, 장티프스, 대장균 등에 대한 억균작용이 있는 것으로 알려져 있으며, 건위, 설사멎이 약으로도 사용되었다(약초의 성분과 이용, 과학 백과사전 출판사편, 일월서각, 1994 참조).

백지는 미나리과의 식물인 구릿대의 뿌리를 건조한 생약이다. 성분으로는 안젤리신(angelicine), 안젤리코톡신(angelicotoxin), 안젤리콜(angelical) 등이 있으며, 동의 및 중약에서는 코피, 치통, 소변 출혈 등을 치료하고 칼 따위의 베인 상처 치료, 기미와 흠집을 없애고 얼굴빛을 윤택하게 하고 고름을 제거하는데 사용하였다고 전해진다. 또한 민간에서는 중풍 및 찬 기운으로 인하여 발생한 병에 사용하였다(약초의 성분과 이용, 과학 백과사전 출판사편, 일월서각, 1994 참조).

당귀는 미나리과의 다년생 초본으로 참당귀, 일당귀 두 가지가 있으며, 참당귀의 학명은 Angelica gigas Nakai이고, 일당귀는 Angelica acutiloba kitagawa이다. 당귀의 성분으로는 데쿠르신(decursin), 데쿠르시놀(decursinol) 등과　 당귀의 고유 취의 성분인 부틸리디네프탈라이드(buthylidenephthalide) 등이 있다. 중약과 동의에서 혈행장애에 의한 부인병 질환 및 진통, 빈혈 등에 사용되는 약재로 알려 져 있다.

한련초는 국화과의 식물로서 성분으로는 캄프토테신(Camptothecine), 웨도로락틴(Wedelolactine), 니코틴(Nicotine) 등이 알려져 있다. 한련초는 항암, 항염, 항균, 항곰팡이 등의 효과가 알려져 있으며, 중약과 동의에서는 머리칼을 검게 염색, 상처 치료, 고름 제거, 지혈제, 암을 억제하고 응어리를 풀어주는 약재로 사용한다고 기록되어있다.

만형자는 마편초과의 식물인 순비기나무의 열매를 건조한 것을 약재로 사용하는 것이다. 성분으로는 알파피네(alpha-pinene), 캄핀(camphene), 터피놀 아세틸에스테르(terpinol aetylester), 디터핀알콜(diterpene alcohol), 비트리신(Vitricine), 비텍시카르핀(Vitexicarpin) 등이 알려져 있다. 중약과 동의에서는 탈모, 감기로 인한 발열, 눈이 아프고 어질어질한 증상, 류마티스성 근골통, 소화불량, 장염, 타박상으로 붓고 아픈 곳을 치료하는 등에 이용된다고 기록되어있다.

하기 실시예에서 볼 수 있는 바와 같이, 본 발명에 의한 대황, 백지, 당귀, 한련초 및 만형자의 혼합 추출물은 기존의 항암, 항염, 항균 효과뿐만 아니라, 자유 라디칼 소거 효과(Free radical scavenging effect), 리폭시게나아제(Lipoxygenase) 활성 억제 효과, 세포증식 효과 등을 나타내므로, 이와 같은 추출물을 이용하는 경우, 탈모 방지 및 발모 개선과 같은 효과를 얻을 수 있게 된다.

이에 더하여, 건조된 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자를 세절하여 추출용 시료를 제조하는 단계; 물, 탄소수 1~3의 무수 또는 함수 알코올 및 에틸아세테이트로 이루어진 군에서 선택되는 추출용매를 상기 추출용 시료의 총 중량 대비 1~15 배 첨가하는 단계;및 상기 추출용매가 첨가된 추출 시료에 대하여 냉각 콘덴서가 장착된 추출기를 이용하여 50~100℃, 3~24시간 동안 추출물을 추출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합추출물의 제조방법을 제공한다.

또한, 상기 추출 단계 전 또는 추출 단계 후에 디에틸에테르를 사용하여 가용성분을 제거하는 단계를 더 포함하는 것이 바람직하다. 이로써, 본 발명에 의한 추출방법의 경우, 더욱 정제된 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출물로 제조할 수 있게 된다.

상기와 같은 추출물의 제조방법에 있어서, 추출공정은 실온에서 추출시료에 추출용매를 가한 후, 침적시켜 추출하거나 추출기를 사용하여 추출할 수 있으며, 그 중에서도 유효 성분의 증발을 방지하기 위하여 냉각 콘덴서가 장착된 추출기를 사용하여 추출하는 것이 바람직하다. 이로써, 하기 실시 예에서처럼, 실온에서 침적하여 추출하는 경우보다 혼합추출물의 양을 더욱 많이 얻을 수 있게 된다.

상기와 같이 제조된 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출물은 예를 들면, 화장품, 비누, 샴푸, 린스 등에 첨가될 수 있으며, 그 중에서도 특히 샴푸 조성물에 포함되는 것이 바람직하다. 이때, 상기 샴푸 조성물은 상기와 같은 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 추출물로 이루어진 조성물을 0.01~20중량% 함유하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는, 0.1~10중량%이다.

이하 본 발명의 바람직한 실시예를 통하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 그러나, 본 실시예는 본 발명의 권리범위를 한정하는 것은 아니고 단지 예시로 서 제시된 것이다.

< 실시예 >

실시예 1 : 혼합추출물의 제조 1

대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자를 각각 100g씩 잘게 세절하여 70% 에틸알코올 1L에 넣고 실온에서 10일간 침적시켜 추출한 후 300 메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 100.74g을 얻었다.

실시예 2 : 혼합추출물의 제조 2

대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자를 각각 100g씩 잘게 세절하여 30% 에틸알코올 1L에 넣고 실온에서 10일간 침적시켜 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 106.41g을 얻었다.

실시예 3 : 혼합추출물의 제조 3

대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자를 각각 100g씩 잘게 세절하여 70% 에틸알코올 1L에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기를 이용하여 100℃에서 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지 로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 150.72g을 얻었다.

실시예 4 : 혼합추출물의 제조 4

대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자를 각각 100g씩 잘게 세절하여 30% 에틸알코올 1L에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기를 이용하여 100℃에서 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 125.84g을 얻었다.

실시예 5 : 혼합추출물의 제조 5

상기 실시예 3에서 제조된 혼합추출물에 디에틸에테르 1L를 가하여 잘 섞어준 후 두 층으로 완전히 분리시켰다. 이후, 하층인 수층에 다시 1L의 에틸아세테이트를 가하여 잘 섞어준 후 두 층으로 완전히 분리시켜 에틸아세테이트 층을 감압 농축기를 이용하여 50℃로 완전히 농축하여 건조 중량 18.1g을 얻었다.

실험예 1 : 혼합추출물에 대한 세포 독성 및 세포 증식 효과의 측정

상기 실시예 3에서 제조된 혼합추출물의 건조분말에 대하여 세포배양을 이용한 세포독성 및 세포 증식 효과를 측정하기 위하여, 세포증식 실험을 다음과 같은 방법으로 실시하였다. 배양하고 있는 세포(파이브로블라스트, 3T3)를 96 웰 마이크 로플레이트에 5,000세포/웰로 분주하여 30분간 항온조에서 배양하고, 시료를 농도별 각각 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1.0(%,W/V)로 투여하여 72시간 동안 배양하였다. 그리고 티아졸린 블루(Thiazoline blue)를 투여하고 4시간 동안 추가 배양을 하였다. 배양액을 모두 버리고 마이크로플레이트의 각 웰에 반응 정지액을 가하고 5분간 교반한 후, 570㎚에서 흡광도를 측정하였다. 대조군은 시료 주입량만큼 10% 우태아혈청(Fetal Bovine Serum, FBS) 배지를 투여하여 세포 성장의 최적 조건으로 동시배양을 하였으며, 대조군의 세포증식을 100%로 하고 시료 투입 실험군의 세포 증식율을 계산하였다.

세포증식 효과는 하기 수학식 1에 의해 계산하였고, 그 결과를 하기 표 1로 나타내었다.

추출물농도(%)	세포증식율(%)
추출물농도(%)	대조군	실시예 3에 의한 추출물
	100
0.01	-	106.6
0.05	-	111.2
0.1	-	125.8
0.5	-	136.9
1.0	-	157.1

상기 실험결과로부터, 본 발명에 의한 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출물의 우수한 세포증식 효과와 더불어 이들은 세포독성이 없는 안전한 것임을 확인할 수 있었다.

실험예 2 : 혼합추출물에 대한 자유 라디칼 소거효과 측정

상기 실시예 3에서 제조된 추출물에 대하여 자유라디칼(Free Radical) 소거 효과를 측정하였으며 대조군으로 케르세틴(Quercetin)을 사용하였다.

DPPH(1,1-디페닐-2피크릴-히드라질)법(참조:Blois.M.S.Nature 181, 1190, 1958)을 사용하여 실험을 수행하였으며, DPPH와 케르세틴은 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 0.2mM DPPH 메탄올 용액 1ml에 여러 농도(1, 5, 10, 20ppm)의 실시예 3에서 제조된 추출물을 첨가하고 잘 교반한 후 실온에서 10분간 반응시켰다. 대조군인 케르세틴의 경우에는 에탄올 또는 메탄올 용액 2ml를 첨가하고 잘 교반한 후 실온에서 10분간 반응시켰다. 그리고 517nm에서 각각의 흡광도를 측정하였으며, 이때 공시험으로 각 시료 대신 정제수를 사용하였다.

하기 수학식 2를 이용하여 자유라디칼 소거효과를 구하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

농도(ppm)	자유 라디칼 소거 효과(%)
농도(ppm)	실시예 3에 의한 추출물	케르세틴
0	0	0
1	6.7	9.4
5	23.7	28.5
10	50.5	53.6
20	93.9	94.8

상기 표 2에서 확인할 수 있는 바와 같이, 실시예 3에 의한 추출물의 자유라디칼 50% 소거 농도(SC₅₀)는 10ppm이고 케르세틴의 자유라디칼 50% 소거 농도(SC₅₀)는 9.9ppm으로 거의 동일한 효과가 있었다. 그러나 케르세틴이 단일 물질이며 이를 추출하여 그 순수 물질의 수득과 사용상의 안정성 및 비용을 고려한다면 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출물이 더 효과적이라는 것을 알 수 있다.

실험예 3 : 혼합추출물에 대한 리폭시게나아제 활성억제 효과 측정

상기 실시예 3에서 제조된 추출물에 대하여 리폭시게나아제(Lipoxygenase) 활성억제 효과를 측정하였으며 대조군으로 케르세틴을 사용하였다.

TBAS법을 사용하여 실험을 수행하였으며, 실험에 사용하는 리놀레산(Linoleic acid), 리폭시게나아제, 티오바르비투린산(Thiobarbituric acid, 이하 'TBA'라 함.) 및 케르세틴(Quercetin)은 시그마(SIGMA)사의 것을 사용하였다. 1mM 리놀레산 1ml에 여러 농도(1, 5, 10, 20, 30ppm)의 실시예 3에서 제조된 추출물, 그리고 케르세틴 0.05ml를 첨가하고 리폭시게나아제 0.95ml를 투여 후 잘 교반하고 25℃에서 10분간 반응시켰다. 그리고 트리클로로 아세트산(Trichloroacetic acid)을 0.5ml 투여하고 TBA를 1ml 첨가한 후 10분간 가열하고 얼음물에서 2~3분간 냉각시켜 반응을 종료시켰다. 반응이 종결된 반응액에 부탄올 2ml를 넣고 4000G로 5분간 원심분리한 후 535nm에서 흡광도를 측정하였으며, 이때 공시험으로 각 시료 대신 정제수를 사용하였다.

하기 수학식 3을 이용하여 리폭시게나아제 활성억제 효과를 구하였으며, 그 결과를 하기 표 3으로 나타내었다.

농도 (ppm)	활성억제효과(%)
농도 (ppm)	실시예 3에 의한 추출물	케르세틴
0	0	0
1.0	6.1	9.21
5.0	18.6	26.4
10.0	56.1	59.9
20	89.8	90.4
30	95.9	97.7

상기 표 3에서 확인할 수 있는 바와 같이, 실시예 3에 의하여 제조된 추출물의 경우, 리폭시게나아제 50% 활성억제 농도(IC₅₀)는 13.5ppm 이고, 대조군인 케르세틴은 11.8ppm으로 실시예 3인 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출보다는 약간의 좋은 효과가 있었다. 그러나 케르세틴이 단일 물질이며 이를 추출하여 그 순수 물질의 수득과 사용상의 안정성 및 비용을 고려한다면 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출물의 리폭시게나아제 활성억제 효과가 더 우수하며, 사용 및 생산 비용적인 면에서도 더 효과적이다는 것을 알 수 있었다.

실시예 6 : 혼합추출물이 함유된 샴푸의 제조

하기와 같은 조성의 샴푸를 일반적인 샴푸의 제조방법과 동일한 방법을 사용하여 제조하였다.

소듐 라우릴 설페이트(SDS) 40.00중량%

(sodium lauryl sulfate)

코카미드 디이에이 2.00중량%

(cocamide DEA)

코코아미도프로필 베타인 3.00중량%

(cocoamido propyl betain)

프로필렌글리콜 3.00중량%

폴리아크릴아마이드 0.50중량%

시트르산 0.10중량%

향 0.50중량%

NaCl 1.50중량%

EDTA 0.10중량%

정제수 39.30중량%

대황 추출물 2.00중량%

백지 추출물 2.00중량%

당귀 추출물 2.00중량%

한련초 추출물 2.00중량%

만형자 추출물 2.00중량%

실험예 4 : 항균실험( Halozone Test)

상기 실시예 6에 의하여 제조된 샴푸를 이용하여, 비듬균인 Malassezia fulful(ATCC 12078)에 대한 항균실험을 실시하였다. 대조군으로서, 본 발명에 의한 시료를 사용하지 아니한 채, 상기 비듬균을 접종하여 배양한 것을 사용하였다.

Malassezia fulful을 Sabouraud Dextrose Agar 배지에 도말하여 접종하고, 그 플레이트 배지 중앙에 본 발명에 의하여 제조된 샴푸를 올린후, 30±1℃에서, 2~3일간 배양하였다.

미생물 저지대의 크기는 하기 수학식 4에 의하여 계산하였다. 실험은 각각 3회를 실시하여 그 결과를 평균하였으며, 실험결과는 하기 표 4로 나타내었다.

W = (T-D)/2

여기서, W : 저지대의 폭(mm)

T : 시료와 미생물 저지대의 전체 지름(mm)

D : 시료의 지름(mm)

시험균주	시료	T(mm)	D(mm)	W(mm)	W ave.(mm)
Malassezia fulful(ATCC 12078)	시험군	75	20	27.5	27.5
		75	20	27.5
		75	20	27.5
	대조군	20	20	0.0	0.0
		20	20	0.0
		20	20	0.0

시험 결과로부터, 본 발명에 의하여 제조된 샴푸의 경우 27.5mm의 저지대를 형성하여, 비듬균에 대하여 항균효과를 지니고 있는 것을 알 수 있었다.

실험예 5 : 항균실험( Halozone Test)

상기 실시예 3에 의하여 제조된 혼합추출물과 상기 실시예 6에 의하여 제조된 샴푸를 사용하여 항균실험을 실시하였다. Propionibacterium acnes(KCTC 3314)를 Fluid Thioglycollate Medium(DIFCO)에 증균시켜 실험에 사용하였다. 준비된 Brewer's Anaerobic Agar(DIFCO) 위에 Propionibacterium acnes 균액을 멸균된 면봉으로 고르게 접종하고 배지 중앙에 멸균디스크를 놓고 증류수 21ml에 시료 3g을 용해시켜 준비된 시험용액 50ul을 떨어뜨린 후 35±1℃에서 Anaerobic Jar(DIFCO)를 이용하여 혐기적 조건에서 3일 동안 배양한 후 억제대(inhibition zone)의 지름을 측정하였다.

시험결과를 하기 표 5로 나타내었다.

시료	저지대의 폭(mm)
실시예 3에 의한 추출물	4.6
실시예 6에 의한 샴푸	5.5

상기 표 5의 결과로부터, 본 발명에 의한 혼합추출물과 혼합추출물을 함유하는 샴푸는 Propionibacterium acnes균에 대하여 각각 4.6mm 및 5.5mm의 저지대(inhibition zone)를 형성하여 항균효과가 있음이 확인되었다.

실험예 6 : 항균실험( Halozone Test)

상기 실시예 3에 의하여 제조된 추출물과 상기 실시예 6에 의하여 제조된 샴푸를 사용하여, 무좀균인 Trichophyton mentagrophytes(KCTC 6077)에 대한 항균실험을 실시하였다. 대조군으로서, 본 발명에 의한 시료를 사용하지 아니한 채, 상기 무좀균을 접종하여 배양한 것을 사용하였다.

Trichophyton mentagrophytes를 아가(Agar) 배지에 도말하여 접종하고, 그 플레이트 배지 중앙에 본 발명에 의하여 제조된 혼합추출물 및 혼합추출물이 함유된 샴푸를 올린후, 30±1℃에서, 2~3일간 배양하였다.

미생물 저지대의 크기는 상기 수학식 1에 의하여 계산하였다. 실험은 각각 3회를 실시하여 그 결과를 평균하였으며, 실험결과는 하기 표 6 및 표 7로 각각 나타내었다.

본 발명에 의한 혼합추출물을 사용한 항균실험

시험 균주	시료	T(mm)	D(mm)	W(mm)	W ave.(mm)
Trichophyton mentagrophyt es (KCTC 6077)	시험군	30	20	5	5.0
		30	20	5
		30	20	5
	대조군	20	20	0	0.0
		20	20	0
		20	20	0

본 발명에 의한 혼합추출물을 함유한 샴푸를 사용한 항균실험

시험 균주	시료	T(mm)	D(mm)	W(mm)	W ave.(mm)
Trichophyton mentagrophytes(KCTC 6077)	시험군	28	20	4	4.0
		28	20	4
		28	20	4
	대조군	20	20	0	0.0
		20	20	0
		20	20	0

상기 표 6 및 표 7의 결과로부터, 본 발명에 의하여 제조된 혼합추출물 및 혼합추출물을 함유한 샴푸의 경우, 무좀균에 대하여 항균효과가 있음을 확인할 수 있었다.

실험예 7 : 모발의 큐티클층 비교 실험

상기 실시예 6에 의하여 제조된 샴푸를 사용한 경우, 모발의 큐티클층을 그 처리 전과 처리 후에 대해서 전자현미경 사진을 통해서 비교하였다. 샴푸 처리를 하기 전의 전자현미경 사진과, 3회 샴푸로 세척처리한 후의 전자현미경 사진을 각각 도 1a 및 도 1b에 나타내었다.

실험결과로부터, 본 발명에 의한 샴푸 처리 후, 모발의 큐티클층이 매우 균일하게 정돈되어 있음을 확인할 수 있었다.

실험예 8 : 모발 굵기 비교 실험

상기 실시예 6에 의하여 제조된 혼합추출물이 함유된 샴푸와 시중에서 구할 수 있는 한방추출물을 함유한 샴푸에 각각 모발을 20분 동안 담근 후 모발의 굵기를 측정하였다. 이때, 모발의 굵기 측정은 모발 굵기 측정기(ID-C112BS)를 사용하였다. 측정결과를 각각 표 8 및 표 9에 나타내었다.

본 발명에 의한 혼합추출물이 함유된 샴푸를 처리한 경우

샘플＼위치	5cm		7cm		10cm		13cm		15cm
	굵기 (mm)	증가율 (%)	굵기 (mm)	증가율 (%)	굵기 (mm)	증가율(%)	굵기 (mm)	증가율(%)	굵기 (mm)	증가율(%)
1(전)	0.079	5.06	0.081	2.47	0.083	2.41	0.084	2.38	0.081	2.47
1(후)	0.083		0.083		0.085		0.086		0.083
2(전)	0.085	2.35	0.084	3.57	0.088	2.27	0.088	2.27	0.093	2.15
2(후)	0.087		0.087		0.090		0.090		0.095
3(전)	0.102	2.94	0.106	3.77	0.102	2.94	0.105	2.86	0.105	-
3(후)	0.105		0.110		0.105		0.108		0.104
4(전)	0.084	5.95	0.084	4.76	0.085	4.70	0.090	3.33	0.100	1.00
4(후)	0.089		0.088		0.089		0.093		0.101
5(전)	0.083	3.61	0.085	3.53	0.086	3.49	0.092	3.26	0.091	4.40
5(후)	0.086		0.088		0.089		0.095		0.095

. 위치(cm) : 모발 최하단 부분부터의 길이

. 샘플 : 전(담그기 전)/후(담근 후)

일반적인 한방 추출물이 함유된 샴푸를 처리한 경우

샘플＼위치	5cm	7cm	10cm	13cm	15cm	비고
샘플＼위치	굵기(mm)	굵기(mm)	굵기(mm)	굵기(mm)	굵기(mm)	비고
1(전)	0.075	0.074	0.081	0.076	0.069	증감 변화 없음.
1(후)	0.074	0.074	0.080	0.074	0.069
2(전)	0.092	0.090	0.090	0.090	0.083
2(후)	0.093	0.090	0.091	0.090	0.083
3(전)	0.090	0.097	0.098	0.095	0.092
3(후)	0.090	0.096	0.097	0.095	0.092

. 위치(cm) : 모발 최하단 부분부터의 길이

. 샘플 : 전(담그기 전)/후(담근 후)

상기 표 8 및 표 9의 결과로부터, 일반적인 한방추출물이 함유된 샴푸에 담근 경우에는 모발 굵기의 변화가 거의 없었지만, 본 발명에 의한 혼합추출물이 함유된 샴푸에 담근 경우에는 모발의 굵기가 평균적으로 3.25% 증가하였음을 알 수 있었다.

실험예 9 : 모발의 인장 강도 비교 실험

상기 실시예 3에 의하여 제조된 혼합추출물이 함유된 용액에 모발을 20분 동안 담근 경우와 아무런 처리도 하지 않은 모발의 인장 강도를 측정하였다. 이때, 모발의 인장 강도 측정은 디지털 포스 게이지(DPS-5R)를 사용하였다. 측정결과를 표 10에 나타내었다.

수(개)＼샘플	무처리(Kg)	혼합추출물 처리(Kg)
1	0.101	0.129
2	0.095	0.115
3	0.097	0.126
4	0.100	0.115
5	0.095	0.115
6	0.094	0.122
7	0.086	0.126
8	0.109	0.121
9	0.100	0.120
10	0.097	0.155
평균	0.0974	0.1204

상기 표 10의 결과로부터, 모발인장강도(모발이 끊어질 때까지 필요한 힘)를 실험한 결과 본 발명에 의한 혼합추출물 함유 용액에 20분 담근 후 측정한 모발이 미처리한 모발의 인장 강도보다 평균 24% 정도 증가되었다(샴푸 5회 이상 사용시 실험결과와 동일).

실험예 10 : 모발의 무게 비교 실험

상기 실시예 3에 의하여 제조된 혼합추출물이 함유된 용액에 모발을 20분 동안 담그기 전후의 모발의 무게를 측정하였다. 측정결과를 표 11에 나타내었다.

	처리전(g)	처리후(g)	증가량(g)	증가율(%)
1	0.7033	0.7186	0.0153	2.17
2	0.7375	0.7505	0.0130	1.76
3	0.6673	0.6818	0.0145	2.17

상기 표 11로부터, 모발 무게를 측정한 결과, 본 발명에 의한 혼합추출물에 20분 담근 후 측정한 모발무게가, 미처리한 모발 무게에 비하여 평균 2.4% 증가하였음을 알 수 있었다(샴푸 5회 이상 사용한 실험 결과와 동일).

실험예 11 : 두피 비교 실험

상기 실시예 6에 의하여 제조된 샴푸와 시중에서 판매되는 한방추출물 함유 샴푸로 각각 2회 세척처리한 후의 두피를 전자현미경 사진을 통해서 비교하였다. 일반 한방추출물 함유 샴푸를 사용한 후 두피의 사진과 본 발명에 의한 샴푸를 사용한 후 두피의 사진을 각각 도 2a 및 도 2b에 나타내었다.

실험 결과로부터, 본 발명에 의한 샴푸 처리 후, 두피의 피지와 비듬이 깨끗하게 제거된 것을 확인할 수 있었다.

상기한 바와 같이, 본 발명에 의한 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합 추출물의 경우, 탈모의 지표가 되는 자유라디칼의 소거 효과(Free radical scavenging effect)와 리폭시게나아제(Lipoxygenase) 활성 억제 효과가 우수하므로, 상기 추출물에 의하는 경우, 탈모방지 효과를 얻을 수 있게 된다.

또한, 본 발명에 의한 혼합추출물의 경우, 세포 독성이 없고, 세포증식에 있어서 우수한 효과를 나타내므로, 발모 효과가 뛰어나며, 각종 제형으로 제조시 배합 안정성 또한 뛰어나다.

나아가, 본 발명에 의하여 제조된 샴푸를 사용하는 경우, 모발의 큐티클 층이 정돈될 뿐만 아니라, 모발의 굵기, 인장 강도 및 무게가 증가하므로 탄력 있고, 건강한 모발을 오랫동안 유지할 수 있게 된다. 이에 더하여, 본 발명에 의하여 제조된 샴푸를 사용하는 경우, 비듬균, 여드름균, 무좀균 등에 대한 항균효과가 우수하고, 두피의 피지와 비듬이 깨끗하게 제거될 수 있어 우수한 탈모방지 효과를 얻을 수 있게 된다.

Claims

대황 추출물 0.1-30중량%, 백지 추출물 0.1-30중량%, 당귀 추출물 0.1-30중량%, 한련초 추출물 0.1-30중량% 및 만형자 추출물 0.1-30중량%를 포함하는 것을 특징으로 하는 탈모 방지와 발모 개선을 위한 조성물.
제 1 항에 의한 조성물을 0.01~20중량% 함유하는 것을 특징으로 하는 샴푸 조성물.
건조된 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자를 세절하여 추출용 시료를 제조하는 단계;

물, 탄소수 1~3의 무수 또는 함수 알코올 및 에틸아세테이트로 이루어진 군에서 선택되는 추출용매를 상기 추출용 시료의 총 중량 대비 1~15배 첨가하는 단계;및

상기 추출용매가 첨가된 추출 시료에 대하여 냉각 콘덴서가 장착된 추출기를 이용하여 50~100℃, 3~24시간 동안 추출물을 추출하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 대황, 백지, 당귀, 한련초, 만형자 혼합추출물의 제조방법.
제 3 항에 있어서,

상기 추출 단계 전 또는 추출 단계 후에 디에틸에테르를 사용하여 가용성분을 제거하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 혼합추출물의 제조방법.