KR100590167B1

KR100590167B1 - 항산화에 유효한 조성물 및 그의 제조방법

Info

Publication number: KR100590167B1
Application number: KR1020050009441A
Authority: KR
Inventors: 임광세; 허철성; 안영태; 김형수
Original assignee: 주식회사한국야쿠르트
Priority date: 2005-02-02
Filing date: 2005-02-02
Publication date: 2006-06-14

Abstract

본 발명은 체내 항산화에 유효한 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 항산화 효과가 있는 토마토 추출물, 브로콜리 추출물, 그리고 파인애플 추출물을 혼합한 것을 유효성분으로 함유하여 향상된 항산화 효과를 나타내는 기능성 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.

상기 본 발명의 조성물은 상기 각 성분을 적절한 배합비율로 혼합 사용함으로써 각 성분을 개별적으로 사용했을 때보다도 상승적인 효과가 있는 것으로, 별도로 항산화제를 복용하지 않아도 맛, 향미가 풍부한 상기 본 발명의 조성물을 식품 형태로 간편하게 식, 음용할 수 있으며 항산화제에 비견하여도 체내 항산화 효과가 우수한 것을 특징으로 한다.

간장, 보호, 알코올, 추출물, 토마토, 브로콜리, 파인애플, 항산화

Description

항산화에 유효한 조성물 및 그의 제조방법{The Composition for Antioxidation and Processing Method of it}

도1은 본 발명의 조성물에 의한 DPPH 자유기 소거능 효과를 나타낸 그래프

도2는 본 발명의 조성물에 의한 하이드록실 라디칼 소거능 효과를 나타낸 그래프

도3a는 본 발명의 조성물의 만성 알코올 섭취시 GOT(AST) 감소효과를 나타낸 그래프

도3b는 본 발명의 조성물의 만성 알코올 섭취시 GPT(ALT) 감소효과를 나타낸 그래프

삭제

도4는 본 발명의 조성물의 만성 알코올 섭취시 수퍼옥사이드 디스뮤타제의 활성 감소에 의한 항산화능 증가효과를 나타낸 그래프

도5는 본 발명의 조성물의 만성 알코올 섭취시 간조직내 과산화 지질 감소효과를 나타낸 그래프

산소는 지구상에서 가장 많은 원소로서(53.8%) 건조 대기중의 21%를 차지하고 있으며 우리 몸은 산소를 호흡하여 에너지를 획득한다. 그러나 이와 같이 생명 유지에 절대적으로 필요한 산소이지만 안정한 분자상태인 기저삼중항산소(ground state triplet oxygen)가 체내 효소계, 환원대사, 화학약품, 공해물질, 광화학반응 등의 각종 물리적 화학적, 환경적 요인 등에 의하여 superoxide radical(O₂-), hydroxyl radical(HO·), hydrogen peroxide (H₂O₂), singlet oxygen(¹O₂)과 같은 반응성이 매우 큰 자유기(free radical)인 활성산소(active oxygen)로 전환되면 생체에 치명적인 산소독성을 일으키는 양면성을 지니고 있다. 또한 우리 몸은 수없이 많은 산화적 손상 속에 노출되어 있다. 대표적인 것이 활성산소, 혹은 유해산소라고 하는 것인데 우리가 생명을 유지하기 위해 먹고 숨을 쉬는 한은 부득이 하게 우리 몸에서 생길 수밖에 없는 물질이다. 이들 활성산소는 세포구성 성분들인 지질, 단백질, 당, DNA 등과 반응하여 파괴작용을 함으로써 노화는 물론 암을 비롯하여 뇌졸중, 파킨슨씨병 등의 뇌질환과 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부손상, 염증, 류마치스, 자가면역질환 등의 각종 질병을 일으키는 원인이 되고 있다. 또한 지질과산화 반응 결과 생성되는 체내 지질 과산화물도 세포에 대한 산화적 파괴로 인한 각종 기능장애를 야기함으로써 노화 등 각종 질병의 원인이 되기도 한다. 특히 약물, 독극물, 또는 음주 등의 산화적 반응을 야기하는 화학물질의 섭취에 의한 산화작용은 간에 손상을 일으켜 심하게는 간경변(肝硬變, Cirrhosis)을 일으키게 된다.

간은 인체에서 가장 큰 장기로서, 간의 주요 기능은 체외에서 유입되거나 체내에서 생성된 각종 물질들을 가공 처리하고 중요한 물질들을 합성 공급하는 것이다. 근래 알코올 소비량 증가와 함께 습관성 음주로 인한 알코올성 간질환이 상당히 늘고 있다.

알코올에 의한 간 손상의 기전으로 여러 가지 원인들이 있는데 그중에서, 알코올의 체내 대사 과정중에 생성되는 대사산물인 아세트알데하이드의 직접적인 영향이나 대사과정에서 생성되는 반응성이 강한 자유기(free radical)의 작용으로 지질과산화가 유도되기 때문이라는 가설이 많은 신뢰를 받고 있다. 알코올 산화에 의해 생성되는 대사산물인 아세트알데하이드는 반응성이 강한 독성물질로 단백질과 결합하여 효소 활성 저해, 지질과 산화의 증가로 미토콘드리아에 손상, 글루타치온 결핍 초래 및 피리독신, 비타민 A, 아연 및 셀레늄 등의 결핍을 초래, 투불린 중합 저해에 의한 단백질 분비 및 이동 저해 등을 발생하는 간손상을 유발하는 주요 인자로 지적되고 있다. 또한 아세트알데하이드에 의한 자유기(free radical) 생성은 간의 콜라겐(collagen) 합성을 촉진시키므로, 이는 만성적인 알코올 섭취자에 있어 간 섬유화(간경변)의 원인이 되는 것으로 보고되고 있다.

이처럼 다양한 질병의 원인이 되고 있는 자유기(free radical) 즉, 활성산소로 인해 우리 몸이 노화되고 손상되는 것을 막아주는 물질을 항산화제(antioxidants)라고 한다. 항산화제는 인체 내에 자연적으로 존재하는 것과 외부에서 투여해 주는 것으로 나눌 수 있는데 인체 내에 자연적으로 존재하는 항산화제로는 SOD, 글루타치온, 페록시다제 등의 효소가 있으며 외부에서 투여해 주는 것으로 비타민 E, C, 베타카로틴이 있으며 미네랄 중에는 셀레니움이 대표적이다. 이러한 항산화제는 약물로 복용하는 것도 가능하지만 장기간 과량의 항산화제를 투여했을 때 발생할 수 있는 부작용에 대해 주의해야 할 필요가 있다. 따라서 항산화제를 약물로 투여하는 것보다는 자연식품을 통해서 섭취하는 것이 바람직하며 항산화 효과가 있는 자연식품으로 토마토, 브로콜리, 파인애플 등이 있다. 토마토, 브로콜리에 함유된 β카로틴은 같은 비타민류 중에서도 항산화력이 월등하게 강하고, 인체내 해독효소를 가지고 있지 않은 일중항산소를 제거하는 작용이 있으며, 토마토, 브로콜리, 파인애플에 모두 함유된 비타민C는 항산화작용, 자유기 포착작용이 있어 암을 비롯한 각종 성인병과 노화를 예방하는 작용이 있다. 이처럼 자연식품인 토마토, 브로콜리, 파인애플은 항산화 효과가 우수하지만 이를 개별로 사용할 경우에는 각 항산화 효능에 한계가 있다.

이에 본 발명은 항산화 효과가 있는 토마토 추출물, 브로콜리 추출물, 그리고 파인애플 추출물을 유효성분으로 함유하여 상기 각 성분을 적절한 배합비율로 혼합 사용함으로써 각 성분을 개별적으로 사용했을 때보다도 상승적인 효과가 있는 새로운 형태의 체내 항산화에 유효한 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한 별도로 항산화제를 복용하지 않아도 맛, 향미가 풍부한 상기 본 발명의 조성물을 식품 형태로 간편하게 식, 음용할 수 있으며 약품인 항산화제에 비견하여도 체내 항산화 효과가 우수한 기능성 조성물 및 그 제조방법을 제공한다.

본 발명은 토마토 추출물 70-90중량%, 브로콜리 추출물 5-15중량%, 파인애플 추출물 5-15중량%로 이루어진 항산화에 유효한 조성물을 제공하는 것을 특징으로 한다.

바람직하게는 상기 토마토 추출물 80-90중량%, 상기 브로콜리 추출물 5-10중량%, 상기 파인애플 추출물 5-10중량%인 것을 특징으로 한다.

보다 바람직하게는 상기 토마토 추출물 85-90중량%, 상기 브로콜리 추출물 5-7.5중량%, 상기 파인애플 추출물 5-7.5중량%인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 목적은 토마토 열매 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 무명천으로 여과하여 125g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 토마토 추출물 70-90중량%와, 브로콜리 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 2시간 동안 정치시킨 다음 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 냉동건조하여 1.8g을 수득한 브로콜리 추출물 5-15중량%와, 파인애플 100g을 세절한 다음 물 100g과 혼합하고 믹서로 분쇄한 후 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 파인애플 추출물 5-15중량%를 혼합하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화에 유효한 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.

바람직하게는 토마토 열매 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 무명천으로 여과하여 125g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 토마토 추출물 80-90중량%와, 브로콜리 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 2시간 동안 정치시킨 다음 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 냉동건조하여 1.8g을 수득한 브로콜리 추출물 5-10중량%와, 파인애플 100g을 세절한 다음 물 100g과 혼합하고 믹서로 분쇄한 후 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 파인애플 추출물 5-10중량%를 혼합하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화에 유효한 조성물의 제조방법을 제공한다.

또한 바람직하게는 토마토 열매 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 무명천으로 여과하여 125g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 토마토 추출물 85-90중량%와, 브로콜리 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 2시간 동안 정치시킨 다음 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 냉동건조하여 1.8g을 수득한 브로콜리 추출물 5-7.5중량%와, 파인애플 100g을 세절한 다음 물 100g과 혼합하고 믹서로 분쇄한 후 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 파인애플 추출물 5-7.5중량%를 혼합하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화에 유효한 조성물의 제조방법을 제공한다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 항산화에 유효한 조성물을 유효성분으로 함 유하는 것을 특징으로 하는 발효유식품, 기능성 음료 및 건강보조식품을 제공하는 것이다.

또한 본 발명의 또 다른 목적은 상기 항산화에 유효한 조성물의 제조방법에 의해 제조되는 항산화에 유효한 조성물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 발효유식품, 기능성 음료 및 건강보조식품을 제공하는 것이다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 토마토 추출물, 브로콜리 추출물, 그리고 파인애플 추출물을 유효성분을 함유하는 것을 특징으로 한다.

여기서, 토마토(Lycopersicon esculentum Mill)는 남아메리카 서부 고원지대 원산으로 열매를 식용하거나 민간에서 고혈압·야맹증·당뇨 등에 약으로 쓴다. 열매의 주성분은 95％가 수분이며, 단백질 0.7％, 지방 0.1％, 탄수화물 3.3％, 셀룰로오스 0.4％, 회분 0.5％가 함유되어 있다. 열매 100g당 카로틴 390

g, 비타민 C 20mg, 비타민 B₁0.05mg, 비타민 B₂0.03mg 외에 비타민 B

, 칼륨, 인, 망간, 루틴, 니아신 등이 함유되어 있다. 이외에도 라이코펜, 퀘세틴(quercetin), 파이토엔(phytoene), 파이토플루엔(phytofluene), 사이클로이코펜(cycloycopene), 살리실산염(salicylates), 그리고 토마틴(tomatine)과 같은 다양한 생리활성 물질들이 함유되어 있다. 특히 토마토는 카로티노이드와 비타민 E보다 항산화력이 우수하고 또한 항암작용이 우수한 라이코펜(lycopene)의 주요 공급원으로 알려져 있으며, 미국인들의 경우 약 80%의 라이코펜을 토마토나 토마토 가공식품들로부터 공급받는 것으로 알려져 있다. 플라본(flavone)류에 속하는 퀘세틴(quercetin)은 남성호르몬인 안드로겐 수용체의 발현을 저지함으로써 전립선암의 예방에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

상기 브로콜리(Brassica oleracea var. italica Plenck)는 지중해연안이 원산지로, 꽃잎양배추라고 불리우는 컬리플라워(cauliflower)의 일종이며 어린 싹과 줄기를 식용으로 한다. 브로콜리는 녹황색채소 가운데 가장 영양가가 높은 작물로 브로콜리 100g당 비타민C 114mg, 카로틴 1.9mg, 칼륨 164mg, 칼슘 150mg 등이 함유되어 있다. 철분도 다른 채소에 비해 두배나 더 많이 들어 있다. 비타민 C 함유량은 레몬의 2배, 감자의 7배로 야채 중에서도 두드러지게 많은 편이다. 그 밖에도 비타민 A를 비롯하여 비타민 B1, B2와 칼륨, 인, 칼슘 등의 미네랄이 시금치 못지않게 많이 들어 있다. 한편, 브로콜리에 풍부하게 함유되어 있는 글루코시놀레이트 등은 항암(抗癌)작용이 있으며, 특히 결장암(結腸癌) 억제에는 양배추보다도 탁월하다는 최근의 연구결과도 있다. 특히, 최근에 브로콜리의 glucosinolate의 효소적 가수분해산물 중의 하나인 sulforaphane이 체내 glutathione S-transferase 등의 활성을 선택적으로 유도하여 발암에 대해서 방어작용을 나타내는 것으로 알려져 있다.

상기 파인애플(Ananas comosus)은 쌍떡잎식물 분질배유목 파인애플과의 상록 여러해살이풀로서 파인애플이라는 이름은 솔방울과 비슷한 열매라는 뜻에서 유래하였다. 중앙아메리카와 남아메리카 북부 원산으로서 열매는 즙이 많고 수크로오스가 10%, 시트르산이 1% 가량이 들어 있으며 상쾌한 신맛과 단맛이 있다. 비타민 A, B, C가 풍부하며, 특히 비타민C가 과실 중 가장 많은데, 100g 중에 60mg이 들어 있다. 파인애플에는 브로멜린(bromelain)이라고 하는 단백질 분해효소도 들어 있어서 육류의 소화를 돕는다. 또한 브로멜린은 혈청(serum)의 fibrin과 fibrinogen을 가수분해하여 혈액이 응고되는 것을 억제해주는 역할을 하는 것으로 알려져 있다.

이하, 본 발명의 구성을 실시예를 통하여 좀더 상세히 설명한다.

실시예 1.

본 실시예에서는 토마토, 브로콜리 및 파인애플을 사용하여 각각의 추출물을 제조하였다.

물로 잘 세척한 토마토 열매 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서를 이용하여 분쇄하고 무명천으로 여과하여 토마토 여액 125g을 수득하였다. 이것을 분무건조하여 최종적으로 4.5g의 토마토 추출물을 수득하였다.

한편, 뜨거운 물로 잘 세척한 브로콜리 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서를 이용하여 분쇄하고 2시간 동안 정치시킨 다음 무명천으로 여과하여 브로콜리 여액 100g을 수득하였다. 이것을 냉동건조하여 최종적으로 브로콜리 추출물 1.8g을 수득하였다.

파인애플 추출물은 냉수로 잘 세척한 파인애플 100g을 세절한 다음 물 100g과 혼합하고 믹서를 이용하여 분쇄한 후 무명천으로 여과하여 파인애플 여액 100g을 수득하였다. 이것을 분무건조하여 최종적으로 파인애플 추출물 4.5g을 수득하였다.

실시예2 내지 실시예6

실시예1을 여러 번 반복하여 수득한 토마토 추출물, 브로콜리 추출물 및 파인애플 추출물을 하기 표 1에 나타낸 함량으로 혼합하여 본 발명의 항산화에 유효한 조성물(이하, "LS"라고 명칭)을 제조하였다.

가장 바람직하게는 전체중량에 대해 토마토 추출물 90중량%, 브로콜리 추출물 5중량%, 파인애플 추출물 5중량%일 때 항산화 효과가 극대화되었다.

표1

	토마토 추출물(중량%)	브로콜리 추출물(중량%)	파인애플 추출물(중량%)
실시예2	70	15	15
실시예3	75	12.5	12.5
실시예4	80	10	10
실시예5	85	7.5	7.5
실시예6	90	5	5

이하, 본 발명의 조성물의 약리작용은 하기 실험의 결과에 의해서 예시되며, 이 실험은 본 발명의 조성물 성분을 각각 단독 또는 혼합 사용하여 행해졌다.

시험예 1(DPPH 자유기 소거능 효과 시험)

DPPH(2,2-디페닐-1-피크릴하이드라질, Sigma)를 80% 메탄올에 최종 농도가 100μM이 되도록 첨가하여 DPPH 메탄올 용액을 제조하였다. 시료 100㎕를 2.9ml의 DPPH 메탄올 용액에 첨가하고 완전히 혼합한 다음 23℃ 암실에서 30분간 반응시키고, 반응이 완료된 후 517nm에서 시료의 흡광도를 측정하였다. 대조군은 50% 메탄올 용액을 사용하였으며, DPPH 메탄올 용액은 시험 당일에 제조하여 사용하였다. 각 군의 DPPH 자유기 소거능(%)은 다음 식과 같다[Kim 등. Vitamin C equivalent antioxidant capacity (VCEVC) of phenolic phytochemicals. J. Agric. Food Chem. 50: 3713-3717 (2002)].

DPPH 자유기 소거능(%) = 100 × [1-(시료의 흡광도/대조군의 흡광도)]

파인애플추출물, 브로콜리추출물, 토마토추출물이 0.1mg/ml, 0.05mg/ml일 때의 DPPH 자유기 소거능(%)을 조성물군(LS) 및 합성 항산화제 BHA(t-부틸하이드록시아니솔)가 0.1mg/ml, 0.05mg/ml일 경우와 비교하여 도 1에 나타내었다.

도 1에 도시된 바와 같이, 본 발명의 조성물은 파인애플추출물, 브로콜리추출물, 토마토추출물을 별도로 사용하는 경우보다 DPPH 자유기 소거능(%)이 향상된 것으로 나타났다. DPPH 자유기 소거능(%)의 향상 효과는 항산화 효과가 향상된 것을 의미하므로 결국 추출물을 개별로 사용하는 것보다 혼합 사용 시 항산화 효과가 향상됨을 알 수 있다.

시험예 2(하이드록실 라디칼 소거능 효과 시험)

0.2ml의 0.1mM FeSO₄(황산철)/0.1mM EDTAㆍ2Na(에틸렌디아민테트라아세트산 2나트륨염), 0.2ml의 10mM 2-데옥시리보스, 0.2ml의 시료 그리고 1.2ml의 0.1M 인삼염 완충용액(pH 7,4)을 혼합한 후 0.2ml의 10mM 과산화수소를 첨가하고 37℃에서 4시간 반응시킨 후 1ml의 2.8% 트리클로로아세트산(TCA) 용액을 첨가하여 반응을 중지시키고 1ml의 1% TBA(티오바르비투르산)/50mM NaOH(수산화나트륨)를 첨가하여 100℃에서 10분간 가열시킨 후 급속 냉각하고 532nm에서 시료의 흡광도를 측정하였 다. 하이드록실(OH) 라디칼 소거능(%)은 다음과 같다[Chung 등. Hydroxyl radical-scavenging effect of spice and scavenger from brown mustard (Brassica nigra). Biosci. Biotech. Biochem. 61: 118-123 (1997)].

하이드록실 라디칼 소거능(%)= [1-(A_S-A_O)/(A_C-A_O)]

여기서 A_S는 시료, A_C는 증류수의 흡광도이고, A_O는 시료를 첨가하기 전에 먼저 트리클로로아세트산(TCA) 용액을 첨가하여 반응을 중지시킨 후 시료와 동일한 방법으로 측정한 흡광도이다.

파인애플추출물, 브로콜리추출물, 토마토추출물의 하이드록실 라디칼 소거능(%)을 조성물군(LS) 및 합성 항산화제 BHA(t-부틸하이드록시아니솔) 하이드록실 라디칼 소거능(%)과 비교하여 도 2에 나타내었다.

도 2에 도시된 바와 같이, 본 발명의 조성물은 파인애플추출물, 브로콜리추출물, 토마토추출물을 별도로 사용하는 경우보다 하이드록실 라디칼 소거능(%)이 향상된 것으로 나타났다. 하이드록실 라디칼 소거능(%)의 향상 효과는 항산화 효과가 향상된 것을 의미하므로 결국 추출물을 개별로 사용하는 것보다 혼합 사용 시 항산화 효과가 향상됨을 알 수 있다.

시험예 3(간효소 GOT, GPT 수치 감소효과 시험)

5주령의 스프라그-돌리(Sprague-Dawley, SD)계 웅성 쥐(대한 바이오링크 주식회사)를 실온 25±1℃, 습도 50±5% 일정한 조건에서 고형사료(CJ 주식회사 제 품)로 1주간 예비사육한 다음 시험용으로 하였다. 1주간 예비사육한 실험동물을 대조군, 알코올군, 그리고 조성물군으로 나누었으며, 각 군은 각각 6마리로 하였다. 대조군과 알코올군에는 2주간 인산완충식염수(PBS, 5ml/kg B.W.)를 강제 경구투여하였고, 조성물군에는 본 발명의 조성물(5ml/kg B.W.)을 2주간 투여하였으며, 알코올군과 조성물군에는 각각 상기 인산완충식염수와 조성물을 투여하는 동시에 22% 알코올 용액(3g/kg B.W.)을 2주간 강제 경구투여하였다. 시험 14일째에 마지막 투여 후 모든 군의 실험동물을 24시간 절식시키고 에테르 마취 하에서 복부정중선을 따라 개복한 다음 복부대동맥으로부터 채혈하여 실혈사시켰다. 채혈한 혈액은 혈액 분석기(Prime, BioSED)를 이용하여 GOT(AST)와 GPT(ALT)를 측정한 후 그 결과를 각각 도 3a, 도 3b에 나타내었다. 그 결과, 조성물군(LS)에서 알코올군에 비해 GOT 및 GPT 수치가 감소한 것을 알 수 있으며, 이러한 간효소수치(GOP, GPT)의 감소는 조성물의 알코올에 대한 간보호 효과가 향상되었음을 나타낸다.

시험예 4(간조직내 SOD의 활성감소에 의한 항산화능 증가효과 시험)

상기 시험예 3에 준하여 해당 물질을 강제투여시킨 후 실혈사시킨 모든 군의 실험동물의 간을 4℃ 생리식염수로 관류시켜 간조직 내에서 남아있는 혈액을 제거한 다음 적출하였다. 적출한 간조직의 일정량에 4배의 0.25M 수크로오스 용액(0.5mM EDTA 함유)을 가하여 얼음 수조에서 글라스 테플론 호모게나이저(glass teflon homogenizer)로 균질액을 만들었다. 이 균질액을 600× g에서 10분간 원심분리하여 핵 및 미마쇄부분을 제거하고 상징액을 10,000× g에서 20분간 원심분리하였다. 다시 미토콘드리아 분획을 제거한 상징액을 105,000× g에서 1시간 동안 초원심분리하여 상징액(사이토졸 분획)을 얻었다. 사이토졸 분획은 수퍼옥사이드 디스뮤타제(SOD) 활성 측정에 사용하였다. 효소활성에 사용한 효소액(사이토졸 분핵) 내 단백질 함량은 단백질 측정키트(Protein assay kit, Bio-rad)를 이용하여 측정하였다.

삭제

수퍼옥사이드 디스뮤타제(SOD) 활성은 다음과 같이 측정하였다. 50mM 트리스 염산(Tris HCl) 완충용액(10mM EDTA 함유, pH 8.6) 2.8ml과 15mM의 피로갈롤(pyrogallol) 0.1ml을 혼합하여 5℃에서 5분간 전배양 시킨 후 사이토졸 액 0.1ml를 가하여 최종 반응액이 3.0ml가 되도록 하였다. 이 반응액을 25℃에서 10분간 반응시킨 다음 1N 염산 0.1ml를 가하여 반응을 종료시키고 440nm에서 흡광도의 변화를 측정하였다. 효소활성의 unit는 효소액을 넣지 않고 반응시킨 15mM 피로갈롤 용액의 자동산화를 50% 억제하는 단백질의 양(U/mg of protein)으로 정하여[Marklund와 Marklund. Eur. J. Biochem. 47:469-474 (1974)], 대조군, 알코올군 및 조성물군(LS)의 측정 결과를 비교하여 도 4에 나타내었다.

그 결과 대조군의 경우 3.6U/mg, 조성물군에서 4.4U/mg, 알코올군에서 5.2U/mg으로 알코올 투여에 의해 간조직내 증가된 수퍼옥사이드의 분해를 위해 높아진 효소활성이 조성물군의 경우, 알코올군 보다 낮은 수치를 나타내어 간조직내 항산화능이 향상되었음을 알 수 있었다.

시험예 5(간조직내 과산화 지질 감소효과 시험)

간 균질액 0.1ml에 8.1% SDS(소디움 도데실 설페이트) 0.2ml, 20% 아세트산 완충용액(pH 3.5) 1.5ml, 0.8% 티오바르비투르산 용액 1.5ml를 넣고 증류수를 넣어 반응용액을 4ml로 조절한 뒤 95℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료된 후 실온으로 식힌 후 증류수 1ml와 부탄올:피리딘(15:1) 혼합용액 5ml를 첨가하여 혼합한 다음 4,000rpm에서 10분간 원심분리한 후 532nm에서 흡광도를 측정하였다. 1,1,3,3-테트라에톡시프로판을 표준물질로 사용하여 표준곡선을 작성하고 이것으로부터 MDA(말론디알데하이드)의 농도(nmoles MDA/g of liver)로 환산하여[Okawa 등. Assay for lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric acid reaction. Anal. Biochemistry. 95:35-41 (1979)] 대조군, 알코올군 및 조성물군(LS)의 MDA 농도(nmoles/g)를 도 5에 도시하였다. 그 결과 조성물군에서 알코올군에 비해 MDA 농도(nmoles/g)가 낮음을 알 수 있는데, 이는 조성물군에서 알코올군보다 간조직내 과산화 지질 생성 감소효과가 우수함을 나타낸다.

이상 설명한 바와 같이, 본 발명에 따르면, 항산화 효과가 있는 토마토 추출물, 브로콜리 추출물, 그리고 파인애플 추출물을 개별적으로 사용하지 않고 적절한 배합비율로 혼합 사용함으로써 각 성분을 개별적으로 사용했을 때보다 항산화 및 알코올에 의한 간장보호에 대한 상승 효과가 기대된다. 뿐만 아니라 별도로 약물 형태로 투여하는 항산화제와는 달리 상기 본 발명의 조성물을 식품 형태로 간편하게 식, 음용할 수 있으며 맛, 향미가 풍부하여 취식이 용이하고 합성 항산화제에 비견하여도 체내 항산화 효과가 우수하다.

Claims

토마토 추출물 70-90중량%, 브로콜리 추출물 5-15중량%, 파인애플 추출물 5-15중량%로 이루어진 항산화에 유효한 조성물.
제1항에 있어서,

상기 토마토 추출물 80-90중량%, 상기 브로콜리 추출물 5-10중량%, 상기 파인애플 추출물 5-10중량%로 이루어진 항산화에 유효한 조성물.
제1항에 있어서,

상기 토마토 추출물 85-90중량%, 상기 브로콜리 추출물 5-7.5중량%, 상기 파인애플 추출물 5-7.5중량%로 이루어진 항산화에 유효한 조성물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 의한 항산화에 유효한 조성물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 발효유식품.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 의한 항산화에 유효한 조성물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 기능성 음료.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 의한 항산화에 유효한 조성물을 유효성분 으로 함유하는 것을 특징으로 하는 건강보조식품.
토마토 열매 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 무명천으로 여과하여 125g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 토마토 추출물 70-90중량%와, 브로콜리 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 2시간 동안 정치시킨 다음 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 냉동건조하여 1.8g을 수득한 브로콜리 추출물 5-15중량%와, 파인애플 100g을 세절한 다음 물 100g과 혼합하고 믹서로 분쇄한 후 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 파인애플 추출물 5-15중량%를 혼합하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화에 유효한 조성물의 제조방법.
토마토 열매 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 무명천으로 여과하여 125g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 토마토 추출물 80-90중량%와, 브로콜리 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 2시간 동안 정치시킨 다음 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 냉동건조하여 1.8g을 수득한 브로콜리 추출물 5-10중량%와, 파인애플 100g을 세절한 다음 물 100g과 혼합하고 믹서로 분쇄한 후 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 파인애플 추출물 5-10중량%를 혼합하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화에 유효한 조성물의 제조방법.
토마토 열매 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 무명천으로 여과하여 125g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 토마토 추출물 85-90중량%와, 브로콜리 100g과 물 100g을 혼합하여 믹서로 분쇄하고 2시간 동안 정치시킨 다음 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 냉동건조하여 1.8g을 수득한 브로콜리 추출물 5-7.5중량%와, 파인애플 100g을 세절한 다음 물 100g과 혼합하고 믹서로 분쇄한 후 무명천으로 여과하여 100g을 수득한 후 이것을 분무건조하여 4.5g을 수득한 파인애플 추출물 5-7.5중량%를 혼합하여 제조하는 것을 특징으로 하는 항산화에 유효한 조성물의 제조방법.
제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 의해 제조된 것을 특징으로 하는 항산화에 유효한 조성물.
제10항에 의한 항산화에 유효한 조성물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 발효유식품.
제10항에 의한 항산화에 유효한 조성물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 기능성 음료.
제10항에 의한 항산화에 유효한 조성물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 건강보조식품.