KR100554963B1 - A culture medium for Monascus and its preparation method and use, and use of culture using the monascus culture medium - Google Patents
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Abstract
본 발명은 콜레스테롤 저하 효과를 갖는 홍국균의 이차대사산물의 생산을 최대화하면서 동시에 배양액내에서 홍국균의 밀도를 극대화할 수있는 액체배양배지 및 이를 이용한 홍국균의 배양방법, 이로부터 얻어진 홍국균의 균체배양액의 용도에 관한 것이다. 본 발명에서는, 질소원, 탄소원, 균성장에 필수적인 미량원소로 이루어진 홍국균의 액체배양배지에 있어서, 홍국균의 이차대사과정 활성화와 균밀도의 증가를 위하여 (a) 질소원으로 목화씨 추출물과; (b) 탄소원으로 설탕, 쌀가루, 옥수수가루, 감자가루, 밀가루 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 물질과; (c) 미량원소로 나트륨(Na), 칼슘(Ca), 철(Fe), 구리(Cu) 및 망간(Mn) 성분;을 포함하는 홍국균 배양배지를 제공한다. 본 발명에 따른 홍국균의 균체배양액은 가축사료 첨가제 등으로 사용되어 콜레스테롤 수치가 저하된 저콜레스테롤 란, 저콜레스테롤 육계, 저콜레스테롤 우유 등과 같은 각종 저콜레스테롤 동물성 식품을 얻을 수 있으며, 기능성 식품 등으로도 사용될 수 있다. The present invention provides a liquid culture medium capable of maximizing the production of secondary metabolites of red yeast bacteria having a cholesterol-lowering effect and maximizing the density of red yeast bacteria in a culture medium, and a method of culturing red yeast bacteria using the same, and a cell culture solution of red yeast bacteria obtained therefrom. It is about. In the present invention, in the liquid culture medium of hongguk bacteria consisting of nitrogen source, carbon source, microelements essential for bacterial growth, for the activation of secondary metabolic process and increase of the bacterial density of (a) cotton seed extract as a nitrogen source; (b) a material selected from the group consisting of sugar, rice flour, corn flour, potato flour, flour and mixtures thereof as a carbon source; (c) as a trace element, sodium (Na), calcium (Ca), iron (Fe), copper (Cu) and manganese (Mn) components; provides a culture medium for hongguk. Cell culture medium of hongguk bacterium according to the present invention can be used as animal feed additives, such as low cholesterol low cholesterol, low cholesterol broiler, low cholesterol milk, low cholesterol can be obtained a variety of animal foods, and also used as functional food Can be.
홍국균, 홍국균 배양배지, 사료첨가제, 액체배양배지, 저콜레스테롤육제품, 저콜레스테롤란, Monacolin K, 고콜레스테롤증S. aureus, S. aureus culture medium, feed additive, liquid culture medium, low cholesterol meat products, low cholesterol, Monacolin K, high cholesterol
Description
도 1은 PST 생산배지를 이용하여 배양된 본 발명의 홍국균 균체배양액을 닭 사료에 첨가하여 21일간 사육한 후 얻은 계란의 콜레스테롤 함량을 나타낸 것이다. Figure 1 shows the cholesterol content of the eggs obtained after the 21 days of breeding by adding the Hong Kong mycelium culture medium of the present invention cultured using a PST production medium to chicken feed.
도 2는 PRT 생산배지를 이용하여 배양된 본 발명의 홍국균 균체배양액을 닭 사료에 첨가하여 21일간 사육한 후 얻은 계란의 콜레스테롤 함량을 나타낸 것이다. Figure 2 shows the cholesterol content of the eggs obtained after the 21 days of breeding by adding the Hong Kong mycelium culture medium of the present invention cultured using a PRT production medium to chicken feed.
본 발명은 홍국균 배양배지 및 그 방법과 이로부터 생산된 홍국균 균체배양액의 용도에 관한 것이다. 특히 본 발명은 콜레스테롤 저하 효과를 갖는 홍국균의 이차대사산물의 생산을 최대화하면서 동시에 배양액내에서 홍국균의 밀도를 극대화할 수 있는 액체배양배지 및 그 방법과 이로부터 얻어진 홍국균의 균체배양액을 이용한 저콜레스테롤 식품에 관한 것이다. The present invention relates to a hongkuk culture medium and its method and the use of hongguk cell culture medium produced therefrom. In particular, the present invention is to maximize the production of secondary metabolites of red yeast bacteria having a cholesterol-lowering effect and at the same time a liquid culture medium and a method for maximizing the density of red yeast bacteria in a culture medium and low cholesterol foods using the cells cultured cells obtained therefrom It is about.
홍국균이라 불리우는 모나스커스(Monascus) 속 미생물은 진한 빨간색의 색소와 모나콜린 K (monacolin K)라는 콜레스테롤 생합성 저해제를 분비하는 특성을 가지고 있어 수백년전부터 다양한 용도로 사용되고 있다. 식품에서 홍국은 음식물 보존제와 빨간색을 내게 하는 발색제 등에 사용되고 염색 산업에서는 홍국의 빨간 염료를 활용하기도 한다. 식품과 염색산업 이외에 홍국균이 인류에 가장 유용하게 활용되는 분야는, 홍국의 모나콜린 K 라는 콜레스테롤 생합성 저해제를 분비하는 특성을 이용해 홍국 발효 술, 홍국 발효 쌀, 홍국 발효 빵 등 홍국균을 발효시켜 만든 다양한 음식물들로, 이를 이용해 인간의 혈중 콜레스테롤 수치를 낮추는 일종의 콜레스테롤 저해제로 사용되고 있다.
홍국균을 포함한 진균류 중 일부는 일차대사과정 이외에도 이차대사과정을 가지고 있는데, 일차대사과정은 모든 생물체들이 살아가기 위해 공통적으로 가지고 있는 대사과정이며, 이차대사과정은 동물에서는 관찰할 수 없고 일부 미생물 및 식물에서 발견되는데 생존에 필수적이지는 않지만 이러한 이차대사과정을 통해 매우 다양한 종류의 화학물질들이 생성된다. 홍국균의 경우 일차대사과정을 통해 세포가 성장과 분열을 하고 이차대사과정을 통해서는 모나콜린 K(monacolin K), 모나스신(monascin), 안카플라빈(ankaflavin), 루브로펀크타틴(rubropunctatin), 모나스코루브린(monascorubrin), 루브로펀크타민(rubropunctamine), 모나스코루브라민 (monascorubramine) 등과 같은 다양한 종류의 화학물질들을 분비해내며, 특히 이중 모나콜린 K는 동물의 콜레스테롤 생합성 과정을 억제해 동물 체내의 콜레스테롤 수치를 떨어뜨리는 작용을 하게 된다. Microorganisms of the genus Monascus called red yeast bacteria have a characteristic of secreting a dark red pigment and a cholesterol biosynthesis inhibitor called monacolin K and have been used for various purposes for hundreds of years. In foods, red yeast is used as food preservatives and red-coloring agents, and in the dyeing industry, red yeast is used. In addition to the food and dyeing industries, the most useful fields for the use of red yeast bacteria are the fermentation of red yeast yeast, red yeast fermented rice, and red yeast fermented bread, using the characteristics of secreting a cholesterol biosynthesis inhibitor called monacoline K. Foods are used as a type of cholesterol inhibitor to lower blood cholesterol levels in humans.
Some fungi, including erythrocytes, have secondary metabolism in addition to primary metabolism, which is a common metabolic process for all living organisms. Although not essential for survival, these secondary metabolisms produce a wide variety of chemicals. In the case of red yeast bacteria, cells grow and divide through the first metabolic process, and monacolin K, monascin, ankaflavin, rubropunctatin, Monascorubrin, rubropunctamine, and monascorubramine release various chemicals, especially Monacoline K, which inhibits the animal's cholesterol biosynthesis process. Lowers the cholesterol levels in the animal's body.
홍국균은 중국 명나라 고전의서인 이시진의 본초강목에서도 혈액 순환 목적으로 기록되었을 정도로 인간의 혈중 콜레스테롤 수치를 낮추는데 효과가 있다는 사실이 오래전부터 알려져 왔다. 또한, 홍국균의 발효 식품은 혈중 콜레스테롤 저하 목적 이외에도 혈당강화 작용과 혈압 강하 작용이 있기 때문에 당뇨병 치료 보조제 및 혈압 강하 보조 치료제로도 활용되고 있다. Hongguk has long been known to be effective in lowering blood cholesterol levels in humans, as it was recorded for blood circulation purposes even in the Chinese Ming Dynasty Yishijin Herbal Cortex. In addition to the purpose of lowering blood cholesterol, fermented foods of red yeast bacteria have been used as an adjuvant for diabetic treatment and an antihypertensive agent for diabetic blood pressure because they have a blood sugar enhancing action and a blood pressure lowering action.
이와 같이 홍국균은 콜레스테롤 저하 의약품 및 콜레스테롤 저하 기능성 식품으로 폭넓게 활용되고 있으나 현재까지 가축의 사료용으로는 거의 사용되지 못하고 있는 실정이다. 홍국균을 가축사료로 사용해 저콜레스테롤 동물성 식품을 얻으려면 가축 사료 특성상 매우 저렴한 가격으로 홍국균을 효과적으로 잘 배양하여야 한다.
현재 홍국균을 배양하는 방법은 고체 배양법과 그 곡물로부터 유래된 곡물성 성분을 주성분으로 하고 약간의 미네랄을 첨가하여 배양하는 방법이 있는데, 이러한 고체 배양법은 전통적인 홍국균 배양법이라고 할 수 있다. 표 1은 현재까지 알려진 대표적인 홍국균 고체 배양 배지들이다. 이러한 고체 배양법의 문제점은 홍국균이 쌀에는 잘 번식이 되나 콩, 옥수수, 밀 등 기타 곡물에서는 번식도가 낮다는 것이다. 또, 쌀을 이용한 고체 배양법도 홍국균의 번식도에는 큰 문제가 없으나 홍국균 배양 기간이 길어 잡균에 의한 오염이 결정적인 문제점으로 지적되고 있다.
이러한 고체 배양법의 문제점을 해결하기 위해 액체 배양법이 개발되었으며, 액체배양법에 따르면 잡균 오염의 걱정없이 고농도로 홍국균 유효성분을 배양할 수 있다. 표 2는 현재까지 알려진 대표적인 홍국균 액체 배양 배지들이다. 그러나 액체 배양법은 홍국균 배양에 비용이 많이 소요되므로 사람을 대상으로 하는 약품 및 기능성 식품 개발에는 큰 문제가 없으나, 가축 사료용으로 이용하기에는 경제성이 전혀 없다는 문제가 있다. As such, red yeast bacteria are widely used as cholesterol-lowering drugs and cholesterol-lowering functional foods, but they are rarely used as feed for livestock. In order to obtain low cholesterol animal food using red yeast fungi as a livestock feed, red yeast fungi must be effectively cultivated at a very low price due to the characteristics of livestock feed.
Currently, the method of culturing red yeast bacteria is a method of cultivating a solid culture method and a grain-derived grain derived from the grains as a main ingredient and adding a few minerals. Table 1 shows representative erythrocyte solid culture media known to date. The problem with this solid culture method is that the red yeast bacteria breed well in rice, but low in red beans, corn, wheat and other grains. In addition, the solid culture method using rice does not have a big problem in the propagation rate of hongguk bacteria, but it is pointed out that contamination by various bacteria is a critical problem because the hongguk bacteria culture period is long.
In order to solve the problems of the solid culture method, a liquid culture method has been developed, and according to the liquid culture method, it is possible to cultivate an effective ingredient of Hongkuk bacteria at high concentration without worrying about contamination of various bacteria. Table 2 shows representative erythrocyte liquid culture media known to date. However, since the liquid culture method is expensive to cultivate hongguk bacteria, there is no big problem in the development of medicines and functional foods for humans, but there is a problem in that it is not economical to use for livestock feed.
또한, 최근에는 고체배양법의 일반적인 방법을 응용하여 콩비지에서 홍국균을 배양하여 저콜레스테롤 계란 및 육계를 생산하기 위한 닭사료로 제조하는 방법 (대한민국 특허출원 10-2001-0028676)이 개발된 바 있다. 그러나 이 방법은 원재료 자체의 가격은 매우 저렴하나, 배지 선택 및 탈수 공정, 살균 공정 및 건조공정 등의 여러 공정을 거치면서 많은 비용이 소요되고, 무엇보다도 다른 일반 고체 배양법에서와 마찬가지로 잡균에 의한 오염문제가 있어 상용화에는 어려움이 있다. In addition, recently, a method of manufacturing a chicken feed for producing low cholesterol eggs and broilers by culturing hongguk in soybeans by applying the general method of the solid culture method (Korean patent application 10-2001-0028676) has been developed. However, this method is very inexpensive for the raw materials itself, but it is very expensive through various processes such as medium selection and dehydration, sterilization and drying, and above all, as with other general solid culture methods, contamination by various bacteria There is a problem, so it is difficult to commercialize.
본 발명은 홍국균의 액체 배양법이 여러 가지 장점이 있음에도 불구하고 경제성 문제 때문에 가축사료에 이용할 수 없었던 문제점을 해결한 것으로, 본 발명에서는 저렴한 비용으로 짧은 시간내에 이차대사과정이 매우 활성화된 홍국균을 배양할 수 있는 액체배양배지 및 이를 이용한 배양방법을 제공하고자 한다. The present invention solves the problem that the liquid culture method of hongguk bacteria could not be used for livestock feed because of the economic problems, in the present invention, cultivated hongguk bacteria with very active secondary metabolism process in a short time at low cost To provide a liquid culture medium and a culture method using the same.
본 발명에 따라 배양된 홍국균의 균체배양액을 사료 첨가제로 하여 가축에 먹이면 가축의 콜레스테롤 수치를 떨어뜨려 이 가축으로부터 각종 저콜레스테롤 동물성 식품을 얻을 수 있다. 따라서 본 발명의 또 다른 측면은 본 발명의 액체배양법으로 배양한 홍국균 균체배양액의 용도에 관한 것으로, 본 발명에서는 균체배양액을 유효성분으로 포함하는 가축사료 첨가제와 이를 이용한 저콜레스테롤 가축의 생산방법 및 이로부터 얻어진 저콜레스테롤 육제품, 계란, 우유와 같은 동물성 식품을 제공한다. When feed to livestock with the cell culture solution of hongguk bacteria cultured according to the present invention as a feed additive can lower the cholesterol level of the livestock can obtain various low-cholesterol animal food from the livestock. Therefore, another aspect of the present invention relates to the use of Hong Kong bacteria cell culture medium cultured by the liquid culture method of the present invention, in the present invention, a livestock feed additive comprising a cell culture medium as an active ingredient and a method for producing low cholesterol livestock using the same It provides low-cholesterol meat products, animal foods such as eggs and milk.
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또한, 본 발명에서는 본 발명의 균체배양액을 이용한 기능성 식품 및 고지혈증 치료제를 제공한다. In addition, the present invention provides a functional food and hyperlipidemia therapeutic agent using the cell culture medium of the present invention.
본 명세서에서 "균체배양액"이란 배지에서 증식된 균체와 이로부터 생산된 산물, 특히 이차대사산물과 배양배지를 모두 포함하는 의미로 사용된다. As used herein, the term "cell culture medium" is used to include both cells grown in the medium and products produced therefrom, in particular, secondary metabolites and culture medium.
본 명세서에서 "홍국균"이란 모나콜린 K (monacolin K)를 분비하는 모나스커스(Monascus) 속의 진균류 미생물을 의미한다. As used herein, "hongguk" means fungal microorganisms of the genus Monascus that secrete monacolin K.
본 명세서에서 "가축"이란 닭, 오리, 타조 등과 같은 가금류와 소, 돼지, 염소, 양 등 사람이 식용을 목적으로 농장이나 집에서 기르는 모든 동물을 포함하는 의미로 사용된다.
본 명세서에서 저콜레스테롤 가축이란 특별히 한정하지 않는 한 정상 평균 가축종에 비해 콜레스테롤 수치가 유의성 있게 낮아진 가축을 의미하는 것으로 해석된다. 저콜레스테롤 육제품이나, 저콜레스테롤 계란, 저콜레스테롤 우유 및 유제품 등도 같은 의미로 해석된다. As used herein, the term "livestock" is used to include poultry such as chickens, ducks, ostriches, and the like, and all animals raised by humans such as cattle, pigs, goats, sheep, and the like for farming or at home.
Low cholesterol livestock herein is understood to mean livestock with significantly lower cholesterol levels compared to normal average livestock species, unless specifically limited. Low cholesterol meat products, low cholesterol eggs, low cholesterol milk and dairy products and the like are also construed as the same meaning.
이차대사과정의 활성화와 균밀도의 증가를 위한 홍국균의 배양배지Culture medium of red yeast bacteria for activation of secondary metabolic process and increase of bacterial density
본 발명의 홍국균 배양배지는, 질소원, 탄소원, 균성장에 필수적인 미량원소로 이루어진 홍국균의 액체배양배지에 있어서, 홍국균의 이차대사과정 활성화와 균밀도의 증가를 위하여 (a) 질소원으로 목화씨 추출물(프로플로™(proflo™))과; (b) 탄소원으로 설탕, 쌀가루, 옥수수가루, 감자가루, 밀가루 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된 물질과; (c) 미량원소로 나트륨(Na), 칼슘(Ca), 철(Fe), 구리(Cu) 및 망간(Mn) 성분;을 포함한다. Hongkuk culture medium of the present invention, in the liquid culture medium of Hongguk bacteria consisting of nitrogen, carbon source, microelements essential for the growth of bacteria, in order to activate the secondary metabolic process and increase the bacterial density of (R) cotton seed extract (pro) Proflo ™); (b) a material selected from the group consisting of sugar, rice flour, corn flour, potato flour, flour and mixtures thereof as a carbon source; (c) Sodium (Na), calcium (Ca), iron (Fe), copper (Cu) and manganese (Mn) components as trace elements.
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바람직하게는 상기 홍국균 배양배지는, 목화씨 추출물 0.5∼1.5%, 탄소원 1.5∼4%, NaCl 0.1∼0.5%, CaCO₃0.1∼0.5%, FeCl3 ·6H2O 0.01∼0.04%, CuCl2·2H2O 0.001∼0.002%, MnCl2·4H2O 0.001∼0.002%, ZnCl2 0.002∼0.006%, Na2B4O7·10H2O 0.001∼0.002%, (NH4)6Mo7O24·4H2O 0.001∼0.002% 및 증류수 잔부를 포함한다. Preferably, the erythrocyte culture medium is 0.5 to 1.5% cotton seed extract, 1.5 to 4% carbon source, 0.1 to 0.5% NaCl, 0.1 to 0.5% CaCO₃, 0.01 to 0.04% FeCl 3 · 6H 2 O, CuCl 2 · 2H 2 O 0.001 to 0.002%, MnCl 2 · 4H 2 O 0.001 to 0.002%, ZnCl 2 0.002 to 0.006%, Na 2 B 4 O 7 · 10H 2 O 0.001 to 0.002%, (NH 4 ) 6 Mo 7 O 24 0.001 to 0.002% of 4H 2 O and the balance of distilled water.
본 발명에 따른 홍국균 액체배양배지의 구체적인 실시예들을 다음의 표 3에 나타내었다. 그러나 본 발명의 홍국균 배양배지가 이에 한정되는 것은 아니다. Specific examples of the honggukyun liquid culture medium according to the present invention are shown in Table 3 below. However, the red yeast cell culture medium of the present invention is not limited thereto.
상기와 같은 본 발명의 배양배지를 이용하여 홍국균을 배양하면 다량의 이차대사산물, 즉 모나콜린 K와 같은 콜레스테롤 저하 물질이 다량으로 포함된 균체배양액을 얻을 수 있다.
홍국균 배양액을 이용해 가축의 콜레스테롤 수치를 효과적으로 낮추기 위해서는 그 전제조건으로 배양액내에서 홍국균의 이차대사과정이 충분히 발현되어야 한다. 또, 홍국균 배양액은 액체상태이므로 가축에 직접 먹이기는 힘들고 가축사료에 섞어서 먹여야 하는데, 종래의 일반적인 홍국균 액체배양배지는 사료와 섞으면 사료의 수분이 증가하고 또 배지 자체가 풍부한 영양분을 함유하고 있어 액티노마이세테스 (Actinomycetes) 계열이나 아스퍼질러스(Aspergillus) 계열의 잡균이 쉽게 번식할 수 있다는 문제점이 있었다. 따라서 종래의 액체배양배지를 이용한 홍국균 배양액을 그대로 가축사료에 사용할 경우에는 앞서 설명한 경제적인 문제외에도 고체 배양법과 마찬가지로 잡균에 의한 오염문제가 생기게 되어 사전에 사료를 철저히 살균하는 공정이 추가로 요구된다.
그러나 본 발명에 따른 액체배양배지는 이차대사과정이 극대화되어 이차대사산물을 매우 풍부하게 함유하고 있을 뿐만 아니라 동시에 홍국균의 밀도가 매우 높다는 특징을 갖게 되므로, 본 발명에 따른 배지를 이용한 홍국균 배양액을 사료에 섞어줄 경우 홍국균이 사료에 충분한 양으로 분포하게 되어 다른 잡균들이 공존할 여지를 잃게 만들며, 나아가 배양액에 풍부하게 함유된 홍국균의 이차대사산물이 항균성을 가지고 있어 다른 잡균들의 번식을 억제하는 작용을 하게 된다. 따라서 본 발명에 의해 개발된 액체 배지를 이용하면 사료의 살균과정 없이 홍국균을 쉽게 닭사료로 활용할 수 있다.
이하, 본 발명에 따른 홍국균 배양배지를 이용하여 홍국균을 배양하는 방법을 보다 상세히 설명한다. 그러나 본 발명에 따른 홍국균의 배양방법은 본 발명의 액체배양배지에서 배양되는 것을 특징으로 하는 것으로, 후술하는 배양법에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다. By culturing hongguk bacteria using the culture medium of the present invention as described above can obtain a cell culture medium containing a large amount of cholesterol-lowering substances such as a large amount of secondary metabolites, that is, monacholine K.
In order to effectively lower the cholesterol level of livestock by using S. aureus culture, the secondary metabolic process of S. aureus must be fully expressed in the culture. In addition, since the culture of red yeast bacteria is liquid, it is difficult to feed them directly to livestock and should be mixed with livestock feed. Conventional red yeast bacterial culture medium increases the moisture of feed when mixed with feed and contains rich nutrients. There was a problem that mycetes ( Actinomycetes ) or Aspergillus series of bacteria can easily breed. Therefore, when using the hongguk culture medium using a conventional liquid culture medium as it is in livestock feed, as well as the above-described economic problems, there is a problem of contamination by various germs like the solid culture method, and further requires a step of thoroughly sterilizing the feed in advance.
However, the liquid culture medium according to the present invention maximizes the secondary metabolic process and contains abundant secondary metabolites, and at the same time has a very high density of the red mussel bacterium, so that the culture of the red mussel bacterium using the medium according to the present invention. When mixed with, red chrysanthemum is distributed in a sufficient amount in feed so that other various bacteria cannot coexist, and further, secondary metabolite of red chrysanthemum contained in culture has antibacterial effect, which inhibits the growth of other bacteria. Done. Therefore, using the liquid medium developed by the present invention can be easily used as a chicken feed without the sterilization process of the feed.
Hereinafter, a method of culturing hongguk bacteria using the hongguk culture medium according to the present invention will be described in detail. However, the culturing method of hongguk bacterium according to the present invention is characterized in that it is cultured in the liquid culture medium of the present invention, and the scope of the present invention is not limited by the culturing method described below.
이차대사산물과 균 밀도가 극대화된 홍국균의 배양방법Cultivation method of Hongguk bacteria with maximum secondary metabolite and bacteria
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1) 종균배양1) spawn culture
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종균배양 과정에는 홍국균의 종균배양으로 일반적으로 알려져 있는 배양법을 사용할 수 있다. 이러한 종균증식 과정의 목적은, 이차대사과정은 최대한 억제하면서 홍국균의 성장과 증식을 촉진시키도록 탄소가 풍부한 액체배지에서 충분히 산소를 공급하면서 미생물을 키워내는 것이다. 본 발명의 일 실시예에서는 종균증식에 Monascus purpureus (ATCC 34892)를 사용하였다. 종균증식에 사용되는 홍국균(Monascus purpureus ATCC 34892)들은 먼저 PDA 아가 (300g Diced potato, 20g glucose, 15g agar/ℓ) 배지에서 5∼8일 동안 배양한 다음 증류수를 이용하여 포자를 얻고, 이 포자를 20% 글리세롤(glycerol) 용액에 섞어 포자 접종 종균을 만들어 보관한다. 포자접종 종균이 만들어지면 이 포자 접종 종균을 충분한 산소공급을 위하여 플라스크 250㎖ 당 40㎖의 YEME (3g yeast extract, 5g peptone, 3g malt extract, 340g sucrose, 10g glucose, 1g MgCl2·6H2O) 배지를 담은 배플드 플라스크(baffled flask)에 0.2% (100㎖ 성장배지당 200㎕ 포자접종 종균)로 접종하여 2∼4일간 키운다.
또한, 생물반응기를 이용할 경우에는 일차 종균배양과 이차 종균배양과정을 거치게 된다. 먼저 일차 종균배양은 5ℓ aspirator bottle에 1.5ℓ의 YEME 배지를 넣은 다음 3.5×109의 포자를 각각의 미생물의 배양 조건에 맞춰 1∼2일 동안 배양한다. 성장배지에서의 이차 종균배양은 150ℓ 생물반응기에 60ℓ의 성장배지를 공급한 후 일차 종균 배양액의 10%를 넣어 150 rpm으로 pH 6.5∼7.2의 범위내에서 1∼2일 동안 배양한다. In the spawn culture process, a culture method generally known as spawn culture of Hongguk can be used. The purpose of this spawn propagation process is to grow microorganisms while supplying enough oxygen in a liquid medium rich in carbon to promote the growth and proliferation of red yeast bacteria while suppressing secondary metabolic processes. In one embodiment of the present invention, Monascus purpureus (ATCC 34892) was used for spawn propagation. Bacillus ( Monascus purpureus ATCC 34892) used for spawn growth was first incubated in PDA agar (300g Diced potato, 20g glucose, 15g agar / L) medium for 5-8 days to obtain spores using distilled water. Mix with 20% glycerol solution to make and store spore inoculated spawn. When spore seed spawn is made, 40 ml of YEME per 250 ml flask (3 g yeast extract, 5 g peptone, 3 g malt extract, 340 g sucrose, 10 g glucose, 1 g MgCl 2 · 6H 2 O) Inoculate 0.2% (200 μl spore seed spawn per 100 ml growth medium) into a baffled flask containing medium and grow for 2 to 4 days.
In addition, in the case of using a bioreactor, the first seed culture and the second seed culture are subjected to the process. In the first seed culture, put 1.5 L YEME medium in a 5 L aspirator bottle, and incubate 3.5 × 10 9 spores for 1 to 2 days according to the culture conditions of each microorganism. Secondary seed culture in the growth medium is supplied to the 150L bioreactor 60L growth medium, and then 10% of the primary seed culture medium is incubated at 150 rpm for 1-2 days in the range of pH 6.5-7.2.
2) 이차대사산물 생산촉진 배양2) Cultivate secondary metabolite production
상기와 같은 종균배양과정을 거쳐 홍국균을 성장·증식시킨 후에는 본 발명의 홍국균 액체배양배지를 이용한 액체배양법으로 이차대사산물의 생산을 촉진하고 균밀도를 증가시키는 이차대사산물 생산촉진 배양 과정에 들어가게 된다. After growing and multiplying the red yeast bacterium through the spawn culture process as described above, the liquid culture method using the red yeast bacterium liquid culture medium of the present invention promotes the production of secondary metabolites and enters the secondary metabolite production promotion culture process to increase the bacterial density. do.
이 배양과정에서는 본 발명의 홍국균 배양배지, 바람직하게는 상기 표 3에 기술된 배지 중 하나를 이용할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. In this culturing process, the hongguk culture medium of the present invention, preferably one of the media described in Table 3 can be used, but is not limited thereto.
이 배양과정에서는 바람직하게는 배플드 플라스크 등을 이용하여 산소를 충분히 공급하며 6∼8일 동안 배양하도록 한다. In this culturing process, it is preferable to incubate for 6-8 days while supplying sufficient oxygen using a baffle flask or the like.
본 발명의 일 실시예에서는, 배플드 플라스크 1ℓ당 250㎖ 의 생산배지를 공급했으며 교반 속도는 150 rpm으로 6∼10일간 배양하였다. 생물반응기를 이용할 경우에는, 1,000ℓ의 생물반응기에 775ℓ의 생산배지를 공급한 다음 이차 종균 배양액의 6%를 접종하여 80∼120 rpm으로 pH 5.8∼6.3 범위내에서 6∼10일 동안 배양하였다. In one embodiment of the present invention, 250 ml of production medium was supplied per liter of the baffle flask, and the stirring speed was incubated at 150 rpm for 6 to 10 days. In the case of using a bioreactor, 775 L of the production medium was supplied to 1,000 L of bioreactor, and 6% of the secondary seed culture was inoculated and incubated at 80-120 rpm for 6-10 days in the pH range of 5.8-6.3.
홍국균 균체배양액의 용도Use of S. aureus cell culture medium
상기와 같은 본 발명의 홍국균 배양방법으로 얻어진 홍국균의 균체배양액은 가축의 콜레스테롤 저하를 위한 유효성분으로서 가축사료 첨가제 등으로 사용될 수 있다. Cell culture medium of hongguk bacteria obtained by the hongguk culture method of the present invention as described above can be used as an additive for livestock feed as an active ingredient for lowering cholesterol of livestock.
홍국균의 균체배양액을 가축사료 첨가제로 사용할 경우, 바람직하게는 상기 균체배양액을 가축사료에 첨가하여 일정 시간 숙성시켜 가축의 콜레스테롤 저하를 위한 가축사료를 만든다. 보다 바람직하게는 상기 홍국균 균체배양액을 가축사료에 1∼10% 첨가하여 3일 이상 숙성시켜 가축사료를 만든다. When using the cell culture liquid of hongguk bacteria as an animal feed additive, preferably the cell culture liquid is added to the animal feed and aged for a certain time to make the animal feed for lowering cholesterol of the livestock. More preferably, 1 ~ 10% of the hongguk bacteria culture medium is added to the livestock feed to aged for 3 days or more to make the livestock feed.
본 발명에서는 상기 홍국균 균체배양액을 포함하는 가축사료를 가축에 투여함으로써 저콜레스테롤 가축을 생산하게 되는데, 보다 바람직하게는 상기 가축사료를 1일 1회 이상, 2일 이상 가축에 투여하여 저콜레스테롤 가축을 얻도록 한다. In the present invention, a low-cholesterol livestock is produced by administering a livestock feed comprising the erythrocyte bacterial culture medium to the livestock, and more preferably, the livestock feed is administered to the livestock at least once a day, for at least two days to feed the low-cholesterol livestock. Get it.
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상기와 같은 방법으로 생산된 저콜레스테롤 가축으로부터 저콜레스테롤 육제품이나, 저콜레스테롤 계란, 저콜레스테롤 우유 등의 저콜레스테롤 동물성 식품을 얻을 수 있다. 또한 이러한 일차 생산품을 이용하여 요구르트, 버터, 치즈, 분유 등과 같은 다양한 저콜레스테롤 유제품이나 계란, 식육 등을 이용한 다양한 저콜레스테롤 가공식품을 제조할 수 있다. Low-cholesterol meat products, low-cholesterol eggs, low-cholesterol animal foods such as low-cholesterol milk can be obtained from the low-cholesterol livestock produced in the above manner. In addition, the primary product can be used to produce a variety of low cholesterol dairy products such as yogurt, butter, cheese, powdered milk, or a variety of low cholesterol processed foods using eggs, meat, and the like.
또한, 이미 잘 알려져 있는 홍국균의 유효성에 따라 본 발명의 홍국균 균체배양액을 사람에게도 적용할 수 있다. 즉, 본 발명의 또 다른 측면은 홍국균에 대해 종래 알려져 있는 유효량과 투여방법의 범위내에서 콜레스테롤 저하를 위한 유효성분으로 본 발명의 홍국균 균체배양액을 포함하는 기능성 식품과 고지혈증 치료제를 제공하는 것이다. In addition, according to the effectiveness of the well-known red yeast fungi can be applied to the red yeast fungi culture medium of the present invention. That is, another aspect of the present invention is to provide a functional food and hyperlipidemia therapeutic agent containing the erythrocyte bacterial culture medium of the present invention as an active ingredient for lowering cholesterol within the range of the conventionally known effective amount and administration method for erythrocyte.
이하, 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 다음의 실시예에 의해 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니며, 본 발명이 속하는 기술분야에 서 통상의 지식을 가진 자에 의해 본 발명의 기술사상과 아래에 기재될 특허청구범위의 균등범위내에서 다양한 수정 및 변형이 가능한 것은 물론이다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, the scope of the present invention is not limited by the following examples, and those of ordinary skill in the art to which the present invention pertains should be within the equivalent scope of the technical concept of the present invention and the claims to be described below. Of course, various modifications and variations are possible.
실시예 1Example 1
이차대사산물 및 홍국균 밀도 최적화 실험Secondary Metabolite and Hongguk Density Optimization Experiment
a) 이차대사산물의 생산성 비교a) Comparison of productivity of secondary metabolites
홍국균을 표 4에 기재된 각각의 이차대사산물 생산배지에서 배양한 후, 각 배양액에서 5㎖의 배양액을 얻어서 0.45㎛ 필터로 여과하였다. 이 여과액을 같은 양의 에틸아세테이트(ethyl acetate)로 이차대사산물을 추출한 다음, 스펙트로포토메터(spectrophotometer)로 480nm에서 red pigment의 흡광도를 측정하여 이차대사산물의 생산성을 비교하였다 (OD480nm 에서 흡광도 1.0은 리터당 15mg의 pigment 임). 결과는 다음의 표 4와 같다. After culturing red yeast bacteria in each secondary metabolite production medium shown in Table 4, 5 ml of the culture solution was obtained from each culture solution, and filtered with a 0.45 µm filter. The filtrate was extracted with the same amount of ethyl acetate, and then the absorbance of the red pigment at 480 nm was measured with a spectrophotometer to compare the productivity of the secondary metabolite (absorbance 1.0 at OD480 nm). Is 15 mg of pigment per liter). The results are shown in Table 4 below.
b) 미생물 밀도 비교b) microbial density comparison
이차대사산물 생산배지내 홍국균 밀도 비교는 각각의 배지에서 생성된 홍국균의 건체량을 측정하여 비교하였다. 즉 위의 공정 a)의 각각의 생산배지에서 생성된 홍국균 배양액을 0.8㎛ 나일론 필터로 여과한 후 60℃에서 진공상태로 세포들을 건조시킨 다음 무게를 측정하는 방법으로 홍국균의 밀도를 측정하였다. 결과는 다음의 표 5와 같다.The comparison of hongukyun density in the secondary metabolite production medium was compared by measuring the dry weight of honggukyun produced in each medium. That is, the honggyun culture medium produced in each production medium of step a) above was filtered with a 0.8 μm nylon filter, and the cells were dried under vacuum at 60 ° C. and then weighed. The results are shown in Table 5 below.
위의 결과(표 4, 표 5)에서 알 수 있듯이 본 발명에서 개발한 배지들이 종래의 배지에 비해 3배 이상의 높은 이차대사산물 생성과 2배 이상의 높은 홍국균 밀도를 보였다. 특히 이중 PST생산배지와 PRT생산배지에서 다른 생산배지들에 비해 이차대사산물의 생산성과 홍국균 밀도가 가장 높았다. 따라서 이 PST 생산배지와 PRT 생산배지를 이용하여 하기의 실시예 2 내지 4를 수행하였다.As can be seen from the above results (Table 4, Table 5), the media developed in the present invention showed more than three times higher secondary metabolite production and two times higher red erythrocyte density than the conventional media. Especially, PST production medium and PRT production medium had the highest productivity of secondary metabolite and density of red yeast bacteria than other production medium. Therefore, the following Examples 2 to 4 were carried out using the PST production medium and PRT production medium.
실시예 2Example 2
PST 생산배지와 PRT 생산배지를 이용하여 배양한 홍국균 배양액을 사료첨가제로 사용하여 생산한 저콜레스테롤 계란Low-Cholesterol Eggs Produced by Using a Hong Kong Bacteria Culture Cultured with PST Production Medium and PRT Production Medium as Feed Additives
① 홍국균 배양액과 산란계 사료와의 혼합과 급이① Mixing and feeding of Hongkuk culture medium and laying hen feed
PST 생산배지와 PRT 생산배지를 이용하여 배양한 홍국균 배양액을 시판되는 산란계 사료에 1%, 5%, 15%, 30%로 섞어 12시간 마다 한번씩 닭에게 먹였다. 실험에 사용된 닭은 33주령을 사용하였고, 케이지당 6마리씩 구분하여 무첨가군, 1% 첨가군, 5%, 15%, 30% 첨가군으로 나누어 21일간 사육하였다. The erythrocyte culture medium cultured using PST production medium and PRT production medium was mixed with commercially available laying hens at 1%, 5%, 15% and 30% and fed to chickens every 12 hours. The chickens used in the experiment were 33 weeks old, and were divided into 6 groups per cage, and were kept for 21 days by dividing into no addition group, 1% addition group, 5%, 15% and 30% addition group.
② 계란의 콜레스테롤 함량 분석② Cholesterol content analysis of eggs
계란의 콜레스테롤 함량 분석은 아래와 같은 방법으로 실시하였다. Cholesterol content analysis of eggs was carried out in the following manner.
먼저 계란을 완전히 삶은 다음, 난황을 분리하여 난황 1g당 15㎖의 chloroform : methanol (2:1, v/v) 용액을 첨가하여 분쇄기로 균질화시킨 후 초음파를 이용해 30초 동안 분쇄한 다음, 0.45㎛ 필터로 여과시켰다. 이 여과액 0.1㎖를 0.3㎖의 33% KOH (in H2O)와 3㎖의 95% Ethanol로 60℃에서 15분 동안 검화시켰다. 검화 반응이 끝난 후, 10㎖의 헥산(Hexane)으로 콜레스테롤을 추출한 후 헥산층의 1㎖을 다른 시험관에서 증발시켰다. 이 시험관에 콜레스테롤 에스테라제 (cholesterol esterase), 콜레스테롤 옥시다제(cholesterol oxidase), 퍼옥시다제(peroxidase)를 이용하여 반응시킨 다음, 스펙트로포토메터로 500nm에서 흡광도를 측정한 후, 표준곡선(standard curve)과 비교하여 계란내 콜레스테롤 함량을 계산하였다. First, boil the eggs thoroughly, separate egg yolk, add 15 ml of chloroform: methanol (2: 1, v / v) solution per 1g of egg yolk, homogenize it with a grinder, and grind for 30 seconds using ultrasonic waves. It was filtered by a filter. 0.1 ml of this filtrate was saponified with 0.3 ml of 33% KOH (in H 2 O) and 3 ml of 95% Ethanol at 60 ° C. for 15 minutes. After the saponification reaction, cholesterol was extracted with 10 ml of hexane (Hexane), and 1 ml of the hexane layer was evaporated in another test tube. The test tube was reacted with cholesterol esterase (cholesterol esterase), cholesterol oxidase (cholesterol oxidase), peroxidase (peroxidase), and then absorbance at 500 nm with a spectrophotometer, and then the standard curve Cholesterol content in eggs was calculated.
PST 생산배지를 이용하여 배양된 본 발명의 홍국균 균체배양액을 닭 사료에 첨가하여 21일간 사육한 후 얻은 계란의 콜레스테롤 함량은 표 6 및 도 1과 같다. Cholesterol content of the eggs obtained after the 21-day breeding by adding the Hong Kong cell culture medium of the present invention cultured using a PST production medium to chicken feed is shown in Table 6 and FIG.
PST 생산배지 대신 PRT 생산배지를 이용하여 배양된 균체배양액을 21일간 투여한 결과는 다음의 표 7및 도 2와 같다. The results of administration of the culture medium cultured using the PRT production medium instead of the PST production medium for 21 days are shown in Table 7 and FIG. 2.
PST 생산배지와 PRT 생산배지에서 배양한 홍국균 배양액을 첨가한 사료를 급여한 후 얻은 계란의 콜레스테롤 함량 변화를 측정한 결과(표 6, 표 7, 도 1, 도 2), PST 생산배지에서는 1% 홍국균 배양액 첨가군의 경우 평균 21.4 %의 계란내 콜레스테롤 함량의 감소를 나타내었고, 5% 홍국균 배양액 첨가군에서는 29.1%의 콜레스테롤 함량 감소를 나타내었다. 또한 15% 홍국균 배양액 첨가군에서는 29.8%, 30% 홍국균 배양액 첨가군에서는 30.6%의 콜레스테롤 저하를 나타냈으나, 이는 5% 사용군과 큰 차이가 없는 것으로, 경제성을 고려할 때 바람직한 홍국균 배양액의 투여용량은 1∼5% 범위임을 알 수 있었다. PRT 생산배지의 경우도, 1% 홍국균 배양액 첨가군에서는 22.3%, 5% 홍국균 배양액 첨가군에서는 29.7%의 계란내 콜레스테롤 함량의 감소를 나타내어 PST 배지와 거의 비슷하거나 약간 상회하는 결과를 나타내었다. As a result of measuring the cholesterol content change of the eggs obtained after feeding the feed containing the erythrocyte culture medium cultured in PST production medium and PRT production medium (Table 6, Table 7, Fig. 1, Fig. 2), 1% in PST production medium On the other hand, the addition of red yeast culture medium showed a decrease in cholesterol content of 21.4% on average, and the decrease in cholesterol content of 29.1% on 5% red yeast culture medium. In addition, 29.8% in the 15% hongkong bacteria added group and 30.6% in the 30% hongkong bacteria added group showed lower cholesterol, which is not significantly different from the 5% used group, considering the economic feasibility. Was found to range from 1 to 5%. In the case of the PRT production medium, the cholesterol content in the eggs was decreased by 22.3% in the group added with 1% S. aureus and 29.7% in the group containing 5% S. aureus, which was almost similar to or slightly higher than that of PST medium.
실시예 3Example 3
PST 생산배지와 PRT 생산배지를 이용하여 배양한 홍국균 배양액을 사료첨가제로 사용하여 생산한 저콜레스테롤 육계Low-cholesterol broiler produced by using erythrocyte culture medium cultured using PST production medium and PRT production medium as feed additive
① 홍국균 배양액과 육계사료와의 혼합과 급이① Mixing and feeding of Hongkuk culture medium and broiler feed
PST 생산배지와 PRT 생산배지를 이용하여 배양한 홍국균 배양액을 시판되고 있는 육계사료에 섞어 12시간 마다 한번씩 닭에게 먹였다. 실험에 사용된 닭은 6주령이고, 케이지당 6마리씩 구분하여 무첨가군, 1% 첨가군, 5% 첨가군으로 나누어 20일간 사육하여, 각각의 육계에서 혈액을 채취하여 혈중 콜레스테롤 수치를 측정하였다. Hongkuk culture cultured using PST production medium and PRT production medium was mixed with commercial broiler feed and fed to chickens every 12 hours. The chickens used in the experiment were 6 weeks old, and 6 animals per cage were divided into no addition group, 1% addition group, and 5% addition group for 20 days, and blood was collected from each broiler to measure blood cholesterol levels.
② 육계의 혈중 콜레스테롤 함량 분석② Analysis of blood cholesterol content in broilers
육계의 혈중 콜레스테롤 함량 분석은 다음과 같은 방법으로 실시하였다. Analysis of blood cholesterol content in broilers was carried out in the following manner.
육계의 혈액에서 혈청을 분리하여 혈청 0.1㎖를 0.3㎖의 33% KOH (in H2O)와 3㎖의 95% 에탄올로 60℃에서 15분 동안 검화시켰다. 검화 반응이 끝난 후, 10㎖의 헥산으로 콜레스테롤을 추출한 후 헥산층의 1㎖을 다른 시험관에서 증발시켰다. 이 시험관에 콜레스테롤 에스테라제(cholesterol esterase), 콜레스테롤 옥시다제 (cholesterol oxidase), 퍼옥시다제(peroxidase)를 이용하여 반응시킨 다음, 스펙트로포토메터로 500nm에서 흡광도를 측정한 후, 표준곡선(standard curve)과 비교하여 혈중 콜레스테롤 함량을 계산하였다. Serum was separated from broiler blood and 0.1 ml of serum was saponified with 0.3 ml of 33% KOH (in H 2 O) and 3 ml of 95% ethanol at 60 ° C. for 15 minutes. After the saponification reaction, cholesterol was extracted with 10 ml of hexane, and 1 ml of the hexane layer was evaporated in another test tube. The test tube was reacted with cholesterol esterase, cholesterol oxidase, and peroxidase, and then absorbance at 500 nm was measured using a spectrophotometer. Blood cholesterol content was calculated.
PST 생산배지를 이용하여 배양된 홍국균 배양액을 투여한 결과를 다음의 표 8에 나타내었다.The results of administration of the cultured hongkookyun culture medium using the PST production medium are shown in Table 8 below.
PST 배지 대신 PRT 배지를 이용하여 배양된 홍국균 배양액을 투여한 결과를 표 9에 나타내었다. Table 9 shows the results of administering the erythrocyte culture medium cultured using PRT medium instead of PST medium.
PST 생산배지와 PRT 생산배지에서 배양한 홍국균 배양액을 육계 사료에 첨가하여 육계의 혈중 콜레스테롤 수치를 측정한 결과(표 8, 표 9), PST 생산배지에서는 1% 홍국균 배양액 첨가군의 경우 평균 16.2 %의 혈중 콜레스테롤 함량 감소를 나타내었고, 5% 홍국균 배양액 첨가군에서는 30%의 콜레스테롤 함량 감소를 나타내었다. PRT 생산배지의 경우는, 1% 홍국균 배양액 첨가군에서는 16.6%, 5% 홍국균 배양액 첨가군에서는 28.4%의 혈중 콜레스테롤 함량 감소를 나타내었다. The results of measuring the blood cholesterol level of broiler chickens were added to the broiler feed by adding the erythrocyte culture medium cultured in PST production medium and PRT production medium (Table 8 and Table 9). Showed a decrease in blood cholesterol content, and 5% hongkuk culture medium addition group showed a 30% cholesterol content decrease. In the case of PRT production medium, 16.6% of the 1% erythrocyte culture medium added group showed 28.4% reduction in blood cholesterol content.
실시예 4Example 4
PST 생산배지와 PRT 생산배지를 이용하여 배양한 홍국균 배양액을 사료첨가제로 사용하여 생산한 저콜레스테롤 우유Low-Cholesterol Milk Produced by Using a Hong Kong Bacteria Culture Cultured with PST Production Medium and PRT Production Medium as Feed Additives
PST 생산배지와 PRT 생산배지를 이용하여 배양한 홍국균 배양액을 시판되고 있는 유우사료에 1%와 5%로 섞어 12시간 마다 한번씩 소에게 먹였다. 실험에 사용된 유우는 25개월령으로, 분만한지 4주된 유우를 각 군마다 한마리씩 무첨가군, 1% 첨가군, 5% 첨가군으로 나누어 3주간 하루에 두번씩 사료를 급여한 후, 각 군의 우유 콜레스테롤 수치를 측정하였다. 측정방법은 우유 0.1㎖를 0.3㎖의 33% KOH (in H2O)와 3㎖의 95% 에탄올로 60℃에서 15분 동안 검화시켰다. 검화 반응이 끝난 후, 10㎖의 헥산으로 콜레스테롤을 추출한 후 헥산층의 1㎖을 다른 시험관에서 증발시켰다. 이 시험관에 콜레스테롤 에스테라제(cholesterol esterase), 콜레스테롤 옥시다제(cholesterol oxidase), 퍼옥시다제(peroxidase)를 이용하여 반응시킨 다음, 스펙트로포토메터로 500nm에서 흡광도를 측정한 후, 표준곡선(standard curve)과 비교하여 우유내 콜레스테롤 함량을 계산하였다.The erythrocyte culture medium cultured using PST production medium and PRT production medium was mixed with commercial dairy cattle feed with 1% and 5% and fed to cows every 12 hours. The cows used in the experiment were 25 months of age, and four weeks old cows were fed into each group without additives, 1% and 5%, and fed twice a day for 3 weeks. Milk cholesterol levels were measured. The measurement method was 0.1 ml of milk saponified with 0.3 ml of 33% KOH (in H 2 O) and 3 ml of 95% ethanol at 60 ° C. for 15 minutes. After the saponification reaction, cholesterol was extracted with 10 ml of hexane, and 1 ml of the hexane layer was evaporated in another test tube. The test tube was reacted with cholesterol esterase, cholesterol oxidase, and peroxidase, and then absorbance at 500 nm was measured using a spectrophotometer. Cholesterol content in milk was calculated.
PST 생산배지를 이용하여 배양한 홍국균 배양액을 투여한 결과를 표 10에 나타내었다. Table 10 shows the results of administering the erythrocyte culture medium cultured using the PST production medium.
PST 배지 대신 PRT 생산배지를 이용하여 배양한 홍국균 배양액을 투여한 결과를 표 11에 나타내었다. Table 11 shows the results of administering the erythrocyte culture medium cultured using the PRT production medium instead of the PST medium.
PST 생산배지와 PRT 생산배지에서 배양한 홍국균 배양액을 유우 사료에 첨가하여 우유의 콜레스테롤 수치를 측정한 결과(표 10, 표 11), PST 생산배지에서는 1% 홍국균 배양액 첨가군의 경우 평균 20.4 %의 우유 콜레스테롤 함량 감소를 나타내었고, 5% 홍국균 배양액 첨가군에서는 22.6%의 콜레스테롤 함량 감소를 나타내었다. 다음 PRT 생산배지의 경우, 1% 홍국균 배양액 첨가군에서는 21.5%, 5% 홍국균 배양액 첨가군에서는 25.6%의 우유 콜레스테롤 함량 감소를 나타내었다.As a result of measuring the cholesterol level of milk by adding red pepper bacteria cultured in PST producing medium and PRT producing medium to cow's feed (Table 10 and Table 11), average 10.4% of red pepper culture medium added in PST producing medium The milk cholesterol content was decreased, and the cholesterol content was decreased by 22.6% in the 5% Hongkuk culture medium added group. In the case of the following PRT production medium, milk cholesterol content was decreased by 21.5% in the group added with 1% S. aureus and 25.6% in the group containing 5% S. aureus.
상기 실시예들로부터 확인되는 바와 같이, 본 발명에 따르면 콜레스테롤 저하효과를 갖는 홍국균의 이차대사산물의 생산을 최대화하면서 동시에 배양액내에서 홍국균 밀도를 극대화할 수 있는 액체배지를 이용하여 저렴한 생산비용으로 짧은 시간내에 가축사료 첨가제로 사용할 수 있는 홍국균의 균체배양액을 얻을 수 있으며, 이를 이용하여 콜레스테롤 수치가 평균 30% 이상 현저히 감소된 저콜레스테롤 란, 저콜레스테롤 육계, 저콜레스테롤 우유 등과 같은 각종 저콜레스테롤 동물성 식품을 얻을 수 있으며, 또한 본 발명의 홍국균의 균체배양액은 알려진 홍국균의 유효성에 따라 사람을 대상으로 하는 기능성 식품 및 고지혈증 치료제로도 활용될 수 있다. As can be seen from the above examples, according to the present invention, while maximizing the production of secondary metabolites of the red yeast bacterium having a cholesterol lowering effect, at the same time, the liquid medium which can maximize the red yeast bacterium density in the culture medium has a short production cost. It is possible to obtain a cell culture solution of hongguk bacteria that can be used as a livestock feed additive within a time, and various low-cholesterol animal foods such as low cholesterol, low cholesterol broiler, low cholesterol milk, etc. In addition, the cell culture medium of hongguk bacterium of the present invention can be used as a functional food and hyperlipidemia treatment for humans according to the known hongguk bacteria.
Claims (17)
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| KR940009335A (en) * | 1992-10-26 | 1994-05-20 | 김규식 | Manufacturing method of red yeast pigment by microorganism |
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Non-Patent Citations (1)
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| Ministry of Agriculture and Forestry research report 'the functional food manufacture engineering development using the biological activity of the Monascus inside product' (1999.10. 31.) * |
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