KR20120122186A - Method of preparing probiotics of solid-state fermentation using korean rice wine cake for livestocks and the probiotics composition - Google Patents

Method of preparing probiotics of solid-state fermentation using korean rice wine cake for livestocks and the probiotics composition Download PDF

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KR20120122186A
KR20120122186A KR1020110040214A KR20110040214A KR20120122186A KR 20120122186 A KR20120122186 A KR 20120122186A KR 1020110040214 A KR1020110040214 A KR 1020110040214A KR 20110040214 A KR20110040214 A KR 20110040214A KR 20120122186 A KR20120122186 A KR 20120122186A
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신명수
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김경수
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(주)오비티
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Abstract

PURPOSE: A method for manufacturing solid-fermented probiotics for livestock using suljigemi and a probiotic composition are provided to improve livestock productivity and to suppress pathogenic bacteria. CONSTITUTION: A method for manufacturing solid-fermented probiotics for livesotck using suljigemi comprises: a step of storing suljigemi in a refrigerator at 0-10 Deg. C. to use yeast and Bacillus subtilis of suljigemi as a spawn; a step of inoculating a solid medium with the suljigemi and fermenting at 25-35 Deg. C. and 30-50% of moisture content for 2-4 days. The method also comprises a step of mixing and inoculating lactic acid bacteria with the suljigemi on the solid medium. The lactic acid bacteria are Lactobacillus plantarum, Enterococcus faecium, or Pediococcus pentosaceus. The solid medium is a basic solid medium containing rice bran and wheat bran. The solid medium further contains 0.2-5 wt% of molasse or glucose.

Description

술지게미를 이용한 가축용 고체발효 생균제의 제조방법 및 제조된 생균제 조성물 {Method of preparing probiotics of solid-state fermentation using korean rice wine cake for livestocks and the probiotics composition}Method of preparing probiotics for livestock using sake lees and prepared probiotic composition {Method of preparing probiotics of solid-state fermentation using korean rice wine cake for livestocks and the probiotics composition}

본 발명은 가축용 생균제에 관한 것으로, 특히 술지게미를 이용하여 가축용 고체발효 생균제를 제조하는 방법 및 제조된 생균제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a livestock probiotic, and more particularly, to a method for producing a solid fermentation probiotic for livestock using sake lees and a produced probiotic composition.

주박(酒粕)은 쌀(곡류), 물, 누룩, 효모 등을 이용하여 탁주(막걸리)나 약주를 제조한 후, 술을 걸러내는 과정에서 생성되는 부산물로서, 흔히 주정박 또는 술지게미라고 부른다. 술을 제조하는 과정을 살펴보면, 먼저 누룩 또는 효소제와 고두밥 등을 비벼서 담고 여기에 효모를 넣어 발효시키면 누룩에 번식한 미생물에 의해 생성되는 효소의 작용으로 녹말과 단백질이 당과 아미노산으로 분해되면서, 효모에 의한 알코올발효가 시작되고, 일정기간 경과 후 알코올 발효가 완료되어 술과 찌꺼기를 분리하게 되는데, 이때 얻어지는 찌꺼기가 술지게미이다. 술지게미는 원료 쌀에 대하여 약 20% 정도가 얻어지며, 대략 7% 내외의 알코올성분이 잔존하고 있고, 전분과 단백질 외에도 섬유소, 무기질, 비타민, 알코올과 유기산, 효소, 효모 등의 영양성분을 다량 함유한 것으로 보고되었다(조 등, 1998). 탁주의 주박은 100g 당 열량이 138 kcal이며, 당질과 단백질이 각각 24.9%와 8.9%를 함유하는 것으로 알려져 있는데(김순미와 조우균, 2006), 밥 100g의 열량이 146kcal, 단백질 함량이 2.7%인 점과 비교할 때 탁주 주박의 열량과 영양성분의 가치가 매우 높음을 알 수 있다.Jujube (酒 粕) is a by-product produced during the process of filtering sake (rice wine) or yakju using rice (grains), water, yeast, yeast, etc., and is commonly referred to as sake lees or sake lees. In the process of making alcohol, first, yeast or enzymes and gourd rice are mixed and fermented with yeast. When yeast is fermented, enzymes produced by the microorganisms breeding in yeast decompose starch and protein into sugars and amino acids. Alcohol fermentation is started by, and after a certain period of time the alcohol fermentation is completed to separate the liquor and dregs, the dregs obtained at this time is sake lees. About 20% of the sake lees is obtained from raw rice, and alcohol content of about 7% remains.In addition to starch and protein, sake lees contains a large amount of nutrients such as fiber, minerals, vitamins, alcohol, organic acids, enzymes, and yeast. (Joe et al., 1998). Takju's sake is known to contain 138 kcal of calories per 100g and sugar and protein of 24.9% and 8.9%, respectively (Kim Soon-mi and Jo Kyun, 2006), and 100g of rice has 146kcal of calories and 2.7% of protein. Compared with, the calories and nutritional value of Takju sake is very high.

우리나라에서는 과거 식량이 부족했던 시절에 술지게미를 식용으로도 사용하였으나, 이용가치가 높은 부산물임에도 불구하고 현재까지 국내에서는 제대로 된 활용분야를 찾지 못해 발생 술지게미 중 일부만이 소, 돼지, 닭 등의 축산 사료에 그대로 혼합 이용되고 있는 실정이다. 술지게미는 발생 후 바로 수거하여 이용하지 않으면 곰팡이 오염 등으로 인해 사용이 어려워지기 때문에 수거되지 않는 대부분의 술지게미는 폐기되고 있는데, 폐기에 추가비용이 소요되며 자연계에 그대로 버려질 경우 환경오염을 유발하는 문제가 있다. In Korea, sake lees were used for food when food was scarce in the past, but despite the high value of by-products, only a few of sake lees were produced in Korea. It is used as it is. Most alcoholic liquors that are not collected are discarded because they are difficult to use due to mold contamination if they are not collected and used immediately after they are generated. However, it takes additional cost and causes environmental pollution if discarded in nature. There is.

우리나라와 마찬가지로 술의 제조과정에서 술지게미가 발생하는 일본의 경우는, 청주를 거른 후 남은 술지게미인 알코올 성분을 식초를 만드는데 사용하거나, 울외장아찌와 같은 전통 채소발효식품의 제조에 사용해 왔다. 또한 주박의 생리기능에 대한 연구를 활발히 수행하고 있는데, 그 결과 주박이 당뇨, 고혈압, 골다공증에 효과가 있고, 뇌경색, 심근경색 및 동맥경화을 예방하고, 알레르기 체질을 개선하고, 미백에 효과가 있다고 보고 하였으며, 이러한 결과를 이용한 건강기능성 식품 및 상품의 개발을 시도하고 있다.In Japan, where alcoholic liquor occurs during the manufacturing process of liquor, as in Korea, alcoholic alcohol, which is left after filtering liquor, has been used to make vinegar, or in the manufacture of traditional vegetable fermented foods such as uljujangajji. In addition, research on physiological functions of gourds is actively conducted. As a result, gourds are effective for diabetes, hypertension, osteoporosis, prevention of cerebral infarction, myocardial infarction and arteriosclerosis, improving allergic constitution and whitening. We are trying to develop health functional foods and products using these results.

주박의 유용성이 알려지면서 국내에서도 주박을 다양한 용도로 활용하고자 하는 연구들이 시도되고 있다. 국내에서 주박을 활용하고자 수행된 연구결과로는, 막걸리박을 이용한 고식이섬유 빵의 제조(조 등, 1996), 탁주분말 또는 탁주 주박을 이용한 제빵 특성 및 제빵개량제의 제조(정진웅과 박기재, 2006), 청주박을 이용한 저식염 고추장의 양조(이갑상와 김동한, 1991), 주박첨가 약과의 제조(강, 2006), 주박 단백질을 이용한 가식성 필름의 제조(조승용 등, 1998), 주박을 이용한 효모포자의 생산(임용성 등, 2004), 주박 첨가에 따른 국수의 품질특성(김순미 등, 2007), 주박첨가가 돈육의 품질특성에 미치는 영향(원지희 등, 2006) 등이 있다. 그러나 이러한 다양한 연구에도 불구하고 아직까지 술지게미의 이용률은 현실적으로 크게 달라지지 않고 여전히 저조한 상태에 머물러 있다. As the usefulness of sake lees is known, studies have been attempted to utilize sake lees for various purposes in Korea. The results of research conducted to utilize sake lees in Korea include the manufacture of high-fiber bread using makgeolli sake (Cho et al., 1996), the baking characteristics and the improvement of the bake improving agent using sake powder or sake lees (Jeong Jin-woong and Park Ki-jae, 2006). ), Brewing low-salt kochujang using sake lees (Lee Ga-sang and Kim Dong-han, 1991), preparation of medicinal supplements with sake lees (Kang, 2006), preparation of edible films using sake protein (Jo Seung-yong et al., 1998), yeast spores with sake lees Production (education, et al., 2004), quality characteristics of noodles with the addition of sake lees (Kim Soon-mi et al., 2007), and the effect of sake addition on the quality characteristics of pork (Won Ji-hee et al., 2006). However, despite these various studies, the utilization rate of alcoholic liquor has not changed much in reality and remains low.

반면 국세청 자료에 따르면, 막걸리의 생산은 최근 들어 급속한 증가세를 보이고 있다. 1972년도에 1,554천㎘가 생산되면서 전체 주류출고량의 81.4%(소주 11.3%, 맥주 5.0%)로 주류시장의 점유율 1위를 차지하던 막걸리는 1980년대에 들어서면서 계속 소비가 감소되어 1995년도에는 전체 주류출고량의 8.4%를 차지(소주 25.9%, 맥주 62.9%)하여 10%대 이하로 추락하였다. 그 후 2000년대 들어 5년간 5%대를 유지해 왔으나, 2009년부터는 다시 소비가 증가하면서 주류시장 점유율이 7.8%(소주 27.9%, 맥주 60.1%)로 급속하게 늘어나기 시작하였으며, 2010년 1분기에는 약 12%(소주 30.5%, 맥주 52.9%)로 신장하였다. 따라서 막걸리 생산량이 증가하면서 술지게미의 생산량도 증가하고 있어 이용률을 증가시킬 수 있는 연구가 시급한 상황이다.
On the other hand, according to IRS data, the production of rice wine has been increasing rapidly in recent years. 1,554 thousand, were produced in 1972, Makgeolli, which occupied the top share in the liquor market with 81.4% (11.3% of soju and 5.0% of beer), continued to decline in the 1980s, accounting for 8.4% of all liquor production in 1995 (25.9% of soju and beer). 62.9%) to 10% or less. Since then, it has maintained 5% for 5 years since 2000, but since 2009, consumption has increased again, and the share of liquor market has rapidly increased to 7.8% (27.9% of soju and 60.1% of beer). About 12% (30.5% shochu, 52.9% beer). Therefore, as the production of makgeolli increases, the yield of sake lees is also increasing, and research that can increase the utilization rate is urgent.

고체발효(solid-state fermentation)는 액상발효(submerged fermentation)와 달리 자유롭게 흐르는 액체 없이 고체기질을 대상으로 미생물을 배양하는 것을 의미한다. 고체발효는 예로부터 곰팡이류를 이용하여 쌀을 발효시킴으로써 코지(Koji)을 생산하기도 하고, 치즈를 생산하는 등 식품산업에 있어서 미생물의 효소 및 대사산물을 생산하는데 주로 사용되어 왔다. 고체발효기술의 장점으로는 값싼 원료와 저렴한 설비에 따른 낮은 생산비용, 높은 효소 생산량 및 안정성, 그리고 액상발효에서 배출되는 폐기물의 최소화에 의한 친환경적인 요소 등이 있으나, 반면 대규모 생산을 위한 표준생산공정을 설정하기 어려우며, 다양한 미생물에 대한 배양조건(산소량, 온도 및 습도 조절 등)을 확립하는데 어려움이 있다. 또한 고체배양 시 가장 고려해야 할 점은 잡균에 의한 오염방지의 취약성으로, 액체배양에서는 배지멸균이 용이한 반면 고체배지의 경우에는 완전히 멸균하기가 용이하지 않아 잡균의 오염 방지에 매우 취약하다는 문제점이 있다. 따라서 고체발효에 의해 생균제를 제조할 경우 배지를 구성하는 곡물 등에 함유되어 있거나 배양공정 중 외부로부터 유입되는 잡균에 의한 오염 문제를 반드시 해결하여야 한다.
Solid-state fermentation, unlike submerged fermentation, means culturing microorganisms on solid substrates without free flowing liquid. Solid fermentation has long been used mainly to produce enzymes and metabolites of microorganisms in the food industry, such as producing koji by fermenting rice using molds and cheese. The advantages of solid fermentation technology include low production cost due to cheap raw materials and inexpensive equipment, high enzyme yield and stability, and eco-friendly factors by minimizing waste from liquid fermentation. It is difficult to establish and it is difficult to establish culture conditions (oxygen amount, temperature and humidity control) for various microorganisms. In addition, the most important thing to consider when cultivating a solid is the vulnerability of pollution prevention by various bacteria, which is easy to sterilize the medium in liquid culture, while the solid medium is not easy to sterilize completely, which is very vulnerable to the prevention of contamination of various bacteria. . Therefore, when producing a probiotic by solid fermentation, the problem of contamination by various bacteria contained in the grain constituting the medium or introduced from the outside during the culture process must be solved.

술지게미를 축산사료에 이용하는 선행기술로, 대한민국 공개특허 10-2007-0050693호에서는 알코올 함유량 7부피% 이하의 폐주류(주정박) 25 내지 50%와 팜코너밀, 옥수수 및 생균제 종균을 사용하여 9일내지 10일간 3단계 발효공정을 거쳐 발효사료를 제조하는 것을 개시하고 있다. 그러나 상기 기술은 공정 중 발효온도가 45℃ 이상으로 상승되어 술지게미 내에 있는 효모의 역할 및 생존을 저하시키게 된다. 이 기술은, 생균제로서의 효능보다는 고체배지 내에 있는 유기물들의 완전 분해에 더 유효한 제조공정이라고 볼 수 있으며, 발효기간이 길어 경제성이 낮고, 최종 제품에 함유된 미생물 수도 낮아 생균제로서 실용화하기 어려운 문제점이 있다. As a prior art for using sake lees in livestock feed, Korean Patent Laid-Open Publication No. 10-2007-0050693 discloses using a liquor (drinking) of 25% or less of alcohol content of 7% by volume or less and using palm corn mill, corn and probiotic seed. It is disclosed that the fermented feed is manufactured through a three-step fermentation process for one to ten days. However, this technique raises the fermentation temperature in the process to more than 45 ℃ lowers the role and survival of yeast in the sake lees. This technology can be seen as a more effective manufacturing process for the complete decomposition of organic matter in a solid medium rather than as a probiotic, and has a problem that it is difficult to be used as a probiotic because of its low economical efficiency due to a long fermentation period and a low number of microorganisms contained in the final product. .

공개번호 10-2010-0078838과 10-2010-0078824는 홍주의 부산물인 홍주 주정박을 대두박과 밀기울로 구성된 고체배지에 혼합한 후, 종균사용 목적으로 액체배양한 효모, 유산균 및 고초균 배양액을 접종하고 2일간 발효 및 건조시켜 제조한 사료첨가제를 개시하고 있다. 그러나 이 기술은 정확한 홍주 주정박의 첨가량에 따른 발효 공정을 파악하기 어렵고, 주정박에 있는 효모를 종균으로 사용하기 보다는 외부에서 종균를 공급하고 있으며, 발효공정 중 배양온도를 일정하게 조절하지 못함에 따라 배양 2일째 배양온도가 44℃로 증가되어 최종적으로 효모 및 유산균의 생균수가 크게 자라지 못하는 문제점이 있다. Publication Nos. 10-2010-0078838 and 10-2010-0078824 mix Hongju brew, a by-product of Hongju, into a solid medium consisting of soybean meal and bran, and then inoculate the cultured yeast, lactobacillus, and Bacillus subtilis medium for the purpose of spawning. A feed additive prepared by daily fermentation and drying is disclosed. However, this technique is difficult to determine the fermentation process according to the addition amount of Hongju alcohol marinated, and it is supplied from the outside rather than using the yeast in the alcohol as a seed, and because the culture temperature during the fermentation process is not controlled constantly On the second day of culture, the culture temperature is increased to 44 ° C., and finally, the number of viable cells of yeast and lactic acid bacteria does not grow significantly.

술지게미를 사료로 활용하고자 하는 시도들은 종래 많이 이루어져 왔으나, 술지게미에 함유된 미생물들의 특성과 효능을 살려 다른 생균제와 차별화될 수 있는 미생물 특징과 배양상의 장점을 지닌 생균제로 제조한 예는 찾아보기 어렵다.
Many attempts to use sake lees as feed have been made in the past, but it is difficult to find an example of producing a probiotic having microbial characteristics and culture advantages that can be differentiated from other probiotics by utilizing the properties and efficacy of microorganisms contained in sake lees.

본 발명은 탁주 또는 약주의 부산물인 술지게미를 이용하여 가축용 고체발효 생균제를 개발하고자 하는 것으로, 특히 술지게미 속에 살아있는 알코올내성 효모와 고초균을 종균으로 사용하여 술지게미의 영양성분과 함유 미생물의 기능성을 살린 새로운 생균제를 제조하는 것을 목적으로 한다. 이를 위해 본 발명에서는, 술지게미에 함유되어 있는 자연 상태의 알코올내성 효모와 고초균을 종균으로 하여 고체배지에서 단시간 내에 최적 발효시켜 술지게미 유래 효모가 107~108 cfu/g 정도로 높게 함유된 새로운 기능성의 고체발효 생균제를 제조하고자 한다. The present invention is to develop a solid fermentation probiotic for livestock using sake lees, which is a by-product of Takju or Yakju, especially using alcohol-resistant yeast and Bacillus subtilis as a seed in the sake lees. The purpose is to produce a probiotic. To this end, in the present invention, by using the alcohol-resistant yeast and Bacillus subtilis in the natural state of sake lees as a seed, optimal fermentation in a solid medium in a short time to a new functional of sake lees-derived yeast containing as high as 10 7 ~ 10 8 cfu / g To prepare a solid fermentation probiotics.

또한, 본 발명에서는 고체발효용 기본 배지 구성에 술지게미에 함유되어 있는 자연 상태의 효모를 종균으로 접종시킴으로써 별도의 살균공정을 필요로 하지 않는 고체발효 생균제를 제조하는 것을 목적으로 한다. In addition, an object of the present invention is to prepare a solid fermentation probiotic that does not require a separate sterilization process by inoculating the yeast of the natural state contained in the sake lees in the basic medium composition for solid fermentation.

또한, 본 발명에서는 최종 생균제에 함유된 효모 미생물 수가 107~108 cfu/g 정도로 높으면서도 생균제의 효능을 증진시키기 위해 유산균을 동시에 접종하여 유산균 생균수를 108~109 cfu/g로 유지시킬 수 있고, 서로 다른 균주를 효율적으로 배양하고 신속한 발효공정으로 대량생산이 가능한 가축용 고체발효 생균제의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다. In addition, in the present invention, while the number of yeast microorganisms contained in the final probiotic is 10 7 ~ 10 8 cfu / g, while inoculating the lactic acid bacteria at the same time in order to enhance the efficacy of the probiotic, the number of lactic acid bacteria is maintained at 10 8 ~ 10 9 cfu / g The purpose of the present invention is to provide a method for producing solid fermentation probiotic for livestock, which is capable of efficiently culturing different strains and mass production by rapid fermentation.

또한, 본 발명은 술지게미를 이용한 고체발효 생균제를 이용하여 가축의 장내 유해균들을 억제하고 유익균들의 활성을 증진시켜줌으로써 어린 가축에서 흔히 발생하는 설사빈도를 감소시켜주며, 일당증체율 증가, 사료효율 개선 및 가축의 육질을 개선하여 고급육을 생산하는 것을 목적으로 한다.
In addition, the present invention by using a solid fermentation probiotics using the sake lees to reduce the intestinal harmful bacteria in the livestock and to enhance the activity of beneficial bacteria to reduce the diarrhea frequency commonly occurs in young livestock, increase the daily gain rate, improve feed efficiency and livestock It aims to produce high quality meat by improving the quality of meat.

본 발명에서는, In the present invention,

(a) 양조장으로부터 수거된 알코올 함량 5~9%의 술지게미를 0~10℃에서 냉장 보관하여 술지게미 내에 함유된 효모 및 고초균을 종균으로 사용 가능하도록 보관하는 단계와, (a) storing the yeast and Bacillus subtilis contained in the sake lees by refrigeration by storing the sake lees of 5-9% alcohol content collected from the brewery at 0-10 ° C .;

(b) 고체배지에 상기 단계의 보관된 술지게미를 접종하고, 수분함량을 30?50%로 조정한 후, 25?35℃에서 2~4일간 발효시켜 술지게미 유래 효모가 107~109 cfu/g로 함유된 생균제를 얻는 단계를 포함하는, 술지게미를 이용한 가축용 고체발효 생균제의 제조방법이 제공된다.(b) inoculate the stored sake lees of the above step in the solid medium, adjust the water content to 30 ~ 50%, fermented at 25 ~ 35 ℃ for 2 to 4 days yeast derived from sake lees 10 7 ~ 10 9 cfu / Provided is a method for producing a solid fermentation probiotic for livestock using sake lees, comprising the step of obtaining a probiotic containing g.

본 발명에서 "술지게미"는 주박(酒粕) 또는 주정박과 같은 의미로 사용되며, 쌀(곡류), 물, 누룩, 효모 등을 이용하여 탁주(막걸리)나 약주를 제조한 후 술을 걸러내는 과정에서 생성되는 부산물을 의미한다. 술지게미에는, 알코올 내성과 생성능이 우수한 효모와, 전분 분해효소 등 술제조 과정에서 자연스럽게 성장하면서 각종 소화효소류를 분비하는 고초균 (Bacillus subtilis)이 포함되어 있다. 이들 술지게미 함유 미생물들은 반추위에서의 대사과정을 조율하는 역할을 수행하며 영양성분을 제공하기도 하고 사료의 소화흡수를 도울 수 있다. 본 발명에서는 술지게미에 함유된 미생물들이 지닌 이러한 특성에 주목하여, 술지게미에 함유되어 있는 자연 상태의 알코올내성 효모와 고초균을 종균으로 하여 이들 미생물의 장점을 살린 생균제를 제조한다. In the present invention, "sulgejimi" is used in the same sense as sake lees (or sake lees), brewing rice (grain), water, yeast, yeast, etc. using the process of manufacturing sake (makgeolli) or yakju filtering process alcohol It means the by-product produced in The sake lees includes yeasts having excellent alcohol resistance and producing ability, and Bacillus subtilis , which naturally secrete various digestive enzymes while growing naturally during alcohol production such as starch degrading enzymes. These alcohol-containing microorganisms play a role in coordinating metabolic processes in the rumen, providing nutrients and helping digestion of feed. In the present invention, paying attention to these characteristics of the microorganisms contained in the sake lees, by using the alcohol-resistant yeast and Bacillus subtilis in the natural state contained in the sake lees to prepare a probiotic utilizing the advantages of these microorganisms.

본 발명에서 사용하는 상기 술지게미는, 알코올 함량 5~9%. 바람직하게는 알코올함량이 7% 내외로, 술지게미 속에 함유되어 있는 효모가 활력을 유지할 수 있도록 바람직하게는 양조장으로부터 수거한 후 0~10℃에서 냉장 보관하면서 48시간 이내에 사용한다. 더욱 바람직하게는 양조장으로부터의 수거도 술지게미 발생 후 1 시간 이내에 바로 이루어지도록 하며 수거 즉시 냉장 보관에 들어가도록 한다. The sake lees used in the present invention, the alcohol content 5-9%. Preferably, the alcohol content is about 7%, so that the yeast contained in the sake lees to maintain vitality, preferably collected from the brewery and used within 48 hours while refrigerated at 0 ~ 10 ℃. More preferably, the collection from the brewery is also made within 1 hour after the sake lees occurs and immediately refrigerated storage.

술지게미를 접종, 배양하는 고체발효 배지로는, 기본배지로 구입이 용이하고 값이 싸며 미생물발효가 용이한 원료인 미강, 소맥피를 사용할 수 있으며, 여기에 당밀 또는 포도당을 첨가할 수 있다. 바람직하게는, 기본배지는 미강과 소맥피 9:1 내지 5:5로 이루어지며, 더욱 바람직하게는 8:2 내지 6:4로 이루어지고, 여기에 당밀 또는 포도당을 전체배지의 0.2~5 중량%의 비율로 첨가할 수 있다. 이러한 고체배양에서는 배지를 구성하는 곡물에 함유되어 있거나 배양공정 중 외부로부터 유입되는 잡균에 의한 오염이 문제되고 있는데, 이를 해결하기 위해 접종 전 배지를 살균하는 공정을 두고 있다. 그러나 액체배지와 달리 고체배지는 완전한 멸균이 어려워 살균공정을 거쳐도 여전히 잡균에 의한 오염 가능성이 남게 된다. 본 발명의 중요한 특징 중의 하나는 술지게미 속에 함유되어 있는 알코올 성분의 항균 효과로 발효과정 중 잡균들의 성장을 억제할 수 있고 아울러 발효기간이 짧아 오염 가능성을 줄일 수 있으므로, 고체배지를 살균하지 않고 그대로 접종에 사용할 수 있다는 점이다. As a solid fermentation medium for inoculating and cultivating sake lees, rice bran and soybeans, which are easy to purchase and inexpensive as a basic medium, and easy to ferment microorganisms, may be used, and molasses or glucose may be added thereto. Preferably, the basic medium is made of rice bran and wheat bran 9: 1 to 5: 5, and more preferably 8: 2 to 6: 4, wherein molasses or glucose is 0.2 to 5 weight of the whole medium. It can be added in the ratio of%. In such a solid culture, contamination by various bacteria contained in grains constituting the medium or introduced from the outside during the culturing process is a problem. In order to solve this problem, the medium is sterilized before inoculation. However, unlike liquid medium, solid medium is difficult to be sterilized completely, and even after the sterilization process, the possibility of contamination by various germs remains. One of the important features of the present invention is that the antimicrobial effect of alcohol contained in sake lees can inhibit the growth of various bacteria during the fermentation process and also shorten the fermentation period, which can reduce the possibility of contamination, so as to inoculate the solid medium without sterilization Is that it can be used for

고체배지에 술지게미를 배지 중량대비 10?30%정도 접종한 후 수분함량을 30?50%로 조정하고, 25?35℃에서 2~4일간 발효시킨다. 술지게미의 접종량이 배지 중량의 30%를 넘게 되면 최종 생균제에 포함되는 미생물수가 오히려 줄어들게 되어 바람직하지 않다. 술지게미의 고체발효로 얻어진 생균제만으로도 사료첨가제용 생균제로 손색이 없으나, 생균제로서의 효능을 보다 높이기 위해 술지게미에 부족한 유산균을 술지게미와 함께 상기 고체배지에 혼합 접종할 수 있다. 이때 바람직하게는 유산균 액상 종균을 기본배지에 대해 중량대비 0.1?5%로 접종한다. 유산균으로는, 바람직하게는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum); 엔테로코커스 패시움(Enterococcus faecium); 페디오코커스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus) 등이 1종 이상 사용될 수 있다.After inoculating about 10-30% of the weight of the sake lees in the solid medium, the water content is adjusted to 30-50% and fermented at 25-35 ° C. for 2-4 days. When the inoculation amount of sake lees exceeds 30% of the weight of the medium, the number of microorganisms included in the final probiotic is rather undesirable. Although the probiotics obtained by the solid fermentation of sake lees are not inferior as a probiotic for feed additives, lactic acid bacteria lacking in sake lees can be inoculated in the solid medium together with sake lees in order to increase the efficacy as a probiotic. At this time, preferably inoculated with lactic acid bacteria liquid spawn 0.1 to 5% by weight relative to the base medium. As lactic acid bacteria, Preferably Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ); Enterococcus faecium ; Pediococcus pentosaceus and the like may be used one or more.

이러한 배양과정을 거쳐 술지게미 유래 효모가 107~109 cfu/g로 함유된 생균제를 얻는다. 술지게미와 유산균을 혼합 접종한 경우에는 술지게미 유래 효모 107~109 cfu/g과 함께 유산균 108~109 cfu/g을 포함하는 생균제를 얻는다. 본 발명의 고체배양에서는 필요에 따라 배양이 끝난 배지를 50℃이하로 건조시키는 단계를 더 둘 수 있다.
Through this culturing process, probiotic containing yeast derived from sake lees is 10 7 ~ 10 9 cfu / g. When inoculated with sake lees and lactic acid bacteria, a probiotic containing lactic acid bacteria 10 8 -10 9 cfu / g is obtained together with 10 7 -10 9 cfu / g yeast derived from sake-jimi. In the solid culture of the present invention may further comprise the step of drying the culture medium to 50 ℃ or less as needed.

본 발명의 또 다른 측면은, 이렇게 얻어진 생균제 조성물, 즉 상기와 같은 방법으로 제조되어, 술지게미 유래 효모 또는 고초균을 107~109 cfu/g로 포함하는 고체발효 생균제 조성물을 제공하는 것이다. 본 발명의 고체발효 생균제 조성물은 술지게미 유래 효모 107~109 cfu/g와 함께 유산균 108~109 cfu/g를 더 포함할 수 있다. Another aspect of the present invention is to provide a probiotic composition obtained in this way, that is, a solid fermentation probiotic composition prepared by the same method as described above, comprising 10 7 ~ 10 9 cfu / g yeast or Bacillus subtilis. Solid fermentation probiotic composition of the present invention may further comprise lactic acid bacteria 10 8 ~ 10 9 cfu / g with sake lees derived yeast 10 7 ~ 10 9 cfu / g.

본 발명의 또 다른 측면은, 상기 고체발효 생균제 조성물을 사료에 0.5~5 중량%로 첨가하여 급여하는 것을 포함하는 반추동물의 사육방법을 제공하는 것이다. 상기 반추동물은 특히 소를 포함한다.
Another aspect of the present invention is to provide a method of rearing a ruminant, which comprises feeding by adding the solid fermentation probiotic composition in a feed of 0.5 to 5% by weight. The ruminant includes in particular cows.

본 발명에 따르면, 술지게미에 함유되어 있는 알코올성분과 효모를 활용하여 술지게미의 영양학적 장점과 미생물학적 특성을 살린 생균제를 제조할 수 있다. 본 발명의 생균제는 원료가 단순하고 공정을 표준화할 수 있어 제품의 균일화가 가능하며, 술지게미에 함유된 효모 및 알코올 성분에 의한 항균효과와 짧은 발효기간으로 잡균에 의한 오염문제를 해결할 수 있어 오염으로 인한 생균제 활성 저하를 예방할 수 있는 것은 물론 살균공정을 둘 필요가 없어 대량 생산이 용이하다. 본 발명의 술지게미를 이용한 고체발효 생균제는 가축 장내 병원성 세균에 대한 억제능력이 우수하며, 이를 급여한 가축의 사양시험에서 확인되는 바와 같이. 송아지의 설사발생율이 저하되고, 비육우를 포함한 반추동물의 가축사육에서 일당증체량과 사료요구율이 개선되는 등 생산성 향상을 가져올 수 있다.
According to the present invention, the probiotic utilizing the nutritional advantages and microbiological characteristics of sake lees can be prepared using the alcohol component and yeast contained in sake lees. The probiotic of the present invention is a simple raw material and can standardize the process, it is possible to homogenize the product, the antibacterial effect by the yeast and alcohol components contained in sake lees and the short fermentation period can solve the problem of contamination by various germs In addition to preventing the degradation of probiotic activity due to the need for a sterilization process, mass production is easy. Solid fermentation probiotic using the sake lees of the present invention is excellent in the ability to inhibit the pathogenic bacteria in the intestine, as confirmed in the specification test of the feed animals. Diarrheal incidence of calves is lowered and productivity can be improved, such as daily gain and feed rate in livestock of ruminants, including beef cattle.

이하 구체적인 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니며, 본 발명은 청구범위에 기재된 범위 내에서 다양한 형태로 구현될 수 있다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to specific examples. However, these examples are only for illustrating the present invention in more detail, the scope of the present invention is not limited by these examples, the present invention can be implemented in various forms within the scope of the claims.

실시예 1Example 1

술지게미의 분석Analysis of sake lees

5개의 양조장으로부터 탁주 및 약주를 생산하고 남은 술지게미를 바로 수거하여 냉장고에 보관하면서 신선한 상태로 미생물 생균수 및 수분함량을 측정하였다. 효모(Saccharomyces cerevisiae)와 고초균(Bacillus subtilis)의 생균수 측정은 각각 PDA agar, LB agar 배지에 1㎖씩 접종하여 도말한 다음, 고초균은 30~37℃에서 18시간 정도 배양하고 효모류는 25~30℃에서 48시간 배양한 다음, 형성된 집락을 계수함으로써 측정하였다. Takju and Yakju were produced from five breweries, and the remaining sake lees were collected immediately and stored in a refrigerator to measure microbial bioburden and water content in a fresh state. The viable cell counts of yeast ( Saccharomyces cerevisiae ) and Bacillus subtilis were inoculated with 1 ml each of PDA agar and LB agar medium and smeared. Then, Bacillus subtilis was incubated for 18 hours at 30-37 ℃ and yeasts were 25-30. Incubation was done for 48 hours at < RTI ID = 0.0 >

[표 1][Table 1]

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탁주를 제조한 다음 수거한 술지게미를 분석한 결과 중량 g당 효모수는 평균 1.4 x 107 cfu/g 함유되어 있었으며, 고초균은 평균 1.6 x 106 cfu/g 정도 되었으나 양조장별 편차가 있었다. 수분함량은 평균 80% 정도 유지하였다. 상기와 같은 효모 생균수는 매우 높은 것으로서 충분히 고체발효 생균제의 종균으로 사용될 수 있는 정도이다. 또한 약주를 제조한 후 수거한 술지게미의 수분함량은 69.7%이었으며, 효모 및 고초균의 생균수는 각각 4.0 x 108 cfu/g와 3.2 x 105 cfu/g 이었다.
As a result of analyzing the collected sake lees after the preparation of Takju, the average number of yeasts per g of weight contained 1.4 x 10 7 cfu / g, and the Bacillus subtilis averaged 1.6 x 10 6 cfu / g, but there was a variation by brewery. Moisture content was maintained about 80% on average. The number of viable yeasts as described above is very high and can be used as a seed of a solid fermenting probiotic. In addition, the water content of sake lees collected after the preparation of the liquor was 69.7%, and the viable cell counts of yeast and Bacillus subtilis were 4.0 x 10 8 cfu / g and 3.2 x 10 5 cfu / g, respectively.

실시예 2Example 2

술지게미 첨가 농도에 따른 고체배양 실험Solid culture experiment according to the concentration of sake lees

술지게미를 중량대비 10-50% 농도로 첨가하여 고체발효의 가능성을 검증하기 위한 고체배양을 실시하였다. 고체배양을 위해 소규모 고체발효용 트레이(tray, 25㎜ x 200㎜ x 250㎜)를 제작 사용하였으며, 배지재료로는 국내에서 안정적인 원료 공급이 가능하고 저렴한 원료인 미강과 소맥피를 혼합하여 사용하였다. 구체적으로, 배양용기인 트레이에 121℃에서 20분간 완전 멸균한 혼합곡물(미강+소맥피=7+3, w/w)과 이의 중량대비 0.2%로 당밀을 혼합한 것을 기본배지로 하였다. 각각 술지게미를 0%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%를 첨가한 후, 수분함량을 30% 정도로 조정하고, 배양온도 30℃에서 3시간 마다 혼합곡물을 뒤집어 줌으로써 호기과정을 실시하였으며, 3일 동안 배양하면서 생균수를 측정하였다.Sulfage was added at a concentration of 10-50% by weight to carry out solid culture to verify the possibility of solid fermentation. Small solid fermentation trays (tray, 25mm x 200mm x 250mm) were manufactured and used for solid culture, and as a medium material, it was possible to supply stable raw materials in Korea and mixed rice bran and wheat bran, which are inexpensive raw materials. . Specifically, the culture medium was mixed with molasses at 0.2% by weight of the mixed grains (Belaxium + wheat flour = 7 + 3, w / w) and completely sterilized for 20 minutes at 121 ℃ as a base medium. After adding 0%, 10%, 20%, 30%, 40%, and 50% of sake lees respectively, adjust the moisture content to about 30% and turn the aerobic process by inverting the mixed grains every 3 hours at 30 ° C incubation temperature. The number of viable cells was measured while culturing for 3 days.

실험 결과는 아래 표 2와 같다. 술지게미를 첨가하지 않은 대조군(술지게미 0%)에서는 멸균한 혼합곡물 또는 외부로부터 오염된 일반세균들이 5.9 x 108 cfu/g 이상 성장하였으나, 술지게미를 첨가한 실험군 모두에서는 첨가한 술지게미 내 알코올에 의한 항균 효과로 인하여 일반 세균들이 성장하지 못하였다. 그리고 술지게미내에 함유된 고초균은 고체배지에서 약간의 성장만 나타났다. 그러나 술지게미에 있는 효모들은 10% 술지게미 첨가군에서는 4.2 x 108 cfu/g 까지 성장하였다. 배양시간에 따른 효모의 생균수 변화를 관측한 결과, 배양 3일째까지 지속적으로 높은 생균수 활력을 보였다.
The experimental results are shown in Table 2 below. In the control group without adding sake lees (0% sake lees), sterilized mixed grains or general bacteria contaminated from the outside grew more than 5.9 x 10 8 cfu / g. Due to the effect, normal bacteria did not grow. Bacillus subtilis contained in sake lees showed only slight growth in solid medium. However, yeasts in sake lees grew to 4.2 x 10 8 cfu / g in 10% sake lees. As a result of observing the viable cell count of yeast according to the incubation time, the viable cell viability was continuously maintained until the 3rd day of culture.

[표 2][Table 2]

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실시예 3Example 3

술지게미와 유산균 액상종균 첨가 고체발효 생균제 발효실험Fermentation test of solid fermentation probiotic added with sake lees and lactic acid bacteria liquid spawn

술지게미에 있는 효모를 이용한 고체발효 생균제의 효능을 극대화하기 위하여 유산균 액상종균을 첨가하여 가축용 고체발효 생균제 제조 방법에 관한 실험을 실시하였다. 즉, 실시예 2와 같이, 트레이에 혼합곡물(미강+소맥피=7+3, w/w)과 이의 중량대비 0.2%로 당밀 또는 포도당을 혼합하여 한 것을 기본배지로 사용하였으며, 상기 기본배지의 수분함량을 정제수를 이용하여 30%로 각각 조정한 후, 술지게미 단독 또는 술지게미와 액상의 유산균(Lactobacillus plantarum)을 접종한 다음, 배양온도 30℃에서 3시간 마다 혼합곡물을 뒤집어 줌으로써 호기과정을 실시하였으며, 3일 동안 배양하면서 생균수를 측정하였다. 실험 1은 배지 중량대비 술지게미를 10%로 접종하여 배양하였으며, 실험 2는 술지게미를 10%와 유사균 1%를 접종하여 배양하였고, 실험 1, 2 모두 배지에 당밀을 첨가하였다. 실험 3은 실험 2와 동일하게 술지게미를 10%와 유사균 1%를 접종하였고 배지에 당밀 대신 포도당을 첨가하였다. In order to maximize the efficacy of solid fermentation probiotics using yeast in sake lees, an experiment was conducted on the production of solid fermentation probiotics for livestock by adding a liquid lactobacillus. That is, as in Example 2, mixed grains (rice bran + wheat flakes = 7 + 3, w / w) and molasses or glucose at 0.2% by weight of the tray was used as a base medium, the base medium After adjusting the water content of each to 30% by using purified water, inoculate sake lees alone or sake lees and liquid lactobacillus ( Lactobacillus plantarum ), and then perform aerobic process by inverting the mixed grains every 3 hours at a culture temperature of 30 ℃ The number of viable cells was measured while incubating for 3 days. Experiment 1 was incubated by inoculating 10% of sake lees relative to the weight of the medium, and experiment 2 was incubated by inoculating 10% of sake lees and 1% of similar bacteria, and experiments 1 and 2 added molasses to the medium. Experiment 3 was inoculated with 10% and 1% of the like bacteria in sake lees as in Experiment 2, and glucose was added to the medium instead of molasses.

실험 결과는 아래 표 3과 같다. 유산균을 접종하여 고체발효를 하였을 경우, 실험 2와 3에서와 같이 유산균은 배양 2일째에 2~3 x 109 cfu/g 까지 성장하였다가 3일째에 약간 생균수가 감소하였다. 또한 유산균이 성장함에 따라 유기산 등과 같은 항균물질의 생산으로 효모가 실험1보다는 낮은 균수로 성장하였다. 이러한 현상은 고체발효 시 유산균의 성장속도가 효모보다 더 빠르기 때문에 발생한 것으로 추정된다. 또한 실험 3에서와 같이 당밀 대신 포도당을 탄소원으로 첨가했을 때에도 효모 및 유산균의 발효가 잘 진행되었다.The experimental results are shown in Table 3 below. In the case of solid fermentation by inoculation with lactic acid bacteria, as in Experiments 2 and 3, the lactic acid bacteria grew to 2 to 3 x 10 9 cfu / g on the 2nd day of culture, and the number of viable cells decreased slightly on the 3rd day. In addition, as lactic acid bacteria grew, yeast grew to a lower number of bacteria than Experiment 1 due to the production of antibacterial substances such as organic acids. This phenomenon is believed to occur because the growth rate of lactic acid bacteria during solid fermentation is faster than yeast. In addition, fermentation of yeast and lactic acid bacteria proceeded well even when glucose was added as a carbon source instead of molasses as in Experiment 3.

[표 3] [Table 3]

Figure pat00003

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실시예Example 4 4

멸균하지 않은 기본 곡물배지에서의 고체발효 Solid fermentation in non-sterile basic grain media

살균처리하지 않은 곡물에는 일반세균들이 104 ?106 cfu/g까지 함유되어 있기 때문에 현실적으로 고체발효 생균제를 대량생산하기 위해서는 곡물배지들을 살균하는 공정을 반드시 첨가하여야 한다. 따라서, 술지게미에 함유되어 있는 알코올성분에 의한 일반세균들의 살균효과를 검증하기 위하여, 트레이에 멸균하지 않은 혼합곡물(미강+소맥피=7+3, w/w)과 이의 중량대비 0.2%의 당밀을 혼합한 것을 기본배지로 사용하고, 상기 기본배지의 수분함량을 정제수를 이용하여 30%로 각각 조정한 후, 액상의 유산균(Lactobacillus plantarum)을 배지 중량대비 1%로 접종한 다음, 배양온도 30℃에서 3시간 마다 혼합곡물을 뒤집어 줌으로써 호기과정을 실시하였으며, 3일 동안 배양하면서 생균수를 측정하였다.Unsterilized grains contain up to 10 4 –10 6 cfu / g of bacteria, so in order to mass produce solid fermentation probiotics, the process of sterilizing grain media must be added. Therefore, in order to verify the bactericidal effect of the general bacteria by alcohol components contained in sake lees, mixed grains (rice bran + wheat vein = 7 + 3, w / w) and 0.2% molasses to its weight, not sterilized in the tray After mixing the mixture as a basic medium, the water content of the base medium was adjusted to 30% using purified water, and then inoculated with liquid lactobacillus ( Lactobacillus plantarum ) at 1% by weight of the medium, followed by a culture temperature of 30 The aerobic process was performed by inverting the mixed grains every 3 hours at ℃, and the number of viable cells was measured while incubating for 3 days.

실험 결과는 아래 표 4와 같다. 실험 1은 멸균하지 않은 기본배지에 술지게미만 넣었으며(중량대비 10%), 실험 2는 술지게미(중량대비 10%)와 유산균, 그리고 실험 3은 멸균하지 않은 곡물배지만으로 발효한 결과이다. 술지게미를 넣지 않았을 때에는 대장균군이 108 cfu/g 이상 성장하였으나, 술지게미 또는 유산균를 혼합하여 첨가하였을 때에는 대장균군이 배양 1일 또는 2일째에 약간 성장하다가 3일째에는 거의 음성으로 나타났다. 이러한 결과로부터 술지게미를 이용한 고체발효시, 기본배지로 사용되는 곡물의 살균공정 없이도 안전한 고체발효 생균제 제조가 가능함을 확인할 수 있었다.The experimental results are shown in Table 4 below. In experiment 1, only sake lees were added to the non-sterile base medium (10% by weight), and experiment 2 was the result of fermentation with sake lees (10% by weight), lactic acid bacteria, and experiment 3 using only non-sterile grain medium. E. coli group grew more than 10 8 cfu / g when the sake lees were not added, but when the sake lees or lactic acid bacteria were mixed, the E. coli group grew slightly on the 1st or 2nd day of culture and almost negative on the 3rd day. From these results, it was confirmed that during solid fermentation using sake lees, it is possible to prepare a safe solid fermentation probiotic without the sterilization process of grain used as a basic medium.

[표 4] [Table 4]

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실시예 5Example 5

술지게미의 효모를 이용한 고체발효 생균제의 대량생산 Mass Production of Solid Fermentation Probiotics Using Yeast from Sagegemi

미강 700㎏, 소맥피 300㎏, 당밀 2㎏를 대형고체발효기에 넣고 혼합하여 기본배지로 하였으며, 실시예 4에서 제조한 액상 유산균 생균제 중량대비 1%를 접종한 다음, 정제수를 첨가하면서 수분함량을 30%로 조정하였다. 상기 접종 혼합물을 하루에 4회씩 교반(40초 동안)하면서 30℃에서 3일간 발효시켜 고체발효 생균제를 제조하였다. 상기와 같은 방법을 제조하였을 경우, 배양 3일째의 효모 생균수는 3.0 x 107 cfu/g 이었으며, 유산균수는 1.5 x 109 cfu/g 이었다. 또한, 상기 제품의 수분함량을 10%대로 조정하기 위하여 50℃에서 5?10시간 정도 건조한 결과, 효모의 생균수는 5.0 x 106 cfu/g, 유산균수는 3.0 x 108 cfu/g 이었다.
700 kg of rice bran, 300 kg of wheat bran, and 2 kg of molasses were mixed and placed in a large solid fermenter to make a basic medium. After inoculating 1% of the weight of the liquid lactobacillus probiotic prepared in Example 4, water content was added while adding purified water. Adjusted to 30%. The inoculum mixture was fermented four times a day (40 seconds) with fermentation at 30 ° C. for 3 days to prepare a solid fermentation probiotic. When the above method was prepared, the number of yeast viable cells on the third day of culture was 3.0 x 10 7 cfu / g, the number of lactic acid bacteria was 1.5 x 10 9 cfu / g. In addition, as a result of drying for 5-10 hours at 50 ℃ to adjust the water content of the product to 10%, the number of viable cells of yeast was 5.0 x 10 6 cfu / g, the number of lactic acid bacteria was 3.0 x 10 8 cfu / g.

실시예 6Example 6

송아지 사양시험Calf Specification Test

본 발명의 술지게미 이용 고체발효 생균제의 효능을 검증하기 위하여, 일반 한우 농가 2군데에서 송아지 12두를 공시하여 3개월간 사양시험을 실시하였다. 생균제를 급여한 실험군은 송아지 8마리를 대상으로 4마리씩 나누어 처리구 1은 배합사료에 실시예 5에서 제조한 고체발효 생균제를 1%, 처리구 2는 고체발효 생균제를 3%씩 송아지 사료위에 뿌려줌으로써 급여하였다. 조사항목으로는 분만시 체중, 설사 발생 유무, 그리고 분변을 통한 장내 미생물의 변화를 측정하였다. 송아지의 사양시험 결과를 다음 표 5에 나타내었으며, 사양시험 결과 대조군과 처리군 간의 장내미생물 변화는 다음 표 6에 나타내었다.In order to verify the efficacy of the solid fermentation probiotic using sake lees of the present invention, 12 calf were disclosed in two places of a general Korean cattle farm and subjected to a specification test for 3 months. The experimental group fed the probiotics was divided into four for 8 calf, treatment 1 was added to the feed compound 1% solid fermentation probiotics prepared in Example 5, treatment 2 was applied by spraying 3% solid fermentation probiotics on the calf feed It was. The survey items included body weight at birth, diarrhea, and changes in intestinal microflora through feces. The calf test results are shown in Table 5 below. Intestinal microbial changes between control and treatment groups are shown in Table 6 below.

사양시험 결과, 술지게미 이용 고체발효 생균제를 섭취한 송아지에 대한 설사 발생율이나 빈도를 관찰한 결과, 생균제를 섭취하지 않은 송아지(대조구)에서는 일부 설사증이 나타났으나, 생균제를 1% 또는 3% 섭취한 급여구에서는 지사제를 투여하지 않을 정도로 대조구(control)에 비해 많이 개선되었기 때문에, 술지게미 이용 생균제를 설사증 예방에 활용할 수 있을 것으로 판단되었다. As a result of the test, the incidence and frequency of diarrhea of the calf fed the solid fermentation probiotics using sake lees showed some diarrhea in the calf without the probiotics. Since the saliva was improved much compared to the control so as not to administer the anti-diarrheal drug, it was judged that the probiotic using sake lees could be used to prevent diarrhea.

사양시험에 따른 분변미생물의 변화를 측정한 결과(표 6), 술지게미 이용 고체발효 생균제를 1% 또는 3% 씩 송아지에 급여함으로써 분변속 유산균 함량을 10배 이상 증가시킬 수 있었다. 그리고 유해미생물인 대장균군의 함량도 대조구에 비해서 급여한 처리구에서 10?100배 이상 감소하는 것으로 나타났다. 이는 효모 및 유산균 생균수가 증가하여 장내에서 우세균으로 분포함으로써 유해세균의 억제를 통한 설사방지 등 장내 정장작용에 중요한 역할을 수행한 것으로 생각되었다. As a result of measuring the change in fecal microorganism according to the specification test (Table 6), the fecal lactobacillus content could be increased by more than 10 times by feeding the calf using the fermented solid fermentation probiotics by 1% or 3%. In addition, the content of E. coli group, which is a harmful microorganism, was also reduced by 10 to 100 times in the treated group compared to the control group. This resulted in an increase in the number of viable yeasts and lactic acid bacteria and the distribution of dominant bacteria in the intestine, which played an important role in intestinal intestinal action such as diarrhea prevention through inhibition of harmful bacteria.

[표 5][Table 5]

Figure pat00005

Figure pat00005

[표 6]TABLE 6

Figure pat00006

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실시예Example 7 7

한우 거세우 대상 사양시험Specification test for Hanwoo beef stew

본 발명의 술지게미 이용 고체발효 생균제가 한우 비육에 미치는 효과을 검증하기 위하여, 일반 한우 농가 2군데에서 비육후기 거세한우 총 36두를 공시하여 6개월간 사양시험을 실시하였다. 12두씩 3개의 군으로 나누어, 대조구는 술지게미 발효 생균제를 급여하지 않았으며, 처리구 1은 실시예 5에서 제조한 고체발효 생균제를 1%, 치리구 2는 고체발효 생균제를 3%씩 사료위에 뿌려줌으로써 급여하였다. 체중 및 사료섭취량은 시험 종료 시까지 측정하여 일당증체량, 일당사료섭취량 및 사료효율을 각각 계산하였다. 사양시험 결과는 다음 표 7에 나타내었다. In order to verify the effect of the solid fermentation probiotics using sake lees of the present invention on the fattening of Hanwoo, a total of 36 heads of late-past castrated Hanwoo were disclosed in two general Hanwoo farmers and subjected to a specification test for 6 months. Divided into three groups of 12 heads, the control group did not receive the sake lees fermentation probiotics, treatment 1 was sprayed on the feed by 1% solid fermentation probiotics prepared in Example 5, Chirigu 2 by 3% solid fermentation probiotics It was paid. Body weight and feed intake were measured until the end of the study to calculate daily gain, feed intake and feed efficiency, respectively. The test results are shown in Table 7 below.

[표 7][Table 7]

Figure pat00007

Figure pat00007

비육후기 한우 거세우에 술지게미를 이용한 고체발효 생균제가 첨가된 사료를 급여했을 때의 사양성적(표 7)를 살펴보면, 대조구에 비해 급여구에서의 일당 증체량이 증가되었으며, 사료효율도 대조구 17.4, 1% 급여구 15.6, 그리고 3% 급여구 15%로 다소 개선된 것으로 나타났다.
The results of dietary supplementation of solid fermentation probiotic supplemented with sake lees in late-winter Hanwoo steer (Table 7) showed an increase in daily gain in the feed group compared to the control, and the feed efficiency was also 17.4, 1%. It was slightly improved to 15.6 for the payroll and 15% for the payroll.

본 발명은, 탁주 또는 약주를 제조함에 따라 발생되는 술지게미의 영양성분과 유용한 미생물인 효모를 고체발효 생균제를 제조하는데 이용함으로써 폐기물로 발생되는 술지게미를 재활용하고, 술지게미 폐기에 따른 환경오염을 줄일 수 있다. 또한, 본 발명의 술지게미를 이용한 고체발효 생균제는 술지게미가 지닌 영양학적 장점과 미생물학적 특성을 살린 새로운 생균제로서 가축에 적용 시 사료에 대한 기호성을 증진시키고, 가축의 생산성을 향상시킬 수 있으며, 술지게미의 새로운 용도로서 산업적으로 활용될 수 있다.
The present invention, by using the nutrients of sake lees and yeast, which is a useful microorganism, produced by preparing sake liquor or medicinal liquor to prepare solid fermentation probiotics, the sake lees generated as waste can be recycled and environmental pollution due to the disposal of sake lees can be reduced. . In addition, the solid fermentation probiotic using the sake lees of the present invention as a new probiotic utilizing the nutritional advantages and microbiological characteristics of sake lees can improve the palatability for feed when applied to livestock, improve the productivity of livestock, It can be used industrially as a new use.

Claims (12)

(a) 양조장으로부터 수거된 알코올 함량 5~9%의 술지게미를 0~10℃에서 냉장 보관하여 술지게미 내에 함유된 효모 및 고초균을 종균으로 사용 가능하도록 보관하는 단계와,
(b) 고체배지에 상기 단계의 보관된 술지게미를 배지 중량대비 10?30%로 접종하고, 수분함량을 30?50%로 조정한 후, 25?35℃에서 2~4일간 발효시켜 술지게미 유래 효모가 107~109 cfu/g로 함유된 생균제를 얻는 단계를 포함하는, 술지게미를 이용한 가축용 고체발효 생균제의 제조방법.
(a) storing the yeast and Bacillus subtilis contained in the sake lees by refrigeration by storing the sake lees of 5-9% alcohol content collected from the brewery at 0-10 ° C .;
(b) inoculated with the sake lees stored in the above step in a solid medium 10 ~ 30% of the weight of the medium, adjust the water content to 30 ~ 50%, fermentation at 25 ~ 35 ℃ 2 ~ 4 days derived yeast derived from A method of producing a solid fermentation probiotic for livestock using sake lees comprising the step of obtaining a probiotic containing 10 7 ~ 10 9 cfu / g.
제1항에 있어서, 상기 고체배지에 술지게미와 함께 유산균을 혼합 접종하는 것을 특징으로 하는 제조방법.The method according to claim 1, wherein the solid medium is inoculated with lactic acid bacteria together with sake lees. 제2항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum); 엔테로코커스 패시움(Enterococcus faecium); 페디오코커스 펜토사세우스(Pediococcus pentosaceus) 중 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 제조방법.According to claim 2, The lactic acid bacteria Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ); Enterococcus faecium ; Pediococcus pentosaceus ( Pediococcus pentosaceus ) The production method, characterized in that any one or more. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 기본 고체배지는 접종 전 살균공정 없이 상기 술지게미가 접종되는 것을 특징으로 하는 제조방법.The method of claim 1, wherein the basic solid medium is inoculated with the sake lees without sterilization before inoculation. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 양조장으로부터 수거된 술지게미는 냉장 보관하면서 48시간 이내에 접종에 사용되는 것을 특징으로 하는 제조방법.The method according to claim 1 or 2, wherein the sake lees collected from the brewery is used for inoculation within 48 hours while refrigerated. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 고체배지는 미강 및 소맥피로 이루어진 기본 고체배지인 것을 특징으로 하는 제조방법.The method according to claim 1 or 2, wherein the solid medium is a basic solid medium consisting of rice bran and wheat veins. 제6항에 있어서, 상기 고체배지는 미강과 소맥피를 9:1 내지 5:5로 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법.The method of claim 6, wherein the solid medium comprises rice bran and wheat bran in a range of 9: 1 to 5: 5. 제7항에 있어서, 상기 고체배지는 당밀 또는 포도당을 전체배지의 0.2~5 중량%로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 제조방법.The method of claim 7, wherein the solid medium further comprises molasses or glucose 0.2 to 5% by weight of the total medium. 제1항의 방법으로 제조되어, 술지게미 유래 효모 107~109 cfu/g를 포함하는 고체발효 생균제 조성물.A solid fermentation probiotic composition prepared by the method of claim 1 and comprising yeast 10 7 to 10 9 cfu / g derived from sake lees. 제2항의 방법으로 제조되어, 술지게미 유래 효모 107~109 cfu/g와 유산균 108~109 cfu/g를 포함하는 고체발효 생균제 조성물.A solid fermentation probiotic composition prepared by the method of claim 2 and comprising yeast 10 7 to 10 9 cfu / g and lactic acid bacteria 10 8 to 10 9 cfu / g. 제9항 또는 제10항의 고체발효 생균제 조성물을 사료에 0.5~5 중량%로 첨가하여 급여하는 것을 포함하는 반추동물의 사육방법.A method of breeding ruminants, comprising adding the solid fermentation probiotic composition of claim 9 or 10 to a feed in an amount of 0.5 to 5% by weight. 제11항에 있어서, 상기 반추동물은 소인 것을 특징으로 하는 사육방법.
12. The breeding method of claim 11, wherein the ruminant is a cow.
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