KR100481696B1 - Solid cultivate material and method for microbial and using method for solid cultivation - Google Patents
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Abstract
본 발명은 친환경 농업용 생물농약을 공급하기 위한 미생물을 고체배양하기 위한 배지와 배양장치 및 배양방법을 제공하도록 하는 미생물 고체배양용 신규배지와 배양장치 및 그들을 이용한 미생물 고체배양 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a new medium and culture medium for culturing microorganisms to provide a medium and culture apparatus for culturing microorganisms for supplying environmentally friendly agricultural biopesticides and a culture method, and a method for culturing microorganisms using them.
이러한 본 발명은 왕겨가루 및 미강 가루로 이루어진 함수율 65%의 고체배지를 배양접시에 깔아주는 단계, 상기 고체배지(수분함유65%)를 121oC의 온도로 1시간을 경과시켜 살균시키는 단계, 살균된 고체배지를 30oC 이하로 온도를 갖도록 냉각시키는 단계, 냉각된 고체배지에 종균을 스프레이식으로 접종시키는 단계, 접종된 종균을 고체배지와 혼합시키는 단계, 충분히 혼합된 배지를 뚜껑을 닫아 배양실로 이동시켜 28oC의 온도로 5일간 배양시키는 단계를 수행시킴으로서 이루어진다.The present invention is a step of spreading a solid medium of 65% water content consisting of chaff powder and rice bran powder in a culture dish, sterilizing the solid medium (65% water) at a temperature of 121 o C for 1 hour, Cooling the sterilized solid medium to a temperature below 30 o C, spraying the seed with the cooled solid medium, mixing the seeded seed with the solid medium, and closing the lid with a sufficiently mixed medium. Transfer to the culture chamber and incubate for 5 days at a temperature of 28 ° C.
Description
본 발명은 친환경 농업용 생물농약을 공급하기 위한 진균(곰팡이)을 고체배양하기 위한 배지와 배양장치 및 배양방법을 제공하도록 하는 미생물 고체배양용 신규배지와 배양장치 및 그들을 이용한 미생물 고체배양 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a new medium and culture medium for culturing microorganisms and to a culture medium and a method for culturing microorganisms using the same, to provide a medium, a culture device and a culture method for solid culture of fungi (fungus) for supplying eco-friendly agricultural agricultural pesticides. .
기존의 미생물제제를 생산하는 업체는 대부분 액체배양을 하고 있으며, 고체배양을 위한 연구를 하고는 있으나 상업적으로 채산성을 맞추면서 대량으로 미생물 포자를 만들어내는 것은 상당히 어려운 일인 것이다.Most companies that produce conventional microbial preparations are liquid cultures, and although they are researching solid cultures, it is quite difficult to produce microbial spores in a commercially profitable manner.
즉 기존의 농업용 미생물제제들은 대부분이 액체배양으로 생산 유통되고 있는 실정으로, 액체배양이 비교적 간단하고 비용도 저렴하기 때문이다.That is, the existing agricultural microorganisms are produced and distributed mostly in liquid culture, because liquid culture is relatively simple and inexpensive.
그러나 액체 배양 미생물의 특성상 액체 속에서는 미생물들이 생명을 유지할 수 있는 포자형성을 하기 어려워 생명을 유지하기가 힘들게 되고, 이에 따라 유통과정에서 대부분의 미생물이 사멸하게 되므로, 유통과정에서 본래의 목적과 기능을 완전히 상실하게 된다.However, due to the nature of liquid culture microorganisms, it is difficult to maintain life because spores are difficult to maintain their life in liquid, and thus most of the microorganisms are killed in the distribution process. It is totally lost.
이러한 문제를 감안하여 액체배양 한 것을 분말흡착제(제오라이트 등)에 섞어 말려 미생물 분말제로 유통시키고 있으나 이러한 미생물 분말제도 고체배양에 비하면 미생물의 밀도(마리수)가 100분의 1에도 미치지 못하여 목적한 대로 안정된 효과를 발휘하지 못하는 것이었다.In view of these problems, liquid cultures are mixed with powder adsorbents (zeolites, etc.) and dried and distributed as microbial powders.But these microbial powders do not reach one hundredth of the density (number) compared to solid cultures. It was not able to exert a stable effect.
또한 기존의 미생물 배양실은 온도 유지를 위하여 열풍을 공급하고 있으나 상기 열풍공급 방식은 작업자에게서 떨어진 잡균 및 먼지와 각종 도구에 묻어있는 잡균 및 먼지가 열풍의 와류에 섞여 공기 중을 떠다니며 배양에 오염원으로 작용하고 있으며, 또한 미생물이 배양될 때 발생하는 열을 효과적으로 처리하지 못하여 온도조절이 쉽지 않는 한편 대량배양이 쉽지 않게 된다.In addition, the existing microbial culture chamber supplies hot air to maintain the temperature, but the hot air supply method mixes various germs and dust from workers and various tools and dusts floating in the air by mixing with the vortices of the hot air and acts as a pollution source for culture. In addition, the heat generated when the microorganism is cultured is not effectively handled temperature control is not easy while mass culture is not easy.
그리고 고체배지에 종균을 접종할 때 작업자의 손이 고체배지의 상부를 지나게 되어 작업자의 손에 의한 오염에 대하여 대책이 없었다.When the seed was inoculated into the solid medium, the worker's hand passed the upper part of the solid medium, so there was no countermeasure against contamination by the worker's hand.
본 발명은 미생물을 고체배양하는 방법과 함께 종균의 접종시 작업자의 손에 의한 오염을 방지하는 미생물 배양장치 및 미생물의 배양시 최적의 배양조건을 제공하는 것을 목적으로 한다.An object of the present invention is to provide a microbial culture apparatus for preventing contamination by a worker's hand when inoculating spawn with a method for solid culture of microorganisms and an optimum culture condition for the culture of microorganisms.
이러한 본 발명은 왕겨가루 및 미강가루로 이루어진 고체배지(수분65%)를 배양접시에 깔아주는 단계, 상기 고체배지를 121oC의 온도로 1시간을 경과시켜 살균시키는 단계, 살균된 고체배지를 30oC 이하로 온도를 갖도록 냉각시키는 단계, 냉각된 고체배지에 종균을 스프레이식으로 접종시키는 단계, 접종된 종균을 고체배지와 혼합시키는 단계, 충분히 혼합된 배지를 뚜껑을 닫아 배양실로 이동시켜 28oC의 온도로 5일간 배양시키는 단계를 수행시킴으로서 이루어진다.The present invention is a step of spreading a solid medium (65% moisture) consisting of chaff powder and rice bran powder in a culture dish, sterilizing the solid medium at a temperature of 121 o C for 1 hour, sterilized solid medium Cooling to a temperature below 30 o C, spraying the seed with the cooled solid medium, mixing the seeded seed with the solid medium, and transferring the sufficiently mixed medium to the incubation chamber by closing the lid. o by incubating at a temperature of C for 5 days.
또한 본 발명은 배양접시의 고체배지에 접종된 종균을 섞어줌에 있어서, 손잡이의 일측에 고정봉이 형성되고 상기 고정봉에 한쪽으로 톱니형상의 섞음봉을 형성시키되 손잡이는 배양접시 위에 놓이지 않고도 섞음봉을 좌우로 이동시켜 고체배지와 종균을 섞어줄 수 있도록 한다.In addition, in the present invention to mix the seed inoculated in the solid medium of the culture dish, a fixed rod is formed on one side of the handle and the sawtooth-shaped mixing rod is formed on one side of the fixed rod, but the handle is not mixed on the culture plate Move left and right to mix the solid medium and spawn.
본 발명의 고체배지에 접종된 종균을 배양시키는 배양실은 바닥에 온수파이프를 설치하여 바닥으로부터 열이 공급되도록 하고, 일측에는 헤파필터가 내장된 에어콘을 장착하여 멸균된 찬(냉각) 외부공기를 공급하도록 하는 한편 배기팬을 이용하여 배양실의 내부공기를 배출시키도록 하되 상기 배기팬이 설치된 배기구는 S자 형태를 갖게 형성시키도록 한 것이다.The culture chamber for cultivating the spawn seed inoculated in the solid medium of the present invention is installed with a hot water pipe on the bottom to supply heat from the bottom, and one side is equipped with an air conditioner with a built-in HEPA filter to supply sterilized cold (cooled) outside air On the other hand to exhaust the internal air of the culture chamber using an exhaust fan, but the exhaust port is installed to have an S-shaped exhaust port is installed.
본 발명의 섞음봉은 4-5회 좌우로 이동시키되 좌측으로 갈 때와 우측으로 갈 때 그 위치를 변화시켜 고체배지와 종균이 충분히 혼합되도록 한다.Mixing bar of the present invention is moved to the left and right 4-5 times to change the position when going to the left and to the right so that the solid medium and the spawn is sufficiently mixed.
본 발명은 톱밥 또는 왕겨 및 쌀겨가루(미강)의 함수율 65%인 고체배지(1)를 배양접시(10)에 담아주고, 이를 살균하여 종균(2)을 접종시킨 후 종균(2)과 고체배지(1)를 혼합시켜 바닥으로부터 온돌형태로 열이 공급되는 배양실(40)에서 종균(2)을 배양시키는 것이다.In the present invention, a solid medium (1) having a water content of 65% of sawdust or rice husk and rice bran (rice bran) is placed in a culture dish (10), and sterilized by inoculating the seed (2) after the seed (2) and the solid medium. (1) is mixed to incubate the spawn (2) in the culture chamber (40) in which heat is supplied from the bottom in the form of ondol.
본 발명의 배양접시(10)는 사각접시 형태로 상부에 덮개(11)가 씌워지게 되며, 상기 배양접시(10)는 여러 개가 칸칸이 채워지는 대차(30)에 채워져 대차(30)의 하부에 설치된 바퀴(32)를 이용하여 이동시키게 되며, 배양접시(10)에 담긴 고체배지(1)와 종균(2)을 혼합시키는 장치는 손잡이(21)에 고정봉(20)을 고정시키고 상기 고정봉(20)의 일측으로 톱니형상의 섞음봉(22)을 고정시킨 것으로, 고체배지(1)를 2cm로 깔아줄 경우 섞음봉(22)은 직경4mm를 갖고 톱니파형의 날 간격이 5cm가 되도록 하며, 날 사이의 간격은 고체배지(1)의 두께가 1cm 늘어날 때마다 2mm를 늘려주어야 한다.The culture dish 10 of the present invention is covered with a cover 11 on the top in the form of a square plate, the culture dish 10 is filled in the bogie 30 is filled with a number of Khankan installed in the lower portion of the bogie 30 The wheel 32 is moved, the device for mixing the solid medium (1) and spawn (2) contained in the culture dish (10) is fixed to the fixing rod 20 to the handle 21 and the fixing rod ( 20) One side of the sawtooth mixing rod 22 is fixed. When the solid medium 1 is laid with 2 cm, the mixing rod 22 has a diameter of 4 mm and the sawtooth blade interval is 5 cm. The spacing between blades should be increased by 2 mm for each 1 cm increase in solid media (1).
여기서 손잡이(21)는 배양접시(10)의 측면에 위치시킨 상태에서 좌우로 이동하게 되는 것으로, 상기 손잡이(21)는 기계적인 장치를 이용하여 자동으로 이동시킬 수 있다.Wherein the handle 21 is to be moved to the left and right in the state positioned on the side of the culture dish 10, the handle 21 can be moved automatically using a mechanical device.
배양접시(10)를 이동시키거나 배양시킬 때 사용되는 대차(30)는 바퀴(32)에 의해 이동되며, 받침턱(31)이 형성되어 배양접시(10)가 층층으로 서랍과 같이 적층시키게 된다.The trolley 30 used to move or incubate the culture dish 10 is moved by the wheels 32, and the support jaw 31 is formed so that the culture dish 10 is stacked like a drawer in layers. .
대차(30)에 채워진 배양접시(10)의 종균을 배양시키는 배양실(40)은 바닥에 스치로폼(53)을 깔고 그 위에 철망(52)을 놓은 후 그 위에 마른 모래(54)와 온수파이프(50)를 놓고 그 위에 세멘트 콘크리트(51)로 처리한 후 상면에 에폭시 페인트로 마감 처리한다.In the culture chamber 40 for culturing the spawn of the culture dish 10 filled in the bogie 30, the styrofoam 53 is laid on the floor, the wire mesh 52 is placed thereon, and the dry sand 54 and the hot water pipe 50 are placed thereon. ) Is placed on it and treated with cement concrete (51) on it and finished with epoxy paint on the top.
그리고 배양실(40)의 상부에는 해파필터가 장착된 에어콘(41)으로부터 멸균된 외부공기를 공급받도록 흡입구(42)를 설치하며, 상기 배양실(40)의 천장에는 배기구(43)를 설치하되 상기 배기구(43)는 S자 형태를 갖도록 하고, 상기 배기구(43)에 배기팬(44)을 설치하여 배양실(40)의 내부공기를 배출시키도록 한다.In addition, an intake port 42 is installed in the upper portion of the culture chamber 40 so as to receive sterilized external air from the air conditioner 41 equipped with a sea wave filter, and an exhaust port 43 is installed in the ceiling of the culture chamber 40, but the exhaust port is installed. 43 has an S-shape, and an exhaust fan 44 is installed in the exhaust port 43 to exhaust the internal air of the culture chamber 40.
한편 본 발명의 배양방법은 톱밥 및 왕겨가루로 이루어진 고체배지를 배양접시에 깔아주는 고체배지 준비단계(100)와, 상기 고체배지를 121oC의 온도로 1시간을 경과시켜 살균시키는 살균단계(200)와, 살균된 고체배지를 30oC 이하의 온도를 갖도록 자연 냉각시키는 냉각단계(300)와, 냉각된 고체배지에 종균을 스프레이식으로 접종시키는 종균접종단계(400)와, 접종된 종균을 고체배지와 혼합시키고 섞어주는 혼합단계(500)와, 충분히 혼합된 배지를 배양실로 이동시켜 28oC의 온도로 5일간 배양시키는 배양단계(600)로 이루어진다.On the other hand, the culture method of the present invention is a solid medium preparation step (100) for laying a solid medium consisting of sawdust and rice husk in a culture dish, sterilization step of sterilization by passing the solid medium at a temperature of 121 o C for 1 hour ( 200), a cooling step (300) for naturally cooling the sterilized solid medium to have a temperature of 30 ° C or less, the seed inoculation step 400 for spraying the seed to the cooled solid medium, and the seeded seed Mixing step (500) for mixing and mixing with the solid medium, and the culture step (600) for culturing for 5 days at a temperature of 28 o C by moving the medium sufficiently mixed to the culture chamber.
여기서 종균의 접종은 클린벤치에서 이루어지며 살균된 배양접시(10)의 이동과 배양에는 대차(30)가 사용되며, 고체배지와 종균의 혼합은 섞음봉(22)에 의해 이루어지는 것으로, 섞음봉(22)은 배양접시(10)의 상부에서 좌우로 4-5회 정도 왕복하되 좌측으로 이동할 때와 우측으로 이동할 때 그 위치를 변화시켜 이동되게 하므로서 충분한 혼합이 이루어지도록 한다.Here, the seed is inoculated in a clean bench and the bogie 30 is used for the movement and culture of the sterilized culture dish 10, and the mixing of the solid medium and the seed is made by the mixing rod 22. 22) is to reciprocate about 4-5 times from side to side in the upper portion of the culture dish 10 to change the position when moving to the left and when moving to the right so that sufficient mixing is made.
이러한 본 발명을 배양순서에 따라 상세히 설명하기로 한다.This invention will be described in detail according to the culture sequence.
본 발명의 고체배지 준비단계(100)는 톱밥 또는 왕겨가루 및 쌀겨가루(미강)로 이루어진 고체배지(1)를 도 2 에 도시된 배양접시(10)에 2cm 두께로 깔아주는 것으로, 상기 고체배지(1)를 배양접시(10)에 깔아주는 두께에 따라 섞음봉(22)의 날 사이 간격이 변하게 된다.Solid medium preparation step 100 of the present invention by laying a solid medium (1) consisting of sawdust or rice bran powder and rice bran (rice bran) to 2cm thick in the culture dish (10) shown in Figure 2, the solid medium (1) the interval between the blades of the mixing rod 22 is changed according to the thickness laid on the culture dish (10).
상기 고체배지 준비단계(100)에서 준비된 고체배지(수분65%)(1)는 살균단계(200)를 거치게 되는 것으로, 살균단계(200)는 고체배지(1)가 깔린 배양접시(10)에 도 8 과 같이 덮개(11)를 씌운 후 배양접시(10)를 도 9 와 같이 대차(30)에 적층시켜 121oC의 온도로 1시간을 초과시켜 고체배지(1)를 완전히 살균시키도록 한다.The solid medium (65% moisture) (1) prepared in the solid medium preparation step 100 is to go through a sterilization step 200, the sterilization step 200 is in the culture dish 10, the solid medium (1) After covering the cover 11 as shown in FIG. 8, the culture dish 10 is laminated on the trolley 30 as shown in FIG. 9 to allow the solid medium 1 to be completely sterilized by over 1 hour at a temperature of 121 ° C. .
살균단계(200)에서 살균된 고체배지(1)는 자연상태로 냉각시켜 30oC이하 온도를 갖도록 하는 냉각단계(300)를 거치도록 한다Solid medium (1) sterilized in the sterilization step 200 is subjected to the cooling step 300 to cool to the natural state to have a temperature below 30 o C.
충분히 냉각된 고체배지(1)가 들어있는 배양접시(10)는 대차(30)에 적층되어 있는 채로 클린벤치가 설치된 장소로 이동시킨 후 클린벤치에서 종균을 접종하는 종균접종단계(400)를 수행하도록 한다.The culture plate 10 containing the sufficiently cooled solid medium 1 moves to the place where the clean bench is installed while being stacked on the trolley 30, and then carries out the seed inoculation step 400 of inoculating the spawn in the clean bench. Do it.
클린벤치가 설치된 장소로 이동된 대차(30)에서 하나의 배양접시(10)를 꺼내어 클린벤치로 이동시킨 후 클린벤치에서 덮개(11)를 벗기고 도 4 와 같이 스프레이 방식으로 종균(2)을 고체배지(1)에 스프레이시켜 접종을 시키도록 한다.Take out one culture dish 10 from the trolley 30 moved to the place where the clean bench is installed, move it to the clean bench, remove the cover 11 from the clean bench, and solidify the spawn 2 by spraying as shown in FIG. Spray the medium (1) to inoculate.
고체배지(1)에 종균(2)의 접종이 완료되면 고체배지(1)와 종균(2)을 혼합하는 혼합단계(500)를 수행하게 된다.When the inoculation of the spawn 2 on the solid medium 1 is completed, the mixing step 500 of mixing the solid medium 1 and the spawn 2 is performed.
혼합단계(500)는 손잡이(21)가 형성된 고정봉(20)에 톱니 형상의 섞음봉(22)이 설치된 것을 이용하는 것으로, 손잡이(21)를 잡고 섞음봉(22)의 하부를 배양접시(10)의 바닥에 밀착시킨 상태에서 배양접시(10)의 상부를 지그재그 형태로 이동시킴으로서 고체배지(1)와 종균(2)을 혼합시키는 것이다.The mixing step 500 is to use a sawtooth mixing rod 22 is installed on the fixed rod 20, the handle 21 is formed, the handle 21 to hold the lower portion of the mixing rod 22 culture dish (10) The solid medium (1) and the spawn (2) are mixed by moving the upper portion of the culture dish (10) in a zigzag form in close contact with the bottom.
여기서 섞음봉(22)은 배양접시(10)에 고체배지(1)를 2cm로 깔아줄 경우 직경4mm를 갖고 톱니파형의 날 간격이 5cm가 되도록 스테인레스 봉을 이용하여 제작하며, 날 사이의 간격은 고체배지(1)의 두께가 1cm 늘어날 때마다 2mm를 늘려주어야 하고, 배양접시(10)의 크기가 커지면 섞음봉(22)의 날을 추가하여 제작 사용한다.Here, the mixing rod 22 is produced by using a stainless rod so that when the solid medium (1) on the culture dish 10 to 2cm and has a diameter of 4mm and the blade spacing of the sawtooth wave is 5cm, the spacing between the blades Whenever the thickness of the solid medium (1) is increased by 1cm 2mm should be increased, and the size of the culture dish 10 is increased to add the blade of the mixing rod 22 is used.
섞음봉(22)은 도 5 와 같이 배양접시(10)의 좌측에서 상부를 맞추어 우측으로 이동시키게 되고,우측으로 이동된 후에는 하부와 맞추어 좌측으로 이동시키게 되는 작업을 4-5회 반복하게 되는 것으로, 상기 섞음봉(22)은 손잡이(21)를 잡고 이동시키게 되며, 이때 손잡이(21)는 배양접시(10)의 측면에 돌출되어 있어 손잡이(21)를 잡은 작업자의 손이 배양접시(10)의 상부에 위치하지 않게 되어 혼합시 오염될 수 있는 확률을 줄이도록 한다.Mixing rod 22 is moved to the right to match the upper side from the left side of the culture dish 10, as shown in Figure 5, after the right to move the left and right to move to the left to match the bottom 4 The mixing rod 22 is to be moved to hold the handle 21, the handle 21 is protruding to the side of the culture dish 10, the hand of the worker holding the handle 21 is a culture dish (10) It is not located at the top of the) to reduce the possibility of contamination during mixing.
이때 손잡이(21) 부위에 기계적으로 좌우로 이동시키는 장치를 설치할 경우 작업자가 수 작업으로 섞음봉(22)을 이동시키지 않고 자동으로 이동시킬 수 있다.At this time, when installing the device for mechanically moving from side to side on the handle 21, the worker can move automatically without moving the mixing rod 22 by hand.
본 발명의 섞음봉(22)은 고체배지(1)의 상하부가 골고루 섞이도록 하는 한편 평탄하게 일정한 두께로 고체배지(1)가 퍼지게 되어 배양이 잘되고 포자형성이 잘되게 된다.Mixing rod 22 of the present invention, while allowing the upper and lower portions of the solid medium (1) to be mixed evenly while the solid medium (1) is spread to a flat constant thickness is well cultured and spore formation is good.
섞음봉(22)이 상기 조건을 벗어날 경우 고체배지(1)와 종균(2)을 섞을 때 고체배지(1)가 한쪽으로 몰리면서 쏠리는 현상이 발생되므로 골고루 섞이지 않게 되며, 고체배지(1)의 뭉침과 쏠림현상으로 배양에 필요한 산소공급에 문제가 발생한다.When the mixing rod 22 deviates from the above conditions, when the solid medium 1 and the spawn 2 are mixed, the solid medium 1 is pushed to one side so that the mixing medium 22 does not mix evenly, and the solid medium 1 of the Agglomeration and dropping causes problems with oxygen supply for culture.
즉 혼합단계(500)는 고체배지(1)로 사용한 왕겨가루나 쌀겨가루에 의한 공극현상을 만들어 산소공급이 배양접시(10)의 바닥에까지 골고루 동시에 이루어져야 하는데 쏠림이나 뭉침현상이 발생하면 배양이제대로 되지 않기 때문에 골고루 혼합이 이루어지도록 하는 한편 산소공급이 원활히 이루어지도록 한다.That is, the mixing step (500) is to create a pore phenomenon by chaff powder or rice bran powder used as a solid medium (1) and oxygen supply must be made evenly to the bottom of the culture dish (10). Since it is not possible to mix evenly while the oxygen supply is made smoothly.
고체배지(1)와 접종한 종균(2)을 잘 섞고 평탄한 두께를 유지하도록 하는 것은 접종한 종균(2)이 고체배지(1)에 골고루 묻도록 하기 위함이다.Mixing the solid medium (1) and the seeded seedlings (2) well and maintaining a flat thickness is to ensure that the seeded seedlings (2) evenly bury the solid medium (1).
본 발명의 섞음봉(22)은 좌우로 이동시킴에 따라 마치 쟁기가 흙을 위로 뒤집는 듯한 기능을 하는 한편 눈에 보이지 않는 제일 밑바닥 부분을 앞뒤로 이동시키는 기능을 수행하면서 고체배지(1)의 두께를 고르게 평탄화시키는 작업을 동시에 수행하게 된다.Mixing rod 22 of the present invention moves as it moves from side to side as if the plow flips up the soil while performing the function of moving back and forth the invisible bottom part of the solid medium (1) The flattening operation is performed at the same time.
이러한 접종작업과 혼합작업은 클린벤치에서 이루어지게 되는 것으로, 혼합작업까지 끝내게 되면 배양접시(10)에 덮개(11)를 씌우고 덮개(11)가 씌워진 배양접시(10)는 대차(30)에 서랍식으로 적층시키게 된다.Such inoculation work and mixing is to be done in a clean bench, when the mixing operation is finished until the cover (11) to the culture plate 10 and the cover plate 11 is covered with a drawer (30) To be stacked.
미생물의 대량 고체배양을 위해서는 고체배양 도구로서 미생물의 특성상 배지에 종균을 접종시키기 위하여 반드시 무균조작을 하여야 하므로 클린벤치의 사용은 필수적이라 할 수 있으나, 미생물의 고체배양시 특정한 균을 한번에 많은 량을 처리할 수 없는 어려움이 있는 것으로, 아무리 큰 클린벤치를 만든다 하여도 오염이 되지 않으면서 많은 량을 한꺼번에 할 수 없기 때문에 오염이 되지 않는 작업량으로 반복해서 작업을 수행하여야 한다.The use of a clean bench is essential for the solid culture of microorganisms. As a solid culture tool, aseptic culture must be performed to inoculate the seed in the medium, it is essential to use a clean bench. There is a difficulty that cannot be dealt with, and no matter how large a clean bench is, it cannot be polluted and a large amount cannot be done at once, so the work must be repeated with a non-polluted workload.
이러한 작업에 필요한 도구가 본 발명의 도 9 에 도시된 대차(30)인 것으로, 대차(30)에 덮개(11)가 씌워진 배양접시(10)를 서랍식으로 적층시켜 클린벤치의 설치장소로 이동시킨 후 대차(30)에서 배양접시(10)를 꺼내어 클린벤치 내에서 덮개(11)를 벗기고 접종과 혼합단계(400)(500)를 수행한 후 덮개(11)를 씌워 대차(30)에 끼워주는 작업을 반복적으로 수행하도록 한다.The tool required for this operation is the trolley 30 shown in Fig. 9 of the present invention, the culture plate 10 covered with a cover 11 on the trolley 30 is stacked in a drawer to move to the installation place of the clean bench. After removing the culture plate 10 from the balance 30, peel off the cover 11 in the clean bench, and after the inoculation and mixing step (400) (500) to cover the cover 11 to fit into the balance 30 Try to perform the task repeatedly.
이 같이 작업을 하는 경우 클린벤치의 크기가 적어도 되고 배양접시(10)의 이동이나 배양시 면적을 적게 차지하는 이점이 있는 것으로, 좁은 공간에서 많은 량의 미생물 처리 배양할 수 있게 된다.In this case, there is an advantage that the size of the clean bench is at least small and occupies a small area during the movement or incubation of the culture dish 10. Thus, a large amount of microorganisms can be treated and cultured in a narrow space.
그리고 접종과 혼합단계를 거쳐 배양접시(10)가 대차(30)에 끼워지는 적층과정이 완료되면 대차(30)를 바퀴(32)구름을 이용하여 도 9 와 같은 배양실(40)로 이동시켜 28oC의 온도로 5일간 배양시키는 배양단계(600)를 수행하도록 한다.And after the lamination process of the culture plate 10 is fitted to the trolley 30 through the inoculation and mixing step is completed by moving the trolley 30 to the culture chamber 40 as shown in Figure 9 using the wheel 32 cloud 28 o Incubate step 600 to incubate for 5 days at a temperature of C.
본 발명과 같이 고체배지(1)와 종균(2)을 혼합하지 않고 고체배지(1)의 표면에 종균을 접종시킨 후 그대로 배양시키게 되면 배양에 10-20일 정도가 소요되며, 고체배지(1)의 밑에까지 배양되는 시간이 오래 걸려 이미 배양된 미생물이 포자상태를 유지하지 못하고 재발아 하여 소멸되는 문제가 발생된다.If the inoculation of the seed medium on the surface of the solid medium (1) without mixing the solid medium (1) and the seed (2) as in the present invention and incubated as it takes about 10-20 days, the solid medium (1 It takes a long time to incubate under) and the microorganisms already cultured do not maintain their spores and regenerate and disappear.
본 발명의 배양실(40)은 흡입구(42)와 배기구(43)의 구조 그리고 배양실(40)에 열을 가하는 바닥 구조에 특징이 있는 것으로, 통상적인 방법인 열풍을 이용하여 배양실(40)의 내부에 열을 가하지 않고 온돌구조를 이용하여 바닥으로부터 열이 공급되도록 한 것이다.The culture chamber 40 of the present invention is characterized in that the structure of the inlet port 42 and the exhaust port 43 and the bottom structure to apply heat to the culture chamber 40, the interior of the culture chamber 40 by using hot air, which is a conventional method The heat is supplied from the floor using the ondol structure without applying heat.
배양실(40)의 바닥에는 온수 파이프(50)가 내장되어 온수파이프(50)를 흐르는 온수에 의해 열이 발생하고 상기 온수파이프(50)의 열은 배양실(40)의 바닥을 통하여 공급되게 된다.Hot water pipe 50 is built in the bottom of the culture chamber 40 to generate heat by the hot water flowing through the hot water pipe 50, the heat of the hot water pipe 50 is supplied through the bottom of the culture chamber 40.
한편 배양실(40)의 천장에 설치되는 흡입구(42)는 외부 공기를 살균시켜 공급해 주는 것으로, 해파필터가 내장된 에어콘(41)에서 살균된 공기를 배양실(40)로 공급하는 것이다.On the other hand, the suction port 42 installed on the ceiling of the culture chamber 40 sterilizes and supplies external air, and supplies the sterilized air to the culture chamber 40 from the air conditioner 41 having the sea wave filter.
배양실(40)의 천장에 설치되는 배기구(43)는 S자 형태를 갖도록 하고, 상기 배기구(43)의 중간에 배기팬(44)을 설치하여 배양실(40)의 내부공기를 외부로 배출시키도록 하는 한편 S자 형태로 인하여 외부공기가 배기구(43)를 통하여 역류하지 않도록 한다.The exhaust port 43 installed on the ceiling of the culture chamber 40 has an S-shape, and an exhaust fan 44 is installed in the middle of the exhaust port 43 to discharge the internal air of the culture chamber 40 to the outside. On the other hand, due to the S-shape to prevent the outside air flows back through the exhaust port (43).
기존의 배양실(항온실)은 열풍을 이용하여 필요한 온도를 고루 유지시키는 방식으로서 내부로 유입되는 열풍은 와류가 일어나 작업자가 드나들 때 발바닥에 묻혀 들어간 먼지 및 잡균이 항온실(배양실) 바닥에 묻어 열풍의 와류에 의해 항온실(배양실) 내부 공기 중에 떠다니게 하여 오염의 주원인으로 된다. Existing culture room (constant room) maintains the required temperature evenly by using hot air, and hot air flowing into the room causes vortices to flow into the soles of the feet when workers enter and leave the floor of the room (culture room). Due to the vortex of hot air, it floats in the air inside the constant temperature room (culture room), which is the main cause of pollution.
또한 미생물이 고체 배양될 때 자체적으로 발생하는 열을 처리하지 못하는 문제가 있으나, 본 발명은 온수 순환에 의한 온돌방식으로 바닥에서부터 열이 가해짐으로 더운 공기가 위로 올라가는 자연적 방식을 채택하여 저절로 배양실 온도가 아래위가 편차가 없도록 하였으며 장시간에 의한 천정 부위의 열 모임 현상은 온도센서에 의해 천장 부위에서 자동배출 되도록 하였고 외부의 강한 바람과 정전에 대비해 바깥의 오염된 공기가 배양실 안쪽으로 유입되지 않게 배기구(43) 연통을 천장부위에서부터 수직으로 2미터 이상 올린 후 아래로 S자 형태로 배양실(40) 바닥높이 만큼 내린 다음 다시 배양실(40) 천장 높이의 위치에서 배출되도록 하였고 미생물이 고체배양 될 때 자체적으로 만들어지는 필요이상의 열은 해파필터를 흡입구에 장착한 에어콘(41)을 통과한 무균화 된 찬 공기를 천장에서부터 아래로 순간순간 온도센서에 의해 살짝살짝 내려보냄으로 필요이상의 열을 제거함과 동시에 항온실(배양실) 내부를 무균화 된 깨끗한 공기(산소)와 배양에 필요한 적정온도를 유지할 수 있도록 하여 미생물 고체배양의 극대화를 이루도록 한다.In addition, there is a problem in that the microorganism is not able to handle the heat generated by itself when the solid culture, but the present invention adopts a natural method in which the hot air rises up from the bottom by heat applied from the bottom by the ondol method by the hot water circulation, the temperature of the culture chamber by itself The temperature gathering phenomenon of the ceiling area is automatically discharged from the ceiling area by the temperature sensor for a long time, and the exhaust air is not prevented from entering the inside of the culture chamber. 43) After raising the communication more than 2 meters vertically from the ceiling, and lowered down to the bottom height of the culture chamber 40 in an S-shape, and then discharged again at the position of the ceiling height of the culture chamber 40, when the microorganisms were solid cultured, The excess heat generated is air conditioner (41) equipped with air filter on suction port The sterilized cold air passed down from the ceiling gently by the temperature sensor at a moment to remove excess heat and at the same time clean the inside of the chamber (sterilization room) with sterilized clean air (oxygen) and proper titration for incubation. Maintain temperature to maximize microbial solid culture.
본 발명은 미생물 고체배양의 난이한 문제를 기능, 모양, 고체배지 등을 복합적으로 이용하여 안정적이고 지속적으로 미생물 포자를 대량생산 할 수 있는 길을 열었으며, 현재 액체배양에 의존한 기존의 미생물제제 및 생물농약의 최대문제점(유통과정에서 미생물밀도 유지불가)을 완전히 해결하고 미생물제제의 그 기능과 효과를 최대로 극대화 할 수 있어 미생물제제의 유통과정에서 발생하는 보존기간 문제도 고체배양에 의한 포자형태로 유통이 가능하도록 하여 해결이 가능하며 실온에서 몇 년간 유지가 가능하다. The present invention has opened the way for mass production of microorganism spores stably and continuously by using the complex problem of microbial solid culture by using function, shape, solid medium, etc. And the maximum problem of biopesticides (unable to maintain microbial density in distribution) and maximize the function and effect of microbial products. It can be solved by distributing it in the form, and it can be maintained for several years at room temperature.
또한 대량배양으로 인하여 생산비 절감효과와 값싼 가격으로 포자를 대량생산 할 수 있으며, 전 세계적으로 환경친화형 농업이 확산되고 있는 이 시점에 맞추어 친환경 농업용 생물농약의 공급은 화학합성농약으로 죽어 가는 우리의 농토와 환경을 살리는 밑거름이 될 것이고 나아가 우리에게 안전한 먹거리를 제공하게 될 것이다. In addition, the production of spores can be mass-produced at a low cost and at a low price due to mass production.In line with the spread of environment-friendly agriculture all over the world, the supply of eco-friendly agricultural biopesticides is our dying as chemical synthetic pesticides. It will serve as a foundation for saving farmland and the environment, and will provide us with safe food.
도 1은 본 발명의 제조공정도1 is a manufacturing process diagram of the present invention
도 2는 본 발명의 배양접시와 섞음봉의 사시도Figure 2 is a perspective view of the culture dish and mixing rod of the present invention
도 3은 본 발명의 고체배지가 채워진 배양접시의 단면도Figure 3 is a cross-sectional view of the culture dish filled with the solid medium of the present invention
도 4는 본 발명의 종균을 스프레이 시키는 상태도Figure 4 is a state of spraying spawn of the present invention
도 5 및 도 6은 본 발명의 섞음봉 이동상태 평면도5 and 6 is a top view of the mixing rod moving state of the present invention
도 7은 본 발명의 섞음봉으로 혼합시키기 전의 배양접시 측단면도Figure 7 is a side cross-sectional view of the culture dish before mixing with the mixing rod of the present invention
도 8은 본 발명의 배양접시와 덮개 정면도8 is a front view of the culture plate and the cover of the present invention
도 9는 본 발명의 대차 정면도9 is a front view of the bogie of the present invention.
도 10은 본 발명의 배양실 단면도10 is a cross-sectional view of the culture chamber of the present invention
도 11은 본 발명의 배양실 바닥 단면도11 is a cross-sectional view of the culture chamber of the present invention
[도면의 주요부분에 대한 부호의 설명][Explanation of symbols on the main parts of the drawings]
1 : 고체배지 2 : 종균 10 : 배양접시1: solid medium 2: spawn 10: culture dish
20 : 고정봉 21 : 손잡이 22 : 섞음봉20: fixed rod 21: handle 22: mixing rod
30 : 대차 40 : 배양실 41 : 에어콘30: balance 40: culture chamber 41: air conditioner
42 : 흡입구 43 : 배기구 50 : 온수파이프42: inlet port 43: exhaust port 50: hot water pipe
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