KR100474110B1 - 피부 탄력 및 윤택 증강용 푸에라리아 미리피카 유래의 추출물 - Google Patents
피부 탄력 및 윤택 증강용 푸에라리아 미리피카 유래의 추출물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티 유래의 추출물 및 그 추출방법, 상기 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품, 음료, 약 및/또는 화장품 및 그 제조방법에 관한 것으로, 상기 식물로부터 분리한 추출물들은 이소플라본 류를 고농도로 함유하며, 상기 추출물이 함유된 조성물로 제조된 제품은 인체 적용시 피부탄력 및 피부윤택을 증가시키는 매우 뛰어난 효과가 있다.
Description
본 발명은 푸에라리아 미리피카(Pueraria mirifica, 백색 Kwao Krua), 부테아 수페르바(Butea superba, 적색 Kwao Krua), 및/또는 무쿠나 콜레티(Mucuna collettii, 흑색 Kwao Krua) 유래의 추출물 및 그 추출방법, 상기 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품, 음료, 약 및/또는 화장품 및 그 제조방법에 관한 것이다.
푸에라리아 미리피카는 태국에서 주로 발견되는 콩과 식물종으로서, 1930년대에 서구에 알려지기 시작한 강장작용을 가진 생약으로 옛부터 태국 민간에 전해져 내려오는 식물이다(Nature, December 3, 1960, 774). 특히 이 식물은 폐경기 이후의 여성들을 위한 강장용 전통약제로서 오랫동안 태국에서 사용된 백색의 식용 근경식물이다.
부테아 수페르바(Butea superba, 적색 Kwao Krua)는 태국에서 주로 발견되는 콩과 식물종이다. 특히 이 식물은 남성들을 위한 강장용 전통약제로서 오랫동안 태국에서 사용된 적색 수피를 갖는 긴 근경 식물이다.
무쿠나 콜레티(Mucuna collettii, 흑색 Kwao Krua)는 아열대 우림에서 발견되는 큰 콩과 식물종이다. 이 식물은 보통 뿌리를 제공한다. 식물의 모든 부분은 잘려서 공기에 노출되면 흑색으로 변한다. 이 식물은 또한 남성을 위한 강장제로서 전통약제 처방전에 사용되었다.
이러한 식물들은 미로에스테롤 (miroesterol), 다이드진(daidzin), 다이드제인(daidzein), 제니스틴(genistin), 제니스테인(genistein), 베타-시토스테롤 (berta-sitosterol), 스티그마스테롤 (stigmasterol), 쿠메스트롤(coumestrol), 푸에라린(puerarin), 캄페스테롤 (campesterol), 미리피쿠메스탄(mirificoumestan), 콱후린(kwakhurin), 미리피신 (mirificin), 장쇄 알코올, 5-디옥시이소플라본 등의 25가지 이상의 화합물로 구성되어 있다.(Bounds, and Pope, 1960; Ingham et al., 1986a;Ingham et al.,1986b;Ingham et al., 1988). 특히 이 식물은 다른 콩과 식물에 비해 상대적으로 매우 많은 양의 피토에스트로겐을 함유하고 있다.
이소플라본은 일반 식물에 광범위하게 함유된 화합물들로서 특히 대두, 칡이나 알파파 등의 콩과 식물에 다량 분포되어 있다. 이들의 이소플라본을 피토에스트로겐이라고 칭하는데 이러한 이름은 이들 화합물이 마치 생체내의 에스트로겐(endogeneous estrogens)과 유사한 구조를 가지고 있으며 이에 따른 생리적 작용이 에스트로겐과 동등한 결과를 가져 올 수 있다는 점에서 유래하였다. 그러나 에스트로겐과 피토에스트로겐의 생리활성을 비교하면 에스트로겐에 비해 피토에스트로겐이 매우 미미한 것으로 나타난다. 단지 피토에스트로겐을 장기간에 섭취할 경우 에스트로겐 호르몬과 유사한 기능이 있다는 보고가 있다[Bingham SA,Atkinson C, J. Nutr 1988 79(5) 393∼406]. 상기와 같은 피토에스트로겐의 종류를 보면 코우메스트롤, 게니스테인, 포오르모네틴, 다이드제인, 비오차닌 에이 등으로서 대부분 이소플라본계(系) 화합물로 이루어져 있다.
지금까지 피토에스트로겐에 관한 주목할 만한 연구는 다음과 같다. 즉, 일본 여성을 상대로 한 피토에스트로겐 관련연구를 보면, 일본여성이 서구인에 비해 갱년기 장애가 경미하다는 사실이 많이 알려져 있다. 이는 피토에스트로겐이 많이 함유된 대두 관련 식품을 많이 섭취하는 식생활에서 유래하는 것으로 간주되고 있다. 따라서 피토에스트로겐을 이용하여 갱년기 장애를 개선하고자 하는 많은 연구가 이루어지고 있다. 예를들면, 갱년기 장애를 개선하고 특히 유방암, 심혈관 질환과 같은 질병을 예방하기 위해 콩과 식물에서 추출한 피토에스트로겐 물질인 제니스테인을 복용하거나 생리주기에 관여하는 항체 호르몬인 프로게스테론의 전구체로서 멕시코 산의 야생마(野生麻;Wild Yam)에서 추출한 디오스게닌을 크림제재로 만들어 피부에 도포하는 상품이 나와 있다. 특히 피토에스트로겐은 유방암 발생을 감소시킨다는 연구결과가 계속적으로 나오고 있다. 아시아 여성의 경우 이러한 피토에스트로겐이 많이 함유된 콩과 식물의 음식물을 오랫동안 섭취하기 때문에 유방암, 난소암, 자궁암 등에 더 적게 걸린다고 한다[Adlercreutz H, Honjo H, Am. J.Clin.Nutr.1991,54(6),1093∼1100].
또 피토에스트로겐은 항산화력을 가지고 있으며 골다공증을 예방하거나 개선시키는 작용이 있는 것으로 보고되어 있다[Tsutsmi N, Biol Pharm bull 1995,18(7),1012∼1015]. 피토에스트로겐은 생체내의 에스트로겐 수용체와 결합하며 이에 따라 조직내에서 에스트로겐 친화적 작용이나 길항적 작용이 있다고 보여진다. 생체내에서 에스트로겐이 얼마나 생성되고 있는지는 수용체와 결합하는 정도에 따라 설명할 수 있다. 폐경기의 경우 에스트로겐의 양이 매우 적기 때문에 피토에스트로겐의 작용은 상대적으로 커지게 된다. 일반적으로 피토에스트로겐은 에스트라디올의 활성에 비해 약 1/400 내지 1/1000의 활성범위를 가진다. 그러나 그 활성은 매우 작기 때문에 에스트로겐의 부작용은 나타나지 않는다. 따라서 장기간 섭취시 오히려 에스트로겐이 가져 올 수 있는 부작용을 예방한다는 많은 연구결과가 나오고 있다. 하지만 많은 연구결과에도 불구하고 아직까지 피토에스트로겐과 관련하여 상기 여러 가지 질병에 대한 정확한 작용기전과 효능을 완전히 밝혀 내지 못하고 있다.
상기와 같은 피토에스트로겐을 응용할 수 있는 한가지 예로서 피토에스트로겐을 피부에 도포시 나타나는 생리적 활성 결과를 들 수 있다. 피부의 노화가 빨리 진행되는 갱년기 여성의 피부에 에스트로겐을 도포하였을 때 피부의 노화가 억제되는 현상이 나타남을 관찰한 연구가 있다. 즉, 약 6개월간 에스트로겐을 도포하였을 때 피부의 탄력성이 눈에 띄게 증가하였고 주름의 깊이 등의 수치가 60%이상 감소되었으며 이는 에스트로겐에 의해 피부 콜라겐 섬유의 숫자가 증가함에 기인한다고 보고되어 있다[Schmidt JB, Binder M, Int J Dermatol 1996, 35(9), 669∼674].
피부에서 엘라스틴 조직은 콜라겐조직과 함께 망상으로 결합되어 있으며 피하조직을 구성하고 있다. 엘라스타제는 이러한 엘라스틴을 가수분해시키는 단백분해 효소로서 항염 메커니즘의 중요한 역할을 담당한다고 알려져 있다. 이 효소는 결합조직(connective tissue)의 골격과 형태를 유지시키는 역할을 하는 모든 단백질, 예를 들어 엘라스틴, 콜라겐, 프로티오글리칸과 케라틴 등을 비선택적으로, 무차별적으로 가수분해시킨다. 또 콜라게나제 효소는 한정된 수의 기질에만 작용하는 것으로 보고 되어 있다[Wiedow, O., Schroder, J.M. , E.J.Biol.Chem. 265(25), 14791(1990)]. UV-A에 노출된 피부는 가벼운 염증이 반복적으로 나타나게 되는데 이는 엘라스타제가 망상조직에 작용하는 것으로 최종적으로 엘라스틴과 콜라겐 섬유의 손상을 불러 일으키며 피부가 늘어지는 노화현상으로 진행되어 버린다 [Motoyoshi,K., Takenouch,M., Proceedings of the 19th IFSCC congress Sydney 22∼25, October 1996]. 특히 40대 이후 엘라스타제의 작용에 의해 피부의 탄력이 급격히 감소하게 되는데 이는 엘라스타제의 작용이 나이를 먹음에 따라 매우 활발해져 엘라스틴 섬유가 일부 소멸되거나 응집현상이 나타나고 콜라겐 섬유가 감소한다. 생화학적인 측면에서 보면 엘라스티나제의 활성이 나이를 먹음에 따라 촉진되는 것이라고 보여진다(Bissett,D.L., Photochem. Photobiol.,1987, 46, 367∼378). 최근, 상기 엘라스타제의 작용을 저해시키는 물질을 찾는 많은 연구가 이루어지고 있다. 예를들면, UV자극에 의해 발생되는 건성 피부를 예방하거나 피부 노화를 억제하기 위하여 엘라스타제 저해물질을 함유하는 도포 화장료 제품이 나와 있다. 특히 항산화력이 있는 식물추출물인 경우 일반적으로 엘라스타제 억제 효과가 있기 때문에 이를 응용하여 피부노화나 주름을 예방하고자 하는 연구가 많이 이루어지고 있다[Bizot-Foulon V., Godeat G., W. Int. J. Cos. Sci. 17,255∼264(1995)].
본 발명자는 다른 콩과식물에 비해 최소 40 배, 최대 100 배의 에스트라디올 활성을 지닌, 즉, 약 0.5 I.U 이상의 피토에스트로겐을 함유한 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 또는 무쿠나 콜레티 식물이 콜라겐과 밀접한 관련이 있는 것으로 보고 피부 기저층에 미치는 작용에 관하여 시험관 내에서 1차적으로 시험하였다.
일반적으로 콩과식물의 피토에스트로겐 활성은 약 1/20,000∼1/50 I.U.(*1 I.U.= 0.1 mg of estradiol)의 범위가 대부분이다. 하지만 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및 무쿠나 콜레티의 피토에스트로겐 함량(약 0.5 I.U.)은 상대적으로 매우 높은 수치이기 때문에 엘라스티나제 저해 활성이 높게 나타날 것으로 예상하여 이를 시험한 결과, 높은 억제율을 나타내었다.
본 발명자는 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및 무쿠나 콜레티가 항산화력 수치는 높지 않으나 엘라스타제 저해 정도가 매우 높다는 것에 주목하여 각종 화장료 조성물에 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유시켜 피부노화를 예방하고 특히 피부 탄력을 유지시키는 화장료 조성물을 제조하고 이 화장료 조성물을 인체 피부에 적용하여 피부탄력 및 윤택 정도를 평가하여 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티 유래의 추출물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티 유래의 추출물을 추출하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티 유래의 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품, 음료, 약 및/또는 화장품을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티 유래의 추출물을 유효성분으로 함유하는 식품, 음료, 약 및/또는 화장품의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티 유래의 추출물은, 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티 식물의 근경, 뿌리, 줄기, 잎 또는 조직배양에 의한 캘러스를 물, 유기용매 또는 이들 혼합 추출용매를 사용하여 추출된 것에 특징이 있다.
본 발명의 다른 목적을 달성하기 위한 추출방법은, 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티의 근경, 뿌리, 줄기, 잎, 조직배양에 의한 캘러스를 온도 및 시간이 조절되는 오븐에서 건조한 다음 분쇄하고, 물, 유기용매 또는 이들 혼합 추출용매를 사용하여 추출한 다음, 그 추출물을 분무건조, 동결건조 및/또는 진공건조하는 것에 특징이 있다.
본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위한 식품, 음료, 약품 및/또는 화장품 제품의 제조방법은. 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티의 근경, 뿌리, 줄기, 잎, 조직배양에 의한 캘러스를 온도 및 시간이 조절되는 오븐에서 건조한 다음 분쇄하고, 추출용매를 사용하여 추출한 다음, 그 추출물을 건조하여 추출물을 제조하고; 및 물, 하나 이상의 수산기를 갖는 저분자알콜 또는 합성용매 등의 용매와 혼합하고, 추출물을 단독 또는 다른 추출물과 혼합 및/또는 기제, 희석제, 첨가물, 염색제, 활성제, 계면활성제, 수분제, 항노화제 또는 화장품 원료와 총량대비 0.1∼99.9%의 비율 또는 0.1∼99.9 중량% 또는 부피%로 혼합하는 것에 특징이 있다.
여기서, 상기 제품은 분말, 건조 또는 수용성 추출물 또는 물질을 0.1∼100% 양으로 함유하며, 알약, 캡슐, 팩키지, 병, 상자 또는 다른 포장형태로 제조되는 것이 바람직하다. 또한, 상기 추출물에는 칼슘무기물 또는 고칼슘 유기물을 더 첨가되는 것이 잇점이 있다. 상기 건조공정은 40∼90℃ 온도의 오븐내에서 2∼9시간동안 수행하는 것이 바람직하다.
본 발명의 또 다른 목적을 달성하기 위하여, 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바, 무쿠나 콜레티와 같은 원료로부터 분리한 분말, 건조 추출물, 추출물 및/또는 생활성 화합물은, 피부관리 및/또는 유방 관리, 유방 강화, 유방 고정, 유방 확대 및 유방 주름 제거용 화장품, 기능성 화장품, 의약용 화장품 및 약품의 제조, 및/또는 전립선 비후 치료를 위한 건강식품, 기능성식품, 음료, 약품의 제조, 및/또는 고콜레스테롤, 동맥경화 예방을 위한 식품, 음료, 약품의 제조, 및/또는 남성의 발기부전, 발기 기능장애를 위한 식품, 음료, 약품의 제조, 및/또는 갱년기 증후군과 폐경 후 증후군을 치료하기 위한 식품, 음료, 약품의 제조에 사용될 수 있다.
이하, 본 발명의 구성을 실시예 및 시험예를 통하여 상세히 설명하고자 하지만 본 발명의 권리범위는 이들 실시예에만 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 푸에라리아 미리피카 추출물 제조
푸에라리아 미리피카 근경 100g을 깨끗이 씻은 후 열풍 건조기를 사용하여 70℃에서 약 5시간 동안 건조시킨 후 분쇄시켰다. 상기 분쇄물에 500mL의 메탄올/물(80/20 v/v)을 넣고 50℃에서 약 6시간 추출하였다. 추출액을 여과한 후 감압농축하여 용매를 제거하고 농축물은 동결건조하여 갈색의 고형물을 제조하고 이 고형물내 이소플라본의 함량을 측정하였다. 실험결과, 제조한 푸에라리아 미리피카 근경 추출물내 함유된 이소플라본의 양은 표 1에 나타낸 바와 같았다.
이소플라본 | mg/100g |
다이디진 | 51.0 |
다아드제인 | 8.1 |
제니스틴 | 12.0 |
제니스타인 | 2.0 |
푸에라린 | 96.0 |
본 발명자들은 상기와 같은 방법으로 최고 품질의 푸에라리아 미리피카 분말을 얻을 수 있음을 알아내었다. 상기 방법으로 얻은 분말은 이소플라본과 다른 피토에스트로겐의 함량이 높게 나타났다.
연구결과, 상기 식물로부터 얻은 피토에스트로겐은 미로에스테롤, 다이드진, 다이드제인, 제니스틴, 제니스테인, 베타-시토스테롤, 스티그마스테롤, 쿠메스트롤, 푸에라린, 캄페스테롤, 미리피쿠메스탄, 콱후린, 미리피신이었다 (Bounds, and Pope, 1960; Ingham et al., 1986a;Ingham et al.,1986b;Ingham et al., 1988).
이소플라본은 특히 유방암, 결장암, 전립선암에 매우 강력한 항암성을 나타낸다. 본 발명에서 준비한 푸에라리아 미리피카 분말에 있는 고함량의 이소플라본은 인간에게 매우 유익하다.
더욱이, 푸에라리아 미리피카로부터 고도의 이소플라본 프로파일의 화학적 추출은 뿌리, 근경, 잎, 줄기, 유합조직, 세포배양, 뿌리배양을 포함한 식물의 모든 부분에서, 상기 식물을 얇게 자르거나 분말화한 후, 물과 하나 이상의 수산기를 갖는 저분자알콜로 구성되는 용매 또는 가능한 표준 기술을 이용한 합성용매와 혼합할 때 성공적으로 발견된다. 추출물은 직접적으로 사용되거나 더욱 정제 및/또는 고농도 추출물을 생산하기 위한 농축하는 데 사용될 수 있다.
실시예 2: 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유하는 화장수
본 실시예에서는 표 2에 나타낸 바와 같이 푸에라리아 미리피카 추출물 4.0중량%, 부틸렌글리콜 4.0중량%, 에틸렌디아민테트라초산나트륨 0.001중량%, 구연산 0.01중량%, 에탄올 15.0중량%, 파라옥시안식향산메칠 0.1중량%, 폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트 0.5중량%, 향료 0.2중량% 및 나머지는 정제수를 함유하는 화장수 화장료 조성물을 제조하였으며 방법은 먼저 유상성분과 수상성분을 각각 별도의 용해조에 용해시켜 유화부에서 함께 유화시킨 다음 30 ℃까지 냉각하여 숙성시켰다.
성분 | 함량 |
푸에라리아 미리피카 추출물 | 4.0 |
부틸렌글리콜 | 4.0 |
에틸렌디아민테트라초산나트륨 | 0.001 |
구연산 | 0.01 |
에탄올 | 15.0 |
파라옥시안식향산메틸 | 0.1 |
폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트 | 0.5 |
향료 | 0.2 |
정제수 | TO 100 |
[주] 단위: 중량% |
실시예 3: 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유하는 로션
본 실시예에서는 상기 실시예 2와 동일한 방법으로 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유하는 로션을 제조하였으며 로션의 조성은 표 3에 나타낸 바와 같았다.
실시예 4: 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유하는 에센스
본 실시예에서는 상기 실시예 2와 동일한 방법으로 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유하는 에센스을 제조하였으며 이 에센스의 조성은 표 4에 나타낸 바와 같았다.
성분 | 함량 |
푸에라리아 미리피카 추출물 | 4.0 |
세토스테아릴 알코올 | 1.0 |
글리세릴모노스테아레이트 | 0.8 |
소르비탄모노스테아레이트 | 0.3 |
프로필파라벤 | 0.1 |
폴리소르베이트 60 | 1.0 |
미네랄오일 | 5.0 |
사이크로메치콘 | 3.0 |
디메치콘 | 0.5 |
알란토인 | 0.1 |
글리세린 | 5.0 |
프로필렌글리콜 | 3.0 |
메틸파라벤 | 0.2 |
트리에탄올아민 | 0.2 |
카보머 | 8.0 |
정제수 | TO 100 |
[주] 단위: 중량% |
성분 | 함량 |
푸에라리아 미리피카 추출물 | 6.0 |
부틸렌글리콜 | 4.0 |
글리세린 | 3.0 |
밀크추출물 | 1.0 |
알란토인 | 0.1 |
판테놀 | 0.1 |
에틸렌디아민테트라초산나트륨 | 0.01 |
카보머 | 0.15 |
콜라겐수용액 | 0.5 |
에탄올 | 6.0 |
폴리옥시에틸렌옥틸도데실에테르 | 0.3 |
파라안식향산메틸 | 0.1 |
트리에탄올아민 | 0.15 |
정제수 | TO 100 |
[주] 단위: 중량% |
실시예 5: 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유하는 크림
본 실시예에서는 상기 실시예 2와 동일한 방법으로 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유하는 크림을 제조하였으며 이 에센스의 조성은 표 5에 나타낸 바와 같았다.
성분 | 함량 |
푸에라리아 미리피카 추출물 | 4.0 |
세토스테아릴 알코올 | 1.0 |
글리세릴모노스테아레이트 | 1.0 |
소르비탄모노스테아레이트 | 0.3 |
마이크로크리스탈린 납 | 0.2 |
프로필파라벤 | 0.1 |
페트로라튬 | 1.0 |
폴리소르베이트 60 | 1.0 |
미네랄오일 | 5.0 |
사이크로메치콘 | 3.0 |
디메치콘 | 0.5 |
아보카도오일 | 2.0 |
알란토인 | 0.1 |
글리세린 | 5.0 |
프로필렌글리콜 | 3.0 |
메틸파라벤 | 0.2 |
트리에탄올아민 | 0.2 |
카보머 | 17.0 |
산탄검 | 0.1 |
정제수 | TO 100 |
[주] 단위: 중량% |
시험예 1: 본 발명 피부 화장료 조성물의 인체적용
본 시험예에서 상기 실시예 5에서 제조한 본 발명의 푸에라리아 미리피카 추출물을 함유한 크림을 인체에 적용하고 피부탄력 및 윤택 증강 정도를 평가하였다.
Pt. No. | 처리구 | |
Pre Tx (mm) | Post Tx (mm) | |
1 | 0.645 | 0.968 |
2 | 0.824 | 0.878 |
3 | 0.737 | 0.923 |
4 | 0.969 | 1 |
5 | 0.917 | 0.935 |
6 | 0.875 | 0.923 |
7 | 0.97 | 0.905 |
8 | 0.976 | 0.951 |
9 | 0.951 | 0.878 |
10 | 0.897 | 1.048 |
11 | 0.947 | 0.939 |
12 | 0.906 | 0.952 |
13 | 0.931 | 0.966 |
14 | 0.938 | 0.944 |
15 | 0.926 | 1 |
16 | 0.895 | 0.824 |
17 | 0.794 | 0.888 |
18 | 0.895 | 0.895 |
19 | 0.889 | 0.9444 |
20 | 0.933 | 0.974 |
21 | 0.938 | 0.889 |
22 | 0.8 | 0.82 |
23 | 0.889 | 0.81 |
24 | 0.967 | 0.965 |
25 | 0.929 | 0.923 |
26 | 0.931 | 0.939 |
27 | 1 | 0.882 |
28 | 0.875 | 0.84 |
29 | 0.903 | 0.951 |
30 | 0.964 | 1 |
31 | 0.967 | 0.970 |
32 | 0.84 | 0.941 |
33 | 0.811 | 0.742 |
34 | 0.869 | 1 |
35 | 0.821 | 0.824 |
36 | 0.517 | 0.889 |
37 | 0.771 | 0.967 |
38 | 0.880 | 0.968 |
39 | 0.875 | 0.882 |
Pt. No. | Placebo 대조구 | |
Pre Tx (mm) | Post Tx (mm) | |
1 | 0.95 | 0.9 |
2 | 0.794 | 0.95 |
3 | 0.867 | 0.933 |
4 | 0.816 | 0.842 |
5 | 0.938 | 0.971 |
처리구 | ||
Pre TX | Post Tx | |
평균 | 0.881076923 | 0.921471795 |
분산 | 0.008956336 | 0.004016681 |
관측수 | 39 | 39 |
피어슨 상관계수 | 0.232602588 | |
가설 평균차 | 0 | |
자유도 | 38 | |
t 통계량 | -2.499917473 | |
P(T<=t) 단측검정 | 0.008428418 | |
t 기각치 단측검정 | 1.685953066 | |
P(T<=t) 양측검정 | 0.016856836 | |
t 기각치 양측검정 | 2.024394234 | |
대조구 | ||
Pre Tx | Post Tx | |
평균 | 0.873 | 0.9192 |
분산 | 0.00492 | 0.0025377 |
관측수 | 5 | 5 |
피어슨 상관계수 | 0.266946433 | |
가설 평균차 | 0 | |
자유도 | 4 | |
t 통계량 | -1.384052624 | |
P(T<=t) 단측검정 | 0.119277841 | |
t 기각치 단측검정 | 2.131846486 | |
P(T<=t) 양측검정 | 0.238555682 | |
t 기각치 양측검정 | 2.776450856 |
20대~50대의 건강한 여성 44명을 대상으로 실험을 실시하였다. 39명은 푸에라리아 미리피카를 함유한 크림을 도포하였고 5명은 대조군으로서 푸에라리아 미리피카를 함유하지 않은 크림을 도포하였다. 도포기간은 2개월로 하였으며 아침,저녁으로 약 1g의 크림을 유방 전 부위에 고르게 도포하였다. 최초 도포는 각 실험 대상자의 월경이 시작된 후 3~5일 째 되는 날부터 시작하였으며 이 때 유방의 탄력도를 측정하였다. 2개월이 경과한 후, 실험대상자의 월경이 시작된 후 3~5일 째 되는 날에 유방의 탄력도를 측정하였다. 탄력도 측정은 유두 중심부로 부터 12시 방향으로 1cm 떨어진 부위를 Cutometer SEM474(Courge+Khazaka electronic GmbH사 제품)를 이용하여 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 6 및 표 7에 나타내었다.
도포 전과 도포 후의 탄력도의 차이가 없다는 귀무가설(null hypothesis)과
도포 후 탄력도가 나타난다는 대립가설(alternative hypothesis)을 가정할 때,
푸에라리아 미리피카 함유 크림을 도포한 군(Treatment group)의 단측검정의 P값이 <0.05 이고, 이에 따라 귀무가설은 기각되므로 유방의 탄력도가 유의있게 나타남을 알 수 있다. 푸에라리아 미리피카를 함유하지 않은 크림을 도포한 군(Control group)은 비록 관측 수가 적어 통계적으로 용이하지 않지만, 단측검정의 P값이 >0.05 이므로 귀무가설이 기각되지 않아 유방의 탄력도의 차이가 없음을 알 수 있다. 상기 탄력도 측정과 동시에 유방의 크기를 MRI로 촬영하여 그 부피를 구하여 유방의 크기가 증가하는지를 임상시험하였으며 그 결과 통계치는 유의성있게 증가하지 않는 것으로 나타났다.
시험예 2 : 본 발명 식품 보조제 또는 기능성 식품의 폐경기이전 여성의 인체적용
하기 표 8에 나타낸 바와 같이, 식품보조제나 기능성 식품으로서의 임상실험을 20∼45 세의 건강한 97명(폐경기 이전의)을 대상으로 실시하였다.
31명의 실험대상자들을 포함한 위약(약리작용은 없으나, 다만 환자의 정신적인 위로를 위해 투여하는 약) 그룹은 2달 연속으로 월경기간의 첫날부터 시작하여 한달에 15일동안 1일 2캡슐을 소비하도록 타피오카 전분 캡슐을 섭취하였다.
위약 | 400 mg/day | 800 mg/day | |
실험대상자 수 | 31 | 32 | 34 |
유방 통증 | 31 | 14 | 32 |
피부 회복 | 31 | 28 | 32 |
모발 개선 | 31 | 24 | 30 |
Charasma clearness | - | 3/3 | 4/4 |
분비 개선 | 31 | 14 | 29 |
월경 개선 | 31 | 2 | 10 |
유방 탄력 | 31 | 13 | 30 |
유방 확대 | 31 | 3 | 28 |
골반 확대 | 31 | 3 | 20 |
이 그룹의 기록된 모든 파라미터는 큰 변화를 나타내지 않았다. 32명의 실험대상자들을 포함한 첫 번째 실험 그룹은 위약그룹과 동일한 조건으로 1일 2개의 캡슐을 소비하도록 200 ㎎의 푸에라리아 미리피카 캡슐을 섭취하였다. 유방의 고정 및 유방 확대에도 관계된 유방의 통증(44%), 피부 회복(88%), 더 건강해진 모발(75%), 카라스마 클리어니스(charisma clearness, 100%), 질 분비(vaginal secretion, 44%), 건강한 월경(6%), 유발 고정(44%), 유방 확대(9%) 및 둔부의 확대(9%)를 포함한 이 그룹의 기록된 모든 파라미터는 다양한 수치를 나타내며 큰 변화를 보였다.
34명의 실험대상자들을 포함한 두 번째 실험 그룹은 위약그룹과 동일한 조건으로 1일 4개의 캡슐을 소비하도록 200㎎의 푸에라리아 미리피카 캡슐을 섭취하였다.
유방의 통증(94%), 피부 회복(94%), 더 건강해진 모발(88%), 카리스마 클리어니스(charisma clearness, 100%), 질 분비(85%)를 포함한 이 그룹의 기록된 모든 파라미터는 높은 수치를 나타내며 큰 변화를 보였으며 따라서 몇몇 실험대상자에서 여성의 성기능, 유방의 통증(29%), 유발 고정(94%), 유방 확대(88%) 및 둔부의 확대(59%)가 회복되었다. 몇몇 실험대상자들은 고혈당 콜레스테롤 수치가 감소했다는 주장도 있었다.
결론적으로, 식품 보조제 또는 기능성 식품으로서의 임상 실험에서는 피부의 개선, 두발 복합(hair complexity), 유발 고정 및 유방확대를 유도케 함을 포함하여 실험대상자들에서 분명한 발정 촉진 효과를 나타내었다.
시험예 3 : 본 발명 식품 보조제 또는 기능성 식품의 폐경기 여성의 인체적용
푸에라리아 미리피카는 폐경기의 여성을 위한 식품 보조제 또는 기능성식품으로 성형하였다. 6명의 폐경기 여성은 4달동안 연속적으로 한달에 21일, 하루에 한번씩 200 ㎎의 푸에라리아 미리키파 캡슐을 섭취하였다. 신체검사와 혈액 분석을 실험 직전 및 실험 후에 수행하였다.
실험대상자들의 연령은 35∼58세 사이로 고열상태, 망상증, 피부 건조증 및 월경이 거의 없거나 무월경자들을 대상으로 하였다. 실험결과는 표 9에 나타낸 바와 같다.
실험결과, 식품 보조제 또는 기능성 식품으로 푸에라리아 미리피카의 섭취할 경우 고열, 망상증, 피부 건조증, 저조한 월경과 같은 폐경기 증상에 뛰어난 치료효과를 나타내었다.
실험대상자 | 연령 | 섭취전 | 섭취후 | ||
증세 | 월경 | 증세 | 월경 | ||
1 | 46 | 고열, 망상증 | 멈춤 | 정상 | 멈춤 |
2 | 52 | 고열, 망상증 | 멈춤 | 정상 | 멈춤 |
3 | 35 | 피부 건조증 | 사라짐 | 정상 | 생김 |
4 | 58 | 고열 | 멈춤 | 정상 | 멈춤 |
5 | 49 | 고열 | 지속 | 정상 | 지속 |
6 | 39 | 망상증 | 거의 없슴 | 정상 | 정상 |
시험예 4 : 푸에라리아 미리피카 추출물의 피부 알레르기 검사
푸에라리아 미리피카의 피부 알레르기 검사는 6마리의 Wistar 랫트와 6 마리의 토끼를 대상으로 실행하였다. 실험결과는 표 10에 나타낸 바와 같다.
동물 | Wistar 랫트 | 토끼 |
1차 반응 | 알레르기 반응 무 | 알레르기 반응 무 |
2차 반응 | 알레르기 반응 무 | 알레르기 반응 무 |
실험결과, 푸에라리아 미리피카는 동물의 피부에 1차 및 2차 알레르기 반응을 야기하지 않았으므로 인간 피부에 안전하게 적용할 수 있음을 알았다.
실시예 6: 부에타 수페르바 추출물 제조
부에타 수페르바 근경 100g을 깨끗이 씻은 후 열풍 건조기를 사용하여 70℃에서 약 5시간 동안 건조시킨 후 분쇄시켰다. 상기 분쇄물에 500mL의 메탄올/물(80/20 v/v)을 넣고 50℃에서 약 6시간 추출하였다. 추출액을 여과한 후 감압농축하여 용매를 제거하고 농축물은 동결건조하여 갈색의 고형물을 제조하였다.
시험예 5 : 식품 보조제 또는 기능성 식품으로서 부테아 수페르바 유효성 검사
식품보조제 또는 기능성 식품으로서 부테아 수페르바의 임상실험은 20∼55세의 발기부전증 환자 142명을 실험대상으로 하여 실시하였다.
첫 번째 그룹은 위약으로 200 ㎎의 타피오카 전분을 아침·저녁식사 후에 각 1 캡슐씩 섭취하였다. 두 번째 그룹은 아침·저녁식사 후에 200 ㎎의 부테아 수페르바 캡슐을 아침·저녁식사 후에 각 1 캡슐씩 섭취하였다. 세 번째 그룹은 200 ㎎의 부테아 수페르바 캡슐을 아침·저녁식사 후에 각 2 캡슐씩 섭취하였다. 표 11에 나타낸 바와 같이, 8개의 파라미터를 평가하였다.
표 11에서 5명의 실험대상자들은 역효과(2명:목통증, 3명:등통증)로 인해 3∼4일째 중단하였다. 1명의 실험대상자는 영구적으로 중단하고, 4명의 실험대상자들은 신선한 우유를 매일 섭취하여 보충한 후 더 이상의 역효과가 없어 계속하였다.
위약 | 400 mg/day | 800 mg/day | |
실험대상자 수 | 42 | 46 | |
조기 발기(day)(mean±S.D.) | 42 | 7.41±1.12 | 4.16±0.81 |
즉각적 발기 | 42 | 32 | 43(+4) |
지속적 발기 | 42 | 28 | 42(+4) |
사정후 적어도2분간 발기유지 | 42 | 14 | 29(+4) |
발기 빈도수(weekly)현저히 증가 | 42 | 32 | 43(+4) |
성교 횟수(weekly) 현저히 증가 | 42 | 11 | 20(+2) |
성교 만족도 증가 | 42 | 32 | 43(+4) |
부테아 수페르바를 무쿠나 콜레티와 혼합하거나 대체하였을 때, 발기장애에 대한 회복효과는 더 크게 나타났다. 본 발명에서, 상기와 같은 목적을 위하여 부테아 수페르바와 무쿠나 콜레티를 포함한 생산물 제조가 가능하다.
결론적으로, 상기 언급된 방법으로 조제한 부테아 수페르바 분말은 특히 음경에 강한 혈관확장 효과를 통하여 남자의 성기능에 효능이 있는 약초임이 증명되었다. 이러한 기작을 통하여, 부테아 수페르바는 직접적으로 또는 남성 발기 부전 치료를 위한 약초 제품의 주요부분으로 이용될 수 있다.
상기 가설을 테스트하기 위해, 65 명의 발기 기능에 이상이 없는 지원자를 두 그룹으로 나누었다. 첫 번째 그룹은 두달 동안 200 ㎎의 타피오카 분말 위약을 아침ㆍ저녁식사 후 2 캡슐을 섭취하였고 실험그룹은 동일한 크기로 동일한 방법에 의해 부테아 수페르바를 섭취하였다. 실험결과는 표 12에 나타낸 바와 같다.
실험대상자 수 | 회복자 수 | |
위약 | 31 | 2 |
실험 | 34 | 28 |
위약그룹에서 회복된 경우는 심리적인 효과로 인한 것일 반면, 실험그룹에서는 상당한 회복수를 나타내었다.
게다가, 발기 기능장애와 발기부전의 두 그룹 모두에서 전립선 비후의 증상은 나타나지 않았다. 이러한 결과는 주로, 이 약초에 존재하며 강력한 전립선 비후 예방제로 보고된 바 있는(Klippel et al. 1997) β-시토스테롤(sitosterol)에 의한 것임을 알 수 있었다. 이러한 증거로부터 부테아 수페르바가 전립선 비후 예방 약품 또는 건강식품으로 제조할 수 있음을 확인할 수 있었다. 또한, 더 강력한 반응을 위한 목적으로 무쿠나 콜레티(Mucuna colletti)와 함께 혼합하거나 대체할 수 있다. 결과적으로, 부테아 수페르바는 발기부전 치료제로 사용하기 위한 약초에 기초한 생산품으로 제조할 수 있다.
시험예 6 : 부테아 수페르바 추출물의 피부 알레르기 검사
알레르기 테스트를 위하여 부테아 수페르바 추출물을 랫트의 피부에 적용하였다. 실험결과는 표 13에 나타낸 바와 같다.
1차 알레르기 반응 | 없슴 |
2차 알레르기 반응 | 없슴 |
상기 실험에서 부테아 수페르바 추출물이 피부에 바르거나 또는 화장품이나 의약품의 외용(外用)제품으로 개발하기에 안전함이 확인되었다.
시험예 7 : 발기부전 남성에서 부테아 수페르바 겔의 유효성 검사
발기 기능장애 치료제로서 부테아 수페르바 추출물의 유효성을 평가하기 위해 63명의 실험대상자들을 위약과 실험군의 두 그룹으로 나누었다. 위약그룹은 한달동안 하루 두 번씩 음경에 직접적으로 부테아 수페르바를 함유하지 않은 겔을 공급하였다. 그리고 실험군은 부테아 수페르바 추출물이 함유된 겔을 위약그룹과 동일하게 처방하였다. 실험결과는 표 14에 나타낸 바와 같다.
위약그룹에서 회복한 경우는 심리적인 효과에 의한 것이거나, 겔을 적용하는 동안의 마사지가 그러한 효과를 촉진했을 것이다. 결과적으로, 부테아 수페르바로부터 발기부전이나 발기 기능장애를 위한 외용제품을 제조하는 것도 가능하다.
실험대상자 수 | 회복자 수 | |
위약 | 31 | 1 |
실험 | 32 | 21 |
푸에라리아 미리피카와 부테아 수페르바의 분말의 조제법은 이 식물에도 적용될 수 있다. 분말은 혈관확장 활성이 매우 높으며 심한 역효과는 없다.
이 세가지 약초의 화학적 추출물을 물, 하나이상의 수산기를 갖는 저분자알콜로 구성된 용매 또는 가능한 기술을 이용한 합성용매와 혼합한 후, 얇게 자름으로써 뿌리, 근경, 줄기, 잎, 조직배양에 의한 캘러스를 포함하여 식물의 모든 부분에서 성공적으로 발견된다.
이 추출물은 다른 화합물 또는 화장품이나 외상용 약품에 사용되는 염기와 쉽게 혼합하여 균질화된다. 화장품 또는 약품으로 사용되는 외부약으로 사용할 수 있다. 새로운 혼합물의 투과성은 여전히 매우 높다.
본 발명자들은 세가지 약초를 고수압에 의한 추출물을 테스트하였다. 생산물은 음료 제조에 사용되는 다른 성분들과 쉽게 혼합된다.
또한 본 발명자들은 분말 조제 또는 분무건조, 동결건조 및 진공건조를 이용한 추출물 조제를 테스트하였다. 상기 모든 조제에서 고품질의 분말 및/또는 추출물을 얻을 수 있었다.
뿐만 아니라, 증발 전에 화학적 추출을 함으로써, 약초약 및 약 조제를 위한 좋은 재료인 상기 식물로부터 분리한 화학물질의 순수한, 즉 고농도의 혼합물을 얻을 수 있다. 상기 방법으로 분리된 생산물은 높은 유효성을 나타낸다.
이상, 상기 실시예를 통하여 설명한 바와 같이, 본 발명의 푸에라리아 미리피카, 부테아 수페르바 및/또는 무쿠나 콜레티 추출물들은 이소플라본 류를 고농도로 함유하며, 상기 추출물이 함유된 조성물로 제조된 제품은 인체 적용시 피부탄력 및 피부윤택을 증가시키는 매우 뛰어난 효과가 있으므로 식품, 음료, 제약 및 화장품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.
Claims (2)
- 푸에라리아 미리피카의 근경을, 물과 하나의 수산기를 갖는 탄소수 1~5인 저급알콜의 혼합용매로 추출하는 것을 특징으로 하며, 다이디진, 다아드제인, 제니스틴, 제니스타인, 푸에라린을 함유하는, 피부 탄력 및 윤택 증강용 푸에라리아 미리피카 유래의 추출물.
- 제1항에 있어서, 상기 저급알콜은 메탄올, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올, 1-부탄올, 2-부탄올, 2-메틸프로판올, 2-메틸-2-프로판올 중에서 선택되는 푸에라리아 미리피카 유래의 추출물.
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