JP7365664B2 - 真皮幹細胞の分化促進剤 - Google Patents
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Description
(1)マンネンタケ胞子の超臨界抽出物を有効成分として含有する、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進剤。
(2)(A)マンネンタケ胞子の超臨界抽出物と、(B)チンピ、ショウキョウ、オオバコ、カンゾウ、キキョウ、サンザシ、ケイヒ、及びニンジンから選択される1種又は2種以上の生薬の抽出物との混合物を有効成分して含有する、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進剤。
(3)マンネンタケ胞子の超臨界抽出物と、チンピ及びショウキョウから選択される1種又は2種の生薬の抽出物との混合物を有効成分して含有する、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進剤。
(4)真皮幹細胞を、(1)~(3)のいずれかに記載の剤を含有する培地で培養する工程を含む、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進方法。
(5)真皮幹細胞を、(1)~(3)のいずれかに記載の剤を含有する培地で培養する工程を含む、真皮線維芽細胞の製造方法。
(6)(1)~(3)のいずれかに記載の剤を含有する、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進用組成物。
1.真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進剤
本発明に係る真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進剤(以下、「真皮幹細胞の分化促進剤」と記載する場合がある)は、マンネンタケ胞子の超臨界抽出物(マンネンタケ胞子油とも称する)、又は、マンネンタケ胞子の超臨界抽出物と、チンピ、ショウキョウ、オオバコ、カンゾウ、キキョウ、サンザシ、ケイヒ、及びニンジンから選択される1種又は2種以上の生薬の抽出物との混合物を有効成分として含有する。
PLANTAGINIS HERBA)は、オオバコ科(Plantaginaceae)の多年草であるオオバコ(学名:Plantago asiatica Linne)の花期の全草であり、生薬(日本薬局方)では主に去痰薬として用いられている。オオバコとしては、日本在来種ではオオバコ(Plantago asiatica)、エゾオオバコ(Plantago camtschatica)、トウオオバコ(Plantago japonica)、ハラオオバコ(Plantago lanceolata)、その近縁の帰化種であるセイヨウオオバコ(Plantago major)、ツボミオオバコ(Plantago virginica)等が挙げられ、その同属又は近縁植物でもよい。本発明において使用する抽出原料は、生薬の「シャゼンソウ(車前草)」として用いられる、オオバコの全草が好ましい。
チンピ、ショウキョウ、オオバコ、カンゾウ、キキョウ、サンザシ、ケイヒ、及びニンジンから選択される1種又は2種以上の生薬の抽出物との混合物を有効成分として含有してもよい。マンネンタケ胞子の超臨界抽出物と組み合わせて用いる生薬の抽出物は、チンピ抽出物、ショウキョウ抽出物、オオバコ抽出物、カンゾウ抽出物、キキョウ抽出物、サンザシ抽出物、ケイヒ抽出物、及びニンジン抽出物のいずれか1種でもよいが、2種以上が好ましく、3種がより好ましい。なかでも、チンピ抽出物、ショウキョウ抽出物が好ましい。2種以上を併用する場合、その組み合わせや混合比率は限定されない。
本発明はまた、真皮幹細胞を、上記真皮幹細胞の分化促進剤を含有する培地で培養する工程を含む、真皮幹細胞の分化促進方法、ならびに、真皮幹細胞を、上記真皮幹細胞の分化促進剤を含有する培地で培養する工程を含む、真皮線維芽細胞の製造方法に関する。本発明に係る方法において真皮幹細胞から分化誘導して製造された真皮線維芽細胞は、一般的に体外で培養後、創傷部や組織を再生させたい部位に直接注射などで移植することが可能である。すなわち、本発明に係る方法にて製造された真皮線維芽細胞は移植材料(細胞移植剤)として用いることができる。
本発明に係る真皮幹細胞の分化促進剤を生体内に投与する場合は、そのまま投与することも可能であるが、本発明の効果を損なわない範囲で適当な添加物とともに化粧品、医薬部外品、医薬品、飲食品等の各種組成物に配合して提供できる。特に、皮膚外用組成物に配合して提供することが好ましい。
(製造例1)マンネンタケ胞子の超臨界抽出物
内容積5Lの抽出槽にマンネンタケの胞子1kgを仕込み、これに超臨界二酸化炭素(温度60℃、圧力25MPa、二酸化炭素供給量15m3)を約4.5時間供給し、抽出槽に接続した分離槽(温度40℃、圧力4MPa)に導いて炭酸ガスと抽出物を分離し、マンネンタケ胞子の超臨界抽出物を15.9g得た。
ウンシュウミカンの果皮(チンピ)の乾燥物100gに精製水800mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してチンピの熱水抽出物を6.1g得た。
ショウガの根茎(ショウキョウ)の乾燥物100gに精製水800mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してショウキョウの熱水抽出物を3.7g得た。
オオバコの全草(シャゼンソウ)の乾燥物100gに精製水800mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してオオバコの熱水抽出物を5.5g得た。
カンゾウの根の乾燥物100gに精製水800mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してカンゾウの熱水抽出物を5.1g得た。
キキョウの根の乾燥物100gに精製水800mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してキキョウの熱水抽出物を5.1g得た。
サンザシの偽果の乾燥物100gに精製水800mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してサンザシの熱水抽出物を2.6g得た。
ニッケイの樹皮(ケイヒ)の乾燥物100gに精製水800mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してケイヒの熱水抽出物を2.1g得た。
オタネニンジンの根(ニンジン)の乾燥物100gに精製水800mLを加え、95~100℃で2時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してニンジンの熱水抽出物を6.7g得た。
実施例1で製造した抽出物(製造例1~9)、及び当該抽出物の混合物(製造例10~18)の真皮幹細胞に対する分化促進効果の評価実験を次のとおり行った。
5'-GCTACCCAACTTGCCTTCATG-3' (配列番号1)
5'-TTCTTGCAGTGGTAGGTGATGTTC-3' (配列番号2)
(COL3A1(III型コラーゲン)プライマーセット)
5'-GGTTTTGCCCCGTATTATGGA-3' (配列番号3)
5'-GTGAAGTCATAATCTCATCGGTGTTG-3' (配列番号4)
(18srRNA(内部標準)用プライマーセット)
5'-CCGAGCCGCCTGGATAC-3' (配列番号5)
5'-CAGTTCCGAAAACCAACAAAATAGA-3'(配列番号6)
Claims (6)
- マンネンタケ胞子の超臨界抽出物を有効成分として含有する、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進剤。
- (A)マンネンタケ胞子の超臨界抽出物と、(B)チンピ、ショウキョウ、オオバコ、カンゾウ、キキョウ、サンザシ、ケイヒ、及びニンジンから選択される1種又は2種以上の生薬の抽出物との混合物を有効成分して含有する、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進剤。
- マンネンタケ胞子の超臨界抽出物と、チンピ及びショウキョウから選択される1種又は2種の生薬の抽出物との混合物を有効成分して含有する、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進剤。
- 真皮幹細胞を、請求項1~3のいずれか1項に記載の剤を含有する培地で培養する工程を含む、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進方法。
- 真皮幹細胞を、請求項1~3のいずれか1項に記載の剤を含有する培地で培養する工程を含む、真皮線維芽細胞の製造方法。
- 請求項1~3のいずれか1項に記載の剤を含有する、真皮幹細胞の真皮線維芽細胞への分化促進用組成物。
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