KR100439635B1 - Novel microorganism which effectively enhances animal performances and reduces smell of animal excretions, agent containing thereof and preparation method of the same - Google Patents

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Abstract

본 발명은 사료 첨가용 미생물제 및 그 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 가축의 증체, 사료효율 개선 및 축산 분뇨에 의한 악취 발생을 감소시키는 가축 사료 첨가용 미생물제 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 주로 치즈나 간장과 같은 식품 및 알코올 제조에만 이용되어온 종래의 뮤커 속 미생물과 달리 가축의 증체 및 축산 분뇨에 의한 악취발생억제 효율이 있는 것으로 동정된 신규한 뮤커 속 균주 KFCC-11239에 관한 것으로서, 이 뮤커 속 미생물은 단독으로 또는 가축의 장내 유해 독소 배출과 장내 유용 세균의 활성을 촉진하는 역할을 하는 수종의 미생물과의 혼합물로서 가축 사료 첨가용 미생물제로서 유용하게 사용되어 축산 농가의 소득 증대에 크게 기여할 수 있다.The present invention relates to a microbial agent for feed addition and a method for manufacturing the same, and more particularly, to a microbial agent for animal feed addition and a method for producing the same for reducing the generation of odor due to livestock increase, feed efficiency and livestock manure. More specifically, unlike the conventional muker microorganism that has been mainly used for food and alcohol production, such as cheese or soy sauce, a new muker strain KFCC-11239 has been identified as having an efficiency of suppressing odor by the increase of livestock and livestock manure. The microorganisms of this muker are used alone or as a mixture of several microorganisms that play a role in promoting the release of intestinal harmful toxins and the activity of useful bacteria in the intestine. It can greatly contribute to income growth.

Description

가축의 생산성 향상 및 축산 분뇨의 악취 발생 감소에 효과적인 신규 미생물, 이를 포함하는 복합 미생물제 및 이의 제조방법{Novel microorganism which effectively enhances animal performances and reduces smell of animal excretions, agent containing thereof and preparation method of the same}Novel microorganism which effectively enhances animal performances and reduces smell of animal excretions, agent containing etc and preparation method of the same}

본 발명은 사료 첨가용 미생물제 및 그 제조방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 가축의 증체, 사료효율 개선 및 축산 분뇨에 의한 악취 발생을 감소시키는 가축 사료 첨가용 미생물제 및 이의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a microbial agent for feed addition and a method for manufacturing the same, and more particularly, to a microbial agent for animal feed addition and a method for producing the same for reducing the generation of odor due to livestock increase, feed efficiency and livestock manure.

가축 사료 첨가용 미생물제란 가축의 장내 균총의 균형을 유지하고 사료의 소화증진에 따른 가축의 생산성을 높이기 위한 미생물을 포함한 물질로서 미생물제의 투여에 따라 가축의 생산성 촉진뿐만 아니라 가축분뇨에서 발생하는 악취를 저감할 수 있는 미생물제가 요구되고 있다.The microbial agent for livestock feed is a substance containing microorganisms to balance the intestinal flora of livestock and increase the productivity of livestock according to the increase of digestion of feed. There is a demand for a microbial agent that can be reduced.

따라서 상기 가축 생산성 증가에 관한 연구 및 악취제거를 위한 연구가 대한민국 특허공개공보 제1998-14276호, 특허공개공보 제1998-56775호, 특허공개공보 제1999-80373호, 특허공개공보 제2000-73915호에 보고되었다. 그러나, 대한민국 특허공개공보 제1998-14276호 및 특허공개공보 제1998-56775호는 유기성 폐기물을부숙시키는 퇴비용 미생물제에 관한 것으로 곰팡이를 이용한 악취제거 미생물제에 대하여 언급하거나 시사하고 있는 바가 없으며 악취제거에 있어서도 황유래물질이나 암모니아 제거에 국한되어 있다. 특허공개공보 제1999-80373호는 유산균, 효모, 아스퍼질러스 오리제를 함유하는 사료 첨가용 미생물제에 관한 것으로서 한우에서만 그 효과를 파악하여 축종별 효과를 알 수 없으며, 특허공개공보 제2000-73915호의 경우 바실러스, 유산균, 효모를 함유하는 가축용 미생물제에 관한 것으로서 통상적으로 생리활성 물질을 많이 생산하는 것으로 알려진 곰팡이를 함유하고 있지 않다. 따라서 상술한 바와 같이 곰팡이를 함유하는 가축 사료 첨가제용 미생물제나 악취 제거 미생물제는 아직까지 보고된 바가 없다.Therefore, the study on the increase in livestock productivity and the study for eliminating odor are disclosed in Korean Patent Publication No. 1998-14276, Korean Patent Publication No. 1998-56775, Korean Patent Publication No. 1999-80373, Korean Patent Publication No. 2000-73915 Reported in the issue. However, Korean Patent Publication No. 1998-14276 and Korean Patent Publication No. 1998-56775 relate to the composting cost microorganisms that house organic wastes, and there is no mention or suggestion of deodorizing microorganisms using molds. It is also limited to the removal of sulfur-derived substances and ammonia. Patent Publication No. 1999-80373 relates to a microbial agent for feed addition containing lactic acid bacteria, yeast, and Aspergillus duckling, and its effect is not known by the type of cattle only by identifying the effect of only Korean cattle, and Patent Publication No. 2000-73915 The heading relates to microorganisms for livestock containing Bacillus, lactic acid bacteria and yeast, and does not contain molds which are commonly known to produce a large amount of bioactive substances. Therefore, as described above, the microbial agent for animal feed additives or odor removing microorganisms containing mold has not been reported until now.

이에 본 발명자들은 지속적이며 다각도로 연구한 끝에 가축의 생산성 향상뿐만 아니라 가축분뇨에서 악취발생을 효과적으로 감소시키는 신규한 미생물을 분리하는데 성공함으로써 본 발명을 완성하기에 이르렀다.Accordingly, the present inventors have completed the present invention by successfully separating new microorganisms which effectively reduce the occurrence of odor in livestock manure as well as improving the productivity of livestock after the continuous and multi-faceted research.

본 발명의 목적은 사료에 첨가하여 가축에게 급여할 경우 생산성을 향상시킴과 동시에 축산 분뇨의 악취를 저감시켜 호흡기 질병의 발생을 억제시키는 뮤커 속 미생물을 함유하는 미생물제 및 상기 뮤커 속 미생물과 함께 수종의 타 미생물을 함유하는 복합 미생물제를 제공하는 것이다.SUMMARY OF THE INVENTION An object of the present invention is to increase the productivity when feeding a livestock feed and to reduce the odor of livestock manure to suppress the occurrence of respiratory diseases, and microbial agent containing the microorganisms of the Muker and the microorganisms of the species together with It is to provide a complex microbial agent containing other microorganisms.

본 발명의 다른 목적은 상기 미생물제의 제조방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a method for producing the microbial agent.

또한, 본 발명의 또 다른 목적은 가축의 생산성 향상 및 악취 분해 효과가 있는 신규한 뮤커 속 미생물을 제공하는 것이다.In addition, another object of the present invention is to provide a novel muker genus microorganism having an effect of improving the productivity and malodor decomposition of livestock.

이하, 본 발명을 보다 구체적으로 설명하고자 한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명은 가축의 생산성을 높임과 동시에 가축분뇨에 의한 악취발생을 감소시켜 호흡기 질병의 발생을 억제할 수 있는 뮤커(Mucor) 속의 미생물을 함유한 미생물제에 관한 것이다. 상기 미생물은 단독으로 사용하거나 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae)와 같은 곰팡이, 유산균, 효모, 바실러스 속의 미생물과 같이 사용할 수 있다.The present invention relates to a microbial agent containing a microorganism in the Mucor (mucor) that can suppress the occurrence of respiratory diseases by increasing the productivity of the livestock and at the same time reduce the occurrence of odor caused by livestock manure. The microorganism may be used alone or as a microorganism of the fungus, lactic acid bacteria, yeast, Bacillus genus such as Aspergillus oryzae .

또한, 본 발명은 상기 미생물제를 저렴한 비용으로 제조하는 방법에 관한 것이다. 미생물제는 일반적으로 액체배양, 고체배양, 반고체배양 등의 방법으로 제조할 수 있는데, 미생물 배양에 있어 조절이 용이하고 배양시간이 짧은 액체배양 방법으로 제조하는 것이 바람직하며, 이 경우 저렴한 배양배지를 선택하여 배양한다.The present invention also relates to a method for producing the microbial agent at low cost. In general, the microbial agent may be prepared by a liquid culture, a solid culture, a semi-solid culture, or the like. In the microbial culture, it is preferable to prepare a microbial liquid culture method that is easy to control and has a short incubation time. Incubate by

또한, 본 발명은 가축에게 급여할 경우 생산성을 향상시키고 축산 분뇨의 악취를 저감시키는 효과를 나타내는 신규한 미생물인 뮤커 속 균주 KFCC-11239에 관한 것이다.In addition, the present invention relates to a novel microorganism of the genus Muker strain KFCC-11239, which has an effect of improving productivity and reducing odor of livestock manure when fed to livestock.

본 발명의 목적을 달성하기 위해 본 발명자들은 가축의 생산성을 높이고 축산 분뇨의 악취를 저감시키는 효과가 있는 곰팡이를 분리하는데 성공하였으며, 분리된 곰팡이는 뮤커 속의 미생물로 동정되었다.In order to achieve the object of the present invention, the present inventors have succeeded in separating fungi that have the effect of increasing the productivity of livestock and reducing the odor of livestock manure, and the isolated fungus has been identified as a microorganism in the muker.

뮤커 속 곰팡이는 털곰팡이라고 부르며 구조는 포자낭병이 균사체에 직립하여 신장하며, 분기하지 않은 것과 분기한 것이 있고 그 말단에 포자낭이 생긴다.전체적으로는 섬모상으로 보이며 거미줄 곰팡이와 달리 가근과 포복지를 형성하지 않고 내생포자를 형성하는 특징이 있다. 균종에 따라 치즈 응유효소인 렌넷을 대체하는 레닌이라는 효소를 생산하는데 이용되기도 하고, 중국의 누룩에서 분리된 뮤커 속의 미생물은 전분당화력과 알코올 발효력이 강하여 알코올 제조에 이용되기도 한다[응용미생물학 개론, p38-39, 세진사, (1997)]. 이와 같이 뮤커 속의 미생물 및 이를 이용한 기술은 주로 치즈나 간장과 같은 식품 및 알코올 제조에만 이용되고 있고, 이를 사료 첨가용 미생물제나 악취 제거 미생물제 또는 균주로 사용된 바는 없다.The fungus in the muker is called a fur fungus, and its structure is spore cysts upright and elongated in the mycelium, with unbranched and branched spores, with spore cysts at their ends. There is a characteristic of forming endogenous spores without forming. Depending on the species, it is used to produce an enzyme called Lenin, which replaces Rennet, a cheese curd enzyme, and microorganisms in the muker isolated from Nuruk in China are used for alcohol production because of its high starch glycation and alcohol fermentation power [Introduction to applied microbiology, p38] -39, Sejinsa, (1997)]. As described above, microorganisms in mukers and techniques using the same are mainly used for food and alcohol production, such as cheese and soy sauce, and have not been used as microorganisms or odor removing microorganisms or strains for feed addition.

본 발명에 개시된 신규 미생물의 동정 및 특징을 설명하면 다음과 같다.Referring to the identification and characteristics of the novel microorganism disclosed in the present invention.

본 발명의 균주는 간장, 청국장과 같은 곰팡이, 효모 및 바실러스 발효에 의한 전통 발효식품으로부터 분리하였다. 전통적으로 발효식품의 생리활성 작용은 널리 알려져 있는 사실로서 특히 효소활성이 높고 생리활성 물질을 많이 생산하는 것으로 알려진 곰팡이를 위주로 가축에게 급여하여 생산성 향상 및 분뇨 악취 발생 억제효과를 얻을 수 있는 균주를 얻고자 하였다. 여러 발효식품을 1차적으로 피디에이 아가배지(PDA, Potato Dextrose Agar)에 도말하여 여러 곰팡이 균주를 분리한 후 효소생산성이 높고 가축분뇨에 첨가하였을 때 악취저감 효과가 가장 우수한 균주를 선발하여 동정한 결과 뮤커 속 균주로 동정되었다. 본 발명의 균주는 2000년 11월 23일자로 한국종균협회에 기탁번호 KFCC-11239로 기탁되었다.Strains of the present invention were isolated from traditional fermented foods by fungus, yeast and Bacillus fermentation such as soy sauce, Cheonggukjang. Traditionally, the physiological activity of fermented foods is a well known fact. Especially, the strains are fed to livestock based on molds, which are known to have high enzyme activity and produce a large amount of physiologically active substances. Now. First, various fermented foods were plated on PDA (Pato, Dextrose Agar) to isolate several fungal strains, and the results were identified by selecting strains with high enzyme productivity and the best odor reduction effect when added to livestock manure. The strain was identified as Muker genus. The strain of the present invention was deposited on November 23, 2000 with the accession number KFCC-11239 to the Korean spawn association.

이렇게 분리한 미생물은 PDA, 덱스트로스 펩톤 아가(DPA) 또는 포테이토 슈크로스 아가(PSA) 등의 배지에서 배양할 수 있다. 이때 배양온도는 25 내지 37℃이며, 보다 바람직하게는 37℃에서 성장시킨다. pH 조건은 5.5 내지 8.0, 보다 바람직하게는 pH 5.7이 적합하다. 배지의 탄소원으로서는 글루코오스, 전분, 슈크로스 등을 단독으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 질소원으로는 황산암모늄, 요소 등과 같은 무기 질소원과 효모추출물, 육추출물, 펩톤 등의 유기 질소원을 단독 또는 조합으로 사용할 수 있다. 무기물은 사용하는 배지에 따라 달라질 수 있으며 일반적으로 철, 마그네슘, 인, 망간 등을 사용하는 것이 바람직하다.The microorganism thus separated can be cultured in a medium such as PDA, dextrose peptone agar (DPA) or potato sucrose agar (PSA). At this time, the culture temperature is 25 to 37 ℃, more preferably at 37 ℃. pH conditions are suitable for 5.5-8.0, More preferably, pH 5.7. As the carbon source of the medium, glucose, starch, sucrose and the like can be used alone or in combination. As the nitrogen source, inorganic nitrogen sources such as ammonium sulfate and urea and organic nitrogen sources such as yeast extract, meat extract, and peptone may be used alone or in combination. The inorganic material may vary depending on the medium used, and it is generally preferable to use iron, magnesium, phosphorus, manganese, or the like.

본 발명의 미생물제를 제조하기 위해서 상기에서 얻은 뮤커 속의 균주를 곰팡이용 배지, 바람직하게는 PDA 배지에 접종하여 25 내지 37℃, 바람직하게는 37℃에서 100 내지 200rpm, 바람직하게는 180rpm으로 1 내지 2일간 호기 배양시켜 배양액을 얻은 후 이를 종균으로 사용한다.In order to prepare the microbial agent of the present invention, the strain of the genus Muker obtained above is inoculated in a mold medium, preferably PDA medium, at 1 to 2 at 25 to 37 ° C., preferably at 37 ° C., at 100 to 200 rpm, preferably at 180 rpm. After aerobic incubation daily to obtain a culture, it is used as a seed.

상기 종균을 글루코오스 1 내지 3중량%, 바람직하게는 2중량%, 감자분말 0.1 내지 0.5중량%, 바람직하게는 0.3중량%를 함유하는 멸균된 배양액을 함유한 발효기에 접종하여 25 내지 37℃, 바람직하게는 37℃에서 100 내지 200rpm, 바람직하게는 200rpm으로 1 내지 2일간, 바람직하게는 2일간 호기 배양시킨다.The seed is inoculated into a fermentor containing a sterilized culture solution containing 1 to 3% by weight of glucose, preferably 2% by weight, 0.1 to 0.5% by weight of potato powder, and preferably 0.3% by weight to 25 to 37 ° C. Preferably, aerobic incubation at 37 ° C. for 1 to 2 days, preferably 2 days at 100 to 200 rpm, preferably 200 rpm.

또한 본 발명의 미생물제에 함유되는 미생물 중 하나는 아스퍼질러스(Aspergillus) 속 미생물이다. 그 예로는 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae), 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger), 아스퍼질러스 피컴(Aspergillus ficcum) 등을 포함한다. 이 중에서, 아스퍼질러스 오리제는 황국균으로 알려져 있고 예로부터 청주, 된장, 간장, 감주, 소주 등의 제조에 널리 이용되어 온 대표적인 곰팡이로 전분 당화력 및 단백질 분해력이 강한 특징을갖고 있다. 상술한 아스퍼질러스 속 미생물중 특히 아스퍼질러스 오리제 KFCC-60241이 바람직하다.In addition, one of the microorganisms contained in the microbial agent of the present invention is a microorganism of the genus Aspergillus . Examples include Aspergillus oryzae , Aspergillus niger , Aspergillus ficcum , and the like. Among them, Aspergillus duckling is known as Hwangkuk bacteria and has been widely used for the production of sake, soybean paste, soy sauce, sake, soju, etc., and has strong starch glycation and proteolytic ability. Among the above-mentioned Aspergillus sp. Microorganisms, Aspergillus duckase KFCC-60241 is particularly preferable.

본 발명의 미생물제에 일 예로서 사용되는 아스퍼질러스 오리제는 전술한 뮤커 속 균주를 배양한 동일한 배지 및 배양 조건으로 배양하여 얻을 수 있다.Aspergillus duckling agent used as an example in the microbial agent of the present invention can be obtained by culturing in the same medium and culture conditions cultured the above-mentioned Muker strain.

또 다른 미생물제의 일원으로서, 바실러스 속 균주는 일반적으로 내생포자 형성으로 내열성이 높고 가축에게 유용한 섬유소 분해효소(cellulase), 전분 분해효소(amylase), 단백질 분해효소(protease), 자일란 분해효소(xylanase)와 같은 효소의 생산성이 높은 것이 특징이며, 아스퍼질러스 오리제와 함께 바실러스속 균주에 의한 발효 생성물은 효소를 비롯한 여러 생리활성 물질들을 함유하고 있어서 장내 유익균총의 활성 및 가축의 성장촉진에 유용한 역할을 하는 것으로 알려져 있다.As a member of another microbial agent, strains of the genus Bacillus are generally resistant to endocrine spores and are highly heat-resistant and useful for livestock, including cellulase, amylase, protease and xylanase. It is characterized by high productivity of enzymes such as fermentation products by Bacillus strains with Aspergillus aurise, which contains enzymes and other biologically active substances, which are useful for promoting intestinal beneficial flora and promoting livestock growth. It is known to do.

구체적인 바실러스 속 균주의 예로는, 바실러스 리체니포미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 세리우스(Bacillus cereus), 바실러스 아밀로리케페시언스(Bacillus amyloliquefaciens) 등을 포함한다. 특히 바실러스 리체니포미스 KCTC 1030 및 바실러스 서브틸리스 KCTC-1666이 바람직하다. 이러한 바실러스 속 균주는 바실러스 균주 배양에 일반적으로 사용되는 배지와 조건 하에 배양할 수 있다. 예를 들어, 뉴트리언트 브로스(NB broth) 배지에서 30 내지 40℃, 바람직하게는 37℃에서 100 내지 200rpm, 바람직하게는 180rpm으로 6 내지 24시간, 바람직하게는 12시간 동안 배양할 수 있다. 이 균주를 대량 생산하는 경우에는 대두박 0.5 내지 3중량%, 바람직하게는 1중량%와 당밀 1 내지 5중량%, 바람직하게는 2중량%를 함유하는 배지를 첨가한 발효기에서 호기 배양하여 얻을 수 있다.Examples of specific strains of the genus Bacillus include Bacillus licheniformis , Bacillus subtilis , Bacillus cereus , Bacillus amyloliquefaciens , and the like. Particularly preferred are Bacillus licheniform KCTC 1030 and Bacillus subtilis KCTC-1666. Such Bacillus strains can be cultured under conditions and medium commonly used for culturing Bacillus strains. For example, it can be incubated for 6 to 24 hours, preferably 12 hours at 30 to 40 ℃, preferably at 37 to 100 to 200rpm, preferably 180rpm in NB broth medium. In the case of mass production of this strain, it can be obtained by aerobic culture in a fermentor in which a medium containing 0.5 to 3% by weight of soybean meal, preferably 1% by weight and molasses 1 to 5% by weight, preferably 2% by weight is added. .

또 다른 미생물제원으로서 사용될 수 있는 것으로 유산균이 있는데, 이는 글루코오스로부터 유산의 생성비율이 50% 이상인 세균을 말하는 것으로서 가축에게 급여하는 유산균은 주로 락토바실러스 (Lactobacillus)속 유산균을 이용할 수 있다. 그 예로는 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 플란타륨(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 파라카제이(Lactobacillus paracasei)를 포함한다. 특히, 락토바실러스 에시도필러스 ATCC 4356이 바람직하다. 가축의 장관내에서 유산균의 역할은 장내 미생물총을 안정화하고 정장작용, 유해균 증식의 억제 및 고유 면역기전의 자극으로 질병발생에 따른 가축의 생산성 감소를 억제하는 역할을 한다.Another microbial source can be used as lactic acid bacteria, which refers to bacteria that produce more than 50% of the lactic acid production from glucose, lactic acid bacteria to feed livestock can be used mainly Lactobacillus ( Lactobacillus ) lactic acid bacteria. Examples include Lactobacillus acidophilus , Lactobacillus casei , Lactobacillus plantarum , Lactobacillus paracasei . In particular, Lactobacillus esidophilus ATCC 4356 is preferred. The role of lactic acid bacteria in the intestine of the livestock is to stabilize the intestinal microflora and to inhibit the productivity of livestock due to disease outbreaks by suppressing intestinal action, inhibiting the growth of harmful bacteria and stimulating the innate immune mechanism.

이러한 유산균 속 균주는 바실러스 균주 배양에 일반적으로 사용되는 배지와 조건 하에 배양할 수 있다. 예를 들어, 엠알에스 브로스(MRS broth) 배지에서 30 내지 40℃, 바람직하게는 37℃에서 80 내지 150rpm, 바람직하게는 120rpm으로 12 내지 48시간, 바람직하게는 15시간 동안 배양할 수 있다. 상기 균주를 대량 생산하는 경우에는 효모추출물 0.1 내지 1.0중량%, 바람직하게는 0.5중량%, 글루코오스 0.3 내지 1.0중량%, 바람직하게는 0.7중량%, 및 아세트산나트륨 0.1 내지 0.5중량%, 바람직하게는 0.2중량%를 함유하는 배지를 첨가한 발효기에서 호기 배양하여 얻을 수 있다.Such strains of lactic acid bacteria can be cultured under medium and conditions generally used for culturing Bacillus strains. For example, it may be incubated in MRS broth medium at 30 to 40 ° C., preferably at 37 ° C., at 80 to 150 rpm, preferably at 120 rpm for 12 to 48 hours, preferably 15 hours. In the case of mass production of the strain, yeast extract 0.1 to 1.0% by weight, preferably 0.5% by weight, glucose 0.3 to 1.0% by weight, preferably 0.7% by weight, and sodium acetate 0.1 to 0.5% by weight, preferably 0.2 It can be obtained by aerobic culture in a fermentor to which a medium containing a weight% is added.

마지막으로, 효모는 글루코오스를 탄소원으로 하여 알코올과 탄산가스를 생성하는 미생물로서, 그 예로는 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae), 사카로마이세스 퍼멘타티(Saccharomyces fermentati), 피치아 속(Pichiasp.), 한세눌라(Hansenulasp.) 속, 캔디다 유틸리스(Candida utilis)를 포함한다. 이중 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae)가 본 발명에 사용될 수 있는 바람직한 효모 종류이다. 특히 사카로마이세스 세레비지에 ATCC 9763이 바람직하다. 본 발명에 사용되는 사카로마이세스 세레비지에의 세포벽은 글루칸, 만난, 키틴과 같은 기능성 고분자 탄수화물로 이루어져 있어 유해독소를 결합시켜 체외로 배출하는 역할과 풍부한 아미노산, 비타민, 미지성장인자 공급 및 장내 유용세균의 활성을 촉진시키고, 특히 사료풍미가 개선되어 가축의 사료섭취량을 높이는 역할을 한다.Finally, yeast is a microorganism that produces alcohol and carbon dioxide using glucose as a carbon source, for example, Saccharomyces cerevisiae , Saccharomyces fermentati , Pichia sp.), Genus Hansenula sp., And Candida utilis . Saccharomyces cerevisiae is the preferred type of yeast that can be used in the present invention. In particular, ATCC 9763 is preferred for Saccharomyces cerevisiae. The cell wall of Saccharomyces cerevisiae used in the present invention is composed of functional polymer carbohydrates such as glucan, mannan and chitin, which binds harmful toxins and releases them to the outside of the body and supplies abundant amino acids, vitamins and unknown growth factors. It promotes the activity of useful bacteria, and in particular, the feed flavor is improved to play a role in raising the feed intake of livestock.

상기 효모는 효모 균주 배양에 사용되는 일반적인 배지와 조건하에서 배양할 수 있다. 예를 들어, 와이엠 브로스(YM broth) 배지에서 25 내지 37℃, 바람직하게는 37℃에서 50 내지 150rpm, 바람직하게는 120rpm으로 15 내지 48시간, 바람직하게는 15시간 동안 배양할 수 있다. 상기 균주를 대량 생산하는 경우에는 대두박 0.5 내지 3중량%, 바람직하게는 1중량%, 당밀 0.1 내지 2.0중량%, 바람직하게는 0.5중량%, 글루코오스 0.5 내지 3중량%, 바람직하게는 1중량%를 함유하는 배지를 첨가한 발효기에서 정치 배양하여 얻을 수 있다.The yeast may be cultured under the general medium and conditions used for culturing yeast strains. For example, the YM broth medium may be incubated at 25 to 37 ° C., preferably at 37 ° C. at 50 to 150 rpm, preferably at 120 rpm for 15 to 48 hours, preferably 15 hours. In the case of mass production of the strain, soybean meal 0.5 to 3% by weight, preferably 1% by weight, molasses 0.1 to 2.0% by weight, preferably 0.5% by weight, glucose 0.5 to 3% by weight, preferably 1% by weight It can obtain by standing culturing in the fermentor which added the containing medium.

상기 미생물들의 제조에 사용한 배지들의 조성을 표 1에 나타내었다. 아가배지는 표 1에 기재된 각각의 배지에 1.5중량%씩 아가를 첨가하여 제조하면 된다.Table 1 shows the composition of the media used to prepare the microorganisms. The agar medium may be prepared by adding 1.5% by weight of agar to each medium of Table 1.

종 류Kinds 성 분(g/L)Component (g / L) 피디에이 브로스(PDA, 포테이토 덱스트로스 브로스)PDA Broth (PDA, potato dextrose broth) 감자추출물 4; 글루코오스 20; pH 5.6Potato extract 4; Glucose 20; pH 5.6 뉴트리언트 브로스(NB, 뉴트리언트 브로스)Nutrient Bros (NB, Nutrient Bros) 펩톤 5; 육추출물 3; pH 7.4Peptone 5; Meat extract 3; pH 7.4 와이엠 브로스(YM broth,이스트-몰트 익스트렉트 브로스)YM broth (Yeast-Malt Extract Bros) 효모추출물 3; 맥아추출물 3; 펩톤 5; 글루코오스 10; pH 6.2Yeast extract 3; Malt extract 3; Peptone 5; Glucose 10; pH 6.2 엠알에스 브로스(MRS broth,Man, Rogosa and Sharpe브로스)MRS broth, Man, Rogosa and Sharpe Bros 펩톤 10; 육추출물 8; 효모추출물 4; 글루코오스 20; 아세트산나트륨 5; 트리암모늄사이트레이트 2; 황화마그네슘 0.2; 황화망간 0.05; 제2인산칼륨 2; 폴리소베이트80 1; pH 6.2Peptone 10; Meat extract 8; Yeast extract 4; Glucose 20; Sodium acetate 5; Triammonium citrate 2; Magnesium sulfide 0.2; Manganese sulfide 0.05; Dibasic potassium phosphate 2; Polysorbate 80 1; pH 6.2

본 발명의 미생물제는 먼저 질석(vermiculite), 밀기울, 대두박, 맥반석을 중량% 기준으로 0.5 내지 2 : 1 내지 3 : 1 내지 3 : 0.5 내지 2의 비율, 바람직하게는 1:2:2:1의 비율로 혼합한 부형제를 얻은 후, 전술한 방법에 따라 각 미생물을 배양하여 얻은 균체 배양액 혼합물 30 내지 60중량%와 상기 부형제 40 내지 70중량%, 바람직하게는 각각 50중량%씩 혼합한 다음 8 내지 24시간, 바람직하게는 15시간 동안 30 내지 45℃, 바람직하게는 40℃로 저온건조시켜 분쇄하여 얻는다. 균체를 분쇄기로 분쇄하여 부형제와 혼합하여 건조시킬 경우 상기 균체는 질석이나 맥반석의 공극에 잘 침투하여 안정성이 높아지며, 건조과정 초기에 발생하는 2차 배양을 촉진한다. 또한 대두박과 밀기울 등은 균주의 영양 공급원으로 작용하여 균 성장을 촉진한다.The microbial agent of the present invention first has a ratio of 0.5 to 2: 1 to 3: 1 to 3: 0.5 to 2, preferably 1: 2: 2: 1 by weight of vermiculite, wheat bran, soybean meal, and ganbanite. After obtaining the excipients mixed in the ratio, 30 to 60% by weight of the cell culture medium mixture obtained by culturing each microorganism according to the above-described method and 40 to 70% by weight, preferably 50% by weight of each of the excipients and then 8 to Obtained by grinding at low temperature drying at 30 to 45 ° C., preferably at 40 ° C. for 24 hours, preferably 15 hours. When the cells are pulverized with a grinder and mixed with an excipient and dried, the cells penetrate well into the pores of vermiculite or elvan, increasing stability, and promoting secondary culture occurring early in the drying process. In addition, soybean meal and bran act as a nutrient source of the strain to promote the growth of bacteria.

또한, 본 발명은 바람직한 일 양태로서 가축의 생산성을 높임과 동시에 가축분뇨에 의한 악취발생을 감소시키는 효과를 나타내는, 한국종균협회에 기탁한 곰팡이인 뮤커 속(Mucor) sp. KFCC-11239를 비롯하여 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae) KFCC-60241, 바실러스 리체니포미스(Bacillus licheniformis) KCTC 1030,바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) KCTC-1666, 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus) ATCC 4356, 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) ATCC 9763을 포함하는 미생물제 및 그 제조 방법을 제공한다.In addition, the present invention as a preferred aspect of the Mucor sp. ( Mucor ) sp. A fungus deposited in the Korean spawn association showing the effect of increasing the productivity of the livestock and at the same time reduce the odor caused by livestock manure. KFCC-11239, Aspergillus oryzae KFCC-60241, Bacillus licheniformis KCTC 1030, Bacillus subtilis KCTC-1666, Lactobacillus acidophilus ) ATCC 4356, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 and a method for producing the same.

이하 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 구체적으로 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 이들 실시예에 의해 본 발명의 범위가 제한되지는 않는다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention in detail, and the scope of the present invention is not limited by these examples.

<실시예 1><Example 1>

미생물 분리 및 동정Microbial Isolation and Identification

본 발명의 신규한 뮤커 속의 미생물을 배양하기 위한 최적의 배지를 선정하기 위해 차펙 이스트 아가(CYA)배지, 몰트 익스트렉트 아가(MEA) 배지, 글리세롤 25% 나이트레이트 아가(G25N) 배지별로 배양하였다. 각 배지의 조성은 다음과 같았다.In order to select the optimal medium for culturing the microorganisms of the novel muker of the present invention was cultured by Chapec yeast agar (CYA) medium, malt extract agar (MEA) medium, glycerol 25% nitrate agar (G25N) medium . The composition of each medium was as follows.

(1) CYA(Czapek Yeast Agar): 차펙 이스트 아가(1) CYA (Czapek Yeast Agar): Chapek East Baby

NaNO33.0g, K2HPO41.0g, KCl 0.5g, MgSO4·7H2O 0.5g, FeSO4·7H2O 0.1g, 효모추출물 5.0g, 사카로오스 30g, 아가 15g, 증류수 1L, pH 7.1NaNO 3 3.0g, K 2 HPO 4 1.0g, KCl 0.5g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, FeSO 4 · 7H 2 O 0.1g, yeast extract 5.0g, saccharose 30g, agar 15g, distilled water 1L, pH 7.1

(2) MEA(Malt Extract Agar): 몰트 익스트렉트 아가(2) Malt Extract Agar (MAL): malt extract agar

맥아추출물 20g, 펩톤 1g, 글루코오스 20g, 아가 15g, 증류수 1L, pH 5.6Malt extract 20g, peptone 1g, glucose 20g, agar 15g, distilled water 1L, pH 5.6

(3) G25N(Glycerol 25% Nitrate Agar): 글리세롤 25% 나이트레이트 아가(3) G25N (Glycerol 25% Nitrate Agar): Glycerol 25% Nitrate Agar

NaNO33.0g, K2HPO41.0g, MgSO4·7H2O 0.5g, 효모추출물 5.0g, 글리세롤 25g, 아가 15g, 증류수 1L, pH 7.1NaNO 3 3.0 g, K 2 HPO 4 1.0 g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5 g, yeast extract 5.0 g, glycerol 25 g, agar 15 g, distilled water 1 L, pH 7.1

7일간 배양한 후 콜로니의 직경을 cm 단위로 측정한 결과 표 2에 나타난 바와 같이 배지별로 성장속도가 상이하였으며, 이중 MEA 배지에서 가장 우수한 성장을 나타내었고, 곰팡이의 일반적인 배양온도인 25℃보다는 37℃에서 더 우수한 성장상태를 나타내었다.After culturing for 7 days, the diameter of the colonies was measured in cm. As a result, as shown in Table 2, the growth rate was different for each medium, showing the best growth in the MEA medium, 37 rather than 25 ° C., which is the general culture temperature of mold. It showed better growth at ℃.

배지온도Medium temperature CYA(1)CYA (1) MEA(2)MEA (2) G25N(3)G25N (3) 5℃5 ℃ 성장 안함No growth 성장 안함No growth 성장 안함No growth 25℃25 ℃ 3.7 cm3.7 cm 5.1 cm5.1 cm 1.7 cm1.7 cm 37℃37 ℃ 4.2 cm4.2 cm 6.5 cm6.5 cm 2.5 cm2.5 cm

균주동정을 위해 피디에이(PDA, Potato Dextrose Agar) 평판배지에서 콜로니를 분리하여 슬라이드 배양하면서 광학현미경으로 관찰한 결과 표 3에 나타난 바와 같이 뮤커 속의 특징인 격벽이 없는 균사, 포자낭포자(sporangiospore)로 꽉 찬 포자낭(sporangium)이 확인되었으며, 가근, 포복지, 병족세포 등은 관찰되지 않았다. 뮤커 속 곰팡이는 균사에 격벽이 없는 조상균류(Phycomycetes)에 속하며, 조상균류에는 뮤커 속을 포함하여 리조퍼스 속(Rhizopussp.), 앱시디아 속(Absidiasp.)이 포함된다. 이 중 뮤커 속 곰팡이는 포자낭병이 균사체에 직립하여 신장하며, 분기하지 않는 것과 분기한 것으로 나뉘는데 본 발명의 균주는 분기하지 않은 균주로 나타났고, 그 말단에 포자낭을 형성한다. 리조퍼스 속(Rhizopussp.)과 달리 가근과 포복지를 형성하지 않아 본 발명의 균주는 뮤커 속 곰팡이로 동정되었다.As a result of observing the colonies from the platelet of PDA (PDA, Potato Dextrose Agar) and cultivating the slides for the identification of the strain, the microscopic observation of the microorganisms showed that the mucosa, sporangiospores, without the septum is characteristic of the muker. Cold sporangium was identified, and no roots, swellings, or pathologic cells were observed. The fungus of the Muker genus belongs to the phycomycetes, which have no septum in the hyphae, and the ancestor fungi include the Rhizopus sp., Including the Muker genus, and the Absidia sp. Among these, the fungus in the muker is divided into spore cyst disease upright in mycelium and elongate, not branched and branched. The strain of the present invention appears as a non-branched strain, and forms spores at the ends thereof. Unlike Rhizopus sp., The strain of the present invention was identified as a fungus of Muker because it did not form rhizome and creep.

항 목Item 뮤커 속 균주Muker strain 분리 균주Isolated strain 균사(Hyphae)Hypha + + 격벽(Septa)Septa 자낭포자(Ascospore)Ascospore 포자낭포자(Sporangiospore)Sporangiospore + + 병족세포(Foot cell)Foot cell 가근(Rhizoid)Rhizoid 포복지(Stolon)Storlon 접합포자(Zygospore)Zygospore + + 포자낭(Sporangium)Sporangium + +

따라서 본 발명의 신규 분리 균주는 조상균류(Phycomycetes)의 뮤커 속임을 확인할 수 있었다. 상기 분리 균주는 2000년 11월 23일자로 한국종균협회에 기탁번호 KFCC-11239로 기탁되었다.Therefore, the novel isolated strain of the present invention was confirmed to be a muker genus of ancestor fungi (Phycomycetes). The isolated strain was deposited on November 23, 2000, with the accession number KFCC-11239 to the Korean spawn association.

본 발명의 분리균주를 600배의 배율로 일반적인 광학현미경하에서 형태를 관찰한 결과는 표 4에 나타내었다.The results of observing the morphology of the isolated strain of the present invention under a general optical microscope at a magnification of 600 times are shown in Table 4.

항 목Item 특 징Characteristic 포자낭포자(Sporangiospore)Sporangiospore 직경: 5.2 ∼ 7.5 ㎛원형Diameter: 5.2 ~ 7.5 ㎛ Round 포자낭(Sporangium)Sporangium 크기: 50.1 ∼ 97.1 ㎛원형Size: 50.1 to 97.1 µm

<실시예 2><Example 2>

미생물제의 제조Preparation of Microbial Agents

뮤커 속 KFCC-11239와 아스퍼질러스 오리제 KFCC-60241은 포테이토 덱스트로스 아가(PDA) 배지에 보존 중인 균주를 1 백금이를 취하여 포테이토 덱스트로스 브로스(PDB) 50ml에 접종하고 37℃에서 2일간 180rpm으로 배양한 후 5L 자-퍼멘터(jar-fermentor)에서 3L의 감자분말 0.3중량%, 글루코오스 2중량%를 함유하는 배지에서 37℃, 200rpm으로 2일간 호기배양시켰다.Mucus KFCC-11239 and Aspergillus aurise KFCC-60241 were inoculated in 50 ml of potato dextrose broth (PDB) with 1 platinum of the preserved strain in potato dextrose agar (PDA) medium and 180 rpm for 2 days at 37 ° C. After incubation in a 5L jar-fermentor (3) potato culture in a medium containing 0.3% by weight of 3L, 2% by weight of glucose in 2L aerobic culture for 2 days at 37 ℃, 200rpm.

바실러스 리체니포미스 KCTC 1030과 바실러스 서브틸리스 KCTC-1666은 뉴트리언트 아가(NA) 배지에 보존 중인 균주를 1 백금이를 취하여 뉴트리언트 브로스(NB) 50ml에 접종하여 37℃에서 12시간 동안 180rpm으로 배양한 후 5L 자-퍼멘터에서 대두박 1중량%, 당밀 2중량%를 함유하는 3L의 배지에서 37℃, 180rpm으로 15시간 동안 호기배양시켰다.Bacillus licheniformis KCTC 1030 and Bacillus subtilis KCTC-1666 were inoculated into 50 ml of nutrient broth (NB) by taking 1 platinum of the strain preserved in nutrient agar (NA) medium at 180 rpm for 12 hours at 37 ° C. After incubation, the culture was exhaled for 15 hours at 37 ° C. and 180 rpm in a 3 L medium containing 1 wt% soybean meal and 2 wt% molasses in a 5 L jar-fermenter.

락토바실러스 에시도필러스 ATCC 4356은 엠알에스 아가(MRS agar)에 보존 중인 균주를 1 백금이를 취하여 엠알에스 브로스(MRS broth) 50ml에 접종하여 37℃에서 15시간 동안 120rpm으로 배양한 후 5L 자-퍼멘터에서 효모추출물(yeast extract) 0.5중량%, 글루코오스 0.7중량%, 아세트산나트륨(Sodium acetate) 0.2중량%를 함유하는 3L의 배지에서 37℃, 120rpm으로 15시간 동안 정치배양시켰다.Lactobacillus Escidophilus ATCC 4356 was inoculated in 50 ml of MRS broth, which was preserved in MRS agar, inoculated in 50 ml of MRS broth, and incubated at 120 rpm for 15 hours at 37 ° C. -The cells were incubated for 15 hours at 37 ° C. and 120 rpm in a 3L medium containing 0.5 wt% yeast extract, 0.7 wt% glucose, and 0.2 wt% sodium acetate.

사카로마이세스 세레비지에 ATCC 9763은 와이엠 아가(YM agar)에 보존 중인 균주를 1 백금이를 취하여 와이엠 브로스(YM broth) 50ml에 접종하여 37℃에서 15시간 동안 120rpm으로 배양한 후 대두박 1중량%, 당밀 0.5중량%, 글루코오스 1중량%를 함유하는 3L의 배지에 접종하여 37℃에서 24시간 동안 정치배양시켰다.ATCC 9763 in Saccharomyces cerevisiae was inoculated in 50 ml of YM broth in a strain preserved in YM agar, inoculated in 50 ml of YM broth, and incubated at 120 rpm for 15 hours at 37 ° C. Inoculated in 3 L medium containing 1% by weight, 0.5% molasses, 1% glucose by incubation at 37 ℃ for 24 hours.

각 균주의 대량 배양 조건을 파악하기 위하여 실험실 및 종균 배양에 쓰이는 최적 배지와 비교한 결과를 표 5에 나타내었다. 비교예에서는 상기 표 1의 종균용 최적 배지를 사용하였다. 뮤커 속 및 바실러스 속의 미생물에 있어서는 대수기까지는 비교예의 성장이 우수하였으나 정지기에 도달한 후 수확하는 시기에서는 차이가 없었다. 락토바실러스 속과 사카로마이세스 속의 미생물에 있어서는 대수기에 있어서도 균 성장에 차이가 없어 미생물에 의한 배지의 이용성에 차이가 없었으며,특히 정지기에 있어서 실시예에 따른 배지 조성이 오히려 더 우수한 미생물 생산 조건임을 알 수 있었다. 따라서 본 발명에 따른 배지조성으로 대량 배양할 경우 저렴하면서 균수가 높은 미생물제를 생산할 수 있다.Table 5 shows the results compared with the optimum medium used in the laboratory and spawn culture to determine the mass culture conditions of each strain. In Comparative Example, the optimum medium for seedlings in Table 1 was used. In the microorganisms of the genus Muker and Bacillus, the growth of the comparative example was excellent up to the log phase, but there was no difference in the harvesting time after reaching the stationary phase. In the microorganisms of the genus Lactobacillus and Saccharomyces, there was no difference in the growth of bacteria in the log phase, so there was no difference in the usability of the medium by the microorganisms. It was found to be a condition. Therefore, it is possible to produce a microbial agent with a high bacterial count at a low cost when cultivating a large amount of the medium according to the present invention.

최적 배양배지와 대량 배양배지간의 균 성장 비교Comparison of Bacterial Growth between Optimal and Mass Culture Medium 항 목Item 배양시간(h)Incubation time (h) 균 수(CFU/ml)Number of bacteria (CFU / ml) 배양시간(h)Incubation time (h) 균 수(CFU/ml)Number of bacteria (CFU / ml) 곰팡이mold 비교예Comparative example 1212 7.5×104 7.5 × 10 4 2424 3.5×107 3.5 × 10 7 실시예Example 8.2×104 8.2 × 10 4 3.3×107 3.3 × 10 7 바실러스Bacillus 비교예Comparative example 44 1.4×106 1.4 × 10 6 1010 2.2×107 2.2 × 10 7 실시예Example 5.2×106 5.2 × 10 6 2.4×107 2.4 × 10 7 유산균Lactobacillus 비교예Comparative example 88 7.0×105 7.0 × 10 5 1515 2.7×108 2.7 × 10 8 실시예Example 6.5×105 6.5 × 10 5 1.1×108 1.1 × 10 8 효모leaven 비교예Comparative example 88 3.5×105 3.5 × 10 5 2424 8.5×107 8.5 × 10 7 실시예Example 3.5×105 3.5 × 10 5 7.5×107 7.5 × 10 7

질석(vermiculite), 밀기울, 대두박, 맥반석을 중량% 기준으로 1:2:2:1의 비율로 혼합한 부형제와 상기 조건으로 배양한 액체배양액을 중량% 기준으로 1:1의 비율로 혼합한 다음 24시간 동안 40℃로 저온건조시켜 분쇄하여 미생물제를 얻었다. 이렇게 얻어진 미생물제의 균수를 파악하기 위하여 멸균 생리식염수에 1중량%의 미생물제를 혼합 분쇄한 후 10배수로 연속 희석하여 각각의 아가배지에 도말하고 배양시킨 결과, 뮤커 속 곰팡이 1.0×107CFU/g, 아스퍼질러스 오리제 1.1×107CFU/g, 바실러스 속 미생물 4.0×108CFU/g, 락토바실러스 속 미생물 1.0×108CFU/g, 사카로마이세스 속 미생물 3.0×107CFU/g의 결과를 얻어 많은 수의 미생물 수를 함유한 우수한 미생물제를 얻게 되었다.Excipients mixing vermiculite, bran, soybean meal, and ganban stone in a ratio of 1: 2: 2: 1 by weight and liquid culture medium cultured under the above conditions in a ratio of 1: 1 by weight, Drying at low temperature at 40 ° C. for 24 hours was pulverized to obtain a microbial agent. Thus obtained by mixing and pulverizing the antimicrobial agent of 1% by weight in sterile physiological saline in order to determine the number of bacteria of the antimicrobial agent 10 in multiples serially diluted to a result of the smeared and cultured on each of the agar medium, myukeo in mold 1.0 × 10 7 CFU / g, Aspergillus duckling 1.1 × 10 7 CFU / g, Bacillus genus 4.0 × 10 8 CFU / g, Lactobacillus genus 1.0 × 10 8 CFU / g, Saccharomyces genus 3.0 × 10 7 CFU / g The result was a good microbial agent containing a large number of microorganisms.

<실시예 3><Example 3>

젖소 급여 시험Dairy cow salary test

산유량과 비유기가 비슷한 홀스타인 젖소 45두를 선발하여 15두씩 무첨가구, 첨가구(뮤커 속 및 복합미생물제)로 나누고, 뮤커 속 미생물 및 상기 실시예 2에 따라 제조된 사료 첨가용 미생물제를 각각 배합 사료의 0.2중량%씩 혼합하여 50일 동안 첨가구에 급여한 결과는 다음 표 6과 같았다.Forty-five Holstein cows of similar milk yield and fertility were selected and divided into 15 groups each without additives and additions (muker genus and complex microbial agent), and the microorganisms in muker and the microbial agent for feed addition prepared according to Example 2, respectively. Mixing 0.2% by weight in 50 days to add the addition was the result shown in Table 6.

구분division 무첨가구No furniture 첨가구Addition 뮤커 속Muker 복합미생물제Complex microbial agent 시험두수Test head 1515 1515 1515 산유량(kg/일)Production flow rate (kg / day) 시험전Before the test 15.815.8 15.715.7 15.915.9 시험중 평균Average during the test 15.315.3 16.216.2 16.516.5 체세포수(103/ml)Somatic cell count (10 3 / ml) 시험전Before the test 532.5532.5 551.3551.3 520.8520.8 시험중 평균Average during the test 442.4442.4 302.3302.3 230.5230.5 유방염 감염두수Mastitis Infection 66 22 22

상기 결과에서 무첨가구는 시험전에 비해 다소 산유량이 저하되었으나 뮤커 속 첨가구 및 뮤커 속 미생물을 포함한 복합미생물제 첨가구의 경우 산유량이 현저하게 증가되었다. 체세포수에 있어서도 무첨가구에 비해 뮤커 속 첨가구와 복합미생물제 첨가구의 경우 체세포 감소율이 높았다. 유방염에 감염된 젖소 두수도 무첨가구에 비해 첨가구가 현저히 낮은 결과를 나타내었다. 결과적으로 뮤커 속 곰팡이의 단독 급여만으로도 젖소의 생산성을 향상시킨다는 것을 알 수 있었으며, 뮤커 속 곰팡이를 비롯한 복합 미생물제를 투여할 경우 더욱 생산성을 향상시키는 효과를 나타내었다. 이러한 결과는 미생물제의 첨가에 따라 반추위내 섬유소 분해 박테리아 활성 증진 및 발효촉진으로 소화작용이 원활하게 이루어지며 미지성장인자 공급과 면역능력 개선에 따른 효과 때문인 것으로 판단된다.In the above results, the amount of oil produced was slightly lower than before the test, but in the case of the added group of muker and the group of added microorganisms including the microorganism of the group of muker, the amount of oil was significantly increased. In the somatic cell counts, mucus added and mixed microbial supplements were higher in somatic cell counts. The number of cows infected with mastitis also showed a significantly lower result than the group without addition. As a result, it could be seen that the cow's productivity alone was improved by only feeding the fungus in the muker, and the administration of complex microorganisms including the fungus in the muker showed an effect of further improving the productivity. These results are believed to be due to the effects of the growth of the fibrinolytic bacteria activity and fermentation in the rumen according to the addition of the microbial agent and the effect of supplying unknown growth factors and improving the immune capacity.

<실시예 4><Example 4>

육계 급여 시험Broiler pay test

육계(아바에이커 브로일러) 수평아리 180수에게 3일령에서 28일령까지 25일 동안 뮤커 속 미생물 및 상기 실시예 2에 따라 제조된 미생물제를 사료에 0.2중량%씩 혼합하여 급여한 결과는 다음 표 7과 같았다. 실험종료 후 육계 수평아리를 도체하여 회장 내용물을 샘플링하여 10배수로 연속 희석한 후 유산균은 엠알에스(MRS) 배지, 대장균군은 멕콩키 아가(MacConkey agar)에 도말하여 37℃에서 48시간 동안 배양한 후 콜로니수를 계수하여 측정하였다.The results of feeding the broiler (avatar) broiler cockerel by mixing 0.2 micro% by weight of the microorganisms and the microbial agent prepared according to Example 2 for 25 days from 3 days to 28 days of age were shown in Table 7 below. . After completion of the experiment, the broiler cockerel was carcassed, and the contents of the ileum were sampled and serially diluted to 10-fold. After lactic acid bacteria were plated in MRS medium and E. coli group was incubated at 37 ° C. for 48 hours. The number of colonies was counted and measured.

구분division 무첨가구No furniture 첨가구Addition 뮤커 속Muker 복합미생물제Complex microbial agent 사육 두수Breeding head 6060 6060 6060 사료섭취량(g/마리)Feed intake (g / mari) 80.180.1 79.179.1 78.978.9 일당증체량(g/마리)Daily weight gain (g / mari) 56.456.4 60.760.7 61.561.5 사료요구율 (사료섭취량/증체량)Feed demand rate (feed intake / weight gain) 1.421.42 1.301.30 1.281.28 장내 유산균수(CFU/g)Enteric Lactobacillus Count (CFU / g) 2.1×107 2.1 × 10 7 2.3×107 2.3 × 10 7 3.1×107 3.1 × 10 7 장내 대장균군수(CFU/g)Intestinal coliform count (CFU / g) 3.3×107 3.3 × 10 7 7.2×106 7.2 × 10 6 5.5×106 5.5 × 10 6 폐사율(%)% Mortality 55 22 22

상기 결과에 나타난 바와 같이 뮤커 속 미생물 급여만으로도 일당 증체량 및 사료요구율이 개선되었고 장내 유산균수는 다소 증가하였고 대장균수는 상당히 감소되어 장내 미생물총 안정에도 유용하게 작용하는 것으로 나타났다. 또한, 뮤커 속 미생물을 포함한 복합미생물제를 사용한 경우가 뮤커 속 미생물을 단독으로 급여한 경우 보다 우수한 급여 효과를 나타내었다.As shown in the above results, the daily microbial weight gain and feed requirement were improved by the feeding of the microorganisms in the muker alone, the number of enteric lactic acid bacteria increased slightly, and the number of E. coli bacteria decreased considerably, which also helped to stabilize the intestinal microflora. In addition, the case of using a microorganism containing a microorganism in the muker showed a better feeding effect than the case of feeding the microorganism in the muker alone.

<실시예 5>Example 5

돼지 급여 시험Pig salary test

상기 실시예 2에 의해서 제조된 미생물제를 돼지사료에 0.2중량% 비율로 혼합하여 급여한 결과를 다음 표 8에 나타내었다. 본 시험은 포유기에서 돼지의 평균 체중이 90kg이 될 때까지 수행하였으며, 포유기에는 대용유를 급여할 때 0.2중량%의 비율로 혼합하여 급여하였다.The microbial agent prepared according to Example 2 was mixed and fed to a pig feed at a ratio of 0.2% by weight, and the results are shown in Table 8 below. This test was carried out until the average weight of pigs in the mammalian body reached 90kg, and the mammalian group was fed a mixture of 0.2% by weight when feeding substitute milk.

구분division 무첨가구No furniture 첨가구Addition 뮤커 속Muker 복합미생물제Complex microbial agent 사육 두수Breeding head 4040 4040 4040 사료섭취량(g/마리)Feed intake (g / mari) 1,8251,825 1,7121,712 1,6991,699 일당증체량(g/마리)Daily weight gain (g / mari) 558558 633633 630630 사료요구율 (사료섭취량/증체량)Feed demand rate (feed intake / weight gain) 3.273.27 2.702.70 2.652.65 하리발생빈도*Hari frequency * 2.082.08 2.782.78 2.882.88 폐사율(%)% Mortality 55 22 22

* 정상변: 3, 연변: 2, 묽은변: 1, 수양변: 0* Normal side: 3, Yanbian: 2, Thin side: 1, Waterside: 0

상기 결과로 보아 본 발명에 따른 뮤커 속 미생물 및 복합 미생물제를 돼지에게 급여하는 경우 증체량과 사료요구율 개선 측면에서 뚜렷한 효과를 기대할 수 있었으며, 특히 하리 발생 빈도가 낮아 분변상태가 매우 좋다는 것을 알 수 있었다.As a result, when feeding the microorganisms in the muker and complex microbial agent according to the present invention to pigs can be expected to have a clear effect in terms of weight gain and feed rate improvement, it was found that the stool state is very good, especially low hari occurrence frequency.

<실시예 6><Example 6>

돼지 분뇨의 악취제거 시험Deodorization test of pig manure

실시예 2의 방법에 따라 얻어진 미생물제를 돼지 분뇨 혼합물에 0.5중량%씩 첨가하여 4일간 발효시켜 악취제거능을 측정한 결과 표 9에 나타난 바와 같이 가축분뇨의 악취의 대부분을 차지하는 황화수소, 이산화황, 암모니아, 휘발성 지방산 함량이 크게 감소하는 것을 알 수 있었다. 이때 악취발생 정도는 관능법에 의해검사하였다. 관능법에 의한 검사는 10명의 검사자로 하여금 각기 다른 처리를 한 가축분뇨 냄새를 맡게 한 다음 악취발생 정도에 따라 점수를 매겨 그 평균값을 계산하는 방법이다.The microbial agent obtained according to the method of Example 2 was added to 0.5% by weight of the pig manure mixture and fermented for 4 days to determine the odor removal ability. As shown in Table 9, hydrogen sulfide, sulfur dioxide, ammonia, It was found that the volatile fatty acid content was greatly reduced. Odor incidence was examined by the sensory method. The sensory test is a method in which 10 inspectors are allowed to smell different treated manure and then calculate the average value based on the degree of odor occurrence.

항 목Item 첨가구Addition 무첨가구No furniture 초기Early 4일후4 days later 제거율(%)% Removal 악취정도*Odor level * 초기Early 4일후4 days later 제거율(%)% Removal 악취정도*Odor level * 분뇨중 암모니아(ppm)Ammonia in Manure (ppm) 112112 3838 66.166.1 4.64.6 112112 6161 45.545.5 7.07.0 분뇨중 황화수소(ppm)Hydrogen sulfide in manure (ppm) 119119 1717 85.785.7 119119 4949 58.858.8 분뇨중 휘발성 지방산 (mM)Volatile Fatty Acids in Manure (mM) 5656 1212 78.678.6 5656 3333 41.141.1

*악취정도: 1-2 냄새 거의 없음, 3-5 보통, 6-8 심한악취, 9-10 매우 심한 악취* Odor: almost 1-2 odors, 3-5 moderate, 6-8 severe odors, 9-10 very bad odors

상술한 바와 같이 본 발명에 의해 제조된 뮤커 속 미생물 및 뮤커 속 미생물을 포함하는 복합 미생물제를 가축사료 첨가제로 가축에게 급여할 경우 가축의 뚜렷한 생산성 향상 및 분뇨의 악취 발생 감소를 기대할 수 있어 농가 소득증대에 크게 기여할 수 있는 유용한 발명이다.As described above, when feeding the microorganisms comprising the mucker microorganism and the muker microorganism prepared by the present invention as livestock feed additives to the livestock, it is possible to expect a marked improvement in the productivity of the livestock and a reduction in the generation of odors of manure. It is a useful invention that can greatly contribute to.

Claims (10)

뮤커 속 곰팡이, 아스퍼질러스 속, 바실러스 속, 락토바실러스 속 및 사카로마이세스 속 균주와의 혼합물로 이루어진 균체배양액 혼합물 30 내지 60중량% 및 미생물 안정화형 부형제 40 내지 70중량%로 구성된 가축의 증체 및 축산 분뇨의 악취 발생 감소에 효과적인 가축사료 첨가용 미생물제.Enrichment of livestock consisting of 30 to 60% by weight of a cell culture mixture consisting of a mixture with the strains of the genus Muker fungus, Aspergillus, Bacillus, Lactobacillus and Saccharomyces and microorganism stabilized excipients 40 to 70% And microbial agent for the addition of livestock feed effective to reduce the occurrence of odor of livestock manure. 제 1항에 있어서, 뮤커 속 곰팡이가 뮤커 속 곰팡이 KFCC-11239인 것을 특징으로 하는 미생물제.The microorganism according to claim 1, wherein the fungus in the muker is fungus KFCC-11239. 제 1항에 있어서, 아스퍼질러스 속 균주가 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae) KFCC-60241이고, 바실러스 속 균주가 바실러스 리체니포미스(Bacillus licheniformis) KCTC 1030 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) KCTC-1666이며, 락토바실러스 속 균주가 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus) ATCC 4356 이고, 사카로마이세스 속 균주가 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) ATCC 9763인 것을 특징으로 하는 미생물제.The genus Aspergillus strain is Aspergillus oryzae KFCC-60241, and the strain Bacillus is Bacillus licheniformis KCTC 1030 and Bacillus subtilis KCTC. Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, and Saccharomyces strain Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763. The strain is Lactobacillus sp. 제 1항에 있어서, 미생물 안정화형 부형제가 질석, 밀기울, 대두박 및 맥반석을 포함하는 것을 특징으로 하는 미생물제.The microbial agent according to claim 1, wherein the microbial stabilizing excipient comprises vermiculite, bran, soybean meal and elvan. 뮤커 속 곰팡이 및 아스퍼질러스 속 미생물 배양용 배지로 글루코오스 1 내지 3중량%와 감자분말 0.1 내지 0.5중량%를 사용하고; 락토바실러스 속 미생물 배양용 배지로 효모추출물 0.1 내지 1.0중량%, 글루코오스 0.3 내지 1.0중량% 및 아세트산나트륨 0.1 내지 0.5중량%를 사용하며; 바실러스 속 미생물 배양용 배지로 대두박 0.5 내지 3중량%와 당밀 1 내지 5중량%를 사용하고; 효모 배양용 배지로 대두박 0.5 내지 3중량%, 당밀 0.1 내지 2.0중량% 및 글루코오스 0.5 내지 3중량%를 사용하여 각 미생물을 배양하는 단계; 질석, 밀기울, 대두박 및 맥반석을 포함하는 미생물 안정화형 부형제와 상기 미생물 배양액 혼합물을 혼합하는 단계; 및 이 혼합물을 저온건조하고 분쇄하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 가축 사료 첨가용 미생물제의 제조방법.1 to 3% by weight of glucose and 0.1 to 0.5% by weight of potato powder are used as a culture medium for culturing the fungus of the genus Muker and the genus Aspergillus; 0.1 to 1.0% by weight of yeast extract, 0.3 to 1.0% by weight of glucose and 0.1 to 0.5% by weight of sodium acetate are used as a medium for culturing the genus Lactobacillus; 0.5 to 3% by weight of soybean meal and 1 to 5% by weight of molasses are used as a medium for culturing Bacillus microorganisms; Culturing each microorganism using 0.5-3% by weight of soybean meal, 0.1-2.0% by molasses and 0.5-3% by weight of glucose as a yeast culture medium; Mixing said microbial culture mixture with a microbial stabilized excipient comprising vermiculite, bran, soybean meal and elvan; And low temperature drying and pulverizing the mixture. 제 5항에 있어서, 뮤커 속 곰팡이가 뮤커 속 곰팡이 KFCC-11239인 것을 특징으로 하는 제조방법.The method according to claim 5, wherein the fungus in the muker is fungus KFCC-11239. 제 5항에 있어서, 아스퍼질러스 속 균주가 아스퍼질러스 오리제(Aspergillus oryzae) KFCC-60241이고, 바실러스 속 균주가 바실러스 리체니포미스(Bacillus licheniformis) KCTC 1030 및 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) KCTC-1666이며, 락토바실러스 속 균주가 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus) ATCC 4356 이고, 사카로마이세스 속 균주가 사카로마이세스 세레비지에(Saccharomyces cerevisiae) ATCC 9763인 것을 특징으로 하는 제조방법.6. The genus Aspergillus strain is Aspergillus oryzae KFCC-60241, and the strain Bacillus is Bacillus licheniformis KCTC 1030 and Bacillus subtilis KCTC. Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Saccharomyces strain Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 . 뮤커 속 곰팡이 배양용 배지로 글루코오스 1 내지 3중량%와 감자분말 0.1 내지 0.5중량%를 사용하여 미생물을 배양하는 단계; 질석, 밀기울, 대두박 및 맥반석을 포함하는 미생물 안정화형 부형제와 상기 미생물 배양액 혼합물을 혼합하는 단계; 및 이 혼합물을 저온건조하고 분쇄하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 가축 사료 첨가용 미생물제의 제조방법.Culturing the microorganisms using 1 to 3% by weight of glucose and 0.1 to 0.5% by weight of potato powder as a medium for culturing fungi in muker; Mixing said microbial culture mixture with a microbial stabilized excipient comprising vermiculite, bran, soybean meal and elvan; And low temperature drying and pulverizing the mixture. 제 8항에 있어서, 뮤커 속 곰팡이가 뮤커 속 곰팡이 KFCC-11239인 것을 특징으로 하는 제조방법.9. The method according to claim 8, wherein the fungus of the muker is fungus KFCC-11239. 뮤커 속 곰팡이 KFCC-11239.Muker fungus KFCC-11239.
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