KR100438592B1

KR100438592B1 - 비브리오 불니피쿠스의 살균 조성물, 및 그 사용방법

Info

Publication number: KR100438592B1
Application number: KR10-2002-0061828A
Authority: KR
Inventors: 한양수; 박경제; 박순정; 양성렬; 이규호
Original assignee: 이규호; 양성렬; 박순정
Priority date: 2002-10-10
Filing date: 2002-10-10
Publication date: 2004-07-02
Also published as: KR20040032621A

Abstract

본 발명은 킬레이팅제, 바람직하게는 피틴산 또는 EDTA를 포함하는 비브리오 불니피쿠스의 살균 조성물 및 이의 사용방법에 관한 것으로서, 본 발명의 살균 조성물은 인체 및 환경에 무해하며, 효과적으로 비브리오 불니피쿠스를 사멸 또는 생존을 저해시킬 수 있어, 실제 자연환경조건(해양 양식장), 어패류와의 공존 조건 (전시/보관용 수족관), 또는 어패류의 저장 조건 (운송/보관용 저장소)에 유용하게 사용할 수 있다.

Description

비브리오 불니피쿠스의 살균 조성물, 및 그 사용방법{COMPOSITION FOR KILLING VIBRIO VULNIFICUS, AND USING METHOD THEREOF}

본 발명은 킬레이팅제를 포함하는 패혈증비브리오균의 살균 또는 제어용 조성물, 및 이의 사용방법에 관한 것으로서, 구체적으로는 실제 자연환경조건(해양 양식장), 어패류와의 공존 조건(전시/보관용 수족관), 또는 어패류의 저장 조건 (운송/보관용 저장소) 하에서 패혈증비브리오균 (비브리오 불니피쿠스;Vibrio vulnificus)을 효과적으로 제어/살균할 수 있는 방법에 관한 것이다.

비브리오 패혈증(Vibrio vulnificussepticemia)은 비브리오 불니피쿠스균(Vibrio vulnificus)의 감염에 의한 급성 패혈증으로서, 오염된 어패류를 생식하거나 오염된 바닷물이 상처난 피부에 접촉할 때 감염되며, 급성 발열, 오한, 혈압 저하, 복통, 구토, 설사 등의 증상이 동반되고 발열 후 36시간 정도 지나면 피부 병변의 발생등의 임상적 특성을 나타낸다.

현재 흔히 사용하고 있는 예방책으로는 어패류 취급시 주방기구는 용도별로 구분, 사용하고 차아염소산나트륨 또는 락스등으로 살균소독을 하고, 어패류 보관시에서는 5℃이하로 저온저장하고 섭취시에는 60℃이상으로 가열 처리하거나 수돗물에 깨끗이 씻은 후 섭취하는 것이다.

자외선을 이용하여 비브리오균을 포함하는 식중독 균을 모두 살균하는 방법이 대한민국 특허공개공보 제2000-029946호 및 대한민국 등록특허공보 제1999-0193221호에 기재되어 있다. 상기 대한민국 특허공고 제1999-0193221호에는 자외선 램프를 이용하여 횟집의 수족관이나 관상용 수족관의 물에서 발생되거나 물고기의 배설물 등에서 발생하는 균체들에 대해 물고기나 인체에 해가 없는 범위내에서 살균기능을 갖는 기기를 제공하여, 수족관에서 발생되는 대장균, 비브리오, 콜레라균 등 인체에 유해세균과 전염성 균체들을 사멸시키는 기능을 가지면서 점등시에 수족관 내에서 밝게 빛을 발하여 조명기능을 가지게 하는 장치를 제공하고 있다.

대한민국 등록특허공보 제2002-0339054호에는 식품의 위생상태를 나타내는 오염지표 세균 및 식중독 원인균들에 대해 탁월한 살균효과를 갖는 세틸피리디니엄 클로라이드로 이루어진 살균제와 그 살균제가 첨가된 세제가 개시되어 있다.

따라서, 환경 및 인체에 무해하면서, 비브리오균의 생존을 저해 또는 사멸시키는 살균제를 사용하여, 강력하고 근본적인 살균 기능을 제공하여 비브리오패혈증의 발생을 미리 예방하는 기능을 갖는 살균 조성물을 제공할 필요성이 있다.

상기와 같은 종래기술의 문제점을 극복하고자, 본 발명의 목적은 킬레이팅제를 포함하는 비브리오 불니피쿠스의 살균 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 킬레이팅제를 포함하는 비브리오 불니피쿠스의 살균 조성물을 이용하여 비브리오 불니피쿠스를 살균하는 방법에 관한 것이다.

도 1은 pH4.0 조건 하에서 피틴산의 비브리오 불니피쿠스 지수기 세포에 대한 사멸효과를 나타내는 그래프이다.

도 2는 pH4.0 조건 하에서 피틴산의 비브리오 불니피쿠스 정체기 세포에 대한 사멸효과를 나타내는 그래프이다.

도 3은 pH4.0 조건 하에서 EDTA의 비브리오 불니피쿠스 정체기 세포에 대한 사멸효과를 나타내는 그래프이다.

도 4는 pH8.0 조건 하에서 EDTA의 비브리오 불니피쿠스에 대한 사멸효과를 나타내는 그래프이다.

도 5는 마이크로코즘(Microcosm)의 설치 예를 나타내는 사진이다.

도 6은 천연해수 조건 하에서 EDTA의 비브리오 불니피쿠스에 대한 사멸효과를 나타내는 그래프이다.

도 7은 조개 내부에 존재하는 비브리오 불니피쿠스에 대한 EDTA의 사멸효과를 나타내는 그래프이다.

도 8은 EDTA에 미노출 또는 노출된 비브리오 불니피쿠스에 의해 감염된 조개로부터 배출되는 비브리오 불니피쿠스를 나타내는 도면이다.

도 9는 조개 내부에서 배출된 비브리오 불니피쿠스의 사멸률을 나타내는 그래프이다.

도 10은 바다 갯벌-마이크로코즘 내에서의 비브리오 불니피쿠스의 생존도를 나타내는 그래프이다.

상기와 같은 기술적 과제를 달성하고자, 본 발명은 킬레이팅제(chelating agent)를 포함하는 비브리오 불니피쿠스(Vibrio vulnificus)의 생존 저해 조성물 및 이의 사용방법을 제공한다.

본 발명에 따른 살균 조성물을 이용함으로써 환경에 무해하며, 실제 자연환경조건 (해양 양식장), 어패류와의 공존 조건 (전시/보관용 수족관), 또는 어패류의 저장 조건 (운송/보관용 저장소) 하에서 비브리오 불니피쿠스를 효과적으로 제어/살균할 수 있는 것이다.

이하에서 본 발명을 자세히 설명하고자 한다.

본 발명은 킬레이팅제를 이용한 비브리오 불니피쿠스의 살균조성물을 제공하며, 본 발명에 사용가능한 킬레이팅제는 특별히 제한하지 않는다. 패혈증비브리오균은 그들의 생존 및 병원성의 유지를 위하여 철을 비롯한 금속류의 존재를 필수적으로 요구하고 있다. 따라서 본 발명에서는 인체에 무해하다고 알려져 있는 화학물질 중에서 비브리오균의 성장을 제어 또는 사멸할 수 있는 물질을 선정하여 사용하는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 피틴산 또는 EDTA이다.

본 발명의 일례에서 피틴산을 유효성분을 포함하는 살균 조성물의 경우에는, pH 2-7범위, 바람직하게는 pH 3-5범위, 더욱 바람직하게는 약 pH 4정도이며, 피틴산의 농도는 5mM 이상의 농도, 바람직하게는 5-50 mM범위의 농도로 포함하는 비브리오 불니피쿠스의 살균 조성물이다. 본 발명에 따른 조성물은 바람직하게는 식염수 (0.8% NaCl 용액) 또는 물에 배합하여 최종농도가 5 mM 이상이 되고 pH 2-7 범위가 되도록 하여 사용할 수 있다. 또한, 상기 피틴산을 포함하는 살균 조성물을 어패류의 세척과정 중 또는 저장과정 전에 사용하면 더욱 바람직하다.

피틴산은 식물체 중에 함유되어 있으며, 특히 씨앗이나 곡물의 외피 및 씨눈에 함유되어 있는 천연물질로서 하기 화학식 1과 같은 구조를 갖는다.

이러한 피틴산은 1996년 국내 식품첨가물 공정서에 천연식품 첨가물 제91호로 지정되었으며, 인간이 유사이래 매일 식생활에서 섭취하는 곡물에 많이 함유되어 있어 독성이 없다.

피틴산은 종래 금속이론에 대하여 킬레이팅제로 작용하여, 항산화제로 이용되거나 철, 주석, 알루미늄 합금, 납등의 금속표면에 불용성의 조밀한 킬레이트 막을 형성하여 강력한 항부식제로서 유용하게 이용되었으며, pH 4-9의 범위에서 강력한 완충작용을 나타내고, 또한 pH 6-8의 범위내에서 강력한 발효촉진제로서 이용되는 등 다양한 용도로 이용되어 왔다.

본 발명의 또다른 일례에서 EDTA를 유효성분으로 포함하는 살균 조성물의 경우에는, 상기 EDTA를 pH 6-9 조건에서 5-10 mM 농도로 포함하는 비브리오 불니피쿠스의 살균 조성물을 제공하는 것이 바람직하다. 상기 EDTA을 포함하는 살균 조성물은 수족관 내 자연해수에 직접적인 투여가 가능하다.

본 발명에 따른 조성물은 개방 시스템이라 할 수 있는 가두리 양식장에 직접적으로 투여하는가, 아니면 보관장소(예를 들면, 수족관) 또는 처리과정(예를 들면 세척/저장과정)등 폐쇄 시스템에 적용할 수 있다. 본 발명자들은 폐쇄 시스템에 적용이 보다 환경 안정적이며 경제적인 선택이며, 적용 시 사용하는 유효성분의 적정농도의 결정은 두 가지 화합물에 대한 최소 저해농도(minimum inhibitory concentration, MIC) 실험 및 생존실험 결과에 기초하였다. 또한, 살균 조성물의 적용은 크게 두 가지 방향으로 사용할 수 있을 것이다. EDTA의 경우, 수족관 내 자연해수(pH8.3)에 최종농도가 5-10mM 정도로서 직접적인 투여하는 것이 바람직하며, 피틴산의 경우, 피틴산의 최종농도가 5mM-50mM 정도인 pH 3-5 범위의 용액을 세척과정 중 또는 저장과정 전에 도입하면 제어효과가 더욱 크다.

하기 예시적인 실시예를 들어 본 발명을 더욱 자세히 설명할 것이나, 본 발명의 보호범위가 하기 실시예로 한정되는 의도는 아니다.

실시예 1: 비브리오 불니피쿠스에 대한 사멸효과

패혈증비브리오균에 대한 사멸정도를 조사하기 위하여, LBS에서 성장중인 지수기 및 정체기 상태의 비브리오 불니피쿠스 세포를 pH 4.0으로 적정된 EDTA(Sigma, Co.) 용액 및 피틴산(Sigma, Co.) 용액에 각각 접종하고, 적당한 시간별로 희석한 후 LBS 아가 플레이트에 도말하여 CFU를 측정하여 그 생존도를 조사하였다. 실험결과를 도 1 내지 3에 나타냈다. 도 1은 지수기 세포의 비브리오 불니피쿠스에 대해 피틴산 용액(0, 10, 25, 50 mM)을 처리한 결과이고, 도 2는 영양 고갈상태인 정체기 세포의 비브리오 불니피쿠스에 대해 피틴산 용액을 처리한 결과이다. 대조구는 세균이 피틴산이 없는 조건(0mM)에서의 생존함을 의미한다.

pH4로 적정된 피틴산 용액을 사용한 결과 사멸효과는 농도 의존적이었으며(0 - 50mM의 피틴산), 약 50mM의 미만의 농도 하에서는 비브리오 불니피쿠스의 성장 상태와 무관하게 효과적인 사멸을 나타내었다.

도 3은 EDTA을 pH 4 조건 하에서 정체기 비브리오 불리피쿠스에 대해 EDTA 용액을(5, 25mM)을 처리한 사멸효과를 나타내는 그래프이다.

실시예 2: 해수에 대한 피틴산의 효과

인공해수실험을 위하여, 실제 바닷물의 경우 그 산성도는 평균 8.3으로 알려져 있다. 따라서 중성-약알칼리성 조건 하에서 피틴산의 패혈증비브리오균 사멸효과를 살펴보았으나 pH 7.5의 인공해수 (0.4M NaCl, 0.1M MgSO₄, 0.02M CaCl₂, 0.02M KCl) 또는 식염수 (0.8% NaCl 용액)에서 피틴산 용액 10, 25, 50mM를 첨가할 경우, 첨가하지 않은 대조군과 비교하여 아무런 사멸 효과를 보여주지 않았다.

자연해수실험을 위하여, 자연해수(서해에서 채취한 바닷물, pH8.3)에 최종농도가 0.1~50 mM의 피틴산을 첨가하여 패혈증비브리오균 사멸효과를 보고자 하였다.그러나 피틴산의 첨가는 해수내 염분이온들의 침전을 야기시켰으며 침전물의 양은 첨가된 피틴산의 양과 비례하였다.

따라서 자연해수 내에 피틴산을 첨가하고자 한 실험은 위의 두 가지 이유, 즉, 해수 산성도에서는 킬레이팅제 역할을 제대로 수행할 수 없으며, 해수에 첨가 시 해수 내 염분들의 침전으로 인하여 그 사용이 불가능하였다. 그러나 최종농도가 5mM 정도인 pH 4.0의 피틴산 용액을 세척과정 중 또는 저장과정 전에 도입하면 제어효과가 우수할 것이라고 판단된다.

실시예 3: 발광세균 독성검사 시스템을 이용한 독성 테스트

EDTA(Sigma Co.)의 독성 여부 및 그 독성 정도를 정확히 판단하기 위하여, 발광세균을 이용한 독성검사 시스템에 이를 적용시켜 보았다(표 1). 지수기 상태의 발광세균과 발광효소의 기질인 알데하이드를 0.01%의 최종농도로 섞은 후 30초 간격으로 희석된 EDTA를 0, 10, 25, 50mM 최종종도가 되도록 주입하고 5초간 혼합시켰다. 5분, 15분, 30분 간격으로 발광의 정도 (RLU)를 측정하였으며, 측정된 RLU로부터 50%의 발광을 감소시킬 수 있는 농도 값(EC₅₀)을 계산하였다. 계산을 위해, 그래프 상에서 X축은 log(농도), Y축은 logΓ라는 값 [독성물질이 유입되었을 때 발광하는 양과 유실되는 양의 비에 log를 취한 값]을 취하여 logΓ = 0일 때의 X값을 구하면 이것이 EC₅₀가 된다. 여기서 logΓ는 {(C₀- C_A)/C_A} [C₀: 농도가 0 mg/L 때의 RLU (%) 그리고 C_A: 농도가 A mg/L 때의 RLU (%)]에 log를 취한 값이다.

EDTA의 발광세균 YH9에 대한 독성정도 검사결과

EDTA농도(mM)	%(relative light unit)
	5분	15분	30분
0	100.0	100.0	100.0
10	70.0	85.7	134.8
25	49.9	42.8	60.9
50	18.6	4.51	38.8

그 결과, EDTA를 첨가하지 않은 대조군 대비 발광의 정도를 50% 감소시키는 EDTA의 5, 15, 30분 노출 시 유효농도(EC₅₀)는 각 19.9, 19.5, 35.2mM로 나타났다. 그러나, 이 독성검사는 세균을 사용한 바이오분석법이므로 인체에 대한 영향은 다를 수도 있다. 이러한 결과를 기반으로, 아래의 microcosm 실험에서 실제 적용할 수 있는 EDTA의 농도로서 EC₅₀값의 반 정도인 10 mM을 사용하였다.

실시예 4: EDTA의 패혈증비브리오균에 대한 사멸효과

4-1: 최소저해농도(MIC) 조사

단백질 성분 등이 다량 함유되어 매우 높은 영양상태인 LBS 배지 및 포도당이 첨가된 인공해수 배지 (ASW-0.05% 글루코스) 내의 비브리오 불니피쿠스에 다양한 농도의 EDTA를 노출시킨 후, 각각의 성장 정도를 600nm 파장에서 OD(optical density)를 측정하여 EDTA의 영향을 비교하면서 MIC를 결정하였다.

EDTA 농도에 따른 패혈증비브리오균 성장 저해효과

EDTA 농도(mM)	OD(600nm(18시간 배양후)
17.5	1.4	0.550
8.8	2.0	0.867
4.4	3.29	0.545
2.2	3.87	`0.654
0	4.28	0.731

그 결과, 아래의 표와 같이 17.5mM의 EDTA는 비브리오 불니피쿠스의 성장을 LBS 영양배지에서는 67.3% 그리고 ASW-글루코스 배지에서는 24.8% 저해시켰다.

4-2: EDTA의 패혈증비브리오균에 대한 사멸정도 조사

실제 바닷물의 약알칼리성 조건 하에서 EDTA(0, 10, 25, 50 mM)의 패혈증비브리오균 사멸효과를 다음과 같이 조사하였다. LBS에서 성장중인 지수기 상태의 비브리오 불니피쿠스 세포를 해당 EDTA(Sigma, Co.)농도가 포함된 인공해수 (0.4M NaCl, 0.1M MgSO₄, 0.02M CaCl₂, 0.02M KCl, pH 8.0)각각 접종하고, 적당한 시간 별로 희석한 후 LBS 아가 플레이트에 도말하여 CFU를 측정하여 그 생존도를 조사하였으며 그 결과를 도 4에 나타냈다.

그 결과, pH 8.0로 적정된 인공해수에서 EDTA는 pH4에서와 같이 강력한 킬레이팅제 기능을 보이지는 않았으나, 비교적 높은 사멸 효과를 보여주지 않았다.

실시예 5: microcosm내의 비브리오균에 대한 EDTA 사멸효과

5-1: 바다-microcosm 내에서의 패혈증비브리오균의 생존도 조사

시험관이나 플라스크를 이용한 경우 보이는 "bottle effect" 등을 어느 정도 줄이고, 비교적 실제 자연환경을 모사하는 microcosm 설치를 위하여 도 5와 같이 수족관을 설치 운영하였다. 각 수족관은 서해안에서 채취한 해수 약 10-20L로 채웠으며, 경우에 따라 현장에서 얻은 조개 및 갯벌을 적당히 넣어주었다. 모든 microcosm 실험은 duplicate setting으로 수행하였다.

패혈증비브리오균은V. vulnificusATCC29307 rif⁺(항생제인 rifampicin에 내성을 갖는 spontaneous mutant 균주)를 LBS 배지 내 지수기 상태의 것을 멸균된 해수로 세척한 후 microcosm에 약 10⁶-10⁷cell/ml이 되도록 접종하였다. 온도는 25(+2)℃를 유지하였고 통기를 위하여 계속적으로 공기를 투입하였다. 설치 후 적당 시간에 해수, 조개 및 갯벌의 aliquot를 얻었으며 이를 멸균된 해수로 적당히 희석한 후, 100 μg/ml 리팜피신 함유하는 LBS 아가 플레이트에 도말하였다. 30℃에 하루 배양한 후 이 배지에서 성장하는, 즉 리팜피신에 내성을 보이는 패혈증비브리오균의 수를 정량하였다. 본 실험을 위한 기초 실험 결과, 자연 환경에서 갓 채취된 (즉, 인위적인 패혈증비브리오균의 접종 이전의) 해수, 조개 및 갯벌에는 리팜피신에 내성을 보이는 패혈증비브리오균은 탐지되지 않았다.

5-2: 자연해수내 비브리온균에 대한 사멸효과

자연해수 내의 패혈증비브리오균도 실험실 내 0.8% NaCl 용액 또는 인공해수에서 보였던 EDTA의 사멸효과가 있는지를 해수만을 포함하는 microcosm 설치하여 조사하였다. 30분 그리고 20시간 동안 EDTA 노출된 후, 패혈증비브리오균수의 변화를 측정하였고, 그 결과를 도 6에 나타냈다. 도 6은 천연해수 조건 하에서 EDTA의 패혈증비브리오균의 사멸효과를 나타내는 그래프이다.

그 결과, EDTA를 첨가하지 않은 자연해수의 경우 초기 농도인 2.8X10⁶cell/ml로부터 1 ~ 3X10⁷cell/ml까지 그 수가 증가하였다. 그러나 10mM EDTA에 노출된 경우, 30분에는 이미 3 ~ 12X10⁴CFU/ml로 감소하며, 20시간에는 그 수가 탐지한계점 (10 CFU/ml)이하로 급격히 감소하였다. 따라서 천연해수에서도 EDTA의 패혈증비브리오균의 사멸 효과는 대단히 우수한 것으로 나타났다.

5-3: 조개가 첨가된 microcosm 내에서의 패혈증비브리오균의 생존도 조사

조개를 첨가한 해수 microcosm 내에서의 EDTA의 영향을 알아보았다. 10L의 해수 (EDTA가 첨가되지 않은 수족관 2개 그리고 EDTA가 10mM로 첨가된 수족관 2개) 내에 각각 20마리의 조개 (바지락)를 넣은 후, 약 2 ~ 3 X 10⁷cell/ml의 패혈증비브리오균을 접종한 후 3 그리고 7 시간째에 바지락 내부에 존재하는 패혈증비브리오균수를 조사하였으며 그 결과를 도 7에 나타냈다. 이 결과 EDTA처리한 경우, 각 28.5배 그리고 1.9배의 차이를 나타내었다. 그러나 시간이 흐를수록 EDTA의 지속적인 사멸영향은 점점 없어짐을 보였다.

5-4: EDTA 미노출- 또는 노출-비브리오 불니피쿠스 감염 조개로부터 배출되는 패혈증비브리오균(실험실)

한 세트는 EDTA 처리된 비브리오 불니피쿠스 세포, 다른 세트는 EDTA에 노출되지 않은 대조구 비브리오 불니피쿠스 세포를 포함하는 두 세트의 비브리오균에 의하여 41 시간 동안 감염된 조개를 새로운 자연해수에 넣은 후, 이로부터 배출되는 각 비브리오 균수를 비교하였으며, 그 결과를 도 8에 나타냈다. 본 실험에 사용된 바지락은 EDTA 처리 비브리오 불니피쿠스 감염 조개는 3.7 ~ 4.8X10⁶cell/gr, 그리고 EDTA 미처리 비브리오 불니피쿠스 감염 조개는 4.2 ~ 5.4X10⁶cell/gr의 패혈증비브리오균이 신선한 해수로 옮길 시 존재하였다.

도 8에 나타낸 바와 같이, 초기 조개 내 비브리오 불니피쿠스 균수는 큰 차이가 없었으나, 해수로 배출되는 비브리오 불니피쿠스 균수는 6시간부터 약 2배 정도의 차이를 보이고 있었다. 이는 도 7에서와 같이 조개 내 패혈증비브리오균은 EDTA의 영향을 받으며, 아울러 이러한 세균들이 주위 바닷물에 배출되는 양 또한 EDTA의 영향을 받음을 보여주는 결과이다.

5-5: 감염된 조개로부터 배출된 브리오균의 EDTA에 대한 반응(천연해수)

본 실시예의 목적은 실험실(즉, LBS라는 영양배지) 내에서 배양된 비브리오 불니피쿠스가 EDTA에 대하여 민감한 반응을 보였는데, 자연계의 실제 생리적 상태로서 존재하는 경우에도 똑같은 사멸효과를 보이는 가를 조사하기 위함이었다.

본 실험을 위하여, 2일간 비브리오 불니피쿠스에 감염시킨 조개 (조개 당 4 ~5.4X10⁶cell/gr의 패혈증비브리오균을 포함하는 조개)를 천연해수 및 10mM EDTA를 함유한 천연해수에 약 1시간 동안 방치한 다음, 각 microcosm 내 조개는 제거하고 해수 내 존재하는 패혈증비브리오균의 수를 정량하였으며, 실험결과를 도 9에 나타냈다.

도 9에 나타낸 바와 같이, 천연해수 내의 조개 내부에서 배출된 패혈증비브리오균도 주변 바닷물에 첨가된 EDTA에 의하여 빠른 사멸률을 보여주었다.

5-6: 바다-갯벌-microcosm 내에서의 패혈증비브리오균의 생존도 조사

해수 10L에 서해안 갯벌 2.1kg을 넣은 후, 패혈증비브리오균을 접종하였다. 위의 microcosm 실험에서와 같이 한 세트(2개의 수족관: 2.8 ~ 4.0X10⁷/cells)에는 EDTA를 최종농도가 10mM이 되도록 하고, 그리고 다른 세트(2개의 수족관: 3.0 ~ 4.6X10⁷/cells)에는 EDTA 처리를 하지 않은 상태로 배양하였다.

시간 별로 바닷물 및 갯벌을 채취한 후, 패혈증비브리오균수의 변화를 측정하였으며, 그 결과를 도 10에 나타냈다. 도 10은 바다-갯벌-microcosm 내에서의 패혈증비브리오균의 생존도를 나타내는 그래프이다. 그 결과 EDTA 미처리 microcosm의 경우, 갯벌 내 비브리오 불니피쿠스의 수는 초기 접종 수 대비 82-112%로서 초기 균수를 유지하였다. 그러나 10mM EDTA 처리 microcosm의 경우, 42시간 째 갯벌 내 비브리오 불니피쿠스의 수는 초기 접종 수 대비 33.8-62.5%로 약간 감소함을 나타내었다.

본 발명은 킬레이팅제를 포함하는 패혈증비브리오균의 살균 또는 제어용 조성물, 및 이의 사용방법에 관한 것으로서, 구체적으로는 실제 자연환경조건 (해양 양식장), 어패류와의 공존 조건 (전시/보관용 수족관), 또는 어패류의 저장 조건 (운송/보관용 저장소) 하에서 패혈증비브리오균 (비브리오 불니피쿠스;Vibrio vulnificus)을 효과적으로 제어/살균할 수 있는 조성물 및 이의 사용방법을 제공하는 장점이 있다.

Claims

킬레이팅제(chelating agent)를 유효성분으로 포함하는, 비브리오 불니피쿠스(Vibrio vulnificus)의 살균 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 비브리오 불니피쿠스는 해수, 어패류 또는 갯벌에 존재하는 것인 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 킬레이팅제가 피틴산, 또는 EDTA인 조성물.
제 3 항에 있어서, 상기 피틴산을 포함하는 조성물은 pH 3-5범위이고, 5-50 mM 농도의 피틴산을 포함하는 조성물.
제 3 항에 있어서, 상기 EDTA를 pH 6-9 범위에서 5-10 mM 농도로 포함하는 조성물.
제 1항 내지 5항중 어느 한항에 따른 살균 조성물을 사용하여 비브리오 불니피쿠스(Vibrio vulnificus)를 사멸하는 방법.
제 6 항에 있어서, 상기 킬레이팅제로서 피틴산을 어패류와의 공존 조건, 또는 어패류의 저장 조건에서 사용하는 비브리오 불니피쿠스를 사멸하는 방법.
제 6 항에 있어서, 상기 킬레이팅제로서 EDTA를 해양 양식장 또는 해수에 사용하는 비브리오 불니피쿠스를 사멸하는 방법.