KR100389132B1 - Mixed extracted substance having anti-oxidant activity from aralia and rubus - Google Patents

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Abstract

본 발명은 두릅과 산딸기의 추출물로서 강력한 항산화작용이 있어 노화로 인한 백내장 등의 질환을 예방, 진행의 지연 및 치료의 효과가 있는 조성물에 관한 것으로, 두릅과 산딸기를 물이나 알코올로 추출한다. 이 추출물은 기존에 알려져 있는 다른 항산화 물질들과 혼합하여 사용될 수 있으며, 마이오-이노시톨 또는 타우린을 포함하여 백내장 치료의 상승 효과를 얻을 수 있다. 또한, 두릅과 산딸기 추출물을 유효 성분으로 포함하는 음료에 의해 음용을 가능하게 함으로써 노화에 따르는 여러 질병에 대해 예방, 지연 및 치료의 효과를 얻을 수 있다.The present invention relates to a composition that has a powerful antioxidant activity as an extract of aralia and raspberries, which has the effect of preventing, delaying, and treating diseases such as cataracts due to aging, and extracting rasp and raspberries with water or alcohol. This extract can be used in admixture with other known antioxidants, including myo-inositol or taurine to achieve synergistic effects in cataract treatment. In addition, it is possible to obtain a drink by the drink containing the extract of arsame and raspberry as an active ingredient, it is possible to obtain the effects of prevention, delay and treatment for various diseases caused by aging.

Description

두릅과 산딸기를 용매로 추출한 항산화 효과를 가진 추출물{MIXED EXTRACTED SUBSTANCE HAVING ANTI-OXIDANT ACTIVITY FROM ARALIA AND RUBUS}MIXED EXTRACTED SUBSTANCE HAVING ANTI-OXIDANT ACTIVITY FROM ARALIA AND RUBUS}

본 발명은 두릅과 산딸기를 용매로 추출한 항산화 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 두릅과 산딸기를 물 또는 알코올로 추출하여 이 추출물을 동물에 투여함으로써 세포막의 산화를 방지하거나 생체 내에서 일어나는 여러 가지 산화반응에 관여하여 과도한 산화반응을 억제하여 건강을 유지하는데 도움을 준다. 한 예로생체 내에서 과도하게 생성되는 과산화물을 효과적으로 제거함으로써 백내장과 같은 질환을 예방하거나 치료효과를 나타낸다.The present invention relates to an antioxidant composition in which arbor and raspberries are extracted with a solvent, and more particularly, by extracting arbor and raspberries with water or alcohol, the extract is administered to an animal to prevent oxidation of cell membranes or various oxidations occurring in vivo. It participates in the reaction and helps to maintain the health by suppressing excessive oxidation. For example, by effectively removing the excess peroxide produced in the living body to prevent or treat diseases such as cataracts.

생체는 많은 양의 불포화지방산을 함유하고 있는데, 불포화지방산은 세포막의 필수적인 구조를 형성하며 생물이 환경에 적응할 수 있도록 유연성을 갖게 한다. 그러나 불포화지방산은 산소 대사과정에서 나오는 유리기나 과산화 화학 반응에 의해 쉽게 손상되어 노화를 촉진시키며 결국 죽음에 이르게 된다고 알려져 있다. 일반적으로 생체를 이루는 세포막의 40-50%는 지질로 구성되어 있는데 예외적으로 신경돌기를 이루는 마이엘린은 약 80%가 지질로 이루어져 있고 미토콘드리아의 안쪽 막은 약 20%가 지질로 구성되어 있다. 지질 중에서 50-85%는 포스포글리세라이드 (phosphoglycerides)로서 글리세롤분자에 두 개의 지방산 사슬이 에스테르결합에 의해 이루어진 구조이다. 모든 생체막은 지질의 이중막으로 이루어져 안쪽은 소수성이고 바깥쪽은 친수성을 나타낸다. 지질의 이중막은 매우 안정한 구조를 이루고 있으며 온도에 따라 유동성에 변화가 있다.The living body contains a large amount of unsaturated fatty acids, which form the essential structure of the cell membrane and give the organisms the flexibility to adapt to the environment. Unsaturated fatty acids, however, are known to be easily damaged by free radicals and peroxide chemical reactions in the process of oxygen metabolism, which promotes aging and eventually death. In general, 40-50% of the cell membrane of the living body is composed of lipids, except for myelin neurite process is about 80% of the lipid and the inner membrane of the mitochondria is about 20% of the lipid. 50-85% of the lipids are phosphoglycerides, in which two fatty acid chains are formed by ester bonds to glycerol molecules. All biofilms consist of lipid bilayers that show hydrophobicity on the inside and hydrophilic on the outside. The lipid bilayer has a very stable structure and changes in fluidity with temperature.

세포막을 이루는 많은 양의 불포화지방산은 미토콘드리아의 안쪽 막에서 호흡 연쇄과정 중 베타 산화과정 (oxidation)에 의해 아세틸 co A (acetyl coemzyme A)로 대사된다. 이때 많은 양의 불포화지방산의 과산화물과 반응성이 강한 유리 라디칼들이 생성되는데 미토콘드리아 안쪽 막의 낮은 지질 함량이 불포화지방산의 과산화물과 유리 라디칼에 대해 저항성을 갖게하는 중요한 요인이다.The large amount of unsaturated fatty acids that make up the cell membrane is metabolized to acetyl co A (acetyl coemzyme A) by the beta oxidation during the respiratory chain in the inner membrane of the mitochondria. In this case, free radicals that are highly reactive with a large amount of peroxides of unsaturated fatty acids are generated, and the low lipid content of the inner membrane of the mitochondria is an important factor for making resistance to peroxides and free radicals of unsaturated fatty acids.

호흡 연쇄 반응은 치토크롬 효소계를 매개로 하여 일어나는 효소반응으로 산소를 물로 환원하는 일련의 전자 전달과정이다. 이러한 과정에서 생성되는 여러 물질중 이다. 그러나 비정상적인 유리기 반응 (free-radical reaction)에 의해 불포화지방산이 파괴된다. 호흡 연쇄 반응에서 가장 파괴적인 과정은 산소가 별도의 전자 (extra electron)를 획득하여 수퍼옥사이드 음이온 라디칼 (superoxide anion radical)이 생성되는 과정이다. 미토콘드리아에서 생성되는 대부분의 수퍼옥사이드는 SOD(superoxide dismutase)라는 효소에 의해 효과적으로 파괴되지만, 일부가 물과 반응하여 과산화수소 (hydrogen peroxide, H2O2)를 생성한다. 이렇게 형성된 과산화수소는 정상적인 상태에서도 미토콘드리아의 기질 내부에 높은 농도로 존재한다는 것이 밝혀졌다. 이 과산화수소는 기질 내에 존재하는 카탈라제 (catalase)라는 효소에 의해 1차적으로 방어된다. 그러나 이 방어체계는 산화 스트레스 (oxygen stress)하에서는 한계가 있어 산화 스트레스에 의해 신생아의 시신경이 파괴되기도 한다는 사실이 밝혀졌다.The respiratory chain reaction is a series of electron transfer processes that reduce oxygen to water by enzymatic reactions that occur through the chitochrome enzyme system. Among the various substances produced in this process. However, unsaturated fatty acids are destroyed by abnormal free-radical reactions. The most destructive process in the respiratory chain reaction is the process in which oxygen acquires extra electrons to produce superoxide anion radicals. Most superoxides produced in mitochondria are effectively destroyed by enzymes called superoxide dismutases (SODs), but some react with water to produce hydrogen peroxide (H 2 O 2 ). The hydrogen peroxide thus formed was found to exist in high concentrations inside the substrate of the mitochondria even under normal conditions. This hydrogen peroxide is primarily defended by an enzyme called catalase present in the substrate. However, it has been found that this defense system is limited under oxygen stress, and that the optic nerve of the newborn may be destroyed by oxidative stress.

불포화지방산 과산화물들은 독성이 매우 강하고 생체 시스템에 손상을 준다.최근의 연구에 따르면 지질 과산화물들은 눈의 노화에서 광범위한 역할을 담당하여 렌즈의 불투명, 투과성 (permeability), 백내장 형성을 촉진하는 것으로 알려졌다. 또한 지질 과산화물은 DNA를 파괴하고, 뇌신경의 리포푸신 (lipofuscin)을 증가시켜 뇌신경 기능을 저하시키는 것으로 보고되었다. 이런 현상은 신경의 파괴를 유발하여 신경세포를 감소시키고, 바튼병 (Batten's disease: 유년기 흑내장성 가족성 치매), 아밀로이도시스 (amyloidosis: 유전분증), 알츠하이머 병, 간 섬유화, 간염, 간경화, 결핵, 진통제에 의한 간과 신장의 변화 등과도 관계가 있다. 지질 과산과물들은 세포막의 결합력을 저하시키고, 막의 유동성과 탄력성을 감소시킨다는 점이 밝혀졌으며, 이 물질들이 발암물질이며, 동맥경화나 심장질환, 위궤양, 소화기 질환, 위암, 뇌연화증과도 관련이 있는 것도 밝혀졌다.Unsaturated fatty acid peroxides are extremely toxic and damage the biological system. Recent studies have shown that lipid peroxides play a broad role in eye aging, promoting lens opacity, permeability and cataract formation. It has also been reported that lipid peroxides degrade DNA and increase brain nerve lipofuscin, which decreases brain nerve function. This can cause nerve breakdown, reducing nerve cells, Batten's disease, childhood amyloidosis, amyloidosis, Alzheimer's disease, liver fibrosis, hepatitis, cirrhosis, tuberculosis It is also related to changes in liver and kidney caused by painkillers. Lipid peroxides have been shown to reduce cell membrane binding capacity, decrease membrane fluidity and elasticity, and these are carcinogens and have been linked to atherosclerosis, heart disease, gastric ulcers, digestive diseases, gastric cancer, and encephalomalacia. lost.

일반적으로 발암물질들은 반응성이 큰 산소 (reactive oxygen)의 생성을 촉진하며 과산화물과 같은 유리기를 발생시킨다. 생체 내에서 발생하는 과도한 유리기들은 생체에 산화적 스트레스로 작용하여 암이나 당뇨, 뇌질환, 동맥경화, 백내장과 같은 노화성 질병을 일으키는 주원인으로 작용하고 있다. 따라서 이런 반응을 저해하는 항산화 물질들은 암을 비롯한 노인성 질환의 진행을 억제한다고 알려져 있다.Carcinogens generally promote the production of reactive oxygen and generate free radicals such as peroxides. Excess free radicals that occur in vivo act as oxidative stress on the living body, leading to aging diseases such as cancer, diabetes, brain diseases, arteriosclerosis, and cataracts. Therefore, antioxidants that inhibit this response are known to inhibit the progression of senile diseases, including cancer.

생체의 지질 과산화물에 대한 방어체계는 상당히 정교하고 효율적인 체제를 이루고 있다. 이러한 방어 체계는 세포 내에 존재하는 해독 효소들과 항산화 물질들, 그리고 체외로부터 유입되는 항산화 물질들간의 미묘한 균형에 의해 유지되고 있다.The defense against lipid peroxides in living organisms is quite sophisticated and efficient. This defense is maintained by a delicate balance between detoxifying enzymes and antioxidants present in cells and antioxidants coming from the body.

항산화 물질들을 효과적으로 사용하여 노인성질환의 발생을 지연시키는 연구들이 활발하게 진행되고 있는 가운데, 비타민 C, 비타민 E, 글루타치온(glutathione), 카탈린(catalin), 바이네이팅(baineiting), 카타크롬-OFTAN (catachrome-OFTAN), 비타-요두롤(Vita-iodurol), 퀴낙스(quinax) 등의 항산화 물질들은 백내장 치료제로 사용되고 있다. 그러나, 이들 화합물 중에는 상당수의 물질이 발암성이 있는 것으로 의심되고 있고, 오심과 같은 부작용을 일으키며 간과 같이 인체의 장기에 부작용이 있는 것도 보고되고 있다.There are active studies to delay the development of senile diseases by using antioxidants effectively. Vitamin C, vitamin E, glutathione, catalin, baineiting and catachrome-OFTAN ( Antioxidants such as catachrome-OFTAN, Vita-iodurol and quinax have been used to treat cataracts. However, many of these compounds are suspected to be carcinogenic, causing side effects such as nausea, and side effects such as liver have been reported.

항산화제는 지방이나 지방 함유 식품의 자동산화를 방지하고 세포의 노화를 억제하는 기능을 가진 물질로서 그 이용 범위가 매우 넓다. 항산화제는 그 기능에 따라 유리 라디칼 저해제 (free radical inhibitor), 금속제거제 (metal scavenger), 과산화물 분해제 (peroxide decomposer), 상승제 (synergist), 산소 결합 억제제 (superoxide dismutase) 등으로 구분되고 있다. 현재는 항산화제를 식품 첨가물로 많이 사용하고 있는데 이에는 BHA (t-butyl hydroxy anisole)나 BHT (t-butyl hydroxy toluene)와 같은 페놀(phenol)계 항산화제가 있다. 그러나 이런 물질들을 하루에 50mg/kg 이상 섭취 하면 생체 효소 및 지방의 변화로 암이 유발될 가능성이 높은 것으로 알려져 있고, 간에도 손상을 입힌다고 보고된 바 있다. 따라서 합성 항산화제를 대신하며 인체에 해롭지 않은 천연 항산화제의 발견은 매우 중요한 과제라고 할 수 있다.Antioxidants are substances that have the function of preventing the automatic oxidation of fats or fat-containing foods and inhibiting the aging of cells. Antioxidants are classified into free radical inhibitors, metal scavengers, peroxide decomposers, synergists, and superoxide dismutases. Currently, antioxidants are widely used as food additives, including phenolic antioxidants such as BHA (t-butyl hydroxy anisole) and BHT (t-butyl hydroxy toluene). However, ingesting more than 50mg / kg of these substances a day is known to cause cancer due to changes in biological enzymes and fats, and has been reported to damage the liver. Therefore, the discovery of natural antioxidants instead of synthetic antioxidants and not harmful to the human body is a very important task.

따라서, 본 발명의 목적은, 항산화 효과가 우수한 두릅과 산딸기 혼합추출물을 제공하는 것이다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide an extract of arsi and raspberry having excellent antioxidant effects.

본 발명의 또 다른 목적은 본 발명의 추출물에 따른 유효 성분을 포함하는 혼합 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a mixed composition comprising the active ingredient according to the extract of the present invention.

본 발명의 또 다른 목적은 본 발명의 추출물을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.Still another object of the present invention is to provide a method for preparing the extract of the present invention.

이와 같은 본 발명의 목적은 두릅과 산딸기를 용매로 추출한 추출물에 의해 달성될 수 있다.Such an object of the present invention can be achieved by extracts extracted with a solvent and wild strawberry.

본 발명의 조성물은 우선 독성이 없어 인체에 직접 경구로 투여하거나 식, 음료에 첨가하여 사용할 수 있기 때문에, 보조 식품으로서 섭취할 수 있는 항산화물질 물질이라는 점에서 매우 큰 의의가 있다.Since the composition of the present invention is not toxic at first and can be directly orally administered to the human body or added to foods and beverages, the composition is very significant in that it is an antioxidant substance that can be ingested as a supplement.

이하 본 발명을 자세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명자들은 이와 같은 노인성 질환의 발병 및 진행의 메카니즘에 기초해서, 두릅과 산딸기나무의 추출물이 항산화 기능이 우수하여 산화적 스트레스를 경감시켜 노인성 질환이나 암, 당뇨등의 예방 및 진행 지연 효과를 나타낼 수 있다는 것을 발견하여 본 발명에 도달하였다.Based on the mechanism of the development and progression of the senile disease, the present inventors have an excellent antioxidant function to reduce the oxidative stress, so that the extract of aralia and raspberry may exhibit the effects of preventing and delaying the senile disease, cancer and diabetes. It has been found that the present invention has been reached.

두릅은 아라리아 속(Aralia sp.)에 속하는 식물로 동아시아에서 자생하는 다년생 초본이다. 두릅의 껍질에는 사포닌을 포함한 여러 종류의 트리테르페노이드(triterpenoids)가 있고, 수피에는 혈당강하 효과가 있는 엘라토시드(elatoside) E를 포함해 엘라토시드 F와 올레놀산 글리코시드 등 몇 가지의 글리코시드가 함유되어 있으며 에탄올 흡수를 저해하는 엘라토시드 A와 B 도 포함되어 있다. 사포닌의 일종인 oleanolic acid는 여러 화학물질에 의한 급성 간손상을 막아주는 역할을 한다.Durul is a plant belonging to the genus Aralia sp., A perennial herb native to East Asia. The shell of the shell contains several types of triterpenoids, including saponins, and the bark contains elatoside E, which has a hypoglycemic effect, such as elatoside F and olenolic acid glycosides. It contains glycosides and elatosides A and B that inhibit ethanol absorption. Oleanolic acid, a type of saponin, prevents acute liver damage caused by various chemicals.

산딸기는 루부스 속 (Rubus)에 속하는 식물로 덜 익은 열매를 복분자라고 한다. 우리나라의 복분자는 대부분 산딸기의 열매이고, 간혹 복분자딸기의 열매를 사용하기도 한다. 전초에는 플라보노이드, 뿌리에는 트리테르펜사포닌이 주성분으로 들어 있다. 그 외에 유기산, 말산 (malic acid), 비타민 C 등이 포함되어 있다. 동의보감에서는 복분자를 강장약으로 사용하였으며, 민간에서는 잎을 진정약, 염증약으로 관절염, 전간에 사용하였다. 복분자는 간기능을 활성화시켜 시력을 증강시키고 기운이 나게 하며 흰머리를 검게하는 것으로 알려져 있다. 또 양기가 부족할 때, 정력감퇴, 유정, 빈뇨에 사용된 경우도 있다.Raspberry is a plant belonging to the genus Rubus, and the less ripe fruit is called Bokbunja. In Korea, bokbunja are mostly berries of wild berries, and sometimes the fruits of bokbunja berries are used. The outpost contains flavonoids and the root contains triterpene saponins. Other organic acids include malic acid and vitamin C. In Dongbogam, bokbunja was used as a tonic medicine, and in folk medicine, leaves were used as sedatives and inflammatory drugs for arthritis and whole liver. Bokbunja is known to activate liver function to enhance vision, make energy and blacken gray hair. In addition, when lack of energy, it is also used for energy loss, oil well, urinary frequency.

본 발명에서는 두릅과 산딸기를 물 또는 알코올로 추출해서 사용한다. 본 발명의 두릅과 산딸기 추출물은 산화적 스트레스를 경감시킬 목적으로 마이오-이노시톨, 타우린, 비타민 C, 엽산, 판토텐산을 각각 또는 동시에 추가한 혼합물로 사용하는 것이 특히 바람직하다. 두릅과 산딸기 추출물은 1대 0.1 내지 0.1대 1의 비율로 혼합될 수 있다.In the present invention, the ginseng and raspberries are extracted with water or alcohol. It is particularly preferable that the arbor and raspberry extracts of the present invention are used in a mixture of myo-inositol, taurine, vitamin C, folic acid and pantothenic acid, respectively or simultaneously, for the purpose of reducing oxidative stress. Arali and raspberry extract may be mixed in a ratio of 0.1 to 0.1 to 1.

본 발명은 두릅과 산딸기 추출물을 유효성분으로 한 생약 제제 나 건강보조식품, 식품 첨가제, 음료를 제공한다. 두릅과 산딸기 추출물을 생약제제나 건강보조식품 등으로 사용할 때의 투여는 치료상 유효량을 단독으로 또는 약리학적으로 수용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 함유한 형태로 피하내, 경구, 근육내 투여 또는 당업계에 알려져 있는 기타 다른 적절한 방법을 포함하는 다양한 방법으로 투여된다. 본 발명의 추출물에 적합한 경구투여용 제제에는 정제, 캅셀제, 용액제, 현탁제, 시럽제, 또는 음료의 형태가 있다. 경구외 투여를 위한 두릅과 산딸기 추출물을 포함하는 제제는 멸균되고 주사가능한 액체 또는 유질 서스펜션과 같은 멸균 주사제 형태가 될 수 있다. 상기 서스펜션은 적당한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제(suspending agent)를 사용하여 본 발명이 속한 기술 분야에서 잘 알려져 있는 방법에 따라 제조된다. 상기 멸균 주사제는 또한 1,3-부탄디올과 같이 경구외로 받아들일 수 있는 희석제 또는 용매를 포함한 멸균 주사액 또는 서스펜션이 될 수 있다. 적당한 희석제는 예를 들어, 물, 링거용액, 및 등장 식염수를 포함한다. 추가로 멸균된 고정유(fixed oils)가 용이하게 용매 또는 현탁 매질로써 사용될 수 있다. 상기 목적을 위해 합성 모노- 또는 디-글리세라이드를 포함하는 어떠한 무자극 고정유도 사용될 수 있다. 추가로 올레인산과 같은 지방산이 마찬가지로 주사제 제제에 사용될 수 있다.The present invention provides herbal preparations, health supplements, food additives, and beverages containing the active ingredients of arsi and raspberry extract. The use of arbor and raspberry extract as a herbal or dietary supplement may be administered subcutaneously, orally, intramuscularly or in the form of a therapeutically effective amount alone or in the form of a pharmacologically acceptable carrier, excipient or diluent. It is administered in a variety of ways, including other suitable methods known to. Formulations for oral administration suitable for extracts of the present invention may be in the form of tablets, capsules, solutions, suspensions, syrups, or beverages. Formulations comprising arbor and raspberry extracts for extraoral administration may be in the form of sterile injectables such as sterile, injectable liquids or oily suspensions. The suspension is prepared according to methods well known in the art, using suitable dispersing or wetting agents and suspending agents. The sterile injectables may also be sterile injectable solutions or suspensions containing an orally acceptable diluent or solvent, such as 1,3-butanediol. Suitable diluents include, for example, water, Ringer's solution, and isotonic saline. In addition, sterile, fixed oils can be readily used as a solvent or suspending medium. For this purpose any bland fixed oil can be employed including synthetic mono- or di-glycerides. In addition, fatty acids such as oleic acid can likewise be used in the preparation of injectables.

본 발명의 두릅과 산딸기 추출물은 물과 감미료 및 적당한 첨가제를 포함하는 음료로 사용할 수 있다. 이 음료에는 마이오-이노시톨 또는 타우린, 비타민 C, 엽산, 판토텐산, 구연산, 올리고 당 등이 추가될 수 있으며, 이들 성분이 함께 혼합되어도 좋다. 두릅과 산딸기는 예로부터 자체로서 식용되어온 식품으로서 이를 추출한 추출물은 독성이 없으므로, 적당한 감미료와 방부제 등을 함유하여 음료로 제공됨으로써 수시로 음용하여 노인성 질환의 예방에 도움이 될 수 있는 것이다. 특히, 항산화 효과와 관련하여 과산화물의 제거에 의해서 백내장의 예방 및 치료의 효과가 있다.The extract of ars and raspberries of the present invention can be used as a beverage containing water, sweeteners and suitable additives. Myo-inositol or taurine, vitamin C, folic acid, pantothenic acid, citric acid, oligosaccharides and the like may be added to the beverage, and these components may be mixed together. Dried radish and raspberry are foods that have been edible by themselves since ancient times, and the extract extracted therefrom is not toxic, and is provided as a beverage containing appropriate sweeteners and preservatives, so that it can be often used for drinking to prevent senile diseases. In particular, there is an effect of the prevention and treatment of cataracts by the removal of peroxides with respect to the antioxidant effect.

본 발명에 따르는 두릅과 산딸기 추출물을 생약제제로 사용할 때 투여용량은 질환의 종류, 질환의 중증도, 투여대상 환자의 성별, 연령, 체중 및 목적하는 효과가 어떤 것인지에 따라 달라질 수 있다. 일반적으로는 성인에게 경구 투여하는 경우, 체중 1 kg당 1 일 20-70 mg, 바람직하게는 30-50 mg의 용량을 투여할 수 있고, 경구 외에 주사제로 투여하는 경우는 체중 60 kg인 사람을 기준으로 10-50 mg의 용량을 투여할 수 있다.Dose and raspberry extract according to the present invention when using the herbal drug dosage may vary depending on the type of disease, the severity of the disease, the sex, age, weight and desired effect of the patient to be administered. Generally, when administered orally to an adult, a dose of 20-70 mg, preferably 30-50 mg, per kg of body weight per day may be administered, and when administered by injection other than oral, a person weighing 60 kg may be used. Doses of 10-50 mg may be administered as a reference.

본 발명에 따라서, 두릅과 산딸기를 수성 용매로 추출하여 여과하고;According to the present invention, the malt and raspberries are extracted with an aqueous solvent and filtered;

여액을 고압하에서 포화시켜 생성된 응고단백질의 침전물을 원심분리하여 제거하고;The filtrate was saturated under high pressure to remove the coagulum precipitate produced by centrifugation;

여액에 유기용매를 가하여 유기용매-가용성 물질을 제거한 다음에 수층을 분리하여 건조시키는 단계;Adding an organic solvent to the filtrate to remove the organic solvent-soluble material, and then separating and drying the aqueous layer;

를 포함하는 의약 조성물의 제조방법이 제공된다.Provided is a method of preparing a pharmaceutical composition comprising a.

본 발명의 방법에서, 용매로는 물 또는 알코올 혹은 물과 알코올을 적정비로 섞은 혼합액이 적당하다. 이 수성 용매를 사용해서 두릅과 산딸기를 1:0.2 내지 1:5의 중량비로 혼합하고 혼합물에 대하여 물을 1:5 내지 1:10의 중량비로 가하여추출한다.In the method of the present invention, as the solvent, water or alcohol or a mixture of water and alcohol in an appropriate ratio is suitable. Using this aqueous solvent, aralia and raspberries are mixed in a weight ratio of 1: 0.2 to 1: 5, and water is added to the mixture in a weight ratio of 1: 5 to 1:10 and extracted.

이와 같이 두릅과 산딸기를 혼합하여 추출하여도 좋고, 상기 두릅과 수성 용매를 1:5 내지 1:10의 중량비로 혼합하여 추출한 추출물과, 상기 산딸기와 수성 용매를 1:5 내지 1:10의 중량비로 혼합하여 추출한 추출물을 1:0.2 내지 1:5의 중량비로 혼합하여도 같은 효과를 얻을 수 있다.Thus, the extract may be extracted by mixing the malt and the raspberry, and the extract extracted by mixing the malt and the aqueous solvent in a weight ratio of 1: 5 to 1:10, and the weight ratio of the raspberry and the aqueous solvent to 1: 5 to 1:10. The same effect can be obtained by mixing the extract extracted by mixing in a weight ratio of 1: 0.2 to 1: 5.

본 발명의 방법에서 유기용매로 클로로포름 또는 헥산을 바람직하게 사용할 수 있다.In the process of the present invention, chloroform or hexane can be preferably used as the organic solvent.

이하에서 실시예에 의거하여 본 발명을 상세히 설명하지만, 본 발명의 범위가 이들 실시예로 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples, but the scope of the present invention is not limited to these Examples.

실시예 1: 두릅과 산딸기의 추출Example 1 Extraction of Aralia and Raspberries

건조된 두릅과 산딸기를 분쇄해 물로 가열 추출한 각각의 추출물을 중량비 1:1로 혼합해 사용하거나 원료를 혼합하여 물을 가해 가열 추출하였다. 추출법은 다음과 같다.Each dried extract was dried and dried by heating with water, and the extracts were mixed at a weight ratio of 1: 1, or the raw materials were mixed and extracted by heating. The extraction method is as follows.

두릅과 산딸기를 중량기준으로 1:1로 혼합한 혼합물과 각각을 600g씩 분쇄하고 증류수 5 ℓ를 가해 40-50 시간 동안 교반하면서 추출, 여과, 원심분리 하였다. 원심분리 후 생성된 여액에 클로로포름 2ℓ를 가해 수지, 섬유질, 단백질 등을 용출시킨 후에 클로로포름 층을 제거하였다. 여기에 다시 n-헥산을 가해 나머지의 수지, 섬유질, n-헥산 가용성 물질 등을 용출시킨 후 수층을 회수하고 탈크를 가하여 여과, 정제하면서 탈크를 제거하였다. 잔존하는 탈크는 멤브레인 필터 장치에서 여과하여 제거하고 정제한 여액은 동결건조하여 분말화 하였다. 이 방법에 의해 두릅과 산딸기의 혼합추출물은 36g (수율 약 6%), 두릅 추출물은 25.8g(수율 약 4.3%), 산딸기 추출물은 46.8g(수율 약 7.8%)이 수득되었다.600 g each of the mixture and each of the mixture of the arbor and raspberry were mixed 1: 1 by weight, and 5 L of distilled water was added thereto, followed by extraction, filtration and centrifugation while stirring for 40-50 hours. After centrifugation, 2 L of chloroform was added to the filtrate, and the resin, fiber, protein, and the like were eluted, and then the chloroform layer was removed. To this, n-hexane was added again to elute the remaining resin, fiber, n-hexane soluble substance, and the like. The aqueous layer was recovered, and talc was added to filter and purify to remove talc. The remaining talc was removed by filtration in a membrane filter device and the purified filtrate was lyophilized to powder. By this method, 36g (yield about 6%) of the mixed extract of aralia and raspberries were obtained, 25.8g (yield about 4.3%) and 46.8g (yield about 7.8%) of wild strawberry extract.

실시예 2: 알코올에 의한 추출물의 제조Example 2: Preparation of Extract with Alcohol

건조한 두릅과 산딸기를 동비례로 혼합한 것을 분쇄기로 분쇄한 분말 100g에 70% 메탄올 1,500㎖를 가하여 때때로 교반하면서 60 시간을 방치한 다음, 이를 감압여과하여 알코올 추출물을 취하고, 잔사는 제거하였다. 환류냉각장치에서 알코올을 회수하고 남은 알코올 추출물에 증류수 1,000㎖를 넣어 혼합하고, 수용화하기 위하여 100℃에서 5분간 가열하였다. 이 혼탁 추출물에 적량의 탈크를 넣고 교반후 감압 여과하여 1차 정제하였다. 정제된 여액을 분획 깔대기에 넣고 클로로포름 300ml를 가하여 수지 및 섬유질 등을 용출시키고, 클로로포름 층을 분리 제거한 후, 수층에 다시 n-핵산 200㎖를 가하여 잔존하는 단백질, 수지, 섬유질 및 n-핵산 가용물질 등을 용출시켰다. 수층을 회수하여 60-80℃로 가온시킨 다음에 다시 적량의 탈크를 가하여 교반 후, 감압여과하여 탈크를 제거하고 여액을 다시 서서히 여과시킨 다음, 동결건조시켜 분말화하였다. 이 방법에 의하여 두릅과 산딸기의 혼합추출물에서 약 10%의 수율 (건조중량기준)로 추출물 약 10g을 수득하였다.1,500 ml of 70% methanol was added to 100 g of the powder ground with a grinder, and dried for 50 hours while stirring occasionally. The mixture was filtered under reduced pressure to obtain an alcohol extract, and the residue was removed. Alcohol was recovered from the reflux condenser, and 1,000 ml of distilled water was added to the remaining alcohol extract, mixed, and heated at 100 ° C. for 5 minutes. An appropriate amount of talc was added to this turbid extract, and the mixture was filtered under reduced pressure and purified first. The purified filtrate was added to a fraction funnel, and 300 ml of chloroform was added to elute the resin and the fibres. The chloroform layer was separated and removed, and 200 ml of n-nucleic acid was added to the aqueous layer. And the like was eluted. The aqueous layer was recovered, warmed to 60-80 ° C., and then stirred by adding an appropriate amount of talc again, filtered under reduced pressure to remove talc, and the filtrate was gradually filtered again, and then lyophilized to powder. By this method, about 10 g of the extract was obtained with a yield of about 10% (dry weight basis) in the mixed extract of the aralia and raspberries.

실시예 3: 두릅과 산딸기나무 추출물을 포함하는 제제Example 3: Formulations Containing Aralia and Raspberry Extract

1. 정제1. Tablet

실시예 1에서 제조된 본 발명의 동결 건조된 분말상의 혼합 추출물 250㎎을 부형제 직타용 락토즈 260㎎과 아비셀(미결정 셀룰로오스) 35㎎, 붕해 보조제인 나트륨 전분 글리코네이트 15㎎, 결합제인 직타용 L-HPC(Low-hydroxyprophylcell ulose) 80㎎을 섞어 U형 혼합기에 넣고 20 분간 혼합하였다. 혼합완료 후 활탁제 마그네슘 스테아레이트 10㎎를 추가로 넣고 3분간 혼합하였다. 정량시험과 항습도 시험을 거쳐 타정하고 필름 코팅하여, 1 정당 혼합 추출물 250㎎을 함유하는 정제를 제조하였다.250 mg of the freeze-dried powdered mixed extract of the present invention prepared in Example 1, 260 mg of lactose for excipients and 35 mg of Avicel (microcrystalline cellulose), 15 mg of sodium starch glyconate as a disintegration aid, 80 mg of -HPC (Low-hydroxyprophylcell ulose) was mixed and mixed in a U-type mixer for 20 minutes. After the completion of the mixing, 10 mg of the suspending agent magnesium stearate was further added and mixed for 3 minutes. After quantitative and hygroscopic tests, tableting and film coating were carried out to prepare tablets containing 250 mg of a single extract.

2. 시럽제2. Syrup

일정량의 물에 적당량의 백당을 용해시키고, 여기에 보존제로서 파라옥시메틸벤조에이트 80㎎ 및 파라옥시프로필벤조에이트 16㎎을 가하고, 실시예 1에서 제조된 본 발명의 동결 건조된 분말상의 혼합추출물 4.5g을 넣고, 60℃로 유지시키면서 완전히 용해시킨 후, 냉각시키고 증류수를 가해 150 ㎖로 만들어 시럽제를 제조하였다.An appropriate amount of sucrose was dissolved in a certain amount of water, and 80 mg of paraoxymethylbenzoate and 16 mg of paraoxypropylbenzoate were added as a preservative, and the freeze-dried powdered mixed extract of the present invention prepared in Example 1 4.5 g was added, dissolved completely while maintaining at 60 ° C, cooled, and distilled water was added to make 150 ml to prepare a syrup.

3. 캅셀제3. Capsule

실시예 1에서 제조된 본 발명의 동결 건조된 분말상의 혼합추출물 500㎎을 경질 젤라틴 캅셀에 충전하여 캅셀제를 제조하였다.500 mg of the freeze-dried powdered mixed extract of the present invention prepared in Example 1 was filled into a hard gelatin capsule to prepare a capsule.

4. 음료4. Drink

실시예 1에서 제조된 본 발명의 동결건조된 분말상의 혼합추출물 500㎎을 적당량의 물에 용해시킨 후에 보조성분으로서 비타민 C, 교미제로서 구연산, 구연산나트륨, 올리고당을 적당량 가하고, 보존제로서 적당량의 나트륨벤조에이트를 가한 후에 물을 가하여 전량을 100 ㎖로 만들어 음료용 조성물을 제조하였다. 이때 타우린이나 마이오 이노시톨, 엽산, 판토텐산 등을 단독으로 혹은 함께 첨가할 수 있다.After dissolving 500 mg of the lyophilized powdered extract of the present invention prepared in Example 1 in an appropriate amount of water, vitamin C as an auxiliary component, citric acid, sodium citrate, oligosaccharides as an auxiliary agent was added, and an appropriate amount of sodium was used as a preservative. After adding benzoate, water was added to make the whole amount 100 ml to prepare a beverage composition. At this time, taurine, myo-inositol, folic acid, pantothenic acid, etc. may be added alone or together.

5. 주사제5. Injection

실시예 1에서 제조된 본 발명의 동결 건조된 분말상의 혼합 추출물 200㎎을 1%의 폴리옥시에틸렌 수소화 카스트로 오일을 함유하는 생리 식염수 200㎎에 가열 용해시켜 혼합 추출물을 0.1 %의 농도로 함유하는 주사 제제를 제조하였다.200 mg of the lyophilized powdered mixed extract of the present invention prepared in Example 1 was dissolved in 200 mg of physiological saline containing 1% polyoxyethylene hydrogenated castro oil, and the mixed extract was contained at a concentration of 0.1%. The formulation was prepared.

실험예 1. 추출물의 항산화 효과 측정Experimental Example 1. Determination of the antioxidant effect of the extract

본 실험예에서 사용된 화학발광(Chemiluminescence)을 이용한 항산화효과 검색방법은 화학반응시에 나오는 에너지가 빛의 형태로 방출되어 나타나는 화학발광을 이용한 것이다. 이 때 발생하는 빛은 아주 소량이므로 이 빛을 증폭시키기 위한 증폭제로서 ABEI(aminobutylethyl isoluminol)과 같은 cyclic diacylhydrazides가 사용된다. 이 물질들은 과산화효소 (peroxidase)의 기질로서 과산화수소 H2O2존재 하에서 효소에 의하여 급격히 산화되면서 빛을 방출한다. H2O2존재 하에서 ABEI가과산화효소에 의하여 산화되면 빛을 방출하고 분해된다. 이 과정에서 항산화제는 산화반응을 억제하므로 산화에 의한 발광을 억제시킨다. 따라서 항산화력은 화학발광을 억제시키는 정도로 나타낼 수 있다. 산화반응에 따른 빛의 방출량은 428nm에서 검출하였다.Antioxidant effect retrieval method using chemiluminescence used in the present experimental example uses the chemiluminescence emitted by the energy emitted in the form of a chemical reaction in the form of light. Since the amount of light generated is very small, cyclic diacylhydrazides such as ABEI (aminobutylethyl isoluminol) are used as an amplifying agent to amplify the light. These substances emit light as they are rapidly oxidized by enzymes in the presence of hydrogen peroxide H 2 O 2 as a substrate of peroxidase. When ABEI is oxidized by peroxidase in the presence of H 2 O 2 , it emits light and decomposes. In this process, the antioxidant inhibits the oxidation reaction, thereby suppressing the luminescence caused by the oxidation. Therefore, the antioxidant power can be expressed to the extent that suppresses chemiluminescence. Light emission from the oxidation reaction was detected at 428nm.

0.6 μM ABEI 200 ul와 추출물 (1 mg/ml) 200 ul를 폴리스티렌 튜브에 넣고 35% H2O2와 10 mg/ml 마이크로페록시다제를 각각 1:100으로 희석하여 루미노미터에 자동 주입하였다. 화학반응에 의한 빛의 강도는 루미노미터(LB9502, Clilumat, Germany)에 의해 2초간 측정되었다. 추출물의 항 산화 능력은 반응 시 빛 강도의 저해 퍼센트(%)로 표시하는데 그 결과는 표 1에 나타난 바와 같이 두릅과 산딸기 추출물이 각각의 추출물보다 항산화능이 강한 것으로 나타났다. 이 사실은 두 물질을 함께 사용할 때 상승작용이 있음을 보여주고 있으며, 이 때의 항산화력은 비타민 C보다 더 우수하다.200 μl of 0.6 μM ABEI and 200 μl of extract (1 mg / ml) were placed in a polystyrene tube and 35% H 2 O 2 and 10 mg / ml microperoxidase were diluted 1: 100 and injected automatically into the luminometer. . The intensity of light by chemical reaction was measured for 2 seconds by a luminometer (LB9502, Clilumat, Germany). The antioxidant capacity of the extract was expressed as a percentage of inhibition of the light intensity during the reaction. The results showed that the arbor and raspberry extracts were stronger than the respective extracts as shown in Table 1. This fact shows that there is a synergy between the two, and the antioxidant power is better than vitamin C.

본 발명의 추출물의 항산화 효과Antioxidant Effect of Extracts of the Present Invention 추출물extract 화학발광 저해 %Chemiluminescence inhibition% 두릅 추출물Arbor extract 75 %75% 산딸기 추출물Raspberry Extract 63 %63% 두릅 + 산딸기 추출물Aralia + Raspberry Extract 92 %92% 비타민 CVitamin c 88 %88%

실험예 2. 두릅과 산딸기 혼합 추출물의 과산화물 함량에 미치는 영향Experimental Example 2. Effects on the Peroxide Contents of the Mixed Extract of Aralia and Raspberries

생체 내에서 흔히 발생하는 주요 지질 과산화물인 MDA (Malonyldialdehyde)는 지질 과산화 과정의 중간산물로 3개 이상의 이중 결합을 갖는 다가 불포화 지방산이 유리 활성 라디칼에 의한 산화적 분해로 생기며 지질 과산화의 지표로 가장 널리 이용된다. 지질 과산화물인 MDA는 당뇨와 같은 상황에서는 더욱 많이 발생하며 티오바르비투르산(TBA)와 반응하기 때문에 측정이 용이하다. 따라서 본 실험에서는 지질 과산화물의 발생이 더 많이 증가하는 당뇨모델을 사용하여 본 발명의 추출물이 지질 과산화물의 발생을 억제하는 정도를 다음과 같은 방법으로 조사하였다.MDA (Malonyldialdehyde), a major lipid peroxide that occurs frequently in vivo, is an intermediate of lipid peroxidation process. Polyunsaturated fatty acids having three or more double bonds are caused by oxidative decomposition of free active radicals and are most widely used as indicators of lipid peroxidation. Is used. MDA, a lipid peroxide, is more likely in diabetic situations and is easier to measure because it reacts with thiobarbituric acid (TBA). Therefore, in this experiment, the degree to which the extract of the present invention inhibits the generation of lipid peroxides was investigated by using a diabetes model in which the generation of lipid peroxides was increased.

체중 150~170g의 백서 (Sprague­Daweley종, ♂) 50마리를 2개군으로 나누어 한 군은 생후 6주가 되었을 때 16시간 금식시킨후 streptozotocin(Sigma Chemical CO,USA)을 65 mg/kg B.W.이 되도록 녹인 뒤 10분 이내에 복강에 1회 주사하여 당뇨를 유도하였다. 당뇨 유도 3일후 꼬리의 정맥혈을 취하여 비공복시 혈당이 300mg/㎗ 이상인 경우에만 당뇨가 유발된 것으로 분류하여 사용하였다(Kawamura et al, 1987). 화학 물질로 당뇨를 유발하여 당뇨가 유도된 백서들을 당뇨군으로 하고, 8주간 사육한 후 사용하였다.One group divided 50 rats (SpragueDaweley species, ♂) weighing 150 ~ 170g into two groups and fasted for 16 hours at 6 weeks of age, and then dissolved streptozotocin (Sigma Chemical CO, USA) to 65 mg / kg BW. Diabetes was induced by one injection into the abdominal cavity within 10 minutes. Three days after the induction of diabetes, venous blood of the tail was taken and classified as having induced diabetes only when the fasting blood glucose was 300 mg / dl or more (Kawamura et al, 1987). Diabetes-induced diabetes with a chemical substance was used as a diabetic group after breeding for 8 weeks.

당뇨군과 정상군을 각각 2개의 군으로 나누어 당뇨군중 1군과 정상군중 1군에게 본 발명의 두릅과 산딸기의 혼합추출물을 생리식염수에 녹여 250 mg/kg B.W.의 수준으로 8주간 주 3회 복강투여하였다. 다른 한 군에게는 같은 양의 생리식염수를 8주간 주 3회 복강투여하였다.The diabetic group and the normal group were divided into two groups, respectively, to the group 1 and group 1 of the diabetic group. Administered. The other group was intraperitoneally administered the same amount of saline three times a week for eight weeks.

백서(SD-rats)를 CO2gas로 희생시키고 바로 신장과 안구를 적출해 사용하였다. 안구에서는 수정체를 적출하여 gentamycin(Gibco, USA, 5 mg/l)과 fungizone (Gibco, USA, 0.5 ug/ml)을 포함하는 M199 배지(Sigma, USA)에 넣고 CO25%, 공기95%, 37℃로 유지되는 세포 배양기에서 배양하였다. 수정체와 신장조직을 액체질소로 급속 냉동시킨 후 -80℃에서 보관하였다가 1주일 이내에 100 mM 인산칼륨 완충액(pH 7.0)를 넣고 4℃에서 균질화한 다음 10,000×g에서 20분간 원심분리 후 상층액을 -80℃에서 보관하였다가 사용하였다.SD-rats were sacrificed with CO 2 gas and the kidneys and eyes were immediately extracted. In the eye, the lens was extracted and placed in M199 medium (Sigma, USA) containing gentamycin (Gibco, USA, 5 mg / l) and fungizone (Gibco, USA, 0.5 ug / ml) and CO 2 5%, air 95%, The cells were cultured in a cell incubator maintained at 37 ° C. The lens and kidney tissues were rapidly frozen with liquid nitrogen and stored at -80 ° C. Then, within one week, 100 mM potassium phosphate buffer (pH 7.0) was added, homogenized at 4 ° C, and centrifuged at 10,000 x g for 20 minutes. Was stored at -80 ° C and used.

지질과산화물 함량을 나타내는 티오바르비투르산 반응물질(thiobarbituric acid reacting substances) 함량은 오카와(Ohkawa)의 방법 (Anal. Biochem.95:351-356)으로 측정하였다. 이때, 표준용액으로 테트라에톡시프로판을 메탄올에 녹여 사용하였다.The content of thiobarbituric acid reacting substances representing lipid peroxide content was measured by the method of Ohkawa ( Anal. Biochem. 95: 351-356). At this time, tetraethoxypropane was dissolved in methanol as a standard solution.

그 결과는 표 2에 나타난 바와 같이 본 발명의 혼합 추출물의 투여가 신장과수정체 균질액에서 TBARS의 생성에 유의한 영향 미치는 것을 알 수 있었다. 즉, 당뇨군중 생리식염수를 투여한 군 (당뇨 대조군)의 신장에서는 정상군의 약 2.4배의 TBARS함량을 나타내었다. 당뇨군에 본 발명의 혼합추출물의 투여했을 때는 TBARS의 함량을 당뇨대조군의 약 34% 수준으로 66% 만큼 감소시켰으며, 정상군의 경우는 본 발명의 혼합추출물의 투여가 유의적인 차이를 나타내지 않았다.As a result, as shown in Table 2, the administration of the mixed extract of the present invention was found to have a significant effect on the production of TBARS in kidney and lens homogenate. That is, in the diabetic group, the saline-administered group (diabetic control group) showed a TBARS content of about 2.4 times that of the normal group. When the mixed extract of the present invention was administered to the diabetic group, the TBARS content was reduced by 66% to about 34% of the diabetic control group, and in the normal group, the administration of the mixed extract of the present invention did not show a significant difference. .

수정체의 균질액에서는 당뇨대조군의 TBARS의 함량은 정상군의 7배 이상 증가하였고, 당뇨군에게 본 발명의 혼합추출물을 투여했을 때 당뇨대조군의 23%수준으로 감소시켰다. 당뇨군에서 신장과 수정체의 TBARS가 크게 증가한 것은 조직의 산화적 스트레스를 반영한 것이라고 볼 수 있다. 본 발명의 혼합추출물을 투여했을 때 TBARS의 함량이 감소된 것은 본 발명의 혼합추출물이 조직을 산화적 스트레스로부터 보호하여 질병의 진행을 지연시킬 수 있는 것을 의미한다.In the homogeneous solution of the lens, the TBARS content of the diabetic control group was increased by 7 times or more than that of the normal control group, and decreased to 23% of the diabetic control group when the diabetic group was administered the mixed extract of the present invention. The significant increase in kidney and lens TBARS in the diabetic group reflects the oxidative stress of tissues. The decrease in the content of TBARS when the mixed extract of the present invention is administered means that the mixed extract of the present invention can delay the progression of the disease by protecting the tissue from oxidative stress.

본 발명의 추출물이 지질 과산화물 생성에 미치는 영향Effect of Extract of the Invention on Lipid Peroxide Production 동물군Fauna 약물투여drug injection 신장kidney 수정체Lens 정상군Normal 생리식염수 투여 (n=10)Physiological saline administration (n = 10) 0.36±0.040.36 ± 0.04 0.23±0.020.23 ± 0.02 본 발명의 혼합추출물 투여 (n=10)Mixed extract administration of the present invention (n = 10) 0.29±0.020.29 ± 0.02 0.20±0.010.20 ± 0.01 당뇨군Diabetes 생리식염수 투여 (n=9)Physiological saline administration (n = 9) 0.88±0.030.88 ± 0.03 1.59±0.041.59 ± 0.04 본 발명의 혼합추출물 투여 (n=8)Mixed extract administration of the present invention (n = 8) 0.30±0.010.30 ± 0.01 0.37±0.020.37 ± 0.02

실시예 4: 본 발명에 따르는 두릅과 산딸기 추출물에 대한 독성 실험Example 4 Toxicity Experiments on Aralia and Raspberry Extracts According to the Present Invention

본 발명에 따르는 두릅과 산딸기 추출물을 생약 또는 건강보조식품으로 사용할 때 안전성을 확인하기 위하여 약물의 급성 독성을 나타내는 지표가 되는 중요한 의미가 있는 수치로서 LD50(실험동물의 50 %를 치사시킬 수 있는 양)치를 다음과 같은 방법에 의하여 구하였다.LD 50 (50% of experimental animals that can kill 50% of experimental animals) is an important value that is an indicator of acute toxicity of drugs in order to confirm the safety when using arbor and raspberry extract according to the present invention as a herbal or dietary supplement. Yang) value was obtained by the following method.

정상 ICR 마우스(male, 22±1 g) 36 마리를 1 개 군에 6 마리씩 A 내지 F의 6개 군으로 나누어, A 군에게는 체중 1 ㎏당 본 발명에 따라 실시예 3에서 제조된 두릅과 산딸기 추출물 5 g을 투여하는 것으로부터 등차적으로, B 군에는 7.5 g, C군에는 10 g, D 군에는 12.5 g 및 E 군에는 15 g을 각각 경구 투여하고 베렌스-칼버(Behrens-Kaber)법(참고문헌: 高木敬次郞 外: 藥物實驗, 南山堂, Japan, p131, 1960)으로 본 발명의 추출물을 경구(p.o.)투여하여 LD50 값을 측정하였다. 결과는 하기 표 3에 기재하였다.Sixty normal ICR mice (male, 22 ± 1 g) were divided into six groups of A to F, each six in a group, and the group A and raspberries prepared in Example 3 according to the present invention per kg of body weight in group A. Equivalently from administering 5 g of extract, 7.5 g in group B, 10 g in group C, 12.5 g in group D and 15 g in group E, respectively, and the Berens-Kaber method ( Reference: 高木 敬 次 郞 外: 藥物 實驗, 南山 堂, Japan, p131, 1960) LD50 values were determined by oral (po) administration of the extract of the present invention. The results are shown in Table 3 below.

두릅과 산딸기 추출물의 경구 투여에 의한 치사량(LD50)Lethal dose (LD50) by oral administration of arbor and raspberry extract 실험군Experimental group 용 량(g/㎏)Capacity (g / kg) 경구투여 군(p.o.)Oral administration group (p.o.) *Z* Z **d** d 사망동물 수/사용동물 수Number of dead animals AA 55 0 / 60/6 -- -- BB 7.57.5 0 / 60/6 00 2.52.5 CC 1010 0 / 60/6 00 2.52.5 DD 12.512.5 0 / 60/6 00 2.52.5 EE 1515 0 / 60/6 00 2.52.5

* Z: 2 개의 연속되는 용량으로 사망동물수의 ½ 값* Z: ½ of the number of dead animals in two consecutive doses

** d : 2 개의 연속되는 용량의 차이** d: difference between two consecutive doses

상기 표 3에 기재된 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명에 따르는 두릅과 산딸기 추출물을 경구투여 했을 때의 LD50 값은 15 g/㎏ 이상이며, 따라서 생체에 매우 안전한 물질임을 알 수 있었다. 즉, 본 발명에 따르는 두릅과 산딸기 추출물 독성이 거의 없이 안전하게 투여될 수 있는 것임을 명백히 알 수 있다.As shown in the results shown in Table 3, the LD50 value of oral administration of the ulm and raspberry extract according to the present invention was 15 g / kg or more, and thus it was found to be a very safe substance. That is, it can be clearly seen that the ul and raspberry extract according to the present invention can be safely administered with little toxicity.

또한, LD50 값의 측정시 사용한 시험동물에 대해 부검 및 병리조직학적 시험을 다음과 같은 방법으로 시행하였다. 시험 종료시 전 생존동물에 대하여 에테르 마취 후 방혈 치사시킨 다음 장기를 적출하여 육안적으로 모든 장기의 이상을 검사하였다. 병리조직 검사를 위하여 부검한 전 장기들을 10 % 중성포르말린 용액에 10 일 이상 고정시킨 다음 탈수 과정을 거쳐 파라핀 포매기(Fisher, Histomatic Tissue Processor, 166A)에 포매한 후 로터리 마이크로톱 (AO Rotary Microtome)으로 5 μm 절편을 만들어 헤마톡실린과 에오신 염색을 하여 관찰하였다.In addition, autopsies and histopathological examinations were performed on the test animals used to measure the LD50 value in the following manner. At the end of the test, all surviving animals were bled after ether anesthesia, and the organs were extracted and visually examined for all organ abnormalities. Autopsied whole organs were fixed in 10% neutral formalin solution for more than 10 days for pathological examination, and then dehydrated and embedded in a paraffin embedding machine (Fisher, Histomatic Tissue Processor, 166A), followed by an AO Rotary Microtome. 5 μm sections were prepared and observed by hematoxylin and eosin staining.

각 군의 모든 동물을 해부하고 HE 염색을 한 후 현미경으로 조사한 병리조직학적 소견은 다음과 같다. 본 발명의 추출물을 마우스 체중 1 kg당 15 g까지 투여시 간 조직과 신장에 있어서 약물 투여에 의한 이상적인 소견은 관찰되지 않았다. 또한, 심장의 심근세포, 위·장관, 췌장, 폐장, 비장, 부신, 뇌, 고환, 난소, 골수 등에 있어서 두릅과 산딸기 추출물 투여에 의한 이상 소견은 관찰되지 않았다.All animals in each group were dissected, and histologic findings examined under a microscope after HE staining were as follows. When the extract of the present invention was administered up to 15 g / kg of mouse body weight, ideal findings by drug administration were not observed in liver tissue and kidney. In addition, no abnormal findings were observed in the cardiomyocytes of the heart, stomach and intestine, pancreas, lung, spleen, adrenal gland, brain, testes, ovaries, bone marrow, etc. by administration of the extracts of arrhythmia and raspberries.

따라서, 본 발명에 따르는 두릅과 산딸기 추출물은 마우스에 투여할 수 있는 최대 용량인 체중 1 kg당 15 g 투여 시에도 전 장기에 대하여 급성독성에 의한 부작용이 없었으며, 또한 어떠한 장기손상 등의 독성도 유발하지 않는 안전한 물질인 것으로 판단되었다.Therefore, even if the ginseng and raspberry extract according to the present invention was administered 15 g per 1 kg of body weight, the maximum dose that can be administered to the mouse, there was no side effect due to acute toxicity to all organs, and also no toxicity such as any organ damage. It was determined to be a safe substance that did not cause it.

이상의 바람직한 실시예에 의거하여 본 발명을 상세히 설명하였으나, 본 발명의 범위는 이에 제한되는 것은 아니고, 본 발명의 사상과 범위 내에서 이 분야의 전문가에게 자명한 치환, 변형 및 변경은 본 발명의 범위에 속하는 것으로 이해되어야 한다.Although the present invention has been described in detail with reference to the above preferred embodiments, the scope of the present invention is not limited thereto, and substitutions, modifications, and changes apparent to those skilled in the art within the spirit and scope of the present invention are within the scope of the present invention. It should be understood to belong to.

이상의 설명에서 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 두릅과 산딸기 추출물은 항산화작용이 강하고 당뇨모델에서 지질과산화물의 생성을 억제하여 당뇨와 같은 질환의 진행을 어느 정도 지연시킬 수 있는 효과를 나타낸다. 본 발명의 두릅과 산딸기 추출물은 독성이 없어 부작용이 적고, 장기 복용 및 투여가 가능하다. 또한 본 발명은 의존성 및 내성을 초래하지 않는다.As can be seen from the above description, the extracts of ars and raspberries according to the present invention have strong antioxidant activity and inhibit the production of lipid peroxides in the diabetic model, thereby exhibiting an effect of delaying the progression of diseases such as diabetes. Arsenal and raspberry extract of the present invention is not toxic and has fewer side effects, and can be taken and administered for a long time. In addition, the present invention does not lead to dependencies and resistance.

본 발명의 추출물은 특히 산화 스트레스로부터 조직을 보호하여 노인성 질환의 예방, 진행의 지연, 치료 및 회복에 효과가 있다.The extract of the present invention is particularly effective in the prevention of senile diseases, delay in progress, treatment and recovery by protecting tissues from oxidative stress.

Claims (18)

두릅과 산딸기의 용매 추출물을 1:0.2 내지 1:5의 중량비로 포함하는 생체내 불포화지방산의 산화억제 조성물.Oxidation inhibiting composition of unsaturated fatty acids in vivo comprising a solvent extract of the aralia and wild strawberry in a weight ratio of 1: 0.2 to 1: 5. 제 1 항에 있어서, 상기 용매가 물 및 알코올로 구성된 군에서 선택되는 조성물.The composition of claim 1 wherein said solvent is selected from the group consisting of water and alcohols. 삭제delete 삭제delete 제 1 항에서, 성인 체중 1㎏당 10 내지 50㎎의 양으로 투여하는 조성물.The composition of claim 1, which is administered in an amount of 10 to 50 mg per kg body weight of the adult. 제 1 항에서, 정제, 캅셀제, 용액제, 현탁제, 시럽제 또는 식용음료의 형태로서 제제학적으로 허용되는 부형제를 가하여 제형화된 조성물.The composition of claim 1 wherein the composition is formulated by adding a pharmaceutically acceptable excipient in the form of a tablet, capsule, solution, suspension, syrup or edible beverage. 삭제delete 제 1 항에 있어서, 생약제제, 건강보조식품 및 음료로 구성된 군에서 선택되는 형태의 조성물.The composition of claim 1, wherein the composition is selected from the group consisting of herbal preparations, dietary supplements and beverages. 제1항에 있어서, 당뇨, 뇌질환, 동맥경화 또는 백내장과 같은 노인성 질환의 예방 또는 진행 지연 효과가 있는 조성물.The composition according to claim 1, which is effective in preventing or delaying the progression of senile diseases such as diabetes, brain diseases, arteriosclerosis or cataracts. 제1항, 제2항, 제5항, 제6항, 제8항 및 제9항 중 어느 하나의 항에 있어서, 마이오-이노시톨 또는 타우린, 비타민 C, 엽산, 판토텐산, 구연산으로 구성된 군에서 선택된 1 또는 그 이상의 화합물을 더 포함하는 조성물.The method according to any one of claims 1, 2, 5, 6, 8 and 9, wherein the group is composed of myo-inositol or taurine, vitamin C, folic acid, pantothenic acid, citric acid. A composition further comprising one or more compounds selected. 두릅과 산딸기를 1:0.2 내지 1:5의 중량비로 혼합하고 혼합물에 대하여 수성 용매를 1:5 내지 1:10의 중량비로 가하여 추출하여 여과하는 단계,Mixing the malt and raspberries in a weight ratio of 1: 0.2 to 1: 5, extracting and filtering by adding an aqueous solvent to the mixture in a weight ratio of 1: 5 to 1:10, 여액을 고압하에서 포화시켜 생성된 응고단백질의 침전물을 원심분리하여 제거하는 단계, 및Centrifuging and removing the precipitate of coagulated protein produced by saturating the filtrate under high pressure, and 여액에 유기용매를 가하여 유기용매-가용성 물질을 제거한 다음에 수층을 분리하여 건조시키는 단계를 포함하는 의약 조성물의 제조방법.A method of preparing a pharmaceutical composition comprising adding an organic solvent to the filtrate to remove the organic solvent-soluble material and then separating and drying the aqueous layer. 제 11 항에 있어서, 상기 수성 용매가 물 또는 알코올인 방법.The method of claim 11, wherein said aqueous solvent is water or an alcohol. 삭제delete 제 11 항에 있어서, 상기 두릅과 수성 용매를 1:5 내지 1:10의 중량비로 혼합하여 추출한 추출물과, 상기 산딸기와 수성 용매를 1:5 내지 1:10의 중량비로 혼합하여 추출한 추출물을 1:0.2 내지 1:5의 중량비로 혼합하는 방법.The extract of claim 11, wherein the extract is obtained by mixing the arbor and the aqueous solvent in a weight ratio of 1: 5 to 1:10, and the extract extracted by mixing the raspberry and the aqueous solvent in a weight ratio of 1: 5 to 1:10. Mixing in a weight ratio of: 0.2 to 1: 5. 제 11 항에 있어서, 상기 유기용매로 클로로포름 또는 헥산을 사용하는 방법.The method of claim 11, wherein chloroform or hexane is used as the organic solvent. 두릅과 산딸기의 혼합 추출물에 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가하여 약제학적 단위투여형으로 제형화된 당뇨, 뇌질환, 동맥경화 또는 백내장과 같은 노인성 질환의 예방 및 치료제.A prophylactic and therapeutic agent for senile diseases, such as diabetes, brain disease, arteriosclerosis, or cataracts, formulated in a pharmaceutical unit dosage form by adding a pharmaceutically acceptable carrier, excipient, or diluent to the mixed extract of arsi and raspberries. 두릅과 산딸기의 혼합 추출물에 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가하여 약제학적 단위투여형으로 제형화된 백내장 예방 및 치료제.A cataract prevention and treatment agent formulated in a pharmaceutical unit dosage form by adding a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent to the mixed extract of arsi and raspberries. 제 16 항 또는 제 17 항에 있어서, 상기 약제학적 단위투여형이 정제, 캅셀제, 용액제, 현탁제, 시럽제, 음료, 또는 주사제인 예방 및 치료제.18. The prophylactic and therapeutic agent according to claim 16 or 17, wherein the pharmaceutical unit dosage form is a tablet, a capsule, a solution, a suspension, a syrup, a drink, or an injection.
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