KR100247569B1 - 혈전치료용 약제조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 혈전치료용 약제조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 겨우살이(Viscum album var. coloratum)의 잎과 줄기 등으로부터 추출한 추출물이 유효성분으로 함유되어 있어 성인병의 주요 원인으로 알려진 혈전의 치료에 효과가 높은 혈전치료용 약제조성물에 관한 것이다.

Description

혈전치료용 약제조성물

본 발명은 혈전치료용 약제조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 겨우살이(Viscum album var. coloratum)의 잎과 줄기 등으로부터 물, 유기용매, 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 얻어진 추출물을 함유한 조성물로서, 성인병의 주요 원인으로 알려진 혈전의 치료에 효과가 높은 혈전치료용 약제조성물에 관한 것이다.

일반적으로 활동중인 심혈관계 안에서 혈액이 응고괴를 형성하는 것을 혈전증(Thrombosis)이라 하며, 그 혈액응고괴를 혈전(Thrombus)이라 한다. 혈전은 혈관벽과 혈액의 유형성분, 특히 혈소판과 혈액응고계를 이루고 있는 혈장응고인자들의 상호작용에 의해서 형성되며, 단지 응고반응이 관계하여 혈액이 시험관에 넣을 때 또는 혈관이 파열될 때 일어나는 혈괴(blood clot)와는 구별된다.

응고는 혈종과 같이 혈액이 혈관밖에 모여도 일어나고, 사망한 뒤에는 심혈관계내에서 혈액의 사후응고가 일어나며, 또한 혈류가 느린 정맥에 생긴 혈전은 혈액응고와 매우 유사하다. 그러나 혈류가 빠른 동맥 또는 심장에서 생긴 혈전은 대부분 섬유소와 혈소판으로 이루어지므로 일반적인 혈액응고와는 상이하다.

정상 혈관내피는 순환하는 혈액과 반응을 하지 않지만, 혈관에 손상이 생기면 혈소판의 활성이 일어나고 혈액응고케스케이드가 활성화하여 혈전이 생기게 되며, 혈류의 변화와 혈액성분의 변화 및 혈관벽의 손상등에 따라서 적색혈전(red Thrombus)과 백색혈전(White Thrombus)으로 구분한다.

또한 혈전은 혈소판과 세포성분을 둘러싼 섬유소가 응집되어 때때로 그 형성부에 혈관이 폐색되고 조직이 괴사되어 뇌혈전, 뇌색전, 폐경색, 심근경색, 말초동맥 폐색증등을 일으키는 요인이 된다.

그러나, 현재까지 혈전예방 및 치료의 목적으로 겨우살이 추출물이 사용된 바 없었다.

겨우살이과(Loranthaceae)는 상록관목으로 다른 나무에 기생하는 기생식물이다. 종래의 민간요법에서는 겨우살이의 잎과 줄기가 고혈압, 진통, 요통, 동상, 유산 방지 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있으나, 보통은 이와 관련된 효능 효과에 대한 과학적 연구는 이루어지지 않고 있는 실정이다. 민간요법에서는 겨우살이의 잎과 줄기를 음건시킨 후 일정량을 취하여 탕제화하거나 또는 끓는 물에 차를 만들어 마시는 방법으로 음용하고 있으나, 이러한 방법으로 가온하여 추출하면 추출물중 유효활성 성분들의 물리적 및 화학적 변화가 유발될 수 있는 문제점이 있다.

최근에는 한국산 겨우살이로부터 렉틴계통의 단백질 성분을 추출하고, 이의 효능효과, 특히 항종양 활성에 대한 보고를 한 바 있다[T.A. Khwaja, Experientia, 36, 599, 1986 & 미국특허 제 5547674호; J.B. Kim, Kor. J. Pharmacogn. 25(2), 132, 1994 & 대한민국특허공개 제 94-3561호; W.B. Park, Yakhak Hoeji, 39(1), 24, 1995]. 그러나, 겨우살이로부터의 추출물이 항혈전 효능이 있다는 사실은 알려지지 않았다.

본 발명은 겨우살이(Viscum album var. coloratum)의 잎 또는 줄기로부터 유효활성성분을 용매추출함으로써, 아무런 물리·화학적 변화가 없는 추출물을 얻을 수 있게 되었다. 또한, 겨우살이 추출물이 혈전의 치료에 효능이 있다는 사실을 밝혀내고, 이 추출물이 유효성분으로 함유된 혈전 및 이와 관련된 질병의 치료에 효과가 있는 약제조성물을 제공하는 데 그 목적이 있다.

본 발명은 겨우살이(Viscum album var. coloratum)의 잎 또는 줄기로부터의 추출물이 유효성분으로 함유되어 있는 혈전치료용 약제조성물을 그 특징으로 한다.

이와 같은 본 발명을 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명에서 사용하는 겨우살이(Viscum album var. coloratum)는 우리나라를 비롯한 아시아 전역 및 유럽 등지에 분포하는 기생식물로서, 참나무, 밤나무, 물오리나무, 팽나무, 자작나무, 소나무, 벗나무, 사과나무 등 여러 종류의 숙주 식물의 가지에서 자라는 상록관목이다.

본 발명에서는 겨우살이(Viscum album var. coloratum)의 잎과 줄기로부터 유효성분을 추출하기 위한 추출용매로서 물 또는 저급알콜 등의 극성용매를 사용한다. 다만, 종래의 용매를 사용한 추출방법이 가온(加溫)하에서 수행됨으로써 유효활성 성분들의 물리·화학적 변화가 생기는 문제가 있는데 반하여, 본 발명에서는 0℃~40℃ 범위내에서 추출함으로써 유효활성 성분들의 물리·화학적 변화를 억제하였다. 그런 다음, 추출물을 감압농축 또는 동결건조법을 이용하여 농축한 뒤, 일정비의 용매를 함유하고 있는 엑기스나 분말상으로 제조한다. 엑기스 또는 분말상의 겨우살이 추출물을 유효성분으로 하여 전분, 정제수 등의 약제학적 분야에서 사용하는 통상적인 부형제와 함께 제제화하여 정제, 캅셀제, 환제, 과립제, 액제 등의 형태로 제형화한다.

또한, 본 발명은 상기와 같은 방법으로 추출한 겨우살이(Viscum album var. coloratum) 추출물이 항혈전효능이 탁월한 사실을 알아내고, 상기한 엑기스나 분말상의 추출물을 유효성분으로 함유하는 약제조성물을 포함한다. 유효성분으로서 겨우살이 추출물은 전체 약제조성물중에 0.1~50중량% 범위내에서 함유되는 것이 보다 우수한 항혈전활성을 나타낸다. 이러한 약제의 용법 용량은 환자의 나이 또는 질병의 정도에 따라 다소 차이는 있지만, 1일 1~2회 복용하고 1회 복용시 1·2정(캡슐, 병)을 복용한다.

이하 본 발명을 실시예에 의거 더욱 상세히 설명하겠는 바, 본 발명이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

[실시예 1] 겨우살이 잎과 줄기의 수추출물

겨우살이(Viscum album var. coloratum)를 채취한 후, 잎과 1~2년생된 줄기를 깨끗하게 세척하고, 통풍이 잘 되는 곳에서 갈변되지 않도록 조심하여 음건한 후, 1cm 이하로 분쇄한 다음 1kg을 취하여 시료로 사용하였다. 시료가 충분히 잠기도록 증류수를 가하고 4℃에서 24시간 이상 침적한 후, 원심분리한 다음 여과하였다. 동일한 방법으로 3회 반복하여 추출한 여액을 합하여 동결건조방법으로 건조하였고, 그 결과 241.5g의 분말을 얻었다.

[실시예 2] 겨우살이 잎과 줄기의 메탄올 추출물

겨우살이(Viscum album var. coloratum)를 채취한 후 잎과 1~2년생 된 줄기를 깨끗하게 하고, 통풍이 잘 되는 곳에서 갈변되지 않도록 조심하여 음건한 후, 1cm이하로 분쇄한 다음 1kg을 취하여 시료로 사용하였다. 시료가 충분히 잠기도록 80% 메탄올을 가하여 4℃에서 7일 동안 침적한 후 여과하였다. 동일한 방법으로 3회 반복하여 추출한 여액을 합하여 진공감압농축하였고, 그 결과 241.5g의 분말을 얻은 후 균일하게 잘 섞어 겨우살이 추출물로 사용하였다.

[제조예 1] 정제의 제조

겨우살이 추출물을 전체 함량의 20%되도록 취한 다음, 약제학적 분야에서 사용하는 통상적인 부형제를 혼합시켜 정제화하였다.

추출물(실시예 2) 20g

락토스 60g

결정성 셀룰로오스 15g

마그네슘 스테아레이트 2g

정제수 적량

- - - - - - - - - - - - - - - - - -

총 량 100g

상기에서 나열된 성분들을 잘게 부숴 혼합한 후, 직타법(direct tableting method)에 의해 정제를 제조하였다. 각 정제의 총량은 100g이었고, 그 중 유효성분의 함량은 20g이었다.

[제조예 2] 캡슐제의 제조

겨우살이 추출물을 전체 함량의 20%되도록 취한 다음, 약제학적 분야에서 사용하는 통상적인 부형제를 혼합하여 균일하게 하였다. 이 혼합물을 적당한 크기로 분말화한 후 일정량씩을 의약 및 식품용 경질 젤라틴 캡슐에 충진시켜 제조하였다.

추출물(실시예 2) 20g

옥수수전분 60g

카르복시메틸셀룰로오스 15g

마그네슘 스테아레이트 1.5g

정제수 적량

- - - - - - - - - - - - - - - - - -

총 량 100g

상기에서 나열된 성분들을 잘게 부숴 혼합하여 분말을 제조하였다. 경질 캡슐에 분말 300mg을 넣어 캡슐제를 제조하였다.

[제조예 3] 수액제의 제조

겨우살이 추출물을 전체 함량의 20%되도록 취한 다음, 약제학적 분야에서 사용하는 통상적인 부형제를 혼합하여 균일하게 하였다.

추출물(실시예 2) 20g

과당 4g

안식향산나트륨 0.08g

파라옥시안식향산메틸 0.01g

파라옥시안식향산프로필 0.001g

정제수 적량

- - - - - - - - - - - - - - - - - -

총 량 100g

[실험예 1] 급성독성실험(LD₅₀측정)

체중 20g 내외의 ICR계 마우스 5~6마리를 한군으로하여 상기 실시예 1 및 실시예 2에서 추출한 겨우살이 추출물을 각각 63 mg/kg, 125 mg/kg, 250 mg/kg, 500 mg/kg, 1000 mg/kg, 2000 mg/kg, 4000 mg/kg의 용량으로 1회 경구 투여하고, 투여한 날로부터 죽은 마우스의 수 및 육안적인 이상 여부를 14일간 관찰하였다.

그 결과는 다음 표 1에 나타내었다.

상기 표 1의 결과에 의하면, 겨우살이(Viscum album var. coloratum) 추출물은 급성독성(LD₅₀)이 4 g/kg 이상으로 거의 무시할 정도이었다.

[실험예 2] 항혈전작용 측정

(1) 출혈시간 측정

170g 내외의 웅성흰쥐 9마리를 1군으로 하여 실시예 2에서 얻은 겨우살이 추출물을 125 mg/kg, 250 mg/kg, 500 mg/kg 씩 12일 동안 하루에 한번 경구로 매일 투여하였다. 이틀에 한번씩 체중을 측정하였고 육안으로 건강상태를 관찰하였다. 호른스트라방법에 준하여 각 쥐에 소듐 펜토바르비톨(Sodium Pentobarbitol; 40 mg/kg)을 복강주사한 후 꼬리 끝으로부터 3mm자르고 37.5℃로 유지된 생리식염수액에 꼬리를 5cm정도 담그고 관찰하였다. 출혈시간으로 꼬리를 자른 직후부터 지혈될때까지의 시간을 측정하여 평가하였다.

(2) 혈액응고시간 측정

출혈시간 측정 후 마취에서 깨어난 각 실험쥐를 다시 에틸에테르로 마취시킨 후 3.13% 소듐 시트레이트(Sodium Citrate)를 0.1 Vol.이 되도록 심장에서 혈액을 채취하였다. 채취한 혈액을 가만히 혼합한 후 플라스틱 시험관에 모으고 시험관에서 혈액 1㎖와 1.7% CaCl₂·2H₂O 200㎕를 반응시키면서 가만히 흔들어 주었다. 혈액응고시간으로는 혈액을 시험관에 가한때부터 응고가 생길 때까지의 시간을 측정하여 평가하였다.

(3) 혈장응고시간 측정

플라스틱 시험관을 37.5℃ 수용액에 담그고 혈장 100㎕, 생리식염수 액 100㎕, 25mM CaCl₂100㎕를 가하여 섞은 후 가만히 흔들어 주면서 CaCl₂를 가한 후부터 혈장이 응고하기까지의 시간을 측정하여 평가하였다.

본 발명에서 얻어진 겨우살이 추출물을 사용한 출혈시간, 혈액응고시간 및 혈장응고시간에 대한 실험결과를 다음 표 2에 나타내었다.

상기에서 본 바와 같이, 본 발명에 의해 얻은 겨우살이 잎과 줄기의 용매 추출물은 혈전의 예방에 대한 효능이 탁월하였다. 특히, 상기 실험예로부터 알 수 있듯이 출혈을 유도한 실험군과 대조군 사이의 출혈시간, 혈액응고시간, 혈장응고시간 등이 상당한 차이를 보였으며, 따라서 본 발명에 따른 추출물이 혈전의 예방에 상당한 효과가 있음을 알 수 있다.

Claims (3)

1. 겨우살이(Viscum album var. coloratum)의 잎 추출물, 줄기 추출물 또는 이들의 혼합 추출물이 유효성분으로 함유되어 있는 것임을 특징으로 하는 혈전치료용 약제조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 약제조성물에 0.1~50중량% 함유되어 있는 것임을 특징으로 하는 혈전치료용 약제조성물.
3. 제1항에 있어서, 상기 약제조성물은 정제, 캡슐제 또는 수액제로 제형화된 것임을 특징으로 하는 혈전치료용 약제조성물.