KR100202733B1 - 트리코데르나 하르지아눔t-39(i-952)의 배양균과 이를함유하는 생물학적 억제 조성물 및 이들을 사용하여 식물을 보호하는 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 생물학적으로 순수한 트리코데르마 하르지아눔 (Trichod erma harzianum)T-39의 새로운 배양균과, T.하르지아눔을 포함하는 생물학적 억제제, 그리고 이를 통해서 보트리티스 시네리아(Botrytis Cinerea)에 의해 유발되는 회색 곰팡이병과 슈레로티니아 슈레로티오룸 (Sclerotinia Sclerotiorum)에 의해 유발되는 백색 고사 등의 병으로부터 식물을 보호하는 방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 항균제, 특히 트리코데르마 하르지아눔(Trichoderma harzianum)을 함유하는 생물학적 억제제로서의 조성물과, 이들을 사용하여 병원성 균류(pathogenic fungi)인 보트리티스 시네리아(Bortytis cinerea : 이하 'B.시네리아'라고 한다), 슈레로티니아 슈레로피오룸(Sclerotinia sclerotiorum : 이하 'S.슈레로티오룸'이라 한다)으로부터 식물을 보호하는 방법에 관한 것이다.
B.시네리아 페르스(B.C Pers.)에 의해 유발되는 회색곰팡이(Gray mold), S.슈레로티오룸 리브 드 베리(S.S Lib : de Bary)에 의한 백색 고사(White rot)는 전 세계의 많은 작물에 심각한 문제이다.
이 병원균들은 포도, 채소, 관상 식물을 포함한 수많은 작물에 침입한다. 덮어서 키우거나 내놓고 키우는 것에 상관없이 병원균이 침입한다. 이들 병원균을 적절히 억제하지 못하면 회색곰팡이와 백색 고사에 의해 수확전이나 수확 후에 저장실이나 운반 도중에 손실을 입게 된다. 이들 병원균은 꽃, 과일, 잎, 뿌리, 가지, 줄기형 잎(: phyloclades), 구근(球根 : bulbs)이나 종자를 포함한 식물의 모든 부분에 침입한다.
이같은 질병을 억제하기 위해 화학 살균제들이 널리 사용되고 있다. 그러나, B.시네리아는 일반적으로 사용되는 살균제에 대하여 내성(耐性)을 갖게 되었다. 이들 살규제로는 다카르복스미드 살균제, 벤즈이미다졸 살균제 등이 있다. 많은 지역의 농부들은 이 내성 때문에 이들 병원균의 문제에 대한 해결책을 찾지 못하고 있다. 그리고, 그 밖의 다른 지역이나 작물 등에서도 장래에 이 문제가 대두될 것이다.
회색 곰팡이와 백색 고사의 전염은 대개 습도가 높고 온도가 10-25사이 그리고 식물의 감각(感覺)기관이 느끼는 수분이 우세할 때 심각하다.
식물의 병원균을 억제하는 데에 길항(拮抗) 작용을 하는 미생물을 이용하는 문제는 널리 연구되는 주제이다. 이 가운데 생물학적 억제와 관련하여 가장 많이 연구된 길항제 중의 하나가 트리코데르마 속(genus)이다. (Y.엘러드 외, 1982, Can. J.Microbiol. 28: 719-725 ; I. 체트 및 R. 베이커, 1981, Phytopatholgy 71 : 286-290 ; M.N. 슈로스 및 J.G. 한코크, 1981, Ann. Rev. Microbiology 35 : 459-463 ; Y. 엘러드 외, 1981, Plant Disease 65 : 675-677 ; Y. 엘러드 외, 1980, Phytopathology 70 : 119-121 ; I 체트 외, 1979, B. 스크립퍼 및 W. 갬스 편집, Slil Borne Plant Pathogens, Academic Press, NY, NY ; Y. 헤이더 외, 1979, phytopatholgy 69: 64-68 ; C. 데니스 및 J. 웹스터, 1971. Trans. Br. mycol. Soc. 57(3), 363-369 : Y. 엘러드, (1990) phygoparasitica 18 : 99-105).
트리코데르마 종(species) 또는 그 균주들(strains)은 각기 다른 균류(fungi)의 종(species)에 대해 상이하게 길항 작용을 한다.(H.D. 웰즈 외, 1972, Phytopathology 62 : 442-447). 이러한 길항 작용에 있어서의 차이는 트리코데르마 종(species) 내부 및 종들(species) 사이에서 모두 발견되었다. (D.K. 벨 외, 1982, Phytopathology 72 : 379-382). 따라서, 그 종들과는 무관하게 트리코데르마의 각 분리물(isolate)은 식물의 질병에 대한 능력에 있어서 각기 다른 특성을 가진다.
B.시네리아와 S.슈레로티오룸은 다른 미생물들과 경쟁하기 때문에 길항작용에 민감하다. 영양소와 공간을 한정하면, 식물 병원균(pathogen)의 포자의 발아와 균사의 성장을 억제되고, 숙주식물(host fof plant)의 감염을 감소시킬 수 있다. 이러한 메카니즘이 회색 곰팡이와 백색고사를 생물학적으로 억제시키는 성공적인 근거가 될 수 있다. 아울러 길항제는 장시간 동일한 니쉬(nisch: nest, 細胞巢)에서 생존할 수 있고, 동시에 병원균에 대해 활성을 가질 수 있다.
본 발명은 식물 병원균인 B.시네리아 페르스와 S.슈레로티오룸에 대해 활성인 것으로 발견된 T. 하르지아눔 종(種)의 새로운 길항제를 제공한다. 이 길항제는 B.시네리아에 의해 발병하는 회색 곰팡이와 S.슈레로티오룸에 의한 백색고사 등의 식물의 질병을 억제하는 데 유용하다. 이 새로운 길항제는 T.하르지아눔 T-39 (수탁번호 I-952)의 균주(strain)이며, 생물학적으로 순수한 배양액(culture)에서 배양된다.
T.하르지아눔 T-39(I-952)는 회색 곰팡이를 억제하는 데 사용되는 다른 살균제들과 교대로 식물의 캐노피(canopy)에 투여될 수 있다. 이 새로운 T.하르지아눔의 균주는 농학적으로(agriculturally) 수용되는 담체(carrier)와 함께 성장ㆍ유지ㆍ혼합되어 -- B.시네리아 및 S.슈레오티오룸에 의해 유발되는 질병들을 억제하는 데 유용한 -- 균학적으로 활성인 생물학적 억제조성물(composition)을 만들어 낼 수 있다. 또한 이 생물학적 억제조성물은 미코파라사이트(mycoparasite)의 영양원(food base)을 함유하거나 또는 담체 자체가 영양원으로 기능을 할 수 있다.
또한 본 발명의 실시예 중의 하나에 의하면, 이 생물학적 억제조성물(biocontrol composition)은 농학적으로 허용되는 적절한 점착물을 함유할 수 있다. 이 생물학적 억제제(biocontrol agent) -- T. 하르지아눔 T-39(I-952)-- 는 B.시네리아 및 S.슈레로티오룸에 의하면 발병한 식물의 질병을 이 억제제를 사용하여 처리하지 아니하는 경우와 비교할 때 50%~70% 감소시킨다. 이 길항제의 사용으로 온실이나 과수원 또는 기타의 장소의 식물의 잎과 열매를 높은 숫자로 유지시킬 수 있다.
T.하르지아눔 T-39(I-952)는 영양소와 공간을 확보하기 위해 균류(fungus)인 B. 시네리아와 S. 슈레로티오룸과 경쟁할 수 있다. 이것이 본 발명인 분리물로 하여금 질병을 억제할 수 있도록 하는 독특한 능력을 부여한다.
이와 함께 본 발명은 회색 곰팡이에 대한 살균제로서 이러한 생물학적 억제조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다. 이같은 살균제로서의 생물학적 억제조성물의 효과적인 사용량은 식물의 각 부분에 따라 다르다.
본 발명의 일부 특정 실시예는 화학적 살균제를 생물학적 억제조성물 내에 포함하여 실시한 것이다. 전술한 T. 하르지아눔 T-39(I-952)는 다른 균류를 죽이거나 성장을 지체시키는 화학적 살균제에 대한 내성을 갖고 있다. 이러한 화학 길항제에 대한 내성에 의하여 본 발명이 B.시네리아 및 S. 슈레로티오룸에 대한 화학적 및 생물학적인 종합 억제제로서 가능하게 된다. 이러한 실시예에서는 T.하르지아눔 T-39(I-952)를 처리한 뒤에 또는 처리에 앞서 화학 살균제만을 쓸 수도 있다.
이와 같은 길항 작용을 하는 T.하르지아눔 종의 새로운 균주가 식물의 병원균인 B.시네리아에 대해 활성이라는 사실이 발견되었다. 전술한 새로운 길항제로서의 보다 양호한 균주는 오이 열매의 필로플레인(phyl oplane)의 천연 마이크로플로라(microflora)에서 분리한 것이다. 이 새로운 균류(fungus)는 생물학적으로 순수한 형태(form)로 배양되었으며, 이를 'T-39'로 명명(tagged)하고 리파이의 분류 기준(M.Rifai, Mycol. Pap. 116)에 의해 확인(identification)하였다.
이 트리코데르마 하르지아눔 리파이 T-39의 보다 양호한 균주는 '특허절차를 위한 미생물기탁의 국제적 승인에 관한 부다페스트 조약'의 규정에 따라 1990년 5월 22일, 프랑스 파리의 국립 미생물 배양기관(Collection Nationale de Cultures de Microorganisms)인 파스퇴르 연구소(Institure Pasteur)에 기탁되었고, 그 수탁 번호는 I-952이다.
이 트리코데르마 하르지아눔 리파이 T-39(I-952)(이하 'T.하르지아눔 리파이 T-39(I-952)'라 한다)와 이로부터 파생된 돌연변이체는 B.시네리아에 의한 회색곰팡이, S. 슈레로티오룸에 의한 백색 고사를 억제하는 에 이용될 수 있다. T.하르지아눔 T-39(I-952)는 전술한 길항작용 외에 식물의 캐노피(canopy)에서 장기간 생존할 수 있는 능력을 가지고 있다. T.하르지아눔 리파이 T-39(I-952)는 회색 곰팡이를 목표로 한 살균제와 교대로 사용할 수 있다. 여기에서 사용하는 살균제의 예를 들면, 베노밀(benomyl), 카프벤다짐(carbendazim), 빈클로졸린(vinclozolin), 이프로디온(iprodione), 프로시미돈(procymidon), 디클로플루아니드(dichlofulani de), 테부코나졸(tebuconazole), 프로클로라즈(prochloraz), 페네타닐(fenethanil), 디에테펜카브(didthencarb), 메토메클란(metomeclan), 클로로탈로닐(chlorothalonil) 등과 이들 살균제의 혼합물이다.
T.하르지아눔 리파이 T-39(I-952)는 여러 가지 재배 시스템에서 식물에 이용할 수 있는 다음의 살충제에 대해 내성을 갖는다. 즉, 폴리옥신(ployoxin) D, 폴리옥신 B, TMTD, CuSO4ㆍ5H2O, 디페닐아민(diphinylamine), 폴펫(folpet), 트리데모르프(tridemorph), 비테르타놀(bitertanol), 디메티리몰(dimethirimol), 트리포린(triforine), 디클로로닛(dichloronit), 로아닐린(roaniline), 부피리멧(bupirimate), 헥사코나졸(hexaconazole), 미클로부타닐(miclobutanil), 페니트로티온(fenitrothion), 포세틸(phosethyl)-Al, 프로피코나졸(propiconazole), 아진포스-메틸(azinphos-methyl), 클로르피리포스(chlorpyrifos), 만코제브(mancozeb), 엔도술판(endosulfan), 메토밀(methomyl), 트리디메폰(tridimefon), 키노메티오넷(quinomethionate), 디니코나졸(diniconazole), 메티다티안(methi dathian), 산염화동(copperoxycloride), 이마잘릴(imazalil), 산화디크실(oxadixyl), 시목사닐(cymoxanil), 메타락실(metalaxil), 트리아디메놀(triadimenol), 디탈림포스(ditalimfos), 황 및 페노코나졸(penocozole) 등이다.
T.하르지아눔 리파이 T-39(I-952)는 길항작용의 광범성과 화학 살균제 및 화학 살충제에 대한 내성 외에도, 장기간 생존능력을 가짐으로써 3~30의 온도대에서 회색 곰팡이와 백색 고사를 억제할 수 있다. 본 발명은 이러한 부차적인 특성에 의하여 온난 농경지대는 물론 건조 지대, 온실이나 노지(in the open) 재배, 농작물의 저장이나 운송시 등 다양한 상황에 이용할 수 있는 다기능적인 생물학적 억제제(biocontrol agent)가 된다.
T.하르지아눔 T-39(I-952)의 이용 방법은 분생자(conidia), 유협포자(chlamydospores), 균사의 체절(hyphal segments) 또는 이들의 상호 결합에 의하여 직접 식물의 캐노피(canopy)에 적용한다. 그러나, 길항제를 직접 이용하는 것은 T.하르지아눔 T-39(I-952)와 농학적 수용 담체를 함유하는 생물학적 억제조성물을 이용하는 것보다 효과적이지 못하다.
이들 생물학적 억제제조성물은 고체나 유동체일 수 있고, 유화제나 현탁제, 고착제(sticking agents)등과 같은 다른 보조제를 포함해도 좋다. 고체상(狀)의 억제조성물은 분말이나 과립 또는 습윤상 분말 등의 형태이며, 반면에 액체 조성물은 물이나 물이 아닌 것을 매질로 하여, 용액(solutions), 현탁액(suspension), 분산(dispersions), 디스팬션(dispensi ons) 또는 응축액의 형태가 된다.
이들 조성물 내의 길항제의 포자나 균사 또는 유협포자(chlamy dospores)의 양은 이들 조성물 그람(g) 당 적어도 106개 이상의 세포가 되어야 한다. 이들 포자의 번식은 이들 조성물 내의 성장 조건이나 이들 조성물이 이용되는 식물에 따라 다르다. 이들 조성물의 저장 시간과 같은 요인은 길항제의 성장 조건에 영향을 미치게 되므로 이들 조성물에 적절한 영양원(food base)을 함유하도록 준비되어야 한다.
본 발명의 실시예에 있어서 사용되는 담체(carrier)는 전체적으로 또는 부분적으로 길항제의 영양원이 된다. 영양원과 담체는 길항제에 충분한 영양과 보다 바람직한 미세 환경을 제공함으로써 길항제의 정착을 쉽게 하고 아울러 장기간 미세환경을 유지함으로써 길항제가 식물기관에 장기간 생존 할 수 있도록 한다.
본 발명의 또 다른 실시예에서, 전술한 생물학적 억제조성물에는 또다른 생물학적 억제 조성물 -- 트리코데르마나 다른 미생물종(種)과 같은 길항작용을 하는 미생물의 다른 분리물 등 -- 이나 또다른 살충제도 포함된다.
이들 생물학적 억제조성물을 식물에 이용하는 데는 곡물 1000평방 미터에 대하여 10~300 밀리리터(ml)의 물에 10~1000 그램(g)의 비율로, 또는 수확 전 후의 곡물에 물을 0.05~0.05% w/w 비율로 사용한다.
B.시네리아나 S.슈레로티오룸의 침입을 받게 되는 숙주 식물의 범위는 매우 넓다. 본 발명은 이 병원균이 널리 유발하는 숙주 식물의 질병들을 억제하는데 효과적이며, 오이, 토마토, 후추, 포도, 장미, 딸기, 가지, 콩, 제라늄, 상치, 당근 및 기타 식물 등을 보호하는 데 효과적이다.
본 발명은 더 양호한 실시예의 제시를 통해 서술될 것이지만 이로써 본 발명을 특정 실시예에 한정하려는 것은 아니며, 본 발명의 범위는 청구범위 내에 포함되는 본 발명의 범위 및 그 대안 및 변경을 포괄한다. 따라서, 양호한 다음의 실시예는 본 발명의 원리 및 개념과 과정을 이해하는 데 매우 유용하고 신속한 것이 될 것이다.
[실시예 1]
본 발명의 트리코데르마 종의 새로운 균주는 다음과 같이 오이에서 분리한 것이다. :-
오이를 물에 놓고 200rpm으로 흔든다. 세척수 일부를 1배 희석하여, 한천평판 배지 위에 0.1 ml를 도포한다. (엘러드 외, phytoparasitica, 1981, vol.9, p.p. 59-67). 그 결과 얻은 순수한 균주를 T-39로 칭하였다. 상기 분리물 T-39는 리파이가 제시하는 방식에 따라 트리코데르마 하르지아눔으로 분류된 것이다. (리파이, M., 1969, Mycol., Pap. 116)
[실시예 2]
T.하르지아눔 T-39(I-952)는 주영양원(a major food source)인 전분과 저수조(a water reservoir)인 세라이트(celite)로 구성된 고체 배지에서 배양되었다. 고체 배지에 T.하르지아눔 T-39(I-952)를 주입함에 따라 성장이 시작되었다. 주영양원과 세라이트, 접종물 등의 혼합물을 알갱이로 만든 후 25를 유지하며 배양하였다. 10일간 배양시키는 동안에 배지를 2차례 뒤집은 뒤 말리고 잘게 부쉈다. 최종생성물은 그람 당 5109내지 11010CFU(Colony Forming Units)를 포함하였다. 생존 능력 테스트 결과, 처음 건조 중량 8.5109CFU/g이 실온에서 6개월 간 7.5109CFU/g으로 조금 달라졌으며, 12개월 후에는 7108CFU/g으로 변하였다.
[실시예 3]
T.하르지아눔 T-39(I-952)를 여러 가지 살균제와 살충제로 보충한 성장배지(감자 포도당 한천)로 시험하였다. T.하르지아눔 T-39(I-952)를 주입하여 24 시간 경과 후 분생자의 발아를 측정하였다. 아울러 20 2에서 T.하르지아눔 T-39(I-952)를 주입한 후 3~4일 내에 균사의 성장도 측정하였다. 살충제는 T.하르지아눔 T-39(I-952)를 억제하는 능력에 따라 그룹별로 배열하였다.(표 1,표 2)
[실시예 4]
트리코데르마 spp. 분리물의 분생자들을 여러 가지 식물 위에 분사하였다. 이어서, 이같이 처리한 식물에 B.시네리아를 주입하였다. 회색 곰팡이가 자랄 수 있도록 162의 습윤한 실내에서 배양하였다. 질병 발생 빈도는 5~10일 내에서 측정되었다. 트리코데르마 spp. 의 여러 가지 분리물에 의한 질병 발생 백분율을 표 3으로 나타냈다. 그 결과를 보면, T.하르지아눔 T-39(I-952)가 질병의 억제에 있어서 다른 분리물보다 훨씬 우수하다는 것을 알 수 있다.
[실시예 5]
포도의 회색 곰팡이에 작용하는 T.하르지아눔 T-39(I-952)의 효과는 각 지역에 따라 권장되는 프로그램에 따라 3 지역에서 이르포디온 조성물만 분사하거나 또는 T-39와 함께 이프로디온을 분사하는 등 여러 가지 태양으로 포도원에서 시험하였다. 열매의 감염 비율을 표 4에 도시하였다. 결과를 보면 T.하르지아눔 T-39(I-952)를 사용할 때 질병이 보다 많이 억제되었다.
[실시예 6]
상업용 온실을 15 3로 유지하고, B. 시네리아에 자연 감염된 장미에 T.하르지아눔 T-39(I-952)을 분사하고 테부코나졸과 디클로플루아니드의 혼합물의 효과와 비교하였다. 위의 활성 생물학적 억제 인자들을 수용액으로 하여 1000/ha 비율로 분사하였다. 5m1m의 지역을 5곳 임의로 선택하여 살포하였다. 표 5는 T.하르지아눔 T-39만을 사용하거나 테부코나졸과 디클로플루아니드의 혼합물과 함께 사용할 때, T.하르지아눔 T-39(I-952)가 B. 시네리아에 의한 줄기 감염을 효과적으로 억제하는 것을 보여준다.
[실시예 7]
T.하르지아눔 T-39(I-952)의 분생자를 B. 시네리아에 의해 자연 감염된 잘라낸 장미꽃들에 분사하였다. 이 꽃들을 6일 동안 습윤실에서 숙성시킨후 회색 곰팡이의 심한 정도를 조사하였다. 표 6에서 볼 수 있듯이 1ml당 107개의 분생자를 함유하는 분사액은 장미의 회색 곰팡이병을 생물학적으로 억제하는 데 매우 효과적이다.
[실시예 8]
B. 시네리아에 의한 회색 곰팡이병이 자연 감염된 포도원의 포도에 1000/ha의 비율로 T.하르지아눔 T-39(I-952) 조성물의 수용액만을 분사하거나 그 대신에 화학 살균제를 함께 분사한 뒤 포도원의 식탁용 포도 송이나 습윤실에서 숙성 중인 수확한 포도송이의 감염을 조사하였다. 그 결과를 나타낸 표 7에서 보면, T.하르지아눔 T-39(I-952)는 여러 가지 방법으로 회색 곰팡이병을 효과적으로 억제한다.
[실시예 9]
온실의 토마토에 1000/ha의 비율로 T.하르지아눔 T-39(I-952)수용액을 분사하였다. 조사 구역은 5곳에서 임의 추출한 20그루로 한 뒤 줄기, 잎, 열매에서 자연 발생하는 B.시네리아를 조사하였다. 열매에 나타나는 증상은 흔한 부패나 고스트(ghost)반점이었다. 표 8에서 볼 수 있듯이 토마토의 작물에 나타나는 회색 곰팡이병의 모든 증상은 T.하르지아눔 T-39(I-952)로 억제되었다.
[실시예 10]
T.하르지아눔 T-39(I-952) 조성물의 수용액을 B. 시네리아에 자연 감염된 딸기 열매에 분사하였다. 처리, 비처리한 열매들을 습윤실에서 숙성시켰다. 표 9에 나타나듯 T.하르지아눔 T-39(I-952) 조성물이 회색 곰팡이를 성공적으로 감소시킨 것을 볼 수 있다.
[실시예 11]
T.하르지아눔 T-39(I-952) 조성물의 수용액을 난방하지 않은 여러 지역의 온실에서 재배된 오이 작물에 분사하였다. 임의로 선택한 블록 단위당 10그루 이상의 식물을 택하여 5~6회 반복 살포하였다. 회색 곰팡이는 온실의 조건 및 B.시네리아의 자연 발생적인 개체수에 따라 열매 및 줄기에 각각 상이하게 발생하였다. T.하르지아눔 T-39(I-952)만을 분사하거나 다른 살균제와 혼합하여 분사하였다. 표 10에서 볼 수 있듯이 T.하르지아눔 (I-952)을 포함하는 조성물은 질병의 발생을 감소시켰다.
[실시예 12 및 13]
T.하르지아눔 T-39(I-952)를 포함하는 조성물의 수용액으로 처리한 포도를 이용하여 포도주를 제조하는 과정에 어떠한 영향을 미치는지 여부를 시험하였다. 준비된 T.하르지아눔 T-39(I-952)를 오탈(이스라엘 북부, 골란고원)에 있는 포도원의 포도(품종 : 소비니온 블랑 (Sauvinion Blanc))에 4/ha의 비율로 1989년 8월 중순 분사하였다. 포도밭 이랑 2개에 각 20m 길이로 백 스프레이어(back sparayer)로 분사하고 이랑 세줄은 분사하지 아니한 완충 이랑으로 하여 분사처리된 이랑과 분리하였다. 나머지 시험 부지에는 살균제를 분사하지 않는대신, 그 지역에서 권장되는 농법에 따른 다른 모든 처리를 수행하였다. 1989년 9월 1일, 10의 포도 10 개의 샘플을 포도원에서 임의적으로 추출하여 실험실로 보냈다. 각 샘플로 포도 쥬스를 만들었고, 만들어진 쥬스에 SO2를 첨가하고 6시간 후 기존 권장 제법에 따라 이스트와 영양소를 첨가하였다. 발효된 쥬스를 이산화탄소 배기 파이프가 달린 1병에서 숙성시켰다.
표 11은 브릭스(Brix) 측정기로 브릭스도 (度: %)를 특정한 결과이다. 이스트의 세포 수는 히모사이토이터(heamocytometer)로 측정하여 그 결과를 표 12으로 작성하였다. 이 결과를 보면, 브릭스 방식으로 측정한 용해될 수 있는 고형물은 T-39로 처리된 항과 이러한 처리를 하지 아니한 대조항에서 다르지 않다는 결론에 이를 수 있다. 또한 최초의 측정에서는 이스트 세포수에 있어서 미세한 차이가 있는데 이는 통계상 중요한 것이 아니며 8일후의 결과는 본질적으로 동일한 것이다. 따라서 포도에 T.하르지아눔 T-39(I-952)를 사용하는 것은 알코올(에탄올) 제품에 중요한 영향을 미치지 못한다. 결국, 포도주의 맛은 T.하르지아눔 T-39(I-952)로 처리한 포도로 만든 포도주와 이러한 처리를 하지 아니한 대조항의 포도주 사이에는 향기와 색, 맛, 투명도 상의 차이가 없다는 것을 알 수 있었다.
[실시예 14]
T.하르지아눔 T-39(I-952)의 분생자를 장미꽃에 분사하였다. 분사 후 일주일 동안 장미꽃에 존재하는 T. 하르지아눔 개체수의 레벨을 조사하였다. T. 하르지아눔 개체수의 레벨을 조사하였다. T. 하르지아눔 개체수의 레벨은 세정제 'Tween-20' 0.001M를 포함한 희석 세척수로 꽃을 세척하여 트리코데르마의 선택배지에 도포하여 측정하였다. 이 분생자의 군체는 5일간 20에서 배양한 후 측정하였다. T. 하르지아눔의 개체수의 레벨을 표 13에서 볼 수 있듯이 그 일주일 동안 현격히 떨어지지 않았다.
[실시예 15]
T.하르지아눔 T-39(I-952) 조성물을 임의로 선택한 들판(101.6 미터 4곳)의 딸기 작물에 0.2%~0.4%의 비율로 분사한 뒤 그 결과를 화학 살균제의 효과와 비교하였다. 4주 후, 딸기 작물의 질병 발생은 표 14와 같이 살균제에 의한 감소 비율과 유사한 비율로 T.하르지아눔 T-39(I-952)에 의해 감소되었다.
[실시예 16]
T.하르지아눔 T-39(I-952) 조성물을 S. 슈레로티오룸에 의해 자연 감염된 당근에 0.2%~0.4% 비율로 사용하였다. 시험대상 당근은 수확 후에 이 조성물로 처리하여 습윤실에서 숙성시켰다. 2주 후에 백색 고사병의 심한 정도를 테스트하였다. 당근의 백색고사는 0.2%~0.4% 비율의 T-39에 의해 크게 감소된 것을 알 수 있었다. 그러나 표 15에서 볼 수 있듯이 권장 비율로 사용한 티오벤다졸의 경우에는 감소되지 않았다.
[실시예 17]
T.하르지아눔 T-39(I-952) 조성물을 온실의 오이 작물에 분사한 뒤 T-39의 개체수를 시간에 따라 잎과 열매에서 측정하였다. 표 16에서 알 수 있듯이, 생물학적 억제 인자는 오이의 캐노피에 정착되었다.
a : 살충제의 농도 2ppm 이하로 제한
b : 살충제의 농도 2~15ppm로 제한
a : 살충제의 농도 15ppm 이상에서 제한
a : 온실 재배
a = 투여물 g/ha
b = 4kg/ha
c = A : 캠플(cap fall), B : 번치클로즈(bunch clos), C : 버레이런(Verairon) D : 수확 전(pre-harvest_
d = 처리 3.후 22일
e = 처리 4.후 10일
f = 처리 4.후 14일
g = 처리 4.후 4일
h = 처리 4.후 21일
a = 습윤한 실내에서 6일 경과 후
b = 0 (건강한 상태) ~ 5 (완전 감염)
a = 재배 품종
b = 포도원에서 시험
c = 수확한 뒤 7일 경과 후 시험
a = 10 그루당 감염 부위의 수
b = 질병 지수 : 0 (건강한 열매) ~ 5 (열매가 완전히 반점으로 뒤덮임)
a = 질병 지수 : 0 (건강한 열매) ~ 5 (완전한 부패)
a = 헥타르 (ha) 당 1000분사함
b = 이스라엘의 지역명
각 날짜별 처리상의 차이는 던컨(Duncan)의 복합 영역 테스트(Multipl Range Test)에 따라 통계상 중요하지 않은 정도이다. (P = 0.05)
각 날짜별 처리상의 차이는 던컨(Duncan)의 광범위 테스트(Multiple Range Test)에 따라 통계상 중요하지 않은 정도이다.(P = 0.05)
a = 질병 평가 4주 전에 분사함
a = 처리 2주 후
b = 0(건강한 상태) ~ 5(완전 부패)
Claims (18)
- 트리코데르마 하르지아눔 종의 길항제인 미코패러사이트의 균주(strain)로서, 트리코데르마 하르지아눔 리파이 T-39(I-952)라고 명명한 균주를 생물학적으로 순수하고 안정되게 배양하는 것을 특징으로 하는 배양균.
- 제 1항에 있어서, 상기 배양균은, 균류(菌類)와 해충의 성장을 지체시키거나 치사시킬 수 있는 화학 농약에 대하여 내성(耐性)을 가지는 것을 특징으로 하는 배양균.
- 제2항에 있어서, 상기 화학 농약은 디카르복스미드, 카르벤다짐, 베노밀, 상기 카르벤다짐과 디에토펜카브, 클로로탈로닐, 메토메클란, 페네타닐, 프로시미돈, 플루아지논, 테부코나졸, 프로클로라즈, 및 NPC, 폴리옥신D, 폴리옥신B, 디클로플루아니드, 티람, CuSO4.5H2O, 디페닐아민, 폴펫, 트리데모르프, 비테르타놀, 그리고 디메티리몰, 트리포린, 디클로로니트로아닐린, 부피리메이트, 헥사코나졸, 미클로부타닐, 페니트로티온, 포스페틸, 프로피코나졸, 아진포스메틸, 클로로피리포스, 만코제브, 엔도설판, 메토밀, 트리아디메폰, 키노메티오네이트, 디니코나졸, 메티다티온, 산염화동, 이마잘릴, 메탈락실, 오라디질+시목사닐+만코제브, 트리아디메놀, 디탈림포스, 황, 펜코나졸로 구성된 그룹에서 선택되는 살충제 또는 살균제인 것을 특징으로 하는 배양균.
- 제3항에 있어서, 상기 디카르복시미드 살균제는 이프로디온(ipro dione)과 빈클로졸린(vinclozolin)으로 구성되는 집단에서 선택되는 것을 특징으로 하는 배양균.
- 트리코데르마 하르지아눔 리파이 T-39(I-952)라고 명명한 트리코데르마 하르지아눔 종의 길항제 균주를 생물학적으로 순수하고 안정되게 배양한 효율적인 양의 배양균(菌)과 적절한 농학적 수용 담체를 함유하는 것을 특징으로 하는 생물학적 억제조성물.
- 제5항에 있어서, 상기 길항제인 배양균의 농도가 105개 (세포)/g이상인 것을 특징으로 하는 생물학적 억제조성물.
- 제 5항에 있어서, 상기 배양균 내의 길항제가 분생자(分生子), 클라미도스포러스(chlamydospores), 균사(菌絲)의 체절, 또는 이들 세포 유형의 혼합물 형태로 존재하는 것을 특징으로 하는 생물학적 억제조성물.
- 제5항 내지 제7항 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 담체가 배양균 내에 길항제의 영양원을 포함하는 것을 특징으로 하는 생물학적 억제조성물.
- 제5항 내지 제7항 중 어느 하나의 항에 있어서, 디카르복스미드, 카르벤다짐, 베노밀, 상기 카르벤다짐과 디에토펜카브, 클로로탈로닐, 메토메클란, 페네타닐, 프로시미돈, 플루아지논, 테부코나졸, 프로클로라즈, 및 NPC, 폴리옥신D, 폴리옥신B, 디클로플루아니드, 티람, CuSO4.5H2O, 디페닐아민, 폴펫, 트리데모르프, 비테르타놀, 그리고 디메티리몰, 트리포린, 디클로로니트로아닐린, 부피리메이트, 헥사코나졸, 미클로부타닐, 페니트로티온, 포스페틸, 프로피코나졸, 아진포스메틸, 클로로피리포스, 만코제브, 엔도설판, 메토밀, 트리아디메폰, 키노메티오네이트, 디니코나졸, 메티다티온, 산염화동, 이마잘릴, 메탈락실, 오라디질+시목사닐+만코제브, 트리아디메놀, 디탈림포스, 황, 펜코나졸로 구성된 그룹에서 선택되는 살충제 또는 살균제를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 생물학적 억제조성물.
- 제9항에 있어서, 상기 디카르복시미드 화학 살균제는 이프로디온(iprodione)과 빈클로졸린(vinclozolin)으로 구성되는 집단에서 선택되는 것을 특징으로 하는 생물학적 억제조성물.
- 농학적 수용 담체와, 트리코데르마 하르지아눔 리파이 T-39 (I-952)로 명명한 트리코데르마 하르지아눔 종의 길항제인 균주를 생물학적으로 순수하고 안정되게 배양한 배양균을 살균에 적합한 양으로 혼합하여, 이 혼합 조성물을 식물이나 작물에 투여함으로써 식물이나 작물의 불필요한 균류의 성장을 억제하여 식물 또는 작물을 보호하는 방법.
- 제11항에 있어서, 상기 불필요한 균류는 병원성 균류인 보트리티스 시네리아인 것을 특징으로 하는 식물 또는 작물을 보호하는 방법.
- 제11항에 있어서, 상기 불필요한 균류는 병원성 균류인 슈레로티니아 슈레로티오룸인 것을 특징으로 하는 식물 또는 작물을 보호하는 방법.
- 제11항에 있어서, 상기 배양균의 길항제의 농도가 상기 혼합조성물 그람당 105개(세포)이상인 것을 특징으로 하는 식물 또는 작물을 보호하는 방법.
- 제11항에 있어서, 상기 배양균 내의 길항제는 분생자, 클라미도스포러스, 균사의 체절, 또는 이들 세포 유형의 혼합물 형태인 것을 특징으로 하는 식물 또는 작물을 보호하는 방법.
- 제11항 내지 제15항 중 어느 하나의 항에 있어서, 상기 담체는 상기 배양균 내에 포함된 길항제의 영양원을 포함하는 것을 특징으로 하는 식물 또는 작물을 보호하는 방법.
- 제11항 내지 제15항 중 어느 하나의 항에 있어서, 디카르복스미드, 카르벤다짐, 베노밀, 상기 카르벤다짐과 디에토펜카브, 클로로탈로닐, 메토메클란, 페네타닐, 프로시미돈, 플루아지논, 테부코나졸, 프로클로라즈, 및 NPC, 폴리옥신D, 폴리옥신B, 디클로플루아니드, 티람, CuSO4.5H2O, 디페닐아민, 폴펫, 트리데모르프, 비테르타놀, 그리고 디메티리몰, 트리포린, 디클로로니트로아닐린, 부피리메이트, 헥사코나졸, 미클로부타닐, 페니트로티온, 포스페틸, 프로피코나졸, 아진포스메틸, 클로로피리포스, 만코제브, 엔도설판, 메토밀, 트리아디메폰, 키노메티오네이트, 디니코나졸, 메티다티온, 산염화동, 이마잘릴, 메탈락실, 오라디질+시목사닐+만코제브, 트리아디메놀, 디탈림포스, 황, 펜코나졸로 구성된 그룹에서 선택되는 살충제 또는 살균제를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 식물 또는 작물을 보호하는 방법.
- 제17항에 있어서, 상기 디카르복스미드 살균제는 이프로디온(iprodione)과 빈클로졸린(Vinclozolin)으로 구성되는 집단에서 선택되는 것을 특징으로 하는 식물 또는 작물을 보호하는 방법.
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