JPWO2021107603A5 - - Google Patents
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Claims (25)
- 式(I):
N末端拡張ドメイン-コアドメイン(I)
[式(I)では、
-は結合であり;
N末端拡張ドメインは、配列番号:3~5アのミノ酸配列のいずれか1つからなるポリペプチドであり;および
コアドメインは、配列番号:20のアミノ酸配列中の15、50、58、97位のアミノ酸およびそれらの組み合わせからなる群から選択されるいずれか1つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換される、配列番号:20のポリペプチド、または配列番号:20から誘導されるポリペプチドであり;
ここで、配列番号:20の15位のアミノ酸であるアルギニン(R)は、アラニン(A)、アスパラギン酸(D)、アスパラギン(N)、システイン(C)、グルタミン酸(E)、グルタミン(Q)、グリシン(G)、ヒスチジン(H)、イソロイシン(I)、ロイシン(L)、リシン(K)、メチオニン(M)、フェニルアラニン(F)、プロリン(P)、セリン(S)、トレオニン(T)、トリプトファン(W)、チロシン(Y)、またはバリン(V)で置換され、
配列番号:20のアミノ酸配列における50位のアミノ酸であるアスパラギン(N)は、アラニン、アルギニン(R)、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、またはバリンで置換され、
配列番号:20のアミノ酸配列における58位のアミノ酸であるセリン(S)は、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、またはバリンで置換され、および
配列番号:20のアミノ酸配列における97位のアミノ酸であるアスパラギン酸(D)は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、またはバリンで置換される]
で表される増殖分化因子15(GDF15)変異体。 - コアドメインが、以下のバリエーション(1)~(6):
(1)配列番号:20のアミノ酸配列中の15位のアミノ酸であるアルギニン(R)が、アスパラギン(N)で置換される変異;
(2)配列番号:20のアミノ酸配列中の50位のアミノ酸であるアスパラギン(N)が、ロイシン(L)で置換される変異;
(3)配列番号:20のアミノ酸配列中の58位のアミノ酸であるセリン(S)が、リシン(K)、アルギニン(R)、アスパラギン(N)、アスパラギン酸(D)、グルタミン酸(E)、システイン(C)、またはロイシン(L)で置換される変異;
(4)配列番号:20のアミノ酸配列中の97位のアミノ酸であるアスパラギン酸(D)が、ロイシン(L)で置換される変異;
(5)配列番号:20のアミノ酸配列中の50位のアミノ酸であるアスパラギン(N)、および配列番号:20のアミノ酸配列中の97位のアミノ酸であるアスパラギン酸(D)が、システイン(C)またはセリン(S)でそれぞれ置換される変異;および
(6)配列番号:20のアミノ酸配列中の15位のアミノ酸であるアルギニン(R)が、アスパラギン(N)で置換され、および配列番号:20のアミノ酸配列中の58位のアミノ酸であるアスパラギン(N)が、リシン(K)またはアルギニン(R)で置換される変異;
からなる群から選択されるいずれか1つの変異を含む、請求項1に記載のGDF15変異体。 - コアドメインが、配列番号:6~19から選択されるいずれか1つのアミノ酸配列からなる、請求項2に記載のGDF15変異体。
- GDF15変異体が、配列番号:3によって表されるアミノ酸配列からなるN末端伸長ドメインと、配列番号:8、9、または20によって表されるアミノ酸配列からなるコアドメインとを含む、請求項1に記載のGDF15変異体。
- GDF15変異体が、配列番号:4のアミノ酸配列からなるN末端伸長ドメインと、配列番号:8、9、または20のアミノ酸配列からなるコアドメインとを含む、請求項1に記載のGDF15変異体。
- GDF15変異体が、配列番号:5のアミノ酸配列からなるN末端伸長ドメインと、配列番号:6~19から選択されるいずれか1つのアミノ酸配列からなるコアドメインとを含む、請求項1に記載のGDF15変異体。
- GDF15変異体が、配列番号:21~39から選択されるいずれか1つのアミノ酸配列からなる、請求項1に記載のGDF15変異体。
- 請求項1に記載のGDF15変異体が、ヒトIgG Fcまたはその変異体に結合する、長時間作用型増殖分化因子15(GDF15)融合タンパク質であって、
ヒトIgG Fcまたはその変異体が、
配列番号:42、44、および46から選択されるいずれか1つのアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド;および
配列番号43、45、および47から選択されるいずれか1つのアミノ酸配列を含む第2のポリペプチを含み;および
IgG Fcまたはその変異体の第1のポリペプチドのC末端またはIgG Fcまたはその変異体の第2のポリペプチドのC末端が、GDF15変異体のN末端に結合する、
長時間作用型GDF15融合タンパク質。 - GDF15変異体が、IgG Fcまたはその変異体に、リンカーを介して結合する、請求項8に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質。
- リンカーが、(G4S) n 、GS(G4S) n 、GS(EEEA) n 、(EEEA) n 、GS(EAAAK) n 、(EAAAK) n 、またはGSGGSS(PT) n であり、ここで、nは1~10の整数である、請求項9に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質。
- リンカーが、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (配列番号:48)、GSGGGGSGGGGSGGGGS (配列番号:92)、GSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (配列番号:93)、GSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (配列番号:94)、GSEEEAEEEAEEEAEEEAEEEAEEEA (配列番号:95)、GSGGSSPTPTPTPTPTPTPTPTPTPT (配列番号:96)、またはGSEAAAKEAAAKEAAAKEAAAKEAAAK (配列番号:97)である、請求項10に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質。
- GDF15変異体が、少なくとも1つのN結合型グリカンを含みうる、請求項8に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質。
- GDF15変異体が、配列番号:21~39からなる群から選択されるアミノ酸配列のいずれか1つを含む、請求項8に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質。
- 請求項8に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質の2つを含む、融合タンパク質二量体。
- 請求項1に記載のGDF15変異体または請求項1に記載のGDF15変異体がヒトIgG Fcまたはその変異体に結合する長時間作用型GDF15融合タンパク質をコードする、単離された核酸分子。
- 請求項15に記載の核酸分子を含む、発現ベクター。
- 請求項16に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
- 有効成分として、
(a)請求項1に記載のGDF15変異体、
(b)請求項1に記載のGDF15変異体が、ヒトIgG Fcまたはその変異体に結合する長時間作用型GDF15融合タンパク質、または
(c)2つの長時間作用型GDF15融合タンパク質(b)を含む融合タンパク質二量体、
を含む、医薬組成物。 - 有効量の、
(a)請求項1に記載のGDF15変異体、
(b)請求項1に記載のGDF15変異体が、ヒトIgG Fcまたはその変異体に結合する長時間作用型GDF15融合タンパク質、または
(c)2つの長時間作用型GDF15融合タンパク質(b)を含む融合タンパク質二量体、
を含む、治療を必要とする個体における、糖尿病、肥満、脂質異常症、またはメタボリックシンドロームを予防または治療するための医薬組成物。 - リンカーが、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (配列番号:48)、GSGGGGSGGGGSGGGGS (配列番号:92)、GSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (配列番号:93)、GSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (配列番号:94)、GSEEEAEEEAEEEAEEEAEEEAEEEA (配列番号:95)、GSGGSSPTPTPTPTPTPTPTPTPTPT (配列番号:96)、またはGSEAAAKEAAAKEAAAKEAAAKEAAAK (配列番号:97)である、GDF15変異体がヒトIgG Fcまたはその変異体にリンカーを介して結合する、請求項13に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質。
- GDF15変異体が配列番号:28または30のアミノ酸配列を含み;
IgG Fcまたはその変異体の第1のポリペプチドが配列番号:46のアミノ酸配列を含み;
IgG Fcまたはその変異体の第1のポリペプチドが配列番号:47のアミノ酸配列を含み;および
リンカーが配列番号:95または97の配列からなる、請求項20に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質。 - 長時間作用型GDF15融合タンパク質が、配列番号:98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108または109のアミノ酸配列を含む、請求項20に記載の長時間作用型GDF15融合タンパク質。
- 請求項1に記載の増殖分化因子15(GDF15)変異体およびIgG Fcを含む複合体であって、
複合体が、以下の式(II):
IgG Fc-(L)m-N末端拡張ドメイン-コアドメイン (II)
[式中、
mは0または1の整数であり、
Lは配列番号:48、92、93、94、95、96および97からなる群から選択されるリンカーであり、
IgG Fcは配列番号:42、44または46のアミノ酸配列を含み、および
N末端拡張ドメインおよびコアドメインは請求項1と同意義である]
で表される、複合体。 - N末端拡張ドメイン-コアドメインが、配列番号:21~39からなる群から選択されるアミノ酸配列のいずれか1つを含む、請求項23に記載の複合体。
- 複合体が、配列番号:50~91および98~109からなる群から選択されるアミノ酸配列のいずれか1つを含む、請求項23に記載の複合体。
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