JPWO2019145475A5 - - Google Patents
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Description
SEQ ID NO:15は、高感度緑色蛍光タンパク質（eGFP）のアミノ配列である。
[本発明1001]
可溶性封入抗原を含む酸化安定性ポリマーソームであって、
該可溶性封入抗原が、
i）ポリペプチド、
ii）糖質、
iii）アンチセンスオリゴヌクレオチドではなく、好ましくはDNA分子もしくはmRNA分子である、ポリヌクレオチド、
iv）i）および/またはii）および/またはiii）の組合せ
からなる群より選択される、
酸化安定性ポリマーソーム。
[本発明1002]
ポリマーソームが、CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を誘発する能力を有し、好ましくは該誘発がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの誘発である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1003]
抗原が膜タンパク質（MP）または膜結合ペプチド（MAP）の可溶性部分を含み、好ましくは抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、さらに好ましくは抗原がSEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13およびSEQ ID NO:14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドを含む、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1004]
ポリマーソームが血清成分の存在下で酸化安定性であり、好ましくは該酸化安定性がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの酸化安定性である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1005]
ポリマーソームがエンドソーム内で安定であり、好ましくは該安定性がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの安定性である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1006]
ポリマーソームが、リポソームの対応する酸化安定性と比較して改良された酸化安定性を有し、好ましくは該改良された安定性がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの改良された安定性である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1007]
ポリマーソームが、可溶性封入抗原を含むその内容物を酸化非依存的に放出して、CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答をトリガーする能力を有し、好ましくは該放出がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの放出である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1008]
ポリマーソームが、CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を含む細胞性免疫応答を誘発する能力を有し、好ましくは該免疫応答がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの免疫応答である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1009]
ポリマーソームが、細胞性免疫応答および/または体液性免疫応答を誘発する能力を有し、細胞性免疫応答がCD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を含み、好ましくは免疫応答がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの免疫応答である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1010]
体液性免疫応答が特異的抗体の生産を含み、さらに好ましくは該免疫応答がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの免疫応答である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1011]
ポリマーソームが、エフェクターCD4
（＋）
T細胞の出現頻度を強化する能力を有し、好ましくは該強化がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの強化である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1012]
細胞性免疫応答がT細胞媒介性免疫応答を含み、好ましくは該免疫応答がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの免疫応答である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1013]
ポリマーソームが、遊離の抗原と比較して抗原特異的CD8
（＋）
T細胞のクローン拡大を強化する能力を有し、好ましくは該拡大がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの拡大である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1014]
ポリマーソームが、抗原特異的エフェクターCD8
（＋）
T細胞を誘導する能力を有し、好ましくは該誘導がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの誘導である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1015]
ポリマーソームが、抗原特異的CD8
（＋）
T細胞の細胞傷害性表現型を強化する能力を有し、好ましくは該強化がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの強化である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1016]
ポリマーソームが、リンパ節常在性マクロファージおよび/またはB細胞をターゲティングする能力を有し、好ましくは該ターゲティングがインビボ、エクスビボまたはインビトロでのターゲティングである、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1017]
ポリマーソームが還元安定性であり、好ましくは該ポリマーソームが血清成分の存在下で還元安定性であり、さらに好ましくは該還元安定性がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの還元安定性である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1018]
ポリマーソームが、低減した透過性を有し、好ましくは該低減した透過性が、リポソームの対応する透過性との比較であり、さらに好ましくは該透過性がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの透過性である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1019]
ポリマーソームが、エンドソーム内でその内容物を放出する能力を有し、好ましくは該エンドソームが後期エンドソームであり、さらに好ましくは該放出がインビボ、エクスビボまたはインビトロでの放出である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1020]
以下の能力のうちの1つまたは複数を有する、前記本発明のいずれかのポリマーソーム:
i）細胞性免疫応答を誘発する能力であって、好ましくは該細胞性免疫応答がCD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を含み、さらに好ましくは該細胞性免疫応答がCD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答であり、最も好ましくは該細胞性免疫応答がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する応答であり、さらに最も好ましくは該細胞性免疫応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドに対する応答である、細胞性免疫応答を誘発する能力;
ii）エンドソーム内でポリマーソーム内容物を放出する能力であって、好ましくは該エンドソームが後期エンドソームであり、さらに好ましくは該内容物がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、最も好ましくは該内容物が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドを含む、エンドソーム内でポリマーソーム内容物を放出する能力;
iii）ポリマーソーム内容物を酸化非依存的に放出してCD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答をトリガーする能力であって、好ましくは該内容物がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、さらに好ましくは該内容物が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドを含む、ポリマーソーム内容物を酸化非依存的に放出してCD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答をトリガーする能力;
iv）抗原に対する免疫応答を刺激する能力であって、好ましくは該抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、さらに好ましくは該抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドを含む、抗原に対する免疫応答を刺激する能力;
v）CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答によって誘導される交差防御をトリガーする能力であって、好ましくは該応答がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する応答であり、さらに好ましくは該応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドに対する応答である、CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答によって誘導される交差防御をトリガーする能力;
vi）ペプチドまたはタンパク質を抗原提示細胞（APC）に送達する能力であって、好ましくは該ペプチドまたはタンパク質が、インフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含むか、または該可溶性部分に由来し、さらに好ましくは該ペプチドまたはタンパク質が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドを含むか、該ポリペプチドに由来する、ペプチドまたはタンパク質を抗原提示細胞（APC）に送達する能力;
vii）CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答および/またはCD4
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を含む免疫応答をトリガーする能力であって、好ましくは該応答がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、卵白アルブミン（OVA）、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する応答であり、さらに好ましくは該応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドに対する応答である、CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答および/またはCD4
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を含む免疫応答をトリガーする能力;
viii）対象における免疫応答を刺激する能力であって、好ましくは該応答がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する応答であり、さらに好ましくは該応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドに対する応答である、対象における免疫応答を刺激する能力;
ix）非ヒト動物を免疫処置する能力であって、好ましくは該免疫処置がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する免疫処置であり、さらに好ましくは該免疫処置が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13およびSEQ ID NO:14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドに対する免疫処置である、非ヒト動物を免疫処置する能力;
x）ポリマーソームが、該ポリマーソームなしでの抗原の対応する抗原性と比較して、改変された抗原性を有することであって、好ましくは該抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分であり、さらに好ましくは該抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドである、改変された抗原性を有すること;
xi）ポリマーソームが、該ポリマーソームなしでの抗原の対応する免疫原性と比較して、改変された免疫原性を有することであって、好ましくは該免疫原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分であり、さらに好ましくは該免疫原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13およびSEQ ID NO:14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドである、改変された免疫原性を有すること。
[本発明1021]
以下の特性のうちの1つまたは複数を有する、前記本発明のいずれかのポリマーソーム:
i）ポリマーソームが酸化安定性膜を含む、および/または
ii）ポリマーソームが合成物である、および/または
iii）ポリマーソームが非封入抗原を含まないか、または非封入抗原と混合されている、および/または
iv）ポリマーソームが両親媒性ポリマーの膜を含む、および/または
v）ポリマーソームが、ベシクル膜を形成する両親媒性合成ブロック共重合体を含む、および/または
vi）ポリマーソームが70nm超の直径を有し、好ましくは該直径が約100nm～約1μm、または約100nm～約750nm、または約100nm～約500nm、または約125nm～約250nm、約140nm～約240nm、約150nm～約235nm、約170nm～約230nm、または約220nm～約180nm、または約190nm～約210nmの範囲であり、最も好ましくは該直径が約200nmである、および/または
vii）ポリマーソームがベシクルの形態を有する、
viii）ポリマーソームが自己集合性である。
[本発明1022]
ポリマーソームがポリマーソームの集合体の形態にあり、ポリマーソームの集合体の平均直径が約100nm～約1μm、または約100nm～約750nm、または約100nm～約500nm、または約125nm～約250nm、約140nm～約240nm、約150nm～約235nm、約170nm～約230nm、または約220nm～約180nm、または約190nm～約210nmの範囲にある、本発明1021のポリマーソーム。
[本発明1023]
抗原が免疫原である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1024]
抗原が、i）自己抗原、ii）非自己抗原、iii）非自己免疫原およびiv）自己免疫原からなる群より選択される、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1025]
抗原が、以下:
i）ウイルスポリペプチド配列と少なくとも80％以上（例えば少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドであって、好ましくは該ウイルスポリペプチド配列がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニンまたはブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質であり、さらに好ましくは該ウイルスポリペプチド配列が、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択される、ポリペプチド;
ii）細菌ポリペプチド配列と少なくとも80％以上（例えば少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチド;
iii）哺乳類ポリペプチド配列または鳥類ポリペプチド配列と少なくとも80％以上（例えば少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるポリペプチドであって、好ましくは該哺乳類ポリペプチド配列または該鳥類ポリペプチド配列が卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドであり、さらに好ましくは該哺乳類ポリペプチド配列または該鳥類ポリペプチド配列が、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10およびSEQ ID NO:11からなる群より選択される、ポリペプチド
からなる群より選択される、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1026]
哺乳類ポリペプチド配列が、ヒト、齧歯類、ウサギおよびウマのポリペプチド配列からなる群より選択される、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1027]
抗原が抗体またはそのフラグメントである、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1028]
抗原が、以下:
i）インフルエンザヘマグルチニン（HA）、好ましくはSEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8からなる群より選択されるもの、
ii）ブタインフルエンザヘマグルチニン（HA）、好ましくはSEQ ID NO:6、
iii）卵白アルブミン（OVA）、好ましくはSEQ ID NO:4、
iv）B16ペプチド、好ましくはSEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10およびSEQ ID NO:11からなる群より選択されるもの、
v）MC38ペプチド、好ましくはSEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2およびSEQ ID NO:3からなる群より選択されるもの、
vi）B16ペプチドおよびMC38ペプチド、好ましくは該ペプチドは、群:i）SEQ ID NO:1～3およびii）SEQ ID NO:9～11から独立して選択される、
vii）ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質およびその可溶性フラグメント、好ましくはSEQ ID NO:12、13または14のフラグメント
からなる群より選択される、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1029]
カチオン性ポリマーソーム、アニオン性ポリマーソーム、ノニオン性ポリマーソームおよびそれらの混合物からなる群より選択される、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1030]
ブロック共重合体または両親媒性ポリマーが本質的に非免疫原性または本質的に非抗原性であり、好ましくはブロック共重合体または両親媒性ポリマーが非免疫原性または非抗原性である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1031]
ブロック共重合体または両親媒性ポリマーが免疫賦活薬でもアジュバントでもない、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1032]
両親媒性ポリマーがジブロックまたはトリブロック（A-B-AまたはA-B-C）共重合体を含む、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1033]
両親媒性ポリマーが共重合体ポリ（N-ビニルピロリドン）-b-PLAを含む、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1034]
両親媒性ポリマーが、カルボン酸、アミド、アミン、アルキレン、ジアルキルシロキサン、エーテルまたはアルキレンスルフィドのモノマー単位を少なくとも1つ含む、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1035]
両親媒性ポリマーが、オリゴ（オキシエチレン）ブロック、ポリ（オキシエチレン）ブロック、オリゴ（オキシプロピレン）ブロック、ポリ（オキシプロピレン）ブロック、オリゴ（オキシブチレン）ブロックおよびポリ（オキシブチレン）ブロックからなる群より選択されるポリエーテルブロックである、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1036]
両親媒性ポリマーがポリ（ブタジエン）-ポリ（エチレンオキシド）（PB-PEO）ジブロック共重合体であるか、両親媒性ポリマーがポリ（ジメチルシロキサン）-ポリ（エチレンオキシド）（PDMS-PEO）ジブロック共重合体である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1037]
PB-PEOジブロック共重合体が5～50ブロックPBおよび5～50ブロックPEOを含むか、PB-PEOジブロック共重合体が好ましくは5～100ブロックPDMSおよび5～100ブロックPEOを含む、本発明1036のポリマーソーム。
[本発明1038]
両親媒性ポリマーがポリ（ラクチド）-ポリ（エチレンオキシド）/1-パルミトイル-2-オレイル-sn-グリセロ-3-ホスホ-L-セリン（PLA-PEO/POPC）共重合体であり、好ましくは該PLA-PEO/POPCが75対25（例えば75/25）のPLA-PEO対POPC（例えばPLA-PEO/POPC）の比を有する、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1039]
両親媒性ポリマーがポリ（カプロラクトン）-ポリ（エチレンオキシド）/1-パルミトイル-2-オレイル-sn-グリセロ-3-ホスホ-L-セリン（PCL-PEO/POPC）共重合体であり、好ましくは該PCL-PEO/POPCが75対25（例えば75/25）のPCL-PEO対POPC（例えばPCL-PEO/POPC）の比を有する、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1040]
両親媒性ポリマーがポリブタジエン-ポリエチレンオキシド（BD）である、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1041]
ジブロック共重合体PBD
21
-PEO
14
（BD21）およびトリブロック共重合体PMOXA
12
-PDMS
55
-PMOXA
12
を含む、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1042]
1つまたは複数のコンパートメントを含む、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1043]
ポリマーソームが1つまたは複数のコンパートメントを含み、該1つまたは複数のコンパートメントのそれぞれが、少なくとも1つのペプチド、タンパク質、および核酸を封入し、好ましくは該ペプチド、タンパク質、および核酸のうちの該少なくとも1つが免疫原性または抗原性であり、さらに好ましくは該1つまたは複数のコンパートメントのそれぞれが、同じ両親媒性ポリマーまたは異なる両親媒性ポリマーで構成される、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1044]
ポリマーソームが2つ以上のコンパートメントを含み、該コンパートメントが外側ブロック共重合体ベシクルと少なくとも1つの内側ブロック共重合体ベシクルとを含み、該少なくとも1つの内側ブロック共重合体ベシクルが外側ブロック共重合体ベシクルの内部に封入され、好ましくは外側ブロック共重合体ベシクルが、
i）ポリ［スチレン-b-ポリ（L-イソシアノアラニン（2-チオフェン-3-イル-エチル）アミド）］（PS-PIAT）、
ii）ポリ（ブタジエン）-ポリ（エチレンオキシド）（PBD-PEO）、
iii）ポリ（エチレンオキシド）-ポリ（カプロラクトン）（PEO-PCL）、
iv）ポリ（エチルエチレン）-ポリ（エチレンオキシド）（PEE-PEO）、
v）ポリ（エチレンオキシド）-ポリ（乳酸）（PEO-PLA）、
vi）ポリ（イソプレン）-ポリ（エチレンオキシド）（PI-PEO）、
vii）ポリ（2-ビニルピリジン）-ポリ（エチレンオキシド）（P2VP-PEO）、
viii）ポリ（エチレンオキシド）-ポリ（N-イソプロピルアクリルアミド）（PEO-PNIPAm）、
ix）ポリ（スチレン）-ポリ（アクリル酸）（PS-PAA）、
x）ポリ（エチレングリコール）-ポリ（プロピレンスルフィド）（PEG-PPS）、
xi）ポリ（2-メチルオキサゾリン）-ポリ（ジメチルシロキサン）-ポリ（2-メチルオキサゾリン）（PMOXA-PDMS-PMOXA）、
xii）ポリ（エチレンオキシド）-ポリ（ジメチルシロキサン）-ポリ（2-メチルオキサゾリン）（PEO-PDMS-PMOXA）、および
xiii）ポリ（メチルフェニルシラン）-ポリ（エチレンオキシド）（PMPS-PEO-PMPS-PEO-PMPS）
からなる群より独立して選択される共重合体で形成されたポリマーソームであり、さらに好ましくは該少なくとも1つの内側ブロック共重合体ベシクルが、
i）ポリ［スチレン-b-ポリ（L-イソシアノアラニン（2-チオフェン-3-イル-エチル）アミド）］（PS-PIAT）、
ii）ポリ（ブタジエン）-ポリ（エチレンオキシド）（PBD-PEO）、
iii）ポリ（エチレンオキシド）-ポリ（カプロラクトン）（PEO-PCL）、
iv）ポリ（エチルエチレン）-ポリ（エチレンオキシド）（PEE-PEO）、
v）ポリ（エチレンオキシド）-ポリ（乳酸）（PEO-PLA）、
vi）ポリ（イソプレン）-ポリ（エチレンオキシド）（PI-PEO）、
vii）ポリ（2-ビニルピリジン）-ポリ（エチレンオキシド）（P2VP-PEO）、
viii）ポリ（エチレンオキシド）-ポリ（N-イソプロピルアクリルアミド）（PEO-PNIPAm）、
ix）ポリ（スチレン）-ポリ（アクリル酸）（PS-PAA）、
x）ポリ（エチレングリコール）-ポリ（プロピレンスルフィド）（PEG-PPS）、
xi）ポリ（2-メチルオキサゾリン）-ポリ（ジメチルシロキサン）-ポリ（2-メチルオキサゾリン）（PMOXA-PDMS-PMOXA）、
xii）ポリ（エチレンオキシド）-ポリ（ジメチルシロキサン）-ポリ（2-メチルオキサゾリン）（PEO-PDMS-PMOXA）、および
xiii）ポリ（メチルフェニルシラン）-ポリ（エチレンオキシド）（PMPS-PEO-PMPS-PEO-PMPS）
からなる群より独立して選択される共重合体で形成されたポリマーソームである、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1045]
脂質ポリマーを含む、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1046]
封入されたアジュバントをさらに含む、前記本発明のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1047]
ポリマーソーム中の封入抗原を生産するための方法であって、以下の工程を含む、方法:
i）両親媒性ポリマーをクロロホルムに溶解する工程であって、好ましくは両親媒性ポリマーがポリブタジエン-ポリエチレンオキシド（BD）である、工程、
ii）ポリマーフィルムを形成させるために、溶解した両親媒性ポリマーを乾燥させる工程、
iii）可溶化された抗原を工程ii）の乾燥両親媒性ポリマーフィルムに加える工程であって、抗原が、
a）ポリペプチドであって、好ましくはポリペプチド抗原が前記本発明のいずれかのとおりであり、さらに好ましくはポリペプチド抗原が、インフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、最も好ましくはポリペプチド抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一である、ポリペプチド、
b）糖質、
c）アンチセンスオリゴヌクレオチドではなく、好ましくはDNA分子またはmRNA分子である、ポリヌクレオチド、
d）（a）および/もしくは（b）および/もしくは（c）の組合せ
からなる群より選択される工程、
iv）ポリマーベシクルを形成させるために、工程iii）のポリマーフィルムを再水和する工程、
v）任意で、ポリマーベシクル単分散ベシクルを精製するために、工程iv）のポリマーベシクルを濾過する工程、ならびに/または
vi）任意で、工程iv）もしくは工程v）のポリマーベシクルを非封入抗原から単離する工程。
[本発明1048]
ポリマーソームが前記本発明のいずれかのポリマーソームである、前記本発明のいずれかのポリマーソーム中の封入抗原を生産するための方法。
[本発明1049]
前記本発明のいずれかのポリマーソーム中の封入抗原を生産するための方法によって生産された、ポリマーソーム。
[本発明1050]
前記本発明のいずれかのポリマーソームを含む、組成物。
[本発明1051]
薬学的組成物または診断組成物である、前記本発明のいずれかの組成物。
[本発明1052]
免疫原性組成物、抗原性組成物または免疫治療組成物である、前記本発明のいずれかの組成物。
[本発明1053]
1つまたは複数の免疫賦活薬および/または1つもしくは複数のアジュバントをさらに含む、前記本発明のいずれかの組成物。
[本発明1054]
ワクチンである、前記本発明のいずれかの組成物。
[本発明1055]
皮内、腹腔内、筋肉内、皮下、静脈内注射、または粘膜表面への非侵襲性投与のために製剤化された、前記本発明のいずれかの組成物。
[本発明1056]
前記本発明のいずれかのポリマーソームまたは組成物に曝露された、単離された抗原提示細胞またはハイブリドーマ細胞。
[本発明1057]
樹状細胞を含む、前記本発明のいずれかの抗原提示細胞。
[本発明1058]
マクロファージを含む、前記本発明のいずれかの抗原提示細胞。
[本発明1059]
B細胞を含む、前記本発明のいずれかの抗原提示細胞。
[本発明1060]
前記本発明のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞またはハイブリドーマを含み、かつ薬学的に許容される賦形剤または担体をさらに含む、ワクチン。
[本発明1061]
i）抗原がインフルエンザヘマグルチニン（HA）を含み、ワクチンがインフルエンザワクチンであり、好ましくは該インフルエンザヘマグルチニン（HA）が、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8からなる群より選択されるポリペプチドと少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一である、
ii）抗原がブタインフルエンザヘマグルチニン（HA）を含み、ワクチンがブタインフルエンザワクチンであり、好ましくは該ブタインフルエンザヘマグルチニン（HA）が、SEQ ID NO:6と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一である、
iii）抗原がブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質を含み、ワクチンがPEDワクチンであり、好ましくは該スパイクタンパク質が、SEQ ID NO:12、13または14のポリペプチドと少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一である、
iv）抗原が卵白アルブミン（OVA）を含み、ワクチンががんワクチンであり、好ましくは該卵白アルブミン（OVA）が、SEQ ID NO:4と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一である、
v）抗原がB16ペプチドを含み、ワクチンががんワクチンであり、好ましくは該ペプチドがSEQ ID NO:9～11からなる群より選択される、
vi）抗原がMC38ペプチドを含み、ワクチンががんワクチンであり、好ましくは該ペプチドがSEQ ID NO:1～3からなる群より選択される、
vii）抗原がB16ペプチドおよびMC38ペプチドを含み、ワクチンががんワクチンであり、好ましくは該ペプチドが群:i）SEQ ID NO:1～3およびii）SEQ ID NO:9～11から独立して選択される、
viii）抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であり、ワクチンががんワクチンである、
前記本発明のいずれかのワクチン。
[本発明1062]
前記本発明のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチンを含む、キット。
[本発明1063]
対象（例えばヒト）における免疫応答を誘発する方法であって、以下の工程を含む、方法:
i）前記本発明1001～1061のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチンを該対象に提供する工程、
ii）該ポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチンを該対象に投与する工程であって、好ましくは該投与が経口、皮内、腹腔内、筋肉内、皮下、静脈内注射、または粘膜表面への非侵襲性投与である、工程。
[本発明1064]
免疫応答が広範な免疫応答である、前記本発明のいずれかの免疫応答を誘発する方法。
[本発明1065]
免疫応答がCD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答および/またはCD4
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を含む、前記本発明のいずれかの免疫応答を誘発する方法。
[本発明1066]
その必要がある対象（例えばヒト）において感染性疾患、がんまたは自己免疫疾患を処置または防止するための方法であって、前記本発明のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチンの治療有効量を対象に投与する工程を含み、好ましくは感染性疾患がウイルス感染性疾患または細菌感染性疾患である、方法。
[本発明1067]
非ヒト動物を免疫処置するための方法であって、以下の工程を含む、方法:
i）前記本発明のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチンを用意する工程、
ii）該ポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチンで非ヒト動物を免疫処置する工程。
[本発明1068]
抗体を調製するための方法であって、以下の工程を含む、方法:
i）前記本発明のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチンで非ヒト哺乳動物を免疫処置する工程、
ii）工程（i）で得られた抗体を単離する工程。
[本発明1069]
抗体がモノクローナル抗体（mAb）である、前記本発明のいずれかの方法。
[本発明1070]
医薬として使用するための、前記本発明のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチン。
[本発明1071]
以下の方法のうちの1つまたは複数において使用するための、前記本発明のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチン:
i）抗体を発見および/またはスクリーニングおよび/または調製する方法、
ii）ワクチンを発見および/またはスクリーニングおよび/または調製する方法、
iii）免疫原性組成物または免疫賦活組成物を生産または調製する方法、
iv）タンパク質および/またはペプチドの標的送達の方法であって、好ましくは標的送達が前記本発明のいずれかの抗原性タンパク質および/または抗原性ペプチドの標的送達であり、さらに好ましくは抗原性タンパク質および/または抗原性ペプチドが膜タンパク質（MP）または膜結合ペプチド（MAP）の可溶性部分を含み、最も好ましくは抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、さらに最も好ましくは抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13およびSEQ ID NO:14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であり、さらに最も好ましくは標的送達が対象において実行される、方法、
v）抗原に対する免疫応答を刺激する方法であって、好ましくは抗原が前記本発明のいずれかの抗原であり、さらに好ましくは抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、さらに最も好ましくは抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13およびSEQ ID NO:14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であり、さらに最も好ましくは対象における該抗原に対する免疫応答の刺激に使用するための、方法、
vi）CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答によって誘導される交差防御をトリガーする方法、好ましくは抗原に対するCD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答によって誘導される交差防御をトリガーする前記本発明のいずれかの方法であって、さらに好ましくは抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、最も好ましくは抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13およびSEQ ID NO:14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一である、方法、
vii）前記本発明のいずれかの抗原提示細胞（APC）にペプチドおよび/またはタンパク質を送達する方法であって、好ましくはペプチドおよび/またはタンパク質が前記本発明のいずれかの抗原であり、さらに好ましくは抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、最も好ましくは抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、13、および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一である、方法、
viii）CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答および/またはCD4
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を含む免疫応答をトリガーする方法であって、好ましくは応答が前記本発明のいずれかの抗原に対する応答であり、さらに好ましくは抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、さらに好ましくは応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一である抗原に対する応答である、方法、
ix）感染性疾患の処置、改善、予防または診断のための方法であって、好ましくは感染性疾患がウイルス感染性疾患または細菌感染性疾患であり、さらに好ましくはウイルス感染性疾患が、インフルエンザ感染症、PEDウイルス感染症、口蹄疫ウイルス（food and mouth virus）感染症、呼吸器合胞体ウイルス感染症、ヘルペスウイルス感染症からなる群より選択される、方法、
x）がんまたは自己免疫疾患の処置、改善、予防または診断のための方法、
xi）がん細胞を化学治療に対して感作させるための方法、
xii）がん細胞におけるアポトーシスを誘導するための方法、
xiii）対象における免疫応答を刺激するための方法、
xiv）非ヒト動物を免疫処置するための方法、
xv）ハイブリドーマの調製方法、
xvi）前記本発明のいずれかの方法、
xvii）インビボおよび/またはエクスビボおよび/またはインビトロでの方法である、前記i）～xvi）のいずれかの方法、
xviii）抗原が、該抗原が使用される環境にとって異種である、前記i）～xvii）のいずれかの方法。
[本発明1072]
以下のうちの1つまたは複数のための、前記本発明のいずれかのポリマーソーム、組成物、抗原提示細胞、ハイブリドーマまたはワクチンの使用:
i）抗体を発見および/またはスクリーニングおよび/または調製するため、
ii）ワクチンを発見および/またはスクリーニングおよび/または調製するため、
iii）免疫原性組成物または免疫賦活組成物を生産または調製するため、
iv）タンパク質および/またはペプチドの標的送達のためであって、好ましくは標的送達が抗原性タンパク質および/または抗原性ペプチドの標的送達であり、さらに好ましくは標的送達が対象において実行される、標的送達のため、
v）抗原に対する免疫応答を刺激するためであって、好ましくは対象における抗原に対する免疫応答を刺激するのに使用するため、
vi）CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答によって誘導される交差防御をトリガーするため、
vii）抗原提示細胞（APC）にペプチドまたはタンパク質を送達するためであって、好ましくはペプチドまたはタンパク質が抗原であり、さらに好ましくはペプチドまたはタンパク質が免疫原性または免疫治療用である、送達のため、
viii）CD8
（＋）
T細胞媒介性免疫応答および/またはCD4
（＋）
T細胞媒介性免疫応答を含む免疫応答をトリガーするため、
ix）感染性疾患の処置、改善、予防または診断のための方法であって、好ましくは感染性疾患がウイルス感染性疾患または細菌感染性疾患であり、さらに好ましくはウイルス感染性疾患が、インフルエンザ感染症、PEDウイルス感染症、呼吸器合胞体ウイルス感染症、ヘルペスウイルス感染症からなる群より選択される、感染性疾患の処置、改善、予防または診断のための方法において、
x）がんまたは自己免疫疾患の処置、改善、予防または診断のため、
xi）がん細胞を化学治療に対して感作させるため、
xii）がん細胞におけるアポトーシスの誘導のため、
xiii）対象における免疫応答を刺激するため、
xiv）非ヒト動物を免疫処置するため、
xv）ハイブリドーマの調製のため、
xvi）前記本発明のいずれかの方法において、
xvii）インビボおよび/またはエクスビボおよび/またはインビトロでの使用である、前記i）～xvi）のいずれかの使用のため、
xviii）抗原が、該抗原が使用される環境にとって異種である、前記i）～xvii）のいずれかの使用のため。
[本発明1073]
免疫応答を誘発するための、可溶性封入抗原を含む、約120nm以上の直径を有するポリマーソームの使用であって、
該可溶性封入抗原が、
i）ポリペプチド、
ii）糖質、
iii）好ましくはアンチセンスオリゴヌクレオチドではなく、さらに好ましくはDNA分子もしくはmRNA分子である、ポリヌクレオチド、または
iv）i）および/もしくはii）および/もしくはiii）の組合せ
からなる群より選択される、
使用。
[本発明1074]
ポリマーソームの直径が、約120nm～約1μm、または約140nm～約750nm、または約120nm～約500nm、または約140nm～約250nm、約120nm～約240nm、約150nm～約235nm、約170nm～約230nm、または約220nm～約180nm、または約190nm～約210nmの範囲にある、本発明1075の使用。
[本発明1075]
免疫応答を誘発するための、可溶性封入抗原を含む、約120nm以上の平均直径を有するポリマーソームの集合体の使用であって、
該可溶性封入抗原が、
i）ポリペプチド、
ii）糖質、
iii）好ましくはアンチセンスオリゴヌクレオチドではなく、さらに好ましくはDNA分子もしくはmRNA分子である、ポリヌクレオチド、または
iv）i）および/もしくはii）および/もしくはiii）の組合せ
からなる群より選択される、
使用。
[本発明1076]
ポリマーソームの集合体の平均直径が、約120nm～約1μm、または約120nm～約750nm、または約120nm～約500nm、または約120nm～約250nm、約120nm～約240nm、約150nm～約235nm、約170nm～約230nm、または約220nm～約180nm、または約190nm～約210nmの範囲にある、本発明1075の使用。
[本発明1077]
ポリマーソームが、カチオン性ポリマーソーム、アニオン性ポリマーソームおよびノニオン性ポリマーソームからなる群より選択される、本発明1073～1076のいずれかの使用。
[本発明1078]
ブロック共重合体または両親媒性ポリマーが本質的に非免疫原性または本質的に非抗原性であり、好ましくはブロック共重合体または両親媒性ポリマーが非免疫原性または非抗原性である、本発明1077の使用。
[本発明1079]
ブロック共重合体または両親媒性ポリマーが免疫賦活薬でもアジュバントでもない、本発明1073～1078のいずれかの使用。
[本発明1080]
両親媒性ポリマーがジブロックまたはトリブロック（A-B-AまたはA-B-C）共重合体を含む、本発明1073～1079のいずれかの使用。
[本発明1081]
両親媒性ポリマーが共重合体ポリ（N-ビニルピロリドン）-b-PLAを含む、本発明1073～1080のいずれかの使用。
[本発明1082]
両親媒性ポリマーが、カルボン酸、アミド、アミン、アルキレン、ジアルキルシロキサン、エーテルまたはアルキレンスルフィドのモノマー単位を少なくとも1つ含む、本発明1074～1081のいずれかの使用。
[本発明1083]
両親媒性ポリマーが、オリゴ（オキシエチレン）ブロック、ポリ（オキシエチレン）ブロック、オリゴ（オキシプロピレン）ブロック、ポリ（オキシプロピレン）ブロック、オリゴ（オキシブチレン）ブロックおよびポリ（オキシブチレン）ブロックからなる群より選択されるポリエーテルブロックである、本発明1074～1082のいずれかの使用。
[本発明1084]
両親媒性ポリマーがポリ（ブタジエン）-ポリ（エチレンオキシド）（PB-PEO）ジブロック共重合体またはポリ（ジメチルシロキサン）-ポリ（エチレンオキシド）（PDMS-PEO）ジブロック共重合体である、本発明1074～1083のいずれかの使用。
[本発明1085]
PB-PEOジブロック共重合体が5～50ブロックPBおよび5～50ブロックPEOを含むか、好ましくはPB-PEOジブロック共重合体が好ましくは5～100ブロックPDMSおよび5～100ブロックPEOを含む、本発明1084の使用。
[本発明1086]
両親媒性ポリマーがポリ（ラクチド）-ポリ（エチレンオキシド）/1-パルミトイル-2-オレイル-sn-グリセロ-3-ホスホ-L-セリン（PLA-PEO/POPC）共重合体であり、好ましくは該PLA-PEO/POPCが75対25（例えば75/25）のPLA-PEO対POPC（例えばPLA-PEO/POPC）の比を有する、本発明1074～1085のいずれかの使用。
[本発明1087]
両親媒性ポリマーがポリ（カプロラクトン）-ポリ（エチレンオキシド）/1-パルミトイル-2-オレイル-sn-グリセロ-3-ホスホ-L-セリン（PCL-PEO/POPC）共重合体であり、好ましくは該PCL-PEO/POPCが75対25（例えば75/25）のPCL-PEO対POPC（例えばPCL-PEO/POPC）の比を有する、本発明1074～1086のいずれかの使用。
[本発明1088]
両親媒性ポリマーがポリブタジエン-ポリエチレンオキシド（BD）である、本発明1074～1087のいずれかの使用。
[本発明1089]
ポリマーソームがジブロック共重合体PBD
21
-PEO
14
（BD21）またはPDMS
47
PEO
36
もしくはトリブロック共重合体PMOXA
12
-PDMS
55
-PMOXA
12
を含む、本発明1074～1088のいずれかの使用。
[本発明1090]
可溶性ウイルスタンパク質である可溶性封入抗原を含む、ポリマーソーム。
[本発明1091]
抗原が、インフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質および口蹄疫ウイルスタンパク質からなる群より選択される可溶性部分を含む、本発明1090のポリマーソーム。
[本発明1092]
ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質がSEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13またはSEQ ID NO:14のアミノ酸配列を含むか、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13またはSEQ ID NO:14のポリペプチド配列と少なくとも60％以上（例えば少なくとも65％、少なくとも70％、少なくとも75％、少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％または100％）同一であるアミノ酸配列を含む、本発明1090のポリマーソーム。
[本発明1093]
本発明1029～1046のいずれかに規定したポリマーソームである、本発明1090～1092のいずれかのポリマーソーム。
[本発明1094]
本発明1090～1093のいずれかのポリマーソームを含む、薬学的組成物。
[本発明1095]
薬学的に許容される担体を含む、本発明1094の薬学的組成物。
[本発明1096]
経口投与用に製剤化された、本発明1095の薬学的組成物。
[本発明1097]
ポリマーソームが天然ポリマーでコーティングされているか、天然ポリマーまたは合成生分解性ポリマーの粒子に含まれている、本発明1095および本発明1096のいずれかの薬学的組成物。
[本発明1098]
天然ポリマーがキトサン、アルギナート、またはキトサンとアルギナートとの混合物を含む、本発明1097の薬学的組成物。
[本発明1099]
天然ポリマーの粒子が約300nm～約1マイクロメートル、約2マイクロメートル、約3マイクロメートル、約4マイクロメートルまたは約5マイクロメートルの範囲のサイズを有する、本発明1096～1098のいずれかの薬学的組成物。
[本発明1100]
対象のワクチン接種用の薬学的組成物を調製するための、本発明1090～1093のいずれかのポリマーソームの使用。
[本発明1101]
対象がウイルス感染症に対してワクチン接種される、本発明1100の使用。
[本発明1102]
対象が哺乳類動物または非哺乳類動物である、本発明1100または本発明1101の使用。
[本発明1103]
非哺乳類動物が鳥類（例えばニワトリ、カモ、ガチョウまたはシチメンチョウなどの家禽）、魚類または甲殻類である、本発明1102の使用。
[本発明1104]
鳥類がニワトリ、カモ、ガチョウまたはシチメンチョウである、本発明1103の使用。
[本発明1105]
魚類がサケ、マスまたはティラピアである、本発明1103の使用。
[本発明1106]
甲殻類がシュリンプ、プローンまたはカニである、本発明1103の使用。
[本発明1107]
哺乳類動物がヤギ、ヒツジ、ウシまたはブタである、本発明1103の使用。
[本発明1108]
動物がブタであり、ブタ流行性下痢ウイルスに対してワクチン接種される、本発明1103の使用。
[本発明1109]
動物が有蹄動物であり、口蹄疫ウイルスに対してワクチン接種される、本発明1103の使用。
SEQ ID NO: 15 is the amino sequence of the sensitive green fluorescent protein (eGFP).
[Invention 1001]
Oxidation-stable polymersome containing soluble encapsulating antigen,
The soluble encapsulated antigen
i) Polypeptide,
ii) Carbohydrate,
iii) A polynucleotide, which is preferably a DNA or mRNA molecule rather than an antisense oligonucleotide.
iv) A combination of i) and / or ii) and / or iii)
Selected from the group consisting of
Oxidation-stable polymersome.
[Invention 1002]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the polymersome has the ability to elicit a CD8 (+) T cell-mediated immune response, preferably in vivo, ex vivo or in vitro.
[Invention 1003]
The antigen comprises a soluble portion of a membrane protein (MP) or membrane binding peptide (MAP), preferably the antigen is influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. Containing a soluble portion of, more preferably the antigen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO Selected from the group consisting of: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 and SEQ ID NO: 14. Polypeptide sequences and at least 60% (eg at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98% , At least 99% or 100%) of any of the above-mentioned polymersomes of the invention, comprising a polypeptide that is identical.
[Invention 1004]
The polymersome of any of the present invention, wherein the polymersome is oxidatively stable in the presence of serum components, preferably said oxidative stability in vivo, ex vivo or in vitro.
[Invention 1005]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the polymersome is stable within the endosome, preferably said stability in vivo, ex vivo or in vitro.
[Invention 1006]
Polymersomes have improved oxidative stability compared to the corresponding oxidative stability of liposomes, preferably said improved stability in vivo, ex vivo or in vitro, said. Any polymersome of the invention.
[Invention 1007]
Polymersomes have the ability to release their contents, including soluble encapsulating antigen, in an oxidation-independent manner, triggering a CD8 (+) T cell-mediated immune response, preferably in vivo, exvivo or in vitro. The polymersome of any of the inventions said to be released in.
[Invention 1008]
The present invention, wherein the polymersome has the ability to elicit a cell-mediated immune response, including a CD8 (+) T cell-mediated immune response, preferably the immune response being an in vivo, exvivo or in vitro immune response. Either polymersome.
[Invention 1009]
Polymersomes have the ability to elicit a cellular and / or humoral immune response, the cellular immune response comprises a CD8 (+) T cell-mediated immune response, preferably the immune response is in vivo, exvivo or The polymersome of any of the inventions said, which is an immune response in vitro.
[Invention 1010]
The polymersome of any of the inventions, wherein the humoral immune response comprises the production of a specific antibody, more preferably the immune response is an in vivo, exvivo or in vitro immune response.
[Invention 1011]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the polymersome has the ability to enhance the frequency of appearance of effector CD4 (+) T cells, preferably the enhancement being in vivo, ex vivo or in vitro enhancement.
[Invention 1012]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the cell-mediated immune response comprises a T cell-mediated immune response, preferably the immune response is an in vivo, ex vivo or in vitro immune response.
[Invention 1013]
The present invention, wherein the polymersome has the ability to enhance the clone expansion of antigen-specific CD8 (+) T cells as compared to a free antigen , preferably the expansion is in vivo, ex vivo or in vitro expansion. One of the polymersomes.
[Invention 1014]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the polymersome has the ability to induce antigen-specific effector CD8 (+) T cells, preferably in vivo, ex vivo or in vitro.
[Invention 1015]
Any of the aforementioned inventions, wherein the polymersome has the ability to enhance the cytotoxic phenotype of antigen-specific CD8 (+) T cells, preferably the enhancement being in vivo, exvivo or in vitro enhancement. Polymersome.
[Invention 1016]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the polymersome has the ability to target lymph node resident macrophages and / or B cells, preferably targeting in vivo, exvivo or in vitro.
[Invention 1017]
The book, wherein the polymersome is reducing stability, preferably the polymersome is reducing stability in the presence of serum components, and more preferably the reducing stability is in vivo, exvivo or in vitro. One of the polymersomes of the invention.
[Invention 1018]
Polymersomes have reduced permeability, preferably said reduced permeability in comparison to the corresponding permeability of liposomes, more preferably said in vivo, ex vivo or in vitro permeability. There is a polymersome of any of the present invention.
[Invention 1019]
Any of the aforementioned inventions, wherein the polymersome has the ability to release its contents within the endosome, preferably the endosome is a late endosome, more preferably the release is in vivo, ex vivo or in vitro. Polymersome.
[Invention 1020]
Any polymersome of the invention said to have one or more of the following abilities:
i) The ability to elicit a cell- mediated immune response, preferably the cell-mediated immune response comprises a CD8 (+) T cell-mediated immune response, and more preferably the cell-mediated immune response is a CD8 (+) T cell . A mediated immune response, most preferably the cell-mediated immune response, is a response to a soluble portion of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. More preferably, the cell-mediated immune response is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO. At least 60% or more of the polypeptide sequence selected from the group consisting of: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12-14 ( For example at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) Ability to elicit a cell-mediated immune response, a response to a polypeptide;
ii) The ability to release the polymersome content within the endosome, preferably the endosome is a late endosome, more preferably the content is influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white. It contains a soluble moiety of albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, most preferably the contents of which are SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID. A group consisting of NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12-14. More selected polypeptide sequences and at least 60% or more (eg at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, Ability to release polymersome contents within endosomes, including polypeptides that are at least 98%, at least 99% or 100%) identical;
iii) The ability to release the polymersome content in an oxidation-independent manner to trigger a CD8 (+) T cell-mediated immune response, preferably the content being influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, or porcine epidemic diarrhea. It contains a soluble moiety of a viral spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, more preferably the contents of which are SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO. : 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12 A polypeptide sequence selected from the group consisting of ~ 14 and at least 60% (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%). , At least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) oxidatively releases polymersome contents containing identical polypeptides to trigger a CD8 (+) T cell-mediated immune response. ability;
iv) Ability to stimulate an immune response to an antigen, preferably the antigen comprising soluble moieties of influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. , More preferably, the antigen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, At least 60% or more (eg, at least 65) of the polypeptide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12-14. %, At least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical polypeptides Ability to stimulate immune response to antigens, including;
v) CD8 (+) Ability to trigger cross-defense induced by a T cell-mediated immune response, preferably such response is influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA). ), B16 peptide or MC38 peptide, and more preferably the response is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO :. A group consisting of 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, 13 and 14. More selected polypeptide sequences and at least 60% or more (eg at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, Ability to trigger cross-defense induced by the CD8 (+) T cell-mediated immune response, which is a response to a polypeptide that is at least 98%, at least 99%, or 100%) identical ;
vi) The ability to deliver a peptide or protein to antigen-presenting cells (APCs), preferably the peptide or protein is influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), B16. Contains or is derived from the soluble moiety of the peptide or MC38 peptide, more preferably the peptide or protein is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO :. 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, A polypeptide sequence selected from the group consisting of 13 and 14 and at least 60% (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96). %, At least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) Ability to deliver a peptide or protein to an antigen-presenting cell (APC) containing or derived from the same polypeptide;
vii) CD8 (+) T-cell-mediated immune response and / or CD4 (+) ability to trigger an immune response, including a T-cell-mediated immune response, preferably the response to influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, egg white. Responses to soluble moieties of albumin (OVA), porcine epidemic diarrhea virus spike protein, B16 peptide or MC38 peptide, more preferably the response is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3. , SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ A polypeptide sequence selected from the group consisting of ID NO: 12, 13 and 14 and at least 60% or more (eg at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) CD8 (+) T cell-mediated immune response and / or CD4 (+) T , which are responses to identical polypeptides. Ability to trigger immune responses, including cell-mediated immune responses;
viii) The ability to stimulate an immune response in a subject, preferably the response to a soluble portion of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. The response is, more preferably, SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO :. At least 60% or more of the polypeptide sequence selected from the group consisting of 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, 13 and 14. (Eg at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) Same The ability to stimulate an immune response in a subject, which is a response to a polypeptide that is
ix) Ability to immunotreat non-human animals, preferably against soluble moieties of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. It is an immunological treatment, and more preferably, the immunological treatment is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ. From the group consisting of ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 and SEQ ID NO: 14. At least 60% or more (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least with the selected polypeptide sequence. 98%, at least 99% or 100%) Ability to immunotreat non-human animals, which is an immunotreatment against the same polypeptide;
x) The polymersome has a modified antigenicity as compared to the corresponding antigenicity of the antigen without the polymersome, preferably the antigen is influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic. Diarrhea virus Spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide is a soluble moiety, more preferably the antigen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO. : 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12 , 13 and 14 selected from the group consisting of and at least 60% (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least. 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) having modified antigenicity, which is a polypeptide that is identical;
xi) The polymersome has a modified immunogenicity as compared to the corresponding immunogenicity of the antigen without the polymersome, preferably the immunogen is influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine,. Pig epidemic diarrhea virus Spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide soluble portion, more preferably the immunogen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3. , SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ A polypeptide sequence selected from the group consisting of ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 and SEQ ID NO: 14 and at least 60% or more (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least Having modified immunogenicity, which is a polypeptide that is 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical.
[Invention 1021]
Any polymersome of the invention said to have one or more of the following properties:
i) Polymersomes contain oxidative stability membranes and / or
ii) Polymersomes are synthetic and / or
iii) Polymersomes do not contain or are mixed with unencapsulated antigens and / or
iv) Polymersomes contain membranes of amphipathic polymers and / or
v) Polymersomes contain amphipathic synthetic block copolymers that form vesicle membranes and / or
vi) Polymersomes have a diameter greater than 70 nm, preferably about 100 nm to about 1 μm, or about 100 nm to about 750 nm, or about 100 nm to about 500 nm, or about 125 nm to about 250 nm, about 140 nm to about 240 nm. , About 150 nm to about 235 nm, about 170 nm to about 230 nm, or about 220 nm to about 180 nm, or about 190 nm to about 210 nm, most preferably having a diameter of about 200 nm, and / or.
vii) Polymersomes have vesicle morphology,
viii) Polymersomes are self-assembling.
[Invention 1022]
Polymersomes are in the form of polymersome aggregates, with an average diameter of about 100 nm to about 1 μm, or about 100 nm to about 750 nm, or about 100 nm to about 500 nm, or about 125 nm to about 250 nm. The polymersome of the invention 1021 in the range of 140 nm to about 240 nm, about 150 nm to about 235 nm, about 170 nm to about 230 nm, or about 220 nm to about 180 nm, or about 190 nm to about 210 nm.
[Invention 1023]
The polymersome of any of the inventions, wherein the antigen is the immunogen.
[Invention 1024]
The polymersome of any of the present invention, wherein the antigen is selected from the group consisting of i) self-antigen, ii) non-self-antigen, iii) non-autoimmune source and iv) self-immunogen.
[Invention 1025]
The antigen is below:
i) A polypeptide that is at least 80% (eg, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical to the viral polypeptide sequence. The viral polypeptide sequence is preferably influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin or porcine epidemic diarrhea virus spike protein, and more preferably the viral polypeptide sequence is SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, A polypeptide selected from the group consisting of SEQ ID NO: 7 and SEQ ID NO: 8 and SEQ ID NO: 12, 13 and 14;
ii) A polypeptide that is at least 80% (eg, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical to the bacterial polypeptide sequence;
iii) At least 80% or more (eg, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical to the mammalian or avian polypeptide sequence The polypeptide, preferably the mammalian polypeptide sequence or the avian polypeptide sequence, is an ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, more preferably the mammalian polypeptide sequence or the avian polypeptide sequence. Is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10 and SEQ ID NO: 11. , Polypeptide
The polymersome of any of the present invention selected from the group consisting of.
[Invention 1026]
The polymersome of any of the inventions, wherein the mammalian polypeptide sequence is selected from the group consisting of human, rodent, rabbit and horse polypeptide sequences.
[Invention 1027]
A polymersome of any of the inventions described above, wherein the antigen is an antibody or fragment thereof.
[Invention 1028]
The antigen is below:
i) Influenza hemagglutinin (HA), preferably selected from the group consisting of SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 and SEQ ID NO: 8.
ii) Swine flu hemagglutinin (HA), preferably SEQ ID NO: 6,
iii) Egg white albumin (OVA), preferably SEQ ID NO: 4,
iv) B16 peptide, preferably one selected from the group consisting of SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10 and SEQ ID NO: 11.
v) MC38 peptide, preferably selected from the group consisting of SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 and SEQ ID NO: 3.
vi) B16 and MC38 peptides, preferably said peptides, are independently selected from the groups: i) SEQ ID NO: 1-3 and ii) SEQ ID NO: 9-11.
vii) Porcine epidemic diarrhea virus spike protein and soluble fragments thereof, preferably fragments of SEQ ID NO: 12, 13 or 14.
The polymersome of any of the present invention selected from the group consisting of.
[Invention 1029]
The polymersome of any of the present invention selected from the group consisting of cationic polymersomes, anionic polymersomes, nonionic polymersomes and mixtures thereof.
[Invention 1030]
Block copolymers or amphoteric polymers are essentially non-immunogenic or essentially non-antigenic, preferably block copolymers or amphoteric polymers are non-immunogenic or non-antigenic. The polymersome of any of the present invention.
[Invention 1031]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the block copolymer or amphipathic polymer is neither an immunostimulant nor an adjuvant.
[Invention 1032]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the amphipathic polymer comprises a diblock or triblock (ABA or ABC) copolymer.
[Invention 1033]
The polymersome of any of the present invention, wherein the amphipathic polymer comprises the copolymer poly (N-vinylpyrrolidone) -b-PLA.
[Invention 1034]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the isomeric polymer comprises at least one monomer unit of a carboxylic acid, amide, amine, alkylene, dialkylsiloxane, ether or alkylene sulfide.
[Invention 1035]
A group in which an amphoteric polymer consists of an oligo (oxyethylene) block, a poly (oxyethylene) block, an oligo (oxypropylene) block, a poly (oxypropylene) block, an oligo (oxybutylene) block and a poly (oxybutylene) block. The polymersome of any of the present inventions, which is a more selected polyether block.
[Invention 1036]
The amphoteric polymer is a poly (butadiene) -poly (ethylene oxide) (PB-PEO) diblock copolymer, or the amphoteric polymer is a poly (dimethylsiloxane) -poly (ethylene oxide) (PDMS-PEO) diblock. The polymersome of any of the present invention, which is a copolymer.
[Invention 1037]
A PB-PEO diblock copolymer comprising 5-50 block PB and 5-50 block PEO, or a PB-PEO diblock copolymer preferably comprising 5-100 block PDMS and 5-100 block PEO. Polymersome of invention 1036.
[Invention 1038]
The amphoteric polymer is a poly (lactide) -poly (ethylene oxide) / 1-palmitoyle-2-oleyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (PLA-PEO / POPC) copolymer, preferably said. Any polymersome of the invention described above, wherein PLA-PEO / POPC has a PLA-PEO to POPC (eg PLA-PEO / POPC) ratio of 75:25 (eg 75/25).
[Invention 1039]
The polycaprolactone polymer is a poly (caprolactone) -poly (ethylene oxide) / 1-palmitoyle-2-oleyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (PCL-PEO / POPC) copolymer, preferably said. One of the polymersomes of the invention described above, wherein the PCL-PEO / POPC has a PCL-PEO to POPC (eg PCL-PEO / POPC) ratio of 75:25 (eg 75/25).
[Invention 1040]
The polymersome of any of the inventions described above, wherein the amphipathic polymer is polybutadiene-polyethylene oxide (BD).
[Invention 1041]
The polymersome of any of the inventions, comprising the diblock copolymer PBD 21 -PEO 14 (BD21) and the triblock copolymer PMOXA 12 -PDMS 55 -PMOXA 12 .
[Invention 1042]
A polymersome of any of the present invention comprising one or more compartments.
[Invention 1043]
The polymersome comprises one or more compartments, each of which encapsulates at least one peptide, protein, and nucleic acid, preferably at least the peptide, protein, and nucleic acid. One of the polymersomes of the invention, wherein one is immunogenic or antigenic, and more preferably each of the one or more compartments is composed of the same amphipathic polymer or different amphipathic polymers. ..
[Invention 1044]
The polymersome comprises two or more compartments, the compartment comprising an outer block copolymer vesicle and at least one inner block copolymer vesicle, the at least one inner block copolymer vesicle being an outer block copolymer. The outer block copolymer vesicle, which is encapsulated inside the vesicle, is preferable.
i) Poly [Styrene-b-Poly (L-isocyananoalanine (2-thiophene-3-yl-ethyl) amide)] (PS-PIAT),
ii) Poly (butadiene)-poly (ethylene oxide) (PBD-PEO),
iii) Poly (ethylene oxide) -poly (caprolactone) (PEO-PCL),
iv) Poly (Ethyl Ethyl)-Poly (Ethylene Oxide) (PEE-PEO),
v) Poly (ethylene oxide)-poly (lactic acid) (PEO-PLA),
vi) Poly (isoprene)-poly (ethylene oxide) (PI-PEO),
vii) Poly (2-vinylpyridine)-Poly (ethylene oxide) (P2VP-PEO),
viii) Poly (ethylene oxide)-Poly (N-isopropylacrylamide) (PEO-PNIPAm),
ix) Poly (Styrene)-Poly (Acrylic Acid) (PS-PAA),
x) Poly (ethylene glycol)-Poly (propylene sulfide) (PEG-PPS),
xi) Poly (2-methyloxazoline) -poly (dimethylsiloxane) -poly (2-methyloxazoline) (PMOXA-PDMS-PMOXA),
xii) Poly (ethylene oxide) -poly (dimethylsiloxane) -poly (2-methyloxazoline) (PEO-PDMS-PMOXA), and
xiii) Poly (Methylphenylsilane) -Poly (Ethethylene Oxide) (PMPS-PEO-PMPS-PEO-PMPS)
Polymersomes formed of copolymers independently selected from the group consisting of, more preferably the at least one inner block copolymer vesicle.
i) Poly [Styrene-b-Poly (L-isocyananoalanine (2-thiophene-3-yl-ethyl) amide)] (PS-PIAT),
ii) Poly (butadiene)-poly (ethylene oxide) (PBD-PEO),
iii) Poly (ethylene oxide) -poly (caprolactone) (PEO-PCL),
iv) Poly (Ethyl Ethyl)-Poly (Ethylene Oxide) (PEE-PEO),
v) Poly (ethylene oxide)-poly (lactic acid) (PEO-PLA),
vi) Poly (isoprene)-poly (ethylene oxide) (PI-PEO),
vii) Poly (2-vinylpyridine)-Poly (ethylene oxide) (P2VP-PEO),
viii) Poly (ethylene oxide)-Poly (N-isopropylacrylamide) (PEO-PNIPAm),
ix) Poly (Styrene)-Poly (Acrylic Acid) (PS-PAA),
x) Poly (ethylene glycol)-Poly (propylene sulfide) (PEG-PPS),
xi) Poly (2-methyloxazoline) -poly (dimethylsiloxane) -poly (2-methyloxazoline) (PMOXA-PDMS-PMOXA),
xii) Poly (ethylene oxide) -poly (dimethylsiloxane) -poly (2-methyloxazoline) (PEO-PDMS-PMOXA), and
xiii) Poly (Methylphenylsilane) -Poly (Ethethylene Oxide) (PMPS-PEO-PMPS-PEO-PMPS)
The polymersome of any of the present invention, which is a polymersome formed of a copolymer independently selected from the group consisting of.
[Invention 1045]
The polymersome of any of the present invention comprising a lipid polymer.
[Invention 1046]
A polymersome of any of the inventions, further comprising an encapsulated adjuvant.
[Invention 1047]
A method for producing an encapsulated antigen in a polymersome, comprising the following steps:
i) A step of dissolving the amphipathic polymer in chloroform, preferably the amphipathic polymer is polybutadiene-polyethylene oxide (BD).
ii) The step of drying the dissolved amphipathic polymer to form a polymer film,
iii) In the step of adding the solubilized antigen to the dry amphipathic polymer film of step ii), the antigen is:
a) A polypeptide, preferably the polypeptide antigen is as one of the present inventions, and more preferably the polypeptide antigen is influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin. (OVA), B16 peptide or MC38 peptide containing soluble moieties, most preferably polypeptide antigens are SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO. : 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12-14 At least 60% or more (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least with the selected polypeptide sequence. 98%, at least 99% or 100%) identical, polypeptide,
b) Carbohydrate,
c) A polynucleotide, which is preferably a DNA or mRNA molecule rather than an antisense oligonucleotide.
d) Combination of (a) and / or (b) and / or (c)
Process selected from the group consisting of
iv) Rehydration of the polymer film in step iii) to form polymer vesicles,
v) Optionally, a step of filtering the polymer vesicles from step iv) to purify the polymer vesicle monodisperse vesicles, and / or
vi) Optionally, the step of isolating the polymer vesicles of step iv) or step v) from the unencapsulated antigen.
[Invention 1048]
A method for producing an encapsulated antigen in any of the polymersomes of the invention, wherein the polymersome is any of the polymersomes of the invention.
[Invention 1049]
Polymersomes produced by the method for producing encapsulating antigens in any of the polymersomes of the invention described above.
[Invention 1050]
A composition comprising any of the polymersomes of the invention.
[Invention 1051]
The composition of any of the present invention, which is a pharmaceutical composition or a diagnostic composition.
[Invention 1052]
The composition of any of the present invention, which is an immunogenic composition, an antigenic composition or an immunotherapeutic composition.
[Invention 1053]
The composition of any of the inventions, further comprising one or more immunostimulants and / or one or more adjuvants.
[Invention 1054]
The composition of any of the present invention, which is a vaccine.
[Invention 1055]
The composition of any of the inventions, formulated for intradermal, intraperitoneal, intramuscular, subcutaneous, intravenous injection, or non-invasive administration to the mucosal surface.
[Invention 1056]
An isolated antigen-presenting cell or hybridoma cell exposed to any of the polymersomes or compositions of the invention.
[Invention 1057]
An antigen-presenting cell of any of the present invention, comprising a dendritic cell.
[Invention 1058]
An antigen-presenting cell of any of the present invention comprising macrophages.
[Invention 1059]
An antigen-presenting cell of any of the present invention, comprising B cells.
[Invention 1060]
A vaccine comprising any of the polymersomes, compositions, antigen presenting cells or hybridomas of the invention, further comprising a pharmaceutically acceptable excipient or carrier.
[Invention 1061]
i) The antigen comprises influenza hemagglutinin (HA) and the vaccine is an influenza vaccine, preferably the influenza hemagglutinin (HA) is SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 and SEQ ID NO. A polypeptide selected from the group consisting of: 8 and at least 60% (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, At least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical,
ii) The antigen comprises swine flu hemagglutinin (HA) and the vaccine is a swine flu vaccine, preferably the swine flu hemagglutinin (HA) is at least 60% or more (eg at least 65%, at least 70) with SEQ ID NO: 6. %, At least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%)
iii) The antigen comprises a porcine epidemic diarrhea virus spike protein and the vaccine is a PED vaccine, preferably the spike protein is at least 60% (eg at least 65%) with the polypeptide of SEQ ID NO: 12, 13 or 14. , At least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%)
iv) The antigen comprises ovalbumin (OVA) and the vaccine is a cancer vaccine, preferably said ovalbumin (OVA) with SEQ ID NO: 4 at least 60% (eg at least 65%, at least 70%). At least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical,
v) The antigen comprises a B16 peptide, the vaccine is a cancer vaccine, preferably the peptide is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 9-11.
vi) The antigen comprises the MC38 peptide, the vaccine is a cancer vaccine, preferably the peptide is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 1-3.
vii) The antigen comprises a B16 peptide and an MC38 peptide, the vaccine is a cancer vaccine, preferably the peptide is independent of the group: i) SEQ ID NO: 1-3 and ii) SEQ ID NO: 9-11. Selected,
viii) A polypeptide sequence in which the antigen is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11. And at least 60% (eg at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% Or 100%) identical and the vaccine is a cancer vaccine,
The vaccine of any of the present invention.
[Invention 1062]
A kit comprising any of the polymersomes, compositions, antigen presenting cells, hybridomas or vaccines of the invention.
[Invention 1063]
A method of inducing an immune response in a subject (eg, human), comprising the following steps:
i) The step of providing the subject with the polymersome, composition, antigen-presenting cell, hybridoma or vaccine according to any one of the present inventions 1001 to 1061.
ii) The step of administering the polymersome, composition, antigen presenting cell, hybridoma or vaccine to the subject, preferably oral, intradermal, intraperitoneal, intramuscular, subcutaneous, intravenous injection, or. A step, which is a non-invasive administration to the mucosal surface.
[Invention 1064]
A method of inducing any of the above-mentioned immune responses of the present invention, wherein the immune response is a broad immune response.
[Invention 1065]
A method of inducing any of the immune responses of the invention, wherein the immune response comprises a CD8 (+) T cell-mediated immune response and / or a CD4 (+) T cell-mediated immune response.
[Invention 1066]
A method for treating or preventing an infectious disease, cancer or autoimmune disease in a subject (eg, human) in need thereof, wherein any of the polymersomes, compositions, antigen-presenting cells, hybridomas of the present invention. Alternatively, a method comprising the step of administering to a subject a therapeutically effective amount of a vaccine, preferably the infectious disease is a viral or bacterial infectious disease.
[Invention 1067]
A method for immunotreating a non-human animal, comprising the following steps:
i) The step of preparing any of the polymersomes, compositions, antigen presenting cells, hybridomas or vaccines of the present invention.
ii) The step of immunotreating a non-human animal with the polymersome, composition, antigen presenting cell, hybridoma or vaccine.
[Invention 1068]
A method for preparing an antibody, which comprises the following steps:
i) The step of immunotreating a non-human mammal with any of the polymersomes, compositions, antigen presenting cells, hybridomas or vaccines of the invention.
ii) The step of isolating the antibody obtained in step (i).
[Invention 1069]
The method of any of the present invention, wherein the antibody is a monoclonal antibody (mAb).
[Invention 1070]
A polymersome, composition, antigen presenting cell, hybridoma or vaccine of any of the present inventions for use as a pharmaceutical.
[Invention 1071]
Polymersomes, compositions, antigen presenting cells, hybridomas or vaccines of the invention for use in one or more of the following methods:
i) How to find and / or screen and / or prepare antibodies,
ii) How to discover and / or screen and / or prepare vaccines,
iii) A method for producing or preparing an immunogenic composition or an immunostimulatory composition,
iv) A method of targeted delivery of a protein and / or peptide, preferably targeted delivery of any of the antigenic proteins and / or antigenic peptides of the invention, more preferably antigenic proteins and / or peptides. / Or the antigenic peptide contains a soluble portion of the membrane protein (MP) or membrane binding peptide (MAP), most preferably the antigens are influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), It contains a soluble portion of a B16 peptide or MC38 peptide, and more preferably the antigens are SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID. NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 and SEQ ID NO: A polypeptide sequence selected from the group consisting of 14 and at least 60% or more (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, A method, which is at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical, and more preferably targeted delivery is performed in the subject.
v) A method of stimulating an immune response to an antigen, preferably the antigen being any of the above-mentioned antigens of the invention, more preferably the antigen being influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white. It contains a soluble moiety of albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, and more preferably the antigen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO. : 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 And SEQ ID NO: 14 with a polypeptide sequence selected from the group consisting of at least 60% (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%). , At least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical, and more preferably a method for use in stimulating an immune response to the antigen in a subject.
vi) CD8 (+) A method of triggering cross-defense induced by a T cell-mediated immune response, preferably CD8 (+) triggering cross-defense induced by a CD8 (+) T cell-mediated immune response against an antigen. Either method, more preferably the antigen comprises a soluble moiety of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, most preferably the antigen. , SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ At least 60% or more of the polypeptide sequence selected from the group consisting of ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 and SEQ ID NO: 14. For example at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) There is a method,
vii) A method of delivering a peptide and / or protein to any of the antigen presenting cells (APCs) of the invention, preferably the peptide and / or protein is any of the antigens of the invention, even more preferred. The antigen comprises soluble moieties of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, most preferably the antigen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO. : 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10 , SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, 13, and 14 selected from the group and at least 60% or more (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, At least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) identical, method,
viii) A method of triggering an immune response, including a CD8 (+) T cell-mediated immune response and / or a CD4 (+) T cell-mediated immune response, preferably the response to any of the antigens of the invention described above. The response, more preferably the antigen, comprises a soluble moiety of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, more preferably the response is SEQ ID NO. 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9 , SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, 13 and 14 selected from the group and at least 60% or more (eg, at least 65%, at least 70%, at least 75%). , At least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, at least 99% or 100%) Responses to identical antigens, methods,
ix) A method for the treatment, amelioration, prevention or diagnosis of an infectious disease, preferably the infectious disease is a viral or bacterial infectious disease, and more preferably the viral infectious disease is an influenza infection. A method selected from the group consisting of diseases, PED virus infections, food and mouth virus infections, respiratory follicles virus infections, and herpesvirus infections.
x) Methods for the treatment, improvement, prevention or diagnosis of cancer or autoimmune diseases,
xi) How to sensitize cancer cells to chemotherapy,
xii) Methods for inducing apoptosis in cancer cells,
xiii) Methods for stimulating an immune response in a subject,
xiv) Methods for immunologically treating non-human animals,
xv) Hybridoma preparation method,
xvi) Any method of the present invention,
xvii) any of the above i) to xvi) methods, in vivo and / or ex vivo and / or in vitro methods.
xviii) The method of any of i) to xvii) above, wherein the antigen is heterologous to the environment in which the antigen is used.
[Invention 1072]
Use of any of the polymersomes, compositions, antigen presenting cells, hybridomas or vaccines of the invention for one or more of the following:
i) To discover and / or screen and / or prepare antibodies
ii) To discover and / or screen and / or prepare vaccines
iii) To produce or prepare an immunogenic composition or an immunostimulatory composition
iv) Targeted delivery for targeted delivery of proteins and / or peptides, preferably targeted delivery of antigenic proteins and / or peptides, and more preferably targeted delivery performed in the subject. for,
v) To stimulate an immune response against an antigen, preferably to be used to stimulate an immune response against an antigen in a subject.
vi) CD8 (+) To trigger cross-defense induced by a T cell-mediated immune response
vii) To deliver a peptide or protein to antigen-presenting cells (APCs), preferably the peptide or protein is the antigen, and more preferably the peptide or protein is immunogenic or immunotherapeutic. ,
viii) To trigger an immune response, including a CD8 (+) T cell-mediated immune response and / or a CD4 (+) T cell-mediated immune response.
ix) A method for the treatment, amelioration, prevention or diagnosis of an infectious disease, preferably the infectious disease is a viral or bacterial infectious disease, and more preferably the viral infectious disease is an influenza infection. In a method for treating, ameliorating, preventing or diagnosing an infectious disease, selected from the group consisting of disease, PED virus infection, respiratory cyst virus infection, and herpesvirus infection.
x) For the treatment, improvement, prevention or diagnosis of cancer or autoimmune diseases
xi) To sensitize cancer cells to chemotherapy
xii) To induce apoptosis in cancer cells
xiii) To stimulate an immune response in a subject
xiv) To immunize non-human animals
xv) For the preparation of hybridomas
xvi) In any of the methods of the present invention
xvii) For use in any of i) to xvi) above, for in vivo and / or ex vivo and / or in vitro use.
xviii) For the use of any of i) to xvii) above, where the antigen is heterologous to the environment in which the antigen is used.
[Invention 1073]
Use of polymersomes with a diameter of about 120 nm or greater, containing soluble encapsulating antigens, to elicit an immune response.
The soluble encapsulated antigen
i) Polypeptide,
ii) Carbohydrate,
iii) A polynucleotide, or a polynucleotide, preferably a DNA or mRNA molecule, preferably not an antisense oligonucleotide.
iv) A combination of i) and / or ii) and / or iii)
Selected from the group consisting of
use.
[Invention 1074]
Polymersome diameters are about 120 nm to about 1 μm, or about 140 nm to about 750 nm, or about 120 nm to about 500 nm, or about 140 nm to about 250 nm, about 120 nm to about 240 nm, about 150 nm to about 235 nm, about 170 nm to about 230 nm. , Or the use of the invention 1075 in the range of about 220 nm to about 180 nm, or about 190 nm to about 210 nm.
[Invention 1075]
The use of a collection of polymersomes with an average diameter of about 120 nm or greater, containing soluble encapsulating antigen, to elicit an immune response.
The soluble encapsulated antigen
i) Polypeptide,
ii) Carbohydrate,
iii) A polynucleotide, or a polynucleotide, preferably a DNA or mRNA molecule, preferably not an antisense oligonucleotide.
iv) A combination of i) and / or ii) and / or iii)
Selected from the group consisting of
use.
[Invention 1076]
The average diameter of polymersome aggregates is about 120 nm to about 1 μm, or about 120 nm to about 750 nm, or about 120 nm to about 500 nm, or about 120 nm to about 250 nm, about 120 nm to about 240 nm, about 150 nm to about 235 nm, about. Use of the invention 1075 in the range of 170 nm to about 230 nm, or about 220 nm to about 180 nm, or about 190 nm to about 210 nm.
[Invention 1077]
Use of any of the present inventions 1073-1076, wherein the polymersome is selected from the group consisting of cationic polymersomes, anionic polymersomes and nonionic polymersomes.
[Invention 1078]
Block copolymers or amphoteric polymers are essentially non-immunogenic or essentially non-antigenic, preferably block copolymers or amphoteric polymers are non-immunogenic or non-antigenic. Use of the present invention 1077.
[Invention 1079]
Use of any of the present inventions 1073-1078, wherein the block copolymer or amphipathic polymer is neither an immunostimulant nor an adjuvant.
[Invention 1080]
Use of any of the present inventions 1073-1079, wherein the amphipathic polymer comprises a diblock or triblock (ABA or ABC) copolymer.
[Invention 1081]
Use of any of 1073 to 1080 of the present invention, wherein the amphipathic polymer comprises the copolymer poly (N-vinylpyrrolidone) -b-PLA.
[Invention 1082]
Use of any of 1074-1081 of the present invention, wherein the amphoteric polymer comprises at least one monomer unit of a carboxylic acid, amide, amine, alkylene, dialkylsiloxane, ether or alkylene sulfide.
[Invention 1083]
A group in which an amphoteric polymer consists of an oligo (oxyethylene) block, a poly (oxyethylene) block, an oligo (oxypropylene) block, a poly (oxypropylene) block, an oligo (oxybutylene) block and a poly (oxybutylene) block. Use of any of the present inventions 1074 to 1082, which is a more selected polyether block.
[Invention 1084]
The present invention, where the homophilic polymer is a poly (butadiene) -poly (ethylene oxide) (PB-PEO) diblock copolymer or a poly (dimethylsiloxane) -poly (ethylene oxide) (PDMS-PEO) diblock copolymer. Use of any of 1074 to 1083.
[Invention 1085]
The PB-PEO diblock copolymer contains 5-50 block PB and 5-50 block PEO, preferably the PB-PEO diblock copolymer contains 5-100 block PDMS and 5-100 block PEO. , Use of the present invention 1084.
[Invention 1086]
The amphoteric polymer is a poly (lactide) -poly (ethylene oxide) / 1-palmitoyle-2-oleyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (PLA-PEO / POPC) copolymer, preferably said. Use of any of the present inventions 1074-1085, wherein the PLA-PEO / POPC has a PLA-PEO to POPC (eg PLA-PEO / POPC) ratio of 75:25 (eg 75/25).
[Invention 1087]
The amphoteric polymer is a poly (caprolactone) -poly (ethylene oxide) / 1-palmitoyl-2-oleyl-sn-glycero-3-phospho-L-serine (PCL-PEO / POPC) copolymer, preferably said. Use of any of 1074-1086 of the invention, wherein the PCL-PEO / POPC has a PCL-PEO to POPC (eg PCL-PEO / POPC) ratio of 75:25 (eg 75/25).
[Invention 1088]
Use of any of the present inventions 1074-1087, wherein the amphipathic polymer is polybutadiene-polyethylene oxide (BD).
[Invention 1089]
Use of either 1074-1088 of the invention, wherein the polymersome comprises the diblock copolymer PBD 21 -PEO 14 (BD21) or PDMS 47 PEO 36 or the triblock copolymer PMOXA 12 -PDMS 55 -PMOXA 12 .
[Invention 1090]
Polymersomes containing soluble encapsulating antigens that are soluble viral proteins.
[Invention 1091]
The polymersome of the invention 1090, wherein the antigen comprises a soluble moiety selected from the group consisting of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein and orthodontic virus protein.
[Invention 1092]
Pig epidemic diarrhea virus spike protein contains the amino acid sequence of SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 or SEQ ID NO: 14, or of SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 or SEQ ID NO: 14. Polypeptide sequences and at least 60% (eg at least 65%, at least 70%, at least 75%, at least 80%, at least 85%, at least 90%, at least 95%, at least 96%, at least 97%, at least 98%, The polymersome of the invention 1090 comprising an amino acid sequence that is at least 99% or 100%) identical.
[Invention 1093]
The polymersome according to any one of the present inventions 1090 to 1092, which is the polymersome specified in any one of the present inventions 1029 to 1046.
[Invention 1094]
A pharmaceutical composition comprising any of the polymersomes of the present invention 1090-1093.
[Invention 1095]
The pharmaceutical composition of the present invention 1094 comprising a pharmaceutically acceptable carrier.
[Invention 1096]
The pharmaceutical composition of the present invention 1095 formulated for oral administration.
[Invention 1097]
The pharmaceutical composition of any of the present invention 1095 and the present invention 1096, wherein the polymersome is coated with a natural polymer or is contained in particles of a natural polymer or a synthetic biodegradable polymer.
[Invention 1098]
The pharmaceutical composition of the present invention 1097, wherein the natural polymer comprises chitosan, arginate, or a mixture of chitosan and arginate.
[Invention 1099]
Pharmaceuticals of any of the present invention 1096-1098, wherein the particles of the natural polymer have a size in the range of about 300 nm to about 1 micrometer, about 2 micrometers, about 3 micrometers, about 4 micrometers or about 5 micrometers. Composition.
[Invention 1100]
Use of any of the polymersomes of the invention 1090-1093 to prepare a pharmaceutical composition for vaccination of interest.
[Invention 1101]
Use of 1100 of the present invention, where the subject is vaccinated against a viral infection.
[Invention 1102]
Use of the invention 1100 or invention 1101 where the subject is a mammalian or non-mammalian animal.
[Invention 1103]
Use of the invention 1102, wherein the non-mammalian animal is a bird (eg, poultry such as chicken, duck, goose or turkey), fish or crustacean.
[Invention 1104]
Use of the present invention 1103, wherein the bird is a chicken, duck, goose or turkey.
[Invention 1105]
Use of the present invention 1103, wherein the fish is salmon, trout or tilapia.
[Invention 1106]
Use of the invention 1103, where the crustaceans are shrimp, prone or crab.
[Invention 1107]
Use of the present invention 1103, wherein the mammal is a goat, sheep, cow or pig.
[Invention 1108]
Use of the present invention 1103, wherein the animal is a pig and is vaccinated against the porcine epidemic diarrhea virus.
[Invention 1109]
Use of the present invention 1103, wherein the animal is a hoof and is vaccinated against the foot-and-mouth disease virus.
Claims (22)
該可溶性封入抗原が、
i）ポリペプチド、
ii）糖質、
iii）アンチセンスオリゴヌクレオチドではなく、好ましくはDNA分子もしくはmRNA分子である、ポリヌクレオチド、
iv）i）および/またはii）および/またはiii）の組合せ
からなる群より選択され、
該ポリマーソームが、約100nm～約1μmの範囲の直径を有し、かつCD8 （＋） T細胞媒介性免疫応答を誘発する能力を有する、
酸化安定性ポリマーソーム。 Oxidation-stable polymersome containing soluble encapsulating antigen,
The soluble encapsulated antigen
i) Polypeptide,
ii) Carbohydrate,
iii) A polynucleotide, which is preferably a DNA or mRNA molecule rather than an antisense oligonucleotide.
iv) Selected from the group consisting of combinations of i) and / or ii) and / or iii)
The polymersome has a diameter in the range of about 100 nm to about 1 μm and has the ability to elicit a CD8 (+) T cell-mediated immune response.
Oxidation-stable polymersome.
（ii）ポリマーソームが、可溶性封入抗原を含むその内容物を酸化非依存的に放出して、CD8 （＋） T細胞媒介性免疫応答をトリガーする能力を有する；
（iii）ポリマーソームが、CD8 （＋） T細胞媒介性免疫応答を含む細胞性免疫応答を誘発する能力を有する；ならびに/または
（iv）ポリマーソームが、細胞性免疫応答および/または体液性免疫応答を誘発する能力を有し、細胞性免疫応答がCD8 （＋） T細胞媒介性免疫応答を含む、
請求項1記載のポリマーソーム。 (I) The antigen contains a soluble portion of membrane protein (MP) or membrane binding peptide (MAP), preferably the antigen is influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide. Alternatively, it contains a soluble portion of the MC38 peptide, more preferably the antigen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, Group consisting of SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 and SEQ ID NO: 14. Includes polypeptides that are at least 60% identical to the selected polypeptide sequence ;
(Ii) Polymersomes have the ability to oxidatively release their contents, including soluble encapsulating antigens, to trigger a CD8 (+) T cell-mediated immune response;
(Iii) Polymersomes have the ability to elicit cell-mediated immune responses, including CD8 (+) T cell-mediated immune responses; and / or
(Iv) Polymersomes have the ability to elicit a cellular and / or humoral immune response, and the cellular immune response comprises a CD8 (+) T cell-mediated immune response.
The polymersome according to claim 1 .
i）細胞性免疫応答を誘発する能力であって、好ましくは該細胞性免疫応答がCD8（＋）T細胞媒介性免疫応答を含み、さらに好ましくは該細胞性免疫応答がCD8（＋）T細胞媒介性免疫応答であり、最も好ましくは該細胞性免疫応答がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する応答であり、さらに最も好ましくは該細胞性免疫応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドに対する応答である、細胞性免疫応答を誘発する能力;
ii）エンドソーム内でポリマーソーム内容物を放出する能力であって、好ましくは該エンドソームが後期エンドソームであり、さらに好ましくは該内容物がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、最も好ましくは該内容物が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドを含む、エンドソーム内でポリマーソーム内容物を放出する能力;
iii）ポリマーソーム内容物を酸化非依存的に放出してCD8（＋）T細胞媒介性免疫応答をトリガーする能力であって、好ましくは該内容物がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、さらに好ましくは該内容物が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドを含む、ポリマーソーム内容物を酸化非依存的に放出してCD8（＋）T細胞媒介性免疫応答をトリガーする能力;
iv）抗原に対する免疫応答を刺激する能力であって、好ましくは該抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含み、さらに好ましくは該抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11およびSEQ ID NO:12～14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドを含む、抗原に対する免疫応答を刺激する能力;
v）CD8（＋）T細胞媒介性免疫応答によって誘導される交差防御をトリガーする能力であって、好ましくは該応答がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する応答であり、さらに好ましくは該応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドに対する応答である、CD8（＋）T細胞媒介性免疫応答によって誘導される交差防御をトリガーする能力;
vi）ペプチドまたはタンパク質を抗原提示細胞（APC）に送達する能力であって、好ましくは該ペプチドまたはタンパク質が、インフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分を含むか、または該可溶性部分に由来し、さらに好ましくは該ペプチドまたはタンパク質が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドを含むか、該ポリペプチドに由来する、ペプチドまたはタンパク質を抗原提示細胞（APC）に送達する能力;
vii）CD8（＋）T細胞媒介性免疫応答および/またはCD4（＋）T細胞媒介性免疫応答を含む免疫応答をトリガーする能力であって、好ましくは該応答がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、卵白アルブミン（OVA）、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する応答であり、さらに好ましくは該応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドに対する応答である、CD8（＋）T細胞媒介性免疫応答および/またはCD4（＋）T細胞媒介性免疫応答を含む免疫応答をトリガーする能力;
viii）対象における免疫応答を刺激する能力であって、好ましくは該応答がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する応答であり、さらに好ましくは該応答が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドに対する応答である、対象における免疫応答を刺激する能力;
ix）非ヒト動物を免疫処置する能力であって、好ましくは該免疫処置がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分に対する免疫処置であり、さらに好ましくは該免疫処置が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13およびSEQ ID NO:14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドに対する免疫処置である、非ヒト動物を免疫処置する能力;
x）ポリマーソームが、該ポリマーソームなしでの抗原の対応する抗原性と比較して、改変された抗原性を有することであって、好ましくは該抗原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分であり、さらに好ましくは該抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドである、改変された抗原性を有すること;
xi）ポリマーソームが、該ポリマーソームなしでの抗原の対応する免疫原性と比較して、改変された免疫原性を有することであって、好ましくは該免疫原がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニン、ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質、卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドの可溶性部分であり、さらに好ましくは該免疫原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13およびSEQ ID NO:14からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であるポリペプチドである、改変された免疫原性を有すること。 The polymersome according to claim 1 or 2 , having one or more of the following abilities:
i) The ability to elicit a cell-mediated immune response, preferably the cell-mediated immune response comprises a CD8 (+) T cell-mediated immune response, and more preferably the cell-mediated immune response is a CD8 (+) T cell. A mediated immune response, most preferably the cell-mediated immune response, is a response to a soluble portion of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. More preferably, the cell-mediated immune response is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO. At least 60% or more of the polypeptide sequence selected from the group consisting of: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12-14. Ability to elicit a cell-mediated immune response, a response to a polypeptide that is identical;
ii) Ability to release polymersome contents within endosomes, preferably the endosomes are late endosomes, and more preferably the contents are influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white. It contains a soluble moiety of albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, most preferably the contents of which are SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID. A group consisting of NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12-14. Ability to release polymersome contents within endosomes, including polypeptides that are at least 60 % identical to the selected polypeptide sequence;
iii) The ability to release the polymersome content in an oxidation-independent manner to trigger a CD8 (+) T cell-mediated immune response, preferably the content being influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, or porcine epidemic diarrhea. It contains a soluble moiety of a viral spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide, more preferably the contents of which are SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO. : 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12 A CD8 (+) T cell-mediated immune response is produced by oxidatively releasing the polymersome content containing a polypeptide that is at least 60 % identical to the polypeptide sequence selected from the group consisting of ~ 14. Ability to trigger;
iv) Ability to stimulate an immune response to an antigen, preferably the antigen comprising soluble moieties of influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. , More preferably, the antigen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, At least 60 % identical to the polypeptide sequence selected from the group consisting of SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12-14. Ability to stimulate immune response to antigen, including polypeptides;
v) CD8 (+) Ability to trigger cross-defense induced by a T cell-mediated immune response, preferably such response is influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA). ), Response to the soluble moiety of the B16 peptide or MC38 peptide, more preferably the response is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO :. A group consisting of 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, 13 and 14. Ability to trigger cross-defense induced by a CD8 (+) T cell-mediated immune response, which is a response to a polypeptide that is at least 60 % identical to the selected polypeptide sequence;
vi) The ability to deliver a peptide or protein to antigen-presenting cells (APCs), preferably the peptide or protein is influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), B16. Contains or is derived from the soluble moiety of the peptide or MC38 peptide, more preferably the peptide or protein contains SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO :. 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, Ability to deliver a peptide or protein to an antigen-presenting cell (APC) containing or derived from a polypeptide that is at least 60 % identical to the polypeptide sequence selected from the group consisting of 13 and 14;
vii) CD8 (+) T-cell-mediated immune response and / or CD4 (+) ability to trigger an immune response, including a T-cell-mediated immune response, preferably the response to influenza hemagglutinin, porcine influenza hemaglutinine, egg white. Responses to soluble moieties of albumin (OVA), porcine epidemic diarrhea virus spike protein, B16 peptide or MC38 peptide, more preferably the response is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3. , SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ CD8 (+) T cell-mediated immune response and / or CD4 ( +), a response to a polypeptide that is at least 60 % identical to a polypeptide sequence selected from the group consisting of ID NO: 12, 13 and 14. ) Ability to trigger immune responses, including T cell-mediated immune responses;
viii) The ability to stimulate an immune response in a subject, preferably the response to a soluble portion of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. The response is, more preferably, SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO :. At least 60% or more of the polypeptide sequence selected from the group consisting of 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12, 13 and 14. Ability to stimulate an immune response in a subject, which is a response to a polypeptide that is identical above ;
ix) Ability to immunotreat non-human animals, preferably against soluble moieties of influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin, porcine epidemic diarrhea virus spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide. It is an immunological treatment, and more preferably, the immunological treatment is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ. From the group consisting of ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 and SEQ ID NO: 14. Ability to immunotreat non-human animals, which is an immunotreatment against a polypeptide that is at least 60 % identical to the selected polypeptide sequence;
x) The polymersome has a modified antigenicity as compared to the corresponding antigenicity of the antigen without the polymersome, preferably the antigen is influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine, porcine epidemic. Diarrhea virus Spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide is a soluble moiety, more preferably the antigen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO. : 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 and SEQ ID NO: 12 , A polypeptide that is at least 60 % identical to the polypeptide sequence selected from the group consisting of 13 and 14, having modified antigenicity;
xi) The polymersome has a modified immunogenicity as compared to the corresponding immunogenicity of the antigen without the polymersome, preferably the immunogen is influenza hemaglutinine, porcine influenza hemaglutinine,. Pig epidemic diarrhea virus Spike protein, egg white albumin (OVA), B16 peptide or MC38 peptide soluble portion, more preferably the immunogen is SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3. , SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11, SEQ Having modified immunogenicity, which is a polypeptide that is at least 60 % identical to the polypeptide sequence selected from the group consisting of ID NO: 12, SEQ ID NO: 13 and SEQ ID NO: 14.
i）ポリマーソームが酸化安定性膜を含む、および/または
ii）ポリマーソームが合成物である、および/または
iii）ポリマーソームが非封入抗原を含まないか、または非封入抗原と混合されている、および/または
iv）ポリマーソームが両親媒性ポリマーの膜を含む、および/または
v）ポリマーソームが、ベシクル膜を形成する両親媒性合成ブロック共重合体を含む、および/または
vi）ポリマーソームがベシクルの形態を有する、
vii）ポリマーソームが自己集合性である。 The polymersome according to any one of claims 1 to 3 , which has one or more of the following properties:
i) Polymersomes contain oxidative stability membranes and / or
ii) Polymersomes are synthetic and / or
iii) Polymersomes do not contain or are mixed with unencapsulated antigens and / or
iv) Polymersomes contain membranes of amphipathic polymers and / or
v) Polymersomes contain amphipathic synthetic block copolymers that form vesicle membranes and / or
vi ) Polymersomes have vesicle morphology,
vii ) Polymersomes are self-assembling.
i）ウイルスポリペプチド配列と少なくとも80％以上同一であるポリペプチドであって、好ましくは該ウイルスポリペプチド配列がインフルエンザヘマグルチニン、ブタインフルエンザヘマグルチニンまたはブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質であり、さらに好ましくは該ウイルスポリペプチド配列が、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8ならびにSEQ ID NO:12、13および14からなる群より選択される、ポリペプチド;
ii）哺乳類ポリペプチド配列または鳥類ポリペプチド配列と少なくとも80％以上同一であるポリペプチドであって、好ましくは該哺乳類ポリペプチド配列または該鳥類ポリペプチド配列が卵白アルブミン（OVA）、B16ペプチドまたはMC38ペプチドであり、さらに好ましくは該哺乳類ポリペプチド配列または該鳥類ポリペプチド配列が、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10およびSEQ ID NO:11からなる群より選択される、ポリペプチド
からなる群より選択される、請求項1～5のいずれか一項記載のポリマーソーム。 The antigen is below:
i) A polypeptide that is at least 80 % identical to the viral polypeptide sequence, preferably the viral polypeptide sequence is influenza hemagglutinin, porcine influenza hemagglutinin or porcine epidemic diarrhea virus spike protein. The viral polypeptide sequence is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 and SEQ ID NO: 8 and SEQ ID NO: 12, 13 and 14, polypeptide;
ii ) A polypeptide that is at least 80 % identical to a mammalian polypeptide or avian polypeptide sequence, preferably the mammalian polypeptide sequence or the avian polypeptide sequence is ovalbumin (OVA), B16 peptide or MC38. Peptides, more preferably the mammalian polypeptide sequence or the avian polypeptide sequence, are SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 9, The polymer som according to any one of claims 1 to 5 , which is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 10 and SEQ ID NO: 11 and selected from the group consisting of polypeptides.
i）インフルエンザヘマグルチニン（HA）、好ましくはSEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7およびSEQ ID NO:8からなる群より選択されるもの、
ii）ブタインフルエンザヘマグルチニン（HA）、好ましくはSEQ ID NO:6、
iii）卵白アルブミン（OVA）、好ましくはSEQ ID NO:4、
iv）B16ペプチド、好ましくはSEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10およびSEQ ID NO:11からなる群より選択されるもの、
v）MC38ペプチド、好ましくはSEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2およびSEQ ID NO:3からなる群より選択されるもの、
vi）B16ペプチドおよびMC38ペプチド、好ましくは該ペプチドは、群:i）SEQ ID NO:1～3およびii）SEQ ID NO:9～11から独立して選択される、
vii）ブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質およびその可溶性フラグメント、好ましくはSEQ ID NO:12、13または14のフラグメント
からなる群より選択される、請求項1～8のいずれか一項記載のポリマーソーム。 The antigen is below:
i) Influenza hemagglutinin (HA), preferably selected from the group consisting of SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 and SEQ ID NO: 8.
ii) Swine flu hemagglutinin (HA), preferably SEQ ID NO: 6,
iii) Egg white albumin (OVA), preferably SEQ ID NO: 4,
iv) B16 peptide, preferably one selected from the group consisting of SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10 and SEQ ID NO: 11.
v) MC38 peptide, preferably selected from the group consisting of SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 and SEQ ID NO: 3.
vi) B16 and MC38 peptides, preferably said peptides, are independently selected from the groups: i) SEQ ID NO: 1-3 and ii) SEQ ID NO: 9-11.
vii) The polymersome according to any one of claims 1 to 8 , which is selected from the group consisting of a porcine epidemic diarrhea virus spike protein and a soluble fragment thereof, preferably a fragment of SEQ ID NO: 12, 13 or 14.
ii）抗原がブタインフルエンザヘマグルチニン（HA）を含み、ワクチンがブタインフルエンザワクチンであり、好ましくは該ブタインフルエンザヘマグルチニン（HA）が、SEQ ID NO:6と少なくとも60％以上同一である、
iii）抗原がブタ流行性下痢ウイルススパイクタンパク質を含み、ワクチンがPEDワクチンであり、好ましくは該スパイクタンパク質が、SEQ ID NO:12、13または14のポリペプチドと少なくとも60％以上同一である、
iv）抗原が卵白アルブミン（OVA）を含み、ワクチンががんワクチンであり、好ましくは該卵白アルブミン（OVA）が、SEQ ID NO:4と少なくとも60％以上同一である、
v）抗原がB16ペプチドを含み、ワクチンががんワクチンであり、好ましくは該ペプチドがSEQ ID NO:9～11からなる群より選択される、
vi）抗原がMC38ペプチドを含み、ワクチンががんワクチンであり、好ましくは該ペプチドがSEQ ID NO:1～3からなる群より選択される、
vii）抗原がB16ペプチドおよびMC38ペプチドを含み、ワクチンががんワクチンであり、好ましくは該ペプチドが群:i）SEQ ID NO:1～3およびii）SEQ ID NO:9～11から独立して選択される、
viii）抗原が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11からなる群より選択されるポリペプチド配列と少なくとも60％以上同一であり、ワクチンががんワクチンである、
請求項18記載のワクチン。 i) The antigen comprises influenza hemagglutinin (HA) and the vaccine is an influenza vaccine, preferably the influenza hemagglutinin (HA) is SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 and SEQ ID NO. At least 60 % identical to the polypeptide selected from the group consisting of: 8.
ii) The antigen comprises swine flu hemagglutinin (HA) and the vaccine is a swine flu vaccine, preferably the swine flu hemagglutinin (HA) is at least 60 % identical to SEQ ID NO: 6.
iii) The antigen comprises a porcine epidemic diarrhea virus spike protein, the vaccine is a PED vaccine, preferably the spike protein is at least 60 % identical to the polypeptide of SEQ ID NO: 12, 13 or 14.
iv) The antigen comprises ovalbumin (OVA) and the vaccine is a cancer vaccine, preferably said ovalbumin (OVA) is at least 60 % identical to SEQ ID NO: 4.
v) The antigen comprises a B16 peptide, the vaccine is a cancer vaccine, preferably the peptide is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 9-11.
vi) The antigen comprises the MC38 peptide, the vaccine is a cancer vaccine, preferably the peptide is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 1-3.
vii) The antigen comprises a B16 peptide and an MC38 peptide, the vaccine is a cancer vaccine, preferably the peptide is independent of the group: i) SEQ ID NO: 1-3 and ii) SEQ ID NO: 9-11. Selected,
viii) A polypeptide sequence in which the antigen is selected from the group consisting of SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11. Is at least 60 % identical and the vaccine is a cancer vaccine,
The vaccine according to claim 18 .
(i)感染性疾患であって、好ましくは感染性疾患がウイルス感染性疾患もしくは細菌感染性疾患であり、さらに好ましくはウイルス感染性疾患が、インフルエンザ感染症、PEDウイルス感染症、口蹄疫ウイルス（food and mouth virus）感染症、呼吸器合胞体ウイルス感染症、ヘルペスウイルス感染症からなる群より選択される、感染性疾患；および/または、
(ii)がんもしくは自己免疫疾患。 The polymersome, composition , or vaccine according to any one of claims 1 to 19 for treating the following :
(i) Infectious diseases, preferably infectious diseases are viral or bacterial infectious diseases, and more preferably viral infectious diseases are influenza infectious diseases, PED virus infectious diseases, and hoof epidemic virus (food). and mouth virus) Infectious diseases selected from the group consisting of infectious diseases, respiratory cyst virus infections, and herpesvirus infections; and / or
(ii) Cancer or autoimmune disease .
i）エクスビボまたはインビトロで、抗体を発見および/またはスクリーニングおよび/または調製するため、
ii）エクスビボまたはインビトロで、ワクチンを発見および/またはスクリーニングおよび/または調製するため、
iii）エクスビボまたはインビトロで、免疫原性組成物または免疫賦活組成物を生産または調製するため、
iv）エクスビボまたはインビトロのハイブリドーマの調製のため。 Use of the polymersome, composition , or vaccine according to any one of claims 1-19 for one or more of the following:
i) To discover and / or screen and / or prepare antibodies in Exvivo or in vitro .
ii) To discover and / or screen and / or prepare vaccines in Exvivo or in vitro
iii) To produce or prepare immunogenic or immunostimulatory compositions in Exvivo or in vitro .
iv ) For the preparation of exvivo or in vitro hybridomas.
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