JPWO2010095462A1

JPWO2010095462A1 - 新規な３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３ｈ）−オン構造を有する化合物及びこれを含有する医薬

Info

Publication number: JPWO2010095462A1
Application number: JP2011500532A
Authority: JP
Inventors: 三浦　徹; 徹三浦; 和弘小野木; 潤也田頭; 玄渡部; 亮平堰本; 石田　理恵; 理恵石田; 忠明扇谷
Original assignee: Kowa Co Ltd
Current assignee: Kowa Co Ltd
Priority date: 2009-02-23
Filing date: 2010-02-22
Publication date: 2012-08-23
Also published as: EP2399917A1; US20110306623A1; TW201031659A; WO2010095462A1

Abstract

アンジオテンシンII受容体拮抗作用及びＰＰＡＲγ活性化作用を併せ持ち、高血圧症、心疾患、狭心症、脳血管障害、脳循環障害、虚血性末梢循環障害、腎疾患、動脈硬化症、炎症性疾患、２型糖尿病、糖尿病性合併症、インスリン抵抗性症候群、シンドロームＸ、メタボリックシンドローム、高インスリン血症の予防及び／又は治療剤として有用な新規な化合物を提供すること。下記一般式（Ｉ）：［式中、Ｒは、Ｃ１−４アルキル基を示す］で表される３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物。

Description

本発明は、アンジオテンシンII拮抗作用及びＰＰＡＲγ活性化作用を有する新規な３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン構造を有する化合物及びこれを含有する医薬に関する。

近年、生活水準向上に伴うライフ・スタイルの変化、即ち、高カロリー、高コレステロール食の摂取、肥満、運動不足、高齢化等により、糖尿病、高血圧、脂質異常症、肥満等の、動脈硬化性疾患の危険因子となり得る疾患が急増している。これらの疾患は互いに独立した危険因子ではあるが、これらの重複により動脈硬化性疾患の、より高頻度の発症や重症化を引き起こすことが明らかにされてきた。そこで、複数の動脈硬化性疾患の危険因子を合併する病態をメタボリックシンドロームという概念でとらえ、その原因の解明と治療法の開発を目指した努力がなされている。

アンジオテンシンII（ＡII）は、レニン−アンジオテンシン系（ＲＡ系）により産生される内因性の昇圧物質として発見されたペプチドである。薬理学的なＡIIの作用抑制は、高血圧等の循環器系疾患の治療又は予防につながると考えられ、ＲＡ系の抑制薬として、アンジオテンシンI（ＡI）からＡIIへの変換酵素を阻害するアンジオテンシン変換酵素（Angiotensin Converting Enzyme（ＡＣＥ））阻害薬が臨床的に用いられている。また、その後経口投与可能なＡII受容体拮抗剤（Angiotensin Receptor Blocker：ＡＲＢ）が開発され、既にロサルタン、カンデサルタン、テルミサルタン、バルサルタン、オルメサルタン、イルベサルタン等が降圧剤として臨床的に用いられている。更に、ＡＲＢは単に降圧作用のみならず、抗炎症作用、内皮機能改善作用、心血管リモデリング抑制作用、酸化ストレス抑制作用、増殖因子抑制作用、インスリン抵抗性改善作用等の様々な作用により、心血管疾患、腎疾患、動脈硬化等にも有用であることが、臨床もしくは基礎試験において多数報告されている（非特許文献１、２）。特に近年では、降圧作用に依存しないＡＲＢの腎保護作用についても報告されている（非特許文献３）。

一方、核内受容体スーパーファミリーに属するペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（Peroxisome Proliferator-Activated Receptors：ＰＰＡＲｓ）は、現在までにα、γ及びδの３種アイソフォームが同定されている。中でもＰＰＡＲγは、脂肪組織中で最も大量に発現するアイソフォームであり、脂肪細胞の分化や糖脂質代謝に重要な役割を果たしている。現在、ピオグリタゾンやロシグリタゾン等のチアゾリジンジオン誘導体（ＴＺＤ）がＰＰＡＲγ活性化作用を有する糖尿病治療薬として臨床的に用いられており、インスリン抵抗性、耐糖能、脂質代謝の改善作用等を示す事が知られている。更に近年、ＴＺＤはＰＰＡＲγの活性化により、降圧作用、抗炎症作用、内皮機能改善作用、増殖因子抑制作用、ＲＡ系との干渉作用等の多様な作用を示すことが報告されている。これら多面的な作用により、特に糖尿病性腎症においてＴＺＤは血糖コントロールに依存しない腎保護作用を示すことが報告されている（非特許文献４、５、６、７、８）。しかしながら、その一方でＴＺＤはＰＰＡＲγ作動で誘発される体液貯留、体重増加、末梢浮腫、肺浮腫等の副作用が危惧されている（非特許文献９、１０）。

近年、テルミサルタンにＰＰＡＲγ活性化作用があることが報告された（非特許文献１１）。また、イルベサルタンについても同様の作用があることが報告されている（非特許文献１２）。これらの化合物は、ＲＡ系抑制及びＰＰＡＲγ活性化作用を併せ持つことにより、ＴＺＤで懸念される体液貯留、体重増加、末梢浮腫、肺浮腫又はうっ血性心不全のリスクを高めることなく循環器系疾患（高血圧症、心疾患、狭心症、脳血管障害、脳循環障害、虚血性末梢循環障害、腎疾患等）や糖尿病関連疾患（２型糖尿病、糖尿病性合併症、インスリン抵抗性症候群、メタボリックシンドローム、高インスリン血症等）の統合的な予防及び／又は治療剤として期待されている（特許文献１）。中でも糖尿病性腎症においては、ＲＡ系抑制及びＰＰＡＲγ活性化作用による複合的な腎保護作用により、相乗的な予防及び／又は治療効果が期待できる。
このような作用を有する化合物として、ピリミジン及びトリアジン誘導体（特許文献１）の報告がある。この特許文献１には、下式（Ａ）：

のような、ピリミジノン骨格を有する化合物が記載されている（特許文献１の実施例３２５参照）。しかしながら、特許文献１にはピリミジノン環の３位に２−ピリミジル基が直接結合した具体的な化合物の開示はない。

国際公開第２００８/０６２９０５号パンフレット

AMER. J. Hypertension, 18, 720(2005) Current Hypertension Report, 10, 261(2008) Diabetes Care, 30, 1581(2007) Kidney Int., 70, 1223(2006) Circulation, 108, 2941(2003) Best Pract. Res. Clin. Endocrinol. Metab., 21(4), 687 (2007) Diab. Vasc. Dis. Res., 1(2), 76(2004) Diab. Vasc. Dis. Res., 2(2), 61(2005) J. Clin. Invest., 116(3), 581(2006) FABES J., 20(8), 1203(2006) Hypertension, 43, 993(2004) Circulation, 109, 2054(2004)

本発明の目的は、循環器系の疾患である高血圧症及び代謝性疾患である糖尿病等の予防及び／又は治療に供する医薬として有用な新規化合物を提供することにある。

本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意研究を続けた結果、下記一般式（Ｉ）で表される３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体が、優れたＡII拮抗作用とＰＰＡＲγ活性化作用とを併せ持ち、特にＡII受容体拮抗作用に優れた化合物であることを見出し、本発明に至った。

すなわち、本発明は、以下に示す発明に関する。
［１］次の一般式（Ｉ）：

［式中、Ｒは、Ｃ_１−４アルキル基を示す］
で表される３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物。
［２］ＲにおけるＣ_１−４アルキル基が、メチル基又はエチル基である前記［１］に記載の化合物、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物。
［３］前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物、及び製薬上許容される担体を含有してなる医薬組成物。
［４］前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物を有効成分とする、アンジオテンシンII受容体拮抗作用及びＰＰＡＲγ活性化作用を併せ持つ医薬組成物。
［５］前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする循環器系疾患の予防及び／又は治療剤。
［６］循環器系疾患が、高血圧症、心疾患、狭心症、脳血管障害、脳循環障害、虚血性末梢循環障害、腎疾患又は動脈硬化症である前記［５］に記載の予防及び／又は治療剤。
［７］前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする代謝性疾患の予防及び／又は治療剤。
［８］代謝性疾患が、２型糖尿病、糖尿病性合併症（糖尿病網膜症、糖尿病性神経障害又は糖尿病性腎症）、インスリン抵抗性症候群、メタボリックシンドローム又は高インスリン血症である前記［７］に記載の予防及び／又は治療剤。
［９］治療を必要としている患者に、前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物の有効量を投与することを特徴とする循環器系疾患の予防及び／又は治療方法。
［１０］治療を必要としている患者に、前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物の有効量を投与することを特徴とする代謝性疾患の予防及び／又は治療方法。
［１１］循環器系疾患の予防及び／又は治療のための製剤を製造するための、前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物の使用。
［１２］代謝性疾患の予防及び／又は治療のための製剤を製造するための、前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物の使用。
［１３］アンジオテンシンII受容体拮抗作用及びＰＰＡＲγ活性化作用の両方の作用を併せ持つ前記［１］又は［２］に記載の３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物。
に関する。

本発明の一般式（Ｉ）で表される３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物は、アンジオテンシンII受容体に対し強い拮抗作用を示し、アンジオテンシンIIの関与する疾患、例えば、高血圧症、心疾患、狭心症、脳血管障害、脳循環障害、虚血性末梢循環障害、腎疾患、動脈硬化症等の循環器系疾患の予防及び／又は治療剤の有効成分として好適に使用できる。

また、本発明の一般式（Ｉ）で表される３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物は、ＰＰＡＲγ活性化作用を示し、ＰＰＡＲγの関与する疾患、例えば、動脈硬化症、２型糖尿病、糖尿病性合併症（糖尿病網膜症、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症）、インスリン抵抗性症候群、シンドロームＸ、メタボリックシンドローム、高インスリン血症等の代謝性疾患の予防及び／又は治療剤の有効成分として好適に使用できる。

さらに、本発明の一般式（Ｉ）で表される３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物は、アンジオテンシンII受容体拮抗作用とＰＰＡＲγ活性化作用とを併せ持ち、アンジオテンシンIIとＰＰＡＲγの両方が関与する疾患、例えば、動脈硬化症、糖尿病性腎症、インスリン抵抗性症候群、シンドロームＸ、メタボリックシンドロームの疾患の予防及び／又は治療剤の有効成分として好適に使用できる。

図１は雄性ＳＤラットを用いた化合物ａ及び比較化合物ＢのそれぞれのＡII昇圧抑制作用を示す図である。図２は高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）を用いた化合物ａの降圧作用を示す図である。

一般式（Ｉ）中、ＲにおけるＣ_１−４アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基が挙げられるが、メチル基、エチル基が好ましい。

一般式（Ｉ）で表される化合物の塩としては、薬学上許容される塩であれば特に制限されない。化合物を酸性化合物として扱う場合は、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等の金属塩との塩等が挙げられる。化合物を塩基性化合物として扱う場合には、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩のような鉱酸の酸付加塩；メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等の有機酸の酸付加塩等が挙げられる。

一般式（Ｉ）で表される化合物、又はその塩の溶媒和物としては、例えば、水和物等が挙げられるが、これに限定されるものではない。

なお、生体内において代謝されて一般式（Ｉ）で表される化合物に変換される化合物、いわゆるプロドラッグもすべて本発明に包含される。本発明化合物のプロドラッグを形成する基としては、「プログレス・イン・メディシン（Progress in Medicine）」、ライフサイエンス・メディカ社、１９８５年、５巻、２１５７−２１６１ページに記載されている基や、廣川書店１９９０年刊「医薬品の開発」第７巻分子設計１６３−１９８ページに記載されている基が挙げられる。

上記一般式（Ｉ）で表される化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物は本明細書実施例の方法又は種々の公知の方法で製造することができる。例えば、２−アミノ−５−置換−ピリミジン誘導体を用いて環化させて３−（５−置換ピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン構造を有する誘導体を製造することができる。また、一般式（Ｉ）で表される化合物のＲ部分の導入には、後記実施例１の工程４に示すように、ピリミジン環の５位を遊離の水酸基とした後、一般的なフェノール性水酸基のアルキル化を用いればよい。さらに、各工程を行う際において、反応部位以外の官能基については必要に応じてあらかじめ保護しておき、適当な段階においてこれを脱保護してもよい。また、各工程において、反応は通常行われる方法で行えばよく、単離精製は結晶化、再結晶化、クロマトグラフィー等の慣用される方法を適宜選択し、又は組み合わせて行えばよい。

本発明の化合物、若しくはその塩、又はそれらの溶媒和物を有効成分とする医薬の投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与又は静脈内注射剤、筋肉注射剤、坐剤、吸入剤、経皮吸収剤、点眼剤、点鼻剤等による非経口投与が挙げられる。また、このような種々の剤型の医薬製剤を調製するには、この有効成分を単独で、又は他の製薬上許容される担体、すなわち、賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、矯味剤、香料、被膜剤、希釈剤等を適宜組み合わせて医薬組成物として調製できる。

本発明の医薬の投与量は、患者の体重、年齢、性別、症状等によって異なるが、通常成人の場合、一般式（Ｉ）で表わされる化合物として、１日０．１〜１０００ｍｇ、特に１〜３００ｍｇを、一回又は数回に分けて経口投与又は非経口投与することができる。

次に、実施例及び試験例を挙げて本発明をさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、下記実施例中で用いられている略号は下記の意味を示す。
ｓ：シングレット（singlet）
ｄ：ダブレット（doublet）
ｔ：トリプレット（triplet）
ｑ：クアルテット（quartet）
ｍ：マルチプレット（multiplet）
ｂｒ：ブロード（broad）
Ｊ：カップリング定数（coupling constant）
Ｈｚ：ヘルツ（Hertz）
ＣＤＣｌ_３：重クロロホルム
^１Ｈ-ＮＭＲ：プロトン核磁気共鳴

実施例１：３−｛４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−イル｝−１，２，４−オキサジアゾール−５（４Ｈ）−オン（化合物ａ）の製造：

工程１：（Z）−３−アセタミド−２−［（２’−シアノビフェニル−４−イル）メチル］−２−ヘプテン酸メチルの製造

２−［（２’−シアノビフェニル−４−イル）メチル］−３−オキソヘプタン酸メチル（２．１１ｇ，６．０４ｍｍｏｌ）及び酢酸アンモニウム（２．７９ｇ，３６．２ｍｍｏｌ）のトルエン（４０．５ｍＬ）及び酢酸（４．５ｍＬ）混合溶液を、４時間加熱還流した。溶媒を留去後の残渣に、室温下で無水酢酸（４．５ｍＬ）及び酢酸（１．０ｍＬ）を加えて、７０℃で３時間攪拌した。反応液に氷冷下で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を合せ、水及び飽和食塩水で洗浄し無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）に付し、（Ｚ）−３−アセタミド−２−［（２’−シアノビフェニル−４−イル）メチル］−２−ヘプテン酸メチル１．２９ｇ（５４．７％，２ｓｔｅｐｓ）を淡黄色油状物として得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：
0.89 (3H, t, J=7 Hz), 1.28-1.55 (4H, m), 2.17 (3H, s),
2.92 (2H, t, J=8 Hz), 3.70 (3H, s), 3.76 (2H, s),
7.25 (2H, d, J=8 Hz), 7.42 (1H, t, J=8 Hz),
7.45-7.53 (3H, m), 7.63 (1H, t, J=8 Hz),
7.74 (1H, d, J=8 Hz), 11.9 (1H, s).

工程２：４’−｛｛３−［５−（ベンジルオキシ）ピリミジン−２−イル］−６−ブチル−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル｝メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリルの製造

２−アミノ−５−ベンジルオキシピリミジン（２９１ｍｇ，１．４５ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（６ｍＬ）溶液に、室温下でトリメチルアルミニウム（２ｍｏｌ／Ｌヘプタン溶液、１．２１ｍＬ，２．４２ｍｍｏｌ）を加え、同温度で７５分間攪拌した。この溶液に、工程１で製造した（Ｚ）−３−アセタミド−２−［（２’−シアノビフェニル−４−イル）メチル］−２−ヘプテン酸メチル（１８９ｍｇ，０．４８３ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン溶液（４ｍＬ）を同温度で滴下し、１２時間加熱還流した。反応液に塩化アンモニウム水溶液及びクロロホルムを加え、セライトろ過した。ろ液の有機層を分離し、水層をクロロホルムで抽出した。有機層を合せ、水及び飽和食塩水で洗浄後無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：アセトン＝５：１→４：１）に付し、４’−｛｛３−［５−（ベンジルオキシ）ピリミジン−２−イル］−６−ブチル−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル｝メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリル２３６ｍｇ（９０．４％）を淡黄色アモルファスとして得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：
0.92 (3H, t, d=7 Hz), 1.33-1.47 (2H, m), 1.51-1.68 (2H, m),
2.16 (3H, s), 2.65 (2H, t, J=8 Hz), 3.97 (2H, s),
5.22 (2H, s), 7.32-7.52 (11H, m), 7.61 (1H, t, J=8 Hz),
7.73 (1H, d, J=8 Hz), 8.60 (2H, s).

工程３：４’−｛［６−ブチル−３−（５−ヒドロキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリルの製造

４’−｛｛３−［５−（ベンジルオキシ）ピリミジン−２−イル］−６−ブチル−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル｝メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリル（２３５ｍｇ，０．４３４ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（１０ｍＬ）に１０％Ｐｄ−Ｃ（５０％水分含有，１２０ｍｇ）を加え、水素で置換した。室温で１時間攪拌後、反応液をセライトろ過し、メタノールで洗浄した。ろ液を留去して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１）に付し、４’−｛［６−ブチル−３−（５−ヒドロキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリル１３８ｍｇ（７０．６％）を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：
0.93 (3H, t, d=7 Hz), 1.33-1.48 (2H, m), 1.53-1.67 (2H, m),
2.17 (3H, s), 2.69 (2H, t, J=8 Hz), 4.05 (2H, s),
7.32-7.46 (3H, m), 7.49 (2H, d,d=8 Hz), 7.62 (1H, t, J=8 Hz)，
7.75 (1H, d, J=8 Hz), 8.16 (2H, s), 9.20 (1H, br s).

工程４：４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリルの製造

４’−｛［６−ブチル−３−（５−ヒドロキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリル（９０ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液（１．５ｍＬ）に炭酸カリウム（３６ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）、ヨードエタン（３７ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）を加え、６５℃で終夜攪拌した。反応終了後、反応液を室温に放冷し、酢酸エチルでセライトろ過をした。ろ液を減圧濃縮し４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリル粗生成物１２０ｍｇを淡黄色油状物として得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
0.92 (3H, t, J=7 Hz), 1.32-1.44 (2H, m), 1.50 (3H, t, J=7 Hz)，
1.55-1.64 (2H, m), 2.16 (3H, s), 2.65 (2H, t, J=8 Hz),
3.98 (2H, s), 4.21 (2H, q, J=7 Hz), 7.35-7.49 (6H, m),
7.60 (1H, dt, J=2, 8 Hz), 7.73 (1H, d, J=8 Hz), 8.52 (2H, s).

工程５：４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝−Ｎ’−ヒドロキシビフェニル−２−カルボキシイミダミドの製造

ヒドロキシルアミン塩酸塩（４３６ｍｇ，６．３８ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド溶液（４ｍＬ）に炭酸水素ナトリウム（６３３ｍｇ，７．５４ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で１時間攪拌した。反応溶液に４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリル粗生成物（１２０ｍｇ）のジメチルスルホキシド溶液（２ｍＬ）を加え９０℃で終夜攪拌した。反応液に水を加え酢酸エチルで抽出した。有機層を合せ、水及び飽和食塩水で洗浄し無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）に付し、４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝−Ｎ’−ヒドロキシビフェニル−２−カルボキシイミダミド５１ｍｇ（４９．８％，２段階収率）を淡黄色アモルファスとして得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
0.91 (3H, t, J=7 Hz), 1.33-1.44 (2H, m), 1.50 (3H, t, J=7 Hz),
1.54-1.65 (2H, m), 2.15 (3H, s), 2.64 (2H, t, J=8 Hz),
3.94 (2H, s), 4.20 (2H, q, J=7 Hz), 4.40 (2H, br s),
7.29-7.49 (7H, m), 7.56 (1H, d, J=7.3 Hz), 8.51 (2H, s).

工程６：３−｛４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−イル｝−１，２，４−オキサジアゾール−５（４Ｈ）−オンの製造

４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝−Ｎ’−ヒドロキシビフェニル−２−カルボキシイミダミド（５１ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド溶液（１ｍＬ）に１，１−カルボニルジイミダゾール（４１ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（３８ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応終了後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を合せ、水及び飽和食塩水で洗浄し無水硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製し、３−｛４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−イル｝−１，２，４−オキサジアゾール−５（４Ｈ）−オン（Ｉ）４５ｍｇ（８３．９％）を淡黄色アモルファスとして得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
0.93 (3H, t, J=7 Hz), 1.33-1.46 (2H, m), 1.49 (3H, t, J=7 Hz),
1.56-1.68 (2H, m), 2.12 (3H, s), 2.64 (2H, t, J=8 Hz),
3.88 (2H, s), 4.19 (2H, q, J=7 Hz), 7.17 (2H, d, J=8 Hz),
7.24-7.29 (2H, m), 7.34-7.46 (2H, m), 7.53-7.59 (1H, m),
7.73 (1H, d, J=8 Hz), 8.47 (2H, s).

実施例２：３−｛４’−｛［６−ブチル−３−（５−メトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−イル｝−１，２，４−オキサジアゾール−５（４Ｈ）−オン（化合物ｂ）の製造：

工程１：４’−｛［６−ブチル−３−(５−メトキシピリミジン−２−イル)−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリルの製造

２−アミノ−５−ベンジルオキシピリミジンの代わりに２−アミノ−５−メトキシピリミジンを用いて実施例１の工程２と同様に反応・処理し、表題化合物を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
0.93 (3H, t, J=7 Hz), 1.33-1.46 (2H, m), 1.53-1.66 (2H, m),
2.16 (3H, s), 2.65 (2H, t, J=8 Hz), 3.98 (2H, s),
4.01 (3H, s), 7.34-7.49 (6H, m), 7.61 (1H, td, J=8, 1 Hz),
7.74 (1H, dd, J=8, 1 Hz), 8.54 (2H, s).

工程２：４’−｛［６−ブチル−３−（５−メトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝−Ｎ’−ヒドロキシビフェニル−２−カルボキシイミダミドの製造

４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリルの代わりに４’−｛［６−ブチル−３−(５−メトキシピリミジン−２−イル)−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−カルボニトリルを用いて、実施例１の工程５と同様に反応・処理し、表題化合物を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
0.92 (3H, t, J=7 Hz), 1.33-1.44 (2H, m), 1.53-1.63 (2H, m),
2.15 (3H, s), 2.65 (2H, t, J=8 Hz), 3.94 (2H, s),
4.00 (3H, s), 4.39 (2H, br s), 7.28-7.38 (6H, m),
7.44 (1H, t, J=8 Hz), 7.56 (1H, d, J=8 Hz), 8.54 (2H, s).

工程３：３−｛４’−｛［６−ブチル−３−（５−メトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝ビフェニル−２−イル｝−１，２，４−オキサジアゾール−５（４Ｈ）−オンの製造

４’−｛［６−ブチル−３−（５−エトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝−Ｎ’−ヒドロキシビフェニル−２−カルボキシイミダミドの代わりに４’−｛［６−ブチル−３−（５−メトキシピリミジン−２−イル）−２−メチルピリミジン−４（３Ｈ）−オン−５−イル］メチル｝−Ｎ’−ヒドロキシビフェニル−２−カルボキシイミダミドを用いて、実施例１の工程６と同様に反応・処理し、表題化合物を得た。

^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
0.95 (3H, t, J=7 Hz), 1.37-1.48 (2H, m), 1.60-1.72 (2H,m),
2.15 (3H, s), 2.69 (2H, t, J=8 Hz), 3.91 (2H, s),
3.98 (3H, s), 7.21 (2H, d, J=8 Hz), 7.28 (2H, t, J=8 Hz),
7.38 (1H, d, J=8 Hz), 7.44 (1H, t, J=8 Hz),
7.57 (1H, t, J=8 Hz), 7.79 (1H, d, J=8 Hz), 8.51 (2H, s).

試験例１：ウサギ摘出血管におけるアンジオテンシンII拮抗作用
化合物ａ又はｂのアンジオテンシンIIタイプ１受容体に対する拮抗作用を、ウサギ摘出血管標本を用いてアンジオテンシンIIによる血管収縮反応に対する用量−反応曲線により算出した。すなわち、ウサギ（New Zealand White：雄性、２．４〜３．０ｋｇ）の胸部大動脈リング標本をKrebs-Henseleite液（組成：１１８ｍＭＮａＣｌ，４．７ｍＭＫＣｌ，２．５５ｍＭＣａＣｌ_２，１．１８ｍＭＭｇＳＯ_４，１．１８ｍＭＫＨ_２ＰＯ_４，２４．８８ｍＭＮａＨＣＯ_３，１１．１ｍＭＤ−ｇｌｕｃｏｓｅ）で充填したマグヌス槽に懸垂し、化合物ａ又はｂ（０．０１〜１０μｍｏｌ／L）存在下のアンジオテンシンII（１０ｎＭ）収縮反応を得た。測定中はマグヌス槽内を３７℃に保温し、十分な混合ガス（９５％Ｏ_２，５％ＣＯ_２）で連続的に通気した。アンジオテンシンII収縮反応は、化合物ａ又はｂ非存在下のアンジオテンシンII（１０ｎＭ）収縮に対する相対値（％）に換算し、得られた濃度−反応曲線より統計解析プログラム、ＳＡＳ前臨床パッケージＶｅｒ５．０（SAS institute Japan Co．，東京）を用いて５０％阻害濃度（ＩＣ_５０値）を算出した。

以上の試験を行った結果、化合物ａ又はｂのＩＣ_５０値はそれぞれ０．０７μＭ、０．００７５μＭであり、本発明化合物に強力なアンジオテンシンII拮抗作用を有することが確認された。なお、本明細書の試験系で化合物ａ又はｂに代えて化合物Ａ（特許文献１の実施例３２５の化合物）及び化合物Ｂ（特許文献１の実施例４７の化合物）を同一条件で測定したところ、化合物Ａ及びＢのＩＣ_５０値はそれぞれ０．３７μＭ、０．０２２μＭであった。

試験例２：ＰＰＡＲγ活性化作用
化合物ａ又はｂのＰＰＡＲγに対するアゴニスト活性は、アフリカミドリザルの腎由来細胞株であるＣＯＳ７細胞（DSファーマバイオメディカル、大阪）を用いたトランスフェクションアッセイ法により測定した。ＣＯＳ７細胞の培養は５％のＣＯ_２濃度で行い、培養液には１０％のウシ胎児血清、グルタミン酸及び抗生物質を含有するＤＭＥＭ培地を用いた。
発現ベクターとしては、酵母の転写因子であるＧａｌ４のＤＮＡ結合領域と、ヒトＰＰＡＲγ２のリガンド結合領域を融合したキメラ体、すなわち、Ｇａｌ４転写因子の１から１４７番目のアミノ酸及びヒトＰＰＡＲγ２の１８２から５０５番目のアミノ酸を融合したものを用いた。また、レポーターベクターとして、プロモーター領域に５個のＧａｌ４認識配列が含まれているホタルルシフェラーゼを用いた。細胞へのプラスミドのトランスフェクションはｊｅｔＰＥＩ(フナコシ、東京)を用いた方法により行った。更にβ−ガラクトシダーゼの発現ベクターを内部標準として用いた。
細胞へのトランスフェクションの後、化合物を添加したＤＭＥＭ培地(１％血清含有)に交換し、更に１６時間の培養を行った。その後、細胞溶解液中のルシフェラーゼ活性及びβ−ガラクトシダーゼ活性を測定した。
なお、本実験では化合物ａ又はｂの溶解・希釈にはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を用い、細胞への処理の際はＤＭＥＭ培地（１％血清含有）中のＤＭＳＯ濃度が０．１％になるように調整した。陽性化合物としてロシグリタゾン（ALEXIS Corporation、Switzerland）を用い、ロシグリタゾン(３−１０μｍｏｌ／Ｌ)のルシフェラーゼ活性を１００％、化合物ａ又はｂ非添加時のルシフェラーゼ活性を０％とした時の化合物ａ又はｂ（１−３０μｍｏｌ／Ｌ）のルシフェラーゼ活性から百分率（％）を算出した。本発明化合物の５０％効果濃度(ＥＣ_５０、50% effect concentration)は統計解析プログラム、ＳＡＳ前臨床パッケージＶｅｒ５．０（SAS institute Japan Co., 東京）を用いて算出した。

以上の試験を行った結果、化合物ａ又はｂのＥＣ_５０値はそれぞれ０．９９μＭ、１．３９μＭであり、ロシグリタゾンのルシフェラーゼ活性を１００％、化合物ａ又はｂ非添加時のルシフェラーゼ活性を０％とした時の化合物ａ又はｂのルシフェラーゼ活性から算出した百分率は、ピリミジン環の５位がメトキシ基である化合物ｂでは２４％であったが、５位がエトキシ基である化合物ａでは５１％であった。よって、本発明化合物は強力なＰＰＡＲγ活性化作用を有することが確認された。なお、本明細書の試験系で化合物ａ又はｂに代えて化合物Ａ（特許文献１の実施例３２５の化合物）を同一条件で測定したところ、化合物ＡのＥＣ_５０値は０．６７μＭ、ルシフェラーゼ活性から算出した百分率は、５２％であった。
この結果、本発明の化合物も十分なＰＰＡＲγ活性化作用を有していることがわかった。

実施例３：アンジオテンシンII昇圧抑制作用
化合物ａ及び化合物Ｂのin vivoにおけるアンジオテンシンII拮抗作用は、アンジオテンシンII静脈内投与による昇圧反応を指標に評価した。
雄性ＳＤラット（１０〜１２週齢）をペントバルビタール麻酔下、右大腿動脈に血圧測定用のカニューレ、右頸静脈にアンジオテンシンII注入用のカニューレを挿入し、カニューレは首の後ろより露出して固定した。
ラットは手術翌日以降に、無麻酔・無拘束・非絶食下にて測定に用いた。動脈カニューレを血圧トランスドューサーに接続し、アンプを介してポリグラフ上に血圧及び心拍数を連続的に記録した。血圧及び心拍数が安定した後、アンジオテンシンII（０．１ｎｍｏｌ／ｋｇ）を静脈カニューレより注入し、安定した昇圧反応が得られるまでアンジオテンシンII投与を繰り返し行った。その後、化合物ａ（１ｍｇ／ｋｇ又は３ｍｇ／ｋｇ）又は化合物Ｂ（３ｍｇ／ｋｇ）を経口投与し、投与２４時間後までアンジオテンシンII昇圧反応の時間推移を観察した。得られた昇圧を薬物投与前のアンジオテンシンII昇圧に対する相対値（％）に換算してアンジオテンシンII昇圧率とした。なお、化合物ａ及び化合物Ｂは、それぞれ０．５％メチルセルロースに懸濁して用いた。

結果を図１に示す。図１の横軸は時間（時間）を示し、縦軸はアンジオテンシンII昇圧率（％）を示す。図１中の白四角印（□）は溶媒（０．５％メチルセルロース）のみを投与した対照(n=5)を示し、黒丸印（●）は化合物ａを１ｍｇ／ｋｇ投与した場合(n=3)を示し、黒三角印（▲）は化合物ａを３ｍｇ／ｋｇ投与した場合(n=6)を示す。また、白三角印（△）は化合物Ｂを３ｍｇ／ｋｇ投与した場合(n=4)を示す。この結果、化合物ａは投与２４時間後においても安定したアンジオテンシンＩＩ昇圧抑制作用を示しており、化合物ａの持続的かつ強力なアンジオテンシンII昇圧抑制作用が確認された。一方、化合物Ｂの３ｍｇ／ｋｇ投与は化合物ａの３ｍｇ／ｋｇ投与と同程度まで昇圧抑制効果が見られたものの、２４時間後における効果はほぼ消失していた。

実施例４：降圧作用
化合物ａの降圧作用は、高血圧自然発症ラット（ＳＨＲ）における平均血圧の時間推移を指標に評価した。
ＳＨＲ（１７〜２２週齢）をペントバルビタール麻酔下、右大腿動脈に血圧測定用のカニューレを挿入し、カニューレは首より露出し固定した。
ＳＨＲは手術翌日以降に、無麻酔・無拘束・非絶食下にて測定に用いた。動脈カニューレを血圧トランスドューサーに接続し、アンプ及びポリグラフを介して、レコーダーで平均血圧及び心拍数を連続的に記録した。血圧及び心拍数が安定した後、化合物ａ（３ｍｇ／ｋｇ）を経口投与し、２４時間後までの平均血圧の時間推移を観察した。なお、化合物ａの溶媒として０．５％メチルセルロースを用いた。

結果を図２に示す。図２の横軸は時間（時間）を示し、縦軸は平均血圧変化値（ΔｍｍＨｇ）を示す。図２中の白四角印（□）は溶媒（０．５％メチルセルロース）のみを投与した対照(n=7)を示し、黒丸印（●）は化合物ａを３ｍｇ／ｋｇ投与した場合(n=6)を示す。この結果、化合物ａは薬物投与２４時間後においても安定した降圧作用を示しており、化合物ａの持続的かつ強力な降圧作用が確認された。

以上の結果より、化合物ａは強力なアンジオテンシンII受容体拮抗作用及びＰＰＡＲγ活性化作用を併せ持つことが確認された。さらに、そのアンジオテンシンII受容体拮抗作用に基づく降圧作用は持続的であることが確認された。従って、本発明の化合物は、アンジオテンシンIIとＰＰＡＲγの関与する疾患、例えば、高血圧症、心疾患、狭心症、脳血管障害、脳循環障害、虚血性末梢循環障害、腎疾患、動脈硬化症、炎症性疾患、２型糖尿病、糖尿病性合併症、インスリン抵抗性症候群、シンドロームＸ、メタボリックシンドローム、高インスリン血症、等の疾患の予防及び／又は治療剤有効成分として好適に使用できることがわかった。

本発明の化合物Ｉは、例えば、高血圧症、心疾患、狭心症、脳血管障害、脳循環障害、虚血性末梢循環障害、腎疾患、動脈硬化症、炎症性疾患、２型糖尿病、糖尿病性合併症、インスリン抵抗性症候群、シンドロームＸ、メタボリックシンドローム、高インスリン血症、等の疾患の予防及び／又は治療剤の有効成分として利用することが可能であり、産業上利用可能性を有している。

Claims

次の一般式（Ｉ）：

［式中、Ｒは、Ｃ_１−４アルキル基を示す］
で表される３−（５−アルコキシピリミジン−２−イル）ピリミジン−４（３Ｈ）−オン誘導体、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物。
ＲにおけるＣ_１−４アルキル基がメチル基又はエチル基である、請求項１に記載の化合物、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物。
請求項１又は２に記載の化合物、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物、及び製薬上許容される担体を含有してなる医薬組成物。
請求項１又は２に記載の化合物、若しくはその塩又はそれらの溶媒和物を有効成分とする、アンジオテンシンII受容体拮抗作用及びＰＰＡＲγ活性化作用を併せ持つ医薬組成物。