JPWO2010029735A1 - 構造解析装置、及び構造解析方法 - Google Patents
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Abstract
Description
g=(IL−IR)/(0.5×(IL+IR))
で表される値である。
本実施の形態に係る構造解析方法の対象となる分子は、どのような分子であってもよいが、特に構造が複雑な分子に好適に適用でき、より具体的には、タンパク質等の生体分子に対して好適に適用できる。
照射工程とは、希土類錯体が結合した、構造解析の対象となる分子(以下、「構造解析対象分子」と記す場合がある)に対して励起光を照射する工程である。
上記計測工程は、上記希土類錯体から放射された光を受光し、該光のスペクトルの強度を計測する工程である。
上記演算工程は、上記計測したスペクトルの発光強度のうち、電気双極子遷移に基づく線スペクトルを含むスペクトルの発光強度を、磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける1つの波長での線スペクトルの強度で規格化する工程である。
上記構造解析工程は、上記規格化した、電気双極子遷移に基づく線スペクトルを含むスペクトルにより、上記構造解析対象分子の構造を解析する工程である。
上述した方法に使用することができる、本実施の形態に係る構造解析装置について図1に基づいて説明する。図1は、本実施の形態に係る構造解析装置の概略構成を示すブロック図である。
本実施例において、発光スペクトルは、希土類錯体を結合したタンパク質分子を蒸留水に溶解させた測定試料を、蛍光分析装置(HITACHI F−4500)を用い、励起波長を365nmとして測定した。
対象分子結合配位子であるBioTは、神戸天然物化学株式会社に依頼して合成されたものを使用した。尚、BioTは、下記合成経路
BSA5mgとBioT5mgとを蒸留水5mL中で約16時間4℃で攪拌して、BSAにBioTを結合させた。当該溶液を濾過後、フリーズドライにより乾燥させた。MALDI−TOFMS測定により、得られたBioTが結合したBSAでは、BSAに4つのBiOTが結合していることが確認された。
グロブリン5mgとBioT5mgとを蒸留水5mL中で約16時間4℃で攪拌して、BSAにBioTを結合させた。得られた溶液を濾過後、フリーズドライにより乾燥させた。その後、水中で、塩化ユーロピウム水和物と室温で24時間反応させることにより、Eu(III)を配位させ、希土類錯体が結合したグロブリン(グロブリン+BioT+Eu(III))を得た。
2 測定試料
3 計測部
4 演算部
7 出力部
10 構造解析装置
Claims (13)
- 希土類錯体が結合した、構造解析の対象となる分子を含む測定試料に対して励起光を照射する光源と、
上記測定試料から放射された光を受光し、当該光のスペクトルの強度を計測する計測部と、
計測した上記スペクトルの強度のうち、電気双極子遷移に基づく線スペクトルを含むスペクトルの強度を、磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける1つの波長での線スペクトルの強度で規格化する演算部と、
規格化した上記スペクトルを出力する出力部と、
を備えていることを特徴とする構造解析装置。 - 希土類錯体が結合した、構造解析の対象となる分子を含む測定試料に対して励起光を照射する光源と、
上記測定試料から放射された光を複数回受光し、当該各光のスペクトルの強度を計測する計測部と、
計測した上記各スペクトルの強度に対して、スペクトルの強度のうち、電気双極子遷移に基づく線スペクトルを含むスペクトルの強度を、磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける1つの波長での線スペクトルの強度で規格化する演算部と、
規格化した上記各スペクトルを出力する出力部と、
を備えていることを特徴とする構造解析装置。 - 構造解析の対象となる上記分子には複数種類の希土類錯体が結合しており、
上記演算部は、計測した上記スペクトルの強度のうち、各希土類錯体に対応する電気双極子遷移に基づく線スペクトルを含む各スペクトルの強度を、各希土類錯体に対応する、磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける1つの波長での各線スペクトルの強度でそれぞれ規格化することを特徴とする請求項1又は2に記載の構造解析装置。 - 上記計測部は、上記スペクトルの強度として、上記測定試料から放射された光の円偏光発光のg値を計測することを特徴とする請求項1〜3の何れか1項に記載の構造解析装置。
- 磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける上記1つの波長は、磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける最大吸収波長であることを特徴とする請求項1〜4の何れか1項に記載の構造解析装置。
- 構造解析の対象となる上記分子がタンパク質であることを特徴とする請求項1〜5の何れか1項に記載の構造解析装置。
- 更に、構造解析部を備え、
上記演算部は、規格化した上記スペクトルを上記構造解析部へ出力し、
上記構造解析部は、規格化された上記スペクトルに基づいて構造解析を行うことを特徴とする請求項1〜6の何れか1項に記載の構造解析装置。 - 希土類錯体が結合した、構造解析の対象となる分子を含む測定試料に対して励起光を照射する照射工程と、
上記測定試料から放射された光を受光し、該光のスペクトルの強度を計測する計測工程と、
計測した上記スペクトルの強度のうち、電気双極子遷移に基づく線スペクトルを含むスペクトルの強度を、磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける1つの波長での線スペクトルの強度で規格化する演算工程と、
規格化した上記スペクトルにより、構造解析の対象となる上記分子の構造を解析する構造解析工程と、
を含むことを特徴とする構造解析方法。 - 構造解析の対象となる上記分子には複数種類の希土類錯体が結合しており、
上記演算工程では、計測した上記スペクトルの強度のうち、各希土類錯体に対応する電気双極子遷移に基づく線スペクトルを含む各スペクトルの強度を、各希土類錯体に対応する、磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける1つの波長での各線スペクトルの強度でそれぞれ規格化することを特徴とする請求項8に記載の構造解析方法。 - 上記計測工程では、上記スペクトルの強度として、上記測定試料から放射された光の円偏光発光のg値を計測することを特徴とする請求項8又は9に記載の構造解析方法。
- 磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける上記1つの波長は、磁気双極子遷移に基づく線スペクトルにおける最大吸収波長であることを特徴とする請求項8〜10の何れか1項に記載の構造解析方法。
- 構造解析の対象となる上記分子がタンパク質であることを特徴とする請求項8〜11の何れか1項に記載の構造解析方法。
- 請求項8〜12の何れか1項に記載の構造解析方法を用いて、時間の経過による構造変化を解析することを特徴とする構造解析方法。
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