JPWO2007142323A1 - 側鎖にスピロ環構造を有する新規インダゾール誘導体 - Google Patents

Abstract

本発明は、医薬として有用な、側鎖にスピロ環構造を有する新規インダゾール誘導体を創製し、その誘導体の新たな薬理作用を見つけることを課題とする。本発明化合物は一般式［I］で示され、優れたＲｈｏキナーゼ阻害作用を有する。式中、環Ｘはベンゼン環、又はピリジン環を；Ｒ1とＲ2は、ハロゲン、Ｈ、ＯＨ、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、アリールオキシ、アルキル、シクロアルキル等を；Ｒ3はハロゲン、Ｈ等を；Ｒ4とＲ5は、ハロゲン、Ｈ等を；Ｒ6とＲ7は、Ｈ、アルキル等を；ｍ、ｎ、ｐ及びｑは０〜３の整数を示す。尚、各基は置換基を有してもよい。【化１】

Description

本発明は医薬として有用な、側鎖にスピロ環構造を有する新規インダゾール誘導体又はその塩に関する。本発明に係るインダゾール誘導体は、Ｒｈｏキナーゼ阻害作用を有し、Ｒｈｏキナーゼが関与する疾患、例えば、緑内障等の眼疾患治療剤として有用である。

低分子量ＧＴＰ結合タンパク質であるＲｈｏは種々の細胞膜受容体からのシグナルにより活性化される。活性化されたＲｈｏは、Ｒｈｏキナーゼ情報伝達系及びアクトミオシン情報伝達系を介して、平滑筋収縮、細胞の形態変化、細胞運動、細胞分裂、細胞間接着、血小板凝集、白血球凝集、癌細胞の浸潤・亢進等、種々の細胞現象の分子スイッチとして機能する。

また、これらの細胞現象が、高血圧症、狭心症、喘息、末梢循環障害、早産、動脈硬化症、癌、炎症性疾患、自己免疫疾患、ＡＩＤＳ、受精及び受精卵の着床、骨粗鬆症、脳機能障害、細菌の消化管障害、緑内障、網膜症等の疾患に深く関与していることが知られている。

したがって、Ｒｈｏを阻害することで、Ｒｈｏが関与する前記疾患の予防及び／又は治療が可能になると考えられている。

一方、Ｒｈｏを介する情報伝達系の下流に存在するＲｈｏキナーゼを阻害することによっても、Ｒｈｏによる種々の細胞現象を抑制できることが知られている。

すなわち、Ｒｈｏキナーゼを阻害する化合物は、Ｒｈｏが関与する前記疾患、例えば、高血圧症、狭心症、喘息、末梢循環障害、早産、動脈硬化症、癌、炎症性疾患、自己免疫疾患、ＡＩＤＳ、受精及び受精卵の着床、骨粗鬆症、脳機能障害、細菌の消化管障害、緑内障、網膜症等の有効な予防及び／又は治療剤となると考えられている（特許文献１）。

Ｒｈｏキナーゼ阻害剤は、一般的にＲｈｏの活性化に伴い活性化されるセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤として定義されている。そのＲｈｏキナーゼ阻害剤には、ＲＯＫα（ＲＯＣＫ−II）、ＲＯＫβ（ＲＯＣＫ−Ｉ、ｐ１６０ＲＯＣＫ）、その他のセリン／スレオニンキナーゼ活性を有するタンパク質を阻害する化合物等が含まれる。

公知のＲｈｏキナーゼ阻害剤としては、特許文献１に開示されているアミド誘導体、特許文献２、非特許文献１及び特許文献３に開示されているイソキノリンスルホニル誘導体、特許文献４に開示されているヘテロサイクルアミノ誘導体、特許文献５及び特許文献６に開示されているインダゾール誘導体、特許文献７及び特許文献８に開示されているキナゾリン誘導体等が挙げられる。

また、Ｒｈｏキナーゼ阻害剤が緑内障の治療剤として有用であることが、特許文献６、特許文献９及び特許文献１０に開示されている。

しかしながら、上記いずれの文献にも本発明に係る側鎖にスピロ環構造を有するインダゾール誘導体についての具体的な開示はない。
Ｎａｔｕｒｅ，３８９，９９０−９９４（１９９７） 国際公開ＷＯ９８／０６４３３号パンフレット 国際公開ＷＯ９７／２３２２２号パンフレット、 国際公開ＷＯ９９／６４０１１号パンフレット 国際公開ＷＯ２００１／５６９８８号パンフレット 国際公開ＷＯ２００２／１００８３３号パンフレット 国際公開ＷＯ２００５／０３５５０６号パンフレット 国際公開ＷＯ２００２／０７６９７６号パンフレット 国際公開ＷＯ２００２／０７６９７７号パンフレット 国際公開ＷＯ２０００／０９１６２号パンフレット 国際公開ＷＯ２０００／５７９１４号パンフレット

医薬として有用な、側鎖にスピロ環構造を有する新規インダゾール誘導体を創製すること、また、その誘導体の新たな薬理作用を見出すことは非常に興味深い課題である。

本発明者等は、上記の課題を解決するために側鎖にスピロ環構造を有する新規インダゾール誘導体（以下、本インダゾール誘導体とする）の合成研究を行い、新規化合物を創製することに成功した。

また、本インダゾール誘導体の医薬としての有用性を種々検討したところ、本インダゾール誘導体はＲｈｏキナーゼ阻害作用を有し、Ｒｈｏキナーゼが関与する疾患の治療剤として有用であることを見出した。

さらに、本インダゾール誘導体のＲｈｏキナーゼが関与する具体的な疾患への適用を検証するために、本インダゾール誘導体の眼圧下降作用についても検討した。その結果、本インダゾール誘導体は優れた眼圧下降作用を有しており、緑内障等の眼疾患治療剤として有用であることも併せて見出し、本発明を完成させた。

本発明は下記一般式［Ｉ］で表される化合物又はその塩（以下、特記なき限り『本発明化合物』とする）及び本発明化合物を含有する医薬組成物に関する。詳しくは、本発明化合物を有効成分とするＲｈｏキナーゼ阻害剤に関する発明であり、より具体的には、緑内障等の眼疾患治療剤に関する発明である。

本発明化合物は、下記一般式［Ｉ］に示されているとおり、Ｘ環の側鎖にスピロ環構造の置換基を有する点に化学構造的特徴を有する。

［式中、環Ｘはベンゼン環、又はピリジン環を示し；
Ｒ¹とＲ²は同一又は異なって、ハロゲン原子、水素原子、ヒドロキシ基、置換若しくは無置換アルコキシ基、置換若しくは無置換アルケニルオキシ基、置換若しくは無置換アルキニルオキシ基、置換若しくは無置換シクロアルキルオキシ基、置換若しくは無置換シクロアルケニルオキシ基、置換若しくは無置換アリールオキシ基、置換若しくは無置換アルキル基、置換若しくは無置換アルケニル基、置換若しくは無置換アルキニル基、置換若しくは無置換シクロアルキル基、置換若しくは無置換シクロアルケニル基、置換若しくは無置換アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、ヒドロカルボニル基、置換若しくは無置換アルキルカルボニル基、置換若しくは無置換アリールカルボニル基、アミノ基、置換若しくは無置換アルキルアミノ基、置換若しくは無置換アリールアミノ基、メルカプト基、置換若しくは無置換アルキルチオ基、置換若しくは無置換アリールチオ基、スルフィン酸基又はそのエステル若しくはそのアミド、ヒドロスルフィニル基、置換若しくは無置換アルキルスルフィニル基、置換若しくは無置換アリールスルフィニル基、スルホン酸基又はそのエステル若しくはそのアミド、ヒドロスルホニル基、置換若しくは無置換アルキルスルホニル基、置換若しくは無置換アリールスルホニル基、ニトロ基、シアノ基、及び置換若しくは無置換単環式複素環からなる群より選択される１又は複数の基を示し；
Ｒ³はハロゲン原子、水素原子、ヒドロキシ基、置換若しくは無置換アルコキシ基、置換若しくは無置換アリールオキシ基、置換若しくは無置換アルキル基、及び置換若しくは無置換アリール基からなる群より選択される１又は複数の基を示し；
Ｒ⁴とＲ⁵は同一又は異なって、ハロゲン原子、水素原子、及び置換又は無置換アルキル基からなる群より選択される１又は複数の基を示し；
Ｒ⁶とＲ⁷は同一又は異なって、水素原子、置換又は無置換アルキル基、及び置換又は無置換アリール基からなる群より選択される基を示し；
Ｒ⁶とＲ⁷は一緒になって単環式複素環を形成してもよく；
ｍ、ｎ、ｐ及びｑは、同一又は異なって０〜３の整数を示す、但し、ｍとｎの合計が１以上の整数であり、かつ、ｐとｑの合計が１以上の整数である。以下、同じ。］

本発明は医薬として有用な、側鎖にスピロ環構造を有する新規インダゾール誘導体又はその塩を提供する。本発明に係るインダゾール誘導体は、優れたＲｈｏキナーゼ阻害作用を有し、Ｒｈｏキナーゼが関与する疾患、例えば、高血圧症、狭心症、喘息、末梢循環障害、早産、動脈硬化症、癌、炎症性疾患、自己免疫疾患、ＡＩＤＳ、受精及び受精卵の着床、骨粗鬆症、脳機能障害、細菌の消化管障害、緑内障、網膜症等の治療剤として有用であることが期待される。

本明細書中で規定した各環、原子又は基について以下に詳しく説明する。

『シクロアルカン環』とは、炭素原子数３〜８個のシクロアルカン環を示す。具体例として、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン等が挙げられる。

『単環式複素環』とは、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子から選択される１若しくは複数のヘテロ原子を環内に有する飽和又は不飽和の単環式複素環を示す。

飽和の単環式複素環の具体例として、窒素原子を環内に有するピロリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、トリアゾリジン、ピペリジン、ヘキサヒドロピリダジン、ヘキサヒドロピリミジン、ピペラジン、ホモピペリジン、ホモピペラジン等が、酸素原子を環内に有するテトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン等が、硫黄原子を環内に有するテトラヒドロチオフェン、テトラヒドロチオピラン等が、窒素原子と酸素原子を環内に有するオキサゾリジン、イソオキサゾリジン、モルホリン等が、窒素原子と硫黄原子を環内に有するチアゾリジン、イソチアゾリジン、チオモルホリン等が挙げられる。

不飽和の単環式複素環の具体例として、窒素原子を環内に有するジヒドロピロール、ピロール、ジヒドロピラゾール、ピラゾール、ジヒドロイミダゾール、イミダゾール、ジヒドロトリアゾール、トリアゾール、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピリジン、ピリジン、テトラヒドロピリダジン、ジヒドロピリダジン、ピリダジン、テトラヒドロピリミジン、ジヒドロピリミジン、ピリミジン、テトラヒドロピラジン、ジヒドロピラジン、ピラジン等が、酸素原子を環内に有するジヒドロフラン、フラン、ジヒドロピラン、ピラン等が、硫黄原子を環内に有するジヒドロチオフェン、チオフェン、ジヒドロチオピラン、チオピラン等が、窒素原子と酸素原子を環内に有するジヒドロオキサゾール、オキサゾール、ジヒドロイソオキサゾール、イソオキサゾール、ジヒドロオキサジン、オキサジン等が、窒素原子と硫黄原子を環内に有するジヒドロチアゾール、チアゾール、ジヒドロイソチアゾール、イソチアゾール、ジヒドロチアジン、チアジン等が挙げられる。

『ハロゲン原子』とは、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素を示す。

『アルコキシ』とは、炭素原子数１〜６個の直鎖又は分枝のアルコキシを示す。具体例として、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、イソプロポキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、イソペントキシ等が挙げられる。

『アルケニルオキシ』とは、炭素原子数２〜８個の直鎖又は分枝のアルケニルオキシを示す。具体例として、ビニルオキシ、アリルオキシ、１−プロペニルオキシ、３−ブテニルオキシ、３−ペンテニルオキシ、４−ヘキセニルオキシ、５−ヘプテニルオキシ、７−オクテニルオキシ、１−メチルビニルオキシ等が挙げられる。

『アルキニルオキシ』とは、炭素原子数２〜８個の直鎖又は分枝のアルキニルオキシを示す。具体例として、エチニルオキシ、２−プロピニルオキシ、２−ブチニルオキシ、３−ペンチニルオキシ、４−ヘキシニルオキシ、５−ヘプチニルオキシ、７−オクチニルオキシ、２−メチルブチニルオキシ等が挙げられる。

『シクロアルキルオキシ』とは、炭素原子数３〜８個のシクロアルキルオキシを示す。具体例として、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、シクロヘプチルオキシ、シクロオクチルオキシ等が挙げられる。

『シクロアルケニルオキシ』とは、炭素原子数３〜８個のシクロアルケニルオキシを示す。具体例として、シクロプロペニルオキシ、シクロブテニルオキシ、シクロペンテニルオキシ、シクロヘキセニルオキシ、シクロヘプテニルオキシ、シクロオクテニルオキシ等が挙げられる。

『アリールオキシ』とは、炭素原子数が６〜１４個の単環式又は２環式若しくは３環式の縮合多環式芳香族炭化水素オキシを示す。具体例としてフェノキシ、ナフチルオキシ、アントリルオキシ、フェナントリルオキシ等が挙げられる。

『アルキル』とは、炭素原子数１〜６個の直鎖又は分枝のアルキルを示す。具体例として、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル等が挙げられる。

『アルケニル』とは、炭素原子数２〜８個の直鎖又は分枝のアルケニルを示す。具体例として、ビニル、アリル、１−プロペニル、３−ブテニル、３−ペンテニル、４−ヘキセニル、５−ヘプテニル、７−オクテニル、１−メチルビニル等が挙げられる。

『アルキニル』とは、炭素原子数２〜８個の直鎖又は分枝のアルキニルを示す。具体例として、エチニル、２−プロピニル、２−ブチニル、３−ペンチニル、４−ヘキシニル、５−ヘプチニル、７−オクチニル、２−メチルブチニル等が挙げられる。

『シクロアルキル』とは、炭素原子数３〜８個のシクロアルキルを示す。具体例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等が挙げられる。

『シクロアルケニル』とは、炭素原子数３〜８個のシクロアルケニルを示す。具体例として、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル等が挙げられる。

『アリール』とは、炭素原子数６〜１４個の単環式又は２環式若しくは３環式の縮合多環式芳香族炭化水素を示す。具体例として、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル等が挙げられる。

『カルボキシ基のエステル』とは、カルボキシ基とアルキルアルコール、アリールアルコール等とからなるエステルを示す。アルキルアルコールの具体例として、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等が挙げられ、アリールアルコールの具体例として、フェノール、ナフトール等が挙げられる。

『カルボキシ基のアミド』とは、カルボキシ基とアンモニア、１級又は２級アミン等とからなるアミドを示す。アミンはアルキルアミンでもアリールアミンでもよく、アルキルアミンの具体例として、メチルアミン、エチルアミン、エチルメチルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジヘキシルアミン等が挙げられ、アリールアミンの具体例として、アニリン、ナフチルアミン、メチルフェニルアミン、エチルフェニルアミン、ジフェニルアミン等が挙げられる。

『アルキルカルボニル』とは、炭素原子数２〜７個の直鎖又は分枝のアルキルカルボニルを示す。具体例として、メチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、ｎ−ブチルカルボニル、ｎ−ペンチルカルボニル、ｎ−ヘキシルカルボニル、イソプロピルカルボニル、イソブチルカルボニル、ｓｅｃ−ブチルカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニル、イソペンチルカルボニル等が挙げられる。

『アリールカルボニル』とは、炭素原子数が７〜１５個の単環式又は２環式若しくは３環式の縮合多環式芳香族炭化水素カルボニルを示す。具体例としてフェニルカルボニル、ナフチルカルボニル、アントリルカルボニル、フェナントリルカルボニル等が挙げられる。

『アルキルアミノ』とは、モノ又はジアルキルアミノを示す。具体例として、メチルアミノ、エチルアミノ、エチルメチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジヘキシルアミノ等が挙げられる。

『アリールアミノ』とは、モノ又はジアリールアミノを示す。具体例として、フェニルアミノ、ナフチルアミノ、メチルフェニルアミノ、エチルフェニルアミノ、ジフェニルアミノ等が挙げられる。

『アルキルチオ』とは、炭素原子数１〜６個の直鎖又は分枝のアルキルチオを示す。具体例として、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、ｎ−ペンチルチオ、ｎ−ヘキシルチオ、イソプロピルチオ、イソブチルチオ、ｓｅｃ−ブチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ、イソペンチルチオ等が挙げられる。

『アリールチオ』とは、炭素原子数が６〜１４個の単環式又は２環式若しくは３環式の縮合多環式芳香族炭化水素チオを示す。具体例としてフェニルチオ、ナフチルチオ、アントリルチオ、フェナントリルチオ等が挙げられる。

『スルフィン酸基のエステル』とは、スルフィン酸基とアルキルアルコール、アリールアルコール等とからなるエステルを示す。アルキルアルコールの具体例として、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等が挙げられ、アリールアルコールの具体例として、フェノール、ナフトール等が挙げられる。

『スルフィン酸基のアミド』とは、スルフィン酸基とアンモニア、１級又は２級アミン等とからなるアミドを示す。アミンはアルキルアミンでもアリールアミンでもよく、アルキルアミンの具体例として、メチルアミン、エチルアミン、エチルメチルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジヘキシルアミン等が挙げられ、アリールアミンの具体例として、アニリン、ナフチルアミン、メチルフェニルアミン、エチルフェニルアミン、ジフェニルアミン等が挙げられる。

『アルキルスルフィニル』とは、炭素原子数１〜６個の直鎖又は分枝のアルキルスルフィニルを示す。具体例として、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、ｎ−プロピルスルフィニル、ｎ−ブチルスルフィニル、ｎ−ペンチルスルフィニル、ｎ−ヘキシルスルフィニル、イソプロピルスルフィニル、イソブチルスルフィニル、ｓｅｃ−ブチルスルフィニル、ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル、イソペチルスルフィニル等が挙げられる。

『アリールスルフィニル』とは、炭素原子数が６〜１４個の単環式又は２環式若しくは３環式の縮合多環式芳香族炭化水素スルフィニルを示す。具体例としてフェニルスルフィニル、ナフチルスルフィニル、アントリルスルフィニル、フェナントリルスルフィニル等が挙げられる。

『スルホン酸基のエステル』とは、スルホン酸基とアルキルアルコール、アリールアルコール等とからなるエステルを示す。アルキルアルコールの具体例として、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等が挙げられ、アリールアルコールの具体例として、フェノール、ナフトール等が挙げられる。

『スルホン酸基のアミド』とは、スルホン酸基とアンモニア、１級又は２級アミン等とからなるアミドを示す。アミンはアルキルアミンでもアリールアミンでもよく、アルキルアミンの具体例として、メチルアミン、エチルアミン、エチルメチルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジヘキシルアミン等が挙げられ、アリールアミンの具体例として、アニリン、ナフチルアミン、メチルフェニルアミン、エチルフェニルアミン、ジフェニルアミン等が挙げられる。

『アルキルスルホニル』とは、炭素原子数１〜６個の直鎖又は分枝のアルキルスルホニルを示す。具体例として、メチルスルホニル、エチルスルホニル、ｎ−プロピルスルホニル、ｎ−ブチルスルホニル、ｎ−ペンチルスルホニル、ｎ−ヘキシルスルホニル、イソプロピルスルホニル、イソブチルスルホニル、ｓｅｃ−ブチルスルホニル、ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル、イソペンチルスルホニル等が挙げられる。

『アリールスルホニル』とは、炭素原子数が６〜１４個の単環式又は２環式若しくは３環式の縮合多環式芳香族炭化水素スルホニルを示す。具体例としてフェニルスルホニル、ナフチルスルホニル、アントリルスルホニル、フェナントリルスルホニル等が挙げられる。

『アルコキシイミノ』とは、炭素原子数１〜６個の直鎖又は分枝のアルコキシイミノを示す。具体例として、メトキシイミノ、エトキシイミノ、ｎ−プロポキシイミノ、ｎ−ブトキシイミノ、ｎ−ペントキシイミノ、ｎ−ヘキシルオキシイミノ、イソプロポキシイミノ、イソブトキシイミノ、ｓｅｃ−ブトキシイミノ、ｔｅｒｔ−ブトキシイミノ、イソペントキシイミノ等が挙げられる。

『アリールオキシイミノ』とは、炭素原子数が６〜１４個の単環式又は２環式若しくは３環式の縮合多環式芳香族炭化水素オキシイミノを示す。具体例としてフェノキシイミノ、ナフチルオキシイミノ、アントリルオキシイミノ、フェナントリルオキシイミノ等が挙げられる。

『置換シクロアルカン環』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するシクロアルカン環を示す。

『置換単環式複素環』とは、その炭素原子部分がハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、メルカプト基、アルキルチオ基、アリールチオ基、ヒドロカルボニル基すなわちホルミル基、アルキルカルボニル基、アリールカルボニル基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有する単環式複素環基を示す。

『置換アルコキシ基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、シアノ基、ヒドロキシイミノ基、アルコキシイミノ基、及びアリールオキシイミノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルコキシ基を示す。

『置換アルケニルオキシ基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルケニルオキシ基を示す。

『置換アルキニルオキシ基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルキニルオキシ基を示す。

『置換シクロアルキルオキシ基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するシクロアルキルオキシ基を示す。

『置換シクロアルケニルオキシ基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するシクロアルケニルオキシ基を示す。

『置換アリールオキシ基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアリールオキシ基を示す。

『置換アルキル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、シアノ基、ヒドロキシイミノ基、アルコキシイミノ基、及びアリールオキシイミノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルキル基を示す。

『置換アルケニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、シアノ基、ヒドロキシイミノ基、アルコキシイミノ基、及びアリールオキシイミノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルケニル基を示す。

『置換アルキニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルキニル基を示す。

『置換シクロアルキル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するシクロアルキル基を示す。

『置換シクロアルケニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するシクロアルケニル基を示す。

『置換アリール基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、シアノ基、ヒドロキシイミノ基、アルコキシイミノ基、及びアリールオキシイミノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアリール基を示す。

『置換アルキルカルボニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルキルカルボニル基を示す。

『置換アリールカルボニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアリールカルボニル基を示す。

『置換アルキルアミノ基』とは、そのアルキル部分がハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルキルアミノ基を示す。

『置換アリールアミノ基』とは、そのアリール部分がハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアリールアミノ基を示す。

『置換アルキルチオ基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルキルチオ基を示す。

『置換アリールチオ基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアリールチオ基を示す。

『置換アルキルスルフィニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルキルスルフィニル基を示す。

『置換アリールスルフィニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアリールスルフィニル基を示す。

『置換アルキルスルホニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、シクロアルキル基、アリール基、ハロゲン原子で置換されたアリール基、アルコキシ基で置換されたアリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアルキルスルホニル基を示す。

『置換アリールスルホニル基』とは、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、ニトロ基、及びシアノ基から選択される１又は複数の基を置換基として有するアリールスルホニル基を示す。

本発明化合物が、遊離の、ヒドロキシ基、アミノ基、アルキルアミノ基又はアリールアミノ基を置換基として有する場合、それらの基は保護基で保護されていてもよい。

遊離のヒドロキシ基の保護基とは、メトキシメチル基、ベンジル基、トリチル基、４−メトキシフェニルメチル基、ベンジルオキシメチル基、メチル基、アリル基等の置換若しくは無置換アルキル基又は無置換アルケニル基；３−ブロモテトラヒドロピラニル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロフラニル基等の置換若しくは無置換複素環基；トリフルオロアセチル基、アセチル基、４−クロロベンゾイル基、ベンゾイル基等の置換若しくは無置換アルキルカルボニル基又は置換若しくは無置換アリールカルボニル基；ベンジルオキシカルボニル基、４−メトキシベンジルオキシカルボニル基、９−フルオレニルメトキシカルボニル基、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ビニルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、４−ニトロフェノキシカルボニル基、フェノキシカルボニル基等の置換若しくは無置換アルキルオキシカルボニル基、無置換アルケニルオキシカルボニル基又は置換若しくは無置換アリールオキシカルボニル基；トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基等の置換シリル基；等の遊離のヒドロキシ基の保護基として汎用されるものを示す。

遊離の、アミノ基、アルキルアミノ基又はアリールアミノ基の保護基とは、ベンジル基、トリチル基、ジフェニルメチル基、(４−メトキシフェニル)ジフェニルメチル、アリル基等の置換アルキル基又は無置換アルケニル基；ヒドロカルボニル基すなわちホルミル基；トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基、アセチル基、４−クロロベンゾイル基、ベンゾイル基、ピコリノイル基等の置換若しくは無置換アルキルカルボニル基、置換若しくは無置換アリールカルボニル基又は無置換複素環カルボニル基；２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ジフェニルメトキシカルボニル基、メトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、３−ニトロフェノキシカルボニル基、フェノキシカルボニル基等の置換若しくは無置換アルキルオキシカルボニル基又は置換若しくは無置換アリールオキシカルボニル基；ベンジルスルホニル基、トリルスルホニル基、メチルスルホニル基、４−クロロフェニルスルホニル基、２，４，６−トリメチルフェニルスルホニル基、フェニルスルホニル基等の置換若しくは無置換アルキルスルホニル基又は置換若しくは無置換アリールスルホニル基；等の遊離の、アミノ基、アルキルアミノ基又はアリールアミノ基の保護基として汎用されるものを示す。

また、本発明化合物のインダゾール環の窒素原子は、保護基で保護されていてもよい。

インダゾール環の窒素原子の保護基とは、ベンジル基、トリチル基、ジフェニルメチル基、(４−メトキシフェニル)ジフェニルメチル基、アリル基等の置換アルキル基又は無置換アルケニル基；ヒドロカルボニル基すなわちホルミル基；トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基、アセチル基、４−クロロベンゾイル基、ベンゾイル基、ピコリノイル基等の置換若しくは無置換アルキルカルボニル基、置換若しくは無置換アリールカルボニル基又は無置換複素環カルボニル基；２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ジフェニルメトキシカルボニル基、メトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、フェノキシカルボニル基、３−ニトロフェノキシカルボニル基等の置換若しくは無置換アルキルオキシカルボニル又は置換若しくは無置換アリールオキシカルボニル基；ベンジルスルホニル基、トリルスルホニル基、メチルスルホニル基、４−クロロフェニルスルホニル基、２，４，６−トリメチルフェニルスルホニル基、フェニルスルホニル基等の置換若しくは無置換アルキルスルホニル基又は置換若しくは無置換アリールスルホニル基；等のインダゾール環の窒素原子の保護基として汎用されるものを示す。

本発明化合物における『塩』とは、医薬として許容される塩であれば、特に制限はなく、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩；酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸、アジピン酸、乳酸、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等の有機酸との塩；リチウム、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩；カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩；アンモニア、ヨウ化メチル等との四級塩等が挙げられる。

本発明でいう『複数の基』は、それぞれの基が同一であっても異なるものであってもよく、Ｒ²の場合、２〜３個の基を意味し、Ｒ³の場合、２〜４個の基を意味し、Ｒ⁴とＲ⁵の場合、２〜１２個の基を意味する。また、ハロゲン原子、水素原子及び単環式複素環も『基』の中に含まれる。

本発明化合物に幾何異性体、例えば、シン−アンチ(syn-anti)異性体又は光学異性体が存在する場合は、それらの異性体も本発明の範囲に含まれる。

さらに本発明化合物は水和物又は溶媒和物の形態をとっていてもよい。

一般式［Ｉ］で上記のように規定される本発明化合物において、好ましい例としては、前記置換アルコキシ基、置換アルキル基、置換アルケニル基、及び／又は置換アリール基がハロゲン原子、ヒドロキシ基、無置換アルコキシ基、無置換アリール基、ヒドロキシイミノ基、及び無置換アルコキシイミノ基からなる群より選択される１又は複数の基で置換された化合物又はその塩が挙げられる。

一般式［Ｉ］で上記のように規定される本発明化合物において、別の好ましい例としては、下記の７つの選択肢ｉ）からvii）のうちの１又は２以上の組み合わせで規定される化合物又はその塩が挙げられる：
ｉ）環Ｘがベンゼン環、又はピリジン環を示し；
ii）Ｒ¹が水素原子、置換アルキル基、無置換アルケニル基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、又はシアノ基を示し；
iii）Ｒ²が水素原子、ヒドロキシ基、置換若しくは無置換アルコキシ基、無置換アルケニルオキシ基、無置換シクロアルキルオキシ基、置換若しくは無置換アルキル基、無置換アルケニル基、無置換シクロアルキル基、アミノ基、無置換アルキルアミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は単環式複素環基を示し；
iv）Ｒ³がハロゲン原子、又は水素原子を示し；
v）Ｒ⁴及びＲ⁵が水素原子を示し；
vi）Ｒ⁶及びＲ⁷が水素原子を示し；
vii）ｍ、ｎ、ｐ及びｑが、同一又は異なって０〜２の整数を示す、但し、ｍとｎの合計が１以上の整数であり、かつ、ｐとｑの合計が１以上の整数である。

中でも好ましくは、下記の５つの選択肢i）からv）のうちの１又は２以上の組み合わせで規定される化合物又はその塩が挙げられる：
i）環Ｘがピリジン環を示し；
ii）Ｒ¹、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁶及びＲ⁷水素原子を示し；
iii）Ｒ²が無置換シクロアルキル基を示し；
iv）ｍ及びｎが１を示し；
v）ｐ及びｑのどちらか一方が０を、他方が１を示す。

一般式［Ｉ］で上記のように規定される本発明化合物において、別の好ましい例としては、置換アルコキシ基がハロゲン原子で置換され、及び／又は、置換アルキル基がヒドロキシ基、及びヒドロキシイミノ基からなる群より選択される１又は複数の基で置換された化合物又はその塩が挙げられる。

一般式［Ｉ］で上記のように規定される本発明化合物において、さらに好ましい例としては、下記の８つの選択肢i）からviii）のうちの１又は２以上の組み合わせで規定される化合物又はその塩が挙げられる：
i）環Ｘがベンゼン環、又はピリジン環を示し；
ii）Ｒ¹が水素原子、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシイミノメチル基、１−メチルビニル基、カルボキシ基、メトキシカルボニル基、アミノカルボニル基、アミノ基、又はシアノ基を示し；
iii）Ｒ²が水素原子、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ジフルオロメトキシ基、２−フルオロエトキシ基、２、２、２−トリフルオロエトキシ基、アリルオキシ基、シクロプロピルオキシ基、シクロプロピルメチルオキシ基、エチル基、ビニル基、ヒドロキシメチル基、１−ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシエチル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、アミノ基、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ニトロ基、シアノ基、ピロリジン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソオキサゾール環、ピペリジン環、ピリジン環、又はモルホリン環を示し；
iv）Ｒ³が塩素原子、又は水素原子を示し；
v）Ｒ⁴及びＲ⁵が水素原子を示し；
vi）Ｒ⁶及びＲ⁷が水素原子を示し；
vii）ｍ及びｎが１を示し；
viii）ｐ及びｑのどちらか一方が０を、他方が１を示す。

一般式［Ｉ］で前記のように規定される本発明化合物において、環Ｘがインダゾール環の５位に置換された化合物又はその塩が特に好ましい。

本発明化合物は前述したとおり、一般式［Ｉ］に示される、Ｘ環の側鎖にスピロ環構造の置換基を有する点に化学構造的特徴を有する。すなわち、一般式［Ｉ］の下記の置換基が、

ａ）環Ｘがベンゼン環である場合にはその４位に、また、
ｂ）環Ｘがピリジン環である場合にはその５位に、
結合した本発明化合物がとりわけ好ましい。

本発明化合物における特に好ましい具体例として、以下に示す化合物又はその塩が挙げられる。

５−｛５−（１−アミノ−スピロ［２，２］ペンタ−１−イル）ピリジン−２−イル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール

５−｛５−（１−アミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−１−イル）ピリジン−２−イル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール

５−｛５−（５−アミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）ピリジン−２−イル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール

５−｛４−（５−アミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）フェニル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール

５−｛５−（２−アミノ−スピロ［３，３］ヘプタ−２−イル）ピリジン−２−イル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール

本発明化合物の代表的な製造方法を下記に記す。尚、本発明化合物の個々の具体的な製造方法については、後述の実施例［製造例の項］で詳細に説明する。

合成経路１又は合成経路２：化合物Ａと化合物Ｂ又は化合物Ｃと化合物Ｄとを有機溶媒中、金属触媒及び／又は塩基存在下、カップリング反応させることで本発明化合物を得ることができる。

上記の製造方法において、製造の便宜上、保護基を使用した場合には、その保護基を汎用される方法にて除去することができる。

環Ｘ及び／又はインダゾール環の置換基は、当初から所望の置換基を導入しておいてもよく、また、上記の方法により基本骨格を製造した後に、酸化、還元、アルキル化、エステル化、アミド化、オキシム化、脱水反応、脱保護反応、アセチル化、加水分解、トリフラート化、カップリング反応、環化反応及び／又はそれらの反応を組み合わせた汎用される合成方法を使用して、基本骨格に所望の置換基を導入してもよい。

本発明化合物の合成中間体の製造方法については、後述の実施例［製造例の項］で詳述する。

また、合成中間体は国際公開ＷＯ２００５／０３５５０６号パンフレットに記載の方法に準じて製造することができる。

本発明化合物の有用性を見出すため、本発明化合物のＲｈｏキナーゼ阻害活性について評価検討した。その詳細は後述の実施例［薬理試験の項（Ｒｈｏキナーゼ阻害活性評価試験）］で説明するが、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー，２７４巻，３２４１８頁，１９９９年発行[J.Biol.Chem.,274,32418(1999)]に記載の方法及び市販の活性型ＲＯＣＫII[アップステイツ・バイオテクノロジー，カタログ 番号１４−３３８，（５ユニット/５０マイクロリットル）upstate biotechnology,Catalog No.14-338,(5Unit/50μl)]付属の説明書記載の方法に準じて、本発明化合物のＲｈｏキナーゼ阻害活性を評価検討した。その結果、本発明化合物は優れたＲｈｏキナーゼ阻害作用を有しており、Ｒｈｏキナーゼが関与する疾患の治療剤として非常に有用であることを見出した。

さらに本発明化合物のＲｈｏキナーゼが関与する具体的な疾患への適用を検証するために、本発明化合物の眼圧下降作用についても検討した。その詳細は後述の実施例［薬理試験の項（眼圧下降作用測定試験）］で説明するが、カニクイザル（性別：雄性、一群４〜５匹）に本発明化合物を点眼投与したところ、本発明化合物は優れた眼圧下降作用を有しており、緑内障等の眼疾患の治療剤としても有用であることも併せて見出した。

前述したようにＲｈｏキナーゼは、高血圧症、狭心症、喘息、末梢循環障害、早産、動脈硬化症、癌、炎症性疾患、自己免疫疾患、ＡＩＤＳ、受精及び受精卵の着床、骨粗鬆症、脳機能障害、細菌の消化管障害、緑内障、網膜症等の疾患と深く関係していることが知られている。したがって、本発明化合物はＲｈｏキナーゼの関与するそれら疾患の治療剤として非常に期待されるものである。

また、本発明におけるＲｈｏキナーゼ阻害剤とはＲｈｏの活性化に伴い活性化されるセリン／スレオニンキナーゼを阻害する化合物を意味する。

さらに本発明における緑内障としては、原発性開放隅角緑内障、正常眼圧緑内障、房水産生過多緑内障、高眼圧症、急性閉塞隅角緑内障、慢性閉塞隅角緑内障、混合型緑内障、ステロイド緑内障、アミロイド緑内障、血管新生緑内障、悪性緑内障、水晶体の嚢性緑内障、台地状虹彩シンドローム（plateau iris syndrom）等が例示される。

本発明化合物は経口でも、非経口でも投与することができる。投与剤型として、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、注射剤、点眼剤等が挙げられ、それらは汎用される技術を組合わせて使用することで製剤化することができる。

錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の経口剤は、例えば、乳糖、マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸、炭酸カルシウム、リン酸水素カルシウム等の賦形剤；ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤；バレイショデンプン、トウモロコシデンプン等のデンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等の結合剤；カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルメチルセルロース、クエン酸カルシウム等の崩壊剤；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコーン樹脂等のコーティング剤；パラオキシ安息香酸エチル、ベンジルアルコール等の安定化剤；甘味料、酸味料、香料等の矯味矯臭剤等を必要に応じて本発明化合物に組合わせて、調製することができる。

また、注射剤、点眼剤等の非経口剤は、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、塩化ナトリウム、塩化カリウム、ソルビトール、マンニトール等の等張化剤；リン酸、リン酸塩、クエン酸、氷酢酸、ε-アミノカプロン酸、トロメタモール等の緩衝剤；塩酸、クエン酸、リン酸、氷酢酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等のｐＨ調節剤；ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、マクロゴール４０００、精製大豆レシチン、ポリオキシエチレン（１６０）ポリオキシプロピレン（３０）グリコール等の可溶化又は分散剤；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等のセルロース系高分子、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等の増粘剤；エデト酸、エデト酸ナトリウム等の安定化剤；汎用のソルビン酸、ソルビン酸カリウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸プロピル、クロロブタノール等の保存又は防腐剤；クロロブタノール、ベンジルアルコール、リドカイン等の無痛化剤等を必要に応じて本発明化合物に組合わせて、調製することができる。

尚、注射剤又は点眼剤の場合、ｐＨは４．０〜８．０に設定することが望ましく、また、浸透圧比は１．０付近に設定することが望ましい。

本発明はまた、患者に本発明化合物又はその塩の有効な量を投与することからなるＲｈｏキナーゼの阻害方法、および、患者に本発明化合物又はその塩の有効な量を投与することからなる緑内障の治療方法に関する。

本発明化合物の投与量は、症状、年齢、剤型等により適宜選択して使用することができる。例えば、経口剤であれば通常１日当たり０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜１００ｍｇを１回又は数回に分けて投与することができる。

また、点眼剤であれば通常０．０００１％〜１０％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．００１％〜５％（ｗ／ｖ）の濃度のものを１回又は数回に分けて投与することができる。

以下に本発明化合物（実施例１〜２）及び合成中間体（参考例１〜９）の製造例、製剤例並びに薬理試験の結果を示す。尚、これらの例示は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。また、実施例の物性におけるＲｆ値は、薄層クロマトグラフィー（メルク社製、ＴＬＣプレートシリカゲル６０Ｆ_２５４（商品名））を用いて測定した値を表し、特記なき限り化学構造式中のＢｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を、ＴＨＰはテトラヒドロピラニル基を表す。

（参考例１）
３−シクロプロピル−２−メチルアセトアニリド（参考化合物１）の合成

窒素気流下、トルエン２０００ｍｌに３−クロロ−２−メチルアセトアニリド１８４ｇ（１．００ｍｏｌ）、シクロプロピルボロン酸１２９ｇ（１．５０ｍｏｌ）、リン酸カリウム二水和物７４５ｇ（３．００ｍｏｌ）、水１２０ｍｌ、２０重量％トリシクロヘキシルホスフィン／トルエン溶液６３．０ｍｌ（０．０４０ｍｏｌ）、酢酸パラジウム４．４９ｇ（０．０２０ｍｏｌ）を順次加え、９０℃から１００℃で７時間加熱撹拌した。

反応終了後、反応溶液を室温まで冷却し、水１０００ｍｌ、酢酸エチル１０００ｍｌを加え、セライト（商品名）濾過を行い、濾液を分液した。有機層を水１０００ｍｌ、飽和塩化ナトリウム水溶液１０００ｍｌで順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残渣にｎ−ヘキサン２０００ｍｌを加え、生成した固体を濾取し、乾燥することにより、標記の化合物１５６ｇを灰白色固体として得た（収率８２％）。

融点：119-120℃。

Ｒｆ値：0.25（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：190（Ｍ^＋＋１）。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d₆,δppm）：0.54-0.59(m,2H),0.87-0.93(m,2H),1.85-1.94(m,1H),2.04(s,3H),2.23(s,3H),6.83(d,J=7.3Hz,1H),7.01-7.06(m,1H),7.12(d,J=7.3Hz,1H),9.32(brs,1H) 。

（参考例２）
４−ブロモ−３−シクロプロピル−２−メチルアセトアニリド（参考化合物２）の合成

窒素気流下、３−シクロプロピル−２−メチルアセトアニリド（参考化合物１）１８５ｇ（０．９７８ｍｏｌ）の酢酸１８００ｍｌ溶液に、酢酸ナトリウム８８．２ｇ（１．０８ｍｏｌ）を加えた。反応溶液に２０℃から３０℃で臭素５５．１ｍｌ（１．０８ｍｏｌ）を滴下し、室温で３時間撹拌した。

反応終了後、反応溶液に水１８００ｍｌ、５重量％亜硫酸水素ナトリウム水溶液３００ｍｌを加え、室温で３０分間撹拌した。生成した固体を濾取、水１０００ｍｌで洗浄、乾燥することにより標記の化合物２４２ｇを白色固体として得た（収率９２％）。

融点：170-172℃。

Ｒｆ値：0.25（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：268,270（Ｍ^＋＋１）。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d₆,δppm）：0.50-0.56(m,2H),1.08-1.14(m,2H),1.72-1.81(m,1H),2.04(s,3H),2.29(s,3H),7.16(d,J=8.5Hz,1H),7.37(d,J=8.5Hz,1H),9.34(brs,1H) 。

（参考例３）
１−アセチル−５−ブロモ−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール（参考化合物３）の合成

窒素気流下、４−ブロモ−３−シクロプロピル−２−メチルアセトアニリド（参考化合物２）２２８ｇ（０．８５０ｍｏｌ）の酢酸エチル２２８０ｍｌ溶液に、臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム１３．７ｇ（０．０４２ｍｏｌ）、酢酸カリウム１６７ｇ（１．７０ｍｏｌ）、無水酢酸２４０ｍｌ（２．５４ｍｏｌ）、亜硝酸イソアミル２３０ｍｌ（１．７２ｍｏｌ）を順次加え、加熱還流条件下で１１時間撹拌した。

反応終了後、反応溶液を室温まで冷却し、水２２８０ｍｌを加え分液した。有機層中に析出した固体を濾取し、乾燥することにより、標記の化合物１３９ｇを淡黄色固体として得た（収率５９％）。

融点：125-126℃。

Ｒｆ値：0.25（ｎ−へキサン：酢酸エチル＝９：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：279,281（Ｍ^＋＋１）。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（CDCl₃,δppm）：0.87-0.92(m,2H),1.20-1.27(m,2H),2.12-2.21(m,1H),2.77(s,3H),7.67(d,J=8.8Hz,1H),8.15-8.18(m,1H),8.28(d,J=0.7Hz,1H)。

（参考例４）
５−ブロモ−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール（参考化合物４）の合成

１−アセチル−５−ブロモ−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール（参考化合物３）１９５ｇ（７００ｍｍｏｌ）のメタノール／テトラヒドロフラン混合溶液７００ｍｌ（１：１（Ｖ／Ｖ））に、７Ｎ水酸化ナトリウム水溶液１２０ｍｌ（８４０ｍｍｏｌ）を１０℃から２０℃で加え、室温で３０分間撹拌した。

反応終了後、反応溶液を２Ｎ塩酸で中和し、水１４００ｍｌを加え、室温で３０分間撹拌した。生成した固体を濾取し、水５００ｍｌで洗浄し、乾燥することにより標記の化合物１６１ｇを微橙色固体として得た（収率９７％）。

融点：149-151℃。

Ｒｆ値：0.65（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：237,239（Ｍ^＋＋１）。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d₆,δppm）：0.96-1.01(m,2H),1.12-1.19(m,2H),2.19-2.28(m,1H),7.31-7.34(m,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),8.11(d,J=1.0Hz,1H),13.23(brs,1H) 。

（参考例５）
５−ブロモ−４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（参考化合物５）の合成

窒素気流下、５−ブロモ−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール（参考化合物４）１５４ｇ（０．６５０ｍｏｌ）のアセトニトリル１０４０ｍｌ溶液に、ピリジニウム ｐ−トルエンスルホナート３２．７ｇ（０．１３ｍｏｌ）、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン１１９ｍｌ（１．３０ｍｏｌ）を加え、室温で２７時間撹拌した。

反応終了後、反応溶液にトルエン２３００ｍｌを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１０００ｍｌ、飽和塩化アンモニウム水溶液１０００ｍｌ、飽和塩化ナトリウム水溶液１０００ｍｌ、水１０００ｍｌで順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残渣にメタノール６５０ｍｌ、水６５０ｍｌを加え、生成した固体を濾取し、水で洗浄し、乾燥することにより標記の化合物２０２ｇを橙色固体として得た（収率９７％）。

融点：75-76℃。

Ｒｆ値：0.40（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＥＩ,ｍ／ｚ）：320,322（Ｍ^＋）。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（CDCl₃,δppm）：0.93-0.98(m,2H),1.14-1.21(m,2H),1.63-1.80(m,3H),2.01-2.25(m,3H),2.47-2.60(m,1H),3.68-3.76(m,1H),3.98-4.03(m,1H),5.66(dd,J1=9.4Hz,J2=2.8Hz,1H),7.28-7.32(m,1H),7.50(d,J=9.0Hz,1H),8.12(d,J=0.7Hz,1H)。

（参考例６）
４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル［１，３，２］ジオキサボロラニル）−１Ｈ−インダゾール（参考化合物６）の合成

５−ブロモ−４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（参考化合物５）７０ｇ（２２０ｍｍｏｌ）のトルエン４９０ｍｌ溶液に、アルゴン気流下撹拌しながらトリエチルアミン９１ｍｌ（６５０ｍｍｏｌ）を室温で滴下した。アルゴンガスで１０分間バブリングした後、アルゴン気流下撹拌しながらジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム４．６ｇ（６．６ｍｍｏｌ）、次いで４，４，５，５−テトラメチル［１，３，２］ジオキサボロラン６３ｍｌ（４３０ｍｍｏｌ）を室温で滴下し、１１０℃で６時間加熱撹拌した。

反応終了後、反応溶液に水１４ｍｌ、１０％クエン酸水溶液３５０ｍｌ、セライト１４ｇを加え１０分間撹拌後濾過した。濾液を分液し、有機層に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液３５０ｍｌ、セライト１４ｇを加え１０分間撹拌後濾過した。濾液を分液し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残渣にｎ−ヘプタン７００ｍｌを加え、セライトを通して濾過した後、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラグラフィー（溶出溶媒；ｎ−へキサン：酢酸エチル＝９：１（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮することにより、標記の化合物７４ｇを淡黄色油状物として得た（収率９２％）。

Ｒｆ値：0.43（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：369（Ｍ^＋＋１）。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（CDCl₃,δppm）：0.93-1.15(m,4H),1.37(s,12H),1.55-1.87(m,3H),1.97-2.25(m,2H),2.45-2.65(m,1H),2.65-2.80(m,1H),3.65-3.80(m,1H),3.95-4.10(m,1H),5.65-5.75(m,1H),7.34(d,J=8.5Hz,1H),7.71(d,J=8.5Hz,1H),8.11(s,1H)。

（参考例７）
２−ブロモ−５−（５−シアノ−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）ピリジン（参考化合物７）の合成

２−ブロモ−５−シアノメチルピリジン（国際公開ＷＯ２００３／０５００８７パンフレット参照）４．０ｇ（２０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４０ｍｌ溶液に、アルゴン気流下撹拌しながら水素化ナトリウム（鉱物油５５％分散物）２．０ｇ（４６ｍｍｏｌ）を０℃で分割添加した。次いで１，１−ビス（ヨードメチル）シクロプロパン（マイケル イー． ライト等 ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー ５８巻、４１２２頁、１９９３年発行[Michael E. Wright et al. J. Org. Chem., 58, 4122(1993)]参照）６．６ｇ（２１ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍｌ溶液を撹拌下０℃で滴下し、２時間撹拌した。

反応終了後、反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液にゆっくり注加し、水を加えた後、トルエンで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラグラフィー（溶出溶媒；ｎ−へキサン：酢酸エチル＝４：１（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮することにより、標記の化合物２．２ｇを無色油状物として得た（収率４１％）。

Ｒｆ値：0.51（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：263,265（Ｍ^＋＋１）。

¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（CDCl₃,δppm）：0.59-0.67(m,2H),0.74-0.81(m,2H),2.66-2.73(m,2H),3.03-3.10(m,2H),7.55(dd,J1=8.4Hz,J2=0.7Hz,1H),7.73(dd,J1=8.4Hz,J2=2.7Hz,1H),8.62(dd,J1=2.7Hz,J2=0.7Hz,1H)。

（参考例８）
５−（５−アミノカルボニル−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）−２−ブロモピリジン（参考化合物８）の合成

２−ブロモ−５−（５−シアノ−スピロ［２,３］ヘキサ−５−イル）ピリジン（参考化合物７）２．０ｇ（７．６ｍｍｏｌ）のｎ−ヘプタン１００ｍｌ溶液にシリカゲル１０ｇ（ＰＳＱ ６０Ｂ 富士シリシア化学株式会社製）、二酸化マンガン１５ｇを加え９０℃で２時間撹拌した。

反応終了後、反応溶液を室温まで冷却しセライト濾過した。残った固形物を酢酸エチル３００ｍｌで３回洗浄し、濾液と洗浄液を集め減圧濃縮した。得られた残渣に酢酸エチル１０ｍｌ、ｎ−ヘプタン５０ｍｌを加え超音波処理を行った後、生成した固体を濾取した。得られた固体をｎ−ヘプタンで洗浄することにより、標記の化合物１．６ｇを白色粉末として得た（収率７５％）。

融点：174-175℃
Ｒｆ値：0.19（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：281,283（Ｍ^＋＋１）。

¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（CDCl₃,δppm）：0.40-0.65(m,4H),2.55-2.65(m,2H),2.90-3.00(m,2H),5.35-5.80(m,2H),7.49(dd,J1=8.3Hz,J2=1.0Hz,1H),7.55(dd,J1=8.3Hz,J2=2.7Hz,1H),8.40-8.45(m,1H)。

（参考例９）
２−ブロモ−５−（５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−スピロ［２,３］ヘキサ−５−イル）ピリジン（参考化合物９）

５−（５−アミノカルボニル−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）−２−ブロモピリジン（参考化合物８）１．６ｇ（５．７ｍｍｏｌ）のｔｅｒｔ−ブタノール１６ｍｌ溶液に、アルゴン気流下撹拌しながら［ビス（トリフルオロアセトキシ）ヨード］ベンゼン２．７ｇ（６．３ｍｍｏｌ）を室温で添加し、６０℃で２０分間加熱撹拌した。次いで、ピリジン１．０ｍｌ（１２ｍｍｏｌ）を加え、９０℃で３０分間加熱撹拌した。

反応終了後、反応溶液を減圧濃縮した。得られた残渣にトルエン１００ｍｌを加え、水５０ｍｌで３回洗浄し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液５０ｍｌで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラグラフィー（溶出溶媒；ｎ−へキサン：酢酸エチル＝４：１（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた残渣にｎ−ヘプタンを加え生成した固体を濾取し、ｎ−ヘプタンで洗浄することにより、標記の化合物１．０ｇを白色粉末として得た（収率５０％）。

融点：122-123℃
Ｒｆ値：0.40（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：353,355（Ｍ^＋＋１）。

¹Ｈ−ＮＭＲスペクトル（CDCl₃,δppm）：0.50-0.70(m,4H),1.40(brs,9H),2.45-2.75(m,4H),5.26(brs,1H),7.45(dd,J1=8.3Hz,J2=0.5Hz,1H),7.65-7.80(m,1H),8.46-8.60(m,1H)。

（実施例１）
５−｛５−（５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）ピリジン−２−イル）｝−４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（実施例化合物１）の合成

４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル［１，３，２］ジオキサボロラニル）−１Ｈ−インダゾール（参考化合物６）１．０ｇ（２．７ｍｍｏｌ）のトルエン６ｍｌ溶液に、アルゴン気流下エタノール１．２ｍｌ、水１．２ｍｌ、リン酸カリウム２水和物２．１ｇ（８．５ｍｍｏｌ）、２−ブロモ−５−（５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−スピロ［２,３］ヘキサ−５−イル）ピリジン（参考化合物９）１．０ｇ（２．８ｍｍｏｌ）を加え、アルゴンガスで１０分間バブリングした。次いで、アルゴン気流下２０重量％トリシクロヘキシルホスフィン／トルエン溶液０．０９０ｍｌ（０．０５７ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム６．４ｍｇ（０．０２９ｍｍｏｌ）を加え、９０℃で５時間加熱撹拌した。

反応終了後、反応溶液にトルエン１０ｍｌ、水５ｍｌを加え分液し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた残渣に酢酸エチル１０ｍｌ、ｎ−ヘプタン２０ｍｌを加え生成した固体を濾取することにより、標記の化合物７００ｍｇを白色粉末として得た（収率４８％）。

融点：199-202℃。

Ｒｆ値：0.33（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：515（Ｍ^＋＋１）。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（CDCl₃,δppm）：0.45-0.70(m,6H),0.80-0.95(m,2H),1.41(brs,9H),1.60-1.90(m,3H),2.00-2.24(m,2H),2.27-2.40(m,1H),2.50-2.80(m,5H),3.70-3.82(m,1H),4.00-4.10(m,1H),5.28(brs,1H),5.70-5.78(m,1H),7.49(d,J=8.6Hz,1H),7.52-7.63(m,2H),7.80-7.95(m,1H),8.22(s,1H),8.85-8.95(m,1H)。

（実施例２）
５−｛５−（５−アミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）ピリジン−２−イル｝｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール ２塩酸塩（実施例化合物２）の合成

５−｛５−（５−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）ピリジン−２−イル｝｝−４−シクロプロピル−１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール（実施例化合物１）７００ｍｇ（１．４ｍｍｏｌ）にエタノール２ｍｌ、水０．１ｍｌ及び３６重量％塩化水素／エタノール溶液５ｍｌを加え、アルゴン気流下、室温で３時間、３５℃で2時間撹拌した。

反応終了後、反応溶液を室温まで冷却した後、エタノールを１ｍｌ加え濾過し、エタノールで洗浄した。得られた固体に、８０℃でエタノール１．５ｍｌ、水０．３ｍｌを加え、１５分間加熱撹拌して、溶解した。

溶解液を０℃に冷却しエタノール１．５ｍｌを加え、生成した固体を濾取し、エタノール洗浄することにより、標記の化合物３００ｍｇを白色粉末として得た（収率５５％）。

融点：＞300℃（分解）。

Ｒｆ値：0.30（クロロホルム：メタノール：２８％アンモニア水＝５：１：０．０１（Ｖ／Ｖ／Ｖ））。

マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：331（Ｍ^＋＋１）。

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（DMSO-d₆,δppm）：0.40-0.73(m,6H),0.80-1.00(m,2H),2.44-2.54(m,1H),2.74(d,J=13.9Hz,2H),2.97(d,J=13.9Hz,2H),7.45-7.65(m,2H),8.07(d,J=8.3Hz,1H),8.27(s,1H) ,8.5(d,J=8.3Hz,1H),9.00-9.08(m,1H),9.10-9.40(m,3H),13.2(brs,1H)。

［製剤例］
本発明化合物の一般的な製剤例を以下に示す。

１）錠剤
処方１ １００ｍｇ中
本発明化合物 １ｍｇ
乳糖 ６６．４ｍｇ
トウモロコシデンプン ２０ｍｇ
カルボキシメチルセルロースカルシウム ６ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース ４ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．６ｍｇ

上記処方の錠剤に、コーティング剤（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴール、シリコーン樹脂等通常のコーティング剤）２ｍｇを用いてコーティングを施し、目的とするコーティング錠を得る（以下の処方の錠剤も同じ）。また、本発明化合物並びに添加物の種類及び量を適宜変更することにより、所望の錠剤を得ることができる。

２）カプセル剤
処方２ １５０ｍｇ中
本発明化合物 ５ｍｇ
乳糖 １４５ｍｇ

本発明化合物と乳糖の混合比を適宜変更することにより、所望のカプセル剤を得ることができる。

３）点眼剤
処方３ １００ｍｌ中
本発明化合物 １００ｍｇ
塩化ナトリウム ９００ｍｇ
ポリソルベート８０ ２００ｍｇ
水酸化ナトリウム 適量
塩酸 適量
滅菌精製水 適量

本発明化合物並びに添加物の種類及び量を適宜変更することにより、所望の点眼剤を得ることができる。

［薬理試験］
Ａ．Ｒｈｏキナーゼ阻害活性評価試験
本発明化合物のＲｈｏキナーゼ阻害剤としての有用性を調べるため、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー，２７４巻，３２４１８頁，１９９９年発行[J.Biol.Chem.,274,32418(1999)]に記載の方法及び市販の活性型ＲＯＣＫＩI[アップステイツ・バイオテクノロジー，カタログ 番号１４−３３８，（５ユニット/５０マイクロリットル）upstate biotechnology,Catalog No.14-338,(5Unit/50μl)]付属の説明書記載の方法に準じて、本発明化合物のＲｈｏキナーゼ阻害活性を評価検討した。被験化合物としては、実施例化合物２を使用した。

（試薬の調製）
１）緩衝液の調製
５０ｍＭ トリスヒドロキシメチルアミノメタン（Ｔｒｉｓ）（ｐＨ７．５）、２ｍＭ エチレングリコールビス（β−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、１ｍＭ エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、５ｍＭ 塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ₂）、５ｍＭ β−グリセロールホスフェイト及び２ｍＭ ジチオスレイトール（ＤＴＴ）となるよう、これらの成分を蒸留水に加え、緩衝液を調製した。

２）［γ−³²Ｐ］ＡＴＰ溶液の調製
１０ｍＭ ＡＴＰ水溶液と市販の［γ−³²Ｐ］ＡＴＰ溶液［NEN社 Code No.NEG-002A］の混合液を緩衝液で希釈して、３００μＭの［γ−³²Ｐ］ＡＴＰ溶液を調製した。

３）ＲＯＣＫII溶液の調製
市販の活性型ＲＯＣＫII［upstate biotechnology,Catalog No.14-338,（5Unit/50μl）］を緩衝液で１／１００希釈して、ＲＯＣＫII溶液を調製した。

４）１ｍＭ 基質溶液の調製
Ｓ６キナーゼ基質ペプチド(S6 Kinase Substrare Peptide) [アップステイツ バイオテクノロジー，カタログ 番号１２−１２４，（２ミリグラム）upstate biotechnology,Catalog No.12-124,(2mg)]を蒸留水に溶解して１ｍＭ 基質溶液を調製した。

５）リン酸溶液の調製
市販のリン酸を蒸留水で各濃度に調製した。

６）被験化合物溶液の調製
被験化合物は１０％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）水溶液に溶解した。

（評価方法）
１）マイクロチューブに被験化合物溶液５μｌおよび［γ−³²Ｐ］ＡＴＰ溶液５μｌを加えた後、４℃に冷却する。

２）次いで、マイクロチューブにＲＯＣＫＩI溶液１０μｌ、１ｍＭ基質溶液２．５μｌ及び緩衝液３７．５μｌを加えて反応混液を作成し、４℃に冷却する。

３）マイクロチューブをウォーターバス（３０℃）中で１５分間インキュベートする。

４）４℃に冷却した後、マイクロチューブに２５０ｍＭリン酸溶液（５μｌ）を加えて反応を停止する。

５）反応混液３０μｌを濾紙（ワットマンＰ８１）（商品名）にスポットする。

６）未反応の［γ−³²Ｐ］ＡＴＰを洗浄するために７５ｍＭリン酸溶液の入ったビーカーに濾紙を移し、５分間振盪する。さらに４回このリン酸溶液で洗浄する。

７）濾紙をエタノールに浸漬した後に乾燥し、液体シンチレーションカウンターによりリン酸化された基質の量を測定する。

（ＩＣ_５０の算出）
ＲＯＣＫII溶液の代わりに緩衝液を入れたバックグラウンドマイクロチューブ中のリン酸化基質量と、被験化合物溶液の代わりに１０％ＤＭＳＯ水溶液を入れたコントロールマイクロチューブ中のリン酸化基質量の差を１００％とする。被験化合物溶液を入れたマイクロチューブ中のリン酸化基質量を内挿し、被験化合物溶液添加時のリン酸化基質量を相対値として算出する。複数濃度の被験化合物溶液添加時のリン酸化基質量から酵素活性を５０％阻害する被験化合物溶液濃度をＩＣ_５０として算出する。

（Ｋｉ値の算出）
以下の計算式に従って、Ｋｉ値を算出する。Ｓは反応液中に含まれるＡＴＰ濃度を、Ｋｍはミハエリス−メンテン[Michaelis-Menten]定数を表す。

Ｋｉ＝ＩＣ_５０／（１＋Ｓ／Ｋｍ）
（結果及び考察）
被験化合物として、実施例化合物２を使用した時の結果を表１に示す。

表１に示したとおり、被験化合物は、優れたＲｈｏキナーゼ阻害作用を示した。この結果から、本発明化合物はＲｈｏキナーゼが関与する疾患の治療剤として非常に有用であることがわかった。

Ｂ.眼圧下降作用測定試験
本発明化合物の緑内障治療剤としての有用性を調べるため、カニクイザル（性別：雄性、一群４〜５匹）に本発明化合物を投与した場合の眼圧下降効果を評価検討した。被験化合物としては実施例化合物２（以下、被験化合物とする）を使用した。

（被験化合物溶液の調製）
被験化合物を２．６％グリセリン液に溶解後、水酸化ナトリウムを加えてｐＨを調整し（ｐＨ６．０〜７．０）、濃度０．１％の被験化合物溶液を調製した。

（眼圧下降評価試験方法）
１）０．４％塩酸オキシブプロカイン点眼液をカニクイザルの両眼に一滴点眼し局所麻酔をした。

２）被験化合物溶液投与直前に眼圧を測定し初期眼圧とした。

３）被験化合物溶液を実験動物の片眼に点眼した（対側眼は無処置）。

４）被験化合物溶液点眼の２時間、４時間及び６時間後に０．４％塩酸オキシブプロカイン点眼液を一滴両眼に点眼し局所麻酔後、眼圧を測定した。各時間の眼圧は３回測定し、その平均値を算出した。

尚、コントロールには被験化合物溶液に代えて、基剤（２．６％グリセリン液）のみを投与して、他は上記の１〜４）と同じ方法で試験した。

（結果及び考察）
被験化合物を使用した時の結果を図１に示す。また、眼圧は初期眼圧からの変化値を示す。

図１に示したとおり、被験化合物は、優れた眼圧下降作用を示した。この結果から本発明化合物は緑内障治療剤として特に有用であることが分かった。

本発明に係るインダゾール誘導体は、Ｒｈｏキナーゼ阻害作用を有し、Ｒｈｏキナーゼが関与する疾患、例えば、緑内障等の眼疾患治療剤として有用である。

各投与群の眼圧の経時変化を示すグラフである。眼圧は初期眼圧からの変化値で示す。□は被験化合物投与群を、○はコントロール群を示す。

Claims (12)

1. 下記一般式［Ｉ］で表される化合物又はその塩。
   

   

   ［式中、環Ｘはベンゼン環、又はピリジン環を示し；
   Ｒ¹とＲ²は同一又は異なって、ハロゲン原子、水素原子、ヒドロキシ基、置換若しくは無置換アルコキシ基、置換若しくは無置換アルケニルオキシ基、置換若しくは無置換アルキニルオキシ基、置換若しくは無置換シクロアルキルオキシ基、置換若しくは無置換シクロアルケニルオキシ基、置換若しくは無置換アリールオキシ基、置換若しくは無置換アルキル基、置換若しくは無置換アルケニル基、置換若しくは無置換アルキニル基、置換若しくは無置換シクロアルキル基、置換若しくは無置換シクロアルケニル基、置換若しくは無置換アリール基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、ヒドロカルボニル基、置換若しくは無置換アルキルカルボニル基、置換若しくは無置換アリールカルボニル基、アミノ基、置換若しくは無置換アルキルアミノ基、置換若しくは無置換アリールアミノ基、メルカプト基、置換若しくは無置換アルキルチオ基、置換若しくは無置換アリールチオ基、スルフィン酸基又はそのエステル若しくはそのアミド、ヒドロスルフィニル基、置換若しくは無置換アルキルスルフィニル基、置換若しくは無置換アリールスルフィニル基、スルホン酸基又はそのエステル若しくはそのアミド、ヒドロスルホニル基、置換若しくは無置換アルキルスルホニル基、置換若しくは無置換アリールスルホニル基、ニトロ基、シアノ基、及び置換若しくは無置換単環式複素環からなる群より選択される１又は複数の基を示し；
   Ｒ³はハロゲン原子、水素原子、ヒドロキシ基、置換若しくは無置換アルコキシ基、置換若しくは無置換アリールオキシ基、置換若しくは無置換アルキル基、及び置換若しくは無置換アリール基からなる群より選択される１又は複数の基を示し；
   Ｒ⁴とＲ⁵は同一又は異なって、ハロゲン原子、水素原子、及び置換又は無置換アルキル基からなる群より選択される１又は複数の基を示し；
   Ｒ⁶とＲ⁷は同一又は異なって、水素原子、置換又は無置換アルキル基、及び置換又は無置換アリール基からなる群より選択される基を示し；
   Ｒ⁶とＲ⁷は一緒になって単環式複素環を形成してもよく；
   ｍ、ｎ、ｐ及びｑは、同一又は異なって０〜３の整数を示す、但し、ｍとｎの合計が１以上の整数であり、かつ、ｐとｑの合計が１以上の整数である。］
2. 置換アルコキシ基、置換アルキル基、置換アルケニル基、又は置換アリール基がハロゲン原子、ヒドロキシ基、無置換アルコキシ基、無置換アリール基、ヒドロキシイミノ基、及び無置換アルコキシイミノ基からなる群より選択される１又は複数の基で置換されたアルコキシ基、アルキル基、アルケニル基、又はアリール基を示す請求項１記載の化合物又はその塩。
3. 一般式［Ｉ］において、
   環Ｘがベンゼン環、又はピリジン環を示し；
   Ｒ¹が水素原子、置換アルキル基、無置換アルケニル基、カルボキシ基又はそのエステル若しくはそのアミド、アミノ基、又はシアノ基を示し；
   Ｒ²が水素原子、ヒドロキシ基、置換若しくは無置換アルコキシ基、無置換アルケニルオキシ基、無置換シクロアルキルオキシ基、置換若しくは無置換アルキル基、無置換アルケニル基、無置換シクロアルキル基、アミノ基、無置換アルキルアミノ基、ニトロ基、シアノ基、又は単環式複素環基を示し；
   Ｒ³がハロゲン原子、又は水素原子を示し；
   Ｒ⁴及びＲ⁵が水素原子を示し；
   Ｒ⁶及びＲ⁷が水素原子を示し；
   ｍ、ｎ、ｐ及びｑが、同一又は異なって０〜２の整数を示す、但し、ｍとｎの合計が１以上の整数であり、かつ、ｐとｑの合計が１以上の整数である、請求項１又は２記載の化合物又はその塩。
4. 置換アルコキシ基がハロゲン原子で置換されたアルコキシ基を示し、置換アルキル基がヒドロキシ基、及びヒドロキシイミノ基からなる群より選択される１又は複数の基で置換されたアルキル基を示す請求項３記載の化合物又はその塩。
5. 一般式［Ｉ］において、
   環Ｘがベンゼン環、又はピリジン環を示し；
   Ｒ¹が水素原子、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシイミノメチル基、１−メチルビニル基、カルボキシ基、メトキシカルボニル基、アミノカルボニル基、アミノ基、又はシアノ基を示し；
   Ｒ²が水素原子、ヒドロキシ基、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロピルオキシ基、ｎ−ブチルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ジフルオロメトキシ基、２−フルオロエトキシ基、２、２、２−トリフルオロエトキシ基、アリルオキシ基、シクロプロピルオキシ基、シクロプロピルメチルオキシ基、エチル基、ビニル基、ヒドロキシメチル基、１−ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシエチル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、アミノ基、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ニトロ基、シアノ基、ピロリジン環、ピロール環、ピラゾール環、オキサゾール環、イソオキサゾール環、ピペリジン環、ピリジン環、又はモルホリン環を示し；
   Ｒ³が塩素原子、又は水素原子を示し；
   Ｒ⁴及びＲ⁵が水素原子を示し；
   Ｒ⁶及びＲ⁷が水素原子を示し；
   ｍ及びｎが１を示し；
   ｐ及びｑのどちらか一方が０を、他方が１を示す請求項１〜４のいずれか１記載の化合物又はその塩。
6. 一般式［Ｉ］において、環Ｘがインダゾール環の５位に置換された請求項１〜５のいずれか１記載の化合物又はその塩。
7. ・５−｛５−（１−アミノ−スピロ［２，２］ペンタ−１−イル）ピリジン−２−イル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール、
   ・５−｛５−（１−アミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−１−イル）ピリジン−２−イル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール、
   ・５−｛５−（５−アミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）ピリジン−２−イル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール、
   ・５−｛４−（５−アミノ−スピロ［２，３］ヘキサ−５−イル）フェニル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール、及び
   ・５−｛５−（２−アミノ−スピロ［３，３］ヘプタ−２−イル）ピリジン−２−イル｝−４−シクロプロピル−１Ｈ−インダゾール
   からなる群より選択される化合物又はその塩。
8. 請求項１〜７のいずれか１記載の化合物又はその塩を含有する医薬組成物。
9. 請求項１〜７のいずれか１記載の化合物又はその塩を有効成分として含有するＲｈｏキナーゼ阻害剤。
10. 請求項１〜７のいずれか１記載の化合物又はその塩を有効成分として含有する緑内障治療剤。
11. 患者に請求項１〜７のいずれか１記載の化合物又はその塩の有効な量を投与することからなるＲｈｏキナーゼの阻害方法。
12. 患者に請求項１〜７のいずれか１記載の化合物又はその塩の有効な量を投与することからなる緑内障の治療方法。

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