JPS6363375A - 新規バチルス・ｓｐＨ０２３ - Google Patents
新規バチルス・ｓｐＨ０２３Info
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- JPS6363375A JPS6363375A JP20515486A JP20515486A JPS6363375A JP S6363375 A JPS6363375 A JP S6363375A JP 20515486 A JP20515486 A JP 20515486A JP 20515486 A JP20515486 A JP 20515486A JP S6363375 A JPS6363375 A JP S6363375A
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Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、新規なバチルス・ｓｐ ＨＯ２３に関するも
のである。
のである。
従来、一般に蛋白質を微生物によって生産させるという
場合、微生物を培養し、微生物菌体を磨砕後、蛋白質を
抽出、精製することにより得ていた。
場合、微生物を培養し、微生物菌体を磨砕後、蛋白質を
抽出、精製することにより得ていた。
また、一般に遺伝子組換えの微生物生産の宿主としては
、大腸菌が主に使用されているが、大腸菌では、組換え
遺伝子によって合成されるペプチドや蛋白質は細胞内に
とどまり培地中に分泌生産されないため、自づとその生
産量は制限されていた。
、大腸菌が主に使用されているが、大腸菌では、組換え
遺伝子によって合成されるペプチドや蛋白質は細胞内に
とどまり培地中に分泌生産されないため、自づとその生
産量は制限されていた。
しかし、細胞磨砕によりペプチド、蛋白質を抽出精製す
ることは、操作が煩雑になるなどの欠点が指摘されてい
る。
ることは、操作が煩雑になるなどの欠点が指摘されてい
る。
鵜高は、先に、遺伝子組換えにおける宿主菌として蛋白
質を菌体外に分泌する微生物を求めて研究した結果、蛋
白質を多量に分泌生産する微生物として、約１２００株
のなかからバチルス・プレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂ
ｒｅｖｉｓ） ４株、新菌株バチルス・プロテア−マン
ス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒｏｔｅｉｆｏｒ＋ｍａｎｓ
） １株の５株を分離同定するに至った。 （Ａｇｒｉ
ｃ、 Ｂｉｏｌ。
質を菌体外に分泌する微生物を求めて研究した結果、蛋
白質を多量に分泌生産する微生物として、約１２００株
のなかからバチルス・プレビス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂ
ｒｅｖｉｓ） ４株、新菌株バチルス・プロテア−マン
ス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｒｏｔｅｉｆｏｒ＋ｍａｎｓ
） １株の５株を分離同定するに至った。 （Ａｇｒｉ
ｃ、 Ｂｉｏｌ。
Ｃｈｅ＋ａ、、 ４０（３）、 ５２３−５２８（１９
７６））また、一方、分泌宿主−ベクターとして枯草菌
も利用され、α−アミラーゼ、インターフェロンなど各
種異種蛋白質を培地中に蓄積させることに成功している
が、菌体内外の強いプロテアーゼにより生産量が制限さ
れたり、分解されたりして、良好な結果は得られていな
い。
７６））また、一方、分泌宿主−ベクターとして枯草菌
も利用され、α−アミラーゼ、インターフェロンなど各
種異種蛋白質を培地中に蓄積させることに成功している
が、菌体内外の強いプロテアーゼにより生産量が制限さ
れたり、分解されたりして、良好な結果は得られていな
い。
先に、鵜高らは、バチルス・ステアロサーモフィルス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍ＋ｏｐｈｉ
ｌｕｓ）ＤＹ−５の耐熱性α−アミラーゼ遺伝子をプラ
スミドＰＵＢＩＩＯに組込んだＰＲＡＭＩＯＩを保有す
るバチルス・プレビス４７及び枯草菌を３７℃、４８時
間培養した時、バチルス・プレビス４７では約１５．０
０００／ｍＱ、枯草菌では３ 、０００υ／ｍＱ程度の
α−アミラーゼをそれぞれ培地中に生産蓄積するのを確
認した。 （Ｊ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、。
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍ＋ｏｐｈｉ
ｌｕｓ）ＤＹ−５の耐熱性α−アミラーゼ遺伝子をプラ
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るバチルス・プレビス４７及び枯草菌を３７℃、４８時
間培養した時、バチルス・プレビス４７では約１５．０
０００／ｍＱ、枯草菌では３ 、０００υ／ｍＱ程度の
α−アミラーゼをそれぞれ培地中に生産蓄積するのを確
認した。 （Ｊ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、。
１６４、（３）、 １１８２−１１３７（１９８５））
。
。
ここに、全く同一のプラスミドを保有するバチルス・プ
レビス４７（後述）と枯草菌とでは、耐熱性α−アミラ
ーゼの生産においてバチルス・プレビス４７の方が約５
倍も生産効率のよいという事実から蛋白質生産菌の有す
る蛋白質分泌能を用いることにより異種遺伝子産物を効
率良く分泌生産させうろことが判明した。
レビス４７（後述）と枯草菌とでは、耐熱性α−アミラ
ーゼの生産においてバチルス・プレビス４７の方が約５
倍も生産効率のよいという事実から蛋白質生産菌の有す
る蛋白質分泌能を用いることにより異種遺伝子産物を効
率良く分泌生産させうろことが判明した。
しかしながら、先に蛋白質を多量に菌体外に分泌生産す
る細菌として分離同定したバチルス・プレビス４７．１
４４．４８１．８９９、バチルス・プロテイホーマンス
４４４の５株は、いずれも培地中に牛血清アルブミン（
以下ＢＳＡという。）を添加して生育させるとＢＳＡを
分解し、更にバチルス・プレビス１４４゜４８１、８９
９、及びバチルス・プロテイホーマンス４４４の４株は
カゼイン分解活性も有していることが確認された。従っ
て、これら蛋白質を多量に菌体外に分泌生産する細菌を
宿主として組換え遺伝子によって異種遺伝子産物を分泌
生産させる時、効率良く分泌生産されたペプチド、蛋白
質が蛋白質分解酵素によって分解されると考えられた。
る細菌として分離同定したバチルス・プレビス４７．１
４４．４８１．８９９、バチルス・プロテイホーマンス
４４４の５株は、いずれも培地中に牛血清アルブミン（
以下ＢＳＡという。）を添加して生育させるとＢＳＡを
分解し、更にバチルス・プレビス１４４゜４８１、８９
９、及びバチルス・プロテイホーマンス４４４の４株は
カゼイン分解活性も有していることが確認された。従っ
て、これら蛋白質を多量に菌体外に分泌生産する細菌を
宿主として組換え遺伝子によって異種遺伝子産物を分泌
生産させる時、効率良く分泌生産されたペプチド、蛋白
質が蛋白質分解酵素によって分解されると考えられた。
そこで、本発明者らは、蛋白質を著量分泌し、かつ、蛋
白質分解酵素を菌体外に全く生産しない菌株が見い出さ
れれば、遺伝子組換えにおける宿主菌としてすぐれたも
のであるとの発想から、このような菌株を求めて鋭意選
別を行ったところ、各種試料から分離した約１００，０
００株のなかから、菌体外に著量の蛋白質を生産するが
、蛋白質分解酵素を菌体外に生産しない株を単離するこ
とに成功したのである。
白質分解酵素を菌体外に全く生産しない菌株が見い出さ
れれば、遺伝子組換えにおける宿主菌としてすぐれたも
のであるとの発想から、このような菌株を求めて鋭意選
別を行ったところ、各種試料から分離した約１００，０
００株のなかから、菌体外に著量の蛋白質を生産するが
、蛋白質分解酵素を菌体外に生産しない株を単離するこ
とに成功したのである。
ここに単離された株について、種の同定を行ったところ
、バチルスに属すものと同定され、本発明を完成するに
到った。
、バチルスに属すものと同定され、本発明を完成するに
到った。
本発明は、菌体外に著量の蛋白質を生産するが、蛋白質
分解酵素を生産しないバチルス・ｓｐ ＨＯ２３である
。
分解酵素を生産しないバチルス・ｓｐ ＨＯ２３である
。
従来、バチルス属において、蛋白質を生産する菌株は知
られているが、周知の菌株はすべて蛋白質分解酵素を生
産するものであって、本発明の。
られているが、周知の菌株はすべて蛋白質分解酵素を生
産するものであって、本発明の。
菌体外に著量の蛋白質を生産するが、蛋白質分解酵素を
菌体外に生産しないバチルス・ｓｐ ＨＯ２３は全く知
られておらず、新規である。
菌体外に生産しないバチルス・ｓｐ ＨＯ２３は全く知
られておらず、新規である。
本発明においては、蛋白質を５ ｇＩＱ以上培地中に分
泌生産しかつＢＳＡ、カゼインのいずれの蛋白質をも分
解しない菌株を目標に選択分離された。
泌生産しかつＢＳＡ、カゼインのいずれの蛋白質をも分
解しない菌株を目標に選択分離された。
まず、土壌などの試料から分離された約１００．０００
株の菌株をＴ２寒天平板培地（１％グルコース、１％ペ
プトン、０．５％肉エキス、０．２％酵母エキス、１．
５％寒天末、ｐＨ７，０）に接種し、平板培地上でコロ
ニー周辺が５％過塩素酸に白濁する細菌を選択した。次
に、ここに分離した細菌株をＴ２液体培地（１５０＋ｎ
Ｒ容三角フラスコ、培地量１０ｍＱ）で振盪培養（３０
℃、４８時間）し、その培養濾液中に１．２ｇ／Ｑ以上
の蛋白質を生産する菌株を８０株得た。
株の菌株をＴ２寒天平板培地（１％グルコース、１％ペ
プトン、０．５％肉エキス、０．２％酵母エキス、１．
５％寒天末、ｐＨ７，０）に接種し、平板培地上でコロ
ニー周辺が５％過塩素酸に白濁する細菌を選択した。次
に、ここに分離した細菌株をＴ２液体培地（１５０＋ｎ
Ｒ容三角フラスコ、培地量１０ｍＱ）で振盪培養（３０
℃、４８時間）し、その培養濾液中に１．２ｇ／Ｑ以上
の蛋白質を生産する菌株を８０株得た。
菌体外蛋白質の測定においては、培養液に等量の０．２
Ｎ ＮａＯＨを加え攪拌後１０．ＯＯＯｒｐｍ Ｘ ５
分遠心分離処理して菌体を除き、上清に等量の１０％ト
リクロル酢酸を加えて１０分抜機、０００ｒｐｍ Ｘ
１０分間遠心分離して沈殿を集め、１〜ＮａＯＨで溶解
した後Ｌｏｗｒｙ法（Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、
１９３．２６５（１９５１））によって定量し、蛋白質
量は牛血清アルブミンとして換算した。
Ｎ ＮａＯＨを加え攪拌後１０．ＯＯＯｒｐｍ Ｘ ５
分遠心分離処理して菌体を除き、上清に等量の１０％ト
リクロル酢酸を加えて１０分抜機、０００ｒｐｍ Ｘ
１０分間遠心分離して沈殿を集め、１〜ＮａＯＨで溶解
した後Ｌｏｗｒｙ法（Ｊ、 Ｂｉｏｌ、 Ｃｈｅｍ、
１９３．２６５（１９５１））によって定量し、蛋白質
量は牛血清アルブミンとして換算した。
蛋白質高生産培地として第１表に示す培地を選んだ。
これらの５種類の培地のすべての培地に、先に得られた
８０株の菌を振盪培養し、いずれかの培地で菌体外蛋白
質を５ｇ／Ω以上生産する菌株を３１株選択した。
８０株の菌を振盪培養し、いずれかの培地で菌体外蛋白
質を５ｇ／Ω以上生産する菌株を３１株選択した。
得られた３１株について、次に示す、ＢＳＡの分解性の
測定及びミルクカゼインの分解性の測定を行った・ （ＢＳＡの分ぎ性の測定） Ｔ２培地を１５０ｍｕ用三角フラスコに１０ｍＲ分注後
オートクレーブ殺菌し、無菌濾過したＢＳＡ （Ｓｉｇ
ｍａＡ４５０３）溶液を最終濃度３．２ｍｇ／ｍＲにな
るように添加し、１晩前培養した菌株を０．２＋ｏＱ接
種後３７℃で２０Ｏｒｐｍにて振盪培養した。
測定及びミルクカゼインの分解性の測定を行った・ （ＢＳＡの分ぎ性の測定） Ｔ２培地を１５０ｍｕ用三角フラスコに１０ｍＲ分注後
オートクレーブ殺菌し、無菌濾過したＢＳＡ （Ｓｉｇ
ｍａＡ４５０３）溶液を最終濃度３．２ｍｇ／ｍＲにな
るように添加し、１晩前培養した菌株を０．２＋ｏＱ接
種後３７℃で２０Ｏｒｐｍにて振盪培養した。
培養２４時間、４８時間、７２時間後にサンプリングし
た培養濾液を１０．０００ｒｐｍ ５分間遠心分離した
培養上清６２５ μｕに０．５Ｍ Ｔｒｉｓ−Ｃ１（ｐ
Ｈ６，８）１２５μｍ、１０％ＳＤＳ ２００μＱ、β
−メルカプトエタノール５０μＱを添加し攪拌後沸騰水
中で３分間熱処理後０．０５％ＢＰＢと７０％グリセロ
ールを含む０．０６２５Ｍ Ｔｒｉｓ−Ｃ１（ｐＨ６，
８）の０，１ｍＱを加え５ＤＳ−ポリアクリルアミドゲ
ル電気泳動（ＳＯ５−ＰＡＧＥ）用の試料とした。スラ
ブ５ＤＳ−ＰＡＧＥは１０％のアクリルアミド濃度で行
なった。
た培養濾液を１０．０００ｒｐｍ ５分間遠心分離した
培養上清６２５ μｕに０．５Ｍ Ｔｒｉｓ−Ｃ１（ｐ
Ｈ６，８）１２５μｍ、１０％ＳＤＳ ２００μＱ、β
−メルカプトエタノール５０μＱを添加し攪拌後沸騰水
中で３分間熱処理後０．０５％ＢＰＢと７０％グリセロ
ールを含む０．０６２５Ｍ Ｔｒｉｓ−Ｃ１（ｐＨ６，
８）の０，１ｍＱを加え５ＤＳ−ポリアクリルアミドゲ
ル電気泳動（ＳＯ５−ＰＡＧＥ）用の試料とした。スラ
ブ５ＤＳ−ＰＡＧＥは１０％のアクリルアミド濃度で行
なった。
蛋白質の検出はクーマシブリリアントブルーによる染色
により行なった。培養２４時間、４８時間、７２時間す
べてにおいてＢＳＡを分解しなかった菌株を、ＢＳＡの
分解性のない菌株とした。
により行なった。培養２４時間、４８時間、７２時間す
べてにおいてＢＳＡを分解しなかった菌株を、ＢＳＡの
分解性のない菌株とした。
（ミルクカゼインの分解性の測定）
スキムミルク５ｇ、２ｇ、１ｇを各々５０１１Ｉｎ純水
にＳ濁した液と寒天１ｇを純水５０ｍ （ｌに溶がした
液を別々にオートクレーブで殺菌機両者を混合後シャー
レに分注して、５％、２％、１％ミルク寒天平板培地を
作った。平板培地に菌株を植苗後３７℃にて３日間培養
しコロニーの周りが透明になるかどうか観察した。５％
、２％、１％ミルク寒天平板培地のすべてに全く透明円
をつくらない菌株をミルクカゼインの分解性のない菌株
とした。
にＳ濁した液と寒天１ｇを純水５０ｍ （ｌに溶がした
液を別々にオートクレーブで殺菌機両者を混合後シャー
レに分注して、５％、２％、１％ミルク寒天平板培地を
作った。平板培地に菌株を植苗後３７℃にて３日間培養
しコロニーの周りが透明になるかどうか観察した。５％
、２％、１％ミルク寒天平板培地のすべてに全く透明円
をつくらない菌株をミルクカゼインの分解性のない菌株
とした。
以上の測定の結果、ＨＯ２３株をＢＳＡ及びミルクカゼ
インをともに分解しないことから、蛋白質分解酵素を菌
体外に生産しない菌株として選定した。
インをともに分解しないことから、蛋白質分解酵素を菌
体外に生産しない菌株として選定した。
ＨＯ２３株を、Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ Ｄｅ
ｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ （
第８版）及び、Ｔｈｅ Ｐｒｏｋａｒｙｏｔｅ（Ａ Ｈ
ａｎｄｂｏｏｋ ｏｎ Ｈａｂｉｔａｔｓ、ｌ５ｏｌａ
ｔｉｏｎ ａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｂａｃｔｅｒｉａ）によって同定したところ、本菌株
は、まず、好気性、ダラム染色陽性、桿菌、胞子を形成
する点においてバチルス属に属するものと認められた。
ｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ （
第８版）及び、Ｔｈｅ Ｐｒｏｋａｒｙｏｔｅ（Ａ Ｈ
ａｎｄｂｏｏｋ ｏｎ Ｈａｂｉｔａｔｓ、ｌ５ｏｌａ
ｔｉｏｎ ａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｂａｃｔｅｒｉａ）によって同定したところ、本菌株
は、まず、好気性、ダラム染色陽性、桿菌、胞子を形成
する点においてバチルス属に属するものと認められた。
また、その他の、形態的性質、各培地における生育状態
、生理学的性質について、バチルス属の・ 従来知ら
れている菌種と比較検討した結果、バチルス属のどの菌
種とも異っていた。また、本菌種には、カゼイン、ＢＳ
Ａを分解する能力もなかった。
、生理学的性質について、バチルス属の・ 従来知ら
れている菌種と比較検討した結果、バチルス属のどの菌
種とも異っていた。また、本菌種には、カゼイン、ＢＳ
Ａを分解する能力もなかった。
従って、本菌種はバチルス属の新菌種として同定された
。
。
かくて、本菌株はバチルス・ｓｐ ＨＯ２３と命名され
た。
た。
バチルス・ｓｐ ＨＯ２３はＦＥＲＭ Ｐ−８８９３と
して微工研に寄託されている。
して微工研に寄託されている。
次にバチルス・ｓｐ ＨＯ２３の菌学的性質を示す。
（Ａ）形態的性質
（Ｃ）生理学的性質
本発明の菌体外に著量の蛋白質を生産するが、蛋白質分
解酵素を菌体外に生産しない菌株はバチルス・５ＰＨ０
２３である。
解酵素を菌体外に生産しない菌株はバチルス・５ＰＨ０
２３である。
本発明の新規バチルス・ｓｐ ）１０２３を培養するこ
とにより著量生産した蛋白質の性質次第では、それ自体
貴重蛋白質やゲル化剤、膨化剤等の食品加工素材または
、ガラス様素材、紙、人工皮革等の表面加工等の工業素
材としての利用等産業上の有用性が非常に高い。
とにより著量生産した蛋白質の性質次第では、それ自体
貴重蛋白質やゲル化剤、膨化剤等の食品加工素材または
、ガラス様素材、紙、人工皮革等の表面加工等の工業素
材としての利用等産業上の有用性が非常に高い。
また、本発明の新規ｓｐ ＨＯ２３を遺伝子組換えの宿
主菌として利用した場合遺伝子組換えによる生産物を効
率良く菌体外に分泌することができ、そして遺伝子組換
えによる生産物を分解することがないので、遺伝子組換
えにおける宿主菌としてきわめてすぐれたものになるで
あろう。
主菌として利用した場合遺伝子組換えによる生産物を効
率良く菌体外に分泌することができ、そして遺伝子組換
えによる生産物を分解することがないので、遺伝子組換
えにおける宿主菌としてきわめてすぐれたものになるで
あろう。
この系は、医薬品、良質な食糧蛋白質やゲル化剤、膨化
剤等の食品加工素材、または、ガラス様素材、紙、人工
皮革等の表面加工等の工業素材などの生産手段としての
活用が期待出来る。
剤等の食品加工素材、または、ガラス様素材、紙、人工
皮革等の表面加工等の工業素材などの生産手段としての
活用が期待出来る。
以上の様に本発明の有用性は産業上極めて意義深いもの
である。
である。
以下に、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明する
。
。
実施例１
前記第１表記載のＩＹ培地５００ｍＱを２Ｑ容のジャー
ファーメンタ−に分注し、常法により１２１℃２０分滅
菌した後、冷却した。
ファーメンタ−に分注し、常法により１２１℃２０分滅
菌した後、冷却した。
別に、ＩＹ培地５＋ｎＱ分注した試験管をオートクレー
ブすることにより滅菌し、これにバチルス・５ｐＨ０２
３を１白金耳接種し、３７℃で１４時間振盪培養した。
ブすることにより滅菌し、これにバチルス・５ｐＨ０２
３を１白金耳接種し、３７℃で１４時間振盪培養した。
この前培養物５＋＋１２をジャーファーメンタ−に接種
し、３７℃４８時間通気量０．５１２／分回転数４００
ｒｐｍで培養した。培養終了後、培養物に等量の０゜２
ＮＮａＯＨを加え攪拌後１００００ｒｐ＋ｉ Ｘ ５分
遠心分離処理して菌体を除き、上清１００ａ＋Ｑに等量
の１０％トリクロル酢酸を加え１０分抜機０００ｒｐ＋
ｍ Ｘ １０分間遠心分離して沈澱を集めた。５％トリ
クロル酢酸で洗浄し、遠心分離にて沈澱を集めＩＮ Ｎ
ａＯＨで溶解した後Ｌｏｗｒｙ法によって定量した。蛋
白質量は牛血清アルブミンに換算して示した。
し、３７℃４８時間通気量０．５１２／分回転数４００
ｒｐｍで培養した。培養終了後、培養物に等量の０゜２
ＮＮａＯＨを加え攪拌後１００００ｒｐ＋ｉ Ｘ ５分
遠心分離処理して菌体を除き、上清１００ａ＋Ｑに等量
の１０％トリクロル酢酸を加え１０分抜機０００ｒｐ＋
ｍ Ｘ １０分間遠心分離して沈澱を集めた。５％トリ
クロル酢酸で洗浄し、遠心分離にて沈澱を集めＩＮ Ｎ
ａＯＨで溶解した後Ｌｏｗｒｙ法によって定量した。蛋
白質量は牛血清アルブミンに換算して示した。
その結果、菌体外に生産された蛋白質量は７ｇ／ｆｌで
あった。
あった。
Claims (1)
- 菌体外に著量の蛋白質を生産するが、蛋白質分解酵素を
菌体外に生産しないバチルス・ｓｐＨ０２３。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20515486A JPS6363375A (ja) | 1986-09-02 | 1986-09-02 | 新規バチルス・ｓｐＨ０２３ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20515486A JPS6363375A (ja) | 1986-09-02 | 1986-09-02 | 新規バチルス・ｓｐＨ０２３ |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6363375A true JPS6363375A (ja) | 1988-03-19 |
| JPH0586183B2 JPH0586183B2 (ja) | 1993-12-10 |
Family
ID=16502312
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20515486A Granted JPS6363375A (ja) | 1986-09-02 | 1986-09-02 | 新規バチルス・ｓｐＨ０２３ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6363375A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101962401A (zh) * | 2010-09-01 | 2011-02-02 | 浙江大学 | 一种多肽菌素及其制备与应用 |
-
1986
- 1986-09-02 JP JP20515486A patent/JPS6363375A/ja active Granted
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101962401A (zh) * | 2010-09-01 | 2011-02-02 | 浙江大学 | 一种多肽菌素及其制备与应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0586183B2 (ja) | 1993-12-10 |
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