JPS63503141A - 動物の生殖機能の調節方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 動物の生殖機能の調節方法 本発明は動物、特に雌動物、における生殖機能を調節する方法、ならびにこの種 の方法で使用するための動物用薬剤組成物に関する。

種々の方法で雌動物における生殖機能を調節することは従来技術分野で知られて いる。プロスタグランジン、妊馬血清性ゴナドトロピン（性腺刺激ホルモン）、 メラトニンなどの合成および天然産物が動物の生殖機能調節のために提案された 。しかしながら、この種の処置は雌動物の排卵を誘発または増強するのに限界が あることが判明した。

従来技術において知られた１つの処置に、ブタ卵胞刺激ホルモン（Ｐ−ＦＳＨ） を配合した製剤による動物の処置が含まれる。この処置は効果的であることが証 明されたが、比較的高い投与量を使用する必要があり、従って費用がかかり、ま た過剰刺激による合併症（例えば卵巣の損傷、全身性浮腫および癒着）へ導き、 その後の受精能を損う恐れがあると分かった。さらに、その後に発生する胚の質 に問題があることが判明し、生育できない胚がしばしば高い比率で発生すること が見出された。

それ故に、本発明の目的は従来技術に関連した問題点の１つまたはそれ以上を克 服もしくは少な（とも軽減することである。

従って、本発明の第一の面によれば、有効量の反別動物卵胞刺激ホルモン（以下 で定義する）を雌動物に投与することから成る、雌動物の排卵を誘発または増強 する方法が提供される。

本明細書中で用いる“卵胞刺激ホルモン”なる用語は、天然または合成の卵胞刺 激ホルモン、その誘導体もしくはそのための生物学的前駆体を意味する。

本明細書中で用いる“生物学的前駆体”なる用語は、動物において卵胞刺激ホル モン様の活性を示す全ての化合物を意味する。

卵胞刺激ホルモンはヒツジ、ヤギまたはウシ卵胞刺激ホルモンでありうる。性的 に未成熟な動物から分離された卵胞刺激ホルモンが好適である。処置すべき動物 はヒツジ、ヤギ、ウシ、シカ、イヌ、ネコ、ブタなどから選ばれる。

雌動物を処置する方法はいずれの適切なタイプのものであってもよい。その処置 は経口、注射、挿入または類似の方法でありうる。従って、卵胞刺激ホルモンは 単位剤形で供給され、経口剤形、注射用側形または挿入用剤形であり得る。卵胞 刺激ホルモンは凍結乾燥された形のものであってもよい。

卵胞刺激ホルモンはポリペプチドである卵胞刺激ホルモンをコードする遺伝子の クローニングおよび原核または真核生物によるその発現を含めた天然または合成 供給源から供給され、またその製剤も使用することができる。

卵胞刺激ホルモンは反別動物の下垂体から抽出される。

ヒツジの下垂体が使用され、子ヒツジの下垂体が好適である。ウシの下垂体も使 用でき、子ウシの下垂体が好適である。ヤギの下垂体も使用でき、子ヤギの下垂 体が好ましい。子ヒツジの下垂体から分離されたヒツジ卵胞刺激ホルモンは、他 のものよりも驚くほど効果的であることが見出された。

驚いたことに、反別動物卵胞刺激ホルモンはＰ−ＦＳＨによる処置を含めた他の 処置に比べて改良された収率で卵をもたらすことが判明した。その収率は大体５ ０％またはそれ以上に増加しうる。さらに、反別動物卵胞刺激ホルモンにより誘 発された卵から発生した胚は従来技術の処置に比べて品質が向上しており、しか も処置動物の卵巣に対する損傷が罵くほど軽減されることが分かった。

このようにして発生した胚は生存能力の向上により特徴づけられる。

使用すべき反別動物卵胞刺激ホルモンの量は、処置すべき動物の種類および達成 すべき生殖機能により変化するであろ５゜従って、本発明は、その好適な態様に おいて、雌動物に有効量の反物動物卵胞刺激ホルモン、その誘導体またはそのた めの生物学的前駆体を、排卵の増加を誘発するに足る期間の間投与することから 成る、雌動物の排卵中に生ずる卵の数を増加させる方法を提供する。

それぞれの投与量は約４〜３０■の範囲でありうる。

その処置は１回の投薬から成るもの、または１〜１０日間継続するものでありう る。投与量の選択は処置すべき動物の大きさ、年齢および種により左右される。

処置期間にわたって投与量を減らすことが適当であると判明した。ヒツジの場合 は、約３〜１ｏｍｇ７日から約０．４〜２ｍ９／日へ次第に低減する投与量を１ 〜４日間にわたり投与することが適当な投薬療法であると分かった。ウシの場合 は、増強された投薬療法が使用される。

投与量の選択はまた卵胞刺激ホルモンの供給源により影響される。上記の投与量 範囲は動物から摘出した下垂体からの分離を含む天然源から分離されたＦＳＨに 関するものでちる。この種の”天然″ＦＳＨは高レベルの不純物を含むことがあ る。より高純度のＦＳＨ（例えば、合成経路により製造されたＦＳＨ）は実質的 に低減した投与量で投与される。例えば約８０〜６００μ２の投与量が使用され る。

本発明のこの面の好適な態様では、約１〜２０■の反別動物卵胞刺激ホルモンで 雌ウシを処置することから成る、雌ウシに双子を生ませるべ（排卵を増加させる 方法が提供される。

この処置は１回の投薬から成り５る。投与量は次第に低減する量で与えることも でき、この処置は約１〜４日間にわたって継続する。

好適な態様では、その投薬療法は約１〜１０ｍ９７日のヒツジ卵胞刺激ホルモン を１日に１〜５回投与することを包含する。驚いたことに、ウシにおいては反物 動物卵胞刺激ホルモン（好ましくはヒツジＦＳＨ）を利用することにより、双子 の出産が比較的一定した基準で誘発されることが見出された。双子の形成はウシ の生産において理想的であることが理解されるであろう。−頭の子ウシの生産は 資源の非効率的な利用法であり、またその反面、３個以上の排卵およびそれに従 う胚の発生は往々にしてウシに奇形および／または自然流産をもたらすであろう 。好ましくは、処置されるウシは性的に成熟したウシである。

本発明のこの面の別の態様では、思春期直前の雌動物に有効量の反別動物卵胞刺 激ホルモンを排卵を誘発するに足る期間にわたり投与することから成る、上記雌 動物の排卵を誘発する方法が提供される。反別動物卵胞刺激ホルモンはヒツジＦ ＳＨでありうる。

使用するヒツジ卵胞刺激ホルモンの量は約１〜２０ｍｇ、好ましくは７〜９ｒｎ ９の範囲である。思春期直前の動物は１回の投与量で処置されるか、あるいは約 １〜５日間にわたって次第に低減する投与量で処置される。

好適な態様では、双子の形成またはその他のために排卵を誘発または増加させる 方法は、動物を有効量の同時性薬剤（ｓ７１ｎｃｈｒｏｎｉｓｉｎｇ　ａｇｅ− ｒｓｔ　）で処置する予備段階を包含する。同時性薬剤はそれ自体知られた薬剤 の中から選択される。その薬剤はプロゲスタゲン、プロスタグランジン、プロス タグランジン類似体などでありうる。

商標名クロノゲスト［Ｃｈｒｏｎｏ（Ｈｓｔ　；　Ｉｘｔａｒｖｇｔ社（オース トラリア）から入手可能〕およびレブロマツプ［Ｒａｐｒｏｍａｐ　：　Ｕｐｊ ｏｈｔｓ　Ｐｔｙ、　Ｌｔｄ、から入手可能〕腟内スポンジとして市販されてい る同時性薬剤がヒツジやヤギに好適であることが分かった。商標名ニストルメイ ト（Ｅｓｔｒｓｍａｔａ　：　ＩＣＩ　Ａｕ５ｔｒａｌｉａ　Ｌｔｄ、から入手 可能〕として市販されている同時性薬剤はウシに適していることが判明した。

同時性薬剤または類似物による予備処置は、反契動物卵胞刺激ホルモンによる処 置の開始に先立って、所定の間隔で着手される。同時性薬剤による処置はＦＳＨ 処置の約８〜１５日前に開始できる。

ヒツジＦＳＨ処置と組み合わせた同時性薬剤処置は、生後約１０ケ月の思春期直 前の雌ウシの排卵を誘発させるのに効果的であることが見出された。

好ましくは、約２５０μ２〜約１００〜の同時性薬剤がヒツジ卵胞刺激ホルモン 処置の開始の約８〜１５日前に思春期直前の動物に投与される。同時性薬剤によ る処置は必要に応じて適当な間隔をおいて繰り返すことができる。

“ニストルメイト”のような注射用の同時性薬剤によるウシの処置においては、 約５００〜１０００μＶの同時性薬剤を使用することが好ましい。

ルプロマツプ”や１クロノゲスト”のような腟内スポンジ型の同時性薬剤による ヒツジおよびヤギの処置においては、約２５〜７５Ｉｎ９の同時性薬剤を使用す ることが好ましい。

より好適な態様では、双子の形成またはその他のために排卵を誘発または増加さ せる方法は、ヒツジＦＳＨ処置の期間中に又はその後に有効量の黄体形成薬剤で 動物を処置する別の段階を包含する。黄体形成薬剤はプロスタグランジンまたは プロスタグランジン類似体でありうる。黄体形成薬剤は先に述べた同時性薬剤と 同じものであっても、異なるものであってもよい。

好ましくは、黄体形成薬剤はプロスタグランジンまたはプロスタグランジン類似 体であり、反別動物卵胞刺激ホルモン処置の開始の約１〜３日後に約２５０〜１ ０００μグの量で投与される。

さらに好適な態様では、排卵を誘発または増加させる方法は動物に有効量のゴナ ドトロピンまたはその誘導体を投与する別の段階を包含しうる。

いくつかの試鋏において２０％程度の動物が反側動物ＦＳＨ処置の実施に対して 応答しないことが判明した。

しかし、比較的少量のゴナドトロピンまたはその誘導体でさらに処理すると、応 答しない動物の数が実質的に減少することが今や判明した。

妊馬血清性ゴナドトロピン（ＰＭＳＧ）を使用することができる。オーストラリ ア国仮特許出願第ＰＨ８４８２／８６号に記載される型の妊馬血清性ゴナドトロ ピンが適当であると分かった（上記特許文献の全記載内容は参照によりここに引 用される）。より好ましくは、ここに記載のそれから誘導されるモノクローナル 抗体が使用される。Ｐ　ｌｖｌ　Ｓ　Ｇはウマ絨毛性ゴナドトロピン（ａｃＧ） とも呼ばれている。

ゴナドトロピンまたはその誘導体は約１００ｊｕ〜１０００ｉｕ、好ましくは５ ００　ｉｓの量で投与される。

ゴナドトロピンはヒツジＦＳＨ処置の前または間のどの時点で投与してもよい。

好ましくは、ゴナドトロピン処置はヒツジＦＳＨ処置の第１日月に開始される。

本発明の別の面では、有効量の反別動物卵胞刺激ホルモンを含有する動物用薬剤 組成物が提供される。反別動物卵胞刺激ホルモンはヒツジ卵胞刺激ホルモンであ りうる。

ヒツジ卵胞刺激ホルモンまたはその誘導体は凍結乾燥された形で供給される。本 発明の動物用薬剤組成物はさらに獣医学的に許容される担体または希釈剤を含有 できる。担体または賦形剤は卵胞刺激ホルモンまたはその誘導体のための溶剤で あり得、水性溶剤が使用される。動物用薬剤組成物は注射可能な剤形で供給され てもよい。

本発明のこの面の好適な態様では、有効量のゴナドトロピンまたはその類似体を さらに含有する動物用薬剤組成物が提供される。

好適な態様では、本発明は凍結乾燥形のヒツジ卵胞刺激ホルモンの供給物を適当 な容器に収納してなるキットを提供する。そのキットはさらに適当な容器中の同 時性薬剤の供給物を包含しうる。ヒツジ卵胞刺激ホルモン、ゴナドトロピン、お よび（存在する場合の）同時性薬剤は注射可能な剤形で供給することができる。

さて、本発明は以下の実施例に関してより詳しく説明されるであろう。しかしな がら、以下の記載は単に例示するためのものであって、上記本発明の一般性を何 ら制限するものでないことを理解すべきである。

ヒツジ卵胞刺激ホルモン（０−ＦＳＨ）を次のようにして調製した： 凍結した子ヒツジ全下垂体を粉砕し、蒸留水（ｐＨ５，５）で−晩抽出した。得 られたＦＳＨに富む抽出物を１．８０Ｍ硫酸アンモニウム（ｐＨ４，０）で連続 的に分別して不活性タンパク質を除去し、そして３．０Ｍ硫ｆｊｌアンモニウム （ｐＨ４，０）でＦＳＨを沈澱させた。そのＦＳＨ調製物をＮαＯＨで中和し、 蒸留水に対して透析し、その後凍結乾燥した。この方法の全工程は５℃の低温室 で実ヒツジ卵胞刺激ホルモン（０−ＦＳＨ）’ｌ使用してヒツジに対して実地試 験を行った。ヒツジは以下の処置療法を用いて処置した： ヒツジのＦＳＨ療法 ４日間（午前と午後）にわたって８回の注射’＆４：３：２：１の比の次第に低 減する量で行った。

例えば、合計８１’９：１日目　−午前　１．６−午後　１．６ ２日目　−午前　１．２ 一午後　１．２ ３日月　−午前　０．８ 一午後　０．８ ４日目　−午前　０．４ 一午後　０．４ 処置計画 １日日−レプロマツプ１スポンジの挿入１０日日月ＦＳＨ注射の１日目（午前／ 午後）１１日日月ＦＳＨ注射の２日目（午前／午後）１２日日月−スポンジを取 り出す；　ＦＳＨ注射の３日目（午前／午後） １３日日月ＦＳＨ注射の４日目（午前／午後）畳腟内スポンジ（メトロキシプロ ゲステロンアセテ−）６０ｍ９） 市販のＰ　−ＦＳＨ（メルボルンのＢ　Ｓ　Ｓ　ＥＸ／Ｈｅ　ｒ　ｉ　ｏ　ｔか ら入手可能）で処置した雌ヒツジとの比較を含む３回の実地試験の結果を以下の 表１．２および３に示す。

表１ ８　８　７　４．２５１−１９ ２８６１．２１−２ 製剤　４６５１．２１−２ 畳　排卵したヒツジの排卵数 試験２　任意交配メリノ種 ８’　８　６　５．８３１−１４ ヒツジ　４　９　９　１．３３１−２ ＳＨ ２９９１，６７１−３ ０８８１，２５１−２ ８８７３，７１１−１１ Ｐ−ＦＳＨ４８８１，３８１−２ ０８８１，２５１−２ 畳　排卵したヒツジの排卵数 表　３ ヒツジ　１２＋　１２　１１　１０．２　２−２３５Ｈ Ｐ−ＦＳＨ１Ｂ＋　６　６　４．３　１−６畳　排卵したヒツジの排卵数 ＋　この実地試験ではスポンジ挿入の１０日後にＦＳＨを３日間にわたり午前と 午後に投与した。

注射した０−ＦＳＨの量は３．３．２．２．１．１ｍｇであり、注射したＰ−Ｆ ＳＨの量は４．４．３．３．２．２■であった。

実施例３゜ ヒツジにおいてＰ−ＦＳＨと対照的に０−ＦＳＨを用いた場合に優れた結果が得 られた。しかしながら、０−ＦＳＨまたはＰ−ＦＳＨを用いてもヒツジの２０％ までは排卵しなかった。この問題はＦＳＨ処置と共に少量のＰＭＳＧを用いるこ とにより解決され、その結果１００％のヒツジが排卵に成功した。Ｆ　Ｍ　Ｓ　 Ｇは好ましくはオーストラリア国仮特許出願第ＰＨ８４８２７８６号に記載され るものであるが、市販製剤のホリゴン（Ｆｏｌｌｉ−ｇｏｎ　；メルボルン、Ｉ ｎｔｇｒｖｅｔ社）も使用できる。０−ＦＳＨはＦＭＳＧと併用したときＰ−Ｆ ＳＨよりもかなり優れていることが証明された。

実地試験はヒツジ卵胞刺激ホルモン（０−ＦＳＨ）およびＰＭＳＧを用いてヒツ ジに対して行った。

ヒツジは以下の処置療法により処置した：ヒツジのＱ−ＦＳＨ療法 ３日間（午前と午後）にわたって３：２：１の比の次第に低減する量で注射を行 った。

例えば、合計１２ダニ　１日月−午前３−午後３ ２日日−午前２ 一午後２ ３日月−午前１ １白目−クロノゲスト１スポンジの挿入（３０ｍ９）１０日日月ＰＭＳＧ　５０ ０　ｉＳ　；　ＦＳＨ注射の１日目（午前／午後） １１日日月ＦＳＨ注射の２日目（午前／午後）１２日日月スポンジを取り出す； 　ＦＳＨ注射の３日目（午前／午後） １３日月−午後に内視鏡による人工授精１９／２０日日−卵巣から胚を取り出す 骨　腟内スポンジ（フルゲストンアセテート３０ｍ９）服、“　の　Φ　− の　へ　−へ 試験４についての考察 １、　０−ＦＳＨの場合は新鮮な精液の使用により受精率９５％。

２、　０−Ｆ’；Ｈを使用した場合はすべてにおいて卵巣の解剖学的構造が変わ らないが、Ｐ−ＦＳＨを使用した場合は卵巣がゆがんでおり、解剖学的所見は正 常でなかった。

３、Ｐ−ＦＳＨを使用したときは少量のＦＭＳＧを併用しても、まだ２０％の雌 ヒツジが排卵しなかった。

０−ＦＳＨを使用したときはメリノ種または英国種にかかわりなく１００％のヒ ツジが排卵した。

４、処置したメリノヒツジについて、０−ＦＳＨとＰ−ＦＳＨを使用した場合で は０−ＦＳＨを使用した方が５０％多い胚が得られた。

５、異なる品種は異なる応答を与えた。Ｐ−ＦＳＨを特に英国種に使用すると、 極めて貧弱な応答が観察された。

表６ ヒツジ　１２　１０　１０’　１３．６　６−１９ヒツジ　１２　１１　１１　 １０．２　４−２１ＳＨ ＰＭＳＧ　１５　１２　１２　１１．４６−２０肴　排卵したヒツジの排卵数 ＋　注射した０−ＦＳＨの量は３．３．２．５．２．５．２．２ｍｇであった。

１、　０−ＦＳＨの用量を増すと、メリノ種および英国種の両方のヒツジの排卵 数がわずかに増加した。

２、卵巣の解剖学的構造は良好であった。

実施例４゜ ヒツジ卵胞刺激ホルモン（０−ＦＳＨ）を使用してヤギについての実地試験を行 った。ヤギは以下の処置療法を用いて処置した： ３日間（午前／午後）にわたり３：２：１の比の次第に低減する量で注射を行っ た。

合計１２ｍ９：　１日月−午前３ −午後３ ２日月−午前２ 一午後２ ３日月−午前１ １日月−クロノゲストスポンジの挿入（４０ｍ？）１６日日月グループ６ａ：Ｐ ＭＳＧなし；　ＦＳＨ注射のグループ６ｂ　：ＰＭＳＧ４００ｉｕ　；１日目（ 午前／午後） １７日日月ＦＳＨ注射の２日目（午前／午後）１８日回目−ポンジを取り出す； 　ＦＳＨ注射の３日目（午前／午後） ２０日回目−視鏡による人工授精または自然交配２６日目−リｐ１ｂ・ら月ｈｔ 　Ｎ２’ｌ　’可表７ ヒツジ　１２　２１　１４　１２．７　１−３３ヒツジ　１２　９　９　１０． ２４−２０骨　排卵したヤギの排卵数 同様の体重および年齢のヤギにＰ−ＦＳＨ１５〜およびＰＭＳＧ４００ｉｕを投 与した際に、他の研究者は３〜８個の排卵を得たにすぎなかった。

試験６ａおよび６ｂについての考察 １、ＰＭＳＧｌｏ−ＦＳＨの使用はヤギにおいて１００％の排卵率をもたらした 。

２、卵巣の解剖学的構造は変化なし−Ｐ−ＦＳＨの場合は重大な問題あり。

３．０−ＦＳＨの場合は新鮮な精液の使用により受精率についての実地試験を行 った。ウシは４日間（午前と午後）にわたり４：３：２：１の比の次第に低減す る量で８回注射することにより０−ＦＳＨで処置した。

処置計画 発情周期は１１日の間隔でプロスタグランジン類似体〔ニストルメイトＣＥｓｔ ｒｗｍａｔａ　）　、　ＩＣ１社〕５００μ？を２回筋肉内注射することにより 同時性をもたせた。その後に続く周期の８〜１０日目に日月は４日間のＦＳＨ処 置（９時および１４時に１日当たり２回の皮下注射）を開始し、その際ＦＳＨの 合計用量は４日間にわたり４：３：２：１の次第に低減する比で投与した。ＦＳ Ｈ注射の３日目の朝にプロスタグランジン類似体を再び注射した。

排卵率は発情の４〜６日後にバルビッール酸塩（（よる麻酔下で腹腔鏡検査法に より評価するか、または胚を非外科的に卵巣から取り出し評価した。

０−ＦＳＨおよびＰ−ＦＳＨにより誘発される過剰排卵について米産のへレフ万 一１程雌ウシ（３才）で実地試験を行った。

ヒツジＦＳＨ０６６１，０１−１ １０６６２，３１−４ ３０７７１３，７１０−Ｉ Ｐ−ＦＳＨＯ６６１，０１−１ １０６６１，２１−２ ３０７７７，９１−１９ 試験７についての考察 １）Ｏ−ＦＳＨ３０ｍ９に対して優れた過剰排卵応答があった。

２）０−ＦＳＨを使用した場合は非常に均質な排卵応答があり、しかも卵巣の過 剰刺激が見られない。しかしながら、Ｐ−ＦＳＨの場合は両方に問題があった。

本発明による思春期直前の動物の排卵を誘発させる方法を例示するために実地試 験を行った。

処置計画 （α）　１１日の間隔でニストルメイトを２回注射する。

（６）　発情後８日目に０−ＦＳＨの注射（１日に２回、４日間）を開始する。

（ｃｌ　Ｏ−Ｆ　Ｓ　Ｈ処置の３日目の朝にニストルメイトを再び投与する。

（ｄ）発情後７日目に腹腔鏡検査法により排卵を調べるか、試験８ ヒツジＦＳＨの効力について思春期直前の雌ウシ（生後１０ケ月）で実地試験を 行った。

０−ＦＳＨ８８８６，９１−１４ 表９８（デキスタ一種ウシ ０−ＦＳＨ２０２２１４，６１３−１６若い雌ウシに対する類似の結果は、他の 研究者がｐ−ＦＳＨを使用した場合に得られなかった。

実施例６゜ ０−ＦＳＨ？：用いたウシの双子形成誘発本発明による雌ウシの双子形成誘発方 法を例示するためにヘレフオード種の雌ウシ（３才）で実地試験を行った。

処置計画 実施例５と同じ。

０−ＦＳＨ注射方法 ４：３：２：１の比の次第に低減する量で４日間（午前、午後）にわたり注射し た。

合計８ｍ９：　１日月−午前１．６ −午後１．６ ２日月−午前１．２ 一午後１．２ ３日月−午前０．８ 一午後０．８ ４日月−午前０．４ 一午後０．４ ４１３頭のウシのみが４個の排卵を有していた。

類似の結果は他の研究者がＰ−ＦＳＨを使用した場合に得られなかった。

ウシの双子形成誘発のための０−ＦＳＨ処置の単純化排卵率の緩和な上昇を誘発 するためのＦＳＨ処置療法を３通り実施した。標準療法（ニストルメイト注射の ４８時間前に開始して、４日間にわたり８回の注射）と、２通りの２４時間療法 （ニストルメイト注射の前または注射時に開始）とを比較した。使用したウシは 混合遺伝子型であり、その年齢は２〜３才であった。

発情周期の１０日日月ＦＳＨ処置を開始する。

Ａ、標準方法一実施例６に記載した通り。

Ｂ１周期の１１日目上９時、１５時、２１時におよび周期の１２日日月３時に。

Ｃ０周期の１２日日月９時、１５時、２１時におよび周期の１３日日月３時に。

処置群Ａ、ＢおよびＣに対して周期の１２日日月ニストルメイトを９時に注射し た。

処置群ＢおよびＣに対しては０−ＦＳＨを２　ｍ、９の等量７４回注射した。

実施例５と同じ。

試験１０ ウシの入子形成誘発のための０−ＦＳＨ注射方法ｉＨ’　”” ＋１　ｘ　ト（ｈ　： 試験１０についての考察 １．３通りの０−ＦＳＨ処置はすべて類似した結果を生じた。

２、標準療法（４日間にわたり８回注射）は２〜３個の排卵誘発に必要とされる よりもかなり複雑である。

８ｒｎ９の標準用量および４日間で８回の注射方法を使用する双子形成誘発に対 するウシの体重および年齢の重要性を評価するために、多数の実地試験を行った 。

ヘレフオード種のウシ：０−ＦＳＨ８ｒｎ９年齢２才　８　８　６．９　１−１ ４ ３才　１９　１９　２．４２　１−９ 体重の影響 ヘレフオード種のウシ：Ｏ−ＦＳＨ８ｍ９表１３ 年齢４才　４５１　１２　２．９” ３才　４２０　８　３．４畳 ２才　２６６　８　９．５” 試験１１および１２についての考察 双子形成を達成させるために、年齢および体重を考慮しながら０−ＦＳＨｆｉｊ （を注意深（計算する必要がある。

畳　これらの処置群の９０％のウシは妊娠していると診断された。

最後に、いろいろな修飾および／または変更がここに概略した本発明の精神から 逸脱することなくなし得ることを理解すべきである。

国際調査報告 ７１ｎｍＡＩｌｌｅｆｉ＆ｌＡ＠１１ｆｌＵａ）ｌａ、ＰＣｒ／Ａｌ二１８７１ ００１２３λ中任Ｘ’ＩＯ−侶ｐの１ｍα０Ｌ都λにΣ田ワ？ｆｌＲＩ’Ｇｉｍ α０Ｌλ阿Ｌπ請ｆｆＴＧＩ　Ｎつ、心入υ　７ＡＩＩＩ５フ３２７／８６　Ｆ Ｒ２５８１５４４Ｇ１１　２１７４６００ＡＵ　１９７９０／６７　圏　６９６ ７８０　ＣＡ　９１８０６７　部　１６１７４５０ＧＢ　１１６１８３６　ＮＬ 　６７０４９５フ

Claims (33)

【特許請求の範囲】
1. １．雌動物に有効量の反芻動物卵胞刺激ホルモン（前記定義通り）を投与するこ とから成る、雌動物の排卵を誘発または増加させる方法。
2. ２．反芻動物卵胞刺激ホルモンはヒツジ卵胞刺激ホルモンである、請求の範囲第 １項記載の方法。
3. ３．ヒツジ卵胞刺激ホルモンはヒツジ卵胞刺激ホルモンまたはその断片をコード する遺伝子のクローニングおよび原核または真核生物によるその発現から作られ た合成卵胞刺激ホルモン、その誘導体またはそのための生物学的前駆体を包含す る、請求の範囲第２項記載の方法。
4. ４．雌動物に有効量の反芻動物卵胞刺激ホルモン（前記定義通り）を卵の数を増 加させるに足る時間にわたって投与することから成る、雌動物の排卵中に生ずる 卵の数を増加させる方法。
5. ５．ヒツジ下垂体から分離したとツジ卵胞刺激ホルモンを約４〜３０ｍｇの量で 投与する、請求の範囲第４項記載の方法。
6. ６．投薬療法はヒツジ卵胞刺激ホルモンを約３〜１０ｍｇ／日から約０．４〜２ ｍｇ／日へ次第に低減する量で３〜４日間にわたり投与することを含む、請求の 範囲第５項記載の方法。
7. ７．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の開始に先立つて、予め定あられた間隔て有 効量の同時性薬剤を雌動物に投与することから成る予備段階をさらに含む、請求 の範囲第４項記載の方法。
8. ８．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の開始の約８〜１５日前に約２５０μｇ〜１ ００ｍｇの同時性薬剤を動物に投与する、請求の範囲第７項記載の方法。
9. ９．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の前、間または後に有効量の黄体形成薬剤を 動物に投与する段階をさらに含む、請求の範囲第４項記載の方法。
10. １０．黄体形成薬剤はプロスタグランジンまたはプロスタグランジン類似体であ り、反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の開始後約１〜３日目に約２５０μｇ〜１０ ００μｇの量を投与する、請求の範囲第９項記載の方法。
11. １１．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の間または前に有効量のゴナドトロピンま たはその誘導体を動物に投与する段階をさらに含む、請求の範囲第４項記載の方 法。
12. １２．ゴナドトロピンは妊馬血清性ゴナドトロピンであり、反芻動物卵胞刺激ホ ルモン処置の第１日目に約１００〜１０００ｉｕのゴナドトロピンを動物に投与 する、請求の範囲第１１項記載の方法。
13. １３．反芻動物下垂体から分離した約１〜２０ｍｇの反芻動物卵胞刺激ホルモン （前記定義通り）を雌ウシに投与することから成る、雌ウシに双子を出産される べく排卵を増加させる方法。
14. １４．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の開始に先立って、予め定められた間隔で 有効量の同時性薬剤を動物に投与することから成る予備段階をさらに含む、請求 の範囲第１３項記載の方法。
15. １５．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の前、間または後に有効量の黄体形成薬剤 を動物に投与する段階をさらに含む、請求の範囲第１３項記載の方法。
16. １６．その投薬療法は約０．８〜４ｍｇ／日から約０．２〜１ｍｇ／日へ次第に 低減する量のヒツジ卵胞刺激ホルモンを３〜４日間にわたり投与することを含む 、請求の範囲第１３項記載の方法。
17. １７．その投薬療法は約１〜１０ｍｇ／日のヒツジ卵胞刺激ホルモンを１日の間 に１〜５回投与することを含む、請求の範囲第１３項記載の方法。
18. １８．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の前、間または後に有効量の黄体形成薬剤 を動物に投与する段階をさらに含む、請求の範囲第１７項記載の方法。
19. １９．思春期直前の雌動物に有効量の反芻動物卵胞刺激ホルモン（前記定義通り ）を排卵を誘発するに足る期間にわたり投与することから成る、思春期直前の雌 動物の排卵を誘発させる方法。
20. ２０．思春期直前の動物はヒツジ下垂体から分離したヒツジ卵胞刺激ホルモン約 １〜２０ｍｇで処置される、請求の範囲第１９項記載の方法。
21. ２１．その投薬療法は約２〜４ｍｇ／日から約０．５〜１ｍｇ／日へ次第に低減 する量のヒツジ卵胞刺激ホルモンを３〜５日間にわたり動物に投与することを含 む、請求の範囲第２０項記載の方法。
22. ２２．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の開始に先立って、予め定められた間隔で 有効量の同時性薬剤を動物に投与する予備段階をさらに含む、請求の範囲第２１ 項記載の方法。
23. ２３．約２５０μｇ〜１００ｍｇの同時性薬剤をヒツジ卵胞刺激ホルモン処置の 開始の約８〜１５日前に動物に投与する、請求の範囲第２２項記載の方法。
24. ２４．反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の前、間または後に有効量の黄体形成薬剤 を思春期直前の動物に投与する段階をさらに含む、請求の範囲第２３項記載の方 法。
25. ２５．黄体形成薬剤はプロスタグランジンまたはプロスタグランジン類似体であ り、反芻動物卵胞刺激ホルモン処置の開始後約１〜３日目に約２５０μｇ〜１０ ００μｇの量を投与する、請求の範囲第２４項記載の方法。
26. ２６．有効量の反芻動物卵胞刺激ホルモン（前記定義通り）およびそのための有 効量の獣医学的に許容される担体または希釈剤を含有する動物用薬剤組成物。
27. ２７．その薬剤組成物は注射可能な剤形であり、有効量の凍結乾燥されたヒツジ 卵胞刺激ホルモンとそのための有効量の水性溶剤を含有する、請求の範囲第２６ 項記載の動物用薬剤組成物。
28. ２８．有効量の反芻動物卵胞刺激ホルモンおよびそのための有効量の獣医学的に 許容される担体または希釈剤を含有する、雌動物の排卵を誘発または増加させる ために使用する動物用薬剤組成物。
29. ２９．適当な容器中の凍結乾燥された反芻動物卵胞刺激ホルモン（前記定義通り ）の供給物；および適当な容器中の水性溶剤の供給物を包含するキツト。
30. ３０．反芻動物卵胞刺激ホルモンはヒツジ卵胞刺激ホルモンである、請求の範囲 第２９項記載のキット。
31. ３１．適当な容器中の同時性薬剤の供給物をさらに含む、請求の範囲第３０項記 載のキット。
32. ３２．適当な容器中の黄体形成薬剤の供給物をさらに含む、請求の範囲第３０項 記載のキット。
33. ３３．適当な容器中のゴナドトロピンまたはその誘導体の供給物をさらに含む、 請求の範囲第３０項記載のキット。