JPS6332361A - 電気泳動装置 - Google Patents
電気泳動装置Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、電気泳動装置に係り、特にたん白質等の荷電
物質を分離精製するのに好適な電気泳動装置■こ関する
ものである。
物質を分離精製するのに好適な電気泳動装置■こ関する
ものである。
従来の装置としては、例えば、化学協会４９巻１２号（
１９８５年１２月）９５４頁に記載されている無担体電
気泳動装置がある。この装置は第５図、第６図に示すよ
うな構造を有する。荷電物質の分離が行われる泳動室４
内に荷電物質を含んだ溶液を矢印乙の方向に循環ポンプ
２０１こより強制的に循環流れを形成させる。
１９８５年１２月）９５４頁に記載されている無担体電
気泳動装置がある。この装置は第５図、第６図に示すよ
うな構造を有する。荷電物質の分離が行われる泳動室４
内に荷電物質を含んだ溶液を矢印乙の方向に循環ポンプ
２０１こより強制的に循環流れを形成させる。
次に外部から荷電物質を含んだ溶液を連続的に泳動室４
へ供給しながら、陰、陽電極板５，６間に直流電圧を印
加すると荷電物質は上部抜き出し口１０および循環用出
口１１付近に集まり、それぞれを取出すことにより荷電
物質を分離することができる。
へ供給しながら、陰、陽電極板５，６間に直流電圧を印
加すると荷電物質は上部抜き出し口１０および循環用出
口１１付近に集まり、それぞれを取出すことにより荷電
物質を分離することができる。
この装置では泳動室４内の溶液の流れは荷電物置の分離
には重要な要因となり、その形態は押し出し流れに近け
れば近い程分離性能は高くなる。
には重要な要因となり、その形態は押し出し流れに近け
れば近い程分離性能は高くなる。
そのため泳動室４内中央部には、荷電物質が通過できる
目開きを有する膜（以下仕切り膜と呼ぶ）８を設け、こ
の仕切り膜８により溶液の流れの安定化を図っている。
目開きを有する膜（以下仕切り膜と呼ぶ）８を設け、こ
の仕切り膜８により溶液の流れの安定化を図っている。
上記従来技術は、泳動室の容積が小さ曵荷電物質の処理
ユが少ない場合には泳動室内の溶液の流れが押し出し流
れに近い状態となり、荷電物質の分離が効果的に行われ
る。一方従来装置において荷電物質の処理量を大きくす
る場合、泳動室の容積を大きくする必要がある。ところ
が荷電物質特にたん白質、酸素等の物質の電気泳動移動
度は極めて小さいこと並びに印加電圧の関係上泳動室の
幅（電極間方向）は大きくすることは分離上種々問題が
多いため不可能であり、泳動室の奥いき方向に増加せざ
るを得ない。次にこのような構造を有する従来装置をス
ケールアップし、荷電物質の分離を行ったところ泳動室
内の溶液の流れに乱れが発生することがわかった。その
ため荷電物質の分離は極めて悪いという結果を得た。
ユが少ない場合には泳動室内の溶液の流れが押し出し流
れに近い状態となり、荷電物質の分離が効果的に行われ
る。一方従来装置において荷電物質の処理量を大きくす
る場合、泳動室の容積を大きくする必要がある。ところ
が荷電物質特にたん白質、酸素等の物質の電気泳動移動
度は極めて小さいこと並びに印加電圧の関係上泳動室の
幅（電極間方向）は大きくすることは分離上種々問題が
多いため不可能であり、泳動室の奥いき方向に増加せざ
るを得ない。次にこのような構造を有する従来装置をス
ケールアップし、荷電物質の分離を行ったところ泳動室
内の溶液の流れに乱れが発生することがわかった。その
ため荷電物質の分離は極めて悪いという結果を得た。
従来技術はこの点に関しては配慮がされておらず、装置
のスケールアップには問題があった。
のスケールアップには問題があった。
本発明の目的は、スケールアップを行っても分離性能の
低下が発生しない電気泳動装置を提供することにある。
低下が発生しない電気泳動装置を提供することにある。
上記目的は、電気泳動装置を、荷電物質を含む溶液の入
口と分離された荷電物質を含む溶液の抜出口とを有し、
かつ、溶液の流れに乱れを発生させない容積の泳動室と
、電極液の入出口を有し前ット連投したものとすること
により、達成される。
口と分離された荷電物質を含む溶液の抜出口とを有し、
かつ、溶液の流れに乱れを発生させない容積の泳動室と
、電極液の入出口を有し前ット連投したものとすること
により、達成される。
泳動室内での溶液の流れは押し出し流れに近い状態であ
り、したがって、荷電物質の分離性能は高いものとなる
。このような電気泳動ユニットを、荷電物質の処理量に
対応したユニット数選択することで、スケールアップを
問題なく図ることができる。また、荷電物質の処理量の
変化には、電気泳動ユニットのユニット数を堆載させる
ことで、容易に対応できる。
り、したがって、荷電物質の分離性能は高いものとなる
。このような電気泳動ユニットを、荷電物質の処理量に
対応したユニット数選択することで、スケールアップを
問題なく図ることができる。また、荷電物質の処理量の
変化には、電気泳動ユニットのユニット数を堆載させる
ことで、容易に対応できる。
以下、本発明の一実施例な第１図〜第４図により説明す
る。
る。
第１図において、ｌは電気泳動装置で、２．２’。
２′の電気泳動ユニットから構成されている。
形成されている。
各電気泳動ユニットの構造は、第２図〜第４図に示すよ
うに、電極室３．泳動室４からなり、電極室３と泳動室
４は半透膜７で隔離されている。
うに、電極室３．泳動室４からなり、電極室３と泳動室
４は半透膜７で隔離されている。
電極室３には陽電極板６．陰電極板５があり、また、電
極液人口１３．電極液出口１４がある。陽、陰電極室へ
供給する電極液は同一の液を使用し、その温度は冷凍器
（図示省略）で一定に保ち循環させて用いる。泳動室４
の中央部には荷電物質が通過できる程度の目開きを有し
た仕切り膜８があって泳動室４を二つに仕切っているが
、この仕切り膜８の上部には、仕切られた泳動室内溶液
が一方から他の泳動室へ移動するための開口部９が設け
である。また、泳動室４の下部には、外部に設けた循環
ポンプ１０に接続しである、泳動室内溶液の循環流れを
形成させるための循環用入口し、出口１１がある。各ユ
ニットの電気泳動装置の泳動室内溶液は循環用出口１１
から外部の集合器１５へ集まり、続いて循環ポンプ、分
散器１６を経て、各ユニットの電気泳動装置の循環用人
口丘から泳動室内へ供給され、泳動室内を矢印ｎの如く
移動し循環流れが形成される。試料は循環ポンプ頒と分
散器１６の途中のラインへ供給され、循環流れと一緒に
泳動室内へ供給される。一方、液の抜き出しは泳動室上
部に設置しである上部抜き出し口１０からと、集半透膜
７．仕切り膜８取付部からの液漏れを防く。
極液人口１３．電極液出口１４がある。陽、陰電極室へ
供給する電極液は同一の液を使用し、その温度は冷凍器
（図示省略）で一定に保ち循環させて用いる。泳動室４
の中央部には荷電物質が通過できる程度の目開きを有し
た仕切り膜８があって泳動室４を二つに仕切っているが
、この仕切り膜８の上部には、仕切られた泳動室内溶液
が一方から他の泳動室へ移動するための開口部９が設け
である。また、泳動室４の下部には、外部に設けた循環
ポンプ１０に接続しである、泳動室内溶液の循環流れを
形成させるための循環用入口し、出口１１がある。各ユ
ニットの電気泳動装置の泳動室内溶液は循環用出口１１
から外部の集合器１５へ集まり、続いて循環ポンプ、分
散器１６を経て、各ユニットの電気泳動装置の循環用人
口丘から泳動室内へ供給され、泳動室内を矢印ｎの如く
移動し循環流れが形成される。試料は循環ポンプ頒と分
散器１６の途中のラインへ供給され、循環流れと一緒に
泳動室内へ供給される。一方、液の抜き出しは泳動室上
部に設置しである上部抜き出し口１０からと、集半透膜
７．仕切り膜８取付部からの液漏れを防く。
パツキン機能をも有している。
次にこの装置を用いて荷電物質を分離した結果について
以下に説明する。
以下に説明する。
第１図に示す三つの電気泳動装置ユニットから構成する
電気泳動装置１を用い、たん白質の分離を行った。
電気泳動装置１を用い、たん白質の分離を行った。
たん白質としては、ミオグロビン（等電点ｐＩ＝６．８
）および牛血清アルブミン（ｐＩ＝４．７）の２種類を
用い、これらを０．０１Ｍ酢酸ナトリウム−酢酸バッフ
ァー（ｐＨ＝５．０）に各たん白質濃度が０．２５９／
ｌ となるように溶解したものを試料とした。電極液は
上記バッファーを用い、流量４００ｊ’／ｈ、温度を恒
温水槽にて１０℃と一定に保ち、陽、陰？４極室へそれ
ぞれ供給、循環させた。
）および牛血清アルブミン（ｐＩ＝４．７）の２種類を
用い、これらを０．０１Ｍ酢酸ナトリウム−酢酸バッフ
ァー（ｐＨ＝５．０）に各たん白質濃度が０．２５９／
ｌ となるように溶解したものを試料とした。電極液は
上記バッファーを用い、流量４００ｊ’／ｈ、温度を恒
温水槽にて１０℃と一定に保ち、陽、陰？４極室へそれ
ぞれ供給、循環させた。
次に各ユニブトの泳動室内１こ上記試料を充満させ、循
環ポンプ１０により泳動室内溶液を０．５ ！！／ ｈ
と一定流量にて強制循環させた。各ユニットへの試料供
給量は０．３６１！／ｈ、上部抜き出し量は０．１８Ｊ
／ｈ、下部抜き出し量は０．１８／’／ｈと一定で連続
的に操作した。続いて陽、陰電極５．６開場こ直流電圧
２００■を印加し、泳動室内溶液へ電場を与え、たん白
質の分離を行った。
環ポンプ１０により泳動室内溶液を０．５ ！！／ ｈ
と一定流量にて強制循環させた。各ユニットへの試料供
給量は０．３６１！／ｈ、上部抜き出し量は０．１８Ｊ
／ｈ、下部抜き出し量は０．１８／’／ｈと一定で連続
的に操作した。続いて陽、陰電極５．６開場こ直流電圧
２００■を印加し、泳動室内溶液へ電場を与え、たん白
質の分離を行った。
なお半透膜面積は３５０ｃｒｒＬ２．！ｌｌ１口部面相
は３．５α２である。
は３．５α２である。
抜き出し液中のたん白質の分析は、高速液体グロマトグ
ラフィ（カラム：東洋曹達（株）製ＴＳＫ−ＧＥＬ
Ｇ３０００ＳＷ）を用いて測定を行うた。表１にその結
果を示す。
ラフィ（カラム：東洋曹達（株）製ＴＳＫ−ＧＥＬ
Ｇ３０００ＳＷ）を用いて測定を行うた。表１にその結
果を示す。
表１ 抜き出し液の分析結果
上部抜き出し液 下部抜き出し液
アルベミン ： ｏ、ｏ６９／ｌ Ｏ，４２９
／１ミオグロビン： ０．４７９／Ｖ ０．０
４ノ／ｌ次に本発明と従来方式の電気泳動装置による分
離とを比較するため、第４図に示した電気泳動装置を用
いて、前記実施例と同一条件下で分離操作を行った。泳
動室の大きさは、本発明の電気泳動装置の各ユニットを
加算したものと同一で半透膜面積１，０５０ｃｍ２．開
口部面積１０．５Ｃｒ＋＋２で、循環流量１．５．ｇ／
ｈ、試料供給量１．０８１！／ｈ、 上部抜き出し量
０．５９Ｊ／ｈ、下部抜き出し量０．５９１！／ｈとし
た。分離結果を表２に示す。
／１ミオグロビン： ０．４７９／Ｖ ０．０
４ノ／ｌ次に本発明と従来方式の電気泳動装置による分
離とを比較するため、第４図に示した電気泳動装置を用
いて、前記実施例と同一条件下で分離操作を行った。泳
動室の大きさは、本発明の電気泳動装置の各ユニットを
加算したものと同一で半透膜面積１，０５０ｃｍ２．開
口部面積１０．５Ｃｒ＋＋２で、循環流量１．５．ｇ／
ｈ、試料供給量１．０８１！／ｈ、 上部抜き出し量
０．５９Ｊ／ｈ、下部抜き出し量０．５９１！／ｈとし
た。分離結果を表２に示す。
表２ 抜き出し液の分析結果
上部抜き出し液 下部抜き出し液
アルブミン ：０．１５ノ／ｌ ０．３４ノ／ｌ
ミオグロビン： ｏ、３１／Ｖ ｏ、１２９／
１このように本発明の分離結果は、上、下の抜き出し液
中のたん白質濃度比で表わすと従来法よりもアルブミン
で３．１倍、ミオグロビンで３．７倍に達した。本実施
例によれば、泳動室内の溶液の流れの安定化な図ること
ができ、たん白質の分離性能を向上させる効果がある。
ミオグロビン： ｏ、３１／Ｖ ｏ、１２９／
１このように本発明の分離結果は、上、下の抜き出し液
中のたん白質濃度比で表わすと従来法よりもアルブミン
で３．１倍、ミオグロビンで３．７倍に達した。本実施
例によれば、泳動室内の溶液の流れの安定化な図ること
ができ、たん白質の分離性能を向上させる効果がある。
本実施例によれば、泳動室の大きさを泳動室内溶液の流
れに乱れが発生しない程度の最大の大きさにし、これを
一つの単一ユニット化し、荷電物質の処理量に応じてユ
ニットを集積する、すなわちモジュール化を図る方式を
採用することにより荷電物質の分離性能を低下させずに
、多量の荷電物質を効率良く分離することができるので
、スケールアップに対して極めて有効な効果がある。ま
た、モジュール化を行うことにより、装置部品が量産化
でき製作１組立、分解作業が簡単で、かつ、部品の交換
も容易となり経済的にも効果がある。
れに乱れが発生しない程度の最大の大きさにし、これを
一つの単一ユニット化し、荷電物質の処理量に応じてユ
ニットを集積する、すなわちモジュール化を図る方式を
採用することにより荷電物質の分離性能を低下させずに
、多量の荷電物質を効率良く分離することができるので
、スケールアップに対して極めて有効な効果がある。ま
た、モジュール化を行うことにより、装置部品が量産化
でき製作１組立、分解作業が簡単で、かつ、部品の交換
も容易となり経済的にも効果がある。
電率
また、各電気泳動ユニットでＩ＝Ｉシールド体を介して
連設しているので、隣り合う電気泳動ユニット間での電
界の相互干渉を防止でき、これ暑こよす各電気泳動ユニ
ットでの荷電物質の分離を問題なッキンとなり各電気泳
動ユニットの半透膜や仕切り膜取付部からの溶液の―れ
が防止でき各電気泳動ユニット間での溶液の混入が防止
できる。このため、各電気泳動ユニットでの荷電物質の
分離が阻害されずに高い精度で行われる。
連設しているので、隣り合う電気泳動ユニット間での電
界の相互干渉を防止でき、これ暑こよす各電気泳動ユニ
ットでの荷電物質の分離を問題なッキンとなり各電気泳
動ユニットの半透膜や仕切り膜取付部からの溶液の―れ
が防止でき各電気泳動ユニット間での溶液の混入が防止
できる。このため、各電気泳動ユニットでの荷電物質の
分離が阻害されずに高い精度で行われる。
を特に有する必要はない。
本発明によれば、荷電物質の分離性能の低下を生じさせ
ずに多量の荷電物質を処理できるという効果がある。
ずに多量の荷電物質を処理できるという効果がある。
第１図は本発明の一実論例の電気泳動装置の断面図、第
２図は茅１図の電気泳動装置のＡ−Ａ’断面図、第３図
、第４図は第１図の電気泳動ユニノトの横断面図および
縦断面図、第５図、第６図は従来の電気泳動装置の横断
面図および縦断面図である。 ２、２’、 ２’・・・・・・電気泳動ユニット、３・
・・・・・１！極室、４・・・・・・泳動室、５・・・
・・・陽電極板、６・・・・・・陰電極板、７・・・・
・・半透膜、８・・−・・・仕切り膜、９・・・・・・
開口部、１０・・・・・・上部抜き出し口、１１・・・
・・−循環液出口、し・・・・・・循環液入口、１３・
・・・・・電極液入口、１４・・・・・・電極液出口、
１５．１？、 １８．２０・・・・・・集合器、１６．
１９・・−第２図 第３区
２図は茅１図の電気泳動装置のＡ−Ａ’断面図、第３図
、第４図は第１図の電気泳動ユニノトの横断面図および
縦断面図、第５図、第６図は従来の電気泳動装置の横断
面図および縦断面図である。 ２、２’、 ２’・・・・・・電気泳動ユニット、３・
・・・・・１！極室、４・・・・・・泳動室、５・・・
・・・陽電極板、６・・・・・・陰電極板、７・・・・
・・半透膜、８・・−・・・仕切り膜、９・・・・・・
開口部、１０・・・・・・上部抜き出し口、１１・・・
・・−循環液出口、し・・・・・・循環液入口、１３・
・・・・・電極液入口、１４・・・・・・電極液出口、
１５．１？、 １８．２０・・・・・・集合器、１６．
１９・・−第２図 第３区
Claims (1)
- １、荷物物質を含む溶液の入口と分離された荷電物質を
含む溶液の抜出口とを有し、かつ、溶液の流れに乱れを
発生させない容積の泳動室と、電極液の入出口を有し前
記泳動室の両側に膜で隔離して設けられた電極室とを具
備した電気泳動ユニットを、電界シールド体を介して複
数ユニット連設したことを特徴とする電気泳動装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61175629A JPS6332361A (ja) | 1986-07-28 | 1986-07-28 | 電気泳動装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61175629A JPS6332361A (ja) | 1986-07-28 | 1986-07-28 | 電気泳動装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6332361A true JPS6332361A (ja) | 1988-02-12 |
Family
ID=15999421
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61175629A Pending JPS6332361A (ja) | 1986-07-28 | 1986-07-28 | 電気泳動装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6332361A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002524229A (ja) * | 1998-09-07 | 2002-08-06 | グラディポア リミテッド | 微小分子浄化用カセット |
-
1986
- 1986-07-28 JP JP61175629A patent/JPS6332361A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002524229A (ja) * | 1998-09-07 | 2002-08-06 | グラディポア リミテッド | 微小分子浄化用カセット |
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