JPS63284198A - 〔１，７‐ジ‐アラニン、デス‐１９‐ロイシン〕カルシトニン類似体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は生物学的活性を有するカルシトニン置換類似体
及びか＼るカルシトニン類似体の製造方法に関する。

〈従来の技術〉 既知の天然カルシトニンペプチドはすべて３２個のアミ
ノ酸のアミノ酸配列順序を有し、且つｌ及び７の位置の
システイニル残基を結ぶジスルフィド結合な有している
。天然カルシトニンには鮭、鰻、鶏、牛、豚、羊、ラッ
ト及びしトカルシトニンがある。例えば鮭カルシトニン
は次式を有している： Ｌａｓ−Ｇｌｙ−１４ａ−Ｌａｓ−５ａｔ−Ｇｌｓ−Ｇ
ｌｓ−Ｌｍｓ−１ｆｔｍ−Ｌｙａ−Ｌａｗ−Ｇｌｓ−Ｔ
ｈｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｈｅ−Ａｘｎ−米国
特許第３，９２６．９３８号、４，０２６，８１５号、
３．９２９，７５８号、４，０３３，９４０号、４，３
３６，１８７号、４．３８８．２３５号及び４，３９１
，７４７号には上述の鮭カルシトニンを含めたカルシト
ニンの改良された合成法が開示されている。

〈発明の構成〉 公知のカルシトニンと同一の種類の生物学的活性を有し
ており、３１個のアミノ酸を持つ上述の天然産カルシト
ニンペプチドの合成カルシトニン類似体が見出された。

構造上の顕著な相異点はこの新規なペプチドでは（１）
１及び７の位置のシスティンがアラニンで置換されてお
り、（２）Ｎ−α−アミノ基がアシル化されているか欠
失しており、　　（３）位［８が次のアミノ酸；グリク
ン・ｋ−アラ３ン・Ｌ−インロイシン、Ｌ−ロイシン又
はＬ−メチオニンのいずれか１つで置換されており、そ
しＣ（４）　１９−ロイシンが欠失していることである
。

これらの新規ペプチドはペプチドの合成修飾についての
ＩＵＰＡＣ−ＩＵＰ命名法（Ｂｉａａｋａｍ、　／、、
　（１９８４）２１９．３４５−３７７）に従って〔Ｎ
−α−アシル（又はデス−１−アミノ）、１，７−ジ−
アラニン、（８−アミノ酸）、デス−１９−ロイシンう
カルシトニンと命名される。

ペプチドは式： ％式％ Ｓ−デーＧ１シーｒｈデーＰデ・−ＮＨ。

但しＸ−Ａｌａはアラニンを表わしており、そのアミノ
基は置換されていないかアシルで置換されている。アシ
ル基は’１−１゜炭素含有カルボン酸で好ましくは１−
１０個の炭素原子を持つアルケン酸（ａｌｈａ％ｅｉａ
　ａｍｉｄ）、特にギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、
バレリン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノ
ナン酸又はそれらの異性体、Ｌ−乳酸であるか、マロン
酸、コノ・り酸、グルタル酸及びアジピン酸のハーフア
ミドである。

特に好ましい新規ペプチドは〔Ｎ−α−プロピオニル、
１．７−ジ−アラニン、デス−１９−ロイシン−〕カル
シトニンである。

本発明の修飾カルシトニンは式（１）で示す一般式を有
している： 〔Ｎ−α−Ｘ、１．７−ジ−アラニン、（ｓ−ｙ）−デ
ス−１９−ｏイシンー〕カルシトニン　　　（Ｉｌ但し
、Ｘは修飾カルシトニンの位置−１のアラニンの遊離ア
ミノ又はＮ−アシルアミノ（式中アシルは１−１θ個の
炭素原子を有するカルボ／ｌｎ、　４−乳酸であるか、
又はマロン酸、コハク酸、グルタル酸又はアジピン酸の
〕１−ファミドである）であり、 そしてＹはＬ−バリン、Ｌ−グリシン、Ｌ−メチオニン
。

〈態様の記載〉 公知の鮭カルシトニンと同じ種類の活性を有する〔Ｎ−
α−プロピオニル、１．７−ジ−アラニン、デス−１９
−ロイシンー〕鮭カルシトニンの式は次の通りである：
−ＦａＪ−Ｌ＃ｓ−ＧＪｙ−Ｌｙａ−Ｌａｓ−５ａｒ−
Ｇｌｎ−ＧＴｏ−Ｌａｓ−Ｈ４ａ−Ｌｙａ−Ｇｌｓ−Ｔ
ｋｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａａｎ−Ｔｈ
ｒ−Ｇｌｙ−５ｍデーＧｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＨ。

〔Ｎ−α−プロピオニル−１，７−ジ−アラニン、デス
−１９−ロイシンー〕鯉カルシトニンの式は次のように
書ける： ＣＨ，−ＣＨ，−Ｃ−Ａｌａ−５ａｒ−Ａｓｎ−Ｌｍｓ
−５ａｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｌａｓ−Ｇｌｙ−
１４ａ−Ｌａｓ−５ａｒ−ＧＬｓ−Ｇｌｓ−Ｌａｗ−Ｈ
４ａ−Ｌｙｅ−Ｇｉｎ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ−ＴｈデーＡｍｐ−Ｖａｌ　−Ｇｌｙ−ＡＬａ−Ｃ；
１ｇ−Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−ＮＥ。

〔Ｎ−α−プロピオニル−１，７−ジ−アラニン、デス
−１９−ロイシン−〕鶏カルシトニンの式は次のように
誉ける： Ｖａ　ｌ　−Ｌｍ　ｕ−Ｇｌ　ｙ−Ｌｙ　ｓ　−Ｌａｕ
−５ｇ　ｒ−Ｇｌ　ｔｓ−Ｇｌ　ｓ−Ｌｇｓ　−Ｈｉ　
ａ−１４ａ−Ｇｉｎ−Ｔｈ１７−１４ａ−Ｇｉｎ−Ｔｈ
ｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒ　−ＧＬｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ
−’Ｉ’ｈｒ−Ｐｒｏ−Ｎｉｌ。

上で示した式から明らかなように３１個のアミノ酸がこ
の式に関与して配置され、鎖の一端のＡ　ｌ　ｇについ
ての位置ｌで始まり類の他端の位置３１のＰデゆで終る
許容された方法に従って付番されている。記載を明瞭化
するために、この同一の付番システムを合成サイクルで
も引用するアミノ酸の組立はプロリンのカップリンを伴
なうサイクル３１で始マリ、トレオニンのカップリン７
伴なうサイクル３０等へと続いてゆく。

一般的に（ペプチド）合成の同相法を用い、ベンズヒド
リルアミン樹脂（ＢＨＡ樹脂）と呼ぶ樹脂を用いて始め
る。

この樹脂はスチレンとジビニルベンゼンの共重合で〜遺
すれた架橋ポリスチレンビーズ樹脂から籾導される。こ
の種類の樹脂は公知であって、七の製造法はＰｉａｔｔ
ａ　ａｔ　ａｌ。

（ｐ４ａｔｔａ、　Ｐ、Ｓ、　ａｓｄ　Ｍａｒａｈａｌ
Ｌ　、　Ｇ、Ｒ，、Ｃルー惟。

Ｃｏｖｘｍｓｔ番、、　　６５０（１９７０））及びＯ
ｒｌｏｗｘｋｔ　　ａｔｍｌ、、〔Ｊ、０デｇ、ｃｈ−
鴨、、　４１、３７０１（１９７６）：）によつ【更に
示されている。架橋ポリスチレンＢＨＡ樹脂は化学品販
売業者から入手できる。以後、記号でＢＨＡ樹脂を示し
、（９−ｚ樹脂のポリスチレン部分である。

本明細書中の修飾カルシトニン製造方法は、アミド形成
条件下で選ばれたアミノ＆’Ｙ適切な配列順序で付加し
て上記の式（夏）の該修飾カルシトニンを形成すること
から成り、場合によっては存在する保８ｍを外し、又場
合によってはアルケン酸、又は↓−乳酸、又はマロン、
コバ久グルタル又はアジピン酸のハーフアミド又は七の
アシル化訪尋体をアミド形成条件下で修飾カルシトニン
の位１１１１のアラニン部分に付加するかそして存在す
る保諌基ヲ場合によっては外す。

この合成法では、全ペプチド配列順序が樹脂上に形成さ
れる迄、アミノ酸を一時に１ａｉａ宛、不溶性の樹脂に
添加する。アミノ酸の官能基はブロッキング基で保護さ
れる。

α−アミノ酸はブロッキング基で保護される。アミノ酸
のα−アミノ基は第３級ブチルオキシカルボニル基又は
その等価物で保護される。とのα−第３級ブチルオキシ
カルボニル基１ｋＢＯＣと略称する。セリン及びトレオ
ニンのヒドロキシル官能はベンジル又はベンジル誘導体
基例えば４−メトキシベンジル、４−メチルベンジル、
３，４−ジメチルベンジル、４−クロロベンジル、２，
６−ジクロロベンジル、４−二トロベンジル、ベンズヒ
ドリル又はその等価物で保護される。ベンジル又はベン
ジル誘導体基ｙｔ衆わすのに用＠Ｂｚを用いる。

チ四シンのヒドロキシル官能は保護されていなくても、
Ｂｍとして上述されるようなベンジル又はベンジル誘導
体基で保護されてい【も、又はベンジルオキシカルボニ
ル又はベンジルオキシカルボニル誘導体基例えば２−ク
ロロベンジルオキシカルボニル又は２−プロそベンジル
オキシカルボニル基又はその等価物で保護されていても
良い。用語Ｗで保ｓｉｂ無しと、Ｂｍ基、ベンジルオキ
シカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル誘導体基
を示すものとする。

アルギニンのグアニジン官能はニトロ基、トシル基又は
その等価物で保護できる。文字Ｔをニトロ基とトシル基
の両方ヲ表わすのに用いる。リシンのξ−アミノ官能は
ベンジルオキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボ
ニル肪導体例えば２−クロロベンジルオキシカルボニル
、３，４−ジメチルペンジルオキシカルボニル、又は七
の等価物で保護できる。文字Ｖがベンジルオキシカルボ
ニル基又はベンジルオキシカルボニル訪纒体基ヲ旗わす
のに用いられる。

ヒスチジンのイきダゾール窒素に用いられる保８基はベ
ンジルオキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニ
ル誘導体基で、例えば上でリシンについて述べ、Ｖで略
称されているものである。グルタミン酸のγ−カルボン
酸基はセリン及びトレオニンのヒドロキシル官能の保護
について述べられたようなベンジル又はベンジル誘導体
基で保護される。これらの保鏝基は文字Ｂ１で表わされ
ている。

（例示としてだけ用いられる）鮭カルシトニンの合成の
３１サイクルのそれぞれで用いる好ましいアミノ酸反応
剤は次の表１に示されている。

表　　１ ３１　　　　　　ＢＯＣ−Ｌ−プロリン３Ｑ　　　　　
ＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−）レオニン２９　　　　　
ＢＯＣ−グリシン ２８　　　　　ＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−セリン２７
　　　　　ＢＯＣ−グリシン ２６　　　　　ＢＯＣ−０−ベンジル−１−）レオニン
２５　　　　　ＢＯＣ−Ｌ−アスパラギンｐ−ニトロフ
ェニルエステル ２４　　　　　ＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−）レオニ／
２３　　　　　ＢＯＣ−ω−ニトロ−Ｌ−アルギニン又
はＢＯＣ−ω−トシル−Ｌ−アルキニン２２　　　　　
　ＢＯＣ−Ｌ−プロリン２１　　　　　ＢＯＣ−０−７
”ロモベンジルオキシカルボニルーＬ−チロシン ２０　　　　　ＢＯＣ−２−〇−ベンジルーＬ−トレオ
ニン １９　　　　　ＢＯＣ−Ｌ−グルタミンｐ−ニトロフェ
ニルエステル １３　　　　　ＢＯＣ−ｅニーＣＢＺ−Ｌ−リシン又は
ＢＯＣ−ｔ−２−クロロベンジルオキシカルボニル−Ｌ
−リシン １７　　　　　ＢＯＣ−Ｎ（ｊｙ＋ｓ）　−ＣＢｌ　−
Ｌ−ヒスチジン １６　　　　　ＢＯＣ−Ｌ−ロイシン １５　　　　　ＢＯＣ−Ｌ−グルタミン酸ｒ−ベンジル
エステル ３４　　　　　ＢＯＣ−Ｌ−グルタミンｐ−ニトロフェ
ニルエステル １３　　　　　ＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−セリン１２
　　　　　Ｂｔ）Ｃ−Ｌ−ロイシン１１　　　　　ＢＯ
Ｃ−ε−ＣＢＺ−Ｌ−リシン又はＢＯＣ−８−２−クロ
ロ−ベンジルカルボニル−Ｌ−リシン １０　　　　　ＢＯＣ−グリシン ９　　　　　ＢＯＣ−Ｌ−ロイシン ８　　　　ＢＯＣ’−Ｌ−バリン ７　　　　　ＢＯＣ−Ｌ−アラニン ６　　　　　ＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−トレオニン５
　　　　　ＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−セリン４　　　
　　ＢＯｔ”−Ｌ−ロイシン ３　　　　　ＢＯＣ’−Ｌ−アスパラギンｐ−ニトロフ
ェニルエステル ２　　　　　ＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−セリンＩ　　
　　　ＢＯＣ−Ｌ−アラニン アシル化　　　プロピオン酸 （デス−１〜アミンの変換）プロピオン酸表１に示した
アミノ酸誘導体の各々は業者から人手でき左 サイクル３１ 樹脂ペプチド合成のすべてで使用する反応容器は、物質
添加用に頂部に入口孔を、そして濾過で可溶性反応混合
物及び洗浄溶媒を除去するためのジンタート（焼結）ガ
ラスディスクを底部に有しているガラス容器であろう。

濾過は真空（減圧）でも窒素加圧で実施し得る。容器内
容物は容器全体の振盪又は機械的攪拌器で攪拌できる。

サイクル３１ではＥＲＡ樹脂を反応容器に入れ、樹脂Ｉ
Ｖ当りの約３乃至２１−割合の溶媒例えば塩化メチレ／
、クロロホルム、ジメチルホルムアミド、ベンゼン等に
懸濁させる。これに用いたＢＨＡ樹脂の遊離アミン当量
当り約１乃至６当量の量でＢＯＣ−Ｌ−プロリンヲ添加
する。５乃至１０分の混合時間後、カップリング剤（Ｃ
Ａ）例えばジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）
’４（添加するか、他のジイミドカップリング剤を使用
する。ジイミドカップリング剤は用いるＢＯＣ−Ｌ−プ
ロリン１当量当り０．５乃至２．０当量の′ｆｊｋ′ｌ
ｊｒ：使用する。

ＢＯＣ−Ｌ−プロリンはその活性エステル誘導体、その
アジド訪導体、その対称（酸）無水物誘導体又は適切に
選ばれた混合（酸）無水物誘導体を用いると、カップリ
ング剤無しでもカップリングできる。使用可能な活性エ
ステル９４体は２−ニトロフェニルエステル、４−ニト
ロフェニルエステル、ペンタフルオロフェニルエステル
、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル等でるる。活
性エステルはＢ１１Ａ樹脂の遊離アミン１当量尚り１乃
至１０当量の量で使用する。

ＢＩＩＡ樹脂、溶媒、ＢＯＣ−Ｌ−プロリン及びカップ
リング剤又はＢＯＣ−Ｌ−プロリン活性エステルから成
る反応混合物は試験試料でニンヒドリン試験〔Ｅ・人ａ
４ａａｒ。

ａｔ　ａｌ、Ａｓａｌ、　Ｂ１１Ａ樹脂、ｌ　３４．５
９５−８（１９７０））で示されるように反応が完結す
る迄、機械的に攪拌又は振盪する。反応完結後、ＢＯＣ
−Ｌ−プロリン樹脂を溶媒例えば塩化メチレン、クロロ
ホルム、メチルアルコール、ベンゼン、ジメチルホルム
アミド又は酢酸で洗浄できる。洗浄溶媒の量は当初用い
たＢＨＡ樹脂ｉｔについて５乃至２０−が適切であろう
。完結前にカップリング反応を終結させることが望まれ
る時には洗浄プロセスを用い且つＢＯＣ−Ｌ−プロリン
樹脂上の残余の遊離アミノ基を過剰のアセチル化剤を用
いたアセチル化で更なる反応からブロックできる。アセ
チル化法はＢＯＣ−Ｌ−プロリン樹脂をアセチル化剤の
溶液と０．５乃至１２時間の間攪拌して実施できる。ア
セチル化試薬例えば塩化メチレン溶液中のＮ−アセチル
イミダゾール又はクロロホルム中の無水酢酸とトリエチ
ルアミンの混合物が用いられる。アセチル化試薬は原料
ＢＨＡ樹脂の遊離アミンタイターの１当量当り０．５乃
至５．０当量の量を用いる。ＥＯＣ−Ｌ−プロリン樹脂
を生ずるカップリング反応は次式のように書ける：上述
のようにして製造されｆｃＢＯｃ−Ｌ−プロリン樹脂は
前述したような溶媒で洗浄し、これを溶媒例えば塩化メ
チレン、クロロホルム、ベンゼン等中のトリフルオロ酢
酸（ＴＦＡ）の混合物の様な剤と攪拌することによって
保護基を外すことができる。溶媒中のＴＦＡの量は混合
物の１０乃至１００％に変え得る。ＴＦＡ−溶媒混合物
の量は当初使用し九樹脂１を当り３乃至２０ｍｇに変え
得る。反応時間は約１０分乃至４時間である。脱保護基
工程はＴＦＡ−溶媒混合物を濾過して除去すると終了す
る。残留ＴＦＡは、溶媒例えば塩化メチレン、クロロホ
ルム、ベンゼン等中の５乃至３０％のトリエチルアミン
溶液’４．ＢＨＡ樹脂１ｆ当り３乃至２〇−用いて洗浄
することで、ｋ−プロリン樹脂から除去できる。トリエ
チルアミンの代りに他の第３級又は第２級有機アミン例
えばトリメチルアミン、Ｎ−エチルピペリジン、ジイソ
プロピルアミン等も使用できる。

Ｌ４０リン樹脂の遊離アミンタイターはドルマン滴定法
（Ｄｏｒｔｎａｓ、Ｌ、Ｄ、、Ｔａｔｒａルーｄｒｏｓ
　　Ｌａｔｔｅｒｓ、１９６９．２３１９−２１）で測
定できる。脱保護基反応は次式のように書ける： サイクル３０ サイクル３１の結果として得られたゾロリルーＢＨＡ樹
脂をカップリング済媒中に締濁し、ＢＯＣ−０−Ｂｚ　
−Ｌ−トレオニンを添加して同一の方法で混合物を平衡
化できる。カップリング剤、ｎｃｃｙ加えて良（、イサ
チン試験（Ａ’、　Ｋａｉａａｒ、　ａｔ　ａｌ、、　
Ａｎａｌ、　Ｃｈａｓｅ、　Ａｃｔａ、　１１ｇ、１４
９−５１（１９８０））で示される反応完結後、反応混
合物は濾過でＢＯＣ−０−Ｂｇ　−）レオニルプロリル
−ＢＨＡ樹脂から除き得る。ペプチド樹脂は溶媒洗浄し
得る。

反応物及び＃謀の量及び反応時間はサイクル３１で述べ
たものと同一である。サイクル３１で述べた脱保Ｍ１基
方法によりＣＢＯＣ基を外すことができる。得られた０
−Ｂｚ　−トレオニルブロリルーＥＨＡ＠脂は次にサイ
クル２９に用い得る。サイクル３０の反応は次式のよう
に書ける：便宜上、この得られた樹脂ペプチドを三文字
記号を用いて次のように書いても良い： サイクル２９ サイクル２９では、ＥＯＣ−０−Ｂｍ−Ｌ−トレオニン
の代りにＢＯＣ−グリシンを用いる以外はサイクル３ｏ
と同一の方法でカップリング反応及び脱保換基反応を実
施できる。カップリング及び脱保醤基を通じて反応は次
のように書ける： サイクル２８ サイクル２８では、アミノ酸訪導体％）ＢＯＣ−０−Ｂ
ｇ−Ｌ−セリンで置換える以外はサイクル３０と同一の
方法でカップリング及び脱保護基反応を実施できる。こ
れは次のように１１！ｔ′ｆる二 サイクル２７ サイクル２７では、アミノ酸反応物としてＢＯＣ−グリ
シンを用いる以外は、カップリング及び脱保１１１１基
反応をサイクル３０に記載のように実施できる。カップ
リング及び脱保護基を通しての反応は次のように省ける
：サイクル２に のサイクルでは、カップリング及び脱保ＩＩ基反応をサ
イクル３０と同一のアミノ酸反応物を用いてサイクル２
８と同様に実施して次式の化合物を得る：サイクル２５ サイクル２５では、ＢＯＣ−Ｌ、−アスパラギンの活性
エステル酵導体を用いてカップリング反応を実施する。

活性エステル法はＢＯＣ−Ｌ−アスパラギン又はＢＯＣ
−Ｌ　−グルタミンとＤＣＣカップリング剤の代りに用
いられる。

ＥＯＣ−Ｌ−アスパラギンの活性エステル誘導体を用い
る反応は当初に使用したＢＨＡ樹脂１１当り２乃至２０
−の溶媒の量の、ジメチルホルムアミド、ジメチルホル
ムアミドとベンゼンの混合物、塩化メチレン又はクロロ
ホルム等中のＢＨＡ側脂の遊離アミン１当量当り２乃至
１０当童のｔを用いて実施できる。反応時間はｌ乃至７
２時間である。

ニンヒドリン試験で示されるような反応の完結後、反応
混合物は濾過でＢ　Ｏ（、’ペプチド樹脂から除去でき
る。使用する活性エステル誘導体は２−ニトロフェニル
エステル、４−ニトロフェニルエステル、ペンタフルオ
ロフェニルエステル等である。誘導体の活性エステル部
分をＡＥで示す。

カップリング反応は次のように曹ける：ＢＯＣ基を外す
脱保護基反応はサイクル３１と同様に実施される。

サイクル２４乃至２０のそれぞれでは、カップリング及
び脱保護基反応はサイクル３０と同じ方法及び反応物の
割合を用い、但しサイクル２４ではＢＯＣ−０−Ｂｇ−
Ｌ−トレオニンを用い、サイクル２３ではＢＯＣ−ω−
１”　−Ｌ−アルギニンを、サイクル２２ではＢＯＣ−
Ｌ−プロリンを、サイクル２１ではＢＯＣ−Ｗ−Ｌ−チ
ロシンを、そしてサイクル２０ではＢＯＣ−Ｂｓ−１，
−）レオニンを用いて実施できる。サイクル２００完結
で得られ次化合物は次のように誉ける： サイクル１９ サイクル１９では、アミノ酸誘導体としてＢＯＣ−Ｌ−
グルタミン活性エステル誘導体を用い、サイクル２５の
方法と反応物の割合を用いてカップリング及び脱保護基
反応が実施でき次の化合物が得られる。

サイクル１８ サイクル１８では、アミノ酸誘導体としてＢＵＣ−ｔ　
−Ｖ−Ｌ−リシンを使うことができる。さもなくばサイ
クル１８の方法はサイクル３０と同様に実施でき、次の
化合物を生じる： サイクル１７乃至１５は、サイクル１５で反応物として
ＢＯＣ−ＮＣ４喝）−Ｖ−Ｌ−グルタミン酸Ｂｇエステ
ル（Ｂ１家セリン及びトレオニンについて用いられるの
と同一の基を示す）を用いる以外は、サイクル３０と同
様に実施でき、サイクル１５から次の化合物が得られる
：サイクル１４−８ サイクル１４はＢＯＣ−Ｌ−グルタミン−ＡＥをアミノ
酸誘導体として用いてサイクル１９と同じ〈実施できる
。

サイクル１３乃至８はサイクル１３ではＢＯＣ−０−Ｂ
ｚ−Ｌ−セリンを、サイクル１２ではＢＯＣ−Ｌ−ロイ
シンを、サイクル１１でｋＬＲＯｃ−ａ−Ｖ−Ｌ−リシ
ｙｖ、サイクルｌＯではＢＯＣ−グリシンを、サイクル
９ではＢＯＣ−！−ロイシンを、そし【サイクル８では
ＢＯＣ−に−バリンを月いる以外はサイクル３０と同様
に実施でき、次の化合物を生じる： サイクル７ サイクル７は、アミノ酸誘導体にＢＯＣ−Ｌ−アラニン
を用いる以外はサイクル３０と同じ〈実施できる。サイ
クル７から得られる化合物は次式で示される：サイクル
６−２ サイクル６乃至２は、サイクル６ではアミノ酸誘導体と
してＢＯＣ−０−Ｂｚ−Ｌ−トレオニンが用いられ、サ
イクル５及び２ではアミノＭ誘導体としてＢＯＣ−０−
Ｂｇ−Ｌ−セリンが用いられ、アミノ酸誘導体としてサ
イクル４ではＢＯＣ−Ｌ−ロイシンが用いられる以外は
サイクル３０と同様に実施できる。サイクル３はＢＯＣ
−Ｌ、−アスパラギン活性エステルを用いてサイクル２
５と同じ〈実施できる。

サイクル２から得られる化合物は次のとおりである：サ
イクルｌ このサイクルはサイクル７と同様に実施される。

アシル化サイクル ＢＯＣ基は前述し九脱保護基方法でペプチド樹脂から取
外すことができる。得られたＢＯＣ’ｌｔ脱した１乃至
３１ＢＨＡ樹脂はプロピオン酸とのカップリングの準備
が完了している。アシル化サイクルはＢＯＣ−Ｌ−アラ
ニンの代りにプロピオン！’ａ’用いる以外はサイクル
ｌと同様に実施される。アシル化サイクルから得られる
化合物は次式で示されるニ アシル化サイクルは樹脂ペプチドの完結を示している。

樹脂ペプチドを反応容器から取出して真空中で乾燥Ｊる
。

樹脂ペプチドの１量は合成に当初使用しｆｃＢＢＡ樹脂
の１量の２．０乃至３．５倍と考えられる。

液体弗化水素（ＨＦ）を用いる処理でサイクルｌで得ら
れた樹脂ペプチドからペプチドをひきはなす。ＨＦ開裂
反応は樹脂ペプチドとアニソール＜ｍ脂ペプチドｌｔ当
り０．５乃至５−）の混合物′％：（樹脂ペプチド樹脂
当り２乃至２０−の）液体ＨＦで０．５乃至２０時間−
２０乃至＋１５℃で処理して実施できる。反応時間後は
、過剰のＨＦｙ！′蒸発させて除去し、ペプチドと樹脂
ビードの混合物を有機溶媒側光ば酢酸エチル、ジエチル
エーテル、ベンゼン等で抽出して、アニソール及び残留
ＨＦ１に除去することができる。

樹脂ビードからペプチドを酢酸水溶液で抽出して分離で
きる。

１１Ｆ処理はペプチドからすべての保護基乞除去する。

従ってＨＦ処理後に得られるペプチドは次の種類である
：ＣＨ，−ＣＭ、−Ｃ−Ａｌａ−５ａｒ−Ａａｓ−Ｌａ
ｓ−５ａｒ−Ｔｈｒ−Ａｌａ−Ｖｍｌ−Ｌａ％−Ｇｌｙ
−Ｌｙａ−Ｌｍｓ−５ｅｔ−ＧＬｎ−Ｇｌｓ−Ｌｅｓ−
Ｈ４ｓ−Ｌｙａ−Ｇｌｖｈ−Ｔｈｒ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−
Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａａｓ−Ｔｈｒ−Ｇ１シーＳ−デーＧ
ｔｙ−ｒｈデーＰデ＠−ＮＨ。

このようにして合成されたカルシトニンはすべて〔Ｎ−
α−プロピオニル−１，７−ジ−アラニン、デス−１９
−ロイシン−〕カルシトニンと呼ばれる。

上記の合成法からの−５，０の粗ペプチド溶液はイオン
交換法を用い″′Ｃ濃縮できる。濃縮物はゲル濾過法、
イオン交換クロマトグラフ法及び分配クロマトグラフィ
ーを組合わせて精製できる。最終精製生成物は溶液から
凍結乾燥でふわふわした白色固体として得られる。生成
物は所望ペプチドについての正しいアミノ酸分析を与え
る。

以下はペプチドの製法についての実施例である。

実施例１゜ 樹脂活性化 ０．６１溝−ｑ／ｆｆのアミンタイターを持りＢＩＩＡ
樹脂（５１）をＡｚｉｔｏｓａ　ｔｔｆ　７’５ｃａｏ
ｓのＶ−σａ　Ｂｉｏａｈｍｔｇｉ−Ｃα１ｍが販売す
るペプチド合成器に入れた。樹脂ｔ２５−以下の溶媒で
処理し、各処理後Ｆ遇した：クロロホルム　　２分１１
１Ｊ２回 トリエチルアミンの１０％クロロホルム＃ｉ液５分間２
回 クロロホルム　　２分間 塩化メチレン　　２分間３回 サイクル３１ カップリングニＢＨＡ１ｔｓ４脂、２５−の塩化メチレ
ン及び１．３１　？　（０，００６１ｓ＊４）のＢＯＣ
−Ｌ−プロリｙＦａ＝１０分間攪拌した。（１ｍの溶液
当り１ミリ当量のＤＣＣの）ジシクロへキシルカルボジ
イミドの塩化メチレン溶液の６．１　ｄ’ａ−反応器に
加えて、混合物７６時間かきまぜた。

濾過で反応混合物を除いてＢＯＣ−プロリル−ＢＨＡ樹
脂を次々と２分間、２５ｍの以下の洗浄を行ない、洗液
を毎回濾過で除去した： 塩化メチレン　　２回 メチルアルコール　　２回 塩化メチレン　　３回 アセチル化：樹脂を次に１．５−のトリエチルアミン（
ＴＥＡ、１−の熱水酢酸及び２５ｍのクロロホルムの混
合物と２時間攪拌した。濾過で反応混合物を除去し、樹
脂を次に２分間宛２５一部で洗浄した： クロロホルム　　２回 メチルアルコール　　２回 塩化メチレン　　３回 脱保護基：ＢＯＣ保護した樹脂を５分間、１５ゴのトリ
フルオロ酢酸（ＴＥＡ）と１５ＷＬｔの塩化メチレンの
混合物と攪拌した。この混合物ヲ濾過で除いて樹脂を次
の１５ｄのＴＥＡと１５−の塩化メチレンの混合物と３
０分間攪拌した。反応混合物を濾過で除いて、樹脂な次
のもので２５−宛洗浄した： 塩化メチレン　　２回２分間分 間−ルアルコール　　２回２分間宛 クロロホルム　　２回２分間分 間−Ａの１０％クロロホルム浴液　　２回１０分間宛ク
ロロホルム　　２回２分間分 間−メチレン　　２回２分間分 間−メチレン　　２回２分間分 間−プロリン樹脂を滴定してアミン又はプ四リンタイタ
ーＶきめた。この値は樹脂１を当りアミン又はプロリン
の０．５５ミリ当量であった。

サイクル３０ カップリング：Ｌ−プロリル樹脂、２５−の塩化メチレ
ン及び１．６４　ｔ　（０，００５３５ｅｔ）のＢＯＣ
−０−ベンジル−ｈ−トレオニンを１０分間攪拌した。

（１ミリ当量のＤＣＣ）のジシクロへキシルカルボジイ
ミドの塩化メチレン溶液の５．５　ｗｔ′％：反応器に
加えて、混合物を２時間攪拌し念。反応混合物を反応器
から除き、樹脂を次のもので２分間宛、２５１１ｔ宛洗
浄し、毎回濾過で洗液を除いた：塩化メチレン　　２回 メチルアルコール　　２回 塩化メチレン　　３回 イサチン試験は陰性であった。

脱保護基：サイクル３１記載の脱保護全方法をこのサイ
クルでも繰返した。

これらのサイクルのカップリング及び脱保護全方法は次
のアミノ酸誘導体をトレオニン訪導体の代りに用いた以
外はサイクル３１と同一であった： サイクル２９・・・　ＢＯＣグリシンの０．９３Ｆ（０
，００５３ｍｏｔ） サイクル２８・・・　ＢＯＣ−０−ベンジル−に−セリ
ンの１．５５Ｆ（０，００５３爛ｔ） サイクル２７・・・　使用反応物サイクル２９に同じサ
イクル２６・・・　使用反応物サイクル３０に同じサイ
クル２５ カップリング：サイクル２６から得られたペプチド°拉
（方言をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の２５一部で
２回洗つた。樹脂を次に３５−ｆ）ＤＭＦ中１７）２．
８２Ｆ（０，００８ｍｏｂ）のＢＯＣ−Ｌ−アスパラギ
ンｐ−ニトロフェニルエステルと２４時間攪拌した。反
応混合物１”ｊＭＬ、樹脂を次の溶媒の２５ｍ部で２回
宛２分間洗った二ＤＭＦ、塩化メチレン、メタノール、
塩化メチレンそれぞれ溶媒は濾過で除いた。ニンヒドリ
ン試験は陰性であった。

脱保護基：サイクル３１で使用した脱保護基方法を繰返
した。

サイクル２４ サイクル３０で使用したのと同一の反応剤を同量用いて
カップリング及び脱保護基を行なった。

サイクル２３ カップリング：サイクル２４で得た樹脂ペプチドをＤＭ
Ｆの２５ｗＩｔ部で続けて２回洗った。次に樹脂ペプチ
ドｔｌＯ分間、３．４２　ｆ　（０，００８ｍｏＬ）の
ＢＯＣ−Ｎ−ω−トシル−Ｌ−アルギニンと２５−のＤ
ＭＦの混合物と攪拌した。次に（０，００８ｍｌのＤＣ
Ｃに相当する）ＤＣＣの塩化メチレ／溶液８ｄ″Ｉｋ：
加えて、混合物Ｙ６時間攪拌した。濾過で反応混合物を
除き、樹脂ペプチドを２回続けて２５ｍの次の溶媒で２
分間洗った：ＤＭＦ、塩化メチレン、メチルアルコール
、塩化メチレン。ニンヒドリン試験は陰性であった。

脱保護基：サイクル３１で用いた脱保護基を繰返した。

サイクル２２ カップリングニサイクル２３で得たペプチド樹脂ヲ１０
分間、１．７２　ｔ　（０，００８ｍｌ　）のＢＯＣ−
１，−プロリンと２５−の塩化メチレンと攪拌した。（
ＤＣＣのｏ、ｏｏｓｍａｌ相当の）ＤＣＣの塩化メチレ
ン浴液８＋ｄＹ加え混合物を６時間攪拌した。反応混合
物を濾過で除き、樹脂ペプチド′４！：２分宛、２５ｗ
４を宛で２回宛次の溶媒で洗った：塩化メチレン、メチ
ルアルコール、塩化メチレン。各洗液は濾過で除いた。

ニンヒドリン試験は陰性であった。

脱保饅基：サイクル３１で用いた脱保護基を繰返した。

カップリング反応でＢＯＣ−Ｌ−プロリンの代りに次の
アミノ酸誘導体を用いた以外はサイクル２２と同一のカ
ップリング及び脱保護全方法をこのサイクルで用いた：
サイクル２１・・・・・・ＢＯＣ−０−２−７’ロモベ
ンジルオキシカルボニルーＬ−チロシンの ４．０７ｒ（０，００８讃ｔ） サイクル２０・・・・・・ＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−
トレオニンの２．４７ｒ（０，００８ｍｏｔ）サイクル
１９ アスパラギン誘導体の代りに２．９４　？　（０，００
８ｍｏｔ）ｆ）ＢＯＣ−Ｌ−／ルタミンｐ−二トロンエ
ニルエステルを用いた以外は、この方法はサイクル２５
と同一である。

サイクル１８乃至１５ トレオニン誘導体の代りに次のアミノ酸ｆｉｓＳ体を用
いた以外はサイクル２９で用いた方法と同一であった。

サイクル１８・・・・・・ＢＯＣ−ｔ−２−クロロベン
ジルオキシ−Ｌ−リシンの２．２０ｆ （Ｏ１００５３爛ｔ） サイクル１７・・・・・・ＢＯＣ−Ａ’（ｉｍ）−カル
ボベンジルオキシ−Ｌ−ヒスチジンの２．０６ｒ （０，００５３ｍａ４） サイクル１６・・・・・・ＢＯＣ−Ｌ−ロイシンの１．
３２Ｆ（０，００５３四ｔ） サイクル１５・・・・・・ＢＯＣ−Ｌ−グルタミン［−
ｒ−ベンジルエステルの１．７Ｓｌ （０，００５３−） サイクル１４ サイクル１９と同一 サイクル１３ プロリン誘導体の代りに２．３６　ｆ　（０，００８ｍ
ｔ　）のＢＯＣ−０−ベンジル−Ｌ−セリンをカップリ
ング反応で用いた以外は方法はサイクル２２で用いたも
のと同一であった。

カップリング反応で次のアミノ酸誘導体をトレオニン誘
導体の代りに用いた以外は使用した方法はサイクル３１
と同一であった。

サイクル１２・・・・・・サイクル１６に用いたのと同
一反応物 サイクル１１・・・・・・サイクル１８と同一の反応物
サイクルｌＯ・・・・・・サイクル２９で用いたのと同
一の反応物 サイクル９・・・・・・サイクル１６で用いたのと同一
の反応物 サイクル８ カップリング：サイクル９からの樹脂ペプチド’ＶＩＯ
分間、１．７４Ｆ（０，００８ｎｗｔ）のＢＯＣ−Ｌ−
ｔ＜リン及び２５−の塩化メチレンと攪拌した。次にＤ
ＣＣの塩化メチレン溶液の８ｍ１（ＤＣＣの０．００８
爛ｔに相当）を加えて混合物を１６時間攪拌した。濾過
で反応混合物を除去した。

樹脂ペプチドを次の溶媒の２５一部で続けて２回宛、２
分間宛洗浄した：塩化メチレン、メチルアルコール、塩
化メチレン。それぞれの洗液は濾過で除去した。

脱保岐基：サイクル３１参照 サイクル７ カップリング反応でトレオニン誘導体の代りに１．０６
　ｒ（０，００５３爛ｔ）のＢＯＣ−Ｌ−アラニンを用
いた以外は方法はサイクル３０使用のものと同一である
。

サイクル６ 使用した方法及び反応物はサイクル３０と同一であった
。

サイクル５ 使用した方法及び反応物はサイクル２８と同一であった
。

サイクル４゜ 使用した方法及び反応物はサイクル１６と同一であった
。

サイクル３ 使用した方法及び反応物はサイクル２５と同一であった
。

サイクル２ 使用した方法及び反応物はサイクル２８と同一であった
。

サイクル１ 使用した反応物及び方法はサイクル７と同一であった。

脱保護基：サイクル３１で記載した脱保護基方法をこの
サイクルで繰返した。

プロピオニル化ＣＰｒｏｐ４ｏｎｏｌａｔｉｏｓ　）　
：樹脂ペプチド、２５ゴの塩化メチレン及び０．７４　
ｆ　（０，０１ｍｔ　）のプロピオン＃ｔを、１０分間
攪拌した。次に（１−当ｒ）ＤＣＣの１惰−ｑ（ミリ当
量））のジシクロへキシルカルボジイミドの塩化メチレ
ン溶液の１１ｓｇＹ反応物に加え、混合物を２時間攪拌
した。反応混合物を反応器から抜き、サイクル３０に述
べたように樹脂を洗った。最後に樹脂ペプチドをｎ−へ
キサンの２５一部で２回洗った。ペプチド物＊”ｒ反応
器から取出して真空炉中４０℃、０．１ｕＨｔで２４時
間乾燥した。

乾燥した樹脂ペプチド（２ｔ）と２−のアニソールをテ
フロン製反応器に入れた。容器はテフロンコートした磁
気攪拌子付でドライアイス−アセトン浴中に入れてあり
、１５−の弗化水素ガスを容器に凝縮させた。この混合
物を水浴中θ℃で１時間攪拌した。蒸発と減圧で弗化水
素を除去した。残渣を酢酸エチルの２５−の６部で磨砕
した。樹脂ビードからペプチドを０．１Ｍ酢酸溶液の１
２０−で抽出した。

上記合成からのｐＨ５，０の溶液２００ｓｌ’１ＳＰ−
２５イオン交換カラムを用いて濃縮した。カラムから２
５艷の濃縮物Ｙ　Ｏ，７Ｍ塩化ナトリウム溶液で取出し
て、セファデックス（Ｓｍｐｈａｄａｙｓ　）Ｇ−２５
（ファイン）ゲル濾過カラムを通し、０．０３Ｍの酢酸
水溶液で溶離させて脱塩し２４製した。このカラムから
の〔Ｎ−α−プロビオニルージＡｌａ”。

デス−Ｌｍｓ”〕ＳＣＴクラクションヲ水酸化アンモニ
ウム浴液を添加してｐＨ６に調節した。この浴液を更に
ワットマン（ＪＰ’Ａａｔｓａｓ　）（’＆−５２カラ
ムを用い、酢酸アンモニウム緩衝液で溶離させるイオン
交換クロマトグラフィーで精製した。このカラムからの
〔Ｎ−α−プロピオニルージＡ　ｌ　ａ　”・’−デス
Ｌｍｓ”〕ＳＣＴフラクショｙ’ｇ氷酢＃１１に添加し
て−５，０に調節した。この溶液をＳＰ−セファデック
スＣ−２５イオン交換カラムを用いＣ＠縮した。０，７
Ｍ塩化ナトリウム溶液を用いてカラムから取出した３０
−の濃縮物をセファデックスＧ−２５Ｃフアイン）ゲル
濾過カラムで脱塩した。ペプチドクラクションを集めて
凍結乾燥した。生成物を更にセファデックスＧ−２５７
アインカラムと溶媒系二％−ブタノール、エタノール、
０．０４％酢酸含有０．２Ｎ酢酸アンモニウム（４−，
１−５）’に用いる分配クロマトグラフィーで精製した
。生成物はカラムから０．５０のＲｆ値で溶離する。生
成物含有フラクション全合併し、爲−ブタノールを蒸発
除去した。生成物を凍結乾燥で回収した。固体を次にセ
ファデックスＧ−２５（ファイン）カラム上で０．２Ｍ
酢酸溶液を用いてゲルＦ遇した。精製したペプチドフラ
クションを集めて凍結乾燥した。

生成物はふわふわした白色固体として得られた。フェノ
ール共存下での酸加水分解後の生成物のアミノ酸分析を
表２に示す。

ｐＨ５，０の開裂抽出物からの２００ｇＩｔの溶液をイ
オン交換カラムで濃縮した。０．７Ｍ塩化ナトリウム溶
液で力２ムから取出した２５−の濃縮物を脱塩し、セフ
ァデックスＧ−２５（ファイン）ゲルー濾過カラムを通
し、０．０３Ｍ酢酸水溶液で溶離して精製した。このカ
ラムからの〔ジーＡｉｍ”、デス−Ｌａｓ”〕Ｓ　ＣＴ
　７　’）クションヲ水酸化アンモニウム溶液を加え′
Ｃ，Ｈ６，Ｏに調節した。この溶液ｔワットマン（Ｗｈ
ａｔｍαｎ）ＣＭ−５２カラムを用い、酢酸アンモニウ
ム緩衝液で溶離させるイオン交換クロマトグラフィーで
さらに精製した。

（、’Ｍ−５２カラムからの半純粋ペプチドは分配系の
上層に用済では無かった。〔ジーＡｌａ”、デス−Ｌａ
ｓ”〕ＳＣＴ類似体Ｃ−１８誘導化シリカを含むカラム
（５，７Ｘ　３０ｃｔ）上で、ＢＰＬＣでさらに精製し
た。（いずｔｌも０．１％のトリフルオロ酢酸ヲ含む）
１２．５及び６０％のアセトニトリルをそれぞれ宮む水
性緩衝液でカラムを溶離させた。等しい純度である目標
ペプチドを含むフラクションを合併し、凍結乾燥した。

得られたペプチドのトリフルオロ酢酸塩ｔＳＰ、Ｃ−２
５−セファデックスカラム上でのイオン交換クロマトグ
ラフィーで対応する酢酸塩に変換し、ゲル濾過して、凍
結乾燥してふわふわした白色粉末′ｌｊｔ得た。アミノ
酸分析及び薬効については表２参照。

インビボのカルシトニン類似体の生物学的アッセイ［Ｎ
−α−プロピオニル−、−１，７−ジーＡ　ｌ　ａ　、
デス−１９−Ｌｇｓ−］鮭カルシトニンの生物学的効力
（力価）’に、ＣＮ−α−プロピオニル−１，７−シー
Ａｌａ、デス−１９−Ｌｍｓ〕ＳＣＴと合成鮭カルシト
ニン標準品の等部分けした用量を投与して後の血清カル
シウム濃度の減少を比較して測定した。ラットを７匹宛
の４群に分け、各群を標準品及び試験溶液の用量に無作
意に割当てた。低及び高用量は用量一応答曲線の直線部
分を選んだ。鮭カルシトニン標準品については、値は０
．７及び２．１４１ペプチド／１００ｆ体ＮＣＢＪＰ’
）であった。ペプチドは皮下注射（０，２ｄ／１００ｆ
Ｂ＃７）で与え、１時間後に血清カルシウム測定用に血
液を取った。血清は２時間以内の捕集を分析した。結果
は２Ｘ２平行線アッセイ（Ｇａｄｄｓｓ、／、Ｈ，、／
。

析した。使用した標準鮭カルシトニンは独立して４，０
００ＩＵ／１ｎ９より大を有していると測定された。

好ましいカルシトニン類似体についてのアミノ酸分析、
分配Ｒｆ値及び上で得られ喪力価を表２に示す。

カルシトニン類似体のアミ 〔ｌ、７−ジ−アラニン、デス− 母　　体　　　　　　デス−１−アミノ理論値　　実測
　　　　理論値　　　実測Ａｌａ　　　　　　（２１２
，０（１１１Ａデｙ　　　　　　　　（１１，９７（１
１，９８Ａ　ａ　ｐ　　　　　（２１２（２１２Ｏ２ｍ
　　　　　（３）　　　　３　　　　　　　（３１３０
１ｙ　　　　　（３１：（（３１３ １１４ｍ　　　　　　（１１，９６（１１，９５Ｌ−％
　　　　　（４１４，１（４１４，２Ｌｙｍ　　　　　
　（２１１，９（２１２Ｐｒｏ　　　　　　（２１２，
０（２１２Ｓ　＃　ｒ　　　　　　（４１３，８（４１
３，７ｒｈデ　　　　　　（５）　　　　　　５．１　
　　　　　　　＋５１　　　　　５．２Ｔｙｒ　　　　
　　（１１０，９（１１，９１Ｖａｌ　　　　　　（１
１１，０（１１１ＮＭ、　　　　　　（５１５，２＋５
１　　　５．２分配Ｒｆ　　　　注　１０．４８ 力価　　　　７４００　Ｉｓ／〜　　　　７３００１ｍ
７隻９５％限界　　（６５５１−８３１４（６３５６−
８４７９）注ｌ：類似体は与えられた溶媒系に分配され
ない。ＩＩＰＬノ酸分析、Ｒｆ値及び力価 １９−ロイシン〕カルシトニン デス−１−アミノ、　　　　　Ｎ−α−プロ８−グリシ
ン　　　　　　　ピオニル 理論値　　　実測　　　　　理論値　　実測（１１，９
６（１１，９７ （３１３，９（３１２，９ （１１，９６（１１，９５ ＋４１　　　　４．２　　　　　　　＋４１　　　４．
３１４１３，７（４１３，６ （５１５，２（５１５，１ （１１，９３（１１，９２ （５１５，２（５＋　　　　５．１ ０．２３　　　　　　　　　　０．５０５９００　Ｉｓ
／１１９　　　　　　７６００１ｓ／ＩＭｉＣで精製し
た。

発明のある態様のみを特に詳細に記載したが、だが本発
明の精神と特許請求の範囲内で当業者にとっては多くの
別の特定態様を実施でき、多くの変更も可能であろう。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式： 〔Ｎ−α−Ｘ、１，７−ジ−アラニン、（８−Ｙ）デス
   −１９−ロイシン〕カルシトニン 但し、Ｘはカルシトニンの１の位置の遊離アミノ又はＮ
   −アシルアミノ（式中アシルは１−１０個の炭素原子を
   有するカルボン酸、￥Ｌ￥−乳酸であるか、又はマロン
   酸、コハク酸、グルタル酸又はアジピン酸のハーフアミ
   ドである）であり、 そしてＹは￥Ｌ￥−バリン、￥Ｌ￥−グリシン、￥Ｌ￥
   −メチオニン、￥Ｌ￥−アラニン、￥Ｌ￥−ロイシン又
   は￥Ｌ￥−イソロイシンである；を有することを特徴と
   する修飾カルシトニン。 ２、式： 〔Ｎ−α−Ｘ、１，７−ジ−アラニン、デス−１９−ロ
   イシン〕カルシトニン 但し、ＸはＣ＿１＿−＿■の炭素原子を有するカルボン
   酸である、を有する請求項１記載のカルシトニン。 ３、カルシトニンが鮭、鰻及び鶏カルシトニンである請
   求項２記載のカルシトニン。 ４、〔Ｎ−α−プロピオニル、１，７−ジ−アラニン、
   デス−１９−ロイシン〕カルシトニンである請求項１又
   は２記載のカルシトニン。 ５、該カルシトニンが鮭カルシトニンである請求項４記
   載のカルシトニン。 ６、〔デス−１−アミノ、１，７−ジ−アラニン、デス
   −１９−ロイシン〕カルシトニンである請求項１記載の
   カルシトニン。 ７、該カルシトニンが鮭カルシトニンである請求項６記
   載のカルシトニン。 ８、〔デス−１−アミノ、１，７−ジ−アラニン、８−
   グリシン、デス−１９−ロイシン〕カルシトニンである
   請求項１記載のカルシトニン。 ９、該カルシトニンが鮭カルシトニンである請求項８記
   載のカルシトニン。