JPS6324157A

JPS6324157A - 酵素免疫自動測定機

Info

Publication number: JPS6324157A
Application number: JP6105887A
Authority: JP
Inventors: Takashi Yamada; 隆山田
Original assignee: Olympus Optical Co Ltd
Current assignee: Olympus Corp
Priority date: 1987-03-18
Filing date: 1987-03-18
Publication date: 1988-02-01
Also published as: JPH0364834B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は自動的に酵素免疫を１１１定する測定−に関す
るものであり、特に、反応によって結合した物質（Ｓｏ
ｕｎｄ）と結合していない物Ｎ（Ｆｒｅｅ　）の分離（
Ｂ−Ｆ分離）が可能な酵素免疫自動測定機に関するもの
である。

従来、酵素免疫測定は複雑な測定法であり、Ｒ終段階の
酵素活性測定は簡単に自動測定を行うことができるにも
かかわらず、Ｂ−Ｆ分離を行う操作段階において、Ｂ−
Ｆ分離が容易でない所から全過程を自動化することが困
難であった。

本発明は、酵素免疫測定においてＢ−Ｆ分離を含む分析
過程を自動的に実施する酵素免疫自動測定機を提供する
ことを目的とする。

本発明は、標識物質として酵素を用い抗原抗体反応によ
りサンプル中の測定対象物質を測定する装置において、
抗原あるいは抗体等の特異親和性物質を固定化した固相
を収容する反応容器を連続的に搬送する反応容器搬送装
置と、所望の反応容器に所望の試薬を分注する試薬分注
装置と、固相と反応容器を同時に洗浄し未結合物質を除
去する洗ｆｐ装置と、反応後の酵素活性を測定する測光
装置とを備えた酵素免疫自動測定機に関する。

第１図は酵素免疫反応の概略図である。１は、ポリスチ
レンボールまたはガラスピーズ等の固相に抗体（あるい
は抗原）２ａを固定した固定化固相である＜Ａ）。この
固定化固相１に抗体（あるいは抗原）２ａに対する抗原
（あるいは抗体）２ｂを含む血清あるいはこれに相応す
る試料を加えて反応させる（Ｂ）。すると、抗原（ある
いは抗体）２ｂは固定化固相上１の抗体くあるいは抗原
）２ａと反応し、抗原（抗体）−抗体（抗原）接合物固
定化固相３を生成する（Ｃ）。この接合物固定化固相３
に、固定化固相１に固定化した抗体くあるいは抗原）２
ａと同一の抗体くあるいは抗原〉に酵素を標識付けした
酵素標識抗体（あるいは抗原）４を加えて反応させる（
Ｄ）、これにより、酵素標識抗体（あるいは抗原）４と
接合物固定化固相３の複合物である酵素標識抗体（抗原
）−抗原（抗体）−抗体く抗原）接合物固定化固相５を
生成する（Ｅ）。過剰の酵素標識抗体（あるいは抗原）
４を除去し、前記固定化固相５上の酵素活性を測定する
。これによって試料中の抗原（あるいは抗体）の含有量
を知ることができる。

第２図はこの自動測定機の一実施例を示す部分図である
。

大口部６ａおよび小口部６ｂを備えたＵ字管６に、大口
部６ａから自由に出し入れでき、小口部６ｂに入らない
固定化固相１を用意する。

Ｕ字管６の大口部６ａより固定化固相１と試薬あるいは
緩衝液を加える（Ｆ）。次にサンプル分注器７により測
定対象のサンプルを一定量加え（Ｇ）、小口部６ｂから
空気を吹込み攪拌を行い上述の固定化固相３を生成され
る（Ｈ）。

この後、大口部６ａに洗浄液供給装置８、小口部６ｂに
洗浄液吸引装置９を適用さゼ前記固定化固相３およびＵ
字管６の洗浄を行う（ｒ）。

次に上述の酵−素標識抗体（あるいは抗原）４を分注器
１０により、Ｕ字管６の大口部６ａより加え（Ｊ）、小
口部６ｂより空気を吹込み攪拌を行い、上述の固定化固
相５を生成させる（Ｋ）。この後、洗浄液供給装置８お
よび洗浄液吸引装置９によって、前記固定化固相５およ
びＵ字管６の洗浄を行う（Ｌ）。次に固定化固相５を含
むＵ字管６内に、固定化固相５上の酵素活性を測定する
ための試薬を、試薬分注器１１によって加える（Ｍ）。

この後小口部６ｂより空気を吹込み攪拌を行い、反応を
行った後（Ｎ）、吸引チューブ１２によって反応溶液を
フローセル１３内に移送する（０）。この反応溶液の吸
光度を測定し、固定化固相５上の酵素活性を求める。こ
れにより、サンプル中の抗原（あるいは抗体）２の含有
量を知ることができる。また、吸光度測定後、Ｕ字管６
内に残った固定化固相５は大口部６ａに設けた固定化固
相吸引袋＠１４によって除去し、小口部６ｂに設けた洗
浄液供給装置１５により洗浄液をＵ字管６内に供給し、
洗浄後、吸引装置１４により除去する。

第３図は、第２図をさらに詳細に説明するため、本発明
による自動測定機の一実施例を示す全体図である。

第３図は、大口部６ａおよび小ロ部６ｂ＠備えた複数の
Ｕ字管を保持する恒温槽を上から見た図である。恒温槽
の上面には反応管を移動させる反応管ターレッ１−１６
が設けてあり、このターレット１６は矢印の方向に所定
ピッチで回動するリング状円板である。一定量の固相を
固定化固相供給袋＠１７から大口部６ａに供給する。次
に、ターレット１６が回動し、サンプル分注器７により
サンプルを一定量加える。このサンプル分注器７は、矢
印の方向に所定ピッチで回動するサンプル１８のサンプ
ルカップ１９からサンプルを、シリンジ２ｏの上下動お
よびプローブ２１の回動と上下動によりＵ字管の大口部
６ａに分注する。このサンプルの分注と同時に又はその
前後において適当な試薬又は緩衝液を分注するように構
成することもできる。２２はＵ字管の小口部６ｂに空気
を送るエアポンプである。小口部６ｂから空気を吹込み
、固定化固相とサンプルを攪拌し完全に反応させる。

次に小口部６ｂから液排出ポンプ２３により未反応の液
を排出する。同時に洗浄用ポンプ２４により大口部６ａ
から洗浄液を供給し、固相とＵ字管の洗浄を）１う。洗
浄液は液排出ポンプ２３により排出する。小口部６ｂの
上面には上下動する円板（図示外）を設け、小口部６ｂ
を介して空気および液を給排する際にこの円板が下降し
て給排チューブが小口部６ｂと連結されるようにし、タ
ーレット１６の回動時には上昇するように配置する。

次に酵素標識抗体を分注器１０により、人口部６ａから
分注する。上に述べたと同様にエアポンプ２２から小口
部６ｂに空気を吹込み攪拌し、液排出ポンプ２３により
液を排出する。洗浄用ポンプ２４により大口部６ａから
洗浄液を供給し、固相とＵ字管を洗浄後、洗浄液を液排
出ポンプ２３１．：より排出する。

次に、試薬分注器１１によって、大口部６ａから試薬を
加え、エアポンプ２２から小口部６ｂに空気を吹込み攪
拌する。次いで、小口部６ｂから減圧ポンプ２５により
反応溶液をホトセル２６に移送する。このホトセル２６
で吸光度を測定する。２７は光源、２８はフィルタ、２
つは受光素子である。

測定後、大口部６ａに密閉連結し得る吸引装置１４によ
りＵ字管の内容物を排出し、小口部６ｂに取付けた洗浄
液供給装置１５により洗浄液を供給しＵ字管を洗浄後、
洗浄液を吸引装置１４により除去する。

上記実施例においてＵ字管を使用して酵素免疫反応を行
わせたが、Ｕ字管に限ら机るものではなく、固相が洗浄
時の洗浄液の除去によって反応容器から吸引排出されな
いような形状、例えば濾斗状、管内に網状のしきり部を
設（プたもの等を使用することができる。

以上述べたように本発明の酵素免疫自動測定機は、分析
途中で自動的に洗浄できる洗′ｆｐ装置を設けたので、
容易に反応物と未反応物の分離を行うことができ、全過
程を自動的に操作することができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は酵素免疫反応の概略図、第２図は本発明による
自動測定機における順次の工程を示す線図、第３図は第
２図に示す自動測定機の構成をさらに詳細に示した図で
ある。１・・・固定化固相、２・・・抗原（抗体）、３・・・
抗原抗体複合物固定化固相、４・・・酵素標識抗体、５
・・・酵素標識抗体−抗原一抗体複合物固定化固相、６
・・・Ｕ字管、７・・・試料分注器、８・・・洗浄水供
給装置、９・・・洗浄水吸引装置、１ｏ・・・分注器、
１１・・・試薬分注器、１２・・・吸引チューブ、１３
・・・フローセル、１４・・・固定化固相吸引装置、１
５・・・小口部用洗浄水供給装置、１６・・・反応管タ
ーレット、２２・・・エアポンプ、２３・・・液排出ポ
ンプ、２４・・・洗浄用ポンプ。

Claims

【特許請求の範囲】

１、標識物質として酵素を用い抗原抗体反応によりサン
プル中の測定対象物質を測定する装置において、抗原あ
るいは抗体等の特異親和性物質を固定化した固相を収容
する反応容器を連続的に搬送する反応容器搬送装置と、
所望の反応容器に酵素標識試薬等の試薬を分注する試薬
分注装置と、固相と反応容器を同時に洗浄し未結合物質
を除去する洗浄装置と、反応後の酵素活性を測定する測
光装置とを具備することを特徴とする酵素免疫自動測定
機。