JPS63211235A - 食欲調節用剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、プロコリノセーゼ（ｐｒｏｃｏｌｉｐａｓｅ
）中に見出されるコリノｅ−ゼ（ｃｏｌｉｐａｓｅ）の
活性化ペプチドよりなる食欲調節用剤又は睡眠剤に関す
るものである。

肥満は、糖尿病、動脈硬化、高血圧、狭心症。

血栓症及びビッククイック症候群のような重篤かつ生命
をおびやかす疾患を随伴することがあり得る。食欲調節
による肥満の減少は、随って上記疾患の処置の際有用で
あることができる。

膵臓は、２つの部分、外分泌部分及び内分泌部分よりな
る。外分泌部分から食物の加水分解に関与する酵素が分
泌され、内分泌部分からいくつかのホルモン、なかんず
く血糖の調節に関与するインシュリンが分泌される。

われわれの食物は巨大分子よりなる。３つの主な群、タ
ンパク質、脂肪及び炭水化物がある。

同化されうるためには、それらは比較的小さい片のアミ
ノ酸、脂肪酸及び単糖類に分解されなければならない。

この分解は、酵素の作用によって腸においておこる。こ
れらの大部分は膵臓から生じる。食物の各群に対して１
つ又はそれ以上の次のもの、すなわち、１つのアミラー
ゼ〔これはデンプン（炭水化物）を開裂する〕、タン白
質を開裂する５つの異なったプロテアーゼ（トリプシン
、キモトリジシン、エラスターゼ、カルボキシペプチダ
ーゼＡ及びＢ）、脂肪を開裂する３つの異なった酵素（
リパーゼ、ホスホリノ櫂−ゼ及びカルボキシエステルヒ
Ｐロラーゼ）がある。これらのうち最も重要なものはリ
パーゼである。これは食用脂肪の主要部分を開成するト
リグリセリＰ（中性脂肪）を加水分解する。すべての高
等動物は、腸内で脂肪を乳化するために胆汁酸塩（肝臓
から胆のうを経由して出される）を有する。リパーゼ自
身は、胆汁酸塩によって全く阻害されるが、この状況に
おいて他の膵臓タン／ぞり質、コリＡ−ぜによって活性
化される。コリノ臂−ゼは％　１０ｋＤの分子量をもつ
タンパク質である。すＡ−ゼの活性化の間にコリパーゼ
は、１：１のモル比でソノ９−ゼに結合する。コリパー
ゼ自身は自らの酵素活性を有さない。コリ・９−ゼによ
るリノぞ−ゼの活性化は、胆汁酸塩があってもなくても
おこる；活性化効果は、胆汁酸塩の存在下に最も明らか
である。

コリＡ−ゼのアミノ酸配列は既知である。おそらく５つ
のジスルヒｒ架橋を有しているために、熱及び酸に対し
て安定である（　０．Ｉ　Ｎ　ＩＩｃｔ中で沸とうさせ
ることによって影響されない）。

これは５つのジスルヒド架橋＋２つの尾部％Ｎ末端及び
Ｃ末端鎖に強く連結されているコアよりなることが特徴
とされる。リパーゼの活性化は、リノ臂−ゼへのコリ／
Ｊ−ゼの結合及び次のリノ臂−ゼーコリパーゼコンプレ
ックスに！ル基’Ｅｔへの結合によっておこる。

すべての膵臓の酵素（アミラーゼおよびリパーゼを除く
）は、不活性又は酵素源形態で膵臓から分泌され、限定
されたタン白質分解にょって腸内で活性化される。膵臓
線中に不活性酵素があることは、膵臓腺自身の酵素分解
（自己分解）Ｋ対する必要な保護である。活性化の際、
活性化ペプチｒとして知られるＮ末端ペプチドが除去さ
れる。どの酵素でも、５〜１０のアミノ酸よりなる自ら
の特性的活性化ペプチドを有する。小腸内のエンテロベ
ゾチダーゼは、トリプシンへのトリプシノーダンの活性
化によって活性化が誘発され、その後トリプシンが残り
の膵臓酵素源を活性化する。

コリパーゼは、プロホームのプロコリパーゼとして存在
する。このための活性化ペプチドは。

５つのアミノ酸よりなる。大部分の動物（ツタ、ラット
、ウマ）の場合、Ｍａｌ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇの外観を有する。ヒトの場合、Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｇ
ｌｙ−Ｐｒ。

−Ａｒｇの外観を有する。このベプチｒは、生物学的活
性を有するように思われ、従って、食欲の調節用剤及び
睡眠剤として薬理学的に使用することができる。

かくして本発明は、ペプチド配列 Ｘ　−Ｐｒｏ　−Ｙ　−Ｐｒｏ　−ｋｒｇ（ただし ａ）　　ＸはＡｌａであり、ＹはＧＩＹであるか、また
は ｂ）　　ｘは’Ｖａｌであり、ＹはＡｓｐであるかまた
はそれらの誘導体である） よりなる、プロコリパーゼの活性化ペプチｙより構成さ
れることを特徴とする、食欲調節用剤及び睡眠剤に関す
る。

その配列の誘導体は、天然プロコリパーゼによるか、Ｃ
末端アミＰＫよるか又は合成重合体に結合されたこのペ
プチド配列によってつくり上げることができる。

ペンタベプチ）’　Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−
Ａｒｇ及びＶａｌ−Ｐｒｏ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａｒｇの
製造は、固体相上での合成（５ｏｌｉｄ　ｐｈａｓｅ　
ｐｅｐｔｉｄｅ　ｓｙｎｔｈｅｇｌｇ　、　２版、スチ
ュアート、Ｊ、Ｍ、及びヤング、　、Ｔ、Ｄ、ピアース
・ケミカル・カンノ二一（１９８４））Ｋよって行なう
ことができる。

経口的に投与されうるため忙は、この薬剤は、誘導体と
する、即ち比較的長い分子に結合させ、かくして胃の既
存の酸環境において破壊されることを防止することがで
きる。この活性化ペプチドは、腸に達するまで遊離され
ない。

ラツ）Ｋついての全身実験は、このペンタペプチドを注
射される時、それらが食欲及び体重を失なうことが明示
されている。このペンタペプチドを投与されたラットは
又、飽満の外うとうと状態、筋弛緩及び睡眠を示す。本
発明による薬剤は、従って、この薬剤が天然に見出され
るという大きな利点を有する、食欲の調節剤並びに睡眠
剤として使用することができる。

ヒトにおける体重過多は、場合によっては強まった食欲
のためであることがあり得る。正常体重のヒトは食事の
始めにある速度で、次にそれよりゆっくり食べ、体重過
多のヒトは、全食事の間中低下しない速度で食べること
が示されている。飽満に達するのに長くかかる。

ラットについての実験を社会人に翻訳される場合、仮説
は、過電過多のヒトが血清中膵臓腺中低いか又は比較的
低い水準のプロコリパーゼ、従って、比較的低い量のベ
プチｒを有するということである。体重過多のヒトは、
ラットの実験における対照ラットに相当し、清足するま
で間断なく大量に食べる。しかし、３時間後には。

かれらは時間を見、再び食べる時間である（社会的・９
ターン）と考え、実際に空腹ではないのに食卓につく。

この食事摂取の、ｅターンは習慣となる。結果は体重過
多である。正常体重のヒトは、本実験においてペプチド
ラッ）Ｋ相当し、かれらは食べ、比較的すぐに飽満に至
る。３時間後、次の食事の時間である時、これらのヒト
は、従って、空腹である。食欲及び食事摂取のパターン
は、これらのヒトの場合にはよく対応し、正常体重が結
果である。これらの人は、仮説として体重過多のヒトよ
り膵臓線中プロコリ、ｅ−ゼが多く、血中活性化ベプチ
ｒが多い。

静脈内投与されたコロリストキニン（ＣＣＫ）は、患者
に比較的早い飽満感を与えることができることが記載さ
れている（キシライフら、Ａｍ、　Ｊ。

Ｃ１１ｎ、　Ｎｕｔｒ　、　３４　：　ｊ　５４〜ｊ　
６０）。ＣＣＫは、膵臓の酵素及びこれらのコリパーゼ
の分泌を刺激する。

この以前の研究された効果は、効果の仲介者としての本
発明によるペプチドＫよる、ＣＣＫの間接の効果である
かも知れない。このことは、ここで説明されたラットに
対する実験をヒトに翻訳することができ、ヒトの医薬の
中で用途を有するという仮説を強めるものである。

このペプチドを腹腔内投与する代りに、静脈内経路によ
って投与することができる。ペレット中に含まれるゾロ
コリパーゼの形態で投与することも適切である。プロコ
リパーゼの多いペレットを投与されたラットは、その食
事摂取においてペプチドのパターンを示す。この場合プ
ロコリパーゼは、明らかＫそのままの形態で胃を通過し
、ラット自身のトリプシンによって腸内で活性化され、
かくしてペンタペゾチＰを遊離する。この観察は、錠剤
の形態のこのペンタ（ブチＰ（安定なプロコリパーゼ分
子として）の可能性のある組成物に関連して重要である
。

実験において比較的高用量は、生長するラットにおいて
体重の低下又はむしろ体重増加の低下を生じる。

本発明によるペプチドは、例えば、医薬用組成物の形態
で、医薬として使用することができる。この医薬用組成
物は１例えば錠剤、フィルム被覆錠剤、Ｐラジエ、硬及
び軟ゼラチンカプセル、溶液、乳濁液又は懸濁液の形態
で経口投与することができる。このペプチドは又、マイ
クロカプセル中に封入することができる。投与は、例え
ば全開の形態で直腸にか、又は例えば注射用溶液の形態
で非経口的にであることもできる。このペプチドは又、
鼻スプレー又は粉末として投与することができる。最後
に舌下剤としての投与が挙げられるべきである。

錠剤、フィルム被覆錠剤、Ｐラジエ及び硬ゼラチンカプ
セルの製造のためには、とのベゾチＰを医薬として不活
性の無機又は有機賦形剤と混合することができる。錠剤
、Ｐラジエ及び硬ゼラチンカプセルの場合には、上記賦
形剤は、乳糖、トウモロコシデンプン又はそれらの誘導
体、メルク、ステアリン酸又はその塩等である仁とがで
きる。

軟ゼラチンカプセルの場合には、植物油、ワックス、脂
肪、半固体又は液体ポリオール等が賦形剤として適して
いる。

溶液又はシロップの製造のためには、水、ポリオール、
サッカロース、転化糖、グルコース等が賦形剤として適
している。

注射用溶液のためには、水、アルコール、ポリオール、
グリセリン、植物油等が賦形剤として適している。

全開のためには、天然及び硬化油、ワックス、脂肪、半
液体又は液体ポリオールが賦形剤として適している。

この医薬用組成物は、保存剤、安定剤、乳化剤、甘味剤
、着色剤、付香剤、滲透圧を変えるための塩、緩衝剤、
糖コーティング、抗酸化部。

も含有することができる。それらは又、外に治療用剤を
含有することができる。

ヒ）　（ｈｏｍｏ）に対する本発明によるペプチドの用
量は、１〜１００ｍ９／日好適には１〜２０即／日の〜
隣下であるべきである。この４ブチＰは、各食事時に投
与されるべきである。

本発明は、次の非限定性の実施例によって例示される。

例 食欲の調節 ラツ）Ｋついての全身実験は、このペンタペプチドを注
射される時食欲及び体重を失なうととを示した。この実
験は、ラットがその日常の栄養摂取に適合するために４
時間の周期に償れなければならないように設計された。

これは、標準ベレットよりなっており、食物を与える前
１５分に、ラットは、ベプチｒ又は食塩を含有する注射
でそれぞれ腹腔内処置され、０％３０分。

６０分、２時間及び４時間の食物摂取を測定した。ラッ
トはある日食塩、次の日ペプチド１食１　塩等を投与さ
れた。典型的なベゾチＰパターン及び食塩パターン（表
１）を観察することができた。対照ラットは、当初大量
に食べ、２時間後金部の１日の必要量を消費していた。

これに反してペプチドラットは、その空腹が比較的早く
飽満され、約１時間後食べることを止め、次にその１日
の必要量の６０〜８０パーセント（ペプチｒの用量によ
って）を食べ、休息し、１時間眠り、再び空腹になり、
２〜４時間の間にその１日の必要量の残りを消費した。

これらの短期実験においては、消費された食物の量は、
ペプチｒの有無で同じ（１０〜１５ｆ）であり、ベゾチ
ｒは、食物摂取の異なった分布をもたらしたのみであっ
た。食物摂取は、ペプチドの注射後ある時間おくれた。

ラットは、食物摂取のパターンの個々の変動のために自
らの対照としてはたらくということが重要であった。

実験が完了した時（異なった用量の（ブチＰ＋対照）、
動物を殺し、膵臓を取り出した。食物摂取と膵臓線中の
プロコリパーゼの量との間に相関があった。対照におい
てペプチドパターンを有していたラットは、その膵臓中
比較的多いプロコリフ４−ゼを有し、従って可能性とし
ては比較的大きいペプチドの内分泌生産を有していた。

このことは、食欲の調節におけるベゾチｒの生理学的機
能に対して、またそれ故に薬理学的用途に対して支持を
与えるものである。

結果を次の表に示す。

表１ ペプチド（２０μｔ）の注射の前及び後４時間の間の食
物摂取。食物の摂取は、ペプチドの有無で同じであり、
１００ノ々−セントと定義され、摂取は１食物の累積摂
取Ａ−セントとして計算される。ラットは、ある日対照
としてはたらき、次の日ペゾチｒが投与される等であっ
た。

食物の摂取（−食物の摂取（＠ 対　照　　　　　ペプチ）’（２０μ？）棒時間　　　
５３．５±　９．２　　　４１．６±１１０１　１　　
　　　７６．７±１６．５　　　　５５．Ｑ±　５．９
２時間　　　９５．９±　６．１　　　６４．５±　８
．２表■ 正常食物（標準ベレット）を与えられたラット、１週間
１回標準ベレット及びイゾチｒ　（２０μｔ）の注射を
与えられたラット及び次の記載に従ってプロコリパーゼ
が添加された標準ペレットが与えられたラットの体重増
加：重量２，５ｆのペレットにドリルでα５×１０鱈の
穴をあけ、その中に５μｔのペプチドを含有する、１０
０μｔのプロコリパーゼに相当するプロコリパ−ゼ溶液
（５４６００単位／ｄ　）　５０μｌを添加した。１０
〜１５Ｆのペレットの１日の消費により、消費されたペ
プチドの量は２０〜３０μｔのペプチドＫ相当した。

正常　　　ｔ＜５７ ベプチｒ（週１回）　　　　　１．５０プロコリパーゼ
ベレツトの効果 連続実験において、ラットの食物摂取をコリパーゼペレ
ットの連続投与によって低下させることができること、
又この効果は可逆的である。

即ちプロコリパーゼ４レツトを普通のペレットに代える
時食物摂取はふたたび上ることが明示された。この実験
は、２匹のラットに１０日間普通のペレット（１期）、
次に１０日間プロコリパーゼペレット（３，７７ｎ　ｒ
ｎｏ１７’？　）　（１１期）、最後に７日間普通のベ
レツ）（１１１期）を与えるように設計された。食物は
、午後４時と午前９時の間１日あたり１７時間利用可能
であった。表ｍに開示される結果は、プロコＩＪ　Ａ−
ゼ期間中食物の摂取が有意に低かったことを示す。

表■ 期！＝標準ベレット　　　　　　１７．８±２．６期ｎ
：ｉ準ペレット＋プロコリ・ぞ−ゼ　　１５．０±１．
８−〇同じ量のコリパーゼ（３，７７ｎ　ｍｏｌ／Ｐ　
）を含有するペレットは食物の摂取に影響を与えず、こ
のことはプロペブチｒの意義を支持する。

遺伝性肥満デツカ−ラットにおけるプロコリパーゼ 遺伝性肥満デツカ−（ｚｕｃｋｅｒ）ラットは、正常実
験用ラットより体重が大きく、食物の摂取が多い。本発
明者らは、肥満ラットの膵臓が正常体重のラットの膵臓
より有意に低い量のプロコリパーゼを有していることを
見出した（表■）。

このことは、ある形態のプロコリパーゼが食物の摂取の
又は体重の正常なコントロールに対して、有意義である
ことを支持する。他の膵臓の酵素、リノ臂−ゼ及びトリ
プリンは正常である。

表■ 遺伝性肥満デツカ−ラット及び正常ラットの体重、食物
摂取及び膵臓の組成。

正常（ｎ＝１３）　　　肥満（ｎ＝４）体重（３月）２
０１６Ｆ　　　　３０８Ｆ食物摂取（９７日）１６８士
１１　　２１．４±α９膵臓の酵素 活性／ダタンパク質 アミラーゼ　　　　　　１．７６±α４５　　　０．７
吐０．１２゜トリプシノーダン　　　６２７七２８　　
　６．０斤０．９７ｎ、ｓジノ９−ゼ　　　　　１９２
．．６±５６．６　１６９．０±４４５ｎ、ｓプロコリ
パーゼ　　２０６．１±４（Ｌ４　　７９．３±２２．
９１９医薬用組成物 本′発明によるペプチドは、普通の医薬用組成物として
投与することができる。このペプチドが１成分である組
成物についていくつかの提案を下に示す。

錠　剤　　　ベプチｌ−″　　　　　　　５ｒｎ９乳糖
　　　１４０■ ステアリン酸Ｍｇ　　　　　　　　　２■酢酸フタノ９
唆セルロース　　　１０■マイクロカプセル　ベプチｌ
−”　　　　　　　　　　　５ｍ９乳Ｆ　　　　１００
１Ｒ９ アビセル　　　　　　　５０ｒｎ９ ：ｘ−−）　ラ−）ｙ　トＬ　　　　　　３０１１１９
１ｖ溶液　　　ベプｆＹ　　　　　　　　５ｍ９ＮａＯ
Ｈアルカリ性−まで適量 ＮａＣ２等張まで 純Ｈ２０１ｍｇ添加 添加ジスプレーペプチド　　　　　　　５■ＮａＯＨ適
量 ＮａＣｔ　　　　　　　　適量 メチルセルロース　　　　　適量 純Ｈ２００，２ｒｄ添加 鼻粉末　　　ペプチド　　　　　　　５ｍ９乳糖　　　
２［３Ｎｉ 舌下剤　　　ペプチド　　　　　　　５■乳糖　　　１
４０〜

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）ペプチド配列 Ｘ−Ｐｒｏ−Ｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ （ただし ａ）ＸはＡｌａであり、ＹはＧｌｙであるか、または ｂ）ＸはＶａｌであり、ＹはＡｓｐであるか、またはそ
   れらの誘導体である） よりなるプロコリパーゼ中に見いだされるコリパーゼの
   活性化ペプチドより構成されることを特徴とする食欲調
   節用剤又は睡眠剤。 ２）プロコリパーゼであることを特徴とする特許請求の
   範囲第１項記載の薬剤。 ３）合成重合体に結合されたこのペプチド配列よりなる
   ことを特徴とする特許請求の範囲第４項記載の薬剤。 ４）活性成分として特許請求の範囲第１〜３項のいずれ
   か記載の薬剤よりなる医薬用組成物。 ５）投薬単位の形態の特許請求の範囲第４項記載の医薬
   用組成物。 ６）医薬として受容されうる担体に配合されている活性
   成分よりなる特許請求の範囲第４〜５項記載の医薬用組
   成物。 ７）体重過多又は睡眠障害の処置を必要とする宿主に特
   許請求の範囲第１〜３項のいずれか記載の薬剤の有効量
   を投与することを特徴とする哺乳類（ヒトを含む）の上
   記の処置法。 ８）治療活性物質として使用するための特許請求の範囲
   第１〜３項のいずれか記載の薬剤。 ９）体重過多又は睡眠障害に対して効果を有する医薬の
   製造のための特許請求の範囲第１〜３項のいずれか記載
   の薬剤の用途。 １０）ペプチド配列 Ｘ−Ｐｒｏ−Ｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ （ただし ａ）ＸはＡｌａであり、ＹはＧｌｙであるか、または ｂ）ＸはＶａｌであり、ＹはＡｓｐであるか、又はそれ
   らの誘導体である） よりなるコリパーゼの活性化ペプチドを医薬として受容
   されうる担体と混合することを特徴とする医薬用組成物
   の製法。