JPS63127159A - パラトルモンの定量方法 - Google Patents
パラトルモンの定量方法Info
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- JPS63127159A JPS63127159A JP62258174A JP25817487A JPS63127159A JP S63127159 A JPS63127159 A JP S63127159A JP 62258174 A JP62258174 A JP 62258174A JP 25817487 A JP25817487 A JP 25817487A JP S63127159 A JPS63127159 A JP S63127159A
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分野］
本発明は、生体標本中の副甲状腺ホルモンまたはパラト
ルモン（以下２丁Ｈと言う、）の定量方法に関する。
ルモン（以下２丁Ｈと言う、）の定量方法に関する。
［従来の技術及び解決すべき問題点］
ＭＨは、上皮小体によって合成されるポリペプチドホル
モンである。これは、主として血液中で、完全な形であ
るいはフラグメントとして見出される。フラグメントは
活性（ＮＨ２末端）のものもあり、不活性（ＣＯＯＨ末
端）のものもある。
モンである。これは、主として血液中で、完全な形であ
るいはフラグメントとして見出される。フラグメントは
活性（ＮＨ２末端）のものもあり、不活性（ＣＯＯＨ末
端）のものもある。
ＰＴＨは、血液中で極めて急速に減成する（２０分以下
の半減期）。
の半減期）。
ＰＴＨは種々の生理的作用を有する。特に、カルシウム
及びリン代謝に関与し、ビタミンＤの腸吸収を促進する
。 ＰＴＨ分泌の調節は、血しようカルシウムのイオン
化分と関連がある。
及びリン代謝に関与し、ビタミンＤの腸吸収を促進する
。 ＰＴＨ分泌の調節は、血しようカルシウムのイオン
化分と関連がある。
上皮小体の異常には、２種類、即ち機能減退即ち副甲状
腺機能低下症と、機鮨冗新すなわち副甲状腺機能亢進症
とがある。後者は、カルシウムについて血液が枯個する
場合は、「続発性」または反応性のものであり得る。ま
た、特に上皮小体腫瘍による「原発性」のものであって
、強い骨や内蔵的発理を有することもある。
腺機能低下症と、機鮨冗新すなわち副甲状腺機能亢進症
とがある。後者は、カルシウムについて血液が枯個する
場合は、「続発性」または反応性のものであり得る。ま
た、特に上皮小体腫瘍による「原発性」のものであって
、強い骨や内蔵的発理を有することもある。
これらの障害を全て検出し、特にタイミングよく腫瘍を
見つけ出すためには、生体標本、特に血液、血清または
血しょう中のパラトルモン濃度を測定できることが必要
である。
見つけ出すためには、生体標本、特に血液、血清または
血しょう中のパラトルモン濃度を測定できることが必要
である。
公知の最も好適な定量技術は、免疫学的方法である。
パラトルモンの免疫定量法の性能は、副甲状腺機能亢進
症、特に原発性型のものに罹患している患者と、正常の
患者とを判別する能力にある。
症、特に原発性型のものに罹患している患者と、正常の
患者とを判別する能力にある。
実際のところ、はとんどの定量方法について、「偽陽性
」標本が正常周囲中に見られ、免疫定量法による正常ケ
ースと原発性副甲状腺機能亢進症との判別を極めてきわ
どいものとしている。
」標本が正常周囲中に見られ、免疫定量法による正常ケ
ースと原発性副甲状腺機能亢進症との判別を極めてきわ
どいものとしている。
正常被験者におけるパラトルモン値のこの異常な−Ｅ昇
は、血しょう中の干渉プロティン、あるいはパラトルモ
ンのキャリヤでありパラトルモン貯蔵所の役割りを果す
ように見えるプロティンの存在によるものである。
は、血しょう中の干渉プロティン、あるいはパラトルモ
ンのキャリヤでありパラトルモン貯蔵所の役割りを果す
ように見えるプロティンの存在によるものである。
［問題点を解決するための手段］
本発明は、これらの干渉源を除去することができる方法
を提案するものである。この［］的のために、定量すべ
き生体標本を、予め干渉となるかあるいはＰＴＨのキャ
リヤとなるプロティンの抽出処理に付すこととしている
。
を提案するものである。この［］的のために、定量すべ
き生体標本を、予め干渉となるかあるいはＰＴＨのキャ
リヤとなるプロティンの抽出処理に付すこととしている
。
この抽出は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）により
行う、ポリエチレングリコールとしては、ＰＥＧ ６０
００が好ましい。
行う、ポリエチレングリコールとしては、ＰＥＧ ６０
００が好ましい。
本発明によれば、このＰＥＧによる処理に続いて、公知
の免疫定量、好ましくは放射線免疫検定法により定量が
行われる。
の免疫定量、好ましくは放射線免疫検定法により定量が
行われる。
本発明による定量法に好適な生体標本は、好ましくは、
血液、血清または血しょう標本である。
血液、血清または血しょう標本である。
本発明は、実施例及び確定したＰＴＨ含有量を示す図か
ら、よりよく理解されるであろう。
ら、よりよく理解されるであろう。
■及び・は、それぞれ、２２人の正常被験者（左、 欄
）及び原発的副甲状腺機能亢進症に罹患している１３人
（右［）のＰＥＧ ６０００による血しょう標本の処理
の前及び後の確定したＰＴＨ含有量を示す。
）及び原発的副甲状腺機能亢進症に罹患している１３人
（右［）のＰＥＧ ６０００による血しょう標本の処理
の前及び後の確定したＰＴＨ含有量を示す。
丈漣勇１：分析設計
ＰＥＧ ６０００による標本の処理
０．２ｍｌ ノＰＥＧ ６０００（４０％重量／容量）
をポリスチレン試験管内の０．４１の標準標品即ち血し
よう標本に添加する。
をポリスチレン試験管内の０．４１の標準標品即ち血し
よう標本に添加する。
試験管内容物を攪拌した後、後者を、３０００ｒｐ■の
速度で１５分間遠心分離機にかける。
速度で１５分間遠心分離機にかける。
次いで、各試験管中の上澄みを回収し、定量に用いる。
放射線免疫検定法による上澄み中のバラトルセン０定ユ
使用した抗血清は、うじのパラトルモンによる免疫処理
によりラビット中に得た。
によりラビット中に得た。
参考標品は、人間のパラトルモンの合成フラグメント４
４−６８により作成した。４３位置でチロシン化（ｔｙ
ｒｏｓｙ １ａｔｅｄ）された合成フラグメント４４−
８８は、ヨウ素１２５により標識した。
４−６８により作成した。４３位置でチロシン化（ｔｙ
ｒｏｓｙ １ａｔｅｄ）された合成フラグメント４４−
８８は、ヨウ素１２５により標識した。
０．１１の上澄み（種々の用量の参考標品または血しょ
う標本）と、０．１１の希釈抗血清を４℃で一晩装置し
た。次いで、０．１１のトレーサ（±ｏ、ｏ２ｐｃｉ）
を添加した。４℃、４時間の温置後、ラビットのガンマ
壷グロブリンに対して逆方向となるとともにＰＥＧ ６
０００ （６Ｋ重量／容量）を含む抗血清を試験管すべ
てに添加した。
う標本）と、０．１１の希釈抗血清を４℃で一晩装置し
た。次いで、０．１１のトレーサ（±ｏ、ｏ２ｐｃｉ）
を添加した。４℃、４時間の温置後、ラビットのガンマ
壷グロブリンに対して逆方向となるとともにＰＥＧ ６
０００ （６Ｋ重量／容量）を含む抗血清を試験管すべ
てに添加した。
室温で２０分間温芒したところ、抗原抗体複合体はすべ
て沈殿した。試験管を３００Ｏｒｐｍで１５分間遠心分
離機にかけ、プレット中に存在する放射源を測定した。
て沈殿した。試験管を３００Ｏｒｐｍで１５分間遠心分
離機にかけ、プレット中に存在する放射源を測定した。
参考曲線を形成し、この曲線を使用して補間することに
より標本中のパラトルモン濃度を定量する。
より標本中のパラトルモン濃度を定量する。
実施例２：実施例１で略述した分析を用いて得た、
結果 正常被験者の２２個の血しょう標本と、副甲状服機能冗
進症に罹っている被験者の１３個の血しょう標本を、
ＰＥＧ ６０００による処理の前後で検定した。
結果 正常被験者の２２個の血しょう標本と、副甲状服機能冗
進症に罹っている被験者の１３個の血しょう標本を、
ＰＥＧ ６０００による処理の前後で検定した。
添付の図面に示すように、パラトルモン値が５００ピコ
グラム／ ｍｌ（ｐｇ／ｍｌ）を超える。２２人の正常
人中の５人は、ＰＥＧによる処理をした後では、パラト
ルモン値に実質的な低下がある。 １７人の他の正常人
の場合には、処理後ＰＴＨ値にわずかな減少が見られる
。
グラム／ ｍｌ（ｐｇ／ｍｌ）を超える。２２人の正常
人中の５人は、ＰＥＧによる処理をした後では、パラト
ルモン値に実質的な低下がある。 １７人の他の正常人
の場合には、処理後ＰＴＨ値にわずかな減少が見られる
。
これとは対照的に、原発性副甲状腺機能光道症に罹って
いる患者では、パラトルモン値が処理前にすでに非常に
高い２人の患者の場合に、ＰＥＧ６０００による処理後
に、パラトルモン値に実質的な上昇が見られる。処理後
のパラトルモン値の低下は、１人の患者で見られる。原
発性の副甲状腺機能先進症の他のケースでは、ＰＥＧ
１（０００による処理の前後で有意の変化は見られない
。
いる患者では、パラトルモン値が処理前にすでに非常に
高い２人の患者の場合に、ＰＥＧ６０００による処理後
に、パラトルモン値に実質的な上昇が見られる。処理後
のパラトルモン値の低下は、１人の患者で見られる。原
発性の副甲状腺機能先進症の他のケースでは、ＰＥＧ
１（０００による処理の前後で有意の変化は見られない
。
下表は、種々のケースについて得られた平均及び極端値
をまとめたものである。
をまとめたものである。
［発明の効果］
このように、ＰＥＧによる標本処理後、抽出処理をせず
に得た結果と対比して、正常集団と、原発性副甲状腺機
能亢進症に罹っている被験者集団とを完全に区別するこ
とができる。
に得た結果と対比して、正常集団と、原発性副甲状腺機
能亢進症に罹っている被験者集団とを完全に区別するこ
とができる。
図は、ＰＥＧ ＥｉＯｏｏによる血しょう標本の処理の
前及び後の確定したＰＴＨ含有量を示し、■及び・は、
それぞれ、２２人の正常被験者及び原発的副甲状腺機能
亢進症に罹患している１３人の血しょう標本の処理の前
及び後のＰＴＨ含有量を示す。
前及び後の確定したＰＴＨ含有量を示し、■及び・は、
それぞれ、２２人の正常被験者及び原発的副甲状腺機能
亢進症に罹患している１３人の血しょう標本の処理の前
及び後のＰＴＨ含有量を示す。
Claims (4)
- （１）パラトルモン（ＰＴＨ）を生体標本中で測定する
ことができる免疫定量式の定量方法において、実際の定
量を行う前に、生体標本を、干渉となるかあるいはＰＴ
Ｈのキャリヤとなるプロテインのポリエチレングリコー
ル（ＰＥＧ）による抽出処理に付すことを特徴とするパ
ラトルモンの定量方法。 - （２）ポリエチレングリコールがＰＥＧ６０００である
特許請求の範囲第１項記載のパラトルモンの定量方法。 - （３）生体標本が血流、血清または血しようである特許
請求の範囲第１項記載のパラトルモンの定量方法。 - （４）免疫定量が放射線免疫検定である特許請求の範囲
第１項記載のパラトルモンの定量方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR8614184 | 1986-10-13 | ||
| FR8614184A FR2605109B1 (fr) | 1986-10-13 | 1986-10-13 | Procede de dosage de la parathormone |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63127159A true JPS63127159A (ja) | 1988-05-31 |
Family
ID=9339782
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62258174A Pending JPS63127159A (ja) | 1986-10-13 | 1987-10-13 | パラトルモンの定量方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0265327B1 (ja) |
| JP (1) | JPS63127159A (ja) |
| AT (1) | ATE57022T1 (ja) |
| DE (1) | DE3765223D1 (ja) |
| ES (1) | ES2017741B3 (ja) |
| FR (1) | FR2605109B1 (ja) |
| GR (1) | GR3000880T3 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2743891B1 (fr) * | 1996-01-18 | 1998-04-10 | Immunotech Sa | Procede pour l'identification ou le dosage immunologique d'antigenes polypeptidiques |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4369138A (en) * | 1980-07-15 | 1983-01-18 | Immuno Nuclear Corporation | Parathyroid radioimmunoassay |
| US4508828A (en) * | 1983-03-21 | 1985-04-02 | Immuno Nuclear Corporation | Bioassay of parathyroid hormone |
-
1986
- 1986-10-13 FR FR8614184A patent/FR2605109B1/fr not_active Expired
-
1987
- 1987-10-13 DE DE8787402283T patent/DE3765223D1/de not_active Expired - Fee Related
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- 1987-10-13 EP EP87402283A patent/EP0265327B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1987-10-13 JP JP62258174A patent/JPS63127159A/ja active Pending
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-
1990
- 1990-09-27 GR GR90400696T patent/GR3000880T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3765223D1 (de) | 1990-10-31 |
| ES2017741B3 (es) | 1991-03-01 |
| EP0265327A1 (fr) | 1988-04-27 |
| GR3000880T3 (en) | 1991-11-15 |
| ATE57022T1 (de) | 1990-10-15 |
| FR2605109A1 (fr) | 1988-04-15 |
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| FR2605109B1 (fr) | 1989-02-03 |
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