JPS6228155B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

この発明は医薬として活性なジインドールアル
カロイドもしくはその酸付加塩を製造する方法に
関係する。 周知のように、ジインドール骨格をもつビンカ
ロゼアＬのマイナーアルカロイドは有益な毛細血
管うつ血性効果を有している（米国特許明細書第
3097137号および同第3205220号；）。これらのマ
イナーアルカロイドのうち、最も有益と見なされ
るビンクスチンはアルカロイド総含有量の百分の
数％を占めるもので、一方効果の劣るビンブラス
チンおよびビンリユウロシンはアルカロイド総含
有量基準で約１〜２％の量で存在する。 近年、後者の二種のアルカロイドの需要は、か
なり高まつて来たが、このことはビンブラスチン
が半合成方法により、より有益なビンクリスチン
に変換でき、しかもビンリユウロシンのＮ−ホル
ミル誘導体も従来公知の毛細血管うつ血薬剤に耐
性の腫瘍の増殖を阻止することを認めることによ
るものといえよう。 この分野における新しい研究は、カルボキシア
ミドおよびデアセチル誘導体のような更に効果的
な半合成アルカロイド誘導体の製造（公知された
ドイツ特許出願1795763号および同第2415890号）
並びにビンカジオリン（vincadioline）、リユウロ
コロンバイン（leurocolombine）（米国特許明細
書第3887565号および同第3890325号）および４−
デアセトキシ−ビンブラスチン（N.Neuss，A.J.
BarnesおよびL.L.Huckstep「Experimentia」
31／１，18〜19頁（1975年））のような他のマイ
ナーアルカロイドの単離に向けられてきた。 前記の他のマイナーアルカロイドの単離はクロ
マトグラフイーの技法における改良、より詳しく
述べれば、高圧のクロマトグラフの使用によつて
可能となつた。このような装置を用いると、かな
り近似した物理定数および化学構造の化合物でさ
え成功裡に相互分離できる。現在、高圧クロマト
グラフは実験室規模の操作で成功裡に使用できる
が、それらの利用は極めて複雑で、かつ大規模の
技術において高価である。 エヌ・ニユース（N.Neuss）外
（「Experimentia」31／１，18〜19頁（1975
年））はビンブラスチンを２回のクロマトグラフ
イーの分離および２回の再結晶によつて、以前に
知られていなかつたビンブラスチンの付随アルカ
ロイドである。４−デアセトキシ−ビンブラスチ
ンを単離することに成功した。ビンブラスチンお
よび４−デアセトキシ−ビンブラスチンのU.V.
およびI.R.スペクトルは極めて近い関係にあり、
そしてそれらの保持因子間の差0.03にすぎない。
前記した公報において著者は二種のアルカロイド
の分離技法および構造決定に関連して生じた困難
事を述べているがこの新規なアルカロイドの薬理
学的もしくは他の効果に関する報告はしてなかつ
た。 本発明は４−デアセトキシ−ビンブラスチンが
抗腫瘍作用を有するビンブラスチンおよび他のジ
インドールアルカロイドより、驚異的な薬理学的
利益を有することの確認に基づくものである。 本発明の方法において、マイナージインドール
アルカロイドの硫酸塩を多く含んだ混合物を出発
物質として用いる。この混合物はそれ自身公知の
方法に従つて前記植物（ビンカロゼアＬ）から単
離される。 新しく考え出した方法によれば、アルカロイド
塩の豊富な混合物の次のように処理する。 アルカロイド塩の混合物のアルカノール性溶液
を有機塩基で処理してアルカロイド塩基を遊離さ
せる。ビンリユウロシン塩基は反応混液から分離
し、過し、そして液を減圧下で蒸発する。残
留物を有機溶媒中に溶かし、前記アルカロイド塩
基を遊離するのに用いた有機塩基の塩を分離す
る。分離した副生成物を過し、そして液をリ
ン酸塩緩衝水溶液（PH＝3.7ないし4.3）で抽出す
る。この水性−酸性抽出物をリン酸でPH3.7ない
し4.1に酸性化し、そして次にこの酸性溶液を塩
素化炭化水素で抽出する。ビンブラスチンの大部
分は塩素化炭化水素相から単離し、そして水性−
酸性相を更に試験する。 上記処理により、ビンブラスチンの付随アルカ
ロイドが水性−酸性相中に豊富にあることがわか
つた。 更に、その他の、既知であるビンクリスチン、
Ｎ−デメチル−ビンブラスチンおよび少量の残留
ビンブラスチン、４番目のアルカロイドである４
−デアセトキシ−ビンブラスチンは付随アルカロ
イドの混合物中においても検知できることがわか
つた。 この４種のアルカロイドの分離可能性を調べる
と、ビンブラスチンから分離するのが困難な物質
であるＮ−デメチル−ビンブラスチンをビンクリ
スチンへ変換するためにアルカロイドの混合物を
ホルミル化すると、三成分のみを含むアルカロイ
ド混合物が得られ、これは簡単な抽出操作および
慣用のカラムクロマトグラフ上で行つたクロマト
グラフイーを実施することにより容易に個々の成
分に分けることができる。 ４−デアセトキシ−ビンブラスチン硫酸塩の薬
理学的性質を調べるとき、この化合物の腫瘍阻止
効果はビンブラスチンのものと大よそ同じであつ
ても、デアセトキシ化合物はビンブラスチンより
はるかに毒性が低いことがわかつた。麻痺症状を
伴う神経毒は構造関係化合物（たとえば、ビンク
リスチンおよびビンブラスチン）の有する特徴的
な不利な副作用であるが、デアセトキシ化合物の
投与の間には全く現われない。 ラツトおよびマウスの移植癌について薬理試験
を実施した。BDF₁マウスにおいて、L1210／VS
（ビンカー感受性）マウスリンパ性白血病および
L1210／Ref（ビンカ−不応性）マウスリンパ性
白血病に及ぼす作用を試験し、エーリツヒ腹水腫
瘍およびS37腹水肉腫に及ぼす作用をスイスマウ
スにおいて調べ、一方ノビコフ血腫
（Novikoffhepatoma）に及ぼす作用をウイスター
ラツトについて試験した。 ４−デアセトキシ−ビンブラスチン硫酸塩を生
理食塩水に溶かし、そしてこの溶液を被験動物の
腹腔内に投与した。この試験において、延命効果
（生存期間の平均的延長日数）および腫瘍抑制効
果を未処置の対照に相関して調査した。これらの
結果を第１表に示す。この表において「Ｔ／Ｃ」
の記号は処置動物の対照に対する割合を示し、そ
して「限度日数」という表現は対照群で観察され
た平均生存期間の４倍を意味する。

【表】 公知のビンカアルカロイドに耐性のL1210／
Ref白血病は４−デアセトキシ−ビンブラスチン
にも感受性ではないことがこの表から明らかであ
る。他方、その他の全移植癌について有意な用量
−依存性阻止効果が観察でき、前記阻止効果はノ
ビコフ血腫について最も著しかつた。４−デアセ
トキシ−ビンブラスチン硫酸塩をラツトもしくは
マウスに１ないし10mg／Kg好ましくは１ないし６
mg／Kgの日用量で投与するとき、生存期間は約50
〜250％で増す。 人の治療においては、静脈内もしくは注入投与
方法がすすめられる。本化合物は0.1〜0.5mg／Kg
の日用量で投与できる。 ４−デアセトキシ−ビンブラスチンの毒性資料
を他の公知のビンカアルカロイドと比較して第２
表に示す。

【表】 従つて、本発明はマイナージインドールアルカ
ロイドの酸付加塩の豊富な混合物から高純度の４
−デアセトキシ−ビンブラスチンを製造するに当
たり、マイナージインドールアルカロイドの酸付
加塩の粗製混合物を塩基の溶液で処理し、得られ
た懸濁液をロ過し、得られた母液を蒸発させ、残
留物を有機溶剤に溶かし、得られた溶液をPH3.7
〜4.3のリン酸塩緩衝水溶液で抽出し、分離した
水性−酸性抽出物を塩素化炭化水素で抽出し、そ
して塩素化炭化水素相を酸性−水性相から分離
し、前記工程で得られた水性−酸性相のPHを塩基
で8.5〜9.2に調節し、この水性−アルカリ性溶液
を塩素化炭化水素で抽出し、４−デアセトキシ−
ビンブラスチンを含有する前記塩素化炭化水素相
を蒸発し、残留物をホルミル化し、ホルミル化後
に得られた混合物のPHを塩基で8.5〜9.2に調節
し、このアルカリ性溶液をベンゼン型炭化水素も
しくは塩素化炭化水素で抽出し、この抽出液を蒸
発し、４−デアセトキシ−ビンブラスチンを含む
生成残留物を部分的に脱活性化したアルミナ上の
クロマトグラフイーにかけ、得られた溶出液から
高純度の４−デアセトキシ−ビンビラスチンを分
離することを特徴とする。 本発明による方法の第一程において、ジインド
ールアルカロイドの酸付加塩の混合物、好ましく
はそれぞれの硫酸塩の混合物を有機溶媒に溶か
す。溶媒として好ましくはアセトンもしくは
C_1〜5脂肪族アルコール、特にメタノールが使用
できる。この溶解は０゜〜50℃の温度、好ましく
は室温において実施される。 この溶液はモノエチルアミン、ジエチルアミン
もしくはピリジンのような塩基で処理し、ジイン
ドールアルカロイド塩基を遊離する。リユウロシ
ン塩基は０〜25℃において溶液から分離する。分
離を完全に達成するためにこの溶液を０℃に冷却
することもできる。分離したリユウロシンを取
し、溶解工程で用いた同一溶媒で洗浄し、そして
乾燥した。得られた粗製のリユウロシンは所望な
らば、再結晶のような公知方法によつて精製でき
る。所望ならば、リユウロシン塩基はその酸付加
塩、好ましくは硫酸塩に変えることができる。 混合液からリユウロシン塩基を分離するときに
得られた母液は減圧下で蒸発する。この残留物を
有機溶媒、好ましくはベンゼン、トルエンもしく
はキシレンのようなベンゼン型溶媒に溶かす。ベ
ンゼンが特に好ましい溶媒であるとわかつた。こ
の工程で、ジインドールアルカロイドの塩基を遊
離するのに用いた有機塩基（たとえば、モノメチ
ルアミン、ジエチルアミン、ピリジン等）の塩
（たとえば、硫酸塩）が析出し、そして除去でき
る。この固体の除去後、液をPH3.7〜4.3、まし
くはPH４±0.1のリン酸塩緩衝水溶液で抽出す
る。この水性−酸性抽出物を合併し、そしてこの
溶液のPHを酸、好ましくはリン酸で3.5〜4.1、更
に好ましくは4.0±0.1に調節する。生じた水性−
酸性溶液を塩素化炭化水素、好ましくは塩化メチ
レンで抽出し、そしてこれらの相を分離する。塩
化メチレン抽出液を合併し、硫酸ナトリウム上で
乾燥し、過し、そして液を減圧下で蒸発乾固
する。この操作はビンブラスチンを残留物として
生成するが、場合によつてその残付加塩、好まし
くは硫酸塩に変えることができる。 その後、この混液に塩基、好ましくはアンモニ
ア水を添加することによつて水性−酸性相のPHを
7.5〜10、好ましくは8.5〜９に調節する。 このアルカリ性溶液を水混和性有機溶媒、好ま
しくは塩化メチレンもしくはクロロホルムのよう
な塩素化炭化水素で抽出する。この抽出液を合併
し、蒸発し、そしてビンクリスチン、Ｎ−デメチ
ル−ビンブラスチン、少量のビンブラスチンおよ
び４−デアセトキシ−ビンブラスチンを含む回収
残留物をホルミル化する。ホルミル化剤として蟻
酸および無水酢酸の混合物を用いることが好まし
い。この反応でＮ−デメチル−ビンブラスチンは
定量的にビンクリスチンに変化する。この反応の
終了時に、混合物を５〜15倍、好ましくは10倍量
の水で希釈し、そして希釈した溶液のPHを7.5〜
10、好ましくは8.5〜９に調節する。 このアルカリ性溶液を水不混和性有機溶媒、好
ましくはベンゼン、トルエン、キシレン、塩化メ
チレンもしくはクロロホルム等のようなベンゼン
型炭化水素もしくは塩素化炭化水素で抽出する。
ベンゼンが特に好ましい抽出剤である。抽出物を
合併し、そして減圧下で蒸発する。ビンクリスチ
ン、ビンブラスチンおよび４−デアセトキシ−ビ
ンブラスチンを含む残留物を有機溶媒もしくは溶
媒混合物、好ましくはベンゼン型炭化水素および
塩素化炭化水素の混合物、特にベンゼンおよびク
ロロホルムの混液に溶かし、そしてこの溶液をカ
ラムクロマトグラフイーにかける。吸着アルミナ
として、特に部分的に脱活性化したアルミナを用
いる。この溶出は有機溶媒混液、特にベンゼンお
よびクロロホルムの二成分を異なる量で含有する
混液で実施することが好ましい。 クロマトグラフイーの留分は薄層クロマトグラ
フイーによつて検査することが好ましく、同一ア
ルカロイド成分を含有する留分を合併する。ビン
クリスチンおよびビンブラスチンを含む留分は
各々公知技法に従つて処理し、一方、４−デアセ
トキシ−ビンブラスチンを含む留分は合併した溶
液を蒸発乾固することによつて処理する。所望な
らば、得られた粗製の４−デアセトキシ−ビンブ
ラスチンは再結晶によつて精製してもよいし、又
はその酸付加塩に変換することもできる。 ４−デアセトキシ−ビンブラスチンおよび／又
はその酸付加塩は経口および／又は非経口的に一
日一回の用量でもしくは一日数回に小分けして投
与できる。非経口用法、主として静注ルートが特
に好まれる投与方法であることがわかつた。 非経口的に投与できる製剤を製造するために
は、活性剤を蒸留水もしくは生理食塩水および／
又は、場合によつては、低級脂肪族アルコールも
しくはグリコールエーテル（たとえば、エチレン
グリコールモノエチルエーテル）のような有機溶
媒に溶解する。注射可能な溶液は場合によつて、
ポリオキシエチレンソルビタン誘導体（たとえ
ば、Tween20，Tween60，Tween80）のような
溶解助剤並びに保存剤（たとえば、ベンジルアル
コール、ｐ−オキシ−安息香酸エステル等）、抗
酸化剤（たとえば、アスコルビン酸、ピロ亜硫酸
ナトリウム、トコフエロール等）、キレート化剤
（たとえば、エチレンジアミンテトラ酢酸塩）、緩
衝剤等のような他の補助剤を含むことができる。
本医薬製剤はリドカインのような局所麻酔等を含
んでいてもよい。固体の組成物は、様々な担体、
たとえば、乳糖等を含むことができる。 本発明の方法は、以下の非限定例を以つて詳し
く説明されよう。 ４−デアセトキシ−ビンブラスチンの物理定数
は以下のように測定した。オプトン（Opton）型
旋光計上で旋光能を測定し、NMRスペクトルは
ヴアリアン（Varian）EM360型分光計上におい
て溶媒としてジユウテリオクロロホルムおよび内
部標準としてテトラメチルシランを用いて記録し
た。 例 １ 粗製４−デアセトキシ−ビンブラスチン 粗製のジインドールアルカロイド硫酸塩の混合
物50ｇを室温においてメタノール300mlに溶か
し、そしてこの溶液にジエチルアミン13mlをかき
まぜながら、添加した。この溶液を０℃において
１時間保つたところ、粗製のリユウロシン塩基が
結晶形態で析出した。この結晶を取し、少量の
メタノールで洗浄し、そして真空中で乾燥した。 収量：粗製のリユウロシン塩基6.4ｇで、これ
は出発ジインドールアルカロイド硫酸塩混合
物にもともと存在するリユウロシンの90〜95
を含む。 この粗製のリユウロシン塩基を再結晶によつて
精製した。所望ならば、この化合物をその硫酸塩
に変換する。 粗製のリユウロシン塩基を分離するとき得られ
た液を減圧下で蒸発乾固し、そして残留物をベ
ンゼン2500mlにとかした。この操作の間に、ジエ
チルアミン硫酸塩は結晶形態で析出した。この結
晶を取し、少量のベンゼンで洗浄し、そして貯
蔵した。この塩はジエチルアミン塩基を回収する
のに用いることができた。 このベンゼン液をリン酸塩緩衝水溶液（PH＝
4.0±0.1）2500mlで３回宛抽出した。このリン酸
塩緩衝溶液は乾燥ジヒドロリン酸ナトリウムを水
に10重量％とかし、この溶液のPHを0.1Nリン酸
で前記値に調節することによつて製造した。抽出
工程において生成された相を放置分離し、そして
この水溶液を合併した。本水溶液のPHは、更に
0.1Nリン酸を加えることによつて4.0±0.1に調節
し、そして次にこの溶液を塩化メチレン2500ml４
回宛で抽出した。塩化メチレン相を合併し、硫酸
ナトリウム上で乾燥し、そして減圧下で蒸発乾固
した。 収量：ビンブラスチン25ｇ、これは直接、即
ち、これ以上精製せずにビンクリスチンの半
合成製造に用いることができた。 得られたビンブラスチン25ｇをメタノール80ml
にとかし、そしてこの溶液を0.3容量％エタノー
ル性硫酸で酸性化しPH＝５にした。放置したとこ
ろ、ビンブラスチン硫酸塩は結晶形態で析出し
た。 水性−酸性相のPHは濃アンモニア水で8.5〜9.0
に調節し、そしてこのアルカリ性溶液をクロロホ
ルム800ml４回宛で抽出した。このクロロホルム
抽出液を合併し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、そ
して過した。液を減圧下で蒸発し、そして残
留物（無定形アルカロイド混合物８ｇ）を蟻酸45
mlおよび無水酢酸11mlの混合液に溶かした。この
溶液を室温において５〜15分間放置し、そして次
に予じめ５℃に冷却した。10倍量の蒸留水で希釈
した。希釈した溶液のPHを濃アンモニア水で8.5
〜9.0に調節し、そしてこのアルカリ性の溶液を
ベンゼン800ml４回宛で抽出した。ベンゼン抽出
液を合併し、減圧下で蒸発し、そして残留物（無
定形アルカロイド混合物6.9ｇ）をベンゼンおよ
びクロロホルムの１：１混液42mlに溶かした。こ
のアルカロイドをカラムクロマトグラフイーによ
つて互に分離した。ベンゼンおよびクロロホルム
の１：１混液中のアルミナ（活性度：−Ｖ）
345ｇの懸濁液を直径４cmのカラムに充填し、そ
してこの被処理溶液をカラム上に注いだ。 カラム上に吸着されたアルカロイドは次のよう
にして溶出した。 ベンゼンおよびクロロホルムの９：１混液で溶
出をはじめ、そして流出液を100mlの留分宛に回
収した。これらの留分を薄層クロマトグラフイー
（吸着剤：アルミニウム箔上のアルミナ
（Merck）；展開剤：ベンゼン100ml、クロロホル
ム50mlおよびジエチルアミン7.5mlの混液）にか
けた。４−デアセトキシ−ビンブラスチンを含有
する第３ないし10留分を合併し、そして減圧下で
蒸発した。粗製の４−デアセトキシ−ビンブラス
チン1.7ｇを取得した。 第10ないし36留分はベンゼンとクロロホルムと
の４：１混液で溶出し、そして各々の留分を前記
のような薄層クロマトグラフイーで験査した。 第11ないし19留分を一緒にし、そして減圧下で
蒸発乾固した。アルカロイド混合物を0.6ｇ取得
したが、これはビンブラスチンおよび４−デアセ
トキシ−ビンブラスチンを１：１の割合で含んで
いた。この混合物は第二クロマトグラフイーの処
理を行つた。 残留物をベンゼンおよびクロロホルムの１：１
混液に溶かし、この溶液をアルミナ（活性度：
−）で充填したカラム上で使用し、そして次に
溶出を上記のように実施した。 収量：ビンブラスチン0.18ｇおよび４−デアセ
トキシ−ビンブラスチン0.20ｇ 所望ならば、この後者のクロマトグラフイーの
工程を10の平行試験で得た合併残留物について実
施できた。 第20ないし24留分を合併し、そして減圧下で蒸
発した。ビンブラスチン0.9ｇを取得した。 第25ないし36留分はデアセチル−ビンブラスチ
ンを0.3ｇ含んでいた。 第36ないし45留分はベンゼンおよびクロロホル
ムの二成分を等量で含有する混液で溶出した。溶
出液を合併し、そして減圧下で蒸発した。ビンク
リスチン1.7ｇを取得した。 例 ２ ４−デアセトキシ−ビンブラスチンの精製 粗製の４−デアセトキシ−ビンブラスチン1.7
ｇを例１に記載のようにして取得し、メタノール
および水の３：２混液25mlに溶かした。この溶液
を５℃に冷却し、そして16時間放置した。析出し
た結晶を取し、５℃に冷却したメタノールと水
との３：２混液３〜４mlで洗浄し、そして乾燥し
た。４−デアセトキシ−ビンブラスチン1.3ｇを
取得した。（融点＝190〜193℃、〔α〕^２０ _Ｄ＝＋107
℃
Ｃ＝１％、クロロホルム中） 分 析 C₄₄H₅₆N₄O₇ 計算値：Ｃ：70.19％，Ｈ：7.50％，
Ｎ：7.44％，Ｏ：14.87％； 実測値：Ｃ：69.85％，Ｈ：7.52％，
Ｎ：7.23％、Ｏ：14.97％。 質量分析 ４−デアセトキシ−ビンブラスチンの質量分析
をビンブラスチンのものと比較して調べた。分子
イオンピークはデアセトキシ化合物に関して、
ｍ／ｅ＝752に現われ、これに対しビンブラスチ
ンについてｍ／ｅ＝810に出現した。この58質量
単位に当たる差はアセトキシ基の質量に匹敵す
る。 両方のジインドールアルカロイドはベルバミン
（velbamine）およびビンドリン（vindoline）部
分からなつた。ベルバミンフラグメントの特徴を
示す質量数およびベルバミン部分の塩基のピーク
（ｍ／ｅ＝355および154）は４−デアセトキシ−
ビンブラスチンの質量分析にも現われるので、問
題のアセトキシ基がビンドリンフラグメントから
消失すると理解する。分割路（splitting paths）
（ｍ／ｅ＝122，135，224）に基づけば、デアセト
キシ化合物がビンブラスチンの４位に連結したア
セトキシ基を含まないと思われる。 NMR−スペクトル ４−デアセトキシビンブラスチンのNMRスペ
クトルをビンブラスチンのと比較するとき、δ＝
2.09ppmにおけるビンブラスチンのスペクトル中
に観察できる、４−アセトキシ基の特徴であるピ
ークがデアセトキシ化合物のスペクトル中には認
められないことが明らかだつた。 ４−デアセトキシ−ビンブラスチンのNMRス
ペクトルの特徴的ピークは以下の通りであつた。 δ＝2.73ppm（Ｎ−メチル プロトン） δ＝3.60ppm（カルボメトキシ プロトン） δ＝3.81ppm（芳香族−OCH₃プロトン） δ＝3.85ppm（カルボンメトキシ プロトン） 例 ３ ４−デアセトキシ−ビンブラスチン硫酸塩 1.25％エタノール性硫酸を（例１に記載のよう
に調製した）粗製の４−デアセトキシ−ビンブラ
スチン1.1ｇに添加し、この混合物のPHを4.5の値
にした。この混合物を５℃で２時間放置した。析
出した結晶を取し、そして５℃のエタノール２
〜３mlで洗浄した。粗製の４−デアセトキシ−ビ
ンブラスチン硫酸塩0.95ｇを取得した。所望なら
ば、この化合物は次のように再結晶できた。 粗製の４−デアセトキシ−ビンブラスチン硫酸
塩0.95ｇをメタノール25mlに溶かし、そしてアセ
トン125mlをそこの溶液に加えた。この溶液を５
℃において２時間放置し、そして析出した結晶を
取した。この結晶を冷アセトン２〜３mlで洗浄
し、そして乾燥した。精製した４−デアセトキシ
−ビンブラスチン硫酸塩0.88ｇが得られた。 〔α〕^２０ _Ｄ＝＋29.0゜
（Ｃ＝１％、メタノール中） 製剤例 ４−デアセトキシ−ビンブラスチン硫酸塩を含
有する医薬製剤 生理食塩水１アンプルにつき５ml、ベンジルア
ルコール１アンプルにつき50mg、乳糖１アンプル
につき50mgおよび凍結乾燥した４−デアセトキシ
−ビンブラスチン硫酸塩１アンプルにつき1.5も
しくは７mgを含有する注射用溶液を製造した。こ
の溶媒はアンプルに充填する前に過法で殺菌し
た。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ マイナージインドールアルカロイドの酸付加
   塩の豊富な混合物から高純度の４−デアセトキシ
   −ビンブラスチンを製造するに当たり、マイナー
   ジインドールアルカロイドの酸付加塩の粗製混合
   物を塩基の溶液で処理し、得られた懸濁液をロ過
   し、得られた母液を蒸発させ、残留物を有機溶剤
   に溶かし、得られた溶液をPH3.7〜4.3のリン酸塩
   緩衝水溶液で抽出し、分離した水性−酸性抽出物
   を塩素化炭化水素で抽出し、そして塩素化炭化水
   素相を酸性−水性相から分離し、前記工程で得ら
   れた水性−酸性相のPHを塩基で8.5〜9.2に調節
   し、この水性−アルカリ性溶液を塩素化炭化水素
   で抽出し、４−デアセトキシ−ビンブラスチンを
   含有する前記塩素化炭化水素相を蒸発し、残留物
   をホルミル化し、ホルミル化後に得られた混合物
   のPHを塩基で8.5〜9.2に調節し、このアルカリ性
   溶液をベンゼン型炭化水素もしくは塩素化炭化水
   素で抽出し、この抽出液を蒸発し、４−デアセト
   キシ−ビンブラスチンを含む生成残留物を部分的
   に脱活性化したアルミナ上のクロマトグラフイー
   にかけ、得られた溶出液から高純度の４−デアセ
   トキシ−ビンブラスチンを分離することを特徴と
   する、４−デアセトキシ−ビンブラスチンの製造
   方法。