JPS62224281A - 細胞の処理方法 - Google Patents
細胞の処理方法Info
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- JPS62224281A JPS62224281A JP62038120A JP3812087A JPS62224281A JP S62224281 A JPS62224281 A JP S62224281A JP 62038120 A JP62038120 A JP 62038120A JP 3812087 A JP3812087 A JP 3812087A JP S62224281 A JPS62224281 A JP S62224281A
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/06—Lysis of microorganisms
- C12N1/066—Lysis of microorganisms by physical methods
-
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
- C12M47/06—Hydrolysis; Cell lysis; Extraction of intracellular or cell wall material
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の目的〕
本発明は細胞の処理方法に、特に破壊された細胞から細
胞内物質、例えば補酵素を得る方法に関する。
胞内物質、例えば補酵素を得る方法に関する。
従来の技術
パッチ方式の化学的及び／または物理的方法により酵母
から補酵素を得ることが知られている。
から補酵素を得ることが知られている。
例えば、特開昭５６−１５４９９５ （種水イビ学）は
加熱温度における酵母の酸処理による特許な補酵素Ｑの
製造方法を開示している。このような処理は酵母抽出物
としての酵母の食品価値を破壊し、かくして工業的価値
のほとんどない生成物を生成してし甘う。
加熱温度における酵母の酸処理による特許な補酵素Ｑの
製造方法を開示している。このような処理は酵母抽出物
としての酵母の食品価値を破壊し、かくして工業的価値
のほとんどない生成物を生成してし甘う。
更に、この処理は一般に小規模でしか可能でないために
微量の補酵素しか得られない。
微量の補酵素しか得られない。
本発明において、酵母も含めて細胞の連続処理方法が見
出され、これにより比較的多量の細胞が処理でき、かく
して補酵素のような細胞内物質が分離される。酵母に適
用した場合、食品価値は影響を受けない。この方法の副
生成物である酵母細胞及び酵母細胞残層は可食性酵素抽
出物の製造に使用でき、かくしてこの方法を大規模で経
済的に実行可能にする。
出され、これにより比較的多量の細胞が処理でき、かく
して補酵素のような細胞内物質が分離される。酵母に適
用した場合、食品価値は影響を受けない。この方法の副
生成物である酵母細胞及び酵母細胞残層は可食性酵素抽
出物の製造に使用でき、かくしてこの方法を大規模で経
済的に実行可能にする。
本発明によれば、
（１）容器内で水性細胞スラリー流全生成させ、（１１
） スラリー流に、細胞の構造的破壊全持たらすのに
充分な量でかつ得られたスラリー／流体混合物の温度が
３０℃を超すように適用地点でスラリーよりも高温及び
高圧の流体全供給し、（ｉｉｉ） スラリー／流体混合
物を３０℃を超す温度に細胞内物質の放出を可能にする
のに充分な時間保持し、そして （ｉｖ） 必要ならば４０℃以下の温度に冷却すること
全含む熱衝撃による細胞の破壊方法が得られる５゜ 本発明方法の別の観点において、上記の工程匂ψにより
得られた冷却混合物は通常の分離方法により、細胞物質
及び細胞不含抽出物に分離され、抽出物は画分化するこ
とにより補酵素、補因子及び他の細胞内生成物が得られ
る。
） スラリー流に、細胞の構造的破壊全持たらすのに
充分な量でかつ得られたスラリー／流体混合物の温度が
３０℃を超すように適用地点でスラリーよりも高温及び
高圧の流体全供給し、（ｉｉｉ） スラリー／流体混合
物を３０℃を超す温度に細胞内物質の放出を可能にする
のに充分な時間保持し、そして （ｉｖ） 必要ならば４０℃以下の温度に冷却すること
全含む熱衝撃による細胞の破壊方法が得られる５゜ 本発明方法の別の観点において、上記の工程匂ψにより
得られた冷却混合物は通常の分離方法により、細胞物質
及び細胞不含抽出物に分離され、抽出物は画分化するこ
とにより補酵素、補因子及び他の細胞内生成物が得られ
る。
好壕しくは本発明方法が適用される細胞は微生物細胞寸
たは菌類細胞である。しかしながら、この方法はまた好
気ダイジェスタ−からの生体塊のような細胞物質にも適
用できる。好適な微生物細胞にはアセトバクター（Ａｃ
ｅｔｏｂａｃｔｅｒ ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒ
ｇｉ！ｌｕｓ ）及びストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ ） ＩＡの微生物が含まれる。好適な
菌類細胞（本明細書ではこの語は菌糸を含む）にはサツ
カロマイコブシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓ ｉ
ｓ ）のような酵母及びペリシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ ）のようなカビが含まれる。
たは菌類細胞である。しかしながら、この方法はまた好
気ダイジェスタ−からの生体塊のような細胞物質にも適
用できる。好適な微生物細胞にはアセトバクター（Ａｃ
ｅｔｏｂａｃｔｅｒ ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒ
ｇｉ！ｌｕｓ ）及びストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ ） ＩＡの微生物が含まれる。好適な
菌類細胞（本明細書ではこの語は菌糸を含む）にはサツ
カロマイコブシス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓ ｉ
ｓ ）のような酵母及びペリシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌ
ｌｉｕｍ ）のようなカビが含まれる。
細胞は生きているものでも死んだ直後のものでもよい。
かくして、当業者にとって、本発明方法は醸造業からの
使用済発酵固体に適用でき、このような酵母の場合酵母
抽出物食品としてのそれらのその後の使用を妨げること
はないことが明らかであろう。あるいは、この方法は食
酢製造業からの及び発酵方法により得られたβ−ラクタ
ム抗生物質の製造からの使用済固体に適用できる。
使用済発酵固体に適用でき、このような酵母の場合酵母
抽出物食品としてのそれらのその後の使用を妨げること
はないことが明らかであろう。あるいは、この方法は食
酢製造業からの及び発酵方法により得られたβ−ラクタ
ム抗生物質の製造からの使用済固体に適用できる。
好ましくは、細胞スラリーは約２〜２０重量％の全固体
金ｔを有する。スラリーの初期温度は普通重要ではない
が、通常２０℃未満である。
金ｔを有する。スラリーの初期温度は普通重要ではない
が、通常２０℃未満である。
スラリーは導管の形状をした容器に供給でき、そして加
熱流体は導管への入口を経てスラリーに供給でき、かく
して液体流はスラリー流金横断することになる。これに
より流体はスラリー流と充分混合でき、かつ速かに必要
な操作温度に到達できる。
熱流体は導管への入口を経てスラリーに供給でき、かく
して液体流はスラリー流金横断することになる。これに
より流体はスラリー流と充分混合でき、かつ速かに必要
な操作温度に到達できる。
好１しくは、スラリーは導管の入口の近くに位置するが
ス捕隼ノズル中に供給される。これにより、流体はスラ
リー小滴流中に「吸入される（ｓｕｃｋｅｄ） Ｊこと
が可能になり、このことは方法効率を増力口することが
見出された。流体は最も好ましくはスラリー流中ヘスラ
リ−流の流れ方向に対して直角に供給される。
ス捕隼ノズル中に供給される。これにより、流体はスラ
リー小滴流中に「吸入される（ｓｕｃｋｅｄ） Ｊこと
が可能になり、このことは方法効率を増力口することが
見出された。流体は最も好ましくはスラリー流中ヘスラ
リ−流の流れ方向に対して直角に供給される。
スラリーは好ましくは調整可能な速度で導管中ヘポンプ
送入され、この速度は加熱流体の温度及び圧力により異
なる。
送入され、この速度は加熱流体の温度及び圧力により異
なる。
本発明の好ましい観点によると、
（１）容器内で水性スラリー流を生成させ、（１１）
この流れを、０〜６００にノゼスカルの圧力でかつ１
００〜５００℃の温度で容器に供給された加熱流体によ
る処理にかけ、 （１１０加熱流体及び／または酵母スラリーの流れを得
られたスラリー混合物が３０℃〜９０℃の温度にされる
ように調整し、 Ｑψ スラリー混合物を３０℃〜９０℃の温度に３０秒
間〜１０分間保持し、そして （■）混合物を４０℃以下に冷却する ことを含む、熱衝撃による細胞の破壊方法が提供される
。
この流れを、０〜６００にノゼスカルの圧力でかつ１
００〜５００℃の温度で容器に供給された加熱流体によ
る処理にかけ、 （１１０加熱流体及び／または酵母スラリーの流れを得
られたスラリー混合物が３０℃〜９０℃の温度にされる
ように調整し、 Ｑψ スラリー混合物を３０℃〜９０℃の温度に３０秒
間〜１０分間保持し、そして （■）混合物を４０℃以下に冷却する ことを含む、熱衝撃による細胞の破壊方法が提供される
。
工程（ＩＶ＋を１０分間より長く行なうときは何ら追加
の利点が得られないこと、しかも４０℃より高温により
長時間保持することはこのことが細胞生成物の劣化を起
こしうるので望ましくないことが見出された。
の利点が得られないこと、しかも４０℃より高温により
長時間保持することはこのことが細胞生成物の劣化を起
こしうるので望ましくないことが見出された。
好ましくは、細胞はビール及び／−またけパン酵母を含
む酵母細胞である。
む酵母細胞である。
好ましい流体はその潜熱容量のために酵母細胞の熱衝撃
を起こすのに光分な熱エネルギー金与えることができる
水蒸気である。更に、水蒸気の温度及び圧力を制御する
ことは比較的安全かつ容易である。
を起こすのに光分な熱エネルギー金与えることができる
水蒸気である。更に、水蒸気の温度及び圧力を制御する
ことは比較的安全かつ容易である。
使用可能なその他の流体は不活性気体（例えば窒素）ま
たは熱水である。
たは熱水である。
流体の好ましい圧力範囲は】Ｏ〜６００にパスカルであ
り、水蒸気の場合、約５〜６０に／”スカルの範囲が特
に好ましい。流体にとって好ましい温度範囲は１００〜
２５０℃であり、水蒸気の場合１００〜１６０℃の範囲
が使用できる。
り、水蒸気の場合、約５〜６０に／”スカルの範囲が特
に好ましい。流体にとって好ましい温度範囲は１００〜
２５０℃であり、水蒸気の場合１００〜１６０℃の範囲
が使用できる。
得られたスラリー及び加熱流体の初期混合物は好ましく
は混合領域中で約５０〜７５℃の温度範囲にされ、次い
でこの温度範囲に好ましくは１〜４分間、より好ましく
は約２〜３分間保持される。
は混合領域中で約５０〜７５℃の温度範囲にされ、次い
でこの温度範囲に好ましくは１〜４分間、より好ましく
は約２〜３分間保持される。
初期混合物の必要な温度は加熱流体の温度及び圧力と共
に加熱流体及びスラリーの流速全調整することにより達
成できる。このことは常法により、例えば混合流中に位
置し、かつ電子温度制御器と組合された温度検出器音用
いて行なうことができる。制御器は電気空気変換器を経
て空気操作調節水蒸気制御弁に接続できる。あるいは、
手動水蒸気制御弁を使用してもよく、操作者は先ず初期
混合物の温度を読み、次いで水蒸気流を増力口すること
により昇温するか、または流れを減少させることにより
降温する。
に加熱流体及びスラリーの流速全調整することにより達
成できる。このことは常法により、例えば混合流中に位
置し、かつ電子温度制御器と組合された温度検出器音用
いて行なうことができる。制御器は電気空気変換器を経
て空気操作調節水蒸気制御弁に接続できる。あるいは、
手動水蒸気制御弁を使用してもよく、操作者は先ず初期
混合物の温度を読み、次いで水蒸気流を増力口すること
により昇温するか、または流れを減少させることにより
降温する。
初期混合物は好ましくは保持槽に供給され、混合物はこ
の中で必要な「滞留（ｒｅｓｉｄｅｎｃｅ ） Ｊ時間
攪拌されるが、この保持槽は必要な温度範囲全与えるた
めに断熱されかつ／または加熱されてもよい。
の中で必要な「滞留（ｒｅｓｉｄｅｎｃｅ ） Ｊ時間
攪拌されるが、この保持槽は必要な温度範囲全与えるた
めに断熱されかつ／または加熱されてもよい。
本発明の好ましい実施態様において、保持槽はオーバー
フローダクトを有する室からなり、ダクトの高さは字の
底より上であり、室内の混合物の滞留時間を支配する。
フローダクトを有する室からなり、ダクトの高さは字の
底より上であり、室内の混合物の滞留時間を支配する。
保持槽を離れた後、混合物は必要ならば４０℃未滴に、
好ましくはそれを熱交換器に通すことにより、冷却され
る。好適には、混合物は２分間内に、より好ましくは約
３０秒以内に２０℃未満に冷却され、通常の熱交換器が
この目的のために使用できる。例えば、混合物は冷媒、
例えば冷水、のジャケットにより囲１れたカラム中にポ
ンプ送入される。
好ましくはそれを熱交換器に通すことにより、冷却され
る。好適には、混合物は２分間内に、より好ましくは約
３０秒以内に２０℃未満に冷却され、通常の熱交換器が
この目的のために使用できる。例えば、混合物は冷媒、
例えば冷水、のジャケットにより囲１れたカラム中にポ
ンプ送入される。
次いで、冷却スラリー混合物は遠心分離、圧搾、限外濾
過またはこれらの方法の組合せにより２種の主成分、す
なわち （１）無傷の細胞及び細胞残層、及び （１１） 細胞不含抽出物 に分離される。
過またはこれらの方法の組合せにより２種の主成分、す
なわち （１）無傷の細胞及び細胞残層、及び （１１） 細胞不含抽出物 に分離される。
好ましくは、遠心分離を用いた後、限界濾過を用い、か
くして得られた細胞不含抽出物は補酵素、補因子及び他
の低分子量細胞内生成物の複雑な混合物を含有するであ
ろう。抽出物はそれ自体虹に画分化することにより興味
ある特定の補酵素または補因子を単離することができる
。それらの例はアセチルＣｏＡ 、 Ａ、 Ｔ、 Ｐ、
（アデノシン５′トリホスフエート） 、Ｎ、Ａ、Ｄ
、にコチンアミドーアデニンジヌクレオチド）及びＮ、
Ａ、 Ｄ、 Ｐ、 にコチンアミドーアデニンジヌク
レオチドホスフエート）である。
くして得られた細胞不含抽出物は補酵素、補因子及び他
の低分子量細胞内生成物の複雑な混合物を含有するであ
ろう。抽出物はそれ自体虹に画分化することにより興味
ある特定の補酵素または補因子を単離することができる
。それらの例はアセチルＣｏＡ 、 Ａ、 Ｔ、 Ｐ、
（アデノシン５′トリホスフエート） 、Ｎ、Ａ、Ｄ
、にコチンアミドーアデニンジヌクレオチド）及びＮ、
Ａ、 Ｄ、 Ｐ、 にコチンアミドーアデニンジヌク
レオチドホスフエート）である。
これらの補酵素及び補因子はそれら自体価値ある物質で
あり、かくして本発明方法は大規模な連続方式によりこ
れら物質を抽田する簡単かつ効率的理した酵母細胞及び
細胞残層は未処理の酵母と同一の方法で酵母抽出物（価
値ある食品）を製造することができ、かくしてこの方法
の無駄な副生成物はない。このことは経済的に重要であ
る。なぜならば比較的少量の価値ある補酵素及び補因子
を製造するため多量の酵素スラリーを処理しなければな
らないからである。
あり、かくして本発明方法は大規模な連続方式によりこ
れら物質を抽田する簡単かつ効率的理した酵母細胞及び
細胞残層は未処理の酵母と同一の方法で酵母抽出物（価
値ある食品）を製造することができ、かくしてこの方法
の無駄な副生成物はない。このことは経済的に重要であ
る。なぜならば比較的少量の価値ある補酵素及び補因子
を製造するため多量の酵素スラリーを処理しなければな
らないからである。
本発明方法は熱衝撃の前に特定の酵素により細胞スラリ
ーを前処理することにより一部変更できる。このことは
補酵素及び補因子の最終状ｔを増加させることが見出さ
れた。
ーを前処理することにより一部変更できる。このことは
補酵素及び補因子の最終状ｔを増加させることが見出さ
れた。
好ましくは、前処理にて使用される酵素は下記のタイプ
のもののうち単一または混合活性を含んでいなければな
らない。
のもののうち単一または混合活性を含んでいなければな
らない。
（１） グルカン中１−３結合に対する活性（１１）
セルラーゼ活性 （ｉｉｉ） ラミナリナーゼ活 性（ｉｖ） キシラナーゼ活性 （Ｖ） キチナーゼ活性 （Ｖ−ブロテイナーゼ活性 （ｖｉＤ グルカナーゼ活性 ＊ 一般に、細胞スラリーはＮｏｖｏｚｙｍ ２３４のよう
な活性（１）〜（ｖｉＤを含有する酵素製剤と０．０５
〜０．５％Ｗ／Ｖの量で混合され、２０℃〜４０℃の温
度で３０分ないし２４時間培養される。処理されたスラ
リーは次いで上記したような熱衝撃にかけられる。
セルラーゼ活性 （ｉｉｉ） ラミナリナーゼ活 性（ｉｖ） キシラナーゼ活性 （Ｖ） キチナーゼ活性 （Ｖ−ブロテイナーゼ活性 （ｖｉＤ グルカナーゼ活性 ＊ 一般に、細胞スラリーはＮｏｖｏｚｙｍ ２３４のよう
な活性（１）〜（ｖｉＤを含有する酵素製剤と０．０５
〜０．５％Ｗ／Ｖの量で混合され、２０℃〜４０℃の温
度で３０分ないし２４時間培養される。処理されたスラ
リーは次いで上記したような熱衝撃にかけられる。
＊
尚、Ｎｏｖｏｚｙｍ ２３４はノゼ、エンザイムス、プ
ロダクツ（Ｎｏｖｏ Ｅｎｚｙｍｅｓ Ｐｒｏｄｕｃｔ
ｓ ）の製品である。
ロダクツ（Ｎｏｖｏ Ｅｎｚｙｍｅｓ Ｐｒｏｄｕｃｔ
ｓ ）の製品である。
実施例
による細胞スラリーの処理装置のフローダイヤグラムで
ある。
ある。
実施例１
酵素スラリーを１０ｋｆの圧搾直後のビール酵母ｋ １
０ ｋｇの水と混合することにより製造し、混合物は均
質なスラリーが形成されるまで攪拌した。
０ ｋｇの水と混合することにより製造し、混合物は均
質なスラリーが形成されるまで攪拌した。
スラリー中の全固体含量百分率は１２チであった。
スラリーを原料槽ｌ中に導入し、原料ポンプ２を用いて
７７９ｍ／／分の速度でノ々イルドアンｒタトロツク（
Ｂａ１ｒｄ （１０）ｄ Ｔａｔｌｏｃｋ ）金属張り
濾過ポンプ３の水投入分中ヘボンプ送入した。
７７９ｍ／／分の速度でノ々イルドアンｒタトロツク（
Ｂａ１ｒｄ （１０）ｄ Ｔａｔｌｏｃｋ ）金属張り
濾過ポンプ３の水投入分中ヘボンプ送入した。
水蒸気を濾過ポンプ３の側部空気入口４中へ約５５にノ
々スカルの圧力及び約１１３℃の温度でポンプ送入した
。水蒸気流を濾過ポンプ３の出口６から出てくるスラリ
ー混合物の温度全６５℃に保持するためＢＲＶサルコ・
スバイラツクス（Ｓａｒｃｏ ５ｐｉ−ｒａｘ ）弁５
を用いて手動で調整し、温度は温度検出器７により監視
し、この検出器は制御弁５に接続されていた。（水蒸気
供給を凝縮水分全除去するため捕集し、安全弁により圧
力が５５にパスカルより高く上昇するのを防いだ）。ス
ラリー混合物を断熱保持槽８中に通し、４１１Ｓ内のス
ラリーの滞留時間中メカニカルスタラー９により攪拌し
た。
々スカルの圧力及び約１１３℃の温度でポンプ送入した
。水蒸気流を濾過ポンプ３の出口６から出てくるスラリ
ー混合物の温度全６５℃に保持するためＢＲＶサルコ・
スバイラツクス（Ｓａｒｃｏ ５ｐｉ−ｒａｘ ）弁５
を用いて手動で調整し、温度は温度検出器７により監視
し、この検出器は制御弁５に接続されていた。（水蒸気
供給を凝縮水分全除去するため捕集し、安全弁により圧
力が５５にパスカルより高く上昇するのを防いだ）。ス
ラリー混合物を断熱保持槽８中に通し、４１１Ｓ内のス
ラリーの滞留時間中メカニカルスタラー９により攪拌し
た。
槽８はオーツクーフローダクト】０を有しており、この
中をスラリーは下降し、移送ポンプ１１により熱交換器
１２の頂部にポンプ送入されるようになっていた。ダク
ト１０はスラリーがダクト中含下降する前に約３分間の
槽内の平均滞留時間を有するように位置していた。この
時間中、温度は約６２℃に保持された。
中をスラリーは下降し、移送ポンプ１１により熱交換器
１２の頂部にポンプ送入されるようになっていた。ダク
ト１０はスラリーがダクト中含下降する前に約３分間の
槽内の平均滞留時間を有するように位置していた。この
時間中、温度は約６２℃に保持された。
熱交換器】２は長さ１．５ ｆｉの円筒形空洞ジャケッ
ト１３からなり、この中にガラス管のラセン形コイル１
４が設けられ、約１０℃の冷水がジャケット１３中を上
方にポンプ送入される−１スラリーはガラス管１４内を
下向きに通過した。管の底部出口から得られた物質の温
度は１６℃であった。
ト１３からなり、この中にガラス管のラセン形コイル１
４が設けられ、約１０℃の冷水がジャケット１３中を上
方にポンプ送入される−１スラリーはガラス管１４内を
下向きに通過した。管の底部出口から得られた物質の温
度は１６℃であった。
物質を次いで遠心分離することにより固体を液体から分
離し、次いで液体を超遠心分離することにより補酵素、
補因子及び他の細胞内物質に豊富な抽出物を得た。
離し、次いで液体を超遠心分離することにより補酵素、
補因子及び他の細胞内物質に豊富な抽出物を得た。
実施例２
酵母スラ’） ｆ Ｎｏｖｏｚｙｍ ２３４で前処理
した以外は、実施例１の方法と同様な方法によりこの方
法を行なった。
した以外は、実施例１の方法と同様な方法によりこの方
法を行なった。
ラリ−の処理装置の７０−ダイヤグラムである。
１・・・原料槽、２・・・原料ヂンプ、３・・・濾過ポ
ンプ、８・・・断熱保持槽、１２・・・熱交換器代理人
弁理士 秋 沢 政 光 他１名
ンプ、８・・・断熱保持槽、１２・・・熱交換器代理人
弁理士 秋 沢 政 光 他１名
Claims (12)
- （１）（ｉ）容器内で水性細胞スラリー流を生成させ、
（ｉｉ）スラリー流に、細胞の構造的破壊をもたらすの
に充分な量でかつ得られたスラリー／流体混合物の温度
が３０℃を超すように適用地点でスラリーよりも高温及
び高圧の流体を供給し、（ｉｉｉ）スラリー／流体混合
物を３０℃を超す温度に細胞内物質の放出を可能にする
のに充分な時間保持し、そして （ｉｖ）必要ならば４０℃以下の温度に冷却することを
特徴とする熱衝撃による細胞の破壊方法。 - （２）細胞は微生物もしくは菌類の細胞または細胞系生
体塊である特許請求の範囲第（１）項記載の方法。 - （３）細胞は酵母細胞である特許請求の範囲第（１）ま
たは（２）項記載の方法。 - （４）（ｉ）容器内で水性細胞スラリー流を生成させ、
（ｉｉ）この流れを、０〜６００Ｋパスカルの圧力でか
つ１００〜５００℃の温度で容器に供給された加熱流体
による処理にかけ、 （ｉｉｉ）加熱流体及び／または酵母スラリーの流れを
得られたスラリー混合物が３０℃〜９０℃の温度にされ
るように調整し、 （ｉｖ）スラリー混合物を３０℃〜９０℃の温度に３０
秒間〜１０分間保持し、そして （ｖ）温度を４０℃以下に冷却する ことを含む特許請求の範囲第（１）〜（３）項のいずれ
か一つの項記載の方法。 - （５）加熱流体は水蒸気である特許請求の範囲第（１）
〜（４）項のいずれか一つの項記載の方法。 - （６）水蒸気は５０〜６０Ｋパスカルの圧力及び１００
℃〜１６０℃の温度で供給される特許請求の範囲第（５
）項記載の方法。 - （７）工程（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）中の温度は５０〜７
５℃である特許請求の範囲第（４）項記載の方法。 - （８）水性細胞スラリーは熱衝撃処理の前に２〜２０重
量％の全固体含量を有する特許請求の範囲第（１）〜（
７）項のいずれか一つの項記載の方法。 - （９）細胞スラリーは導管に供給され、かつ加熱流体は
導管への入口を経てスラリー流へ供給される特許請求の
範囲第（１）〜（８）項のいずれか一つの項記載の方法
。 - （１０）４０℃以下の温度に冷却することにより得られ
た冷却混合物を細胞物質及び細胞不含有抽出物に分離す
る追加工程を含む特許請求の範囲第（１）〜（９）項の
いずれか一つの項記載の方法。 - （１１）細胞不含有抽出物を画分化することにより補酵
素、補因子及び他の細胞内生成物を得る特許請求の範囲
第（１０）項記載の方法。 - （１２）特許請求の範囲第（１１）項記載の方法により
得られた補酵素、補因子及び他の細胞内生成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB868604440A GB8604440D0 (en) | 1986-02-22 | 1986-02-22 | Process |
| GB8604440 | 1986-02-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62224281A true JPS62224281A (ja) | 1987-10-02 |
Family
ID=10593516
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62038120A Pending JPS62224281A (ja) | 1986-02-22 | 1987-02-23 | 細胞の処理方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0234863A3 (ja) |
| JP (1) | JPS62224281A (ja) |
| AU (1) | AU6908787A (ja) |
| DK (1) | DK87987A (ja) |
| GB (1) | GB8604440D0 (ja) |
| PT (1) | PT84324B (ja) |
| ZA (1) | ZA871251B (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010104197A1 (ja) | 2009-03-13 | 2010-09-16 | アサヒビール株式会社 | ０mV以下の酸化還元電位を有する微生物由来還元性混合物及びその製造方法 |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1990000200A1 (en) * | 1988-06-27 | 1990-01-11 | Genex Corporation | Thermal release of recombinant protein into culture media |
| FR2645171B1 (fr) * | 1989-03-29 | 1991-06-21 | Cohas Pascal | Procede de preparation de lysats de levures |
| FR2665058B1 (fr) * | 1990-07-30 | 1992-10-30 | Cohas Pascal | Procede de preparation de lysat de levures en suspension. |
| EP0600247A3 (de) * | 1992-11-05 | 1995-05-10 | Hoechst Ag | Verfahren zur selektiven Desaktivierung von unerwünschten Proteinen in einem Proteingemisch mittels Mikrowelleneinstrahlung. |
| JPH0848698A (ja) * | 1994-08-05 | 1996-02-20 | Seiwa Kasei:Kk | 酵母タンパク誘導ペプチド組成物、その製造方法およびその用途 |
| EP0790316A3 (en) * | 1996-02-16 | 1999-02-10 | Quest International B.V. | Emulsifier from yeast |
| EP2796438B1 (en) * | 2011-12-21 | 2017-10-18 | Asahi Group Holdings, Ltd. | Reducible fertilizer |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT982367B (it) * | 1972-11-30 | 1974-10-21 | Sir Soc Italiana Resine Spa | Procedimento per la produzione di lisati da microorganism |
| DE2526647C3 (de) * | 1975-06-14 | 1981-10-01 | Kernforschungsanlage Jülich GmbH, 5170 Jülich | Kontinuierlicher Zellaufschluß und weitgehende Sterilisation von Mikroorganismen |
| DE2837342A1 (de) * | 1978-08-26 | 1980-03-06 | Henkel Kgaa | Verfahren zur herstellung von hefeautolysat |
| US4533628A (en) * | 1983-08-03 | 1985-08-06 | New York University | Colony hybridization method |
-
1986
- 1986-02-22 GB GB868604440A patent/GB8604440D0/en active Pending
-
1987
- 1987-02-19 EP EP87301420A patent/EP0234863A3/en not_active Withdrawn
- 1987-02-20 DK DK087987A patent/DK87987A/da not_active Application Discontinuation
- 1987-02-20 PT PT84324A patent/PT84324B/pt unknown
- 1987-02-20 AU AU69087/87A patent/AU6908787A/en not_active Abandoned
- 1987-02-20 ZA ZA871251A patent/ZA871251B/xx unknown
- 1987-02-23 JP JP62038120A patent/JPS62224281A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2010104197A1 (ja) | 2009-03-13 | 2010-09-16 | アサヒビール株式会社 | ０mV以下の酸化還元電位を有する微生物由来還元性混合物及びその製造方法 |
| US9193635B2 (en) | 2009-03-13 | 2015-11-24 | Asahi Group Holdings, Ltd. | Reducing mixture derived from microorganisms which has an oxidation-reduction potential of 0 mV or less, and production method for same |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK87987A (da) | 1987-08-23 |
| PT84324A (en) | 1987-03-01 |
| PT84324B (en) | 1989-02-20 |
| ZA871251B (en) | 1988-08-31 |
| AU6908787A (en) | 1987-08-27 |
| EP0234863A2 (en) | 1987-09-02 |
| GB8604440D0 (en) | 1986-03-26 |
| DK87987D0 (da) | 1987-02-20 |
| EP0234863A3 (en) | 1989-08-02 |
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