JPS62116565A - 新規ペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 「産業上の利用分野」 この発明の下記一般式（Ｉ〜■）で示される化合物およ
びその塩は抗潰瘍作用を有し、医薬として有用である。

１従来の技衛。

ペプチドは数多く知られているが、本願発明のペプチド
は知られていない。

１発明が解決しようとする問題点」 抗潰瘍作用を有し、医薬として有用な化合物は数多く知
られているが、この発明はさらに優れた医薬品の開発を
意図してなされたものである。

１問題点を解決するための手段」 この発明は新規ペプチドおよびその塩に関する。更に詳
しくは、この発明は、抗潰瘍作用を有する新規ペプチド
およびその塩に関する。

この発明の新規ペプチドは次の式（Ｉ〜■）で示すこと
ができる。

Ｈ−Ｓａｒ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ　−ＯＨ（Ｉ　）Ｈ−
Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ（Ｉ［）Ｈ−β
−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ（Ｉ［［）Ｈ−Ｇｌｙ
−Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｘ−ＮＨ２（■）Ｈ−β−Ａｌａ−Ｈ
ｉｓ−ＮＨ−Ｙ−ＮＨ２（Ｖ）Ｈ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｈ
ｉｓ−Ａｒｇ−ＱＨ（ＶＩ）Ｈ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｈｉ
ｓ−Ｌ、ｙｓ−ＯＨ（■）Ｈ−ｐＧｌｕ−Ｇｌｙ−Ｈｉ
ｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ（■）（式中、Ｘは低級アルキレン基
、 Ｙは低級アルキレン基を意味する）。

この明細書においてはアミノ酸、保護基、活性基、溶媒
等について、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ　ｃｏｍｍｉｓｓｉｏ
ｎ　ｏｎＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｎｏｍａｎｃｌａｔｕ
ｒｅに基づく略号および当該分野における慣用略号で表
示する場合があり、それらを例示すると次の通りである
。

Ｓａｒ　：サルコシン ）１ｉｓ　：ヒスチジン Ｌｙｓ　：リジン Ａｓｐ　：アスパラギン酸 Ａｌａ　：アラニン β−Ａｌａ　：β−アラニン Ｇｌｙ　ニゲリシン Ｔｈｒ　：スレオニン Ｌｅｕ　：ロイシン Ａｒｇ　：アルギニン ｐＧｌｕ　：ピログルタミン酸 ｒｏｓ：Ｉ−シル ｚ：ベンジルオキシカルボニル ０Ｂｚｌ　：ベンジルエステル Ｂｏｃ：第三級ブトキシカルボニル Ｏ５ｕ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルＣＩＺ
：ｏ−クロロベンジルオキシカルボニルＮ０２：ニトロ Ｂｚｌ：ベンジル この発明の新規ペプチド（Ｉ〜■）および医薬として許
容されるそれらの塩類は、下記製造法により製造するこ
とができる。

聚盗豊ユ （Ｉ−１＞　　　　　　　　　（Ｉ−２）（Ｉａ） Ｃ力 （Ｉ［−１　）　　　　　　　　　（　Ｉ［−２）（Ｉ
［ａ） （Ｉ［［−１）　　　　　　　　　　　　（ＩＩＩ−２
＞（Ｉ［ａ） （ＩＶ−１＞　　　　　　　　　　　　（ＩＶ−２）（
ＩＶａ） （Ｖａ） （Ｗ−１）　　　　　　　　　　　　（Ｖｌ−２）（Ｖ
Ｉａ） （■−１）　　　　　　　　　　　（■−２）（■ａ） （■−１〉　　　　　　　　　　　（■−２）（■ａ） 製造法２ （Ｉ［−３） （Ｉ［ｂ） 製造法３ 一一一→Ｈ−３ａｒ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ　−０Ｈ（Ｉ） （クー（ａ） （Ｉ［ａ） 一一一→Ｈ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ（
Ｉ） （クー＜ｂ＞ （Ｉ［ｂ） 一一一→Ｈ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ（
Ｉ［） （］Ｉ［ａ、） 一一一→Ｈ−β−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ（ＩＩ
Ｉ） （４）　Ｒ，−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｘ−ＮＨ−Ｒｆ
（ＩＶ　ａ　） 一一→Ｈ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｘ−ＮＨ２（ＩＶ） （５）　Ｒ１−β−Ａｌａ−Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｙ　ＮＨ−
Ｒｌｄ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
ｇ（Ｖａ） 一−→Ｈ−β−Ａｌａ−Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｙ−ＮＨ２（Ｖ
） （ＶＩａ） 一−−−→　Ｈ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｏ
Ｈ（ＶＩ） （７）　Ｒ，’−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ（Ｒ
，’）−ＯＲ”。

（■ａ） 一一−→　Ｈ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ
（■） （８）　Ｒ’、−ｐＧｌｕ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ（
＜）−ＯＲ，”（■ａ） 一−−−→　Ｈ−ｐＧｌｕ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−
ＯＨ（■） （上記式中、ＸおよびＹはそれぞれ前と同じ意味；　Ｒ
ａ、Ｒｂ、　Ｒｏ、　Ｒ，、Ｒ８、Ｒｆ、　Ｒ，、Ｒｈ
１ＲおよびＲ１，はそれぞれアミン保護基；Ｊ Ｒ，ＲおよびＲ２はそれぞれカルボキシ保護ａｂ　　　
　　　　　ｃ 基； Ｒ３はイミダゾール保護基； Ｒ４はヒドロキシ保護基； Ｒ５はグアニジノ保護基を意味する）。

この明細書の以上および以下の記載において、この発明
の範囲内に包含される種々の定義の好適な例および説明
を以下詳細に述べる。

（１）■ １低級」とは、特に指示がなければ、炭素原子１〜６個
を有する基を意味するものとする。

〈２）低級アルキレン 好適な「低級アルキレン」としては、メチレン、エチレ
ン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレン、
ヘキサメチレン等が挙げられる。

（３）二」二ｊＬｌ基 アミン保護基を例示すると、アミノ酸およびペプチド化
学の分野で通常使用される一般的なアミノ保護基であり
、例えば第三級ブトキシカルボニル、第三級ヘンチルオ
キシカルボニル、シクロへキシルオキシカルボニル等の
アルコキシカルボニル基およびシクロアルフキジカルボ
ニル基、例えハヘンジルオキシ力ルボニル、０−クロロ
ベンジルオキシカルボニル等の置換されたまたは非置換
フェニル−低級アルフキジカルボニル基のようなアラル
フキジカルボニル基、例えばベンゼンスルホニノ呟　ｐ
−トルエンスルホニル等の置換されたまたは非置換アレ
ーンスルホニル基、例えばホルミル、アセデル等のアル
カノイル基等のような好ましい基が挙げられる。

（４）ｉ＞ｔユゴ（コニ匹二ｌ！Ｊｓ カルボキシ保護基を例示すると、アミノ酸およびペプチ
ド化学の分野で通常使用きれる一般的なカルボキシ保護
基であり、例えばメチル、エチル等の低級アルキル基、
例えばシクロペンチル、シクロヘキシル等のシクロアル
キル基、例えばベンジル、ジフェニルメチル等の七ノー
またはジフェニル−低１アルキル基のようなアラルキル
基、例えばフェナシル、トルオイルエチル等のアロイル
アルキル基等のような好ましい基が挙げられる。

（５）イミダゾール保 イミダゾール保護基を例示すると、アミノ酸およびペプ
チド化学の分野で通常使用される一般的なイミダゾール
保護基であり、例えばベンジル、ジフェニルメチル、ト
リフェニルメチル等の七ノーまたはジまたはトリフェニ
ル−低級アルキル基のようなアラルキル基、例えば第三
級ブトキシカルボニル等の低級アルコキシカルボニル基
、例えばベンジルオキシカルボニル等のフェニル−低級
アルフキジカルボニル基のようなアラルキルオキシカル
ボニル基、例えばベンゼンスルホニル、トシル等の置換
されたまたは非置換アレーンスルホニル基等のような好
ましい基が挙げられる。

（６）旦工三土上皇１１ ヒドロキシ保護基を例示すると、アミノ酸およびペプチ
ド化学の分野で通常使用される一般的なヒドロキシ保護
基である。そのようなヒドロキシ保護基の好ましい例と
しては例えばアセチル等のアルカノイル基のようなアシ
ル基および例えばベンジル、２．６−ジクロロベンジル
等の置換されたまたは非置換アラルキル基が挙げられる
。

（７）久に当し包茎１基 グアニジノ保護基を例示すると、アミノ酸およびペプチ
ド化学の分野で通常使用きれる一般的なグアニジノ保護
基である。そのような保護基の好ましい例としては、ニ
トロ基、例えばトシル等の置換されたまたは非置換アレ
ーンスルホニル基、例えばベンジルオキシカルボニル等
の置換されたまたは非置換フェニル−低級アルコキシカ
ルボニル基等が挙げられる。

（８）医薬として許容される塩 化合物（Ｉ）〜（■）についての医薬として許容される
塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアル
カリ金属塩類、例えばカルシウム塩等のアルカリ土類金
属塩類、アンモニウム塩類、例えばエタノールアミン塩
、トリエチルアミン塩、レジクロへキシルアミン塩等の
有機アミン塩類等のような無機塩基または有機塩基との
塩類、およびとりわけ酢酸、酒石酸、クエン酸、トリフ
ルオロ酢酸、メタンスルホン酸、塩酸、硫酸、硝酸、燐
酸等との塩類のような有機酸付加塩類または無機酸付加
塩類が挙げられる。

以下、前記製造法をそれぞれ詳細に説明する。

（１）製造法１（液相法によるペプチド合成）この製造
法は、化合物（Ｉ−１）またはその塩を化合物（Ｉ−２
＞またはその塩と反応キ姓て、化合物（Ｉａ）またはそ
の塩を得る製造法［ｔ−（１）］；化合物（Ｉ［−１＞
またはその塩を化合物（Ｉ［−２＞またはその塩と反応
許せて、化合物（Ｉ［ａ）またはその塩を得る製造法［
１−（２）コ； 化合物（ＩＩＩ−１）またはその塩を化合物（Ｉ［［−
２）またはその塩と反応きせて、化合物（ＩＩＩａ）ま
たはその塩を得る製造法［１−（３）コ； 化合物（ＩＶ−１）またはその塩を化合物（ＩＶ−２）
またはその塩と反応させて、化合物（ＩＶａ）またはそ
の塩を得る製造法［１−（４）コ； 化合物（Ｖ−１）またはその塩を化合物（Ｖ　−２＞ま
たはその塩と反応させて、化合物（Ｖａ）またはその塩
を得る製造法［１−（５）］； 化合物（ＶＩ−１）またはその塩を化合物（ＶＩ−２）
またはその塩と反応許せて、化合物（■ａ）またはその
塩を得る製造法［：１−＜６）］； 化合物（■−１）またはその塩を化合物（■−２）また
はその塩と反応させて、化合物（■ａ）またはその塩を
得る製造法［１−＜７）］；および化合物（■−１）ま
たはその塩を化合物（■−２）またはその塩と反応させ
て、化合物（■ａ）またはその塩を得る製造法［１−（
８）］よりなる。

前記製造法はすべて、酸塩化物法、アジド法、混合酸無
水物法、活性エステル法、カルボジイミド法等のような
慣用の液相法によって行うことができる。

反ＥはＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、
クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジオキサン、酢酸
エチル、メタノール、エタノール、水等のような溶媒中
、冷却下または室温で進行する。

反応は通常、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミン
等のような塩基の存在下に行われる。

製造法［１−（４）コおよび［１−（５）コの反応は、
アジド法によって行うのが好ましい。

製造法［１−（１）コ、Ｃ１−（２）］、［１−（３）
］、〔１−＜６）］、［１−（７）コおよび［１−（８
）］の反応は活性エステル法によって行うのが好ましい
。

好適な活性エステルとしては、シアンメチルエステル、
ビニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、２，４
−ジニトロフェニルエステル、トリクロロフェニルエス
テル、ペンタクロロフェニルエステル、メシルフェニル
エステル、フェニルアゾフェニルエステル、フェニルチ
オエステル、ｐ−ニトロフェニルチオエステル、カルボ
キシメチルチオエステル、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ドエステル等が挙げられる。

この製造法の原料化合物（ＩＩ　−２）、（■−２）お
よび（■−２）は新規化合物であり、実施例として後に
説明する製造法によって、またはこれに準する製造法に
よって製造することができる。

（２）製造法２（同相法によるペプチド合成）この製造
法では、保護されたアミノ酸成分はペプチド合成の常法
に従って固相法により順次結合して化合物（ＩＩｂンま
たはその塩を生成する。

この製造法で使用される樹脂は固相ペプチド合成で共通
して使用されるものの一つであり、スチレン−ジビニル
ベンゼン共重合体等のようなポリスプレン樹脂等が挙げ
られる。

（３）斃ｊＥ阻」＝（保護基の脱離） これはアミノ保護基、カルボキシ保護基、イミダゾール
保護基、ヒドロキシ保護基および／またはグアニジノ保
護基を、化合物（Ｉａ＞またはその塩、化合物（Ｉ［ａ
またはＩ［ｂ）またはその塩、化合物（ＩＩＩａ）また
はその塩、化合物（Ｉａ）またはその塩、化合物（Ｖａ
）またはその塩、化合物（ＶＩａ）またはその塩、化合
物（■ａ）またはその塩、および化合物（■ａ）または
その塩から脱離して、それぞれ化合物（Ｉ）またはその
塩、化合物（Ｉ［）またはその塩、化合物（ＩＩＩ）ま
たはその塩、化合物（ＩＶ’）またはその塩、化合物（
Ｖ）またはその塩、化合物（ＶＩ）またはその塩、化合
物（■）またはその塩、および化合物（■）またはその
塩を得ることによりなる製造法である。

ペプチドに結合した樹脂はカルボキシ保護基と見なすこ
とができるので、カルボキシ保護基についての説明は樹
脂についての説明でもあると解される。

そのようなアミン保護基、イミダゾール保護基、グアニ
ジノ保護基、カルボキシ保護基およびヒドロキシ保護基
の脱離反応は、接触還元、例えば液体アンモニア−ナト
リウム等の液体アンモニア−アルカリ金属法、例えば酢
酸−亜鉛等の酸−亜鉛法、ピリジン塩酸塩を使用する方
法、ヒドラジン法、例えば塩化水素、臭化水素、フッ化
水素、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン
酸、酢酸等の酸を使用する方法、例えば水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、
炭酸リチウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化カルシウム
、水酸化マグネシウム、水酸化アンモニウム、トリエチ
ルアミン等の塩基を使用する方法等のような慣用の方法
によって行われる。

これらの方法は脱離すべき保護基の種類によって選択す
ることができる。

反応は通常、例えばメタノール、エタノール等のアルコ
ール、塩化スチレン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドの
ような慣用の溶媒中で行われるが、反応に悪影響を及ぼ
さない溶媒であれば、その他のいかなる溶媒中でも反応
を行うことができる。

脱離反応に使用する酸、塩基またはその他の試薬が液体
である場合には、それらを溶媒として使用することもで
きる。

反応温度は脱離すべき保護基の種類および脱離法によっ
て選択することができ、通常は冷却下または常温のよう
な温和な条件下に反応が行われる。

アミン、グアニジノ、カルボキシ、ヒドロキシおよびイ
ミダゾール保護基の脱離反応は、脱離すべき保護基の種
類によって同時にまたは段階的に行うことができる。

この発明による新規ペプチド（Ｉ）、＜ＩＩ）、（Ｉ［
Ｉ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（■）および（■
）はそれぞれ分子内不斉炭素原子に基づく１個以上の異
性体を含む。そのような異性体はすべてこの発明の範囲
内に包含される。

この発明の目的とするペプチドおよび医薬として許容さ
れるそれらの塩類は新規であり、抗潰瘍作用を有する。

目的とするペプチドの有用性を示すために、代表的なペ
プチドの薬理学的試験結果を以下に示す。

（Ａ＞エタノール潰瘍の抑制 試験法 生後７週齢、体重的２００ｇのスブラーグ・ドーリ−（
Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ　）糸線ラット５匹を１
打出りに使用して、２４時間絶食後にエタノール潰瘍試
験を行った。

試験化合物を０．１％メチルセルロース水溶液中に懸濁
し、懸濁液（５鶴／ｋｇ）を各ラットに経口投与した。

対照群には同様にして担体、すなわち０．１％メチルセ
ルロース水溶液（５ｍ／ｋｇ）のみを投与した。

無水エタノール（５ｍｆｉ／ｋｇ）を試験化合物投与３
０分後に経口投与し、その１時間後にラットを屠殺して
それらの胃を切除した。各ラットの潰瘍面積を測定した
。投与群の平均面積（ｍ２）を対照群のそれと比較した
。

試験結果 試験化合物：　Ｈ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−
ＯＲ−ＣＨ３ＣＯＯＨ試験化合物のＥＤ５ｏ値：　９．
２ｍｇ／ｋｇ上記試験結果から明らかなように、この発
明の目的化合物は抗潰瘍薬として有用である。

治療のためにこの発明の化合物は、前記化合物を有効成
分として、経口または非経口投与に適した有機もしくは
無機固体状もしくは液状賦形剤のような医薬として許容
される担体と混合して含有する医薬製剤の形で使用する
ことができる。医薬製剤はカプセル、錠剤、糖衣錠、溶
液、懸濁液、エマルジョン等とすることができる。必要
に応じて一ヒ記製剤中に助剤、安定剤、湿潤剤または乳
化剤、綴衝液およびその他通常使用される添加剤が含ま
れていてもよい。

化合物の投与量は患者の年齢および条件によって変化す
るが、この発明の化合物は平均１回投与約５＋ｎｇ、１
０ｍｇ、　５０ｍｇ、１００ｍｇ、　２５０ｍｇ、　５
００ｍｇ。

１０００ｍｇで潰瘍の治療に有効である。一般的には１
ｍｇ〜約６０００ｍｇの間の量またはそれ以上を１日当
り投与してもよい。

以下にこの発明を実施例により説明するが、実施例中の
各アミノ酸はＬ型化合物である。

実施例１ （１）Ｂｏａ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂ
ｚｌ（７，１９ｇ　）をトリフルオロ酢酸（８０ｍ１ｌ
　）およびアニソール（７誰）により、−２０〜−１５
°Ｃで１時間、−１２〜−１０°Ｃで１．５時間処理す
る。反応混合物を濃縮して、順次ｎ−ヘキサンおよびｎ
−ヘキサンとエーテルとの混合物（１：１）でデカンテ
ーションにより洗浄し、真空乾燥して無定形固体（７，
７３ｇ）を得る。この無定形固体をＢｏｃ−５ａｒ−Ｏ
５ｕ（２，５７ｇ）でＮ−メチルモルホリン（１１２ｍ
Ｑ　）の存在下、塩化メチレン（１００ｍ１１　）中常
温で一夜処理する。これに反応中Ｎ−メチルホルモリン
（ｏ、ａｍｉ）を加える。過剰のＢｏａ　−Ｓａｒ　−
Ｏ５ｕを３−ジメチルアミノプロピルアミン（３６１ｍ
ｇ）を添加して分解する。

次いで反応混合物をピリジン・塩酸塩（３，２８ｇ）に
より室温で４時間処理し、濃縮後、酢酸エチルで抽出し
て、粗生成物（５，８０ｇ）を得る。この粗生成物（５
，８０ｇ）をイソプロピルアルコール（５０ｍＱ　）中
で加温し、冷却する。生成する結晶を濾去し、濾液を濃
縮して、ＢｏＣ−５ａｒ−）＋１ｓ−Ｌｙｑ（Ｚ）−０
Ｂｚｌ　（３，９４ｇ　）を純物質として得る。

［αコＤｗ　−１７，９６°　（Ｃ−１，０５、メタノ
ール）元素分析、Ｃ３，Ｈ４６Ｎ６０８として、計算値
：Ｃ，６１，９３；　　Ｈ，６，８３，Ｎ、１２．３８
実測値：Ｃ，６０，８４；　　Ｈ，６，２４，Ｎ、１２
．１４（２）Ｂｏａ　−Ｓａｒ　−Ｉｔｓ　−Ｌｙｓ（
Ｚ）　−０Ｂｚｌ（３，６０ｇ　）を無水フッ化水素（
３０１１１Ｑ　）によりアニソール（５戚）の存在下、
０°Ｃで１時間処理する。過剰のフッ化水素を留去後、
目的とするペプチドを水で抽出する。抽出液をエーテル
で洗浄して、ダウエックスｌＸ２（アセテート型）（商
標；ダウケミカル社製）　（ｚｓｏｍＱ）を充填したカ
ラムを通過させる。

ボーリーの試薬に陽性を示す溶出液を集め、凍結乾燥し
て、粗生成物を得る。この粗生成物を０．１Ｍピリジン
−酢酸ｕｋ衡液（ｐＨ５，４）で平衡にしたカルボキシ
メチルセルロース ５２、ワットマン社製）カラムを使用するカラムクロマ
トグラフィーに付す。直Ｉｌａ度勾配溶出法で、０．１
Ｍ〜０．７Ｍピリジン−酢酸緩衝液（　ｐＨ５４）（容
重ρ）により溶出し、溶出液を分画（各８ｇ）する。画
分（１７０番〜２１６番）を集めて濃縮し、２％酢酸に
溶解し、凍結乾燥して、Ｈ−Ｓａｒ　−　Ｈｉｓ　−　
Ｌｙｓ　−　ＯＨ−ＣＨ３ＣＯＯＨ　（　１．　５３ｇ
　）を純物質として得る。

（３）Ｈ−Ｓａｒ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ・ＣＨ３ＣＯ
ＯＨ（　１．５０ｇ）の無水エタノール（　５０ｍｌｌ
　）溶液に、Ｌ（＋）−酒石酸（　４４６．　２ｍｇ　
）の無水エタノール（　２０ｍＭ　）溶液を加える。混
合物を加温して水浴中攪拌し、室温で放置する。沈殿を
濾取し、エタノールおよびエーテルで洗浄して、Ｈ−Ｓ
ａｒ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ・３／２（＋）ＨＯＯＣ　
−　ＣＭ（ＯＨ）ＣＨ（ＯＲ）　−　Ｃｏｏｌ　（　１
．　５５ｇ　）を得る。

［α］Ｄ−　＋　３．　７１°（Ｃ−０．５７、水）Ｎ
ＭＲ　（Ｄ２Ｑ，　８　）　：　１．５〜１．９　（ｍ
，６Ｈ）、　２．７７　（ｓ。

３Ｈ）、　３．０５　（ｔ．２Ｈ．Ｊ＝６Ｈｚ）、　３
．３０　（ｄ．２Ｈ。

Ｊ：６Ｈｚ）、　３．８　（ｍ，ＩＨ）、　３．９５　
（ｓ．２Ｈ）、　４、３３（ｓ，３Ｈ）、　４．２　（
ｎ＋，ＩＨ）、　７．３７　（ｓ．ＬＨ）、　８．６０
（ｓ．　ＩＨ） 因】０江主 （１）Ｂｏａ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂ
ｚｌ（　５．８２ｇ）をトリフルオロ酢Ｍ（　６０ｍ１
１　）によりアニソール（　６．０戚）の存在下、−１
５〜−１０℃で４．５時間処理する。反応混合物を濃縮
し、残渣をエーテルとｎ　−ヘキサンとの混合物、次い
でｎ−ヘキサン（３回）で洗浄し、２時間真空乾燥して
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（　６０ｍＭ　）に溶解
する。この溶液にＢｏｃ　−　Ａｌａ　−　ＯＳｕ　（
２．　２９ｇ　）およびＮ−メチルモルホリン（　０．
８９ｍＭ　）を加える。溶液を室温で一夜攪拌し、この
間反応完結のためにＢｏａ　−　Ａｌａ　−　ＯＳｕ（
０．２０ｇ）およびＮ−メチルモルホリン（０．２０ｍ
Ｍ、２回）を加える。反応混合物を濃縮して酢酸エチル
で２回抽出し、抽出液を水および塩化ナトリウム水溶液
で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥して、Ｂｏｃ−Ａｌ
ａ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）　　Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚｌの粗
生成物を得る。

（２〉実施例２−（１）で得られるＢｏｃ−　Ａｌａ　
−　Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）Ｌｙｓ（Ｚ）　　ＯＢｚｌの粗生
成物をＮ．Ｎ−ジメチルホルムアミド（　８０ｍＭ　）
中、ピリジン塩酸塩（２．６３ｇ）により室温で４．５
時間処理する。反応混合物を濃縮して酢酸エチルで抽出
する。抽出液を水および塩化すｌ−　１）ラム水溶液で
洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を留去して、
粗生成物（７．４３ｇ）を得る。

この粗生成物（７．４３ｇ）を塩化メチレン（１００戚
）中、３−ジメチルアミノプロピルアミン（　６２４ｍ
ｇ　）により室温で処理して過剰のＢｏｃ−Ａｌａ−Ｏ
Ｓｕを分解する。溶液を濃縮し、酢酸エチルで抽出する
。抽出液を０．ＩＮ塩酸（２回）、水および炭酸水素ナ
トリウム希水溶液で洗浄する。沈殿を濾取して、ＢｏＣ
−　Ａｌａ　−　Ｈｉｓ　−　Ｌｙｓ（Ｚ）　−０Ｂｚ
ｌ（３．１０ｇ）を純物質として得る。

ｍｐ　　１８０℃ ［α］Ｄ−　−　１７．　７０°　（Ｃ−１、Ｎ，Ｎ−
ジメチルホルムアミド） （３）Ｂｏａ　−　Ａｌａ　−　）１ｉｓ　−　Ｌｙｓ
（Ｚ）　−　０Ｂｚｌ　（　３．　Ｌｏｇ　）をアニソ
ール（３．０ｍｌの存在下トリフルオロ酢酸（　３０ｍ
１１　）によりＯ″Ｃで２５分間、室温で３０分間処理
する。混合物を濃縮し、残渣をエーテルで３河洗浄し、
ジオキサン（４。４ｍｊｌ）中４．８Ｎ塩酸で処理する
。蒸発乾固後、残渣をエーテルで粉砕し、濾取してＮ．
Ｎ−ジメチルホルムアミド（　４０ｍＭ　）中、Ｎ−メ
チルモルホリン（ｔ、Ｏ３ｇ）の存在下Ｂｏａ　−Ａｓ
ｐ（ＯＢｚｌ）−０Ｓｕ（２，１ｇ）により室温で一夜
処理する。反応混合物を濃縮して酢酸エチルで抽出する
。抽出液を炭酸水素すｈ　ＩＪウム希氷水溶液２回）お
よび塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄し、エーテルとジ
イソプロピルエーテル（１：１）の混合物で粉砕して、
Ｂｏａ　−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）　−Ａｌａ　−Ｈｉｓ　
−Ｌｙｓ（Ｚ）　−０Ｂｚｌ　（３，８６ｇ　）を得る
。

［αコ２７−−４５．２０”　　（Ｃ−１、Ｎ、Ｎ−ジ
メチルホルムアミド） 元素分析、Ｃ４６Ｈ５７Ｎ７ｏｌｌとして、計算値：Ｃ
，６２，５０Ｈ，６，５０Ｎ、ＩＬ、０９実測値、Ｃ，
６１，０６Ｈ，６，５３Ｎ、１０．３７（４）Ｂｏｃ　
−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）　−Ａｌａ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ
（Ｚ）　−０Ｂｚｌ（３，８０ｇ）を無水フッ化水素Ｃ
２０１ｄ　）によりアニソール（５，０ｍ１２）の存在
下、０℃で１時間処理する。フッ化水素を留去後、生成
物を水で抽出する。抽出液をエーテルで洗浄して、ダウ
エックス１×２（アセテート型）を充填したカラムを通
過させ、凍結乾燥して、Ｈ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−
Ｌｙｓ　−０Ｈ−ＣＨ３ＣＯＯＨ（２，０５ｇ　）を粗
生成物として得る。

衷」■江ユ （１）Ｂｏａ−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）−０ＣＨ２−ｐｊ４脂
（１％架橋ジビニルベンゼン−スチレン共重合体、Ｌｙ
ｓ含有率：１．２ｍモル／　ｇ　）　（１０，０ｇ）を
同相法用反応容器に仕込み、下記スケジュールに従って
、Ｂｏａ　−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）−ＯＨ，Ｂｏｃ−Ａｌａ
−ＯＨおよびＢｏｃ　−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）　−ＯＨを
順次カップリングさせる。

スケジュール １（洗　浄）　塩化メチレン　　　　　３×３２　（脱
係Ｎ）　　５０％（ｖ／ｖ））リフルｔｏ　　　　　　
３０Ｘ１酢酸−塩化メチレン ３（洗　浄）　塩化メチレン　　　　　３×３４（洗　
浄）　２−プロパツール　　　３Ｘ２５（洗　浄）　塩
化メチレン　　　　　３×２６　（中　　和）　　　５
　％（Ｖ／Ｖ）トリエチルアミン−塩化メチレン　　　
　３×２ ７（洗　浄）　塩化メチレン　　　　　３×３８　（カ
ップリング）　　　ア　ミ　ノ酸（３モル　）　　　　
　１５〜２４およびジシクロへキシルカルボ　　　　　
時間Ｘ１ジイミド（３モル）の 塩化メチレン溶液 ９（洗　浄）　塩化メチレン　　　　　３×５１０（洗
　浄）　２−プロパツール　　　３×３１１（ｉ　　ｅ
）　　ジメチルホルムアミド　　３Ｘ３上記スケジユー
ルに従って最終カップリング終了後、反応生成物をメタ
ノールで洗浄し、減圧乾燥して、Ｂｏａ　−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）　−Ａｌａ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）　
−〇ＣＨ２−樹脂（１３，６ｇ）を得る。

（２）実施例３−（１）で得られるＢｏｃ　−Ａｓｐ（
ＯＢｚｌ）　−Ａｌａ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ（ＣＩＺ）
　−０ＣＨ２−ｍ脂（６，９ｇ）を無水フッ化水素（７
ｏｍｘ　）アニソール（９ｇ）の存在下−５〜０°Ｃで
１時間処理する。過剰のフッ化水素を留去後、ペプチド
を水（１ｏｏＩｎｌｌ）で抽出する。

抽出液をエーテルで洗浄し、濾過して、ダウエックス１
×２（アセテート型）　（３００証）を充填したカラム
を通過させ、凍結乾燥して、粗製Ｈ−Ａｓｐ−Ａｌａ　
−）＋ｉｓ　−Ｌｙｓ　−０）１−ＣＨ３ＣＯＯＨを得
る。

（３）粗製Ｈ−Ａｓｐ　−Ａｌａ　−）１ｉｓ　−Ｌｙ
ｓ　−０Ｈ−ＣＨ３ＣＯＯＨ（４，２０ｇ）を０．１Ｍ
ピリジン−酢酸緩衝液（ｐＨ５，４）で平衡にしたカル
ボキシメチルセルロース（ワットマンＣＭ−５２）を充
填したカラム（３，２×６０ｃｍ　）によるクロマトグ
ラフィーに付す。０．１〜０、４Ｍピリジン−酢酸緩衝
液（ｐＨ５，４）（各１２）により直線濃度勾配溶出法
で溶出し、溶出液を分画（各１１ｇ）する。画分（６８
番〜９４番）を集め、濃縮して水に溶解し、凍結乾燥し
て、Ｈ−Ａｓｐ　−Ａｌａ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ　−０
Ｈ−ＣＨ３ＣＯＯＨ（３，７０ｇ　）を純物質として得
る。

［α　コ、−−２７，５８°　　（Ｃ−１，０１１、水
　）アミノ酸分析（６Ｎ塩酸、１１０°Ｃ５２４時間）
Ａｓｐ：　Ｌ、０２４．　Ａｌａ：　１．０００．　Ｈ
ｉｓ　：　１．０２８Ｌｙｓ　：　１．０３５ 薄層クロマトグラフィー Ｒｆ−０，１０［溶媒：ｎ−ブタノール−酢酸−水一ビ
リジン（１５：　３　：　１２：　１０）　；固定相：
メルクＮｏ、５５５２コ Ｒｆ＝　０．３６　［溶媒；ｎ−ブタノール−酢酸−水
一ピリジン（２：２：２：１）；固定相：メルクＮｏ、
　５５５２　］ ＮＭＲ（Ｃ２０，δ）　：　Ｌ、３７　（ｄ、３）１．
Ｊ＝６Ｈｚ）、　１．３３−１９（，６８）、　１．９
４　（ｓ、３Ｈ）、　２．７８　（ｄｄ、２Ｈ）。

３．０３　（ｔ、２Ｈ，Ｊ：６Ｈｚ）、　３．２８　（
ｔ、２Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ）。

４．２０　（ｔ、ＬＨ，Ｊ＝６Ｈｚ）、　４．２７　（
ｔ、ＬＨ，、Ｃ６Ｈｚ）。

４．３８　（（１，ＬＨ，Ｊ＝６Ｈ２）、　４．６８　
（ｔ、ＬＨ，Ｊ＝６Ｈｚ＞。

７．３５　（ｓ、ＬＨ）、　８．５８（ｓ、ＩＨ）元素
分析、Ｃ１９Ｈ３、Ｎ７０７・ＣＨ３ＣＯＯ）ｌ・３Ｈ
２０として、計算値：Ｃ，４３，２２Ｈ，７，０８Ｎ、
１６．８０実測値：Ｃ，４３，２３Ｈ，７，０２Ｎ、１
６．６３及渡旦１ （１）Ｂｏｃ　−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）　−Ｌｙｓ（Ｚ）　
−０Ｂｚｌ（５，１ｇ　）をトリフルオロ酢酸（ｓｏｗ
ｎ　）でアニソール（５１１１１１）の存在下、−１５
°Ｃで４時間処理する。反応混合物を濃縮して残渣をｎ
−ヘキサンで３回洗浄し、真空乾燥して、無定形粉末（
５，７ｇ）を得る。この無定形粉末（５，７ｇ）をＢｏ
ａ−β−Ａｌａ−Ｏ５ｕ　（２，３ｔ　ｇ　）およびＮ
−メチルモルホリン（１，２０ｍｎ　）でＮ、Ｎ−ジメ
チルホルムアミド（６５ｍ１ｌ　）中室温で一夜処理す
る。

反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出して、Ｂｏａ−
β−Ａｌａ　−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）　−Ｌｙｓ（Ｚ）　−
０Ｂｚｌ　（６，６ｇ）粗生成物を得る。

（２）粗製Ｂｏａ−β−Ａｌａ　−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）　
−Ｌｙｓ（Ｚ）　−０Ｂｚｌ（８，３８ｇ）をＮ、Ｎ−
ジメチルホルムアミド（ｓｏｗｎ）に溶解し、とリジン
・塩酸塩（９，７ｇ）により室温で３．５時間処理する
６反応部合物を濃縮して酢酸エチルで抽出する。抽出液
を濃縮後、残渣を順次酢酸エチル、エーテルおよびジイ
ソプロピルエーテルとエーテルとの混合物で洗浄し、ジ
イソプロピルエーテルで粉砕して、粗生成物（５，２１
ｇ）を得る。

この粗生成物（５，２１ｇ）をシリカゲル（７０ｇ）を
使用するカラムクロマトグラフィーに付す、順次１）塩
化メチレン、２）塩化メチレン−アセトン（９：１〜４
：１）、３）塩化メチレン−メタノール（５０：１．４
０：１．２５：１次いで１６：１）および４）塩化メチ
レン−メタノール−酢酸（１７８：２０：２）で溶出す
る。精製された目的化合物は溶出液３〉および４）によ
り溶出される。主要な画分を集め、濃縮し、酢酸エチル
とエーテルとの混合物で洗浄し、エーテルで粉砕して、
ＢｏＣ−β−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚｌ
（３，９９ｇ　）を得る。

ｍｐ　　１４８−１５０℃（分解） ［αコＤｘ　−１０，０７°　（Ｃ−１、Ｎ、Ｎ−ジメ
チルホルムアミド） （３）Ｂｏａ−β　−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ（Ｚ）−
０８ｚｌ（３，８２ｇ　　）を無水フッ化水素（２０ｍ
Ｑ　）でアニソール（５−）の存在下、０°Ｃで１時間
処理する。過剰のフッ化水素を留去後、ペプチドを水で
抽出する。抽出液をエーテルで洗浄し、ダウエックス１
×２（アセテート型）　（２５０ｍ１１　）を充填した
カラムを通過させる。ニンヒドリン試薬およびボーリー
の試薬に陽性を示す溶出液を集め、凍結乾燥して粗生成
物（１，４７ｇ）を得る。この粗生成物を１％酢酸で平
衡にしたセファデックスＧ−１０（商標：ファルマシア
社製）カラム（３，２Ｘ　６５ａｎ　）によるクロマト
グラフィーに付す。１％酢酸で溶出し、溶出液を分画（
各９ｇ）する０画分（１５番〜２３番）を集め、凍結乾
燥して、Ｈ−β−Ａｌａ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ　−ＯＨ
・ＣＨ３ｃＯＯＨ（１、１２ｇ　）を純物質上して得る
。

［α］２６−−１２．３０°（Ｃ−１，４、水）アミノ
酸分析（６Ｎ塩酸、１１０°０１２４時間）β−Ａｌａ
　：　０．３５３．　Ｌｙｓ　：　１．０００．　Ｈｉ
ｓ　：　０．９９３実施例５ （１）Ｂｏｃ　−Ｇｌｙ　−Ｈｌｓ　−ＮＨＮＨ２のＮ
、Ｎ−ジメチルホルムアミド 中４．８Ｎ塩酸および亜硝酸第三級ブチル（　２．　７
ｏｍａ　）順次−５℃で加える．この溶液を１５分間攪
拌し、トリエチルアミン（４．６２ｇ）で中和する．次
いでこれに、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＤン
に溶解したＢｏｃ−　ＮＨ−　（ＣＨ２）４−　Ｎ）！
２およびトリエチルアミン（２．３１ｇ）を加える。反
応混合物を水浴中冷却下に一夜攪拌し、濃縮する。濃縮
液を塩化ナトリウムで飽和させてメタノールを含む酢酸
エチルで抽出する。抽出液を濃縮し、残渣をエーテルで
粉砕して、Ｂｏａ　−　Ｇｌｙ　−　Ｈｉｓ−■（ＣＨ
２　）４　−　ＮＨ−Ｂｏｃ　（　８．　０３　ｇ　）
を無定形粉末とじて得る。

ｍｐ　　１３８　１４０℃ ［αコＤ−−１２０．２８°　（Ｃ−１、Ｎ、Ｎ−ジメ
チルホルムアミド） （２）Ｂｏｃ　−Ｇｌｙ　−）１ｉｓ　−Ｎｌ（−（Ｃ
Ｉ（２）４−　ＮトＢｏａ（０，５０ｇ）をトリフルオ
ロ酢酸（５誠）により室温で０．５時間処理する。反応
混合物を濃縮し、ジオキサン（０，８５１ｎρ）中７．
３Ｎ塩酸で処理する。濃縮後、残渣をエーテルで粉砕し
て、Ｈ−Ｇｌｙ　−Ｈｉｓ　−ＮＨ−（ＣＨ２）４−　
ＮＨ２・３ＨＣ１（０，５１６ｍｇ　）を粉末として得
る。

［α］２６譚−２６．８６＠（Ｃ璽り、１９２、水）薄
層クロマトグラブイ− Ｒｆ−０，１４［溶媒：ｎ−ブタノール−酢酸−水層ビ
リジン（１５：　３　：１２：１０）　；固定相：メル
クＮｏ、５５５２コ アミノ酸分析（６Ｎ塩酸、１１０’Ｃ，２４時間）Ｇｌ
ｙ　：　１．０００．　Ｈｉｓ　：　１．０３ＯＮＭＲ
（Ｄ２０，６　）　：１．６　（ｍ、４）１）、２．９
−３．２　（ｍ、４Ｈ）。

３．２　（ｄ、２Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ）、　７．３３　（ｓ
、ＬＨ）、　８．６７（ｓ、ＬＨ） 実施例６ （１）Ｚ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−ＮＨＮＨ２（５，０ｇ　）
のＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＱ　）溶液
にジオキサン中５．９１’ｌ酸（４，７ｍＱ）および亜
硝酸第三級ブチル（１，８ｍＱ）を−５℃で加える。混
合物を１５分間攪拌してトリエチルアミン（３，９１ｎ
ｊｌ）で中和し、次いでこれにＨ２Ｎ−（ＣＨ２）５−
　ＮＨ−Ｂｏａ　（２，５５ｇ　）およびトリエチルア
ミン（１，９４１１９）を加える。混合物を水浴中冷却
下に８０分間攪拌する。濾過後、濾液を濃縮する。残渣
の油状物を水で粉砕して粉末化し、濾取、乾燥して、Ｚ
　−Ｇｌｙ　−）！ｉｓ　−ＮＨ−（Ｃ）１２）５−　
ＮＨ−Ｂｏａ（６，Ｏｉｃ　）を得る。

ｍｐ　１４５−１４７℃ ［αコ２５−−５．７３°　（Ｃ−１，０２５、Ｎ、Ｎ
−ジメチルホルムアミド） 元素分析、Ｃ２６Ｈ３８Ｎ６０６として、計算値：Ｃ，
５Ｌ８５　　Ｈ，７，２２Ｎ、１５．８４実測値：Ｃ，
５８，８４Ｈ，７，３６Ｎ、１５．９５（２）Ｚ　−Ｇ
ｌｙ　−Ｈｉｓ　−Ｎｕ　−（Ｃｔ（２）５−Ｎ）ｔ　
−ＢｏＣ（５，８０ｇ　）をトリフルオロ酢酸（５４１
ｄ　）でアニソール（６ｍＱ　）の存在下、水浴中冷却
下に０．５時間、室温で０５時間処理する。反応混合物
を濃縮して残渣をジオキサン中５．９Ｎ塩酸で１時間処
理する。濃縮後、残渣をエーテルで粉砕して、ｚ−Ｇｌ
ｙ　−Ｈｉｓ　−ＮＨ−（ＣＩ２）５−Ｎｌ（２・２Ｈ
Ｃ１（６，８ｇ　）を粉末として得る。

（３）Ｚ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−ＮＨ−（ＣＨ２）５−ＮＨ
２・２ＨＣ１（５，９０ｇ）を、５．９Ｎジオキサン中
塩酸（１，９ｍＱ）を含むエタノール（２５０１１１Ｑ
　）に溶解し、１０％パラジウム−炭素（３，５ｇ）に
より水素雰囲気中大気圧下室温で６時間水素添加する。

反応混合物を濾過、濃縮し、生成する粉末を濾取して、
Ｈ−Ｇｌｙ　−）１ｉｓ　−ＮＨ−（ＣＨ２〉５−ＮＨ
２・３８Ｃ１（４，３５ｇ　）を得る。

薄層クロマトグラフィー Ｒｆ−０，２３［溶媒：ｎ−ブタン−ルー酢酸−水層ビ
リンン（１５：　３　：　１２：　１０）　；固定相：
メルクＮｏ。５５５２］にンヒドリンにより検出）Ｒｆ
＝　０．５４　［溶媒：ｎ−ブタノール−酢酸−水層ビ
リジン（２：２：２：１／）；固定相；メルクＮｏ、５
５５２コにンヒドリンにより検出）ＮＭＲ（Ｄｚｏ、８
　）　’　１．３−１．８　（ｍ−６８）、２．８−３
．２　（ｍ。

４Ｈ）、　　３．２３　　（ｄ、２Ｈ，Ｊ：６Ｈｚ）、
　　３．８７　　（ｓ、２Ｈ）。

７．３３　　（ｓ、ＬＨ）、　　８．６７　　（ｓ、Ｌ
Ｈ＞。

実施例７ （１）Ｂｏｃ−β−Ａｌａ−Ｈｉｓ−ＮＨＮＨ２（１，
５９ｇ　）のＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０１１
１９）溶液に、ジオキサン中７．３Ｎ塩酸（１，２８１
１１１１）および亜硝酸第三級ブチル（１０，５５１１
１Ｑ　）を−５°Ｃで加える。混合物を２０分間攪拌し
、トリエチルアミン（０，９５ｇ）で中和する。この溶
液に８２Ｎ−（ＣＨ２）４−ＮＨ−Ｂｏａ（ｏ、ｓｇ）
およびトリエチルアミン（０，４７ｇ）を加え、混合物
を水浴冷却下に一夜攪拌する。濃縮後、残渣を酢酸エチ
ルで２回抽出する。水層を塩化ナトリウムで飽和させて
さらにメタノール含有酢酸エチルで抽出する。抽出液を
合わせて濃縮後、残渣をエーテルで粉末化して、粗生成
物（２，０２ｇ）を得る。粗生成物（２，０２ｇ）を水
洗して、ＢｏＣ−β−Ａｌａ−Ｈｉｓ−ＮＨ−（ＣＨ２
）４−ＮＨ−Ｂｏｃ（１，０２ｇ　）を能物質として得
る。

ｍｐ　　９２°Ｃ（分解） ［α］２５°５！−１３３，４０＠（Ｃ−１、Ｎ、Ｎ−
ジメチルホルムアミド） （２）ＢｏＣ−β−Ａｌａ−）１ｉｓ−Ｎ）Ｉ−（ＣＨ
２）４−ＮＨ−Ｂｏａ（１，０２ｇ　）をトリフルオロ
酢酸（ｌｏｍＱ　）　テ氷浴冷却下に３０分間、室温で
２０分間処理する６反応混合物を濃縮し、残渣をジオキ
サン中７．３Ｎ塩酸（０，８４ｍＥＩ　）で処理して濃
縮する０次いで残渣を水に溶解してダウエックス１×２
（アセテート型）（２００ｍＱ　）のカラムを通過させ
、２％酢酸水溶液から２回凍結乾燥する。生成する吸湿
性物質（８６７ｍｇ）をエタノール（８，３戚）に溶解
し、クエン酸（３０５ｍｇ　）のエタノール（４ｆｆｌ
１２）溶液で処理する。生成する沈殿を濾取し、エタノ
ール、次いでエーテルで洗浄して、 ＣＨ２Ｃｏｏｌ （６５３，５ｍｇ　）を得る。

［αコ２８翼　−７，１０＠　（Ｃ−１、水）薄層クロ
マトグラフィー Ｒｆ−０，６１［溶媒二〇−ブタノールー酢酸−水層ビ
リジン（２：２：２：１）；固定相：メルクＮｏ、　５
５５２　］ Ｒｆ−０，１７［溶媒：ｎ−ブタノール−酢酸−水層ビ
リジン（１５：　３　：１２：１０）　；固定相：メル
クＮｏ、５５５２コ Ｘ履±１ （１）Ｂｏａ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−ＮＨＮＨ２（４，８９
ｇ　）のＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍ１ｌ
　）溶液に、ジオキサン中７．３Ｎ塩酸（３，５０ｍＱ
　）および亜硝酸第三級ブチル（１５１１ｄ　）を−５
℃で加える０反応混合物を同温で１５分間攪拌し、トリ
エチルアミン（３，５８猷）で中和する０反応混合物に （７，６１ｇ）およびトリエチルアミ７　（３，２６ｒ
ｎＱ）　＜７）Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５１
ｍ　）　溶液を力ａえ、トリエチルアミン（１，６３ｆ
ｆｌｌｌ）を加えた後、混合物を水浴冷却下−夜撹拌す
る。反応混合物を濃縮後、生成物を酢酸エチルで抽出し
、溶媒を留去して生成する無定形固体をエーテルで粉砕
して、Ｂｏａ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ（Ｎｏ２）　　
０Ｂｚｌ（５，４３ｇ）を粉末として得る。

ｍｐ８４−９４℃（分解） ［αコ２５−−２２°　（Ｃ−１，０２、Ｎ、Ｎ−ジメ
チルホルムアミド） （２）Ｂｏａ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ　−Ａｒｇ（Ｎｏ２）−
０Ｂｚｌ　（５，９ｇ　　）　　をアニソール（５１１
１Ｑ）の存在下トリフルオロ酢酸（６０ｍＱ）で水浴冷
却下に３０分間、室温で２０分間処理する。反応混合物
を濃縮し、残渣をエーテルで処理して、Ｈ−Ｌｅｕ　−
Ｈｉｓ　−Ａｒｇ（Ｎｏ２）　−０Ｂｚｌ　・２ＣＦ３
ＣＯＯＨ（７，７７ｇ　）を粉末として得る。

＜３）Ｈ−Ｌｅｕ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ（ＮＯ２）−０Ｂｚ
ｌ　・２ＣＦ３ＣＯＯＨ（７，７０ｇ）をＢｏｃ−ｒｈ
ｒ（Ｂｚｌ）−０Ｓｕ（３，６３ｇ　）およびＮ−メチ
ルモルホリン（ｚ、ｏｌｍ　）によりＮ。

Ｎ−ツメチルホルムアミド（７０１１１１１）中室温で
一夜処理する。この反応時間中、Ｎ−メチルモルホリン
１．ＱｍＱおよびＱ、４ｍＱを分けて加える。反応混合
物濃縮後、生成物を酢酸エチルで抽出する。得られる油
状物（６，５４ｇ）をエーテルで洗浄して、Ｂｏｃ−Ｔ
ｈｒ（Ｂｚｌ）　−Ｌｅｕ　−Ｈｉｓ　−Ａｒｇ（Ｎｏ
２）　−０Ｂｚｌ　（５，６３ｇ）を粗製物として得る
。

ｍｐ　　１１０°Ｃ（分解） ［αコ２５丑−６．６５°　（Ｃ＝１．００５、Ｎ、Ｎ
−ジメチルホルムアミド） （４）粗製Ｂｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ　）　−Ｌｅｕ　−
Ｈｉｓ　−Ａｒｇ（Ｎｏ２）−ＯＢｚｌ　（５，２０ｇ
　）をアニソール（５ｍＱ　）　ｔｙ）存在下無水フッ
化水素（５０ｍＱ　）で水浴冷却下に１時間処理する。

過剰のフッ化水素を留去後、生成物を水で抽出する。抽
出液をエーテルで洗浄し、ダウエックス１×２（アセテ
ート型）　（２００＋ｎＱ　）のカラムを通過させる。

溶出液を集め、凍結乾燥して粗生成物を無定形固体とし
て得る。

この粗生成物を０．１Ｍピリジン−酢＠綴衝液（ｐＨ５
，４）で平衡にしたカルボキシメチルセルロース（ワン
ドマンＣＭ−５２）カラムを使用するクロマトグラフィ
ーに付す、０．２Ｍ〜１．０Ｍピリジン−酢酸緩衝液（
ｐＨ５，４）（各ｌｌ２）で直線濃度勾配溶出法により
溶出し、溶出液を分画（各１１ｇ）する。１１８番〜１
４４番の画分を集めて凍結乾燥する。生成物を０．１Ｍ
ピリジン−酢酸緩衝液（ｐＨ５４）で平衡にしたＳＰ−
セファデックスＣ−２５（商標、ファーマシア社製）カ
ラム（３，２Ｘ６Ｑａｍ）を使用するクロマトグラフィ
ーに付す。直線濃度勾配溶出法により０．２Ｍ〜１．Ｏ
Ｍピリジンー酢酸緩衝液（ｐＨ５，４）（各１２）で溶
出する。主画分を集め凍結乾燥して、Ｈ−Ｔｈｒ　−Ｌ
ａｕ　−Ｈｉｓ　−ＡｒｇＯＨ−ＣＨ３ＣＯＯＨ（１、
５０ｇ　）を純物質として得る。

アミノ酸分析（６Ｎ塩酸、１１０℃、２４時間）Ｌｅｕ
：　１．０００．　Ｔｈｒ：　Ｌ、０１５．　Ｈｉｓ：
　１．１３６゜Ａｒｇ　：　１．０５０ 薄層クロマトグラフィー Ｒｆ−０，４［溶媒：ｎ−ブタノール−酢酸−水層ビリ
ジン（１５：　３　：　１２：　１０）　：固定相：メ
ルルクＮｏ、５５５２、ポー１）−の試薬により検出］
［α］２４−−３６．５５°（Ｃ−１，０２７、水）高
速液体クロマトグラフィー 保持時間：１１．１分 カラム　；ヌクレオシルＬＯＧ１８（２５０ｍｍＸ　４
　ｍｍ　）溶出液　：０１ＭＨ３Ｐ０４−に２ＨＰ０４
緩衝溶液（ｐＨ５，５）およびアセトニトリル、アセト
ニトリル濃度は３０分間に１０％から３０％に直線的に
増加 流速　　：１．０１ｌｌＱ／分 検出　　：　ＵＶ２１０ｎｍ 夾星■ユ （１）Ｈ−Ｈｉｓ（Ｔｏｓ）　−Ｌｙｓ（Ｚ）　−０Ｂ
ｚｌ　・ＣＦ３Ｃｏｏｌ　（１４，０２ｇ）を塩化メチ
レン（１ｓｏｍａ　）中Ｎ−メチルモルホリン（５，０
ｍ１１　）の存在下、Ｂｏｃ　−Ｇｌｙ　−Ｏ５ｕ　（
１，４５２）で水浴冷却下に処理する。この間Ｂｏａ−
Ｇｌｙ　−０５ｕを０．８７　ｇおよび０．５８　ｇに
分けて加える６反応混合物を室温で一夜攪拌して濃縮す
る。残渣の油状物に炭酸水素ナトリウム希水溶液を加え
、生成する粉末を濾取し、酢酸エチルで洗浄して、Ｂｏ
ａ−Ｇｌｙ　−Ｈｔｓ　−Ｌｙｓ（Ｚ）　−０Ｂｚｌ　
（６，２５ｇ　）を得る。

ｍｐ　　１７９−１８１℃ ［α］Ｄ−−６．３２＠（Ｃ−１，０５、ジメチルスル
ホキシド） （２）ＢｏＣ−Ｇｌｙ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ（Ｚ）　−
０Ｂｚｌ　（５，３ｇ　）をトリフルオロ酢酸（５ｏｍ
Ｑ）で水浴冷却下に３０分間、室温で２０分間処理する
。濃縮後、残渣をジオキサン中塩酸（４，３６ｍＡ　）
で処理する。混合物にエーテルを加えて、Ｈ−Ｇｌｙ−
Ｈｉｓ−Ｌｙｓ（Ｚ）　　０Ｂｚ１２ＨＣ１（５，２ｇ
）を白色粉末として得る。

（３）Ｈ−Ｇｌｙ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ（Ｚ）　−０８
ｚｌ　・２ＨＣ１（５、Ｏｇ）をＢｏａ−Ｇｌｙ−Ｏ５
ｕ（１７５ｇ　）でＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（５
０ｍＱ　）中、Ｎ−メチルモルホリン（１，７８ｍＱ　
）の存在下、室温で５時間処理する。濃縮後、残渣の油
状物に炭酸水素ナトリウム希水溶液を加えて、混合物を
冷蔵庫内に一夜放置する。

沈殿を濾取、水洗、乾燥して、Ｂｏａ　−Ｇｌｙ　−Ｇ
ｌｙ　−Ｈｌｓ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚｌ（５，２０ｇ
　）を得る。

ｍｐ　　１３３　１３６℃（分解） ［αコＤ厘−１６．１７’　　（Ｃ−１、Ｎ、Ｎ−ジメ
チルホルムアミド） （４）Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ（Ｚ）
−０Ｂｚｌ（４，９０ｇ）を水浴冷却下無水フッ化水素
（６０ｍＡ　）でアニソール（６ｍＭ）の存在下に１時
間処理する。過剰のフッ化水素を留去後、生成物を水で
抽出する。

抽出液をエーテルで洗浄し、ダウエックス１×２（アセ
テート型）のカラム（２００１１１１）を通過させ、凍
結乾燥する。この粗生成物を０．１Ｍピリジン−酢酸緩
衝液（ｐＨ５，４）で平衡にしたカルボキシメチルセル
ロース［ワットマンＣＭ−５２］カラムを使用するクロ
マトグラフィーに付す。直線濃度勾配溶出法により０．
２Ｍ〜１．０Ｍピリジン−酢酸緩衝液（ｐＨ５，４）（
各１１２）で溶出し、溶出液を分画（各１０ｇ）する。

９６番〜１０８番の画分を集めて濃縮し、セファデック
スＧ　−１５（３，８Ｘ　１００ｃｍ、　　１％酢酸）
で精製する。主画分を集め、濃縮して９−セファデック
スＣ−２５（商標、ファーマシア社製）カラムに吸着さ
せる。カラムをピリジン水溶液（５〜２０％）で洗浄後
、生成物をＩＮアンモニア水で溶出する。ボーリーの試
薬に陽性を示す溶出液を集め、活性炭で脱色し、凍結乾
燥して、Ｈ−Ｇｌｙ　−Ｇｌｙ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ　
−ＯＨ（０，９７７ｇ　）を粉末として得る。

薄層クロマトグラフィ− Ｒｆ−０，４１［溶媒：ｎ−ブタノール−酢酸−水層ピ
リジン（２：２：２：１）；固定相：メルクＮｏ、　５
５５２　；ポーリーの試薬により検出コアミノ酸分析（
６Ｎ塩酸、１１０°Ｃ１２４時間）Ｇｌｙ：２．０２２
．　Ｌｙｓ　：　１．００．　Ｈｉｓ　：　１．０６７
夾員璽旦 （１）Ｈ−Ｇｕｙ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚｌ　
−２ＨＣ１（３，８８ｇ　）をＮ、Ｎ−ジメチルホルム
アミド（４０ｍ１ｌ　）中Ｎ−メチルモルホリン（１，
７ｍ１１）の存在下、Ｚ−ｐＧｌｕ−Ｏ５ｕ（２，１９
ｇ　）で水浴冷却下に４時間、室温で一夜処理する０反
応混合物濃縮後、これに酢酸エチルおよび炭酸水素ナト
リウムを含む水を加え、生成する不溶物を濾取、乾燥し
て、Ｚ　−ｐＧｌｕ　−Ｇｌｙ　−Ｈｌｓ　−Ｌｙｓ（
Ｚ）　−０Ｂｚｌ　（３，７ｇ　）を得る。

ｍｐ　　１４５−１５５°Ｃ（分解） ［αコ２５−−２１．２３°　（Ｃ−１、Ｎ、Ｎ−ジメ
チルホルムアミド） （２）Ｚ　−ｐＧｌｕ　−Ｇｌｙ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ
（Ｚ）　−０Ｂｚｌ　（３，Ｏｇ　）をアニソール（４
ＬＱ）の存在下無水フッ化水素（４０ｍＱ　）で水浴冷
却下に１時間処理する。過剰のフッ化水素を留去後、生
成物を水で抽出する。抽出液をエーテルで洗浄し、ダウ
エックスｌＸ２（アセテート型）カラムを通過させ、凍
結乾燥する。

この粗生成物をＯ，１Ｍピリジン−酢酸緩衝液（ｐＨ５
，４）で平衡にしたカルボキシメチルセルロース［ワッ
ト’７ンＣＭ−５２コカ５　ム（３，２Ｘ　６０ｃｍ）
を使用するクロマトグラフィーに付す。直線濃度勾配溶
出法により０２〜０．８Ｍピリジン−酢酸緩衝液（ｐ）
１５．４）（各１り）で溶出し、溶出液を分画する（各
１０ｇ）。主画分（６７番〜８１番）を集めてさらにセ
ファデックスＧ−１５（１，３ｆｆｉ、０．１％酢酸）
で精製する。溶出液を集め、濃縮して０．１％炭酸水素
アンモニウム水溶液に溶解し、凍結乾燥して、Ｈ−ｐＧ
ｌｕ　−Ｇｌｙ　−Ｈｉｓ　−Ｌｙｓ　−ＯＨ（５１０
ｍｇ　）を純物質として得る。

［αコ”　−−１９，１８°　（Ｃ−１、水）薄層クロ
マトグラフィー Ｒｆ−０，５３［溶媒：ｎ−ブタノール−酢酸−水層ビ
リジン（２：２：２：１）；固定相：メルクＮｏ、　５
５５２　；ボーリーの試薬により検出コアミノ酸分析（
６Ｎ塩酸、１１０℃、２４時間）Ｇｌ！／：　１．００
０．　Ｇｌｕ：　０．９８９．　Ｌｙｓ：　１．０１９
゜Ｈｉｓ　：　　１．１１０

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式： Ｈ−Ｓａｒ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ、 Ｈ−Ａｓｐ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ、Ｈ−β−
   Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｙｓ−ＯＨ、 Ｈ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−ＮＨ−Ｘ−ＮＨ＿２、Ｈ−β−Ａ
   ｌａ−Ｈｉ−ＮＨ−Ｙ−ＮＨ＿２、Ｈ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ
   −Ｈｉｓ−Ａｒｇ−ＯＨ、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ
   −Ｌｙｓ−ＯＨおよびＨ−ｐＧｌｕ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−
   Ｌｙｓ−ＯＨ（式中、Ｘは低級アルキレン基、Ｙは低級
   アルキレン基を意味する） で示される化合物群から選ばれたペプチドおよびその医
   薬として許容される塩。