JPS6171805A - 高吸油性ペプチドによる有機溶媒の分離方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は特許請求の範囲に記載したトリペプチド誘導体
ＣＩ）を用いて有機溶媒を含む水系混合物または混合水
溶液中から化合物群（ＩＶＩで代表される有機物を効率
よく選択的に吸収、除去することを特徴とする方法に関
する。

ペプチド合成化学の分野において反応試薬ともいえるＮ
−保護アミノ酸（あるいはペプチド）の活性エステルは
Ｎ−保護基、活性エステルの種類およびペプチドを構成
するアミノ酸の種類とその配列順序により有機溶媒に対
する溶解性、結晶性などの物理的性質が大きく左右され
ることが知られている。

しかしながら、これらの低分子量ペプチド類が高分子化
合物によく見られる性質、すなわち有機溶媒に対して高
い吸収塵７１Ｘ１性を示すことを記載した報告は皆無で
ある。

本発明者らはペプチド合成の研究途上偶然にも若干のベ
プチＰ誘導体が低分子化合物であるにもかかわらず、あ
る種の有機物質を効果的に吸収し、−見高分子化合物に
見られるデル状膨潤物質に似た挙動を示す性質のあるこ
とを発見した。この発見をもとにペプチド誘導体の構造
と有機物質の吸収能との関係を鋭意検討した結果、一般
式ＣＩ）で表わされるペプチド類が一般の有機溶媒に対
して非常に高い吸収膨潤性を示すことを見出し、本発明
を完成させた。

本発明になる一般式（Ｉ）の構造から明らかな様に、こ
の親油性化合物はＮ−保護基としてＢＯＣ（１，−ブト
キシカルボニル）、エステル基のアルコール成分トシテ
ＰＣＰ（ヘンタクロロフェニル）の様な疎水性の大きな
構造を持っているが、必ずしもそのことが本発明の性質
発現のための主要な理由とはならない。例えば、式ＣＩ
）の化合物においテＢＯＣヲペンゾイルオキシ力ルボニ
ル基でｔａキ換えるかあるいはＰＣＰのかわりにフェニ
ル基の様に疎水性のより大きい官能基を付けてやると、
有機溶媒に対する親和性が向上して完全に溶解してしま
い、吸収膨潤性を示さない。さらにまた、式ＣＩ）の化
合物におけるアミノ敵の種類とその数についても大きな
制約があり、ジペノチド以下あるいはテトラペプチド以
上では有機溶媒に対して、完全に溶解するか、もしくは
外見上物理変化が全く起らず、同じく吸収膨潤性を示さ
ない。

本発明の有機溶媒の吸収あるいは除去方法を一般的に述
べる。

本発明の有機溶媒の吸収あるいは除去剤を好適に使用す
るには次の様にする。

本発明の一般式ＣＩ）を有する化合物の粉末を有機溶媒
ＣＩＶＩで代表される溶媒中に１１５〜１１５゜（容量
）添加し、全体を固化させる。この際固化速度を高める
ために系全体を振と５あるいは攪拌してもよい。かくし
て、有機溶媒を常温で固形化することができる。

この性質を利用して、以下の様な工業上価値ある使用法
も可能となる。水面上に水と混らない油状物質が一面に
拡散している様な場合本発明の化金物（Ｉ”］の粉末を
その部分に散布することによって速やかに油状物質を固
形化し、除去することが可能となる。

つぎに水とよく混じり合う有機物質との混合溶媒系から
有機物質を選択的に吸収除去する場合にも有効である。

例えば、水−アルコール混合溶媒中において両者を分離
する場合、混合割合によっては共沸の現象を生じ、一方
の物質を蒸留で分離することが不可能となる。

この様な場合、上記混合溶媒中に物質〔工〕の粉末を混
和攪拌することにより常温でアルコールのみを吸収固化
し系外に除去することが可能となり、工業上非常に有利
なプロセスを発現できる可能性を秘めているといえる。

以下に実施例に従って本発明を具体的に述べる。

本実施例で合成した化合物〔Ｉ〕はすべてＬ型アミノ酸
を用いているが、本発明の用途にはＬ型に限る必要はな
く、Ｄ型アミノ酸あるいはＤＬ型アミノ酸を適用するこ
とも可能であり、ペプチド合成においてはラセミイｋを
水ける。弘罪は仝イｔｒい一実施例１ （Ａ）　　ｔ−ｆトキシカルボニルーアラニルーフェニ
ルアラニルーグリシンーペンタクロロフェ二ルエステル
（ＢＯＣ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＦＣＰ　）の製
造方法グリシン−エチルエステル−塩酸塩（４１，８８
ｇ）を塩化メチレン（１））に懸濁し、トリエチルアミ
ン（４２，０ｍＡりで中和し、ｔ−プトキシ力ルポニル
−フェニルアラニ７（７９，５９ｇ）　ｒｔ加えて溶か
し、−１５°Ｃに冷却する。これにジシクロへキシルカ
ルボジイミド（ＤＣＣ）　（６１，９ｇ）を加えて、冷
却下攪拌し、−夜室温で反応させる。

ジシクロへキシルウレアを濾別し、濾液中の溶媒を留去
して得た残分を石油エーテルで固化させる。

ｔ−７”トキシカル？ニルーフェニルアラニルーグリシ
ンーエチルエステルヲ得ル。ＪＤ１８０゜２７．９＜７
６．４％）。ｍｐ　ａ　＜５．０°Ｃ０〔α〕’ｆｆ＝
−ｓ、１２゜（２、エタノール）。

このものを４．２６　Ｎ−塩化水素・／酢酸エチル（５
４０ｆｆｉｇ）で室温で処理する。１．５時間反応させ
たのち溶媒等を留去し、生成したフェニルアラニル−グ
リシン−エチルエステル塩ｍ塩（８１，２ｇ）を得た。

これは減圧乾燥によっても溶媒を完全に除くことはでき
なかった。ただちにこの塩酸塩を塩化メチレン（３００
ｍｌ）に溶かし、トリエチルアミン（３２，１ｍ１）を
加え、冷却し、この混合物にｔ−ブトキシカルボニル−
アラニン（４３，３７９）　ヲ加Ｌ、−１５°ｃテＤｃ
ｃ＜４８．２４ｇ）を加える。−夜室温で攪拌し、ジシ
クロへキシルウレアを濾別し、濾液中の溶媒を’ｒｆＩ
夫して残留物を酢酸エチル（８００ｍ）に溶か１、、ｘ
−？＃　（８Ｑ　Ｑｍｌ　）と石油エーテル（４５０ｍ
Ａ’）を加えて冷却すると固体生成物１−フトキシ力ル
ポニルーアラニル−７ェニルアラニルーグリシンーエチ
ルエステルを得る。収率６５．５５　、＠　（６７，８
％）ｏｍｐ１５３−１５４°００元素分析値：　ｃ２１
）（３１１’ｒ３ｏ６に対してｃ＝５９．８４％（計算
値６０．０８％）Ｈ＝　　７．６５％（＃７．４１％） Ｎ＝　　９．９７％（〃　　９．９７％）かくして得ら
れたエステル（６５，５５ｇ）をメタノール（４００ｍ
ｌ）に懸濁し、２　Ｎ　−ＮａＯＨ（１１６ｍｌ）を加
えて室温で１．５時間反応させる。

いったん濾別したのち、大部分のメタノールを留去し、
全体な０°Ｃ以下に冷却してから冷２Ｎ−ＨＣｊでｐ［
（４〜５にする。析出油状物を酢酸エチルで抽出して水
洗したのち留去する。残分な酢酸エチル−石油エーテル
より再結晶してｔ−ブトキシカルボニル−アラニル−フ
ェニルアラニル−グリシンを得た。収率４２．８０．ｌ
ｉ’（７０％）ｏｍｐｌ　４１−１４２′”ｃ、　〔ａ
〕”ｒＥ＝−２８，９°（ｃ＝１．０、ジメチルホルム
アミド）。

上記のトリペプチド（４２，８０，９）をテトラヒドロ
７ラン（８００ｉＪ）に溶かし、ペンタクロロフェノー
ル（３０，４２，９’）を加えて一１０°Ｃに冷却し、
約１時間後ＤＣＣ（２３，５６ｇ）を加える。

−夜反応させたところ、全体が溶媒和して固化しており
、マグネチツクスターラーで攪拌不能な状態であった。

そこで、１０ＱｍＡ’のジメチルホルムアミドを加えて
４０〜５０°Ｇで濾過し、濾液を留去する。生じた溶媒
和したかさ高いゲル状固体を４０〜５０°Ｃの酢酸エチ
ル（１，５１’）と４０〜５０°Ｃのジメチルホルムア
ミド（１００ｍ）で溶解させ、全体をほぼ１／２容−に
留去すると、強く溶媒和したゼラチン状物を得た。これ
を風乾して溶媒をほぼ蒸発させ、さらに精製（再結晶）
するためにクロロホルム５００−を加えて６０°Ｃ付近
で溶かす。室温付近に全体が冷えると同様にゼラチン状
物となり精製することができなかった。これをエーテル
で洗浄しても溶媒和は解除できなかった。よって２−６
日風乾した後、減圧乾燥して僅かに灰黄色の固体として
ｔ−ブトキシカルボニル−７ラニルーフエニルアラニル
ーグリシンーペンタクロロフエニルエステルヲ得り。収
率５９．３　ｇ（８５，０％）。ｍｐ　１７５−１７６
°Ｏｏ　　（α）ｆａｒ”　＝−１３，４°（１，０、
ジメチルホルムアミド）。

明らかにこの化合物は酢酸エチル、クロロホルムおよび
そのエーテル混合物とは強く溶媒和する。

（Ｂｌｔ−７”）キシ力ルポニルーフ０ロリルーフェニ
ルアラニルーグリシンーペンタクロロフェニルエステル
（ＢＯＣ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＰＣＰ　）の製
造方法フェニルアラニル−グリシン−エチルエステル−
塩酸塩（９５，０，５２）を塩化メチレン（１２５ｃＴ
Ｌｌりに加えて、冷却（−１５°Ｃ）下でトリエチルア
ミン＜４６．２ｒｎｌ）で中和して得た混合物にｔ−ブ
トキシカルボニル−プロリン（７１，０ｇ）を加える。

６０分後冷却（−１５°Ｃ）下でＤｃｃ（６８，１ｇ）
を加え一夜室温で攪拌した。ジシクロへキシルウレアを
濾別し、濾液を留去して、残分を酢酸エチルで抽出し、
Ｉ　Ｎ　−ＮａＨＣＯ３、水、５％−りｘ＞（４３、水
で洗浄し硫酸マグネシウムで乾燥し溶媒を留去すると固
体生成物、ｔ−ブトキシカルボニル−プロリル−フェニ
ルアラニル−グリシン−エチルエステルを得た。収率１
２４．３　ｇ（８４，２％、石油エーテルとエーテルで
洗浄後）。

上記エステル（１２４，３ｇ＞をメタノール（５００ｍ
）に懸濁し、２Ｎ　−ＮａＯＨ（１６６ｍ１）を加えて
、室温で反応させる。反応１．５時間後火部分のメタノ
ールを留去し、水で稀釈した後、酢酸エチルで抽出し、
水相を冷却して、冷Ｉ　Ｎ　−私（酸でｐＨ４〜３の酸
性にし、酢酸エチルで１ｉＪ（状物を抽出し、それを水
洗した後硫酸マグネシウムで乾燥した。留去して、無定
形の固体を得た。石油エーテルで洗浄して、ｔ−ブトキ
シカルボニル−プロリル−フェニルアラニル−グリシン
１２１．ＯＦを得た（定量的）ｏｍｐ９０−９９−０°
Ｃ（無定形）。

〔α］Ｆ＝−７１．９°（１，０、メタノール）。

元素分析値：　ＣｚｘＨｚ＊Ｎ５Ｏｓに対してｃ　＝　
５９−９６％（計算値６０．１３％）Ｈ＝　　７．２３
％（Ｗ６．９７％） Ｎ＝　　９．６９％（、１０，０２％）このトリペプチ
ド（１２１，０ｇ）とペンタクロロフェノール（８１，
３、Ｆ　）　ヲｍ化メチレン（１０００ｄ）に溶かし、
ＤＣＣ（６３，０ｇ）を冷却下（−１５°Ｃ）Ｋ加え、
さらに室温で一夜反応させると全体がゼラチン状に固化
していたので、クロロホルム（４００ｄ）を加えて６０
℃付近で溶解させて不溶部分を濾別し、濾液を得た。こ
の濾液に結晶化の目的でエーテルを加えると強く溶媒和
したゼラチン状のｒル状物が生じて濾過不能になった。

一部をとり出して風乾して得た固体を酢酸エチルとエー
テルで再結晶しようとしたが、得られたものは同じゼラ
チン状固体であった。

単離の目的で、数日間室温に放置すると溶媒が大部分飛
散した。さらに減圧乾燥して、ｔ−プトキシ力ルボニル
ープロリルーフエ二ルアラニルーグリシンーペンタクロ
ロフェノール１０２．８　、！ｉ’（６７，７％）を得
た。ｍｐ１２０−１２４°Ｃ０〔α〕霊＝−３１，５１
°（０，９、エタノール）。

実施例２ 実施例１で合成したＢＯＣ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−
ＯＦＣＰ　０．２ｇを試験管にとり、それぞれ有機溶媒
５０Ｆを加えて振と５した後、静置してその外見を観察
した。

その結果を表１に示す。

酢酸エチル　　　　　　膨潤し、全体が固化する。

エチルアルコール　　膨潤し、全体が固化する。

メチルアルコール　　直ちに膨潤する。

ジメチルエーテル　　直ちに膨潤し、一部面化する。

灯　　　油　　　　　　　　膨潤する。

石油エーテル　　　　膨潤する。

“固化とは試験管を倒しても流動しない状態のものをい
う。

なお、比較対照として実施例１に従って容易に合゛成さ
れるＢＯＣ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＰＣＰを０．２　Ｆと
り、上と同様の実験を行なったが、この化合物は各溶媒
に対して完全に溶解するかまたは不溶となり、表１のご
と（膨潤したり全体が固化するという現象は見られなか
った。

実施例６ 実施例１で合成したＢＯＣ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−
ＯＰＣＰ　Ｏ，２ｇを試験管にとり、それぞれ有機溶媒
６ｏｇを加えて振とうした後、静置してその外見を観察
した。

その結果を表２に示す。

酢酸エチル　　　　　　直ちに膨潤し、全体が固化する
。

ベンゼン　　　　　　　膨潤し、直ちに全体が固化する
。

エチルアルコール　　膨潤し、全体が固化する。

メチルアルコール　　膨潤し、全体が固化する。

ジエチルエーテル　　膨潤し、固化する。

ジオキサン　　　　　膨潤する。

４化メチレン　　　　膨潤する。

灯　　油　　　　　　　膨潤し、全体が固化する。

石油エーテル　　　　膨潤し、全体が固化する。

なお、比較対照として、実施例１に従って容易ンゾイル
オキシカルがニルである）０．２５１をとり、上と同様
の実験を行なったが、この化合物は各溶媒に対して表２
に示した様な特徴ある現象を示さなかった。

実施例４ 水１ｏｏｏｍ／！ｃ酢酸エチル’ｌＱｍｌを添加した混
合物中（静置すると二層に分離している）に実施例１で
合成したＢＯＣ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＰＣＰ　
Ｏ，２ｇを添加し、はげしく攪拌する。常温で３０分攪
拌した後、固形物を濾別する。濾液な８０分静置した後
、外見を観察したが透明な溶液となっており酢酸エチル
が上部に分離して二層になるという現象は見られなかっ
た。

つぎに濾別した固形物を風乾し、柳本ガスクロマトグラ
フィで分析したところ、大量の酢酸エチルと痕跡量の水
のピークを示し、上記混合物から酢酸エチルが選択的に
吸収除失されることがわかった。

実施例５ 水５００Ｍ−メタノール５００ＷＬｌの混合溶媒中に実
施例１で合成したＢＯＣ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｏ
ＦＣＰＯ０５Ｉを添加し、室温で８時間攪拌した後、固
形物を濾別する。

濾別した固形物を風乾した後、実施例４と同様がスクロ
マトグラフイで分析したところ、大量のメタノールおよ
び極く少量（０，１％以下）の水のピークを示した。

このことは、上記混合物からメタノールを選択的に吸収
除去できることを示しており、一般の蒸留によっては不
可能な割合の水−アルコール混合液からの高純度アルコ
ールの分離が可能となることを示している。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 一般式〔 I 〕 ＢＯＣ−Ｘ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−ＯＰＣＰ〔 I 〕（式中
   、Ｘは、アラニル、プロリンおよびグリシン残基を表わ
   し、ＢＯＣおよびＯＰＣＰはそれぞれ式〔II〕および〔
   III〕▲数式、化学式、表等があります▼〔II〕、▲数
   式、化学式、表等があります▼〔III〕で示される官能
   基を表わす） で表わされるトリペプチド誘導体を、つぎの化合物群〔
   IV〕； 酢酸エチル、ベンゼン、エチルアルコール、メチルアル
   コール、ジエチルエーテル、ジオキサン、塩化メチレン
   、ガソリン、軽油、灯油、重油および石油エーテル〔I
   V〕 で代表される有機溶媒中に、あるいはこの有機溶媒と水
   との混合物または混合溶液中に添加することにより上記
   トリペプチド誘導体に化合物群〔IV〕を吸収させること
   を特徴とする有機溶媒の分離方法。