JPS61501325A - 抗ウイルス医薬製剤およびその使用法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 抗ウイルス医薬製剤およびその使用法 本発明は哺乳動物のヘルペス群ウィルス感染を治療するための、特にヒトに於け る単純ヘルペスウィルス感染を治療するための医薬層、成物および治療方法に関 する。

ヒトに感染し、疾患の原因となる４種の別々のヘルペス群は、以下の如（取り扱 うことができる；（１）単純ヘルペスウィルス１および２（Ｈ５Ｖ−１および（ Ｈ５Ｖ−２）　：　（２）サイトメガＯ’フィルス（ＣＭＶ）：　（３）水痘帯 状ヘルペスウィルス（ＶＺ）；および（４）ニブ本発明者らは、通常り≠ド力イ ン（２−ジエチルアミノ−２’、６’−アセトキシリジド）と呼ばれでいるアミ ノ−アミドが、細胞培養に於いて、Ｈ３Ｖ−１およびＨ５Ｖ−２に対して有効な 抗ウィルス剤であり、哺乳動物のヘルペスウィルス感染を治療することができる ことを見い出した。これは、ヒトの口腔および性器病変の治療に特に有効である 。

本発明者らはまた、パントテン酸またはそのアルコールおよび塩形のもの、デク スパンテノールおよびパントチネートを、それぞれ、リドカインまたはりドカイ ン塩酸塩に添加すると、これらの薬物の抗ウィルス活性が有意に増強されること を見い出した。

エング（Ｎｇ）らは、女性の性器ヘルペスウィルス感染の対症療法に１％リドカ イン塩酸塩を使用している〔オブステトリックス・アンド・シネコロジー（Ｏｂ ｓｔｅｔｒｉｃｓ　ａｎｄ　Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ　）、３６巻、Ｐ６４５−６ ５１．１９７０）。しかし、著者らは、この治療法では有益な成果が得られなか ったと報告している。

エングらが局所的リドカイン塩酸塩療法により、みるべき効果を観察出来なかっ た理由は説明されでいないが、化合物の濃度が十分でなかったためであるかも知 ブチナ（Ｖｕｃｉｎａ　）らは、帯状ヘルペスの９つの症例の治療にパンテノー ルを使用し、パンテノールは有力な鎮痛効果を有し、治療中断しい病変が生じな かったこと、臨床症状の期間は、他のタイプの治療剤を用いて観察された期間よ りも短かかったことを報告していル［ヘティアトリ７　（Ｐｅｄｉａｔｒｉａ、 ８巻、（２）、ｐ１４７−５０．１９６５　］。これらの臨床実験に於いて、著 者らは５％％所適用または５％法法名溶液使用した。

著者らは、単純ヘルペスウィルス感染の治療にパンテノールを使用することにつ いては、何ら報告していない。

本発明は、有効な抗ウイルス活性量（好ましくは医はその薬学的；こ許容し得る 塩を哺乳動物に投与することからなる、哺乳動物のヘルペス群ウィルス感染を治 療する方法ｌこ広く関係するものである。さらに本発明は、有効な抗ウイルス活 性量のりドカインまたは薬学的に許容し得るその塩を、パンテノール、パントテ ン酸またはその塩類と共に投与することからなる、ヒトのヘルペス群ウィルス感 染を治療する方法を提供するものであるっ 更ム”こ本発明のもう１つの目的は、抗ウイルス活性量のリドカインまたはその 薬学的に許容し得る塩単独との組合せからなるか、あるいは、これらと、パンテ ノール、パントテン酸またはその薬学的に許容し得る塩、例えばナトリウム、カ リウム、カルシウムまたはアルミニウムなどの金属との塩、あるいはトリー（Ｃ ニー６−アルキル）アミン類（例えばトリエチルアミン）、アンモニウム、グア ニジンなどの塩基との塩との組合せからなる、哺乳動物のヘルペス群ウィルス感 染の治療のための医薬組成物製剤を提供するものである。

リドカインは、局所麻酔剤として臨床的に有用であることが証明された最初のア ミノ−アミドであり、リドカインの導入以来合成された多くの局所麻酔剤もまた 、アミノ−アミド頌である。リドカインと化学的に類但している以下の化合物群 が最近臨床に導入された：ブリロカイン（２−（プロピルアミン）　−２’−プ ロピオノトルイジド）；エチドカイン（２−エチルプロピルアミノ−２’　、　 ６’−ブチロキシリジド）；メピバカイン（１−メチル−２’、６’−ピペコロ キシリジド）；およびその類似体プピバカイン（１−ブチル−２′。

６’−’；ｌｆルー２−ピペリジン力ルポキサニリド）。

これらの化合物および化学的に関連するその他の合成アミド−アミン類がリドカ インと同じ様に機能し、ヘルペス群ウィルスに対して抗ウィルス活性を示す限り 、これらの化合物は、本発明の目的に照らし、リドカインと等価であると考える べきであり、本発明の請求の範囲に入るものである。

リドカインおよびその薬学的に活性な塩類は、本発明者らにより、１．５■／ｒ ｎｌ（０，０５％）〜１００”９／、ｎｌ（１０％）の範囲の濃度で、細胞培養 および動物モデル系に於いで、抗ウィルス活性を示すことが見い出された。ヒト に於ける筋肉内投与の場合の、推奨される１日量は４．３ｍ９／ｋｇ　（体重） または２−　ＯＷ　／　ホ７ド（体重）である。従って、７０ｋｇ　のヒトの場 合、推奨される１日投与量は３００１Ｎ１である。これは通常、１回の筋肉内ポ ーラスの形で注入される。局所剤形（軟膏または溶液）においては、代表的な投 与量は、１゜５〜１０％の局所適用（最も好ましいのは１．５〜４９６）を１日 ３〜４回行なうことである。パントテン酸またはデクンバンテノールが製剤中に 含まれでいる場合は、これは５・〜５０η／−の濃度で存在するのがよい。

リドカインを薬学的１こ許容し得る塩の形で投与する場合は、この塩は非毒性塩 とし、無機酸または強い有機酸の酸付加塩、例えばハ゛イドロバライド、硫酸塩 、硝酸塩、燐酸塩、酢酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩 、トルエンスルホン酸塩ｔたはメタンスルホン酸塩などにする。

リドカインまたはその薬学的に許容し得る塩は、それを原料物質のままで投与す ることもできるが、医薬製剤の形で投与することが望ましい。この医薬製剤は、 活性化合物を、薬学的に許容し得る担体と共に含んでいでもよい。担体は、製剤 中の他の成分と適合するという意味に於いて許容し得るものでなければならず、 そして受入者にとって有毒であってはならない。この様な医薬製剤は、薬学技術 分野で既知の方法のいずれかを使って製造することができる。

この医薬製剤を局所投与する場合、担体は溶液、軟膏またはゲル基剤からなるこ とが好ましい。基剤は、例えば以下の物質の１またはそれ以上からなっていても よい：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール類、蜜ロウ、鉱油、希釈剤 、例えば水およびアルコール、乳化剤および安定化剤。通常、製剤には、約１６ ５〜約１０％（Ｗ／ｖ）（単位容量当たりの重量）の濃度のリドカインまたはり ドカイン塩を含有させる。非経口投与に適した医薬製剤には、活性化合物を水ま たはその他の適当な媒体に入れた滅菌溶液または懸濁液が含まれる。

コ（７）ＩＪＪは、ベロ（Ｖｅｒｏ、アフリカミドリザルの腎）細胞培養中；こ 於ける単純ヘルペスウィルス１型の複製に対して、リドカイン塩酸塩か坑ウィル ス活性を持っているかどうかを調べるために特に計画されたものである。Ｈ５Ｖ −１感染細胞培養を、多数の濃度のりドカイン塩酸塩で後処置するという収穫実 験を行なった。

非処置ウィルス（ネガティブ）コントロール培養における細胞変性効果（ＣＰＥ 　）が３十〜４＋（約９０％の細胞がＣＰＥを示す）になった時、細胞を含んで いる容器を収穫したうこの実験に於けるポジティブコンであった。ウィルス収穫 物をベロ細胞においでプラーク分析し、各試験フラスコ中で生産された、ミリメ ータ当たりのプラーク形成、単位（ｐｆｕ／ｍｚ）の数を測定し、コントロール と比較した。第１表は、この収穫滴定の結果を示しており、リドカイン塩酸塩は 、細胞培養（こ於いて単純ヘルペスウィルス１型の複製を阻止し得ることがわか り、従って抗ウィルス剤として確立された。

第１表は、０．４〜１．８η／ｒｎｔの種々の濃度でのリドカイン塩酸塩につい ての結果を示している。この濃度範囲の全てに強い抗ウィルス活性が見られる。

、２．０η／−の濃度では、リドカイン塩酸塩は細胞培養に於いて毒性を示した 。リドカイン塩酸塩の濃度を低げでいくと、リドカイン塩酸塩の抗ウィルス活性 は、０，１η／−まで有意１こ降下することがわかった。

のドーズリスポンス（投与量一応答） 単純ヘルペスウィルスの複製サイクルは、よく記載されでいる様に規則正しく時 間的に起るので、リドカイン塩酸塩によってブロックされた複製段階を推定すＦ ｕｎｇｉｓｏｎｅ　）　〕、および１０％熱非活性化ウシ胎児つ清を添加したイ ーグル（Ｅａｇｌｅ　）の最小必須培地上で、アフリカ緑猿の腎細胞〔ベロ（Ｖ ｅｒｏ）細胞〕を増殖させた。湿気を与えた５％ＣＯ２雰囲気下で、細胞を増殖 させた。

我々の保存する、単純ヘルペスビールス、タイプ１（１型）（Ｈ５Ｖ−１）、ド ー／Ｌｌ　（Ｄｏｒｒ　）株を使用した。

０、０１　ｐｆｕ／細胞の多重度でベロ細胞に感染させることによりビールス株 を増殖させ、２％ウシ胎児血清を使用する以外は上記と同様の培地上で採取した 。３回冷凍と解凍を繰り返してビールスを採取した後、細胞残渣を除去するため 、３０００ｒＰｍ、４℃で１５分間遠心した。上澄液を分割し、−７０℃で冷凍 した。

ＰＢＳ中での系列希釈によってＨ５Ｖ−１および２を検定し、次いであらかじめ ＰＢＳ　で３回洗浄しでおいた３５ｍ　のプレート中で、ベロ細胞の単一層上に ０．１４のビールスを吸着させた。３７℃で６０分間吸着させた後、ビールス接 種剤を除去し、感染させた単一層をＰＢＳで２回洗浄し、ＭＥＭ維持維持上地上 、５％保存ヒト血清２−でおおった。感染後７２時間でおおつていた液を除去し 、単一層をＰＢＳで３回洗浄した。９５％のメタノールおよび１％のシュウ酸ア ンモニウムを含有する、０．２％のクリスタル・バイオレット水溶液で細胞を染 色し、水道水ですすぎ、乾燥し、プラークを数えたつ 抗体　ウサギ−抗−Ｈ５Ｖ　−１（マクィンタイレ（Ｍａｃｌｎｔγｒｅ）株〕 抗体、およびヤギー抗−ウサギフルオレツセインインチオシアネートコンジュゲ ート（複合体）抗体は、市販品から得た。

有の増殖培地４ｍ１ｓ中に５×１０２または５　Ｘ　１０’個、の細胞密度とな るように細胞をまいた。コロニーが形成されるように、３７℃で７日間プレート をインキュ＋＋ ベートした。次いで培地を除去し、Ｃ２およびＭｇ＋“を含有しないリン酸塩緩 衝の食塩水（ＰＢＳ　）　中で３回細胞を洗浄し、クリスタル・バイオレットで 染色し、すすぎ、乾燥した。立体顕微鏡を使用しでコｏニー数を数えた。コロニ ーとして定義する最少細胞数は５０であり、平均的なコロニーは１００細胞を含 有しでいた。処理をした培養物中のコロニーの平均数を、処理をしない対照培養 物中のコロニーの平均数で割ることにより、平均生存％を計算した。

間接的な免疫螢光法　下記ａ）〜ｄ）の４つの系について分析した。

ａ）非感染、未処理ベロ細胞 ｂ）非感染、リドカイン処理（１，０■／−）ベロ細胞 ｃ）　Ｈ５Ｖ　−１ｍ染、未処理へ口細胞（Ｍｏｌ　＝Ｑ、３　）ｄ）Ｈ５Ｖ− １感染、処理へ口細胞（１，Ｏ＋’９／−リドカイン、Ｍｏ１−０．３　） 感染１時間後に、培養物を処理した。感染１８時間後に、培養物を冷メタノール で固定し、抗Ｈ５Ｖ−１ウサギ抗体で３０分間染色し、ＰＢＳで３回洗浄し、フ ルオレッセイン複合ヤギ抗−ウサギ抗体で３０分間染色し、洗浄し、螢光顕微鏡 で観察した。

つの系について分析した。

１）非感染、未処理ベロ細胞 ２）非感染、リドカイン処理ベロ細胞 ３）Ｈ５Ｖ−１感染、未処理ベロ細胞 ４）　ＨＳ　Ｖ　−１感染、リドカイン処理ベロ細胞２５Ｃ１１のフラスコ中で 融合するまで細胞を増殖させた。増殖培地を除去し、ＰＢＳ中で３回細胞を洗浄 し、３．ＱＭＯＩのＨ５Ｖ−１で感染させるかまたはモツク（ｍｏｃｋ）感染さ せた。６０分間吸着させた後、接種物を除去し、細胞をＰＢＳ中で１回洗浄し、 リドカイン含有または対照の維持培地を加えた。処理培養におけるリドカインの 濃度は１．０■／ｍｔであった。３７℃で１８時間、細胞をインキュベートした 。次いで、培地を除去し、細胞をＰＢＳで１回洗浄し、０．０２％分散させるよ うに振盪した。

７うＸ：＋中で細胞を再分散させ、次いで細胞をペレット化するため、１５−の 遠心管ｉこ移し、ｇ　ｏ　ｏ　ｒｐｍ。

室温で５分間遠心した。ＥＤＴＡ　上澄液を除去し、同様の遠心操作によりＰＢ Ｓ洗浄を２回行なった。細胞ペレットをＦＢ５５ｍｌｓに再懸濁させ、染色する ため、２つの２．５ｍ１ｇ懸濁液に分割した５次いで、下記２種の染色プロトコ ールを行なう。

１）ヤギー抗−６サギＦＩＴＣ抗体のみ上記と同様にして、２．５−の細胞懸濁 液を再度遠心し、次の１）または２）１．ｎｌ中で、細胞ペレットを再懸濁させ た。

１）ヤギー抗−ウサギＦＩＴＣ複合体 ２）ウサギ抗Ｈ５Ｖ抗体 ウサギの抗Ｈ５Ｖ−１抗体、およびヤギー抗−ウサギＦＩＴＣ抗体は、最終希釈 １：４０で使用した。非感染細胞および０．３Ｍ０ＩでＨ５Ｖ−１感染させた細 胞を染色するために、１：２０から１　：１６０の交叉希釈を使う抗体のチェッ カーボード（ｃｈｅｃｋｅｒｂｏａｒｄ　）滴定を利用する試験を前もって行な い、この希釈を決定した。包含されるものも、また、ヤギー抗−ウサギＦＩＴＣ 抗体のみによって染色された、非感染またはＨ５Ｖ感染の培養物であつ・た。抗 体の最適濃度は、最少の非特定（バックグラウンド）染色、および螢光顕微鏡に よる細胞構造の最良の視覚像を生じる希釈液であると考えられる。

抗体と結合させるため、室温の暗所で３０分間、培養物を維持し、次いでｓ　ｏ 　ｏ　ｒｐｍで５分間遠心した。

次いで、前記のＰＢ５　５ｍ１ｓで３回、この細胞を洗浄した。次いでプロトコ ールに従って、前記のように、ヤギー抗−ウサギＦＩＴＣ抗体で、染色操作を繰 り返した。最終の細胞ペレットを、ＰＢＳＩ、、ｚＨこ再懸濁させ、２つの１０ ％ホルマリンを含有するＰＢＳ溶液０゜５−に分割した。次いで全試料を螢光顕 微鏡で観察した後、自動螢光分析にかけた。試料あたり２０細、抱を数えること により、観察試料を定量し、相対的な観察螢光度をＯから６の等４級に格付けし 、各試料１こついて平均の相対的螢光度を計算した。

料−こ対する螢光強度および螢光細胞数ｌこおいて、ホルマリン固定試料が等価 であること、および細胞の相同性が固定操作Ｆこよって変化しないことを螢光顕 微鏡で決定した。従って、自動分析；こおける２つのグループの螢光パラメータ ーの確認の後、最終的な自動螢光分析に対するホルマリン固定試料を選択した。

次のコードを使い、８試料についで分析した。

抗体 １）ヤギー抗−ウサギＦＩＴＣ抗体（２番目の抗体のみ） ２）ウサギ−抗−Ｈ５Ｖ−１およびヤギー抗−ウサギＦＩＴＣ抗体（１番目およ び２番目の抗体）ＵＵ−１−非感染、未処理細胞、２番目の抗体のみＵＴ−１− 非感染、≠・リドカイン処理細胞、２番目の抗体のみ ＵＵ−２−非感染、未処理細胞、１番目および２番目の抗体 ＩＵ−１−Ｈ５Ｖ−１感染、未処理細胞、２番目の抗体のみ ＩＴ−１−Ｈ５Ｖ−１感染、中リドカイン処理細胞、２番目の抗体のみ ＩＵ−２−Ｈ５Ｖ−１感染、未処理細胞、１番目および２番目の抗体 ＩＴ−２−Ｈ５Ｖ−１感染、中ａ）　）’　カイン処理細胞、１番目および２番 目の抗体 どちらの抗体系が、非感染、未処理のベロ細胞に結合するかを決定するため、Ｕ Ｕ−１、ＵＵ−２コントロールを設定した。抗体系の存在下でリドカインが自身 で螢光するかまたは螢光を起こすかどうかを決定するため、ＵＴ−１、ＵＴ−２ コントロールを設定した。

選別される抗体としての特殊性を確認するため、ＩＵ−１、ＩＵ−２コントロー ルを設定した。Ｈ５ｖ感染のりドカイン処理組胞が、２番目の抗体と意味ある結 合をするかどうかを決定するため、ＩＴ−１系を設定し、リドカインが、ＩＵ− ２試料に匹適するようなＨ５Ｖ固有の抗体結合量に影響するかどうかを決定する ためＩＴ−２コントロールを設定した。

測定細胞数（Ｃｅ１ｌｓ　ｃｏｕｎｔｅｄ　）　：　１０，００ル一ザー強度（ Ｌａ５ｅｒ　Ｐｏｗｅｒ　）　：　５００．４８８ｎｍ時ノズルの大きさ＝５０ 正の螢光の基準は、負のコントロールておける重なりが５％以下である正の部分 であると考えた。特定のチャンネルで試験した相対的な細胞数の関数として、螢 光チャンネルを計算した。正の細胞数は、与えられた場所での正の細胞数パーセ ントに、分析細胞総数を乗じることによって計算した。コルモゴロフースミル／ 　７　（Ｋｏｌｍｏｇｏｒｏｖ　−Ｓｍ’１ｒｎｏｆｆ　）統計、および、００ １以下のＰ（またはα）値に対応する９９．９％信頼値での温熱仮説を使って、 結果を試験する。

リドカインによるＨ５Ｖ−１の直接不活性化ＭＥＭ中、４℃で１時間、９×１０ ６斑点生成単位のＨ５Ｖ　−１と共に、３種濃度のリドカインをインキュベート した。適当な希釈を行ない、斑点検定ｌこよりウィルスを検定した。

２５Ｃ１１”　フラスコ中で３．０のＭｏｌでＨ５Ｖ−１に感染させた。６０分 間の吸着の後、接種物を除去し、細胞を洗浄し、１．５．１，０．０，５．０． ０り／−の濃度で維持培地に含有されるリドカインを加えた。３７℃で１８時間 インキュベートした後、培養物を洗浄し、トリプシン−ＥＤＴＡに分散させた。

再懸濁細胞の希釈を、非感染ベロ細胞と混合して行ない、１．５％の保存ヒト血 清を含有する維持培地を使用しで塗布した（ＨＳＶ上層）。次いで上層を除去し 、細胞をＰＢＳ中で洗浄し、クリスタル・バイオレットで染色した。゛感染中心 の数を立体顕微鏡を使って決定した。

中で洗浄し、３５　ｒａｔｓ２（Ｄ皿中、３．０（７）ＭＯＩ　で、Ｈ５Ｖ−Ｈ こ感染させた、ウィルス接覆をした後、直ちに、細胞内ウィルスを採取するため 、Ｐ、ＢＳで２回洗浄し、各培養物に１．０ｒｎｔのＰＢＳを加え、−７０℃で 冷凍して、３つの培養物を洗浄して調製した。

つぎの３つの系について試験した。

１）リドカイン処置培養物（０，１■／−濃度）２）ヨードデオキシウリジン処 置培養物（１０μｇ／、ｎｌａ度） ３）非処置培養物 ６０分の吸着期間後、接種物を除き、その細胞を洗浄し、維持培地に適当な化合 物を加えたものまたは維持培地単独（対照培養物）で処理した。各基の３つの培 養物を細胞内ウィルス収穫用（１時間収穫）に調製した。２．４．６．８．１０ ，１２．１４．１６および１８時間後感染にて、各基の３つの培養物を収穫用に 調製した。・全″培養物ｌこついて皿から細胞をこすり取り、凍結−融解を３回 繰返し、ついで３０００ｒＰｍにて４℃で３０分間遠心して細胞くずをペレット にして収獲した。その上清液を一７０℃で保存し、各時間で生成した細胞内ウィ ルス量をプラーク試験により測定した。

処置時間の複製に対する影響 ３５　ｍｍ２の平板中に含まれている融合性のベロ細胞をｐｎｓ中で洗浄Ｌ、Ｍ ＯＩ　３．０１ｃｋイテＨ５Ｖ−１テ感染させた。

２つの系列について分析した： １）リドカイン処置培養（濃度１．Ｏ＃／ｄ）２）ヨードデオキシウリジン処置 培養（ａ度１０μｌ／ｄ＞ 吸着期間（６０分）後、接種物を除去し、細胞をＰＢＳ中で洗浄し、各系列から 、３つの培養物を維持培地中で適当な薬物で処理した。残りの培養物に維持培地 を重層した。感染後、２，４，６，８，１０，１２，１４．１６および１８時間 後、各系列の３つの培養物から培地を除去し、細胞をＩ’ＢＳ中で洗浄し、培地 を、リドカインまたはヨードデオキシウリジン−含有培地で置き換えた。全培養 物を３７℃において１８時間、インキュベートした。１８時間後処理した平板を いずれかの薬物に、約２分間、さらした。感染の１８時間後、培地を除去し、全 培養物から細胞内ウィルスを収獲した。１８時間目に、６個の、）ｉｓＶ−１感 染、非処置培養物をも収獲した。両薬物の処置時間がＨ５Ｖ−４の複製に及ぼす 影響を、プラーク・アッセイにより請求めた。

結果 非感染細胞に対するリドカインの毒性 リドカインは、濃度０．０５Ｍｇ／ｄまたはそれ以下では、ベロ細胞のコロニー 形成能力を阻止しなかった。

濃度２．０！／ｄまたはそれ以上のりドカインでベロ細胞を処置すると、コロニ ー形成能力が９０％以上の割合で減少された。リドカイン濃度が１．Ｏ＃／ｄま たはそれ以下の場合、平均の生存率は７５％以上であった。

直線状の回帰プロットの形成に基づいて５０％阻止用量を算出し、１．２１９／ ｄという値を得た。

以上の結果から、また、濃度ＬＯ’ｌ／ｄまたはそれ以下において、リドカイン がベロ細胞内での単純庖疹ウィルスの複製を有意に阻止することから、他のウィ ルスを用いて行う抗ウイルス分析においては、濃度範囲として１、Ｏ＃／ｄ　（ ３１０ｇ減少）　〜０．０５＃／ｄ（５０％プラーク減少）を採用することとし た。

リドカインによるＨ３Ｖ−１複製の抑制：へＯ（Ｖｅｒｏ）細胞を）ｉＳｖ−１ ド一ル株テＭＯＩ　３回にて感染させ、感染１時間後、リドカイン含有維持培地 を加え、２４時間培養する。そのウィルスを集め、ベロ細胞でのプラーク試験に よりウィルス収量を測定した。

）（ＳＶ感染ベロ細胞培養物のリドカイン０．０５Ｍｇ／厘ｌ濃度での処理によ り、プラーク形成ユニット７厘ｔ（Ｐｆｕ／ｄ）が５０％抑制された。このリド カイン用量を非細胞毒であるとして示した。０．６ＭＩ／ｄにてウィルス収穫が ２　ｌｏｇ減少され、この濃度では１１％細胞毒性を示した。リドカイン１．０ １１９／ｄ！度では５Ｘ１０２ｐＥｕ／ｄ以下のウィルス収穫をもたらし、この 濃度はわずかに２６％細胞毒性に相当した。

リドカインによるｔ−ｔｓｖ−２複製の抑制：べ口細胞をＨ５Ｖ−２（臨床的単 離株）でＭＯＩ３回にて感染させ、感染１時間後にリドカイン含有維持培地を加 え、２４時間培養させた。ウィルスを集め、ベロ細胞にてプラーク試験によりウ ィルス収量を測定Ｈ５Ｖ−２感染培養物をリドカイン濃度０．０５Ｍ１／ｄ〜Ｌ Ｏ＃／ｄにて処理して、ウィルス収穫値減少は０、６７　＃Ｏｇ〜２．６　＃ｏ ｇに増加した。

細胞付着１こ対するリドカインの影響 ６０ｎ＠中でリドカイン含有培地４ｄにベロ細胞を５　ｘ　ＩＱ　ｃｅｌｌｓの 密度で塗布し、３７°Ｃて７日間培養させたのち、培地を除き、コロニーをＰＢ Ｓにて３回洗浄し、クリスタルバイオレットで染色させた。２回実験し、その平 均をプロットした。

濃度１．Ｏ＃／ｄ以下ではリドカインはベロ細胞ノ付着ならびにその後のプラー ク形成を抑制しなかった。

しかし、濃度１．２ｍｇ／ｄ以上では、リドカイン存在下に塗布した細胞のコロ ニー形成能は相当抑制された。

回帰直線分析で得られる５０％抑制用量は１．２８Ｍ１／ｄであった。細胞付着 プロットについて回帰直線分析により得られる５０％抑制用量は１．０２ｑ／ｄ であった。しかし、これらの実験では、塗布時にある濃度範囲の薬物が存在し、 ５日間の追加処理によりコロニー形成が減少したため、それらの値は、付着結果 と細胞毒性との間の差異を決定するために直接比較することはできない。

間接的免疫螢光分析： リドカイン０．２〜１．０＃／ｇｊの濃度にて４回別々に測定した。コードされ たスライドを試験した３人の観察者は、それぞれ独立して、リドカインの全濃度 での螢光により、螢光細胞の数および対象に対する螢光強度において類似してい たと結論した。ベロ細胞内でＨｓｖ−１抗原が非処理対象と同程度合成されたこ とが認められると結論された。

リドカイン処理ｔ（ＳＶ−１感染ベロ細胞の生細胞表面間接的免疫螢光： 非感染ベロ細胞は、家兎（ウサギ）抗１（ＳＶ抗体および山羊（ヤギ）抗家兎抗 体系のいずれにも著しい結合は示さなかった。リドカイン処理細胞および非処理 細胞のいずれも螢光せず、それは非特異的抗体の結合およびリドカイン誘引螢光 は生じなかったことを示す。

染色成績表１は、Ｈ５Ｖ感染または非感染を問わず、複合抗体がベロ細胞に非特 異的に結合しなかったことを示した。この結果は、リドカイン処理Ｈ５Ｖ−１感 染細胞の表面では、非処理感染細胞のものに比べて螢光強度において減少するこ とを示している。リドカインは生細胞の表面での１−１ｓＶ特異抗原の蓄積を防 ぐとの結論を得た。

自動的螢光プロー細胞計算により分析される生細胞表面間接的免疫螢光： 非感染細胞を第２抗体のみまたは両抗体で染色したところ明らかな螢光は示さな かった。非感染リドカイン処理細胞も、いずれの染色系でも、螢光を示さなかっ た。Ｈ５Ｖ感染細胞は、リドカインによる処理、非処理を問わず、第２抗体のみ で染色したときには明らかな螢光は示さなかった。

Ｈ５Ｖ感染非処理細胞を両抗体で染色すると、９０．８％の細胞が明らかに染色 された（９．０８１細胞／１０゜００１全細胞；第１図を参照）。その平均ピー ク溝は８４．７であった。このように、この群の直線螢光平均強度は約８５であ った。上記平均以上の細胞の割合は４５．０８％で、平均以下の細胞の割合は４ ５．７３％であった。）（ＳＶ−１感染リドカイン処理細胞を両抗体で染色する と、４７．６７％の細胞°が明らかに染色された（４，７６７細胞／１０，００ １全細胞）。

その平均ピーク溝は６２．２で、平均直線螢光は約６２であった。その平均以上 の陽性細胞の割合は１２゜７３％で、その平均以下の陽性細胞の割合は３４．９ ４％であった。

溝２２〜１２８を合体して螢光陽性と決定された。

リドカイン処理試料では、陽性細胞の数は４３％減少し、２２．５の平均溝のず れがあり、それは螢光強度においても同様に著しい減少があったことを示す。こ れらの結果は、リドカインはＨ５Ｖ特異的抗原の血漿膜への挿入を抑制すること を示す。

ｒｉｓＶ−１をリドカイン３用量にて４°Ｃで培養したところウィルス価は低下 しなかった（第２表を参照）。

リドカインは４℃では１−ｉｓｖ−１の感染性を直接不活化しないとの結論を得 た。

リドカインは試験した全濃度において感染中心の形成を抑制した（第４表）。こ の実験結果から、Ｈ５Ｖ感染細胞をあとでリドカインで処理し、よく洗浄し、つ いで非感染細胞と一緒に培養すると活発なＨ５Ｖ複製は行なえないことがわかっ た。例外的に、きわめて低レベル（対照の３〜１５％）では４複裂サイクルに相 当した。

１段階複製サイクル： リドカインおよびヨードデオキシウリジン処理培養物の両方についての細胞内Ｈ ５Ｖ−１価は対照培養物から６時間後感染までのものと同様であった。しかし、 ６〜８特開後感染の間では、対照細胞にも１　ｎｏｇの力価増加が認められ、１ ８時間後感染では最終レベルで１、　Ｌ　５　Ｘ　１０６ｐｆｕ／、７まで力価 増加があった。リドカイ、ン処理収獲物ではＩＤＵ処理処理物獲物べ°て最初は 低かったが、１０〜１２時間後感染の間では増加し、ＩＤＵ処理処理物獲物以上 ベルに達した。しかし、最大差でも１６時間後感染での０．６７１ｔｏｇにすき なかった。

細胞内ウィルス複製を著しく抑制する両阻害剤は、対照状獲物に見られると同様 に、約６〜８時間後感染で平常に増加を始めると結論された。

複製に対する処理時間の影響： ヨードデオキシウリジンは、１２時間後感染（ｐ、ｉ、）はど遅れて与えたとき は対照群レベルの２％以下にＨｓｖ−１の複製を抑制する効果があった。しかし 、１４時間ｐ、ｉ、では１３．７％の収穫物力価が測定され、培養物を１８時間 ｐ、ｉ、で処理したときは対照力価の８１．３％まで増加した（第１図）。

リドカインは、１２時間ｐ、ｉ、で与えたときは対照レベルの０．１９％までＨ ３Ｖ−１の複製を抑制し、１４．１６および１８時間ｐ、ｉ、では、対照レベル の１．２襲〜３．１％の間のウィルス収穫力価をもたらした。これらの結果は、 リドカインは複製サイクルにきわめて遅（作用するか復製とは独立したものであ ることを示した。

考察および原理： ここに示したデータからつぎのことがいえる。リドカインは、 １）細胞内Ｈ３Ｖ−１および２ならびにＨ５Ｖ複製の強力な阻害剤である。

２）細胞内Ｈ５Ｖ抗原の蓄積を適当な程度に抑制することはない。

３）血漿膜へのｆ（ＳＶ特異的抗原の蓄積を防ぐ。

４）その抗ウィルス作用をウィルス複製の生じる段階とは独立して発揮するか、 または複製サイクルのきわめて遅い段階で作用する。

５）ウィルス粒子を直接的には不活性化しない。しかし、 ６）複製１サイクル後に感染細胞を２分間処理すると対照レベルの３％にウィル ス収量を減少することができる。

これらの結果から、リドカインは以下の機構の１つによって作用するものと認め られる。

１）感染性に必須のＨ５Ｖ特異糖蛋白の合成または作用を妨害する。

２）包接ヌクレオカプシドの粗内質網状質およびグリコジル化のゴルジ体へのウ ィルスによる移送を妨害する。

３）ウィルス特異糖蛋白の生物物理学的変性を起し、その結果感染性を失なう。

リドカイン３濃度を用い　Ｈ３Ｖ−１９ｘｌＯプラ一ク形成単位にて４℃で１時 間培養した。ウィルスを適当に希釈し、プラーク試験にて定量した。

表３　Ｈ５Ｖ感染リドカイン処理細胞の感染中心試験 ベロ細胞をＭＯ１３回にて感染させ、１時間吸着後、リドカイン含有維持培地を 加えた。３７℃で１８時間培養したのち、その培養物をＰＢＳで３回洗浄し、ト リプシン−ＥＤＴＡｉこ分散させ、ついでｋ（ＳＶｆｉ布培地にて非感染ベロ細 胞と共に７２時間培養した。その塗布Ｈ５Ｖを除き、細胞をＰＢＳで洗浄し、ク リスタルバイオレットにて染色して感染中心の数を数えた。

第１図−複製サイクルに対する処理時間の影響：べ口細胞培養物を１（ＳＶ−１ でＭＯ１３回にて感染させた。３７℃で１時間培養後、維持培地を全培養物（こ 加えた。例外として、１時間後処理系についてはりドカインまたはヨードデオキ シウ、リジン含有培地を加えた。２．４，６，８，１０，１２，１４．１６　お よび１８時間後に残りの培養物を適当な薬物で処理した。６つの非処理培養物（ 対照）を含めて全培養物について１８時間後感染で細胞内ウィルスを収量した。

プラーク試験によりウィルス収量を測定し、その収量を、各小感゛　染時間にて 対照の収量と比べた悌にてプロットした。

その結果を第１図に示した。

これらの結果は、リドカイン塩酸塩およびデクスパンテノールは細胞培養におい て抗ウィルス剤として有効であり、細胞培養において単純ヘルペスウィルスの複 製を抑制する活性を有することを明らかに示している。

さらに行なった研究により、リドカイン塩酸塩をデクスパンテノールと組合せて 局所的または腹腔内投与にてマウス感染時に与えるかまたはその処置を感染後１ 週間続けると、無毛マウスモデル系で単純ヘルペスタイプ１の病変の進行が有効 に減少されることを示した。病変の初期に注射した場合にも無毛マウスにおける に一１ｓＶ−１病変の進行が有効に減少される。これらの実験結果を以下に示す 。

この実験では、動物にひっかき傷をつけてＨｓｖ−ボ（グループ１）またはリド カイン塩酸塩−デクスパンテノール（グループ２）軟責〔リドカイン４ＯＮｌ／ ｄ１Ｐ−アミ７安息香酸５％、パンテノール５０１１１／ｄを、小麦胚種油、七 チルアルコール、ワセリン、ステリルアルコール、ツイーン８０、水、こはく酸 、アスコルビン酸（防腐剤および抗酸化剤として添加）からなる基剤に添加した もの〕を適用した。その動物を７日間毎日処置した。プラセボと処置動物の感応 平均病変スコアを第２図に示す。感応平均病変スコアは、実際に病変を有する動 物の集合病変スコアを病変を有する全動物数で割った値で示した。この図および 以降の全図において、対照（プラセポ群）は四角で示し、処置群はダイアモンド 型記号で示す。処置群と対照群との間の計算上の差異を三角で示す。この実験結 果は、対照動物と予防的に処置した動物の間に顕著な差異（Ｐ＜０．００５）が あることを示す。ひっかき傷接種したのち毎日リドカイン塩酸塩−デクスパンテ ノール軟膏を適用した場合、対照群における著しい病変が顕著な程度に防止する 。この効果は病変進展および治療の最初の１０日間にみられる。約１０日後にも そのスコアは同等である。第３図は全平均病変スコアについて同じ群の動物を比 較したものである。全平均病変を全動物数で割った。この分析系は病変が進展し なかった動物を考慮して行なう。第３図では、処置動物と対照群との間に、第２ 図におけるとはゾ同様の顕著な差異が認められる。有意差レベルはｐ＜０．００ ５である。

これは、データを評価する２つの方法が結果的に差がないことを示している。第 ４図は、プラセボと処置群とで病変が進展した全動物数を比較したもので、病変 が進展した動物数には顕著な差異はなかったことを示している。この実験におけ るこれらの結果は、リドカイン塩酸塩−デクスバンテ／−ル軟責は、無毛マウス にひっかき傷をつけて単純ヘルペスタイプ１を接種したときに同時に適用した場 合に、病変の進展を満足し得る程度に減少させることを示す。

この実験では、動物にひっかき傷をつけてＨ５Ｖ−カイン塩酸塩−デクスバンテ ノール溶液を動物に１日注射当り２０１ｆ　／　ｘｉ　；デクスパンテノールの 濃ｆ、３０ダ／ｄであった）約０，１ｄ注射した。この群の目的は、リドカイン 塩酸塩をデクスパンテノールと組合せて全身的に用いたときに病変の開始後感染 無毛マウスにおける）ｉｓＶ−１の皮膚病変の治療に成功す゛るかどうかをみる ためである。プラセボ注射液を対照として用いた。

第５図は対照と処置群との間（こ感応平均病変スコア分析（ｐ＜０．００１）に おいて顕著な差があることを示している。

第６図は、プラセボと対照群の間に全平均病変スコアにおいて同様に差異かある ことを示す。

第７図は、処置群が対照群よりも病変が進展した動物が若干少なかったことを示 す。これは、その処置を病変が進展したのち１こ開始したため、あまり顕著な所 見ではない。これらの結果は、注射しうる剤形のリドカイン塩酸塩−デクスパン テノール混合物は、動物に最初の病変が出現したときに適用した場合、無毛マウ スにおける単純ヘルペスタイプ１により誘引される病変を減少するのに有効であ ることを示す。

上記のｈｓｖ−１の無毛マウスモデル系への接種技法により、一連の実験を行な い、無毛マウスモデル系での単純ヘルペスウィルスタイプ１により誘引される病 変の治療におけるリドカイン塩酸塩とデクスパンテノールの各種濃度の試験を行 なった。その実験結果を表４および表５に示す。

表４は、リドカインとデクスパンテノールの広範囲の１度組合せについて、無毛 マウスモデル系で単純ヘルペスウィルスタイプ１　（）ｉＳＶ−１）の最初の接 種後５，１０．１５．２０および２５日目に記録した平均病変スコアを示す。表 ４の結果は、この医薬の全濃度組合せで、非処置対照動物に比べて当該日におけ る病変のサイズおよび程度の有効な減少が認められることを示している。唯一の 例外は、０．５％リドカインと３％デクスパンテノールの混合物（処方Ａ）であ り、それでは、病変スコアは非処置対照（処方Ｎ）とほぼ同等であり、またリド カインを含まない５％デクスパンテノール単独（処方し）では、その病変スコア は対照と類似している。他のすべての医薬組合せでは対照溶液に比べてｔ−ｔｓ ｖ−１誘引病変の治療に有効であることが示された。０．５鳴りドカインは用い たりドカインの最小濃度であることに留意されるべきである。

表５はリドカイン塩酸塩とデクスパンテノールの各種濃度で処置した同群の動物 におけるウィルス誘引病変の完全治癒までの日を示す。表５に示されるように、 リドカインおよびデクスパンテノールの各種組合せで処置した各群の動物では、 非処置対照またはデクスパンテノールまたはリドカイン単独の場合に比べて完全 治癒に至る時間が少なかった。２つの例外は、リドカイン濃度０．５％のりドカ インーデクスパンテノール混合物（処方Ａ）（それは治癒までに２１．３日を要 した〕と、６％リドカイン塩酸塩と０．５％デクスパンテノール混合物（処方Ｆ ）（それは治産までに２３．５日を要した）である。他の全群では非感染対照に 比べて無毛マウスモデル系でのｈｓＶ−１誘引病変の治癒時間の減少に顕著な効 果を示した。これらの実験結果は、リドカイン−デクスパンテノール混合物がす べての濃度範囲において、きわめて低濃度の場合を除いて、無毛マウスモデル系 におけるＨ５Ｖ−１誘引病変の治療に有効であることを示している。

表４つづき 米接種後の日数 ＋１−４スコアシステムで計算 これらの結果は、リドカイン塩酸塩およびデクスパンテノールの局所適用または 注射適用が、補乳項における単純庖疹ウィルス感染の治療に奏効することを科学 的に示唆するものである。

リドカイン塩酸塩のヒトにおける研究 実施例１　男性での陰部庖疹 この研究には年令１６〜５０歳の１４症例が含まれる。患者は全て、過去の陰部 庖疹（ヘルペス）罹病歴を有し、１〜６力月間にわたって回復していた、という 経験を有する。陰部庖疹の期間は１０〜１４日間であり、その症状は、水痘発疹 前に強い熱傷感を生じ、次いで、破裂の前および後に痛みを伴なう水痘が現われ 、さらに、かさぶたが出来、治ゆに至る。この研究では、水痘の発現前、並びに 発現の１〜２日後の患者を観察した。患者達には、特別に調製した軟膏基剤〔リ ドカインＨＣｚ　４０　＃／ｄ、デクスパンテノール５０−ｖ’−１ヲ、小麦胚 芽油、セチルアルコール、ワセリン、ステアリルアルコール、トウイーン８Ｑ　 （Ｔｗｅｅｎ　８Ｑ）、水、コハク酸、並びに保存剤かつ抗酸化剤としてのアス コルビン酸からなる基剤に含有させる〕中に含まれるリドカイン塩酸塩−デクス パンテノールの少量を、１日３回（朝、昼、および就寝前）、発現している局所 （患部）に静かに擦り込む様、指示した。

結果 水痘の発疹前のかゆみと、発症に伴なう痛みとは、最初の適用後１５〜２０分の 後に顕著に軽減もしくは消失した。１４症例中６例の患者においては、第１回目 の適用後、２〜３時間後に痛みが再発したが、症状の強さは減少していた。第２ 回目の投与後、即ち８〜１０時間後にはかゆみや不快感、および痛みは完全に消 失し、病変が完全に治ゆするまで、再発することはなかった。患者の症状−かゆ み、不快感および痛み−の消失は、リドカインの麻酔作用によるとも考えられる が、予想外にも、２〜３日間で、局所の炎症と不快感を含む症状が回復すると共 に、水痘が消失するという好結果が得られた。全ての治療例は、かゆみ、水痘、 およびかさぶた形成からなる周期が明らかに停止され、あるいは７〜１０日間短 縮されていることを示した。

患者達は、治療の開始時期の如何に拘らず、リドカイン塩酸塩の軟膏を適用した 後、２〜３日後に完全に寛解した。

実施例２　肛門ヘルペス 再発性の肛門ヘルペス患者を、実施例１で示した轢殊な軟膏基剤中の４％リドカ イン塩酸塩および５％デクスパンテノールによって治療した。治療は、朝、昼、 就寝前の１日３回、少量の軟膏剤を患部に静かに擦り込むことで行った。患者は 、６日後、痛みの消失と共に、明確な回復を示した。１２日後には、痛みの７５ ％の改善と、発疹の消失を認めた。それ以前の肛門ヘルペスの症状は、かなりの 蒲みと不快感を伴ない、１４〜３０日間持続するものであった。

２人の帯状庖疹患者を、実施例１で示した特殊な軟膏基剤中の４％リドカイン塩 酸塩および５％デクスパンテノールで治療した。治療は、朝、昼、就寝前の１日 ３回、少量の軟膏を患部に静かに擦り込むことで行った。１名の患者は２４時間 、痛みの増加を訴え、１日後に治療を中断した。もう１名の、頭部に帯状庖疹を 有する患者は１回目の治療後、明らかな改善を示し、その後、終始変らず回復に 向い、痛みと発疹の顕著な減少を来した。

１名の患者を、実施例１で示した特殊な軟膏基剤中の４％リドカイン塩酸塩およ び５％デクスパンテノールで治療した。朝、昼、就寝前の１日３回、少量の軟膏 を患部に擦り込むことにより、治療した。２日間で５名の患者を、実施例１で示 した特殊な基剤中の４％リドカイン塩酸塩および５％デクスパンテノールで治療 した。朝、昼、就寝前の１日３回、少量の軟膏を患部に擦り込むことにより、治 療した。２〜５日間で痛みおよび症状が消失し、完全な寛解をみた。

患者は陰部庖疹病巣を有する２５歳の男性である。

発症部位は陰茎幹であった。この患者は、患部に刺痛感およびちくちく刺す様な 感覚を訴え；軽度のかゆみがあったが、熱傷感はなく；病巣の回復歴（それ以前 に６〜７回の発赦歴）を有していた。この患者を、実施例１で示した特殊な軟膏 基剤中に４％リドカイン、塩酸塩と５％デクスパンテノールを含む軟膏と、注射 剤の形（リドカイン塩酸塩２０　ｍｙ／ｙ／、デクスパンテノール３０〜／ｄ、 ナイアシンアミド２０　ｒｑ／ｉ　、リボフラビンｌａｗ／ｍ、チアミン４１ｖ ／ｙ＋ｆ、葉酸１００　ｐｙ／ｒｅ１クエン酸８ｑ／ｌＩ／、クエン酸ナトリウ ム１２　ｆｉｖ／−／、および保存剤として１．５９６ベンジルアルコールを含 み、ｐＨは４．５である）の、リドカイン塩酸塩−デクスパンテノール混合物を 併用することにより、治療した。朝、昼、就寝前の１日３回、少量の軟膏を患部 に静かに擦り込むことで治療した。病変は３日間で完全に寛解し、痛みがなく、 不快感も殆どなくなり、新らしい水痘の形成もみられなかった。

患者は２６歳の男性であり、病巣は陰茎の背面にあった。症状は非常に軽度であ り、かすかな熱傷惑があった。この患者は、３〜４年間のヘルペス歴と、数回の 淋病歴とを有していた。この患者を、実施例１で示した特殊な軟膏基剤中に４％ リドカイン塩酸塩と５％デクスパンテノールを含む軟膏を病巣に適用することと 、注射用リドカイン（リドカイン塩酸塩２０■／ｄ。

デクスパンテノール３０ｑ／ｗｓｌ、ナイアシンアミド２０呵／ｄ、リボフラビ ン１■／−、チアミン４　ｑ／ｖｘｌ、葉酸１００μｙ　／−／、クエン酸８　 呵／ｄ　ｓ　クエン酸ナトリウム１２ｑ／ｄおよび保存剤としての１．５％ベン ジルアルコールを含有し、ｐＨは４．５である）とを併用することにより、治療 した。朝、昼、就寝前の１日３回、少量の軟膏を患部に静かに擦り込むことによ り、治療した。病変は３日間で消失し、た。新らしい水痘の形成はなく、痛みも 消失していた。

患者は３４歳の女性である。病巣は口唇の右下側にあり、非常に細かい水痘を生 じていた。この患者は発症後５白目であり、これまでに発病したことがなく、ま た、性病感染歴もなかった。この患者を、実施例１で示した特殊な軟膏基剤中に ４％リドカイン塩酸塩と５％デクスパンテノールとを含む軟膏剤で治療した。

朝、昼、就寝前の１日３回、少量の軟膏を患部に静かに擦り込むことにより、治 療した。この治療は奏効し、３日間で完全な寛解をみた。

患者は２３歳の女性である。病巣は腟口のすぐ内側であった。熱傷感とかゆみと があった。それらの病巣は極めて緊張していた。この患者は以前に発病歴なく、 性病感染歴もなく、病巣の持続期間は約５日間であった。この患者は、既に幾つ かの抗ウイルス性を予測される化合物によって治療を試みられていたが、良好な 結果を得ることができなかった。この患者を、実施例１で示した特殊な軟膏基剤 中に４％リドカイン塩酸塩と５％デクスパンテノールを含む軟膏と、注射剤の形 （リドカイン塩酸塩２０岬／Ｍｌ、デクスパンテノール３０呵／１．ナイアシン アミド２０　ｑ／ｊ、リボフラビンｌｌ１ｆ／１、チアミン４岬／ｌ、葉酸１０ ０μダ／’ｓクエン酸８呵／−、クエン酸ナトリウム２２３　ｑ／ｄ　、および 保存剤として２．５％ベンジルアルコールを含み、ＰＨは４．５である）の製剤 により治療すると、熱傷感、痛み、および病変は４日以内に消失した。朝、昼、 就寝前の１日３回、少量の軟膏を患部に静かに擦り込むことによって治療を行っ た。

患者は５５歳の女性である。病変部位は左手の第３および第４指の付は根であり ：病巣は、赤く腫張し、水痘が破れ、滲出し、薬指の基部は深く破裂していた。

手に引張られる様な痛みとかゆみ、および熱傷感があり、腋窩領域にも痛みを伴 なっていた。この患者は以前、１０日間にわたり、口唇に小庖病変を有していた が、それは消失していた。手の病変は口唇の発病後に現われた。手の病変は、治 療開始前に、既に１週間を経過していた。来訪の前日には、患者は１０１°ノ熱 ヲ出していた。実施例１で示した特殊な軟膏基剤中に４％リドカイン塩酸塩と５ ％デクスパンテノールを含む軟膏と、注射剤の形（リドカイン塩酸塩２０　ｑ／ ｄ、デクスパンテノール３０．ｑ／ｌ　、ナイアシンアミド２０％’−、リボフ ラビンｌ岬／−、チアミン４岬／−１葉酸１００μｙ／−ｚ、クエン酸ｇｊＩＦ ／ａ／、クエン酸ナトリウム１２　ｑ／ｐｉ、オヨび保存剤として１．５％ベン ジルアルコールヲ含ミ、ｐＨは４．５である）の製剤で治療を開始すると、３日 後に、痛みと腫張が引いた。朝、昼、就寝前の１日３回、少量の軟膏を患部に静 かに擦り込むことで治療した。

全ての病変は２週間以内に消失した。

患者は４５歳の女性である。病巣の部位は腟口であって、刺激性があり、痛みを 伴な、つていた。この症例は慢性であって、患者は５〜６力月間、不快感を覚え ていた。治療は、実施例１で示した特殊な軟膏基剤中に４％リドカイン塩酸塩と ５％デクスパンテノールを含むリドカイン塩酸塩−デクスパンテノール軟膏ト、 注射剤の形（リドカイン塩酸塩２０■ｉ、ｔ、？ラスパンテノール３０　ｖｑ／ ｄ　、ナイアシンアミド２０　ｑ／ｄ、リボフラビン１呵／−、チアミン４呵／ −１葉酸１００μ２／−、クエン酸８ｅｙ／ｍ、クエン酸ナトリウム２２　ｍｙ ／ｄ、および保存剤として２．５％ベンジルアルコールヲ含ミ、ｐＨは４，５で ある）の製剤により、開始され、治療開始３日後に病変の消失をみた。朝、昼、 就寝前の１日３回、少量の軟膏を患部に静かに擦り込むことで治療した。

新らしい症例の研究 上唇に病変を有する女性患者を、クエン酸す）　ＩＪウム（ｘ２＝ｖ／−／）、 クエン酸（８−ｑ／−）および保存剤としてのベンジルアルコール（０，５％） からなる賦形剤溶液に、リドカイン塩酸塩（２％）とデクスパンテノール（３％ ）とを含有する製剤で治療した。患者は病巣を開き、先端に綿を付けたアプリケ ーターで上記の溶液を適用する方法により、該溶液を１日４回、病巣に直接、適 用した。適用３日後（？−１水庖の数が少くなり、全ての水痘が乾燥し、不快感 もさほどでなくなった。４日目には、病変の完全な治ゆがみられた。

陰茎幹に重篤なヘルペスを発症しており、通常の、かつ平均の治ゆ期間が１０日 間である、３０台半ばの男性患者が、クエン酸ナトリウム（１２−ｗ／＊）、ク エン酸（８岬／、／）および保存剤としてのベンジルアルコール（０，５％）か らなる賦形剤溶液に、リドカイン塩酸塩（２％）とデクスパンテノール（３％） トラ含有する製剤を１日５回、直接病巣に適用した。溶液をたつぶりと病巣に直 接適用し、乾燥させた。患者は、治療後後１日で水痘病巣が改善されたことを報 告した。

３日後には、水痘の数も減少し、それらは乾燥してきていた。２日目の始めには 、不快感も少くなっていた。

４日目には、病変の完全な治ゆかみられた。

臀部にヘルペスを発症している４２歳の男性患者が、トリウム（１２〜／、／　 ）、クエン酸（８〜／、／）および保存剤としてのベンジルアルコール（０，５ ％）からなる賦形剤溶液に、リドカイン塩酸塩（２％）とデクスパンテノール（ ３％）とを含有する製剤を適用した。この溶液を、綿を先端に付けたアプリケー ターで、１日３回、直接、適用した。４日後には、完全に消失した。

約１カ月後、この男性が、左側臀部と陰茎幹の右側とに同時に発症した。いずれ も大きい病巣であった。

臀部の病巣は約１２．５Ｘ３．２＋ｅｗであった。患者は、病変が治ゆするまで の７日間、薬物を１日４回適用した。

この同じ患者が、上記の発症から１０日後にを椎基部に発症した。この病巣はウ ェストラインの下側であって、直径約１９＋ｗであった。彼は、直ぐに薬物の溶 液を病巣の発現位置と、気付いた、赤い部分と、かゆみのある部分とに適用した 。１日３回、４日間適用したところ、その部分での病巣の拡大はなかった。

２日後、この患者は、右側臀部上方の元の病巣より約５０ｍ＋下方の別の領域に 水痘を発現した。クエン酸ベンジルアルコール（０，５％）からなる賦形剤溶液 に、リドカイン塩酸塩（２％）とデクスパンテノール（３％）とを含有する製剤 を１日３回適用したところ、３日後には、これらの病巣の完全な治ゆをみた。

約１カ月後、この患者は、臀部上方の下部を椎の皮下にかゆみを伴なった前駆症 状を認めた。最初の日は１日２回、溶液を投与したが、２日目に、狭い範囲内で 、さらに赤くなり、かゆみを生じていることに気付いたので、薬物を１日４回適 用し始めた。２日後には、赤みやかゆみの消失を認め、全病巣が消失していた。

３５歳の女性患者は、外生殖器に庖疹ウィルス感染の経験があり、約６個の膣− 陰唇びらんを有していた。

彼女は、クエン酸ナトリウム（１２ｑ／、ｚ）、クエン酸（ｓ　−ｐ７．ｔ　） および保存剤としてのベンジルアルコール（８，５％）からなる賦形剤溶液に、 リドカイン塩酸塩（２％）とデクスパンテノール（３％）とを含有する製剤を、 綿を先端に付けたアプリケーター・スティックを用い、初日は１日３回、以後は １日４回、びらん箇所に直接、適用した。最初の反応として、薬物の適用に際し て僅かな火傷感があったが、４日間では、何ら改善を認めなかった。５日目に、 僅かに改善され、びらんの痛みが軽減された。６日目には、はるかに多くの改善 が得られた。びらんの痛みは最少となり、びらんは治ゆされ始めた。７日目には 痛みが失くなり、びらんの９５％が治ゆした。８日目（こは、びらんの完全な治 ゆを認めた。

３０代半ばの男性が顔面と下顎とに熱性庖疹を発症エン酸（８−ｐ／−１）およ び保存剤としてのベンジルアル：Ｉ−ル（Ｑ、５％）からなる賦形剤溶液に、リ ドカイン塩酸塩（２％）とデクスパンテノール（３％）とを含有する製剤を、綿 ボールにより、１日４回、患部に直接適用した。患者は、３日で熱性庖疹の症状 が良くなり、４日で庖疹の数が少くなり、かつ乾燥し、５日後には、全病巣が完 全に治ゆしたことを報告した。

外生殖器ヘルペスを有する３３歳の女性が、クエン酸ナトリウム（１２ｑ／＝ｉ 　）　、クエン酸（８■／、２）および保存剤としてのベンジルアルコ−／ｌ／ 　（０，５％）カラなる賦形剤溶液に、リドカイン塩酸塩（２％）とデクスパン テノール（３％）とを含有する製剤を、先端に綿を付けたアプリケーターで、１ 日４回適用した。患者は、それまで、発疹に至る前には、前駆症状的なかゆみと 、刺痛があったことを訴えていた。完全に破壊された水痘は得られなかった。溶 液の適用により、５日後に完全に発疹が治ゆし、以後の新らしい水痘または発疹 の発現はなく、刺痛および痛みは即座に軽減された。

２４歳の女性患者は、外陰と外部股領域に外部生殖器ヘルペス病巣を有していた 。病巣は、かゆみのある赤い発疹であった。水痘は形成されていなかった。患者 は、この様な型の病変が１力月間に２回治ゆした経験を有することを報告した。

患者は、クエン酸ナトリウム（１２−ｐ／ｗｔ　）、クエン酸（８岬／−）およ び保存剤トシてのベンジルアルコール（０，５％）からなる賦形剤溶液に、リド カイン塩酸塩（４％）とデクスパンテノール（３％）とを含有する製剤を適用し た。患者は、１日５回、この溶液を、発疹の上にたっぷり適用し、完全に乾かし た。患者は、適用の１日後に庖疹が良くなり、適用の直後から庖疹が乾燥し始め 、適用後１８目から不快感が減少し、溶液適用後７８目には発疹が完全に消失し たことを報告した。

３１歳の女性は、外部生殖器にヘルペス病巣を有していた。病巣は、外陰部の単 一の水痘であった。患者は、病巣を開き、先端に綿を付けたアプリケーターを用 い、クエン酸ナトリウム（１２ｑ／ｊｌ／）　、クエン酸（８ｑ／ｄ　）および 保存剤としてのベンジルアルコール（０，５％）からなる賦形剤溶液に、リドカ イン塩酸塩（４％）とデクスパンテノール（３％）とを含有する溶液に病巣を浸 す方法により、この溶液を直接、適用した。彼女は、第１８目の後で製剤の適用 に直接帰することができる、ヘルペスがより良くなったという“感じ”を覚え、 １日後には乾燥し、不快感が少くなったこと、さらには、適用後４日後には、病 変が完全に治ゆしたことを報告した。

ＦＩＧ、　１ 乍＾煤ＡＥＩべ

Claims (26)

【特許請求の範囲】
1. １．抗ウイルス有効量のリドカインまたはその薬学的に許容し得る塩を哺乳動物 に投与することからなる該哺乳動物のヘルペス群ウイルス感染を治療する方法。
2. ２．リドカインまたはリドカインの塩を感染部位に局所的に投与することからな る第２項に記載の方法。
3. ３．リドカインまたはリドカインの塩を、水性溶液の形で非経口投与することか らなる第２項に記載の方法。
4. ４．リドカインまたはリドカインの塩を１．５〜１０％ｗ／ｖの濃度で投与する ことからなる第２項に記載の方法。
5. ５．リドカインまたはリドカインの塩をパンテノール、パントテン酸またはその 塩と組み合せて投与する第２項に記載の方法。
6. ６．パントテン酸を５〜５０ｍｌ／ｍｌの濃度で投与する第５項に記載の方法。
7. ７．抗ウイルス有効量のリドカインまたは薬学的に許容し得るその塩をヒトに投 与することからなるヒトのヘルペス群ウイルス感染を治療する方法。
8. ８．リドカインをその塩酸塩の形で投与する第７項に記載の方法。
9. ９．リドカイン塩酸塩をパンテノール、パントテン酸またはその塩と組み合せて 投与することからなる第８項に記載の方法。
10. １０．リドカイン塩酸塩が１．５〜１０％ｗ／ｖの濃度で存在しており、パンテ ノール、バントテン酸またはその塩が５〜５０ｍｌ／ｍｌの濃度で存在している 第９項に記載の方法。
11. １１．ヒトの皮膏の単純ヘルペスウイルス感染を治療する方法であつて、活性成 分として抗ウイルス有効量のリドカインまたはその薬学的に許容し得る塩を１． ５〜１０％ｗ／ｖの濃度で含有している軟膏またはゲルを、ヒトの感染部位に局 所適用することからなる方法。
12. １２．約１．５〜１０％ｗ／ｖのリドカインまたはその薬学的に許容し得る塩を ヒトに非経口投与することからなるヒトの帯状ヘルペスを治療する方法。
13. １３．リドカインまたはリドカインの塩を、５〜５０ｍｇ／ｍｌのデクスパンテ ノールと組み合せて投与することからなる第１１項に記載の方法。
14. １４．リドカインまたはリドカインの塩を体重１ポンド当たり約２．０ｍｇの１ 日投与量の割合で投与することからなる第１１項に記載の方法。
15. １５．抗ウイルス有効量のリドカインまたはその薬学的に許容し得る塩をバンテ ノール、パントテン酸またはその塩と組み合せて含有する哺乳動物のヘルペス群 ウイルス感染を治療するための医薬組成物。
16. １６．リドカインまたはリドカインの塩が１．５〜１０％ｗ／ｖの濃度で存在し 、パントテン酸が５〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する第１５項に記載の医薬組 成物。
17. １７．リドカインをその塩酸塩の形で投与する第１６項に記載の医薬組成物。
18. １８．抗ウイルス有効量のリドカインまたはその薬学的に許容し得る塩とパンテ ノール、パントテン酸またはその塩との組み合せを薬学的に許容し得る軟膏基剤 中に含んでいる、ヒトのへルペス群ウイルス感染の治療のための医薬組成物。
19. １９．抗ウイルス有効量のリドカインまたはその薬学的に許容し得る塩をパンテ ノール、パントテン酸またはその塩との組み合せで含有している滅菌溶液からな る、ヒトのヘルペス群ウイルス感染の治療のための医薬組成物。
20. ２０．リドカインまたはリドカインの塩が１．５〜１０％ｗ／ｖの濃度で存在し ており、パントテン酸が５〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在している第１８項に記 載の医薬組成物。
21. ２１．ヒトのヘルペス群ウイルス感染の治療のための医薬組成物の製剤方法であ つて、抗ウイルス有効量のリドカインまたはその薬学的に許容し得る塩を該組成 物に含有させることからなる方法。
22. ２２．製剤が局所投与用である第２１項記載の方法。
23. ２３．製剤が水性溶液である第２１項記載の方法。
24. ２４．リドカインまたはリドカインの塩が１．５〜１０％ｗ／ｖの濃度で存在し ている第２２項記載の方法。
25. ２５．ヒトのヘルペス群ウイルス感染の治療のための医薬組成物の製造方法であ つて、抗ウイルス有効量のリドカインまたはその薬学的に許容し得る塩をパンテ ノール、パントテン酸または薬学的に許容し得るその塩との混合物として該組成 物に含有させることからなる方法。
26. ２６．該組成物が１．５〜１０％ｗ／ｖリドカインを含んでおり、パンテノール 、パントテン酸またはその塩の濃度が５〜５０ｍｇ／ｍｌである第２５項に記載 の方法。