JPS61268611A - 皮膜型パツク剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、皮膚表面に適当な厚さに塗布し、一定時間放
置して、皮膚表（２）の汚れ成分や老化角質を固定化酵
素の酵素反応によシ分解し、その後、自然乾燥して生成
した皮膜を剥離する半によって皮膚表向を清浄化し得る
皮膜型バック剤に関する。

（従来の技術） 従来、加水分解＃素による反清汚れ成分や老化角質の分
解作用を利用した酵素配合のパック剤（例えば特開昭５
９−２０２１１号「バック組成物」等）が提案されてい
るが、これらのパック剤には下記の如き難点がめる。

０）化粧料の製造時に＃集油性が低下しやすい。

（ロ）酵素が原因となってパック剤が経日によシ変色や
変臭を生起しやすい。

ｅ→酵索が原因となって皮膚に刺厳やアレルギーを与え
やすい。

（発明が解決しようとする問題点） ゛本発明者等は、上記従来技術の難点を改良せんとして
鋭意研究した結果、加水分解＃ｐ索の代シに固定化され
た加水分解鉢索と水溶性多価アルコールを併用して得ら
れた皮膜型パック剤は、（１）老化角質分解効果が良好
で、肌をなめらかにし、肌につやを与える等、肌質改善
効果に優れていること。

（２）皮）に刺旅やアレルギーを与えることなく、安全
性が高いこと。

（３）経口によっても寂色や友臭を生起することなく、
保存安定性に優れていること。

等を見出し、本発明を完成した。

（間鵜点を解決するだめの手段） すなわち、本発明は、加水分解＃素が固定化されている
固定化酵素の粉末と、水浴性多価アルコールと、ポリビ
ニルアルコールと水とを配合してなる皮膜型パック剤で
ある。本発明に使用する前記の固定化酵素において固定
化されている加水分解酵素としては、例えは蛋白質分解
ｒ酵素（グロテアーゼ）、脂肪分解酵素（リパーゼ）、
グリコシド結合分解酵素（グリコシダーゼ）、澱粉分解
酵素（アミ２−ゼ）等が挙けられる。

前記の固定化酵素に含有する加水分解酵素の量は、通常
０．１へ５０電量％の範囲内である。

本発明に使用する固定化酵素は、加水分解酵素の固定化
法により自己架ｗｔｍ、包括型、担体結合型、吸着型、
マイクロカプセル型等に分類することができるが、加水
分解酵素を固定化することによシ、加水分解酵素と肌の
直接接触はほとんどなくなシ、安全性が向上するという
利点がある。

従って本発明における固定化酵素はいずれの型に属する
ものも用いることができるが、その担体或いは包括体は
安全性の高い天然物およびその誘導体がより好ましい。

すなわち、アルギン酸、ペクチン、カラギーナン、セル
ロース、デンプン、キトサ等の多糖類、コ２−グン、絹
フィブロイン、ゼイン、カゼイン、アルブミンｉ白質、
或いはそれらの誘導体、シリカ、アルミナ、ベントナイ
ト等の無機物が挙げられ、必要に応じて不溶化処理を行
なうが、これ等に結合または吸着した固定化酵素あるい
は、これらによシ包括された固定化＃素が好ましい。

固定化酵素は、その機能、目的に応じて適宜選択するが
、自己架橋型固定化＃素は、加水分解酵素同士を官能基
を２個以上有する架橋剤で架橋化、不溶化したものであ
って、例えばグルタルアルデヒドで架橋化するか、これ
をＮａＢＨＪｔ元するか、ジイソシアネートによシ架橋
不溶化する等によシ得られる。

担体結合型固定化酵素は、不治化した担体に加水分解酵
素を化学的に結合して固定化したもので、例えばセルワ
ースをＢｒＣＮ活性化し、あるいは過ヨウ素酸酸化し加
水分解酵素と反応さする方法、カルボキシメチルセルロ
ースをアジド誘導体とした後、加水分解酵素と反応させ
る方法、不溶化したキトサンあるいはコラーゲンと加水
分解酵素をグルタルアルデヒドで結合させる方法、シリ
カ粉末のアミノシラン誘導体と加水分解＃素をカルボジ
イミド試薬で締金結合させる方法等によって得られる。

また、ジエチルアミンエチルセルロース等のカチオン性
ポリマーに加水分解酵素をイオン結合によシ固定化した
吸着型固定化酵素や、アルミナ、ベントナイト、カオリ
ナイト等に加水分解酵素を吸着固定化した吸着型固定化
酵素も十分便用し得る。包括製固定化酵素とは、一般に
は架橋された高分子の三次元１１１目状構造によって加
水分解＃素をとじ込めて固定化したものであシ、一般に
は加水分解酵素を含んだ高分子溶液から化学結合、配位
結合、イオン結合、疎水結合１部分結晶化等によシ高分
子を架橋化、不溶化し製造される。また水に不溶性の高
分子の溶液に加水分解Ｆ＃ｔを分散させ、水系で沈澱さ
せることにより、包括型の固定化酵素を得ることができ
る。その他、高分子網目状構造にとじ込められた加水分
解酵素が更に化学結合で担体に結合しているものも、東
買上、包括型固定化酵素と考えられる。これらの包括製
固定化酵素のうち、絹フィブロインやゼインにより包括
された固定化酵素、カルシウムイオン、カリウムイオン
等で架橋ゲル化したアルギン酸、ペクチン、力２ギーナ
ン等に包括された固定化＃素、キトサンに包括された固
定化酵素等はその製造工程において夾寅上反応試薬を用
いることなく、無害な天然物のみによる固定化酵素であ
り、最も好ましいものである。

本発明に使用する固定化酵素の粉末としては、平均粒径
が通常１〜５０μのものが好適でおる。

本発明の化粧料における前記固定化＃祢の配合Ｎｊｌｋ
）に対して０．０１〜５重重％、好ましくは０．１〜８
電量％である。

本発明に使用される前記の水浴性多価アルコールとして
は、例えばエチレングリコール、プロ（レンゲリコール
、１，８−７’テレングリコール、１．４−ブチレング
リコール、ジグロビレングリ；−ル、グリセリン、ジグ
リセリン、トリグリセリン、テトラグリセリン、グルコ
ース、マルトース、マルチトール、蔗糖、フックトール
、キシリトール、ンルビトール、マレトリオース、スレ
イトール、エリスリトール、澱粉分解ＩＩｊＩｉＬ元ア
ルコール等を挙げることができ、これらの−稼または二
種以上組合せて使用される。水溶性多価アルコールの配
合量（使用量）は、使用する固定化酵素の中に含有して
いる＃素恵量の１〜１００倍麓、好ましくは６〜５０倍
量である。１倍魚よシも少なくなると経日安定性が低下
して変色や友臭を起しやすく、１００倍魚上りも多くな
ると、乾燥が遅くなシ、皮膜形成までに時間がかかって
好１しくない。

本発明に使用されるポリビニルアルコールの平均分子量
は８００〜６０００、好ましくは１０００〜８０００で
、その配合量は組成物（処方成分の全量）の重量を基準
として８〜８０１意％である。

水の配合量は、組成物の重重を基準として４０５ｂ 本発明の皮膜型パック剤には、前記必須成分の他に必要
に応じて、エタノール、薬効成分、芳香剤、防騙剤、着
色削りを配合することができる。

（発明の効果） 本発明の皮膜型パック剤は、従来の酵素（非固定化＃Ｘ
）による皮膚刺激、アレルギー、変色（着色）、灰臭（
変質）等の姓点が解消きれておシ、かつ保存時の経日安
定性が良好で、使用後の肌をなめらかにしたり、つやを
与える事ができる。

（夾施例） 以下、実施例について説明する。

５＊施例に示す％とり、を菰％、部とは重麓部を意味す
る。

夫施例に示した実用テスト、経日変化の試験方法は下記
の通υである。

（１）実用テスト 専門検査員２０人が１日１回、８日間連続して実用テス
トを行ない下記試験横目のアンケートに回答した。

試験項目：評価項目 塗布時の皮膚刺激：籍布して剥離するまでの間に皮膚刺
激を感じたと答えた人数 皮膜形成までの時間の長さ：塗布して皮膜を形成するま
での時間が長ずざると答えた人数皮膜の柔らかさ；形成
した皮膜が柔らかすぎて剥離しにくいと答えた人数 使用後の肌のなめらかさ：剥―後１０分たった時の肌の
方が、使用前の肌よりなめらかになっていると答えた人
数 使用後の肌のつや：剥離後ｌＯ分たった時の肌の方が、
使用前の肌よりつやがあると谷えた人数使用方法は、試
料５ｆを手にとって顔面に均一に塗布した後、水分等が
自然蒸散する拳によって皮膜が形成するのを待ち、次い
でこの形成した皮膜を顔面の下方から上方へ向ってゆつ
くシと剥離する。

（２）経日安定性 試料を密封、遮光の条件下、４５°Ｃの恒温槽に８ケ月
放置した後、色と匂いの灰化を観察した。

夾施例１ （１）　　包括型固定化酵素の調製 フィブロイン水溶液（フィブロイア磯度５．５％）２０
０部に、プロテアーゼ（ノボインダストリー社製）０．
５５部を溶解したｐ　ｆｉ　４．５の０．１モル−クエ
ンｆａ緩衝液２０部を混合した後、４５％硫酸アンモニ
ウム水浴液５００部の中に注入して、塩析を行なった。

得られた沈澱を戸別した後、十分水洗し、脱水後、風乾
し、粉末をジェットミルで粉砕して、平均粒径が１０〜
８０μの粉末状の包括型固定化プロテアーゼ（プロテア
ーゼがフィブロインによって包括された固定化酵素で、
プロテアーゼの含有社は５％）を得た。

（２）　　皮膜型パック剤のｙ４ｆＭ ４部ビニルアルコール（平均分子ｆｉ２０００）１０部
とマルチトール１０部と水７０部を７０℃で８０分間撹
拌し均一に溶解する。次に撹拌しながら冷却し８０℃に
なった時点で、−１１紀の固定化プロテアーゼ５部を添
加し、更に１０分間撹拌して不発明の皮膜型パック剤を
得た。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中Ｏ人、皮膜形Ｉ＆
、ｔでの時間が長すぎたと谷えた人数は２０人中０人、
皮膜が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中Ｏ人、肌が
なめらかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌に
つやがでたと答えた人数は２０１人中２０人であった。

また経日貧化（経日安定性）において、色、匂い共に液
化が無かった。

比較例１ マルチトール（水溶性多価アルコール）を使用せず、か
つ水を８０部便用する他は、実施例１と同様に行なって
、比較の皮膜型パック剤を？ｉＭ製した。

このパック剤を前記の如く賦鋏した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中０人、皮膜
が柔らかすぎたと谷えた人数は２０人中Ｏ人、肌がなめ
らかになったと答えた入部は２０人中１７人、肌につや
かでたと答えた人数は２０人中１８人であった。

また経日貧化（経日安定ｉｆ）において娘１色はやや変
色し・、匂いはやや灰具して不良でおった。

比較例２ 包括型固定化プロテアーゼの代りに、プロテア’−ゼｏ
、２５部とフイプ四インパウダー４．７５９使用する他
は、実施例１と同様に行なって、比較の皮膜型パック剤
をｉＡ製した。

このパック剤を前ｉｃの如く試験した軸来、塗布時に皮
膚刺激を感じたと答えた人数は２０人中１２人、皮膜形
成までの時間が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、
皮膜が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中Ｏ人、肌が
なめらかになったと答えた人数は２０人中１７人、肌に
つやがでたと答えた人数は２０人中１７人であった。

また経日安定性において色は黄色に変色し、匂いは著し
く寂具して、也めて不良であった。

比較例８ 包括型固定化プロテアーゼの代シに、プロテアーゼを使
用する他は、実施例１と同様に行なって、比較の皮膜型
パック剤をＢＡ製した。

このパック剤を前ｄ己の如く試験した結果、塗布時に皮
膚刺激を感じたと谷えた人数は２０人中１２人、皮膜形
成までの時間が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、
皮膜が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌が
なめらかになったと答えた人数は２０人中１７人、肌に
つやがでたと答えた人数は２０人中１７人であった。

また経日安定性において、色は黄色に変色し、匂いは著
しく変臭して極めて不良でありた。

実施例２ ポリビニルアルコール（平均分子ｊｉｋ１５００）１６
部とグリセリン１０部と水６０ｍＴｈ７０’Ｃで８０分
間撹拌し、均一に溶解する。次に撹拌しながら冷却し、
８０℃になった時点でエタノール５部と実施例１の（１
）で得られた包括型−走化プロチアーゼ６部を加え、史
ＫＩＯ分間撹拌して本発明の皮膜ｍ　パック剤を得た。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜
が柔らがすき゛たと谷えた人数は２０人中０人、肌がな
めらかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につ
やがでたと谷えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

比較例４ グリセリンを使用せずかつ水を７０部使用する他は実施
例２と同様に行なって比較の皮膜型パッり剤を調製した
。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を悪したと答えた人数は２０人中θ人、皮膜形成ま
での時間が長すぎ九と答えた人数は２０人中θ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人であつた。

また経日安定性において、色は黄色に変色し、匂いは変
臭して不良であった。

比較例５ 包括型固定化グロテアーゼの代りに、グロテアーゼ（ノ
ボインダストリー社ＩＪりを使用する他は、！１ｉ！施
例２と同様に行なって比較の皮膜型パック剤を調製した
。

このパック剤を前ｉｄの如く試験した結果、塗布時に皮
膚刺激を感じたと答えた人数は２０人中１２人、皮膜形
成までの時間が長すぎたと答えた人数は２０人中Ｏ人、
皮膜が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌が
なめらかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌に
つやがでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日安定性において、色は黄色に変色し、匂いは著
しく変臭して極めて不良であった。

比較例６ グリセリンを０．１２５部（固定化酵素中に含有する酵
素量の０．６倍量）使用しかつ水を６９．８７５部使用
する他は実施例２と同様に行なって、比較の皮膜型パッ
ク剤を一製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中０人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中０人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９であった。

また経日安定性において、色紘買色にやや変色し、匂い
はやや変臭して不良であった。

比較例７ グリセリンを８７．５部（固定化酵素中に含有する酵素
量の１５０倍量）使用しかつ水を８２．６部使用する他
は実施例２と同様にして比較の皮膜製バック剤を調製し
た。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜形成オ
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中１５人、皮
膜が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中１８人、肌が
なめらかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌に
つやがでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例８ グリセリンを０．２５部（固定化酵素中に自有する酵素
量の１倍ｔｃ＞使用し、かつ水を６９．７５部使用する
他は実施例２と同様にして本発明の皮膜型パック剤をｙ
Ｂ製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、炊布時に皮膚
刺激を惑じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例４ グリセリンを２５部（固定化＃素中に含有する酵累重の
１００倍重）便用し、かつ水を４５部便用する他は実施
例２と同様にして、本発明の皮膜型パック剤をｔＡ製し
た。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと谷えた人数は２０人中１人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中１人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例６ グリセリンを１２．５部（固定化酵素中に含有する＃嵩
量の５０倍菫）使用し、かつ水を５７．５部使用する他
は実施例２と同様に行なって本発明の皮膜型パック剤を
調製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと谷えた人数は２０人中θ人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中０人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
かでたと答えた人数は２０人中１９人であつた。

また経日変化（経口安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例７ （１）包括島固定化酵素の調製 プロテアーゼの代りに、リパーゼ（各軸産業製）を使用
する他は、実施例１の（１）と同様に行なって、平均粒
径が１０〜８０μの粉末状の包括型固定化リパーゼ（リ
パーゼがフィブロインによって包括された固定化酵素で
、リパーゼの含有率は５％）を得た。

（２）皮膜型パック剤の調製 実施例１の固定化Ｙロチアーゼの代シに、前記の包括型
固定化リパーゼを使用する他は実施例１と同様に行なっ
て本発明の皮ｍ型パック剤を調製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中Ｏ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中０人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例８ アルギン酸ナトリウム１０部を２００部の水に溶解した
水溶液の中に、プロテアーゼ（長編産業社製）１部を２
０部の水に溶解した＃液を添加、混合した後、この混合
物を２％塩化カルシウム水溶液の中に撹拌下に注入して
細粒状のゲルを得た。

このゲルを戸別後、水洗、乾燥した後、ドライアイスと
共に粉砕して平均粒径が１０〜５０μの包括型固定化ブ
、ロチアーゼ（プロテアーゼがアルギン酸カルシウムに
よって包括された一定化酵素で、プロテアーゼの含有率
は１０％）を得た。

（２）皮膜型パック剤の調製 包括型固定化プロテアーゼの代シに、前記の包括型固定
化プロテアーゼを使用する他は、実施例１の（２）と同
様に行なって本発明の皮膜型パック剤を調製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形Ｗ、
までの時間が長すぎたと答えた人数は２０人中０人、皮
膜が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がな
めらかになったと谷えた人数は２０人中１９人、肌につ
やかでたと答えた人数は２０人中１９人でめった。

また経口ｉ化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例９ （１）包括皺固定化酵素の調製 ０．０５Ｍ−リン酸ナトリウム緩貧液（ｐＨ８，０）１
００部に牛血情アルブミン１０部とリパーゼＭＹ１部を
溶解した溶液に５％グルタルアルデヒド水溶液１０部を
添加、混合１７た後、１０℃で２０時間撹拌して、生成
する沈＃を水洗した後、０．１％ＮａＢＨａ水浴獣中で
還元処理を行なった。水洗、乾燥した後、粉砕して、平
均粒径が１０〜５０μの包括型固定化リパーゼ（リパー
ゼがアルブミンによって包括された固定化［８で、リパ
ーゼの含有意は９％）を得た。

（２）　　皮膜型パック剤の９４製 固定化グロテアーゼの代シに、前記の包括型固定化リパ
ーゼを使用する他は、実施例１と同様に行なって、本発
明の皮膜型パック剤を調製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中Ｏ人、皮膜形成ま
での＃＆商が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、皮
膜が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がな
めらかになりだと答えた人数は２０人中１９人、肌につ
やがでたと谷えた人数は２０人中１９人であった。

また経日良化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例１Ｏ （１）担体粕合型固定化酵票の銅製 セルロース粉末５部を史に細粉化した後、沸騰水に２時
間浸漬し、次Ｋ　Ｏ，Ｉ　Ｍ過ヨウ素酸ナトリウム水浴
＆２００部の中に浸漬し２４時間撹拌した。戸別した後
、水洗し、１１：Ｉテアーゼのビオプラーゼコンク（長
編産業社製）を２部含む０．０１Ｍ−リンｗ緩衝液（ｐ
Ｈ７，５）１００部の中に添加し、１５℃で１８時間撹
拌した。再度戸別し、水洗した後、０．“１％ＮａＢＨ
ａ水溶液１００部中で還元処理を行なった後、回収し、
水洗、脱水、凍結乾燥を行なって、担体結合型の固定化
プロテアーゼ（プロテアーゼが担体のセルロースに結合
している固定化酵素で、プロテアーゼの含有型は８％）
の微粉末を得た。

（２）　　皮膜型パック剤の調製 包括型固定化プロテアーゼの代シに、１ｊｌＮｄの担体
結合型の固定化プロテアーゼを使用する他は、実施例１
の（２）と同様に行なって、本発明の皮膜型パック剤を
ｙ４製した。

このパック剤を前記の如く！に験した結果、塗布時に反
膚刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成
までの時間が長すぎたと答えた人数は２０人中０人、皮
膜が柔らかすぎたと谷えた人数は２０人中０人、肌がな
めらかになったと谷えた人数は２０人中１９人、肌につ
やがでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日良化（経口安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例１１ （１）　　担体結合型固定化酵素の調製セルロースの微
粉末を滴水中に２時曲浸漬した。

次に脱水した後１％臭化シアン水溶液２００部の中に浸
漬し、２　Ｍ　−ＮａＯＨ水溶液でｐＨｖｉｌ−１１−
１２に保ちつつ、２０°Ｃで５分間反応させた後、戸別
し、０．１　Ｍ　−ＮａＯＨ水浴液で洗浄した。得られ
た活性化セルロース粉末を、リパーゼＭＹ２部を溶解し
た０、１Ｍ−リン酸ナトリウム叡衝液（ｐＨ７，５）１
００部の中に添加して、４℃で１８時間反応させた。そ
の後、充分水洗後、凍結乾燥して、担体結合型の固定化
リパーゼ（リパーゼか担体のセルロースに結合している
固定化酵素で、リパーゼ含有量は１．２％）を得た。

（２）　　皮膜型パック剤の調製 包括型１犀化プロテアーゼの代りに、担体結合型の固定
化リパーゼを使用する他は、実施例１の（２）と同様に
行なって、本発明の皮膜型パック剤をＴｈ製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮清
刺撤を感じたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中Ｏ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと合えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例１２ （１）　　包括型固定化酵素のｐ４製 エタノール８５部と水１５部とからなる混故にゼイン粉
末５部を溶解した浴液の中に、プロテアーゼのバンクレ
アチン（和光ｍ、楽製）０．２５部を水５部に溶解した
溶液を加え、撹拌して分散させた後、これをアセトン８
０００部の中に注入し、沈澱された沈澱物をアセトンで
洗浄した伎、乾燥、粉砕して包括型の固定化プロテアー
ゼ（）゛ロチアーゼがゼインによって包括された固定化
＃素で、プロテアーゼ含有拭は４．７％）の微粉末を得
た。

（２）　　皮膜型パック剤の調製 包括型固定化プロテアーゼの代りに、前記の包括型固定
化プロテアーゼを使用する他は、実施例１の（２）と同
様に行なって、本発明の皮膜型パック剤を調製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中０人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中０人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人でめった。

また経日良化（経日安定性）において、色、匂いともに
良化がなかりた。

実施例１８ （１）担体結合型固定化酵塞の調製 ニッケルーシリカアルミナ粉末（１００５２００メツシ
エ）１０部を８−アミノグロビルトリエトキシシランの
２％アセトン溶液に浸漬し、過剰の液を除いた後、６０
℃で２０時間放置した。これを１％臭化シアン水溶液２
００部の中に浸漬し、ｐＨを１１＾１２ＧＣ保ちつつ、
２０℃で６分間反応させた後、戸別し、０．１　Ｍ　−
ＮａＨＯＯｓ水浴液で洗浄した。これをアミラーゼのり
ゾチーム（シグマ社製）１部を溶解した０、１Ｍ−リン
酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７，５）１００部の中に加え
４°Ｃで２０時間撹拌した後、戸別し、凍結乾燥して、
担体結合型の固定化アミ２−ゼ（アミラーゼがニッケル
ーシリカアルミナに結合した固定化ｒｓ酵素で、アミラ
ーゼ含有麓は０．８％）の蝋粉末を得た。

（２）　　皮膜型パック剤の調製 包括型固定化グロテアーゼの代シに、前記の担体結合型
の固定化アミラーゼを使用する他は、実施例１の（２）
と同様に行なって、本発明の皮層型パック剤をＴｈ製し
た。

このパック剤を前記の如く試験した結果、紐布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中０人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人でめった。

また経日に化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例１４ （１）吸着型固定化＃素の調製 ジエチルアミノエチルセルロース（和光紬薬社製）の粉
末２部をｐＨ５，０の０．０１Ｍ酢酸ナトリウムＩｌｋ
術液１０００部に浸漬し１時間撹拌した。

−過後、減圧乾燥し、これをリパーゼＭＹ０．５部を溶
解した上記緩衝液８０部に加えて５℃で２０時間撹拌し
て吸着させた。Ｆ別後、ｉｉＲ衝液を用いて充分洗浄し
た後、凍結乾□して、吸着型の固定化リパーゼ（リパー
ゼがジエチルアミノエチルセルロースに吸着した固定化
酵素で、リパーゼ含有量は１．５％）の微粉末を得た。

（２）皮膜型パック剤の１ｓ１６１製 包括型固定化グロテアーゼの代シに、前記の吸着型固定
化リパーゼを使用する他は、実施例１の（２）と同様に
行なって、本発明の皮膜型パック剤を調製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中０人、皮膜
が柔、らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がな
めらかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につ
やがでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例１５ （１）担体結合型固定化酵素の１！！ｌｌｌ！Ｍ塩化カ
ルシウム２０部を水２０部に溶解した溶液に、メタノー
ル８０部を混合し、これに球状のナイロン粉末（平均粒
径６〜１０μｍ）を６部分数させ、５０℃で８０分間撹
拌した。回収、水洗後、８．６Ｍ塩酸ｉｏｏ部中、４５
℃で５０分間撹拌した。水洗後、１０％グルタルアルデ
ヒドを含むＩ）　Ｈ８，５の０．１Ｍ−ホウ酸ナトリウ
ム緩衝液５０部に浸漬し、続いて同駿衝液で洗浄した。

この処理粉末を、プロテアーゼのアルカラーゼ２．　Ｏ
Ｔを１部含有する０、０５Ｍ−リン酸ナトリウム緩衝液
（ｐＨ７，５）５０部の中に添加し、１０℃で５時間反
応させた後、水洗処理を行なつて、担体結合型の固定化
プロテアーゼ（グロテアーゼカ球状ナイロンに結合した
固定化酵素で、プロテアーゼ含有量は１．１％）の微粉
末を得た。

（２）皮膜型パック剤の調製 包括型固定化プロテアーゼの代シに、前記の担体結合型
固定化グロテアーゼを使用する他は、実施例１の（２）
と同様に行なって、本発明の皮ＩＩＩ型パック剤を調製
した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中Ｏ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人でめった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった。

実施例１６ （１）包括型固定化酵素の調製 ４％カッパーカラギーナン水浴液５０部に、プロテアー
ゼのパパイン１部を含む水浴液５部を混合した後、直ち
に２％ＫＣｅ水溶液１００部中に注入しゲル化させた。

得られた糸状体を５％のグルタルアルデヒドを含む２％
ＫＯＩ水溶液に８＃＆間浸漬後、水洗し、凍結乾燥し、
粉砕して、包括型の固定化プロテアーゼ（プロテアーゼ
がカラギーナンによって包括された固定化′ｒ＃素で、
プロテアーゼ含有量は５％）の微粉末を得喪。

（２）　　皮膜型パック剤の調製 包括型固定化プロテアーゼの代りに、前ｄ己の包括型固
定化プロテアーゼを使用する他は、実施例１の（２）と
同様に行なって、本発明の皮膜型バック剤を調製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、簡布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中Ｏ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定！！１：）において、色、匂い
ともに変化がなかった。

実施例１７ （１）　　自己架橋型固定化酵素の調製０．０５Ｍ−リ
ン酸ナトリウム緩ｇｔｉ液（ｐＨ７，５）１００部にプ
ロテアーゼのビオプラーゼ（長＃Ａａ業製）１部を溶解
し、これに５％グルタルアルデヒド水溶液１０部を加え
て８０℃で４時間撹拌した。更に４０％硫酸アンモニウ
ム水浴液１００部を添加し、ｐＨを７．５に調製して、
８０℃で１０時間撹拌した。得られた沈澱を水洗した後
、０．１％ＮａＢＨ４水浴液中で還元処理を行ない、水
洗、乾燥した後、粉砕して、自己架橋型の固定化プロテ
アーゼ（プロテアーゼがグルタルアルデヒドによって自
己架橋した固定化酵素でグロテアーゼ含有意は８％）の
微粉末を得た。

（２）　　皮膜型バック剤のｖ！４製 包括型固定化グロテアーゼの代りに、前記の自己架橋型
の同定化プロテアーゼを使用する他は、実施例１の（２
）と同様に行なって、本発明の皮膜型パック剤を調製し
た。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中０人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人であった。

また経日変化（経日安定性）において、色、匂いともに
変化がなかりた。

実施例１８ （１）担体結合型固定化酵素のｍ製 １％ジビニルベンゼンを含むスチレンを乳化重合して得
たポリスチレン粉本を、濃硝酸−一硫酸系でニド四化し
、次いでこれを還元してアミノ化ポリスチレンとした。

この５部をＩＮ−塩酸５０部中に懸濁し、水冷下に撹拌
しながら、４％ＮａＮＯ２を２．６部滴下し、２０分間
撹拌を続けた。

十分に冷水で洗浄後、これを、トリプシン（プロテアー
ゼ）０゜５部溶解した０、０５Ｍリン酸ナトリウムｌｉ
！！衝液（ｐ　Ｈ８，０）の中に加え４０℃で２０時間
撹拌し反応させた。反厄後、十分に水洗し、凍結乾燥し
て、担体結合型の固定化プロテアーゼ（担体のポリスチ
レンにプロテアーゼが結合した固定化酵素で、プロテア
ーゼ含有りは２．８％）の微粉末を得た。

（２）皮膜型パック剤の調製 包括型固定化プロテアーゼの代５に、前記の担体結合型
固定化プロティンを使用する他は、実施例１の（２）と
同様に行なって、本発明の皮膜型パック剤を調製した。

このパック剤を前記の如く試験した結果、塗布時に皮膚
刺激を感じたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜形成ま
での時間が長すぎたと答えた人数は２０人中θ人、皮膜
が柔らかすぎたと答えた人数は２０人中θ人、肌がなめ
らかになったと答えた人数は２０人中１９人、肌につや
がでたと答えた人数は２０人中１９人でめった。

また経日変化（経口安定性）において、色、匂いともに
変化がなかった〇

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）加水分解酵素が固定化されている固定化酵素の粉
   末と、水溶性多価アルコールと、ポリビニルアルコール
   と水とを配合してなる、皮膜型パック剤。
2. （２）前記の固定化酵素が、含有している酵素量として
   ０．０１〜５重量％（重量％は組成物の重量基準）配合
   されている、特許請求の範囲第（１）項記載の皮膜型パ
   ック剤。
3. （３）前記の水溶性多価アルコールが、固定化酵素に含
   有している加水分解酵素の重量の１〜１００倍量（重量
   ）配合されている特許請求の範囲第（１）項記載の皮膜
   型パック剤。