JPS6024451A - 体液中のデルタ抗原決定 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、体液試料中のＢ型肝炎に係るデルタ抗原の定
性的及び／又は定量的検出方法及びかかる方法を実施す
るだめのテストキットに関する。

１９４０年代に、黄１０症例の主原因がウィルス性病原
体、即ち肝炎ウィルスであることが発見された。

Ａ型及びＢ型肝炎ウィルスが確認されている。更に、い
わゆる非Ａ型、非Ｂ型肝炎もあるが、これ等の病原体に
ついては何等確認されていない。正しく診断し、該診断
に基いて黄痘を適切に治療りるためには、考えられる病
原体を確認することが当然必要（二なる。肝炎ウィルス
は先ず疾恣の臨床経過に基づいて識別可能である。しか
しながら、より高い信頼度で以って識別するには、免疫
化学的な特性づけを必要とする。公知の種類の肝炎ウィ
ルスの抗原、及びこれ等抗原に対する抗体の検出は、現
在、ＢＴ炎を患っていると思われる患者の血液たりてな
く、疾患の臨床的症状が発現してい（７い潜７を保菌者
、特に供血者の血液に対しても大規模に実施されている
。

供血者の血液は、肝炎ウィルスに特有な物質の有無、特
にＢ型肝炎ウィルス（１−Ｉ　Ｂ　Ｖ　’）の抗原の有
無、おＪ、び一般的にこれ等抗原に対する抗体の有無に
ついても定期検査でスクリーンにかけられる。こうする
ことにより、事実、例えば米国では、幅面が原因で肝炎
を患った患者数が１７６９％から５．９％にイｒ（減し
た。ウィルス性肝炎の発現を絶えず抑制づるためには、
患者及び非患者を定期的スクリーニングにかけウィルス
を特徴づける物質を出来るだけ多く検出する必要がある
。

最近、ｌ−Ｉ　Ｂ　Ｍに係る新しいタイプの抗原、いわ
ゆるデルタ抗原（δ−ＡＵ）、及びこれに３Ｊする免疫
グロブリン（ａｎｔｉ−δ）が発見された。この発見は
、Ｂ型肝炎ウィルスに特有な物質に陽性を示した慢性肝
疾患患者を生検して冑た肝細胞中に、この新しい抗原が
存在することが組織化学的（免疫螢光法により）に検出
されたことに端を発している。恐らく、我々は、生命機
能（ｖｉｔａｌ　１ｉｆｅｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　）の多
くがＢ型肝炎ウィルスに依存覆る、ＲＮＡウィルス抗原
を扱っているの（゛あろう。

従って、肝臓中の抗δ−Ａｑ１及び血液中の抗−δの存
在は、慢性１−Ｉ　Ｂ　Ｍ感染による生命危機を更に強
める超感染（ｓｕｐｅｒ−ｉｎｆｅｃｔ−ｉｏｎ　）　
ノ’Ｑ候と’ｊｌなされる。δ感染は、しばしば極めて
重症な急性肝炎に移行し、成る場合には、非常に突然に
劇症を伴って起り、遂には死亡する場合もある。

追認試験によれば、従来は非Ａ型、非Ｂ型肝炎と見なさ
れていた肝炎感染の大多数が実際にはδ感染であった。

他の試験でも、ＨＢ　Ｖ感染の全思者数の約７％が、δ
−八へにも感染していることが知見されている。しかし
ながら、定期的に血液、又は白液類から得られた産物（
ｐｒｏｃｌｔ＋ｃｔｓ）を受けたＩＩ　ＢＶ感染患者の
場合、δ感染の危険性がはるかに人きい。従って、イタ
リア、ドイツ、及び米国では、被検１−Ｉ　Ｂ　Ｖ感染
血友病患者の約５０％もがδ−八へに感染していると推
定される。

δ−八へが肝臓生検で発見された慢性Ｂ型肝炎患省の場
合、常に血中に、一般にδ感染の指標とみなされている
抗−δが存在している。δ−Ａ（］に対する免疫グ［１
プリンの存在が常に、活性δ感染の指標となるわけでは
なく、δ感染に対して幅−の信頼出来るパラメータは血
中にδ−八へ自身が存在Ｊるか否かである。血中のδ−
Ａ（ｌを確実に検出する方法は、現在のところ余り利用
されていないが感染を確実に診断する場合にも、又、供
血者からδ感染に特有な物質を完全にスクリーニングす
る場合にもこれらの方法は極めて重要（゛ある。

本発明は、体液中のδ−八へを非常に？’Ａ感１ｑで検
出し１ｑる方法を提供する。

本発明による方法は、被検体液試料を↑トリアに結合さ
れた、Ｂ型肝炎表面抗原に対する免疫グロブリン（以後
抗−ＨＢ５と言う）とインキュベートし、その後固相を
液相から分離し、界面活性剤とδ−八へに対する免疫グ
ロブリン（抗−δ）との存在下で同相をインキコベ−１
〜し、次いでδ−Ａ！＋と抗−δとの結合（ｐｏｓｓｉ
ｂｌｒ＋　ｈｏｎｄｉＨ）を調べて、試料内のδ−Ａ（
］の右無を定性的及び／又は定Ｗ的に測定することを特
徴とする。

抗−１−Ｉ　Ｂ　Ｓのためのキャリアは、キャリア結合
相及び非キャリア結合相を互いに分前し冑るイーｒ怠の
形状又は大きさを有するものであれば良く、且つこの目
的に適する任意の材料で製造され得る。

抗−Ｉｔ　Ｂ　ｓは直接又は間接的にキャリアに結合さ
れ得る。適切なキャリアは、例えば、ガラス、プラスデ
ック、又は天然物製の試験管、ミクロ滴定用ストリップ
父はプレートのウェル、及びロッド。

ビーズ、又はディスクである。

本発明方法で用いられる界面活性剤（ｄ１３ｔｅｒ−ｇ
ｅｎｔ　）は、例えば硫酸ドデシルナトリウム、ドデシ
ル−Ｎ−ザルコシン酸ナトリウム、臭化セチルトリメデ
ル）アンモニウム、塩化ドデシルごリミジウム、バルミ
１〜イルーリゾレシチン、ドデシル−Ｎ−ベタイン、ポ
リオキシエチレンアルコール。

ポリ第４−シＪチレンーイソアルコール、ポリオキシＪ
チレン−ｐ−ｔ−オクチル−フェノール、ポリＡヤシ］
−チレンノニルフェノール、脂肪酸のポリ′：Ａ：１ニ
ジエチレンエステル、ポリオキシエチレンソルビトール
エステル、ドデシルスルホン酸ナトリウム、臭化テトラ
デシルアンモニウム、及びリボニンである。非イオン性
界面活性剤が好ましい。

非常に好適な非イオン性界面活性剤は、ブリ（Ｂｒｙ）
、ｔ−リドン（Ｔｒｉｔｏｎ　）　、ノニデート（Ｎ　
ｏｎｉｄｅｔ）　−Ｐ　−４０，及びトウィーン（Ｔｗ
ｅｅｄ）等のポリＡキシエヂ１ノン誘尋体である。

δ−八へと抗−δどの結合は免疫化学における慣用の４
１意の方法により検出され得る。例えば、このために、
凝集反応、又はいわゆるサンドイッチ反応を用いること
が可能である。

凝集反応を利用してδ−八へを決定する際、δ−八へを
粒子に結合した抗−δでインキコベートづる。δ−八へ
が存在すれば粒子の凝集が起るので、δ−Ａ！＋が定性
的又は定ｍ的に検出され得る。この方法で使用される粒
子は、例えば、赤面球、ラテックス粒子、染別ゾル粒子
、又は金属或いは金属化合物のゾル粒子であり得る。

リンドイッチ反応を利用してδ−八へを決定する際には
、δ−Ａ（ｌをキャリアに結合された抗−δ及び標識試
薬に結合された抗−δでインキュベート覆る。両方の抗
−δ試薬が１つのδ−ＡＱへジョイン］へ結合すれば標
識試薬がキャリアへ結合するの゛Ｃ１キトリア結合標識
試薬の検出によりδ−ΔＯと抗−δとの結合、従って試
料中に存在するδ−Δｇが検査される。抗−１−１［３
ｓの場合のように、使用されるキャリアは適当な物質で
製造可能であり、又キャリア結合相及び非キャリア結合
相を分−１し得る適切な形状と大きさであり得る。

本発明方法で使用可能なキャリア結合抗−１−ｌ　Ｂ　
ｓ及び抗−δは各４種々のキャリアに結合可能であり、
又、被検試料と同時に又は互いに別個に接触させること
も、或いは１つの同一のキャリアに連帯的に（ｃｏｎｊ
ｏｉｎｔｌｙ）結合せることも可能である。

この最後の方法に困るのが、一般に実施が最も簡単な測
定法である。かかる方法に於いては、仝Ｃの慣用の標識
試薬がδ−八への検出に使用可能であり、例えば、酵素
、放射性原子又は化合物、螢光物質２着色化合物、染斜
ゾル、金属類又は金属化合物のゾルなどが使用され得る
。

本発明は更に、本発明方法を実施覆るに必要な少なくと
も幾つかの成分を含有するテストキットに関する。即ち
、本発明のデストキツ１〜は少なくとも、キャリアに結
合された抗−ＨＢ　Ｓと抗−δどを含有Ｊる。抗−δは
、例えば、７スト１ツト中に粒子に結合された形態で存
在しても良いが、一方、テストキットはキｌ？リアに結
合しｌこ抗−δ及び標識試薬に結合した抗−δの両省を
含（ｉすることが出来る。後者のテストキットでは、抗
−ＨＢ５　及び抗−δが１つのキャリア上に連帯的に、
又は別のキャリア」二に存在することか出来る。キャリ
アとして、例えば、ガラス、プラスチック。

又は天然物製の試験管、ミクロ滴定用プレート或いはス
トリップ、又はロンド、ビーズ或いはディスクを用いる
ことが可能である。本発明のテスト、１−ットでは、標
識試薬として、例えば、酵素、放口Ｉｆｌ同位体或いは
放射性同位体含有化合物、螢光物賀又は容色化合物、或
いは染料ゾル、金属類又【よ金属化合物のゾルなどを含
有し得る。テストキットは父、所望により、測定用助剤
、例えば、標識試薬検出用助剤（例えば、酵素基質）、
洗浄用バッファ・及び／又は界面活＋（１剤などを含有
することが出来る。例えば本発明のテストキットでは抗
−δに結合される粒子として、赤血球、ラテックス粒子
、或いは染料、金屈類、又は金属化合物のゾル粒子を含
有することが出来る。

本発明を下記非限定的実施例により更に説明される。

丈１」ＬＬ Ａ：方法 （１）　ポリスチレンデユープの被覆 ２０℃で２４時間、ｐＨ９，Ｏの重炭Ｍ塩バッファ中で
δ−ＡｎとＩｌｒ３ＳＡｇに対すルヒト免１ｉ　’）　
Ｅｌ　７リンとの混合物をインキュベートしｃ１ポリス
チレンヂコーブの内面を抗−ＨＢｓ及び抗−δで・被覆
した。その後、前記デユープをｌｌＮ７．２の０．１５
モル／リットル燐酸塩バッファで洗浄した。

■　抗−δの西洋ワサビペルオキシダーゼへのカップリ
ング δ−ＡＨに対する免疫グロブリン及び西洋ワリビペルオ
キシダーゼ（＋−Ｉ　ＲＰ　’）の抱合体（ｃｏｎ−ｊ
ｕｏａｔｅ）をＮ　ａｋａｎｃ　＆　Ｋ　ａｗａｏｉの
方法（Ｊ。

Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ、　Ｃｙｔｏｃｈｅｍ、１９７４，
２２．１０８４−１０９１）　ニ従って調製した。

（３）被覆されたポリスチレンチューブの白酒によるイ
ンキュベーション 被覆ポリスチレンチューブをｉ、ｏｍＩＡの被検面清ど
、ρ８７．２の０．１５モル／リットル燐酸塩バッフン
・による希釈皮を次第に増加させて、３７℃で２時間イ
ンキュベートした。

（４）　界面活性剤にＪ：るインキュベーショント記（
３）で得られたチューブをＮ　ｏｎｉｄｅｔ　−Ｐ−４
０のｐｌ−１７，２、０，１５モル／リットル燐酸塩バ
ッファ溶液１．０−で３７℃、２時間インキュベートし
た。

その後チューブを吸引で空にし、ｆｌｌ−１７，２の０
．１５モル／リットル燐酸バッファで３回洗浄後、再び
吸引した。

（５）　抗−δ−ＨＲＰ−抱合体によるインキュベーシ
ョン Ｌ記（４）で得られたデユープの各々に■で得られた抱
合体１１１ｉヲ加えた後、ｐｉ−１７，２７７）　０．
１５［ル／リットル燐酸塩バッフ１で希釈した。３７℃
で１時間インキュベートした後、チューブを吸引し、ｐ
Ｈ７，２の０．１５モル／リッ１〜ル燐１１ＱＪｉバッ
ファ　２−で３回洗浄し、再び吸引した。

（６）　Ｉ−Ｉ　ＲＰに対する基質とのインキュベーシ
ョンその後、０．４１１１０／ｍ（！のＡルトーフエニ
レンジアミン及び０．４１ｎｇ／ｍｆ！の尿素過酸化物
の混合物の１１１−１５．０　、０．１５モル／リッＩ
・ル耐酸プトリウム溶液１ｍｅをチューブに加えた。３
０分間のインキュベーション後、２モル／リットル硫酸
溶液１＃ｌｉ！を加えて反応を停止さゼた。

（７）　測定 ポリスチレンチューブ内のこのＪ、うにして得られた溶
液の吸収を、４９２ｎＩＩｌの波長で光度計により測定
した。

Ｂ：結果 慢性＋＋１３Ｖ感染患者の血清試料及びヒト対照１銅清
試料を用いた、上記の方法による各希釈度に於（）る吸
収測定の結果を第１表に示す。

ダニ１表 実施例２ 肝炎の臨床的症状発現の前後に、臨床肝炎罹４．Ｌ’。

患者から血液試料を採取し、これ等の試別から血清がＵ
！ｊａｌｌされた。ミクロ滴定用プレートのつ■ルの内
面上に被覆された抗−ＨＢ５及び１］ツド上に被覆され
た抗−δを使用する系で前記＋ｎ＋循を検査した。

Δ：方法 （１）　ポリスチレンミクロ滴定用プレートの被覆ｐＨ
９，０の重炭酸塩バッファ中で、抗−１−Ｉ　Ｂ　ｓを
ＨＢＳＩＩに対するヒト免疫グロブリンで室温。

２４時間インキコベートし、続いてｌ’１ｌ１７．２の
０，１５モル／リットル燐酸塩バッファで洗浄して、ポ
リスチレンミクロ滴定板用プレートのつ１ルの内面を抗
−ト１１３ｓ、で被覆した。

■　ポリスチレンロッドの被覆 ミクロ滴定用プレートのウェルに嵌合り°るような寸法
のポリスチレン［Ｉラドを、（１）と同様にしててδ〜
八へに対する免疫グロブリンで被覆した１゜（３）　抗
−δの西洋ワサビペルオキシダーゼとのカップリング この抱合体を実施例１の八〇に記載の方ｖ１で調製した
。

（４）　ミク［１滴定用プレートの被検面精とのインキ
ュベーション 被検白酒０．１−をミクロ滴定プレー１〜のつＴルにピ
ペットで注入し、３７℃で１時間インキュベートした。

その後ウェルを吸引し、ｐｌ−１７，２のｔＡＭバッフ
ァ０．３ｍｅで５回洗浄した。

６）　界面活性剤によるインキュベーションソノ後、Ｎ
　ｏｎｉｄｅｔ　−Ｐ　−４０３ｏ／リツトルのｐＨ７
，２＋燐酸塩バッファ溶液０．１ｍ１ｊを各つ、１ルに
尋人し、次いで■で得られた抗−δぐ被覆されたポリス
チレンロッドを各ウェルに浸漬させた。

３７℃、１時間のインキュベーション後、ロッドを液か
ら取り出し、１１Ｈ７，２の燐酸塩バッファ中に連続的
に５回「１ツドを浸漬して洗浄した。各浸漬毎に新しい
バッファが用いられた。

〈６）　抗−δ−ＬＩ　ＲＰ抱合体によるインキュベー
ション このように処理されたポリスチレンロッドを（３）で１
ｑられた抱合体の溶液に逐次浸漬し、３７℃、１時間の
インキュベート後０と同様にして洗浄した。

＜７）　ＨＲＰにり・１する基質によるインキュベーシ
ョン その後、これ等の１］ツドをミクロ滴定用プレー１への
ウールに配置したが、該ウェルには０．４ｍ（１／ｄの
Ａルトー７Ｔニレンジアミンと０．４ｍＤ／ｌｎｅのｒ
′ｊＡ免過酸化物との混合物のｐＨｓ、、ｏ、バッファ
／溶液０．２ｄが含有されていた。３０分間インキュベ
ー１〜した後、［］ツドを取出し、２モル／リットル硫
酸０．１ｍＱをつ■ル内液体に添加した。

（０）　測定 これ等Ｑ溶液の吸収を４９２ｎｌｌｌの波長（Ａ　４９
２）ぐ光度Ｅ１により測定した。

Ｂ：結果 δ感染が種々の段階にある患者の自消の吸収を、上記方
法により検査し、その結果を第２表にまとめＩＣ６ 実施例３ ２０人の健庫人及び１２人の慢性）ＩＢＶ患者（６人の
急性肝炎患者を含む）の血清を対象として、１−Ｉ８３
Ａ（１，目Ｂｅ　Ａｏ、Ｄａｎｅ　＃子、及びδ−八へ
の有無を調べた。トＩＢＶ患者の場合、生検により得ら
れた肝細胞についでもδ−八へのイｊ無を調べた。

Ａ：方法 （１）肝生検試お１中のデルタ抗原決定生検して得た肝
細胞中のδ−八への存在が、Ｒ１ＺＺｅｔｔｏらの方Ｆ
）ｉ　（Ｇｌｌｊ、　１９７７．１８．９９７１０＋１
３）に従って免疫螢光により明らかにされた。

■　血清中のＨＢ　Ｓへ〇検出 血清中のＨＢＳＡ（ｌ検出には、Ｇ、　ＷＯｌｔＯｒら
によるＥＬＩＳＡ法（Ｊ　、　Ｃ，ｉｎ、　Ｐ　ａｔｈ
ｏｌ、、１９７６゜岨、８７３−８７９）が用いられた
。

（３）　ｔｔｎ　ｔｈ中のＩＩＢｅＡ！７検出而情中の
ｌ−Ｉ　Ｂ　ｅΔ９をＭ、　ｖａｎ　ｄｅ　Ｗａａｒｔ
らによるＥＬＩＳＡ法（Ｊ　、　Ｍｅｄ、Ｖ　１ｒｏ１
．．１９７９４゜４３−４９　）を用いて測定した。

（４）　血清中のＤ　ａｎｅ粒子 １）　ａｎｅ粒子の検出は、電子顕微鏡を用いて血清を
調べた。

６）　血清中のδ−八へ検出 血清中のδ−八へは実施例２に記載の方法により検査さ
れた。

（以下余白） Ｂ：結果 被検白酒の種々の測定結果を第３表にまとめる。

これ等の結果から、本発明による血清中のδ−Ａｇに対
するテストは、ヒト血Ｍ（ｆｔ白。

ＨＢｅ　ＡＱ　、Ｄａｎｅ粒子中にみられるＩ−Ｉ　Ｂ
　ｃΔ０゜又は［）ａｎｅ粒子自体と反応Ｕず、又ＨＢ
ｓＡｇども反応しないことが知見された。血清中のδ−
Ａｏに対Ｊるテストでは、急性肝炎患者は錫↑ノＦ示し
、肝細胞中にδ−Ａ（Ｊが検出された。

第３表 １−１［３Ｖ患者の血清中δ−Ａ！＋及び対照血清中δ
−Ａ（１実施例４ テスｉヘキット 実施例１によるδ−八へ決定に用いられるデスト４ツｉ
−は、次の成分からなるニ ー西洋ワυどペルオキシダーゼで標識された、δ−Ａｏ
に対するヒト免疫グロブリンの凍結乾無品を入れたアン
プル； 一アルミニウムラミネートにパッケージされ、δ−Ａｉ
ｌ及び１ｉＢｓＡｏに対する免疫グロブリンで内側を被
覆されたポリスチレンデユープ；−ｌ１ｌ−１７，２の
燐酸塩バッファを含有するびんニーＮ　ｏｎｉｄｅｔ　
−ｐ　−４０の溶液を含有するびん；−Ａルトーフｌニ
レンジアミンを含有する発泡性錠剤を入れたびん； −ブリスターストリップ中の過酸化尿素錠剤ニー酢酸ナ
トリウムバッファ； 一δ−へ〇陰性対照血消を入れたフラスコニーδ−Δｇ
陽性対照白酒を入れたフラスコニーテスト実施のための
使用説明書。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　体液試料中のＢ型肝炎に係るデルタ抗原の定性
   的及び／又は定量的な検出方法であって、被検試料をキ
   ャリアに結合されたＢ型肝炎表面抗原に対する免疫グロ
   ブリンと共にインキュベートし、その後液相から固相を
   分離し、界面活性剤とデルタ抗原【こ対する免疫グロブ
   リンとの存在下で同相をインキュベートし、次いでデル
   タ抗原に対Ｊる免疫グロブリンと前記抗原との結合を調
   べ、該結合から試第３１中のデルタ抗原の存在を定性的
   ／及び又は定量的に測定する方法。 （２）　デルタ抗原に対する免疫グロブリンとのインキ
   ュベーションを、キャリアに結合された免疫グロブリン
   及び標識試薬に結合された免疫グロブリンを用いて実施
   され、そしてその後デルタ抗原に対する免疫グロブリン
   と該抗原との結合を、キャリアに結合された前記デルタ
   抗原に対する免疫グロブリンと標識試薬との結合を調べ
   ることによって測定することを特徴とする特許請求の範
   囲第１項に記載の方法。 （３１１３型肝炎表面抗原に対でる、及びデルタ抗原に
   対する免疫グロブリンを帯同的に結合するキャリアが使
   用されることを特徴とする特許請求の範囲第２項に記載
   の方法。 （４）　酵素が標識試薬として用いられることを特徴と
   する特許請求の範囲第２項又は第３項に記載の方法。 （５）　デルタ抗原に対する免疫グロブリンによるイン
   キュベーションが粒子に結合された免疫グロブリンにＪ
   ：り実施されることを特徴とする特ｈ１請求の範囲第１
   項に記載の方法。 （６）　粒子として、赤血球、ラテックス粒子。 染料ゾル又は金属ゾルが用いられることを特徴とする特
   許請求の範囲第５項に記載の方法。 （１）　表面活性剤が非イオン性表面活性剤であること
   を特徴とする特許請求の範囲第１項乃至第６項のいずれ
   かに記載の方法。 （８）　非イオン性界面活性剤がポリＡギシエチレン銹
   η体であることを特徴とする特許請求の範囲第７項に記
   載の方法。 （９）　特許請求の範囲第１項に記載の方法を実施する
   ためのテストキットであって、該キットが歩容くども、 一キレリアに結合された、Ｂ型肝炎表面抗原に対する免
   疫グロブリンと、 一デルタ抗原に対１゛る免疫グロブリンと、からなるこ
   とを特徴とするテストキット。 （１０）　テストキットは少な（とも、−Ｂ型肝炎表面
   抗原に対する、及びデルタ抗原に対する免疫グ１］プリ
   ンが結合されるキ髪・リアと、−標識試薬に結合された
   、デルタ抗原に対する免疫グロブリンと、 からなることを特徴とする特許請求の範囲第９１ｎに記
   載のテストキット。 （１１）　テストキットは少なくとも、−第１のキャリ
   アに結合された、Ｂ型肝炎表面抗原に対する免疫グロブ
   リンど、 一第２のキャリアに結合された、デルタ抗原に対する免
   疫グロブリンと、 一標識試薬に結合された、デルタ抗原に対する免疫グロ
   ブリンと、 からなることを特徴とする特５′Ｆ請求の範囲第９項に
   記載のテストキット。 （１２）　標識試薬として酵素を含有することを特徴と
   する特許請求の範囲第１０項または第１１項に記載のデ
   ス１ヘキツト。 （１３）　酵素に対リ−る基質を更に含有することを特
   徴とする特許請求の範囲第１２項に記載のテスト−１ツ
   １〜。 （１４）　テストキットは少なくとも、−キャリアに結
   合された、Ｂ型肝炎表面抗原に対する免疫グ［１プリン
   と、 一粒子に結合された、デルタ抗原に対する免疫グ［１プ
   リンと、 からなることを特徴とする特許請求の範囲第９項に記載
   のテストキット。 （１５）　粒子として、赤血球、ラテックス粒子。 染料ゾル、又は金属ゾルを含有することを特徴とする特
   許請求の範囲第１４項に記載のテストキット。 （１６）　テストキットは更に界面活性剤を含むことを
   特徴とする特許請求の範囲第９項乃至第１５項のいずれ
   かに記載のテストキット。 （１１）　主１／リアと、該キャリアに結合した、デル
   タ抗原に対する及びＢ型肝炎表面抗原に対する免疫グロ
   ブリンとを含む免疫化学テスト試薬。