JPS60200166A - 液体クロマトグラムの同定方法 - Google Patents
液体クロマトグラムの同定方法Info
- Publication number
- JPS60200166A JPS60200166A JP5607384A JP5607384A JPS60200166A JP S60200166 A JPS60200166 A JP S60200166A JP 5607384 A JP5607384 A JP 5607384A JP 5607384 A JP5607384 A JP 5607384A JP S60200166 A JPS60200166 A JP S60200166A
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- JP
- Japan
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- chromatogram
- component
- cross
- liquid
- peak
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- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明は液体クロ７トグラム装置により得られる液体ク
ロマトグラムの同定方法に関Ｖる。
ロマトグラムの同定方法に関Ｖる。
従来では、液体クロマ１−グラフにおけるピーク同定法
は、リテンションタイム（以下ＲＴと言う）、が等しい
かどうかが唯一の判定基準であった。
は、リテンションタイム（以下ＲＴと言う）、が等しい
かどうかが唯一の判定基準であった。
したがってＲＴが等しければ、たとえ異種成分であって
も、同一成分として判定する恐れがあった。
も、同一成分として判定する恐れがあった。
すなわち、第１図におけるａ、成分と０１成分は同一と
みなさＪしる。この誤りを防ぐための一方法として、第
２図に示すように、フ第１〜ダイオードアレイ素子等を
用いて各ピーク頂点における瞬間的な波長スペクトルを
測定し、その波形の相似形で判定する方法がある。すな
わち、ａ、成分とｂ２成分は各波長における高さの比が
ほぼ同一のため同一成分と見なされるが、ｃ２成分はス
ペクトルが異なるため異種成分と判定できる。
みなさＪしる。この誤りを防ぐための一方法として、第
２図に示すように、フ第１〜ダイオードアレイ素子等を
用いて各ピーク頂点における瞬間的な波長スペクトルを
測定し、その波形の相似形で判定する方法がある。すな
わち、ａ、成分とｂ２成分は各波長における高さの比が
ほぼ同一のため同一成分と見なされるが、ｃ２成分はス
ペクトルが異なるため異種成分と判定できる。
しかし、その正確な判定に当って次に述べるいくつかの
問題がある。
問題がある。
第一にノーマライズ処理が必要であるという点である。
すなわちａ２成分とｂ２成分が等しいかどうかは、それ
ぞれのスペクトルが異なるかどうかを判定しなければな
らない。そのため例えばｂ２成分のスペクトルを吸光度
（以下、ＡＵと記す。）方向に約２倍電気的に拡大する
操作が必要である。そのためには、ｂ２スペクトルを最
初にメモリに記憶させ、かつ何倍かに拡大するソフトウ
ェア処理が必要であり、ソフトウェアが繁雑になる。
ぞれのスペクトルが異なるかどうかを判定しなければな
らない。そのため例えばｂ２成分のスペクトルを吸光度
（以下、ＡＵと記す。）方向に約２倍電気的に拡大する
操作が必要である。そのためには、ｂ２スペクトルを最
初にメモリに記憶させ、かつ何倍かに拡大するソフトウ
ェア処理が必要であり、ソフトウェアが繁雑になる。
第二にはスペクトルのバックグランド補正が必要である
という点である。すなわち液体クロマトグラムの正確な
同定をするために忘れてならないことにベースライン部
分の吸収スペクトルｄ２がある。例えば、ａ２成分のス
ペクトルにｄ２スペクトルが加えられている場合、そし
てｄ２成分のスペクトルにｄ２に相当するスベク１ヘル
が加えられていない場合ａ、とｂ２は正規化しても重な
らない恐れがある。なぜならば、ベースラインの吸収ス
ペクトルは成分量に無関係だからである。このためには
、ａ２スペクトルもｂ２スペクトルも正確にベースライ
ン部分のスペクトルを差引いておかなければならない。
という点である。すなわち液体クロマトグラムの正確な
同定をするために忘れてならないことにベースライン部
分の吸収スペクトルｄ２がある。例えば、ａ２成分のス
ペクトルにｄ２スペクトルが加えられている場合、そし
てｄ２成分のスペクトルにｄ２に相当するスベク１ヘル
が加えられていない場合ａ、とｂ２は正規化しても重な
らない恐れがある。なぜならば、ベースラインの吸収ス
ペクトルは成分量に無関係だからである。このためには
、ａ２スペクトルもｂ２スペクトルも正確にベースライ
ン部分のスペクトルを差引いておかなければならない。
このことは、やはり、繁雑なソフトウェアサポートが必
要となる。
要となる。
更に第三には３次元クロマトグラムによる場合には正確
な判定が困難であるという点である。ある成分の吸収ス
ペクトルの全容を知る手段として、第３図に示すように
、ＲＴ、波長（ＷＬ）、吸光度（ＡＵ）を三つの要素と
した三次元クロマトグラムがある。これは立体感があり
、全体の形状を知るうえでは、解りやすいが、正確なか
つ定量的な比較は不可能である。
な判定が困難であるという点である。ある成分の吸収ス
ペクトルの全容を知る手段として、第３図に示すように
、ＲＴ、波長（ＷＬ）、吸光度（ＡＵ）を三つの要素と
した三次元クロマトグラムがある。これは立体感があり
、全体の形状を知るうえでは、解りやすいが、正確なか
つ定量的な比較は不可能である。
本発明の目的は、液体クロマトグラフ装置によす得られ
た液体クロマトグラムのピーク同定をより正確に、かつ
簡便に行うことが可能な液体クロマトグラムの同定方法
を提供することにある。
た液体クロマトグラムのピーク同定をより正確に、かつ
簡便に行うことが可能な液体クロマトグラムの同定方法
を提供することにある。
本発明はリテンションタイム、波長及び吸光度の３要素
を同時に測定し、これらの測定データから得られた液体
クロマトグラムから試料中の各成分を同定する液体クロ
マトグラムの同定方法において一方の座標をリテンショ
ンタイムとし他の座標軸を波長とした座標系に測定対象
となる成分の吸光度の一定レベルにおける断面クロマト
グラ１１を作成し、該断面クロマトグラムに表わされた
等高曲線の形状が既知成分の等高曲線の形状と同一であ
るか否かにより各成分の同定を行うことを特徴とするも
のである。
を同時に測定し、これらの測定データから得られた液体
クロマトグラムから試料中の各成分を同定する液体クロ
マトグラムの同定方法において一方の座標をリテンショ
ンタイムとし他の座標軸を波長とした座標系に測定対象
となる成分の吸光度の一定レベルにおける断面クロマト
グラ１１を作成し、該断面クロマトグラムに表わされた
等高曲線の形状が既知成分の等高曲線の形状と同一であ
るか否かにより各成分の同定を行うことを特徴とするも
のである。
以下図面により本発明の詳細な説明する。第１図におい
てピークａ、の半値幅Ｗ１は、ピークの高さの異るａ、
と同一成分であるピークｂ、の半値幅ｗ２とほぼ同じで
ある。一般に液体プロマドグラフィーにおいて、同一成
分の半値幅は、その成分が充填剤に対して過負荷容量で
ない限り。
てピークａ、の半値幅Ｗ１は、ピークの高さの異るａ、
と同一成分であるピークｂ、の半値幅ｗ２とほぼ同じで
ある。一般に液体プロマドグラフィーにおいて、同一成
分の半値幅は、その成分が充填剤に対して過負荷容量で
ない限り。
成分量に無関係に同一値を示す。その理由は、ＲＴが同
じと言うことは、カラム内の拡がりも、カラム外の拡が
り（例えばデッドスペースによる拡散など）は同一であ
る。この点に注目すれば、第３図の３次元クロマトグラ
フのピーク成分量に無関係な方向すなわち、吸光度の大
きい方向から見た方が、より正しい相似形が得られるこ
とが解る。
じと言うことは、カラム内の拡がりも、カラム外の拡が
り（例えばデッドスペースによる拡散など）は同一であ
る。この点に注目すれば、第３図の３次元クロマトグラ
フのピーク成分量に無関係な方向すなわち、吸光度の大
きい方向から見た方が、より正しい相似形が得られるこ
とが解る。
第４図はこのような観点により描かれたａ１成分の断面
クロマトグラムを示している。４は頂点位置であり、Ｒ
Ｔに等しく、かつ第２図の８２スペクトルの頂点に相当
する。また３はピーク頂点から見て１０％のピークの等
高形状、１は９０％のピークの等高形状をそれぞれ示し
ている。
クロマトグラムを示している。４は頂点位置であり、Ｒ
Ｔに等しく、かつ第２図の８２スペクトルの頂点に相当
する。また３はピーク頂点から見て１０％のピークの等
高形状、１は９０％のピークの等高形状をそれぞれ示し
ている。
第５図はａ１ビークとす、ピークを同一座標系で示した
断面クロマトグラムであり、同図において２は第４図の
２に等しいａ、ピークの等高曲線５はピークの頂点から
見て５０％の等高曲線であリ、はぼ同一形状になってい
る。これによってａ１ピークの示す成分とす、ピークの
示す成分は同一であると明確に判定することができる。
断面クロマトグラムであり、同図において２は第４図の
２に等しいａ、ピークの等高曲線５はピークの頂点から
見て５０％の等高曲線であリ、はぼ同一形状になってい
る。これによってａ１ピークの示す成分とす、ピークの
示す成分は同一であると明確に判定することができる。
第６図は他の実施例を示しており、ピーク高さの一定レ
ベル（例えば半値高さ）以上の値が現われるように、波
長スキャンした（スキャン間隔の一例は５秒）場合の断
面クロマトグラムである。
ベル（例えば半値高さ）以上の値が現われるように、波
長スキャンした（スキャン間隔の一例は５秒）場合の断
面クロマトグラムである。
その外形形状（等高曲線）を未知成分のそれと比較する
ことによって、同一成分かどうかを正確に判定すること
ができる。
ことによって、同一成分かどうかを正確に判定すること
ができる。
本発明の実施例によればピークの頂点の位置がどこにあ
るかで、定性判定をすることができる。
るかで、定性判定をすることができる。
すなわち、従来はＲＴのみで判定していたが１本発明は
ＲＴと波長の座標系（２次元）を使用することにより、
波長の情報が加わった２次元の情報として判定すること
ができる。
ＲＴと波長の座標系（２次元）を使用することにより、
波長の情報が加わった２次元の情報として判定すること
ができる。
またピークのレベルとして半値幅以上のレベルを使用し
た場合、ベースライン部分のスペクトルを差引く処理を
しなくても、十分に正確な同定情報を得ることができる
。これは、ピークの半値幅以上のレベルにおいては、成
分量の大小の影響がほとんどないからである。
た場合、ベースライン部分のスペクトルを差引く処理を
しなくても、十分に正確な同定情報を得ることができる
。これは、ピークの半値幅以上のレベルにおいては、成
分量の大小の影響がほとんどないからである。
本発明によれば、複雑な処理を行うことなく正確かつ、
容易に液体クロマトグラムの同定を行うことができる。
容易に液体クロマトグラムの同定を行うことができる。
第１図はリテンションタイムと吸光度を座標軸にとって
座標系に表わした液体クロマトグラムの一例を示す図、
第２図における各ピーク頂点における瞬間的な波長スペ
クトルを示す図、第３図はリテンションタイム、波長及
び吸光度を座標軸とする三次元クロマトグラムを示す図
、第４図は特定成分の断面クロマトグラムを示す図、第
５図は異種成分を同一の座標系により表わした断面クロ
マトグラムを示す図、第６図は吸光度が一定レベル以上
のピークが現われるように波長スキャンを行うことによ
り得られる断面クロマトグラムを示す図である。 ＲＴ・・・リテンションタイム、ＡＵ・・・吸光度、ｗ
Ｌ・・・波長、ｌ−１、、Ｈ２−ピーク高さ、Ｗ、、Ｗ
２−＝半値幅。 舒ＺｆｊＪ ＷＬ 不５ｍ ■ 殻６ｆ７Ｊ
座標系に表わした液体クロマトグラムの一例を示す図、
第２図における各ピーク頂点における瞬間的な波長スペ
クトルを示す図、第３図はリテンションタイム、波長及
び吸光度を座標軸とする三次元クロマトグラムを示す図
、第４図は特定成分の断面クロマトグラムを示す図、第
５図は異種成分を同一の座標系により表わした断面クロ
マトグラムを示す図、第６図は吸光度が一定レベル以上
のピークが現われるように波長スキャンを行うことによ
り得られる断面クロマトグラムを示す図である。 ＲＴ・・・リテンションタイム、ＡＵ・・・吸光度、ｗ
Ｌ・・・波長、ｌ−１、、Ｈ２−ピーク高さ、Ｗ、、Ｗ
２−＝半値幅。 舒ＺｆｊＪ ＷＬ 不５ｍ ■ 殻６ｆ７Ｊ
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ■、リテンションタイム、波長及び吸光度の３要素を同
時に測定し、これらの測定データから得られた液体クロ
マトグラムから試料中の各成分を同定する液体クロマＦ
・ダラムの同定方法において、一方の座標をリテンショ
ンタイムとし他の１ｍａｌ軸を波長とした座標系に測定
対象となる成分の吸光度の一定レベルにおける断面クロ
マトグラムを作成し、該断面クロマトグラムに表わされ
た等高曲線の形状が既知成分の等高曲線の形状と同一で
あるか否かにより各成分の同定を行うことを特徴とする
液体クロア１〜グラムの同定方法。 ２ｏ前記一定レベルの断面は、ピーク頂点の吸光度の１
／２以］二のレベルであることを特徴とする特許請求の
範囲第１項に記載の液体クロマトグラムの同定方法。 ３、前記一定レベルの断面は、ピーク頂点の吸光度の点
であることを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の
液体クロマトグラムの同定方法。 ４、前記断面クロマトグラムは、既知成分のクロマトグ
ラムに、未知成分のクロマトグラムを同一座標系に示し
たことを特徴とする特許請求の範囲第１項に記載の液体
クロマトグラムの同定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5607384A JPS60200166A (ja) | 1984-03-26 | 1984-03-26 | 液体クロマトグラムの同定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5607384A JPS60200166A (ja) | 1984-03-26 | 1984-03-26 | 液体クロマトグラムの同定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60200166A true JPS60200166A (ja) | 1985-10-09 |
Family
ID=13016904
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5607384A Pending JPS60200166A (ja) | 1984-03-26 | 1984-03-26 | 液体クロマトグラムの同定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60200166A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006125856A (ja) * | 2004-10-26 | 2006-05-18 | Sumitomo Chemical Co Ltd | 液体クロマトグラフィー装置 |
| US20210318277A1 (en) * | 2018-10-11 | 2021-10-14 | Kagami Inc. | Analysis method, analysis apparatus, analysis program, method for generating standard shape |
-
1984
- 1984-03-26 JP JP5607384A patent/JPS60200166A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006125856A (ja) * | 2004-10-26 | 2006-05-18 | Sumitomo Chemical Co Ltd | 液体クロマトグラフィー装置 |
| US20210318277A1 (en) * | 2018-10-11 | 2021-10-14 | Kagami Inc. | Analysis method, analysis apparatus, analysis program, method for generating standard shape |
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