JPS60197626A - 血圧降下剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はユーグレナ細胞の水性溶媒抽出物を有効成分と
する血圧降下剤に関する。

近年、生活環境、とくに食生活の変化に伴って成人病の
増加が指摘され、なかでも高血圧に伴う脳卒中（脳出血
および脳梗塞）死は、日本では癌に次いで死因の第二値
を占めている。高血圧に伴う症状は脳卒中以外にも、心
臓肥大、腎硬化、動脈病変、糖尿病など身体全体におよ
び、従って高血圧症の予防ないし治療は緊急の課題であ
るとされている。

さて、本発明で用いるユーグレナ（ｔｉｕｇｌｅｎａ　
）は、藻類として扱われることが多いが、分類学的には
原生動物門鞭毛虫類綱、およびミドリムシ植物門ミドリ
ムシ藻！Ｒ綱の両方に分類され、植物的な性質と併せて
動物的な性質を持ち、従来藻類としてよく知られている
クロレラ、スピルリナなどとは性質を異にする。即ち、
動物的な性質としては、蛋白質性の細胞外膜を持ち、尿
素を資化せず、鞭毛によって運動する。他方、植物的な
性質としては、細胞内にクロロフィルを持ち光合成を行
うことが知られている。従来、ユーグレナの利用に関す
る報告は、その培養並びに細胞内の栄養学的成分に関し
てされている〔大所ら、層化、第３３巻、２９３頁、　
１９５７年、乳量ら、層化、第５１ｔ！、４７７頁、　
１９７７年、細谷ら、層化、第５１巻、４８３頁、　１
９７７年、Ａｇｒｉｃ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｎ＋、　
（アグリカルチュラル・アンド・バイオロジカル・ケミ
ストリー）第４７巻。

２５６１頁、　１９８３年、同第４７巻、　２６６９頁
、　１９８３年、など〕。

本発明者らは従来よりユニグレナの有効利用について研
究を続けてきたが、該細胞の抽出物の持つ薬理効果に着
目し、その医薬への応用について鋭意研究したところ、
ユーグレナ細胞の水性溶媒抽出物が高血圧自然発症ラッ
ト（５ｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉ
ｖｅ　Ｒａｔ、以下ｒｓＨＲＪという）およびの脳卒中
易発症性高血圧自然発症うツ）　（Ｓｐ−ｏｎｔａｎｅ
ｏｕｓｌｙ　Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　Ｒａｔ　−５
ｔｒｏｋｅ　−Ｐｒｏｎｅ、以下ｒｓＨＲ−３ＰＪとい
う）に対し著しい血圧降下作用を有することを見いだし
、これに基づいて、血圧降下剤として利用できることを
確認して、本発明の完成に至った。

本発明で用いるユーグレナ細胞を取得するには次の方法
により行われる。まず、ユーグレナ属に属する生物を栄
養培地に培養して、細胞を増殖せしめ、培養物より細胞
を分離する。ユーグレナ属に属する生物の好ましい例と
して番訃ユーグレナ・グラシリス（Ｈｕｇｌｅｎａ　ｇ
ａｃｉｌｉｓ　）　、ユーグレナ・ビリシス（１！ｕｇ
ｌｅｎａ　ｖｉｒｉｄｉｓ　）などが挙げられる。栄養
培地としては、無機あるいは有機の炭素源、窒素源およ
び無機塩類その他微量要素を含む培地が用いられる。具
体的には、炭素源としては、炭酸ガス、リンゴ酸、クエ
ン酸、グルコースなど、窒素源としては、リン酸アンモ
ニウム、硫酸アンモニウム、各種アミノ酸などが用いら
れる。

無機塩類としては、ＭｇＳＯ４、ＣａＣＯ３、ＺｎＳＯ
４、ＭｎＳＯ４、（ＮＨ４）２　Ｆｅ　（ＳＯ４）２、
Ｎａ２　ＭｎＯ４、ＣｕＳＯ４、ＣＯ３Ｏ４など、微量
要素としては各種ビタミン類が用いられる。

培養は屋外のプールあるいはタンク等の培養装置が用い
られる。培養に際して、通気攪拌は行ってもよいが、必
須ではない。ユーグレナは前述の如く、植物と動物の両
方の性質を有するため光を照射して光合成を行わせるこ
とができるが、他方全く光を照射しないでも培養を行う
ことができ、いずれの場合も細胞内の有効成分に関して
はほとんど差異はない。

ユーグレナ細胞より血圧降下物質を抽出するには以下の
方法により行われる。原料として湿潤状態の培養細胞、
あるいはこれを凍結乾燥、熱風乾燥、真空乾燥、スプレ
ードライなどの方法で乾燥した粉末細胞を用意し、これ
ら細胞に水性溶媒を加えて適当な温度に適当な時間保持
して抽出液を得る。水性溶媒に、さらにペプシン、トリ
プシン、溶菌酵素などの細胞を消化するための酵素剤を
加えることもできる。水性溶媒としては、水、生理的食
塩水、緩衝液、酸またはその塩の水溶液、およびアルカ
リの水溶液、若しくはこれらの水性溶媒に極性の有機溶
媒、例えばエタノール、メタノール、プロパツール、ア
セトンなどを約１０％以下の少量加えた水性溶媒が用い
られる。緩衝液としては、リン酸、酢酸、ホウ酸、クエ
ン酸、トリス−塩酸などの緩衝液が用いられる。酸また
はその塩としては、リン酸、塩酸、酢酸、乳酸、クエン
酸、コハク酸などの水溶性の無機酸または有機酸および
それらのアルカリ金属塩が用いられる。

アルカリとしてはナトリウム、カリウムなどのアルカリ
金属の水酸化物が用いられる。以上例示した水性溶媒の
うち特に好ましいのは、水、生理食塩水、緩衝液、酸ま
たはアル°カリの水溶液、またはｐｕｔ〜３の酸性水溶
液にペプシンを、ＰＨ７〜９の中性乃至微弱アルカリ性
の水溶液にトリプシンなどの消化酵素剤をそれぞれ加え
た水性溶液である。適当な温度とは、０〜１００℃のこ
とであり、水性溶液のみを使用した場合は５〜１００℃
が好ましく、水性溶液にペプシン、トリプシンなどの酵
素剤を添加した場合は２０〜５０℃が好ましい。適当な
時間とは、ｌＯ分〜５日間であり、好ましくは１０分〜
４８時間である。用いる水性溶媒の量は特に限定されな
いが、ユーグレナ細胞重量の３倍〜２００倍の量が好ま
しい。

原料ユーグレナ細胞に水性溶媒を加えて適当な温度に適
当な時間保持して行う抽出方法は、通常の攪拌、振盪、
向流などの抽出方法の他に、ユーグレナの細胞を破壊す
るためホモジナイザー、ブレンダー、超音波、加圧型細
胞破壊装置、摺潰機などで処理した後にインキエベーシ
ッンシして抽出することができる。以上のようにして抽
出した後、抽出残渣を遠心分離またはろ過によって除き
、ろ液を減圧濃縮、加温濃縮、限外ろ過などの方法で濃
縮して本発明の血圧降下物質の粗製物が得られる。

上記粗製物はそのままでも血圧降下物質として使用可能
であるが、さらにこれより血圧降下物質を精製するには
、公知の種々の精製手段が用いられる。例えば、硫安、
硫酸ナトリウムなどを使用した塩析、エタノール、メタ
ノール、アセトン、プロパツールなどを使用した有機溶
媒沈澱、活性炭、シリカゲル、アルミナ、ヒドロキシア
パタイト、セルロースなどを使用した吸着クロマトグラ
フィー、イオン交換樹脂、イオン交換セルロース、イオ
ン交換セファデックスなどを使用したイオン交換クロマ
トグラフィー、セフ１デツクス、バイオゲルなどを使用
したゲルろ過、電気泳動、限外ろ過、透析などの方法を
任意の順序で適宜組合せ、または繰り返すことにより精
製される。

本発明の血圧降下物質は、以下の理化学的性質に示され
るポリペプチドである。

（１）　溶剤に対する溶解性：水、エタノールに可溶。

（２）　呈色反応：ニンヒドリン反応、ビューレット反
応に陽性。

（３）紫外部吸収スペクトル：２８０　ｎｍ付近に吸収
極大を有する。

（４）等電点：約３．８ （５）　温度安定性：約１００℃の水に安定（６）　物
質の色：白色粉末 本発明のユーグレナ細胞の水性溶媒抽出物を血圧降下剤
として用いる場合には、単独または薬剤として許容され
る担体と混合して、錠剤、顆粒剤、散剤（粉剤）、コー
ティング剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、乳剤、アンプ
ル、注射液、座荊などの製剤となし、通常経口または非
経口的に用いられる。製剤化は当分野における常法に従
うて行うことができる。投与量は、患者の年齢、健康状
態、症状の程度、所望の効果などによっても変動するが
、通常１日当り０．１■／輸〜０．５■／呟の範−であ
る。

次に、実施例をもって本発明の詳細な説明する・が、薬
理効果試験は以下のとおり行った。即ち、血圧１７０〜
２３０　ｍｍ１ｇのＳＨＲまたは５ＨＲ−３Ｐに本発明
の血圧降下物質を静脈内に投与し、一定時間毎にテイル
パルスピックアンプ（ｔａｉｌ−ｐｕｌｓｅ−ｐｉｃｋ
−ｕｐ）法により無麻酔下で血圧を測定した。

実施例　１ 下記に示す培地２０００βの入ったタンクでユーグレナ
・グラシリスを光照射下（２，５００ルツクス）、２７
℃で５日間培養した。

培地組成　濃度 グルコース　１２．０　（ｇ　／　ｌ　）Ｌ−アルギニ
ン塩酸塩　０．５ Ｌ−アスパラギン酸　０．３ Ｌ−グルタミン酸　４．０ グリシン　０．３ Ｌ−ヒスチジン塩酸塩・８２０　０．０５ＤＬ−リンゴ
酸　６．５ クエン酸ナトリウム・１１２０　０．５コハク酸ナトリ
ウム・６Ｈ２００，１ （ＮＨ４）２３０４　０．２５ ＮＨ４ＨＣＯ３０，２５ ＫＩＩ２　ＰＯ４０，２５ ＭｇＣＯ３０，６ ＣａＣＯ３０，１２ Ｎａ２　ＥＤＴ＾　５０．０　（ｇ／　ｌ　）（ＮＨ４
）２Ｆｅ　（８０４）２　・６　Ｈ２Ｏ５０，０ＭｎＳ
Ｏ４・Ｈ２Ｏ１８，０ ＺｎＳＯ４・７　Ｈ２Ｏ２５，０ （ＮＨ４）ｓｒｌｏ７０２４・４Ｈ２０４，０ＣｕＳＯ
４１、２ ＮＨ４ＶＯ３０，５ ＣｏＳＯ４・７Ｈ２００，５ ｎ３　ＢＯ２０，６ ＮｉＳＯ４・　６Ｈ２００，５ ビタミンＢ１塩酸４　２．５ ビタミン８１２　０．００５ 初発ｐｉ　３．５ 細胞数が約２　Ｘ　１０７個／−に達したときに培養を
終了し、培養液を遠心分離して細胞を集め、５００１の
水で二回洗浄した後、熱風乾燥して３５−の乾燥細胞を
得た。

実施例　２ ユーグレナ・グラシリスをストレプトマイシンで処理し
たクロロフィル欠損株を用い、前記実施例１に準じて培
養を行い、培養液を遠心分離して細胞を集め、５００１
の水で二回洗浄した後、熱風乾燥して２８ｋｔｒの乾燥
細胞を得た。

実施例　３ 実施例１で得られたユーグレナ細胞３０ｇを水２．００
０ｗ１に懸濁し、９６℃で３０分間処理した。その後１
Ｇ、０ＯＯＸ　ｇ　、　１５分間遠心分離して残渣を除
き、上清液を２００−まで減圧濃縮した。この濃縮液に
冷却下（約０℃）、エタノールを終濃度７０％となるよ
うに加え、４℃で一夜放置した。次いで、生成した沈澱
をろ過して除き、ろ液をセファデックスＧ−２５（ファ
ルマシア社製）を使用したゲルろ過（カラム５φＸ６０
ｃｍ）にかけ、蒸留水で溶出した。

溶出液を２０−ずつに分画して２８０ｎｓ＋における吸
光度（蛋白質量を表す）を測定したところ、第１図に示
すパターンが得られた。最初に溶出されたＡ画分を凍結
乾燥することにより、血圧降下物質の粗製物２．５ｇが
得られた。

この血圧降下物質の粗製物を生理食塩水に溶解して、５
ＨＲ２匹および５ＨＲ−３Ｐ３匹の計５匹に１００＋ａ
ｇ／　１００　ｇの割合で静注したところ、第２図に示
すように顕著な血圧降下作用を示した。

実施例　４ 実施例２で得られたユーグレナ細胞１００ｇを水２．０
００　Ｗ７１に懸濁した後、゛ＩＮ水酸化ナトリウムを
加えてｐＨ８，０とし、５〜１０℃で１０時間超音波破
砕を行った。次いで、１０．０００ｘ　ｇ　、　２０分
間遠心分離して残渣を除き、上清液を６００ｄまで減圧
濃縮した。次ぎに濃縮液を限外ろ過により４両分に分画
した。即ち、ろ過膜としてＸＭ−３００（分画分子量３
０万）　、ＸＭ−１０ＯＡ　（同１０万）およびＰＭ−
３０（同３万、いずれもアミコン社製）の３種類を使用
し、分子量３０万以上、ｌＯ〜３０万、３〜１０万およ
び３万以下の４画分を得た。操作は全て約４℃で行った
。

分子量１０〜３０万および３〜１０万の両分を凍結乾燥
することにより、血圧降下物質の粗製物がそれぞれ６．
３ｇおよび４．１ｇ得られた。

これら血圧降下物質の粗製物を生理食塩水に溶解して、
５ＨＲ−３Ｐ３匹に１０■／１００ｇの割合で静注した
ところ、第３図に示すように顕著な血圧降下作用を示し
た。

実施例　５ 実施例１で得られたユーグレナ細胞１５ｇを水１００ｍ
ｅに懸濁し、塩酸を加えｐＨ１，８とした後、ペプシン
７５■を添加して、３７℃で２４時間処理した。

次いで、１０．０００Ｘ　ｇ、１５分間遠心分離して残
渣を除いた後、上清“液をセファデックスＧ−２５カラ
ム（５φＸ６０ｃｍ）にかけ、蒸留水で溶出した。溶出
液を１５ｍ１ずつに分画して２８０ｎｓ＋における吸光
度を測定したところ、第４図に示すパターンが得られた
。最初に溶出されたＡ画分を凍結乾燥することにより、
血圧降下物質の粗製物１．４ｇが得られた。

この血圧降下物質の粗製物を生理食塩水に熔解して、５
ＨＲ−３Ｐ５匹に１０■／１００ｇの割合で静注したと
ころ、第５図に示すように顕著な血圧降下作用を示した
。

実施例　６ 実施例２で得られたユーグレナ細胞１５ｇを水１０ｈｊ
！に懸濁し、ＩＮ水酸化ナトリウムを加えてｐＨ７，８
とした後、トリプシン７５■を添加して、３７℃で２４
時間処理した。次いで、１０，０ＯＯＸ　ｇ　、　１５
分間遠心分離して残渣を除いた後、上清液をセファデッ
クスＧ−２５カラム（５φＸ６０ｃｍ）にかけ、蒸留水
で溶出した。溶出液を１５−ずつに分画して２８０ｎＩ
１１における吸光度を測定したところ、第６図に示すパ
ターンが得られた。最初に溶出されたＡ画分を凍結乾燥
することにより、血圧降下物質の粗製物１．８ｇが得ら
れた。

この血圧降下物質の粗製物を生理食塩水に熔解して、５
ＨＲ−３Ｐ４匹にｌθ■／１００ｇの割合で静注したと
ころ、第７図に示すように顕著な血圧降下作用を示した
。

実施例　７ 実施例２で得られたユーグレナ細胞１５ｇを水１００−
に懸濁し、ＩＮ水酸化ナトリウムを加えてｐｉ　７．８
とした後、トリプシン７５■を添加して、３７℃で２４
時間処理した。次いで、１０．０００Ｘ　ｇ、１５分間
遠心分離して残渣を除き、得られた上清液に硫安を飽和
濃度に加え塩析した。生成した沈澱を遠心分離により集
め、５０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７，５）に熔解した後
、同緩衝液に透析した。次いで、あらかじめ５０ｍＭリ
ン酸緩衝液（ｐＨ７，５）で平衡化したＤＥＡＲ−セル
ロース（ブラウン社製）カラム（４，３φＸ５ＢＣＩｌ
）に透析内液を吸着させ、同緩衝液で洗浄した後、０〜
ＩＭの塩化カリウム（２，０００１１１１りでグラジェ
ントに溶出し、さらに１．５Ｍの塩化カリウム（５００
ｍｆｆ１）、　０．３Ｍの水酸化ナトリウム（５００ｍ
＞で順次溶出した。溶出液を１５１ｍ１！ずつに分画し
て２８０ｎ−における吸光度を測定したところ、第８図
に示すパターンが得られた。

同図に示すＡ−Ｆの６つの両分のうちＡ、Ｂ、Ｃおよび
Ｆ画分をイオン交換水に透析した後、凍結乾燥すること
により血圧降下物質の粗製物が各々０．３ｇ、０．６ｇ
、０．４ｇ、および、０．３ｇ得られた。

これら粗製物は分子量約５．０００〜１０，０００のポ
リペプチドであった。

これら血圧降下物質の粗製物を生理食塩水に熔解して、
５ＨＲ−３Ｐ３匹にｌＯ■／１００ｇの割合で静注した
ところ、第９図に示すように顕著な血圧降下作用を示し
た。

実施例　８ 実施例７においてＤＥＡＥ−セルロースを用いたカラム
クロマトグラフィーで得られた画分Ｃを、アンホライン
を使用した等電点電気泳動により分画した。使用したア
ンホラインは、ｐＨ２，５〜５．０で、冷却下４００Ｖ
、　４８時間通電した。泳動後５−ずつに分画して２８
０ｎｍにおける吸光度を測定したところ、第１０図に示
すパターンが得られた。

同図に示す等電点約３．８のＣ−２画分をイオン交換水
に透析した後、凍結乾燥することにより血圧降下物質０
．１５ｇが得られた。

この血圧降下物質を生理食塩水に溶解してＳ　ＨＲ−３
Ｐ３匹に２■／１００ｇの割合で静注したところ、第１
１図に示すように顕著な血圧降下作用を示した。

実施例　９ 実施例１で得られたユーグレナ細胞３０ｇをｐｔ＋７．
８のリン酸緩衝液２．０００艷に懸濁し、よく攪拌シナ
力ら８５〜１００℃で４０分間抽出した。その後１０．
０ＯＯＸ　ｇ　、　１５分間遠心分離して残渣を除き、
上滑液を２００−まで減圧濃縮した。この濃縮液に約５
℃でイソプロパツールを終濃度７５％となるように加え
、４℃で一夜放置した。次いで、生成した沈澱をろ過し
て除き、ろ液をセファデックスＧ−２５を使用したゲル
ろ過（カラム５φ×６０ＣＩ１１）にかけ、生理食塩水
で溶出した。溶出液を２０−ずつに分画して２ＢＯｒ＋
ｍにおける吸光度を測定したところ、第１図に示すパタ
ーンと同じ結果が得られた。最初に溶出されたＡ画分を
凍結乾燥することにより血圧降下物質の粗製物２．６ｇ
が得られた。

実施例　１０ 実施、例１で得られたユーグレナ細胞３０ｇを生理食塩
水２．０００−に懸濁したのち、８〜１０℃で１０時間
超音波破砕を行った。次いで、１０，０ＯＯＸ　ｇ、１
５分間遠心分離して残渣を除き、上清液を２００−まで
減圧濃縮した。この濃縮液に約５℃でエタノールを終濃
度７０％となるように加え、４℃で一夜放置した。次い
で、生成した沈澱をろ過して除き、ろ液をセファデック
スＧ−２５を使用したゲルろ過　−（カラム５φＸ６０
ｃｎ）にかけ、蒸留水で溶出した。

溶出液を２０−ずつに分画して２８０ｎｍにおける吸光
度を測定したところ、第１図に示すパターンと同じ結果
が得られた。最初に溶出されたＡ画分を凍結乾燥するこ
とにより、血圧降下物質の粗製物２．５ｇが得られた。

実施例　１１ 実施例１で得られたユーグレナ細胞３０ｇｔ”ｐＨ８，
２のホウ酸緩衝液２，０００−に懸濁したのち、１０〜
１５℃で１０時間超音波破砕を行った。次いで、１（Ｌ
ＯＯＯ×ｇ　１１５分間遠心分離して残渣を除き、上清
液を２００ｗ１まで減圧濃縮した。この濃縮液に約５℃
でエタノールを終濃度７０％となるように加え、４℃で
一夜放置した。次いで、生成した沈澱をろ過して除き、
ろ液をセファデックスＧ−２５を使用したゲルろ過（カ
ラム５φＸ６０Ｑｍ）にかけ、蒸留水で溶出した。゛溶
出液を２０ｄずつに分画して２８０ｒｖにおける吸光度
を測定したところ、第１図に示すパターンと同じ結果が
得られた。最初に熔出されたＡ画分を凍結乾燥すること
により、血圧降下物質の粗製物２．６ｇが得られた。

本発明の血圧°降下物質の急性毒性は、実施例８で得ら
れた物質を５ＨＲ−３Ｐ系ラット１０匹に各々　３００
■／ｋｓｔ／日宛の割合で腹腔内投与し７日間観察した
が、解剖所見等に異常は認められなかった。

【図面の簡単な説明】

第１図はユーグレナ細胞の水性溶媒抽出物のセファデッ
クスを用いたゲルろ過における２ＢＯｎ＋ｓの吸収のパ
ターンを表す図であり、第２図はそのＡ画分をＳＨＲお
よび５ＨＲ−５Ｐに投与したときの血圧の変化を表す図
である。 第３図はユーグレナ細胞の水性溶媒抽出物を限外ろ過し
て得られた両分を５ＨＲ−３Ｐに投与したときの血圧の
変化を表す図である。 第４図はユーグレナ細胞の水性溶媒（ペプシンを含む）
抽出物のセファデックスを用いたゲルろ過における２８
０ｎ請の吸収のパターンを表す図であり、第５図はその
Ａ画分を５ＨＲ−３Ｐに投与したときの血圧の変化を表
す図である。 第６図はユーグレナ細胞の水性溶媒（トリプシンを含む
）抽出物のセファデックスを用いたゲルろ過における２
８０ｎ−の吸収のパターンを表す図であり、第７図はそ
のＡ画分を５ＨＲ−３Ｐに投与したときの血圧の変化を
表す図である。 第８図はユーグレナ細胞の水性溶媒（トリプシンを含む
）抽出物をＤＥＡＥ−セルロースを用いて分画したとき
の２８０ｎｍの吸収のパターンを表す図であり、第９図
はそのＡ、Ｂ、Ｃおよび２画分を５ＨＲ−３Ｐに投与し
たときの血圧の変化を表す図である。 第１０図は第８図に示されるＣ画分を等電点電気泳動で
分画したときの２８Ｏｎ＋＊の吸収のパターンを表す図
であり、第１１図はそのＣ−２画分を５ＨＲ−ｓｐに投
与したときの血圧の変化を表す図である。 特許出願人　天野製薬株式会社 大阪瓦斯株式会社 １ｇ２図 ０　１　２　３ 投与後時間（ｈｒ） 第　３　図 ０　１　２　３０　１　２　３ 投与後時間（ｈｒ） 第　９ 投与後 一時　間　（ｈｒ） 第　１０　図 ワラクシ１ン陽 第１１図 ０　１　２　３ 投与後時間（ｈｒ）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　ユーグレナ細胞の水性溶媒抽出物を有効成分とする
   血圧降下剤。 ２　水性溶媒がｐＨ５〜１０の水、生理食塩水、緩衝液
   、酸またはアルカリの水溶液である特許請求の範囲第１
   項記載の血圧降下剤。 ３　水性溶媒がペプシンを含むｐＨ１〜３の水溶液であ
   る特許請求の範囲第１項記載の血圧降下剤。 ４　水性溶媒がトリプシンを含むｐＨ７〜９の水溶液で
   ある特許請求の範囲第１項記載の血圧降下剤。 ５　抽出温度が５〜１００℃である特許請求の範囲第１
   項または第２項記載の血圧降下剤。 ６　抽出温度が２０〜５０℃である特許請求の範囲第１
   項、第３項または第４項のいずれかに記載の血圧降下剤
   。