JPS60181637A - メタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法 - Google Patents
メタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法Info
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- JPS60181637A JPS60181637A JP59038311A JP3831184A JPS60181637A JP S60181637 A JPS60181637 A JP S60181637A JP 59038311 A JP59038311 A JP 59038311A JP 3831184 A JP3831184 A JP 3831184A JP S60181637 A JPS60181637 A JP S60181637A
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- bacteria
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- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
- C12Q1/06—Quantitative determination
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/30—Fuel from waste, e.g. synthetic alcohol or diesel
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の技術分野〕
この発明は、メタン菌を有する被検体におけるメタン菌
の菌数またはメタン生成活性を測定する方法に関し、特
に下水処理システムのメタン醗酵槽内等における、多数
の微生物群および消化汚泥等の膠物の中に存在するメタ
ン菌の菌数またはメタン生成活性の測定にも適用できる
方法に関する。
の菌数またはメタン生成活性を測定する方法に関し、特
に下水処理システムのメタン醗酵槽内等における、多数
の微生物群および消化汚泥等の膠物の中に存在するメタ
ン菌の菌数またはメタン生成活性の測定にも適用できる
方法に関する。
従来、この種の測定方法としては第１図に示すものがあ
った。図において、（１）は微生物を有する被検体、（
２）は光源、（３）はこの光源（２）に電圧を印加する
電源、（４）は光電子増倍管、（６）はこの光電子増倍
管（４）に電圧を印加する電源、（６）は光電子増倍管
（４）の光電流を測定する検出部である。
った。図において、（１）は微生物を有する被検体、（
２）は光源、（３）はこの光源（２）に電圧を印加する
電源、（４）は光電子増倍管、（６）はこの光電子増倍
管（４）に電圧を印加する電源、（６）は光電子増倍管
（４）の光電流を測定する検出部である。
次に、実際の測定方法について説明する。光源（２）か
ら発する光は微生物を有する被検体（１）を透過して、
この透過光が光電子増倍管（４）により受光され、その
強度が光電子増倍管（４）の光電流値とじて検出部（６
）により測定される。このようにして得られる、可視光
を光源として用いた場合の吸光度と上記被検体（１）に
存在する微生物濃度との間には一定の関係が成り立つた
め、吸光度を測定することにより微生物濃度が評価でき
、その結果あるいはそれに関連して菌数または微生物の
活性が評価できる。
ら発する光は微生物を有する被検体（１）を透過して、
この透過光が光電子増倍管（４）により受光され、その
強度が光電子増倍管（４）の光電流値とじて検出部（６
）により測定される。このようにして得られる、可視光
を光源として用いた場合の吸光度と上記被検体（１）に
存在する微生物濃度との間には一定の関係が成り立つた
め、吸光度を測定することにより微生物濃度が評価でき
、その結果あるいはそれに関連して菌数または微生物の
活性が評価できる。
また、微生物の活性を測定する他の方法として、微生物
に含まれるＡＴ Ｐ（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｔｒｉｐｈ
ｏｓｐ？＋ａｔｅ）あるいはＮＡＤ （Ｐ）Ｈ（Ｎｉｃ
ｏｔｉｎｅａｍｉｄｅ Ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ（ｐ
ｉｌｏｓｐｈａｔｅ） ）というエネルギー代謝に係わ
る生体物質の量を光学的に測定する方法があった。
に含まれるＡＴ Ｐ（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ Ｔｒｉｐｈ
ｏｓｐ？＋ａｔｅ）あるいはＮＡＤ （Ｐ）Ｈ（Ｎｉｃ
ｏｔｉｎｅａｍｉｄｅ Ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ（ｐ
ｉｌｏｓｐｈａｔｅ） ）というエネルギー代謝に係わ
る生体物質の量を光学的に測定する方法があった。
従来の微生物の菌数または活性の測定方法は以上のよう
に被検体（１）の吸光度を測定する方法であるため、被
検体（１）が一種類の微生物により構成され、かつ汚泥
等の異物が含まれていない場合には有効であるが、被検
体（１）が多種類の微生物により構成され、かつ異物が
含まれている場合、その中から測定したい特定種類の微
生物の菌数または活性を選択的に計測することは不可能
であった。
に被検体（１）の吸光度を測定する方法であるため、被
検体（１）が一種類の微生物により構成され、かつ汚泥
等の異物が含まれていない場合には有効であるが、被検
体（１）が多種類の微生物により構成され、かつ異物が
含まれている場合、その中から測定したい特定種類の微
生物の菌数または活性を選択的に計測することは不可能
であった。
またＡ Ｔ ＰやＮＡＤ（Ｐ）Ｈはすべての微生物に存
在する生体物質であるため、メタン菌のみの菌数または
メタン生成活性の測定には不適当である。
在する生体物質であるため、メタン菌のみの菌数または
メタン生成活性の測定には不適当である。
この発明は上記のような従来のものの欠点を除去するた
めになされたもので、メタン菌を有する被検体に波長範
囲８．８０ ｍｍへ４４０聰の励起光を照射する仁とに
より、上記被検体が放射する特定波長範囲の蛍光の強度
を測定して、上記メタン菌の菌数またはメタン生成活性
を計測、あるいは上記被検体に特定波長範囲の励起光を
照射する仁とにより、上記被検体が放射する波長範囲４
５０ａｎ〜４９０Ｉｌｕ１１の蛍光の強度を測定して、
上記メタン菌の菌数またはメタン生成活性を計測しよう
とするもので、特に、メタン醗酵槽内のような消化汚泥
等の異物を含む微生物混合系の中からでも、上記メタン
菌の菌数またはメタン生成活性を計測可能ならしめよう
とするものである。
めになされたもので、メタン菌を有する被検体に波長範
囲８．８０ ｍｍへ４４０聰の励起光を照射する仁とに
より、上記被検体が放射する特定波長範囲の蛍光の強度
を測定して、上記メタン菌の菌数またはメタン生成活性
を計測、あるいは上記被検体に特定波長範囲の励起光を
照射する仁とにより、上記被検体が放射する波長範囲４
５０ａｎ〜４９０Ｉｌｕ１１の蛍光の強度を測定して、
上記メタン菌の菌数またはメタン生成活性を計測しよう
とするもので、特に、メタン醗酵槽内のような消化汚泥
等の異物を含む微生物混合系の中からでも、上記メタン
菌の菌数またはメタン生成活性を計測可能ならしめよう
とするものである。
〔発明の実施例［
以下、この発明の一実施例を図、をもとに説明する。第
２図において、（８）は被検体を有するメタン醗酵槽内
部、（９）はメタン醗酵槽内部（８）へ光を導入および
導出するための光ファイバ、Ｑ→は電源、（ハ）は電源
０→に接線された光源、（２）は光源ａ［有］からの光
の波長を限定する光フィルタ、αηは光源（至）の光強
度を調節するセレクタ、θ０は光源から発する光を光フ
ァイバ（９）に集光する集光器、Ｑ１９は光ファイバ（
９）より発する光を集光する集光器、θＱは受光側の光
の波長を限定する光フィルタ、０７）は光電子増倍管、
（至）は光電子増倍管用電源、θりは光電子増倍管αη
の光電流を測定する検出部である。
２図において、（８）は被検体を有するメタン醗酵槽内
部、（９）はメタン醗酵槽内部（８）へ光を導入および
導出するための光ファイバ、Ｑ→は電源、（ハ）は電源
０→に接線された光源、（２）は光源ａ［有］からの光
の波長を限定する光フィルタ、αηは光源（至）の光強
度を調節するセレクタ、θ０は光源から発する光を光フ
ァイバ（９）に集光する集光器、Ｑ１９は光ファイバ（
９）より発する光を集光する集光器、θＱは受光側の光
の波長を限定する光フィルタ、０７）は光電子増倍管、
（至）は光電子増倍管用電源、θりは光電子増倍管αη
の光電流を測定する検出部である。
次にこの発明の原理および作用について説明する。メタ
ン菌は通常の微生物と異なる生理的性質を持ち、メタン
菌のエネルギー代謝に関与している電子伝達系に関して
はまだその全容は不明であるが、メタン菌に固有なもの
であることが知られている。このメタン菌のエネルギー
代謝系に存在する電子伝達系の中にはＦ４２０という物
質が電子キャリアとして機能していることが知られてお
り、これはメタン菌に固有の物質であり、他の生物系に
は存在していない。そこで、このＦ４２Ｇを中心とする
メタン菌の電子伝達系に関与する物質が、消化汚泥等の
被検出体中のメタン菌以外の微生物群および異物と異な
る特異的かつ計測可能な物理化学的性質を持ち、またそ
れが被検出体中の生菌（生きた状態の菌）の状態で計測
可能なものであるならば、メタン菌の菌数またはメタン
生成活性の測定における計測パラメータとして使用でき
る。
ン菌は通常の微生物と異なる生理的性質を持ち、メタン
菌のエネルギー代謝に関与している電子伝達系に関して
はまだその全容は不明であるが、メタン菌に固有なもの
であることが知られている。このメタン菌のエネルギー
代謝系に存在する電子伝達系の中にはＦ４２０という物
質が電子キャリアとして機能していることが知られてお
り、これはメタン菌に固有の物質であり、他の生物系に
は存在していない。そこで、このＦ４２Ｇを中心とする
メタン菌の電子伝達系に関与する物質が、消化汚泥等の
被検出体中のメタン菌以外の微生物群および異物と異な
る特異的かつ計測可能な物理化学的性質を持ち、またそ
れが被検出体中の生菌（生きた状態の菌）の状態で計測
可能なものであるならば、メタン菌の菌数またはメタン
生成活性の測定における計測パラメータとして使用でき
る。
特に、１７４２０を中心とするメタン菌の電子伝達系に
関与する物質は、その生理的機能においで直接メタン生
成機構と関連しているため、メタン生成活性測定におい
ては有効な計測対象となり得る。
関与する物質は、その生理的機能においで直接メタン生
成機構と関連しているため、メタン生成活性測定におい
ては有効な計測対象となり得る。
上記考察に基づき鋭意研究を行なった結果、メタン菌の
Ｆ４２０に起因すると考えられる蛍光特性が消化汚泥中
のメタン菌以外の微生物および異物に起因する蛍光特性
と生菌状態において異なる挙動をとることが解明された
のでこの発明を創作した。
Ｆ４２０に起因すると考えられる蛍光特性が消化汚泥中
のメタン菌以外の微生物および異物に起因する蛍光特性
と生菌状態において異なる挙動をとることが解明された
のでこの発明を創作した。
第８図に栄養培地（トリプトンｉｏ ｇ ／ ｌｊ ｐ
塩化ナトリウム１０ｇ／１．酵母エキス５ ｇ／（１
）に懸濁した大腸菌の蛍光励起スペクトルおよび蛍光ス
ペクトルを示す。蛍光励起スペクトルは励起波長の変
化に対する波長４７０ｍ＋ｎの蛍光の強度を示したもの
で、蛍光スペクトルは励起波長８８０朧における蛍光ス
ペクトルを示している。生体物質のうちで蛍光を発する
物質としては、トリプトファン、チロシン、およびフェ
ニルアラニン等のアミノ酸が代表的であるが、ここで用
いた被検体試料はこれらの蛍光物質が混在したものであ
り、メタン菌以外の生体試料系のモデルとみなすことが
できる。
塩化ナトリウム１０ｇ／１．酵母エキス５ ｇ／（１
）に懸濁した大腸菌の蛍光励起スペクトルおよび蛍光ス
ペクトルを示す。蛍光励起スペクトルは励起波長の変
化に対する波長４７０ｍ＋ｎの蛍光の強度を示したもの
で、蛍光スペクトルは励起波長８８０朧における蛍光ス
ペクトルを示している。生体物質のうちで蛍光を発する
物質としては、トリプトファン、チロシン、およびフェ
ニルアラニン等のアミノ酸が代表的であるが、ここで用
いた被検体試料はこれらの蛍光物質が混在したものであ
り、メタン菌以外の生体試料系のモデルとみなすことが
できる。
第４図は、最少培地（有機物炭素源を含まない培地）に
懸濁したメタン菌（ここではメタノザルチナバＡｔケ’
） ＣＭｅｔｈａｎｏｓｏ−ｒＯｉｎａ ｂａｒｋｅｒ
ｊ ） ） ノＨ励起スペクトルおよび蛍光スペクトル
を示す。比較のために最少培地に懸濁した大腸菌の蛍光
励起スペクトルおよび蛍光スペクトルも示す。ただし、
メタン菌の蛍光励起スペクトルは励起波長の変化に対す
る波長４７０胴の蛍光の強度を示したもので、蛍光スペ
クトルは励起波長４００．における蛍光スペクトルを示
している。また、大腸菌の蛍光励起スペクトルは励起波
長の変化に対する波長４７０１ＩＩ１１の蛍光の強度を
示したもので、蛍光スペクトルは励起波長４００祁にお
ける蛍光スペクトルを示している。ここでは最少培地を
用いているため、第４図に示す蛍光特性は微生物体にの
み由来し、メタン菌の蛍光特性は大腸菌の蛍光特性と大
きく異なる挙動をとることがわかる。また、第８図と比
較することにより、メタン菌の蛍光特性はメタン菌以外
の微生物および異物のモデル試料の蛍光特性とは異なる
挙動をとることがわかる。
懸濁したメタン菌（ここではメタノザルチナバＡｔケ’
） ＣＭｅｔｈａｎｏｓｏ−ｒＯｉｎａ ｂａｒｋｅｒ
ｊ ） ） ノＨ励起スペクトルおよび蛍光スペクトル
を示す。比較のために最少培地に懸濁した大腸菌の蛍光
励起スペクトルおよび蛍光スペクトルも示す。ただし、
メタン菌の蛍光励起スペクトルは励起波長の変化に対す
る波長４７０胴の蛍光の強度を示したもので、蛍光スペ
クトルは励起波長４００．における蛍光スペクトルを示
している。また、大腸菌の蛍光励起スペクトルは励起波
長の変化に対する波長４７０１ＩＩ１１の蛍光の強度を
示したもので、蛍光スペクトルは励起波長４００祁にお
ける蛍光スペクトルを示している。ここでは最少培地を
用いているため、第４図に示す蛍光特性は微生物体にの
み由来し、メタン菌の蛍光特性は大腸菌の蛍光特性と大
きく異なる挙動をとることがわかる。また、第８図と比
較することにより、メタン菌の蛍光特性はメタン菌以外
の微生物および異物のモデル試料の蛍光特性とは異なる
挙動をとることがわかる。
第６図にメタン醗酵槽から採取した消化汚泥の蛍光励起
スペクトルおよび蛍光スペクトルを示す。
スペクトルおよび蛍光スペクトルを示す。
ただし、蛍光励起スペクトルは励起波長の変化に対する
波長４７０ ｉｕｎの蛍光の強度、を示し、蛍光スペク
トルは励起波長４２０馴における蛍光スペクトルを示し
ている。第４図と第５図を比較すると８８０刷〜４４０
胴の波長範囲の励起スペクトル及び４５０ＩＤＩ１１〜
４９０＋ａｍの波長範囲の蛍光スペクトルにおいて良く
一致した挙動を示し、上記波長範囲における消化汚泥の
蛍光特性はメタン菌に起因していることがある。
波長４７０ ｉｕｎの蛍光の強度、を示し、蛍光スペク
トルは励起波長４２０馴における蛍光スペクトルを示し
ている。第４図と第５図を比較すると８８０刷〜４４０
胴の波長範囲の励起スペクトル及び４５０ＩＤＩ１１〜
４９０＋ａｍの波長範囲の蛍光スペクトルにおいて良く
一致した挙動を示し、上記波長範囲における消化汚泥の
蛍光特性はメタン菌に起因していることがある。
第６図に栄養培地中のメタン菌および大腸菌の各ＰＨに
おける蛍光励起スペクトルを示す。ただし、励起波長の
変化に対する波長４７０■の蛍光の強度を示している。
おける蛍光励起スペクトルを示す。ただし、励起波長の
変化に対する波長４７０■の蛍光の強度を示している。
図より、大腸菌ではＰＨ７からＰＨＩＩの範囲で励起ス
ペクトルはほとんど変化しないが、メタン菌では蛍光励
起ピーク波長および強度がＰＨにより変化し、ＰＨ７に
対しＰ Ｈ１１ではピーク波長が長波長側に約２０ｍｍ
シフトし、ピーク強度も約８倍に増大している。このよ
うに、水酸化ナトリウムや水酸化カリウムや水酸化アン
モニウムなどの塩基性溶液や塩基性固体を添加すること
により被検体をＰＨ７〜ＰＨ１４の範囲でアルカリ性に
し、メタン菌に由来する蛍光強度信号の信号強度を高め
、かつ蛍光励起波長域を０〜８゜閣の範囲で長波長側に
シフトせしめ、メタン菌以外の成分に由来するバックグ
ラウンド蛍光に対するＳｌＮ比を高めることが可能であ
る。特に、第４図〜第６図から明らかなように、励起光
として波長範囲４１０ｍｍ〜４８０閣の光を、蛍光とし
て波長範囲４６０〜４８０１１Ｌ１１の光を用いると、
励起および蛍光スペクトルのピーク近傍で測定すること
力５できる。
ペクトルはほとんど変化しないが、メタン菌では蛍光励
起ピーク波長および強度がＰＨにより変化し、ＰＨ７に
対しＰ Ｈ１１ではピーク波長が長波長側に約２０ｍｍ
シフトし、ピーク強度も約８倍に増大している。このよ
うに、水酸化ナトリウムや水酸化カリウムや水酸化アン
モニウムなどの塩基性溶液や塩基性固体を添加すること
により被検体をＰＨ７〜ＰＨ１４の範囲でアルカリ性に
し、メタン菌に由来する蛍光強度信号の信号強度を高め
、かつ蛍光励起波長域を０〜８゜閣の範囲で長波長側に
シフトせしめ、メタン菌以外の成分に由来するバックグ
ラウンド蛍光に対するＳｌＮ比を高めることが可能であ
る。特に、第４図〜第６図から明らかなように、励起光
として波長範囲４１０ｍｍ〜４８０閣の光を、蛍光とし
て波長範囲４６０〜４８０１１Ｌ１１の光を用いると、
励起および蛍光スペクトルのピーク近傍で測定すること
力５できる。
また、被検体中の固体および液体成分のうち液体成分を
、遠心操作またはろ過操作などを用０て、励起波長範囲
で測定波長範囲の蛍光を発しな０溶液、例えば水などで
置換する、あるいは被検体を励起波長範囲で測定波長範
囲の蛍光を発しない溶液、例えば水などで希釈すること
によっても、メタン菌に由来する蛍光強度信号のＳ／Ｎ
比を高めることができる。さらにこの時、励起波長範囲
で測定波長範囲の蛍光を発しない溶液として例えば水酸
化ナトリウムや水酸化カリウムなどの塩基性溶液を用い
れば、上記のアルカリ性による効果も加わる。
、遠心操作またはろ過操作などを用０て、励起波長範囲
で測定波長範囲の蛍光を発しな０溶液、例えば水などで
置換する、あるいは被検体を励起波長範囲で測定波長範
囲の蛍光を発しない溶液、例えば水などで希釈すること
によっても、メタン菌に由来する蛍光強度信号のＳ／Ｎ
比を高めることができる。さらにこの時、励起波長範囲
で測定波長範囲の蛍光を発しない溶液として例えば水酸
化ナトリウムや水酸化カリウムなどの塩基性溶液を用い
れば、上記のアルカリ性による効果も加わる。
以上の研究結果より、メタン醗酵槽内などにおける多数
の微生物群および消化汚泥などの異物の中に存在するメ
タン菌の菌数またはメタン生成活性を測定するには、以
下の方法によればよいことがわかった。
の微生物群および消化汚泥などの異物の中に存在するメ
タン菌の菌数またはメタン生成活性を測定するには、以
下の方法によればよいことがわかった。
（１）蛍光励起光として波長範囲８８０ ｉｎｎ〜４４
０ＩＩＩＩ１１の光を用い、その励起スペクトル強度と
メタン菌の菌数またはメタン生成活性との相関により、
メタン菌の菌数またはメタン生成活性を同定する。
０ＩＩＩＩ１１の光を用い、その励起スペクトル強度と
メタン菌の菌数またはメタン生成活性との相関により、
メタン菌の菌数またはメタン生成活性を同定する。
（２）蛍光として波長範囲４５０胴〜４９０ ｍｒｎの
光を用い、蛍光スペクトル強度とメタン菌の菌数または
メタン生成活性との相関により、メタン菌の菌数または
メタン生成活性を同定する。
光を用い、蛍光スペクトル強度とメタン菌の菌数または
メタン生成活性との相関により、メタン菌の菌数または
メタン生成活性を同定する。
（３） メタン菌以外の成分に由来するバックグラウン
ド蛍光に対するメタン菌に由来する蛍光のＳ／Ｎ比を高
める方法として次の８つの方法を用いる。
ド蛍光に対するメタン菌に由来する蛍光のＳ／Ｎ比を高
める方法として次の８つの方法を用いる。
イ）被検体をアルカリ性にする
口）被検体の液体成分を他の溶液で置換するハ）被検体
を季釈する 蛍光励起スペクトルおよび蛍光スペクトル強度と菌数ま
たはメタン生成活性との相関は、Ｍ、パルケリ（Ｍｅ
ｂａｒｋｅｒｉ ）等の消化汚泥から単離されたメタン
菌を標準試料としてめることができる。
を季釈する 蛍光励起スペクトルおよび蛍光スペクトル強度と菌数ま
たはメタン生成活性との相関は、Ｍ、パルケリ（Ｍｅ
ｂａｒｋｅｒｉ ）等の消化汚泥から単離されたメタン
菌を標準試料としてめることができる。
その−例として、第７図、第８図にそれぞれ菌数と励起
スペクトル強度およびメタン発生量と励起スペクトル強
度との相関を示す。
スペクトル強度およびメタン発生量と励起スペクトル強
度との相関を示す。
この測定方法によると、メタン醗酵槽の運転時に、実時
間でメタン菌の菌数またはメタン生成活性を測定するこ
とも可能であるので、メタン醗酵槽の運転制御に大きな
効果が期待できる。
間でメタン菌の菌数またはメタン生成活性を測定するこ
とも可能であるので、メタン醗酵槽の運転制御に大きな
効果が期待できる。
なお、第２図は次のように構成すると便利である。すな
わち、システムコントローラを備え、検出部０呻や光フ
ィルタ（２）、０１等に配線すると蛍光励起強度または
光電子増倍管αηζこ対する印加電圧を光電子増倍管α
力に導入される光強度に応じて変化せしめ、光電子増倍
ＷＯｆｔに流れる光電流値をその光電子増倍管αηに適
した範囲内に保つと共に、各蛍光励起強度または各印加
電圧に対する光電流値を一定蛍光励起強度才たは一定印
加電圧に対する光電流値に換算するという動作を、シス
テムコントローラにより自動的に行なえる。
わち、システムコントローラを備え、検出部０呻や光フ
ィルタ（２）、０１等に配線すると蛍光励起強度または
光電子増倍管αηζこ対する印加電圧を光電子増倍管α
力に導入される光強度に応じて変化せしめ、光電子増倍
ＷＯｆｔに流れる光電流値をその光電子増倍管αηに適
した範囲内に保つと共に、各蛍光励起強度または各印加
電圧に対する光電流値を一定蛍光励起強度才たは一定印
加電圧に対する光電流値に換算するという動作を、シス
テムコントローラにより自動的に行なえる。
また、上記実施例ではメタン醗酵槽内部（８）へ直接光
ファイバ（９）を導入して測定する方法について説明し
たが、メタン醗酵槽から被検体を採取してメタン醗酵槽
外部で測定することも可能であり、被検体をアルカリ処
理や希釈、あるいは被検体の液体成分を他の溶液で置換
する場合には、被検体を採取した方が処理しやすい。
ファイバ（９）を導入して測定する方法について説明し
たが、メタン醗酵槽から被検体を採取してメタン醗酵槽
外部で測定することも可能であり、被検体をアルカリ処
理や希釈、あるいは被検体の液体成分を他の溶液で置換
する場合には、被検体を採取した方が処理しやすい。
また、固定化担体にメタン菌が固定化されている場合に
は、光ファイバ（９）により固定化メタン菌の位置で測
定することも可能である。
は、光ファイバ（９）により固定化メタン菌の位置で測
定することも可能である。
なお、上口説明では主に、メタン醗酵槽内における多数
の微生物群および消化汚泥等の異物の中に存在するメタ
ン菌の菌数またはメタン生成活性の測定について述べた
が、被検体はこれに限られるものではない。
の微生物群および消化汚泥等の異物の中に存在するメタ
ン菌の菌数またはメタン生成活性の測定について述べた
が、被検体はこれに限られるものではない。
以上のように、この発明によれば、メタン菌を有する被
検体に波長範囲８８０Ｍ〜４４０ ｘｍの励起光を照射
することにより、上記被検体が放射する特定波長範囲の
蛍光の強度を測定することにより、上記メタン菌の菌数
またはメタン生成活性を計測することが可能となり、特
にメタン醗酵槽内のような消化汚泥などの異物を含む微
生物混合系の中からでも、上記メタン菌の菌数またはメ
タン生成活性の測定が可能となる効果がある。
検体に波長範囲８８０Ｍ〜４４０ ｘｍの励起光を照射
することにより、上記被検体が放射する特定波長範囲の
蛍光の強度を測定することにより、上記メタン菌の菌数
またはメタン生成活性を計測することが可能となり、特
にメタン醗酵槽内のような消化汚泥などの異物を含む微
生物混合系の中からでも、上記メタン菌の菌数またはメ
タン生成活性の測定が可能となる効果がある。
また、上記被検体に特定波長範囲の励起光を照射するこ
とにより、上記被検体が放射する波長範囲４６０肛〜４
９０ｍｍの蛍光の強度を測定しても、上記同様の効果が
得られる。
とにより、上記被検体が放射する波長範囲４６０肛〜４
９０ｍｍの蛍光の強度を測定しても、上記同様の効果が
得られる。
また、上記被検体をアルカリ性にすれば、測定感度が向
上する。
上する。
第１図は従来の微生物数測定方法を説明するブロック図
、第２図はこの発明の一実施例によるメタン菌の菌数ま
たはメタン生成活性の測定方法を説明するブロック図、
第８図は消化汚泥のうちのメタン菌以外の成分モデルの
蛍光特性を示す特性図、第４図はメタン菌の蛍光特性を
示す特〜性図、第５図は、メタン菌を含む消化汚泥の蛍
光特性を示す特性図、第６図はメタン菌および大腸菌の
蛍光特性のＰＨによる変ｆしを示す特性図、第７図、第
８図はそれぞれメタン菌数と蛍光励起スペクトル強度お
よびメタン発生量と蛍光励起スペクトル強度との相関を
示す特性図である。 図において、（す、（８）は被検体、（２）、（１３は
光源、（３） ｊ （５） ？ （Ｊ４ ＃（ト）は電
源、（４） 、 ０７） ｌ産児電子増倍管、（ａ）
、 ０９ ハ検出部、（９）ハ光ファイバ、（１１，（
ｌｆｅｉ、を集光器１αυはセレクタ、に）ｅ ００は
光フィルタである。 なお、図中同一符号は同一または相当部分を示すものと
する。 代理人 大岩増雄 第１図 １ （ ） 第６図 戴長（ｎ？７７） 第７図 第８１ｍ 手 続 補 正 占（自発） ２、発明の名称 メタン菌の菌数またはメタン生成 代表古片由仁へ部 １、代理人 ５、補正の対象 明細書の特許請求の範囲および発明の詳細な説明の欄 ６、補正の内容 （１）明細書の特許請求の範囲を別紙のとおり訂正する
。 （２）明細書第４頁第１０行の’ Ｎｉｃｏｔｉｎｅａ
ｍｉｄｅ Ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ 、／／ ’Ｎｉ
’ｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ Ａｄｅｎｉｎｅ Ｄｉｎｕｃ
ｌｅｏｔｉｄｅ。 に訂正する。 （３〕同第１０頁第１行の１とがある。、を１とがわか
る。、に訂正する。 （４）同第５頁第７行、第９頁第１６行〜１７行、第１
２頁第１行、および第１４頁第１５行の’ ８８０ ｍ
ｍ −４４０ｒｒＩＩｎ Ｊ をそｎぞれ８８０ ｎｍ
〜４４０ ｎｍＪに訂正する。 （５）同第５頁第１２行〜１３行、第９頁第１７行〜１
８行、第１２頁第６行、および第１５頁第５行の’ ４
５０ ｒｒｒｎ〜４９０１ＴＩＴＩＪをそ釘ぞｆＬ ’
４５０１ｍ −４９０ｎｍ、に訂正する。 （６）同第８頁第８行、第１８行、第９頁第１行、第１
４行、および第１０頁第４行の’ ４７０ ｍｎ Ｊ’
／そ第１ぞれ’ ４７０ ｎｍＪ に訂正する。 （７）同第８頁第４行の’ ３８０ ｎηＩＪを「３８
ｏ曲〕ヨに訂正する。 （８）同第８頁第１９行および第９頁第８行の’ ４０
０ｒｌｌｒｌｌｕをそれぞｆｌ ’ ４００ ｎｍ、に
訂正する。 （９）同第９頁第１５行の’ ４２０ ｍｍＪを’ ４
２０ ｎｍ Ｊに訂正する。 ａｎ同第１０頁第１５行〜１６行の’ ０−８０ ｍｍ
Ｊ を「０〜８０ｎｍ、Ｊ に訂正する。 ０１）同第１０頁第２０行の’ ４１０ ｍｍ −４８
０ｍｍＪを’ ４１０ ｎｍ −４８０ｍｎ 、 ニ訂
正スル。 （２）同第１１頁テ１行の’ ４６０ ｍｍ−４８０ｍ
ｍヨを’ ４６０ ｎｍ −４８０ｎｍＪ番ζ訂正する
０、７、 添付書類の目録 補正後の特許請求の範囲ｆｐ記載した書面 １通以 上 特許請求の範囲 （１）メタン菌を有する被検体に波長範囲８８０ ｎｍ
−４４０ｎ１ＴＩ の励起光を照射することにより、上
記被検体が放射する特定波長範囲の蛍光の強度を測定し
て、上記メタン菌の菌数またはメタン生成活性を得るよ
う番てしたメタン菌の菌数またはメ々ン生成活１ｊの７
１ｔ！ｌ定方法。 （２）被検体をアルカリ性番ζすることを特徴とする特
許請求の範囲第１項記載のメタン菌の菌数またはメタン
生成活性の測定方法。 （３）被検体の液体５９分を励起波長範囲で測定波長範
囲の蛍光を発しない溶液で置換することを特徴とする特
許請求の範囲第１項まｔ：は第２項記載のメタン菌の菌
数またけメタン生成活性の測定方法。 （４）被検体を・励起波長範囲で測定波長範囲の蛍光を
発しない溶液で希釈することを特徴とする特許請求の範
囲第１項才たけ第２項Ｆ載のメタン菌の菌数またけメタ
ン生成活性の測定方法。 （５）メタン菌を有する被検体に特定波長範囲の励起光
を照射することにより、上＊ｉ′Ｉ被検体が放射する波
長範囲４５０ ｎｍ−４９０ｎｍの蛍光の強度を測定し
て、土肥メタン菌の菌数またはメタン生成活性を得るよ
うにしたメタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方
法。 （６）□被検体をアルカリ性にすることを特徴とする特
許請求の範囲第５項記載のメタン菌の菌数才たけメタン
生成活性の測定方法。 （７）被検体の液体酸、分を励起波長範囲で測定波長範
囲の蛍光を発しない溶液で置換すること５−特徴とする
特許請求の範囲第５項才たけ第６項Ｆｉｔ、’載のメタ
ン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法。 （８）被検体を励起波長範囲で測定波長範囲の蛍光を発
しｊ（い溶液で希釈すること／／特徴とする特許請求の
範ｌＴ１１第５項または第６項記載のメタン菌の菌数ま
たはメタン生成活性の測定方法。
、第２図はこの発明の一実施例によるメタン菌の菌数ま
たはメタン生成活性の測定方法を説明するブロック図、
第８図は消化汚泥のうちのメタン菌以外の成分モデルの
蛍光特性を示す特性図、第４図はメタン菌の蛍光特性を
示す特〜性図、第５図は、メタン菌を含む消化汚泥の蛍
光特性を示す特性図、第６図はメタン菌および大腸菌の
蛍光特性のＰＨによる変ｆしを示す特性図、第７図、第
８図はそれぞれメタン菌数と蛍光励起スペクトル強度お
よびメタン発生量と蛍光励起スペクトル強度との相関を
示す特性図である。 図において、（す、（８）は被検体、（２）、（１３は
光源、（３） ｊ （５） ？ （Ｊ４ ＃（ト）は電
源、（４） 、 ０７） ｌ産児電子増倍管、（ａ）
、 ０９ ハ検出部、（９）ハ光ファイバ、（１１，（
ｌｆｅｉ、を集光器１αυはセレクタ、に）ｅ ００は
光フィルタである。 なお、図中同一符号は同一または相当部分を示すものと
する。 代理人 大岩増雄 第１図 １ （ ） 第６図 戴長（ｎ？７７） 第７図 第８１ｍ 手 続 補 正 占（自発） ２、発明の名称 メタン菌の菌数またはメタン生成 代表古片由仁へ部 １、代理人 ５、補正の対象 明細書の特許請求の範囲および発明の詳細な説明の欄 ６、補正の内容 （１）明細書の特許請求の範囲を別紙のとおり訂正する
。 （２）明細書第４頁第１０行の’ Ｎｉｃｏｔｉｎｅａ
ｍｉｄｅ Ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ 、／／ ’Ｎｉ
’ｃｏｔｉｎａｍｉｄｅ Ａｄｅｎｉｎｅ Ｄｉｎｕｃ
ｌｅｏｔｉｄｅ。 に訂正する。 （３〕同第１０頁第１行の１とがある。、を１とがわか
る。、に訂正する。 （４）同第５頁第７行、第９頁第１６行〜１７行、第１
２頁第１行、および第１４頁第１５行の’ ８８０ ｍ
ｍ −４４０ｒｒＩＩｎ Ｊ をそｎぞれ８８０ ｎｍ
〜４４０ ｎｍＪに訂正する。 （５）同第５頁第１２行〜１３行、第９頁第１７行〜１
８行、第１２頁第６行、および第１５頁第５行の’ ４
５０ ｒｒｒｎ〜４９０１ＴＩＴＩＪをそ釘ぞｆＬ ’
４５０１ｍ −４９０ｎｍ、に訂正する。 （６）同第８頁第８行、第１８行、第９頁第１行、第１
４行、および第１０頁第４行の’ ４７０ ｍｎ Ｊ’
／そ第１ぞれ’ ４７０ ｎｍＪ に訂正する。 （７）同第８頁第４行の’ ３８０ ｎηＩＪを「３８
ｏ曲〕ヨに訂正する。 （８）同第８頁第１９行および第９頁第８行の’ ４０
０ｒｌｌｒｌｌｕをそれぞｆｌ ’ ４００ ｎｍ、に
訂正する。 （９）同第９頁第１５行の’ ４２０ ｍｍＪを’ ４
２０ ｎｍ Ｊに訂正する。 ａｎ同第１０頁第１５行〜１６行の’ ０−８０ ｍｍ
Ｊ を「０〜８０ｎｍ、Ｊ に訂正する。 ０１）同第１０頁第２０行の’ ４１０ ｍｍ −４８
０ｍｍＪを’ ４１０ ｎｍ −４８０ｍｎ 、 ニ訂
正スル。 （２）同第１１頁テ１行の’ ４６０ ｍｍ−４８０ｍ
ｍヨを’ ４６０ ｎｍ −４８０ｎｍＪ番ζ訂正する
０、７、 添付書類の目録 補正後の特許請求の範囲ｆｐ記載した書面 １通以 上 特許請求の範囲 （１）メタン菌を有する被検体に波長範囲８８０ ｎｍ
−４４０ｎ１ＴＩ の励起光を照射することにより、上
記被検体が放射する特定波長範囲の蛍光の強度を測定し
て、上記メタン菌の菌数またはメタン生成活性を得るよ
う番てしたメタン菌の菌数またはメ々ン生成活１ｊの７
１ｔ！ｌ定方法。 （２）被検体をアルカリ性番ζすることを特徴とする特
許請求の範囲第１項記載のメタン菌の菌数またはメタン
生成活性の測定方法。 （３）被検体の液体５９分を励起波長範囲で測定波長範
囲の蛍光を発しない溶液で置換することを特徴とする特
許請求の範囲第１項まｔ：は第２項記載のメタン菌の菌
数またけメタン生成活性の測定方法。 （４）被検体を・励起波長範囲で測定波長範囲の蛍光を
発しない溶液で希釈することを特徴とする特許請求の範
囲第１項才たけ第２項Ｆ載のメタン菌の菌数またけメタ
ン生成活性の測定方法。 （５）メタン菌を有する被検体に特定波長範囲の励起光
を照射することにより、上＊ｉ′Ｉ被検体が放射する波
長範囲４５０ ｎｍ−４９０ｎｍの蛍光の強度を測定し
て、土肥メタン菌の菌数またはメタン生成活性を得るよ
うにしたメタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方
法。 （６）□被検体をアルカリ性にすることを特徴とする特
許請求の範囲第５項記載のメタン菌の菌数才たけメタン
生成活性の測定方法。 （７）被検体の液体酸、分を励起波長範囲で測定波長範
囲の蛍光を発しない溶液で置換すること５−特徴とする
特許請求の範囲第５項才たけ第６項Ｆｉｔ、’載のメタ
ン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法。 （８）被検体を励起波長範囲で測定波長範囲の蛍光を発
しｊ（い溶液で希釈すること／／特徴とする特許請求の
範ｌＴ１１第５項または第６項記載のメタン菌の菌数ま
たはメタン生成活性の測定方法。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 （１） メタン菌を有する被検体に波長範囲８８０胴〜
４４０＋ｎｍの励起光を照射することにより、上記被検
体が放射する特定波長範囲の蛍光の強度を測定して、上
記メタン菌の菌数またはメタン生成活性を得るようにし
たメタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法。 （２）被検体をアルカリ性にすることを特徴とする特許
請求の範囲第１項記載のメタン菌の菌数またはメタン生
成活性の測定方法。 （３）被検体の液体成分を励起波長範囲で測定波長範囲
の蛍光を発しない溶液で置換することを特徴とする特許
請求の範囲第１項または第２項記載のメタン菌の菌数ま
たはメタン生成活性の測定方法。 ／Ａ１ 油餘Ｉ′ｋ ん旨釦辿ｊＬ伽村囲ヤ追ｆ１空辿
、巳伽に囲の射光を発しない溶液で希釈することを特徴
とする特許請求の範囲第１項または第２項記載のメタン
菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法。 （５） メタン菌を有する被検体に特定波長範囲の励起
光を照射することにより、上記被検体が放射する波長範
囲４５０Ｉ〜４９０ｍｍの蛍光の強度を測定して、上記
メタン菌の菌数またはメタン生成活性を得るようにした
メタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法。 （０） 被検体をアルカリ性にすることを特徴とする特
許請求の範囲第６項記載のメタン菌の菌数またはメタン
生成活性の測定方法。 （７） 被検体の液体成分を励起波長範囲で測定波長範
囲の蛍光を発しない溶液で置換することを特徴とする特
許請求の範囲第５項または第６項記載のメタン菌の菌数
またはメタン生成活性の測定方法・・ （８）被検体を励起波長範囲で測定波長範囲の蛍光を発
しない溶液で希釈することを特徴とする特許請求の範囲
第６項または第６項記載のメタン菌の菌数またはメタン
生成活性の測定方法。
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59038311A JPS60181637A (ja) | 1984-02-28 | 1984-02-28 | メタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法 |
| DE19843490229 DE3490229T1 (de) | 1983-05-09 | 1984-05-07 | Verfahren zum Messen der Zellenzahl oder methanerzeugender Aktivität von Methanogenen |
| US06/694,384 US4686372A (en) | 1983-05-09 | 1984-05-07 | Method and apparatus for measuring cell counts of Methanogens or methane producing activity thereof |
| PCT/JP1984/000230 WO1984004544A1 (en) | 1983-05-09 | 1984-05-07 | Method for measuring the number or methane-producing activity of methane bacteria |
| FR858502843A FR2560214B1 (fr) | 1984-02-28 | 1985-02-27 | Procede de mesure du nombre de cellules de methanogenes ou de leur activite de production de methane |
| GB08505078A GB2155631B (en) | 1984-02-28 | 1985-02-27 | Measurements on methane-producing organisms |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59038311A JPS60181637A (ja) | 1984-02-28 | 1984-02-28 | メタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60181637A true JPS60181637A (ja) | 1985-09-17 |
| JPH0440654B2 JPH0440654B2 (ja) | 1992-07-03 |
Family
ID=12521747
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59038311A Granted JPS60181637A (ja) | 1983-05-09 | 1984-02-28 | メタン菌の菌数またはメタン生成活性の測定方法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60181637A (ja) |
| FR (1) | FR2560214B1 (ja) |
| GB (1) | GB2155631B (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60220199A (ja) * | 1984-04-13 | 1985-11-02 | Sumitomo Heavy Ind Ltd | メタン発酵処理方法 |
| JPH03127697A (ja) * | 1989-10-09 | 1991-05-30 | Shimizu Corp | 嫌気性発酵による廃水処理制御方法及び装置 |
| JP2008246359A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-10-16 | Kubota Corp | 有機性廃棄物の処理方法および装置 |
| CN103102056A (zh) * | 2013-03-13 | 2013-05-15 | 南京盟博环保科技有限公司 | 一种用于污泥减水减量的设备 |
| CN103364382A (zh) * | 2013-07-12 | 2013-10-23 | 大连海事大学 | 一种船舶生活污水检测装置 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3811098A1 (de) * | 1988-03-31 | 1989-10-12 | Orpegen Med Molekularbioforsch | Verfahren zur quantifizierung von methangas-bakterien |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3566114A (en) * | 1968-04-25 | 1971-02-23 | Aubrey K Brewer | Method and means for detection of microorganisms in the atmosphere |
| US3916197A (en) * | 1973-11-28 | 1975-10-28 | Particle Technology Inc | Method and apparatus for classifying biological cells |
| US4283490A (en) * | 1978-07-28 | 1981-08-11 | Plakas Chris J | Method for detection of low level bacterial concentration by luminescence |
-
1984
- 1984-02-28 JP JP59038311A patent/JPS60181637A/ja active Granted
-
1985
- 1985-02-27 GB GB08505078A patent/GB2155631B/en not_active Expired
- 1985-02-27 FR FR858502843A patent/FR2560214B1/fr not_active Expired
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| BIOGAS-METHANGARUNG ORGANISCHER ABFALLSTOFFE=1982 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60220199A (ja) * | 1984-04-13 | 1985-11-02 | Sumitomo Heavy Ind Ltd | メタン発酵処理方法 |
| JPH03127697A (ja) * | 1989-10-09 | 1991-05-30 | Shimizu Corp | 嫌気性発酵による廃水処理制御方法及び装置 |
| JP2008246359A (ja) * | 2007-03-30 | 2008-10-16 | Kubota Corp | 有機性廃棄物の処理方法および装置 |
| CN103102056A (zh) * | 2013-03-13 | 2013-05-15 | 南京盟博环保科技有限公司 | 一种用于污泥减水减量的设备 |
| CN103364382A (zh) * | 2013-07-12 | 2013-10-23 | 大连海事大学 | 一种船舶生活污水检测装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2155631B (en) | 1988-01-06 |
| GB8505078D0 (en) | 1985-03-27 |
| GB2155631A (en) | 1985-09-25 |
| JPH0440654B2 (ja) | 1992-07-03 |
| FR2560214B1 (fr) | 1989-09-29 |
| FR2560214A1 (fr) | 1985-08-30 |
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