JPS5951349A - 胆汁酸の定量法 - Google Patents
胆汁酸の定量法Info
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- JPS5951349A JPS5951349A JP16280082A JP16280082A JPS5951349A JP S5951349 A JPS5951349 A JP S5951349A JP 16280082 A JP16280082 A JP 16280082A JP 16280082 A JP16280082 A JP 16280082A JP S5951349 A JPS5951349 A JP S5951349A
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- bile
- bile acid
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- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
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- Pathology (AREA)
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- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明性胆汁酸の定量法に関する。
従来、肝機能の検査の一つとして血液中に微量に含まれ
る胆汁酸の定量が行なわれる。
る胆汁酸の定量が行なわれる。
血液中には、胆汁酸としてコール酸、デオキシコール酸
、ケノデオキシコール酸、クルソデオキシコール酸、リ
トコール酸が夫々遊離体、グリシリ抱合体、タウリン抱
合体の形で含まれておシ、これらの１５１１類の各胆汁
酸を分離定量することが、肝胆道系疾患の病態解析並び
に鑑別診断に有用である。
、ケノデオキシコール酸、クルソデオキシコール酸、リ
トコール酸が夫々遊離体、グリシリ抱合体、タウリン抱
合体の形で含まれておシ、これらの１５１１類の各胆汁
酸を分離定量することが、肝胆道系疾患の病態解析並び
に鑑別診断に有用である。
このため従来、高速液体クロマトグラ７イーを用いて分
離カラム内に溶離液と混金された愈清等の生体試料を注
入して胆汁酸を分離し、次いでニブチン酸アミドアデニ
ンジヌクレオチド（以下ＮＡＤ＋と略す）を加え九反応
液を供給し、酵素３α−ヒドルステ党イドデヒドロゲナ
ーゼ（以下３α−ＨＳＤと略す）が固定された担体が完
膚された固定化酵素力ラムに通して、分離された胆汁酸
とＮＡＤ＋とを反応させ、螢光物質を生成させて螢光検
出器によシ検出し、得られた結果に基づいて生体試料中
の１５種類の各胆汁酸の定量を行っている。
離カラム内に溶離液と混金された愈清等の生体試料を注
入して胆汁酸を分離し、次いでニブチン酸アミドアデニ
ンジヌクレオチド（以下ＮＡＤ＋と略す）を加え九反応
液を供給し、酵素３α−ヒドルステ党イドデヒドロゲナ
ーゼ（以下３α−ＨＳＤと略す）が固定された担体が完
膚された固定化酵素力ラムに通して、分離された胆汁酸
とＮＡＤ＋とを反応させ、螢光物質を生成させて螢光検
出器によシ検出し、得られた結果に基づいて生体試料中
の１５種類の各胆汁酸の定量を行っている。
しかしながら生体試料は液体クロマトグラフィーにかけ
る前に分離阻害物質を除去する目的で前処理操作にかけ
られるので、この際に試料中の胆汁酸が損失を受けるお
それがあシ、検出結果に影響を及ぼすので、既知の第３
成分を内部標準物質として加えておくことが行なわれて
いる。
る前に分離阻害物質を除去する目的で前処理操作にかけ
られるので、この際に試料中の胆汁酸が損失を受けるお
それがあシ、検出結果に影響を及ぼすので、既知の第３
成分を内部標準物質として加えておくことが行なわれて
いる。
か＼る内部標準物質として従来はプレグナントリオール
が使用されてき友。しかしながらプレグナントリオール
は分離用カラムでの保持時間が全ての胆汁酸よシ長時間
で分析に時間を要し、又検出時のピークも幅が広くなシ
、これを基準ピークとした場合に誤差が大きくなる欠点
があった。
が使用されてき友。しかしながらプレグナントリオール
は分離用カラムでの保持時間が全ての胆汁酸よシ長時間
で分析に時間を要し、又検出時のピークも幅が広くなシ
、これを基準ピークとした場合に誤差が大きくなる欠点
があった。
本発明はか＼る欠点を解消することを目的としてなされ
たものでアシ、内部標準物質としてすべての胆汁酸よシ
も短かい保持時間を有するが。
たものでアシ、内部標準物質としてすべての胆汁酸よシ
も短かい保持時間を有するが。
溶媒その他の混在物よシは遅く溶出される性質を有し、
又検出に当って鋭いピークを現出しうるものを見出すこ
とにな夛完成した発明であシ、短時間での胆汁酸の定量
が可能でしかも誤差の少ない、胆汁酸の定量法を提供す
るものである。
又検出に当って鋭いピークを現出しうるものを見出すこ
とにな夛完成した発明であシ、短時間での胆汁酸の定量
が可能でしかも誤差の少ない、胆汁酸の定量法を提供す
るものである。
本発明の要旨は、液体クロマドグ９フイーによって生体
試料中の胆汁酸を分離し、固定化酵素を入れたカラムに
導入し、カラム内で固定化酵素と接触させて胆汁酸とこ
れと反応しうる物質との反応を生じさせ、反応生成物を
検出器で測定することによシ胆汁酸を定量する方法にお
いて、内部標準物質としてコール酸又はウルソデオキシ
コール酸の酸性アミノ酸抱合体を用いることを特徴とす
る、胆汁酸の定量法に存する。
試料中の胆汁酸を分離し、固定化酵素を入れたカラムに
導入し、カラム内で固定化酵素と接触させて胆汁酸とこ
れと反応しうる物質との反応を生じさせ、反応生成物を
検出器で測定することによシ胆汁酸を定量する方法にお
いて、内部標準物質としてコール酸又はウルソデオキシ
コール酸の酸性アミノ酸抱合体を用いることを特徴とす
る、胆汁酸の定量法に存する。
本発明において内部標準物質を設計するに当）、逆相系
分離用カラム内での保持時間を短かくするためにイオン
性基を導入し親水性を高めることとした。また酵素に対
する反応性を胆汁酸に近いものとするために、胆汁酸の
誘導体を用いることとした。そしてとれに適合する内部
標準物質としてコール酸又はウルソデオキシコール酸の
酸性アミノ酸抱合体を見出した。
分離用カラム内での保持時間を短かくするためにイオン
性基を導入し親水性を高めることとした。また酵素に対
する反応性を胆汁酸に近いものとするために、胆汁酸の
誘導体を用いることとした。そしてとれに適合する内部
標準物質としてコール酸又はウルソデオキシコール酸の
酸性アミノ酸抱合体を見出した。
コール酸又はウルソデオキシコール酸の酸性アミノ酸抱
合体は希アルカリ性での加水分解に抵抗性のあるアミド
結合により化学結合されているものであり、イオン性基
としてはカルボキシル基が用いられる。又、酸性アミノ
酸としては、グルタンン酸、アスパラギン酸のようなカ
ルボキシル基がアミノ基よシも多いものが使用される。
合体は希アルカリ性での加水分解に抵抗性のあるアミド
結合により化学結合されているものであり、イオン性基
としてはカルボキシル基が用いられる。又、酸性アミノ
酸としては、グルタンン酸、アスパラギン酸のようなカ
ルボキシル基がアミノ基よシも多いものが使用される。
コール酸又はウルソデオキシコール酸の［性７ミノ酸抱
合体を合成するＫは、例えばコール酸又はウルソデオキ
シコール酸と酸性アミノ酸エステルの塩酸塩をＮ、Ｎ’
−ジクロヘキシルカルボジイミドの存在下に攪拌して反
応させ、更に水酸化カリウム溶液によシ加水分解を行え
ばよいＯ 上記の内部標準物質を用いて胆汁酸の定量を行う場合は
、例えば第１図に示すような装置を用いる。
合体を合成するＫは、例えばコール酸又はウルソデオキ
シコール酸と酸性アミノ酸エステルの塩酸塩をＮ、Ｎ’
−ジクロヘキシルカルボジイミドの存在下に攪拌して反
応させ、更に水酸化カリウム溶液によシ加水分解を行え
ばよいＯ 上記の内部標準物質を用いて胆汁酸の定量を行う場合は
、例えば第１図に示すような装置を用いる。
５−
１．２は溶離液槽であル、溶離液槽１における溶離液と
しては例えば炭酸アンモニウム−アセトニトリル混合液
が使用され、溶離液２としてはアセトニトリルが使用さ
れ、アセトニトリルの添加にはグラジェントがかけられ
、徐々にアセトニトリルの含有量が増加するものとされ
る。
しては例えば炭酸アンモニウム−アセトニトリル混合液
が使用され、溶離液２としてはアセトニトリルが使用さ
れ、アセトニトリルの添加にはグラジェントがかけられ
、徐々にアセトニトリルの含有量が増加するものとされ
る。
４はこのためのグラジェントプログラ！−である。
５は試料注入器であシ、プール酸あるいはウルソデオキ
シコール酸の酸性アζ）酸抱合体の一定量を前処理した
血清試料に添加した試料液が注入されて溶離液と混合さ
れる。又、試料液としては、前処理における血中胆汁酸
の損失を補正する方法として、血清試料に一定量の内部
標準物質を加えた後、前処理を行い、抽出し丸ものを使
用してもよい。試料液紘流路３から分離用カッムロに導
かれ、胆汁酸の分離がなされ石。
シコール酸の酸性アζ）酸抱合体の一定量を前処理した
血清試料に添加した試料液が注入されて溶離液と混合さ
れる。又、試料液としては、前処理における血中胆汁酸
の損失を補正する方法として、血清試料に一定量の内部
標準物質を加えた後、前処理を行い、抽出し丸ものを使
用してもよい。試料液紘流路３から分離用カッムロに導
かれ、胆汁酸の分離がなされ石。
分離用カラム６には、例えばオクタデシル基を導入した
多孔性シリカ、ジビニルベンゼン−（メタ）アクリル酸
共重合体等の粒子が充填され６− ている。
多孔性シリカ、ジビニルベンゼン−（メタ）アクリル酸
共重合体等の粒子が充填され６− ている。
分離用カラム６において高速液体りｐストグラフィーに
よシ胆汁酸が分離される。上記分離用カラム６から流出
した分離液にＮＡＤ＋を含む反応液を反応液槽１０から
供給し、これを３α−Ｈ８Ｄが充填されている固定化酸
素カラム７に導き、上記３α−Ｈ８Ｄの作用によシ各胆
汁酸成分とＮＡＤ＋とを順次反応させ、該反応によ）螢
光物質を生成させる。
よシ胆汁酸が分離される。上記分離用カラム６から流出
した分離液にＮＡＤ＋を含む反応液を反応液槽１０から
供給し、これを３α−Ｈ８Ｄが充填されている固定化酸
素カラム７に導き、上記３α−Ｈ８Ｄの作用によシ各胆
汁酸成分とＮＡＤ＋とを順次反応させ、該反応によ）螢
光物質を生成させる。
この螢光物質の生成量は試料液中に含まれる胆汁酸の量
に依存するので螢光光度計８においてこれを検出しその
結果を記録計９によシ記録する。
に依存するので螢光光度計８においてこれを検出しその
結果を記録計９によシ記録する。
このようにしてまず、試料液中の蛋白質等の混在物のピ
ーク、内部標準物質であるプール酸またはウルソデオキ
シコール酸の酸性アミノ酸抱合体によるピーク、各胆汁
酸によるピークが記録される。
ーク、内部標準物質であるプール酸またはウルソデオキ
シコール酸の酸性アミノ酸抱合体によるピーク、各胆汁
酸によるピークが記録される。
そしてとのようにして得られた結果に基づいて各胆汁酸
の量を定量することができる。
の量を定量することができる。
本発明によれば、内部標準物質としてコール酸またはウ
ルソデオキシコール酸の酸性アミノ酸抱合体を用いるこ
とにより、分離用カラムでの保持時間が各胆汁酸より短
かいものとなシ、各胆汁酸の分析時間を短縮するととが
できる。又検出時のピークが鋭いものとなシ、定量誤差
を少なくすることができる。
ルソデオキシコール酸の酸性アミノ酸抱合体を用いるこ
とにより、分離用カラムでの保持時間が各胆汁酸より短
かいものとなシ、各胆汁酸の分析時間を短縮するととが
できる。又検出時のピークが鋭いものとなシ、定量誤差
を少なくすることができる。
実施例１
コール酸のグルタミン酸抱合体を次のようにして合成し
た。
た。
■、−グルタミン酸クジエチルエステル塩酸ｆｆ１２．
４ｙ）、コール酸（４，１））のテトラヒドロ７ラン溶
液（１ｏ ｏＩＲｌ）にトリエチルアミン（１，４１１
７）ヲ加、ｔ、続いてＮ 、 Ｎ’−ジシクロへキシル
カルボジイミド（ｚｘｙ）を加え、室温で攪拌し、反応
させた。生成した不溶物を戸別し、Ｆ液を濃縮し、塩化
メチレン（ｚｏｏｍ）に溶解した。飽和炭酸水素ナトリ
ウム溶液で洗浄した後、溶媒を留去し、続いて、３チ水
酸化カリクムーエタノール溶液（１ｏ ｏｌｌ＋／）に
とかして加水分解した。室温にて攪拌後、溶媒を留去し
、残渣を少量の水に溶解し、氷冷しながら塩酸を滴下し
ＰＨ４に調整した。冷蔵庫に静置し、析出する結晶なＰ
取した。この際の収量はｔａｐ（収率８０チ）であった
。この結晶を減圧下に乾燥したものを内部標準として用
いた。
４ｙ）、コール酸（４，１））のテトラヒドロ７ラン溶
液（１ｏ ｏＩＲｌ）にトリエチルアミン（１，４１１
７）ヲ加、ｔ、続いてＮ 、 Ｎ’−ジシクロへキシル
カルボジイミド（ｚｘｙ）を加え、室温で攪拌し、反応
させた。生成した不溶物を戸別し、Ｆ液を濃縮し、塩化
メチレン（ｚｏｏｍ）に溶解した。飽和炭酸水素ナトリ
ウム溶液で洗浄した後、溶媒を留去し、続いて、３チ水
酸化カリクムーエタノール溶液（１ｏ ｏｌｌ＋／）に
とかして加水分解した。室温にて攪拌後、溶媒を留去し
、残渣を少量の水に溶解し、氷冷しながら塩酸を滴下し
ＰＨ４に調整した。冷蔵庫に静置し、析出する結晶なＰ
取した。この際の収量はｔａｐ（収率８０チ）であった
。この結晶を減圧下に乾燥したものを内部標準として用
いた。
上述の内部標準物質（例えばプール酸のグルタミン酸抱
合体）ｚｏｄをエタノール（１ｏ ｏｄ）に溶解し、こ
の溶液を試料血清１ｄに１０μを添加し、この血清０．
５ｄにエタノール（２５ｉ１）を加え、８５℃の水浴中
で１分間攪拌した後、これを遠心分離し、上澄を採取し
た。
合体）ｚｏｄをエタノール（１ｏ ｏｄ）に溶解し、こ
の溶液を試料血清１ｄに１０μを添加し、この血清０．
５ｄにエタノール（２５ｉ１）を加え、８５℃の水浴中
で１分間攪拌した後、これを遠心分離し、上澄を採取し
た。
残査にエタノール（２，５ｍｌ ）を加え上記操作を〈
シ返し、得られた上澄を蒸発乾固し、これにメタノール
１００μｔを加え溶解し、この１０μｔを試料注入口５
よシ注入した。
シ返し、得られた上澄を蒸発乾固し、これにメタノール
１００μｔを加え溶解し、この１０μｔを試料注入口５
よシ注入した。
溶離液槽１から０，３重量−の炭酸アンモニウム２０容
量−とアセトニトリル８０容量チの混合液をポンプ１１
によシ供給し、又溶離液槽２からアセトニトリルを初期
値０容量チから１容量９− ％／分のグラジェントを有するようにポンプ１２によシ
供給し流量をＯ，ｓ ｗｌ ７分として試料と混合し、
得られた試料液を分離用カラム６に導いた。分離用カラ
ム６としては、オクチル基をその表面に化学的に結合さ
せた粒径１０μ鶴前後の球状シリカゲルが充填された内
径３９１１Ｂ、長さ３０（ｍのものを使用し、試料液中
の各胆汁酸を分離した。分離用カラム６から出てきた各
成分は反応液槽１０からポンプ１３によって供給される
反応液と混合され固定化酵素カラム７に導入された。
量−とアセトニトリル８０容量チの混合液をポンプ１１
によシ供給し、又溶離液槽２からアセトニトリルを初期
値０容量チから１容量９− ％／分のグラジェントを有するようにポンプ１２によシ
供給し流量をＯ，ｓ ｗｌ ７分として試料と混合し、
得られた試料液を分離用カラム６に導いた。分離用カラ
ム６としては、オクチル基をその表面に化学的に結合さ
せた粒径１０μ鶴前後の球状シリカゲルが充填された内
径３９１１Ｂ、長さ３０（ｍのものを使用し、試料液中
の各胆汁酸を分離した。分離用カラム６から出てきた各
成分は反応液槽１０からポンプ１３によって供給される
反応液と混合され固定化酵素カラム７に導入された。
反応液は０，３無Ｍのβ−ＮＡＤ＋、１ｏ鴨Ｍのリン酸
緩衝液（Ｐ Ｈ７，０）、Ｉ ＫＭのＥＤＴＡ、０．０
５重量％の２−メルカグトエタノールからなシ、供給量
はｏ、 ｓ ｄ ７分とした。
緩衝液（Ｐ Ｈ７，０）、Ｉ ＫＭのＥＤＴＡ、０．０
５重量％の２−メルカグトエタノールからなシ、供給量
はｏ、 ｓ ｄ ７分とした。
固定化酵素カラム７としては、３α−ＨＳ Ｄ １００
ユニツトをｚＣＣの粒状セルロースＫ 臭化シアン法で
固定化し、内１ｒ！４．６１ｍ、 ％すｓ ｏ ｃｍｍ
ｌｙラムに充填したものを用いた。
ユニツトをｚＣＣの粒状セルロースＫ 臭化シアン法で
固定化し、内１ｒ！４．６１ｍ、 ％すｓ ｏ ｃｍｍ
ｌｙラムに充填したものを用いた。
試料液中の胆汁酸成分は、酵素により３−ケト１０−
体に酸化され、同時に反応液中のβ−ＮＡＤ＋は還元さ
れて螢光を有するＮＡＤＨにな夛、螢光光度計８によっ
てその濃度が測定された。螢光光度計８は励起波長３
Ｓ ０ｊｌｌＢ、螢光波長４５０籐の条件で測定された
。螢光光度計８による測定結果を記録計９によシ記鎌し
た。
れて螢光を有するＮＡＤＨにな夛、螢光光度計８によっ
てその濃度が測定された。螢光光度計８は励起波長３
Ｓ ０ｊｌｌＢ、螢光波長４５０籐の条件で測定された
。螢光光度計８による測定結果を記録計９によシ記鎌し
た。
第２図は急性肝炎患者の血清試料を用いて測定し圧倒を
示すものであシ、内部標準であるコール酸のグルタミン
酸抱合体によるピークＰＢは、血清試料中の蛋白質等の
混在物によるピークＦＡ及び胆汁酸によるビークＰ（と
よ〈分離された。
示すものであシ、内部標準であるコール酸のグルタミン
酸抱合体によるピークＰＢは、血清試料中の蛋白質等の
混在物によるピークＦＡ及び胆汁酸によるビークＰ（と
よ〈分離された。
実施例２
ウルソデオキシコール酸のグルタミン酸抱合体２０購ｐ
を内部標準物質としてエタノール１００１１ＬＩＫ溶解
した。この溶液を慢性肝炎患者の試料血清ｘｗｌ当シ５
−量添加した。これを疎水性ゲルを充填した前処理カラ
ムに添加し、続いて蒸溜水５ｄで洗浄した後、無水エタ
ノール１０―で溶離した。更にエタノールを蒸発乾固し
た後、残渣をメタノール１０ｐｌに溶層した。
を内部標準物質としてエタノール１００１１ＬＩＫ溶解
した。この溶液を慢性肝炎患者の試料血清ｘｗｌ当シ５
−量添加した。これを疎水性ゲルを充填した前処理カラ
ムに添加し、続いて蒸溜水５ｄで洗浄した後、無水エタ
ノール１０―で溶離した。更にエタノールを蒸発乾固し
た後、残渣をメタノール１０ｐｌに溶層した。
このようにして処理された試料液を用いて実施例１と同
様にして胆汁酸の定量を行った。
様にして胆汁酸の定量を行った。
第３図にその結果を示す。内部標準であるウルソデオキ
シコール酸のグルタミン酸抱合体によるビークＰＢは、
血清試料中の蛋白質等の混在物によるピークＦＡ及び胆
汁酸によるビークＰ（とよく分離された。
シコール酸のグルタミン酸抱合体によるビークＰＢは、
血清試料中の蛋白質等の混在物によるピークＦＡ及び胆
汁酸によるビークＰ（とよく分離された。
第１図は本発明胆汁酸の定量法に使用する装置の例を示
す説明図、第２図は実施例ＩＫおけるクロマドグ２ム、
第３図は実施例２におけるクロマドグ２ムである。 符号の説明 １．２・・・・・・溶離液槽、 ４・・・・・・グラ
ジェントプログラマ−１５・・・・・・試料注入口、
６・・・・・・分離用カラム、 ７・・・・・・固
定化酵素カラム、８・・・・・・螢光光度計、 ９・
・・・・・記録針、 １０・・・・・・反応液槽、
１１，１２．１３・・・・・・ポンプ。
す説明図、第２図は実施例ＩＫおけるクロマドグ２ム、
第３図は実施例２におけるクロマドグ２ムである。 符号の説明 １．２・・・・・・溶離液槽、 ４・・・・・・グラ
ジェントプログラマ−１５・・・・・・試料注入口、
６・・・・・・分離用カラム、 ７・・・・・・固
定化酵素カラム、８・・・・・・螢光光度計、 ９・
・・・・・記録針、 １０・・・・・・反応液槽、
１１，１２．１３・・・・・・ポンプ。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 Ｌｆ１体クロりトグツフイーによって生体試料中の胆汁
酸を分離し、固定化酵素を入れ九カラムに導入し、カラ
ム内で固定化酵素と接触させて胆汁酸とこれと反応しう
る物質との反応を生じさせ、反応生成物を検出器で測定
することによυ胆汁酸を定量する方法において、内部標
準物質としてコール酸又社ウルソデオキシコール酸の酸
性アミノ酸抱倉体を用いることを特徴とする、胆汁酸の
定量法。 ２内部標準物質がコール酸又はクルソデオ午シ；−ル酸
のグルタミン酸抱合体である、特許請求の範囲 ３、内部標準物質がコール酸又はクルソデオキシコール
酸のアスパラギン酸抱合体である、特許請求の範囲第１
項記載の胆汁酸の定量法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16280082A JPH0233360B2 (ja) | 1982-09-17 | 1982-09-17 | Tanjusannoteiryoho |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16280082A JPH0233360B2 (ja) | 1982-09-17 | 1982-09-17 | Tanjusannoteiryoho |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5951349A true JPS5951349A (ja) | 1984-03-24 |
| JPH0233360B2 JPH0233360B2 (ja) | 1990-07-26 |
Family
ID=15761449
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP16280082A Expired - Lifetime JPH0233360B2 (ja) | 1982-09-17 | 1982-09-17 | Tanjusannoteiryoho |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0233360B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63152996A (ja) * | 1986-12-16 | 1988-06-25 | Sekisui Chem Co Ltd | 胆汁酸分画定量法 |
| JPH0339096A (ja) * | 1989-07-04 | 1991-02-20 | Sekisui Chem Co Ltd | 固定化酵素利用高速液体クロマトグラフィー |
| JPH0572191A (ja) * | 1991-09-11 | 1993-03-23 | Kao Corp | 紫外可視部に吸収を有する多種類の化合物の一斉自動分析システム |
| CN103852554A (zh) * | 2012-11-30 | 2014-06-11 | 山东阿如拉药物研究开发有限公司 | 一种藏药组合物棘豆消痒制剂的质量检测方法 |
| CN106841492A (zh) * | 2017-03-30 | 2017-06-13 | 杭州佰辰医学检验所有限公司 | 高效液相色谱串联质谱检测血清中五种游离型胆汁酸的方法 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016013115A1 (ja) * | 2014-07-25 | 2016-01-28 | 株式会社 リージャー | 希釈生体試料成分の分析方法 |
-
1982
- 1982-09-17 JP JP16280082A patent/JPH0233360B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63152996A (ja) * | 1986-12-16 | 1988-06-25 | Sekisui Chem Co Ltd | 胆汁酸分画定量法 |
| JPH0339096A (ja) * | 1989-07-04 | 1991-02-20 | Sekisui Chem Co Ltd | 固定化酵素利用高速液体クロマトグラフィー |
| JPH0572191A (ja) * | 1991-09-11 | 1993-03-23 | Kao Corp | 紫外可視部に吸収を有する多種類の化合物の一斉自動分析システム |
| CN103852554A (zh) * | 2012-11-30 | 2014-06-11 | 山东阿如拉药物研究开发有限公司 | 一种藏药组合物棘豆消痒制剂的质量检测方法 |
| CN103852554B (zh) * | 2012-11-30 | 2015-11-18 | 山东金诃药物研究开发有限公司 | 一种藏药组合物棘豆消痒制剂的质量检测方法 |
| CN106841492A (zh) * | 2017-03-30 | 2017-06-13 | 杭州佰辰医学检验所有限公司 | 高效液相色谱串联质谱检测血清中五种游离型胆汁酸的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0233360B2 (ja) | 1990-07-26 |
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